專利名稱：復(fù)合菌群cpx及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及菌株的培養(yǎng)篩選領(lǐng)域，特別是，涉及一種可降解毒死蜱的復(fù)合菌群 CPX。
背景技術(shù)：
毒死蜱(chlorpyrifos)，有效成分化學(xué)名稱0，0_ 二乙基_0_ (3，5，6_三氯_2_吡 啶基)硫逐磷酸酯，是美國(guó)陶氏化學(xué)公司于1965年開(kāi)發(fā)并研制出來(lái)的一種廣譜性有機(jī)磷 酸酯類殺蟲(chóng)劑，(Journal of Agricultural and Food Chenmistry，57 :1882—1889，2009) 廣泛應(yīng)用于葉菜類和瓜果類蔬菜的病蟲(chóng)害防治，是目前全球使用最廣泛的5種殺蟲(chóng)劑之一 (Biotechnol Lett 29 :1469_1473，2007)。隨著毒死蜱在我國(guó)產(chǎn)銷量的逐年增加和使用范 圍的不斷擴(kuò)大，必然會(huì)對(duì)出口農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)生不利影響，危害人畜健康，并對(duì)水、土壤等環(huán)境帶 來(lái)嚴(yán)重污染。因此，如何有效地處理毒死蜱的毒性和殘留帶來(lái)的污染，成為人們亟待解決的 問(wèn)題。目前篩選到的能夠降解毒死蜱的菌株都是單一的純化菌株，降解時(shí)間一般在4-6天 左右ο而且，單菌株的降解能力有限且降解時(shí)間較長(zhǎng)。由于培養(yǎng)條件的影響等，隨著降解 菌株傳代培養(yǎng)，菌株的降解能力退化嚴(yán)重。許多單菌株不能夠降解毒死蜱的代謝產(chǎn)物，從而 造成代謝產(chǎn)物的積累，且由于代謝產(chǎn)物會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，因此不能夠完全降解毒死蜱。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種可降解毒死蜱的復(fù)合菌群，以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷。本發(fā)明的目的還在于提供該復(fù)合菌群的制備方法。本發(fā)明的復(fù)合菌群CPX通過(guò)下述步驟制備獲得1)采集農(nóng)藥廠的活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于25 350C 150 200rpm富集培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng) 基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，然后轉(zhuǎn)接5 8次，且 每次都將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高到500 800mg/L ；3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%，IOOOOrpm離心收集菌體，然后轉(zhuǎn) 接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加毒死蜱至濃度為500 800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩 周；同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性；4)馴化結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%左右的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳 源，濃度為25 800mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選3 5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌 群 CPX。其中，所述步驟2)中，將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng) 基于35°C 200rpm富集培養(yǎng)7天后，取培養(yǎng)體積的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)7天，取培養(yǎng)體積的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒 死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)7天后，連續(xù)轉(zhuǎn)接8次，且每次都將毒死蜱濃度提 高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高到800mg/L。所述步驟3)中，富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的15%，IOOOOrpm離心5min收集菌 體，然后轉(zhuǎn)接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基添加毒死蜱至濃度為800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再馴化兩周， 同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性。所述步驟4)中，取培養(yǎng)體積的15%的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳源，濃度為 500mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX。所述步驟2)中的富集培養(yǎng)基具有以下組成蛋白胨10g/L，NaCll. 0g/L, KH2PO4 1. 0g/L, pH 7。所述步驟3)和步驟4)中無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基具有以下組成=K2HPO4O. 2g/L，KH2PO4 0. 5g/L, MgSO4 · 7H20 0. 4g/L, FeSO4 · 7H20 0. 002g/L, (NH4)2SO4 0. 2g/L, CaSO4 0. 08g/L。