用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑及其制備方法，屬于微生物應(yīng)用領(lǐng)域。該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)P?8、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)按(1.8?2.4):(1.8?2.4):(0.9?1.3)的比例組成，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)含量2.4?3.2×109cfu/ml。這三種菌的復(fù)配對番茄的生長代謝有明顯的促進(jìn)作用，尤其可以協(xié)同促進(jìn)番茄的番茄紅素和Vc的含量，提升番茄品質(zhì)，增加種植效益。
【專利說明】
用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及微生物應(yīng)用領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑 及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 番茄化ycopersicon esculentum)是全世界栽培最為普遍的果菜之一，別名西紅 柿，原產(chǎn)自南美洲，中國南北方廣泛栽培，番茄果實(shí)營養(yǎng)豐富，含有豐富的維生素 C、番茄紅 素和B族維生素等。近年來蔬菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，番茄種植面積不斷擴(kuò)大，隨著人們生活質(zhì)量 的提高，對番茄產(chǎn)量和品質(zhì)也提出了更高的要求。而生產(chǎn)中因盲目W增施肥料，尤其是化 月己，獲得高產(chǎn)已成為一種普遍現(xiàn)象，過量施用化肥會造成生產(chǎn)成本大幅度增加、±壤質(zhì)量退 化及環(huán)境污染嚴(yán)重等諸多問題，已經(jīng)影響到我國農(nóng)產(chǎn)品安全及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。
[0003] 微生物菌肥是繼有機(jī)肥和化肥之后的一種新型生物肥料，大量研究結(jié)果表明，微 生物肥料具有高效率、無毒害、無污染等特點(diǎn)，不但能減少農(nóng)產(chǎn)品污染，而且能改善品質(zhì)，目 前世界上近半數(shù)的國家包括日本、英國、美國、法國、瑞典等主要的發(fā)達(dá)國家及己基斯坦、印 度、中國等發(fā)展中國家，都在進(jìn)行微生物肥料的開發(fā)與利用。尹顯慧等研究發(fā)現(xiàn)，稀釋200倍 的微生物菌劑處理對番茄生長發(fā)育、產(chǎn)量和品質(zhì)的促進(jìn)效果最好。姜莉莉等研究微生物菌 肥在溫室番茄上的應(yīng)用效果發(fā)現(xiàn)，與施用普通化肥的對照相比，按750kg/畝和1 000kg/畝 施用豐田寶微生物菌肥增產(chǎn)效果好，經(jīng)濟(jì)效益顯著。同時，能夠減少化學(xué)肥料的污染，提高 果實(shí)品質(zhì)。
[0004] 乳酸菌作為自然環(huán)境中普遍存在的一種安全的微生物，在農(nóng)產(chǎn)品的種植及其質(zhì)量 安全中優(yōu)勢明顯(憐是上壤中除氮素外的第二大植物營養(yǎng)元素，雖然上壤中總憐含量高，但 植物無法利用。乳酸菌分泌的乳酸、乙酸等一方面能直接溶解±壤中難溶性憐酸鹽，另一方 面則通過馨合作用釋放出±壤憐素，W便于植物吸收利用，W利于植物產(chǎn)量和品質(zhì)的提 高）。無農(nóng)藥和化學(xué)肥料施用的農(nóng)產(chǎn)品越來越受到人們的歡迎，乳酸菌在農(nóng)業(yè)種植和農(nóng)產(chǎn)品 品質(zhì)安全領(lǐng)域的應(yīng)用也越來越廣泛，但是目前并沒有能夠有效促進(jìn)番茄品質(zhì)提高的乳酸菌 菌劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于通過探究不同乳酸菌對番茄的生長性狀及品質(zhì)的影響，確定適 宜在番茄中應(yīng)用的乳酸菌制劑，提供了一種用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑及其制備 方法。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，采用如下技術(shù)方案：
[0007] 本發(fā)明是用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌 (Lactobacillus planta;rum)P-8、干酪乳桿菌(Xactobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌 保加利亞亞種（Lactobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)組成。
[000引需要說明的是，本發(fā)明所采用的植物乳桿菌(Xactobacillus planta;rum)P-8,分 離自內(nèi)蒙古傳統(tǒng)自然發(fā)酵的酸牛奶中，具有優(yōu)異的抗胃腸道消化液耐受能力，能夠存活于 動物腸道內(nèi)；該菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、， 保藏號為CGMCC No.6312;本發(fā)明所采用的干酪乳桿菌(；Lactobacillus casei)Zhang，是從 酸馬奶中分離的耐酸和耐膽汁酸的益生菌菌株;該菌株于2006年4月21日保藏于中國微生 物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、，保藏號CGMCC No. 1697。德氏乳桿菌保加 利亞亞種（Lactobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)簡稱為保加利亞乳桿菌，具有 發(fā)酵劑的能力，它是從甘肅省甘南藏族自治州傳統(tǒng)發(fā)酵巧牛乳中篩選得到的；2011年4月22 日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、，保藏號CGMCC No.47740
[0009]優(yōu)選地，如上所述的復(fù)合乳酸菌菌劑，該菌劑由植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種 (Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)按（1.8-2.4):(1.8-2.4):(0.9-1.3)的 比例組成，其中，植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 (Lactobacillus casei)Zhang的例為1:1。
[0010] 優(yōu)選的，植物乳桿菌（Lactobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacillus de 化 ruecki isubsp. bulgar icus)按2:2:1 的比例混合。
[0011] 所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)含量2.4-3.2 X 109c化/ml。
[0012] 優(yōu)選的，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)為3 X 109c化/ml。
[0013] 本發(fā)明另一方面提供了上述復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，具體方法步驟如下：