本發(fā)明還提供制備上述復(fù)合菌群CPX的方法，包括下述步驟1)采集農(nóng)藥廠的活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于25 35°C 150 200rpm富集培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中 并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn) 接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，然后轉(zhuǎn)接5 8次，且每次都 將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高到500 800mg/L ；3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%，IOOOOrpm離心收集菌體，然后轉(zhuǎn) 接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加毒死蜱至濃度為500 800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩 周；同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性；4)馴化結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%左右的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳 源，濃度為25 800mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選3 5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌 群 CPX。本發(fā)明還提供包含上述復(fù)合菌群CPX的菌劑。本發(fā)明還提供所述復(fù)合菌群CPX在降解有機(jī)磷酸酯類殺蟲(chóng)劑中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供所述復(fù)合菌群CPX在降解毒死蜱中的應(yīng)用。本發(fā)明具有以下有益效果1)通過(guò)馴化、篩選的方法得到能夠快速降解毒死蜱及其代謝產(chǎn)物的復(fù)合菌群；2)利用微生物之間存在互生、共生和協(xié)同作用，菌種互相依賴形成特殊的水解途 徑，達(dá)到降解毒死蜱的目的；3)本發(fā)明中提供的復(fù)合菌群CPX能夠在在12小時(shí)內(nèi)將50mg/L濃度的毒死蜱降解 64.7%,48小時(shí)內(nèi)降解80. 3%，4天后能降解95%以上。在相同的培養(yǎng)條件下，比單菌株的 降解能力提高了 5倍以上。


圖1復(fù)合菌群CPX對(duì)毒死蜱的降解率；圖2復(fù)合菌群CPX對(duì)毒死蜱的降解曲線；
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圖3毒死蜱的氣相色譜圖；圖4毒死蜱的高效液相色譜圖。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例11)自山東華陽(yáng)集團(tuán)農(nóng)藥廠的污水處理池采集活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于35°C 200rpm富 集培養(yǎng)7天后，取培養(yǎng)體積的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將農(nóng)藥濃度提高至50mg/L， 再繼續(xù)培養(yǎng)10天，取培養(yǎng)體積的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高 至100mg/L，連續(xù)轉(zhuǎn)接8次，且每次都將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃 度提高到800mg/L。3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的15%，IOOOOrpm離心5min收集菌體，然后分別 轉(zhuǎn)接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加800mg/L的毒死蜱，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩周；同時(shí)更換 不同溶劑(甲醇、乙醇、丙酮)溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性。4)取培養(yǎng)體積的15%的馴化菌液，在以濃度為500mg/L的毒死蜱為唯一碳源的無(wú) 機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX并測(cè)定其對(duì)毒死蜱(50mg/L) 的降解率(見(jiàn)圖1、圖2)。其中，所述步驟2)中的富集培養(yǎng)基具有以下組成蛋白胨10g/L，NaCl 1. 0g/L, KH2PO4 1. 0g/L, pH 7· 0。所述步驟3)和步驟4)中無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基具有以下組成=K2HPO4O. 2g/L，KH2PO4 0. 5g/L, MgSO4 · 7H20 0. 4g/L, FeSO4 · 7H20 0. 002g/L, (NH4)2SO4 0. 2g/L, CaSO4 0. 08g/L。實(shí)施例21)自山東華陽(yáng)集團(tuán)農(nóng)藥廠的污水處理池采集活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于25 V 200rpm 富集培養(yǎng)7天后，取培養(yǎng)體積的10%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將農(nóng)藥濃度提高至50mg/ L，再繼續(xù)培6天，取培養(yǎng)體積的10%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至 100mg/L，連續(xù)轉(zhuǎn)接5次，且每次都將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度 提高到500mg/L。3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10%，IOOOOrpm離心5min收集菌體，然后分別 轉(zhuǎn)接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加500mg/L的毒死蜱，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩周；同時(shí)更換 不同溶劑(甲醇、乙醇、丙酮)溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性。4)，取培養(yǎng)體積的10%的馴化菌液，在以毒死蜱為唯一碳源，濃度為500mg/L的無(wú) 機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選3次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX。其中，所述步驟2)中的富集培養(yǎng)基具有以下組成蛋白胨10g/L，NaCl 1. 0g/L, KH2PO4 1. 0g/L, pH 7。所述步驟3)中無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基具有以下組成=K2HPO4 0. 2g/L，KH2PO4 0. 5g/L， MgSO4 · 7H20 0. 4g/L, FeSO4 · 7H20 0. 002g/L, (NH4)2SO4 0. 2g/L, CaSO4 0. 08g/L。所述步驟4)中無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基具有以下組成毒死蜱500mg/L，K2HPO4 0. 2g/L，KH2PO4 0. 5g/L, MgSO4 · 7H20 0. 4g/L, FeSO4 · 7Η200· 002g/L, (NH4) 2S04 0. 2g/L, CaSO4 0. 08g/ L0實(shí)驗(yàn)例11)測(cè)定農(nóng)藥濃度對(duì)降解率的影響控制培養(yǎng)液中初始毒死蜱濃度分別為10、25、 50、100、200mg/L，定量接種活化至對(duì)數(shù)期的復(fù)合菌群CPX，200rpm振蕩培養(yǎng)，每隔12小時(shí)定
時(shí)取樣，測(cè)定毒死蜱殘留量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著毒死蜱濃度的增大，復(fù)合菌群CPX的降解率逐漸降低。2)測(cè)定接種量對(duì)降解率的影響將活化至對(duì)數(shù)期的復(fù)合菌群CPX以體積比分別為 5、10、15、20、25、30%接種于含有50mg/L毒死蜱的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中，200rpm振蕩培養(yǎng)，每隔 12小時(shí)定時(shí)取樣，測(cè)定不同接種量對(duì)降解率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著接種量的增大，毒死蜱的降解逐漸加快。3)測(cè)定外加碳源對(duì)降解率的影響以蔗糖為外加碳源，質(zhì)量濃度分別為0、0. 5、 1. 0,1. 5,2. 0,2. 5mg/L，定量接種活化至對(duì)數(shù)期的復(fù)合菌群CPX，200rpm振蕩培養(yǎng)，每隔12 小時(shí)定時(shí)取樣，測(cè)定不同外加碳源濃度對(duì)毒死蜱的降解率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著外加碳源濃度的增加，毒死蜱的降解率較高，說(shuō)明外加碳源可 顯著增強(qiáng)菌群的降解能力。4)測(cè)定溫度對(duì)降解率的影響控制振蕩培養(yǎng)的溫度分別為15、20、25、30、351，定 量接種活化至對(duì)數(shù)期的復(fù)合菌群CPX，200rpm振蕩培養(yǎng)，每隔12小時(shí)定時(shí)取樣，測(cè)定培養(yǎng)溫 度對(duì)對(duì)降解率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)合菌群CPX在培養(yǎng)溫度為30°C時(shí)，對(duì)毒死蜱的降解效率最高。5)測(cè)定pH值對(duì)降解率的影響控制無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基(同實(shí)施例1中的的無(wú)機(jī)鹽培 養(yǎng)基)的初始PH值分別為5、6、7、8、9，定量接種活化至對(duì)數(shù)期的復(fù)合菌群CPX，200rpm振蕩 培養(yǎng)，每隔12小時(shí)定時(shí)取樣，測(cè)定初始pH對(duì)降解率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)合菌群CPX在培養(yǎng)基的pH為8的條件下，對(duì)毒死蜱的降解效果 最好。實(shí)驗(yàn)例2毒死蜱及其中間代謝產(chǎn)物的測(cè)定1)氣相色譜(GC)分析毒死蜱殘留量的測(cè)定經(jīng)正己烷萃取后的樣品采用氣相色譜法SHMADZU GC-2010 型氣相色譜儀，E⑶檢測(cè)器；色譜柱RtX-1301(30mX0. 25mm)；溫度條件進(jìn)樣口 300°C，柱 溫270°C，檢測(cè)器3300C ；載氣氮?dú)?；流?lml/min ；進(jìn)樣量1 μ L。從毒死蜱的氣相色譜圖中可以看出(參見(jiàn)圖3)毒死蜱在13. 924分鐘處有最大值，可以根據(jù)峰面積和峰高來(lái)判斷毒死蜱的濃度。2)高效液相色譜(HPLC)分析儀器為Agilent 1200，色譜柱Eclipse_C18 (150X4. 6mmX 5 μ m)，流動(dòng)相為甲 醇水=70 30 (ν/ν)，流速1. Oml/min ；檢測(cè)器為DAD檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)273nm和230nm, 進(jìn)樣量10 μ 1。如毒死蜱的高效液相色譜圖(參見(jiàn)圖4)，可以看出毒死蜱的降解產(chǎn)物在1.5min左右有最大吸收峰，經(jīng)鑒定表明是3，5，6_三氯-2-吡啶酚(3,5. 6-Trichloro-2-pyridinol, TCP)。3)薄層色譜(TLC)分析硅膠板GF254，展層劑(甲苯甲醇正己烷=18 1 1，ν/ν/ν)，顯色劑 (0. IgAgNO3溶于IOOmL苯氧乙醇，加丙酮定容至200mL)噴霧，紫外光254nm照射顯色。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾 也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
一種復(fù)合菌群CPX，其通過(guò)下述步驟制備獲得1)采集農(nóng)藥廠的活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于25～35℃150～200rpm富集培養(yǎng)6～10天后，取培養(yǎng)體積的10％～15％轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)6～10天后，取培養(yǎng)體積的10％～15％轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，然后轉(zhuǎn)接5～8次，且每次都將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高到500～800mg/L；3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10％～15％，10000rpm離心收集菌體，然后轉(zhuǎn)接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加毒死蜱至濃度為500～800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩周；同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性；4)馴化結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10％～15％左右的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳源，濃度為25～800mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選3～5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌群CPX，其特征在于，所述步驟2)中，將步驟1)的活 性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于35°C 200rpm富集培養(yǎng)7天后，取培養(yǎng)體積 的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)7天，取培養(yǎng)體 積的15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)7天 后，連續(xù)轉(zhuǎn)接8次，且每次都將毒死蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高 到 800mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌群CPX，其特征在于，所述步驟3)中，富集培養(yǎng)結(jié)束 后，取培養(yǎng)體積的15%，IOOOOrpm離心5min收集菌體，然后轉(zhuǎn)接到無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基添加毒死 蜱至濃度為800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再馴化兩周，同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液， 以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌群CPX，其特征在于，所述步驟4)中，取培養(yǎng)體積的 15%的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳源，濃度為500mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng) 篩選5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的復(fù)合菌群CPX，其特征在于，所述步驟2)中的富集培養(yǎng) 基具有以下組成蛋白胨 10g/L, NaCl 1. 0g/L, KH2PO4 1. 0g/L, pH 7。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的復(fù)合菌群CPX，其特征在于，所述步驟3)和步驟4)中無(wú) 機(jī)鹽培養(yǎng)基具有以下組成=K2HPO4 0. 2g/L，KH2PO4 0. 5g/L，MgSO4 · 7H20 0. 4g/L，F(xiàn)eSO4 · 7H20 0. 002g/L, (NH4)2SO4 0. 2g/L, CaSO4 0. 08g/L。
7.制備權(quán)利要求1所述復(fù)合菌群CPX的方法，包括下述步驟1)采集農(nóng)藥廠的活性污泥樣品；2)將步驟1)的活性污泥樣品用含毒死蜱25mg/L的富集培養(yǎng)基于25 35°C150 200rpm富集培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn)接至新鮮富集培養(yǎng)基中并將毒 死蜱農(nóng)藥濃度提高至50mg/L，再繼續(xù)培養(yǎng)6 10天后，取培養(yǎng)體積的10% 15%轉(zhuǎn)接至新 鮮富集培養(yǎng)基中并將毒死蜱農(nóng)藥濃度提高至100mg/L，然后轉(zhuǎn)接5 8次，且每次都將毒死 蜱濃度提高100mg/L，直至富集培養(yǎng)基中農(nóng)藥濃度提高到500 800mg/L ；3)富集培養(yǎng)結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%，10000rpm離心收集菌體，然后轉(zhuǎn)接到 無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，添加毒死蜱至濃度為500 800mg/L，相同培養(yǎng)條件下再分別馴化兩周；同時(shí)更換不同溶劑溶解的毒死蜱母液，以排除菌株對(duì)溶劑的依賴性；4)馴化結(jié)束后，取培養(yǎng)體積的10% 15%左右的馴化菌液在以毒死蜱為唯一碳源，濃 度為25 800mg/L的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基內(nèi)連續(xù)繼代培養(yǎng)篩選3 5次，培養(yǎng)得到復(fù)合菌群CPX。
8.包含權(quán)利要求1所述復(fù)合菌群CPX的菌劑。
9.權(quán)利要求1所述復(fù)合菌群CPX在降解有機(jī)磷酸酯類殺蟲(chóng)劑中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求1所述復(fù)合菌群CPX在降解毒死蜱中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種通過(guò)馴化、篩選的方法得到能夠快速降解毒死蜱及其代謝產(chǎn)物的復(fù)合菌群CPX；其利用微生物之間存在互生、共生和協(xié)同作用，菌種互相依賴形成特殊的水解途徑，達(dá)到降解毒死蜱的目的；本發(fā)明中提供的復(fù)合菌群CPX能夠在在12小時(shí)內(nèi)將50mg/L濃度的毒死蜱降解64.7％，48小時(shí)內(nèi)降解80.3％，4天后能降解95％以上。在相同的培養(yǎng)條件下，比單菌株的降解能力提高了5倍以上。
文檔編號(hào)A62D3/02GK101948755SQ20101027785
公開(kāi)日2011年1月19日 申請(qǐng)日期2010年9月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月10日
發(fā)明者史延華, 曲杰, 李康, 王圣惠, 翟逸, 閆艷春 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院