[0014] (1)首先將所述植物乳桿菌化actobaci 1 lus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 (Lactobacillus casei)Zhang接種于MRS培養(yǎng)液中，在37±rC條件下培養(yǎng)26-28小時，用無 菌生理鹽水離屯、洗涂3次，得到的菌體沉淀中加入8%-12%滅菌脫脂乳液，并調(diào)整其菌數(shù)為 1.8-2.0 X l〇9cfu/ml，混勻后在35-37°C條件下培養(yǎng)35-48小時；
[0015] (2)將步驟（1)得到的菌株培養(yǎng)物與德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)按比例進(jìn)行混合，接種于MRS培養(yǎng)液，在39± rC條件下培 養(yǎng)12-24小時，并加入50ml/l的挪汁，調(diào)整其菌數(shù)為2.4-3.2 X 109cfu/ml，pH值為5.5-6.5。
[0016] 優(yōu)選的，步驟（1)植物乳桿菌化actobaci 1 lus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 (Lactobacillus casei)Zhang的接種量各為4-10% (v/w)。
[0017] 優(yōu)選的，步驟（1)植物乳桿菌化actobaci 1 lus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 (Lactobacillus casei)Zhang的接種量為1:1。
[0018] 優(yōu)選的，步驟（1)得到的菌株培養(yǎng)物與德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacillus de化rueckii subsp .bulgaricus)按（3.6-4.8): (0.9-1.3)的比例進(jìn)行混合，并 W8-12% (v/w)的接種量接種于MRS培養(yǎng)基。
[0019] 本發(fā)明還提供了該復(fù)合乳酸菌菌劑在番茄上的應(yīng)用，從番茄春季開花坐果期開 始，按化/畝，2次/月隨水誘施于植物根部。
[0020] 本發(fā)明的有益效果是，本發(fā)明設(shè)及的復(fù)合菌劑由植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8、干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種 (Lactobacillus de化rueckii subsp.bulgariCUS)組成，運(yùn)Ξ種菌的復(fù)配對番茄的生長代 謝有明顯的促進(jìn)作用，尤其可W協(xié)同促進(jìn)番茄的產(chǎn)量和品質(zhì)性狀，單株產(chǎn)量達(dá)到2.44kg/ 株，較空白對照組提高了 12.96 % ;番茄紅素達(dá)到0.68g/kg，較空白對照組提高了 28.25 % ; 番茄Vc較空白對照組提高了 27.01%;可溶性糖和可溶性固形物的含量，較對照組分別提高 了 22.09%和17.60%。起到了明顯的提質(zhì)增產(chǎn)的作用，進(jìn)而增加種植效益。
【附圖說明】
[0021 ]圖1:不同乳酸菌對番茄的單果重和單株產(chǎn)量的影響；
[0022] 圖2:不同乳酸菌對番茄的番茄紅素和Vc含量的影響；
[0023] 圖3:不同乳酸菌對番茄可溶性糖和可溶性固形物的影響；
【具體實(shí)施方式】
[0024] 下面將對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施 例僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技 術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范 圍。
[0025] 本發(fā)明實(shí)施例一方面提供了一種用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，該復(fù)合乳 酸菌菌劑由植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8、干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulg曰r icus)組成。
[00%] 需要說明的是，所采用的植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8,分離自內(nèi) 蒙古傳統(tǒng)自然發(fā)酵的酸牛奶中，具有優(yōu)異的抗胃腸道消化液耐受能力，能夠存活于動物腸 道內(nèi)；該菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、，保藏號 為CGMCC No.6312;本發(fā)明所采用的干酪乳桿菌(；Lactobacillus casei)Zhang，是從酸馬奶 中分離的耐酸和耐膽汁酸的益生菌菌株;該菌株于2006年4月21日保藏于中國微生物菌種 保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、，保藏號CGMCC No. 1697。德氏乳桿菌保加利亞亞 種(Xactobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)，具有發(fā)酵劑的能力，它是從甘肅省 甘南藏族自治州傳統(tǒng)發(fā)酵巧牛乳中篩選得到的；2011年4月22日保藏于中國微生物菌種保 藏管理委員會普通微生物菌種保藏中屯、，保藏號CGMCC No.4774。
[0027]在本發(fā)明的一實(shí)施例中，該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種 (Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)按（1.8-2.4):(1.8-2.4):(0.9-1.3)的 比例組成，其中，植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 化曰(：1:〇6曰(3；[111180曰36；0211曰]1旨的比例為1:1，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)含量2.4-3.2 Xl〇9cfu/ml。
[002引具體的，Ξ 種菌的比例可W 為 1.8:1.8:0.9,1.9 :1.9:1.0,2 :2:1,2.1:2.1:1.1， 2.2:2.2:1.1,2.3:2.3:1.2,2.4:2.4:1.3,但是可W理解的是，Ξ種菌的比例可W在上述范 圍內(nèi)調(diào)整任意合適的數(shù)值，不局限于上述比例。
[00巧]在本發(fā)明的一更優(yōu)選的實(shí)施例中，植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和 干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)按2 : 2:1的比例混合，所述復(fù)合菌劑的活菌總數(shù)為3 X l〇9cfu/ml。
[0030]本發(fā)明又一實(shí)施例提供了上述復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，具體方法步驟如下： [0031] S1 :首先將所述植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8和干酪乳桿菌 化日(：1:〇6日(3；[111130日36；0211日]1旨各4-10%(>/'\￥)的接種量接種于11?5培養(yǎng)基中，在37±1"€條 件下培養(yǎng)26-28小時，用無菌生理鹽水離屯、洗涂3次，得到的菌體沉淀中加入8%-12%滅菌 脫脂乳液，并調(diào)整其菌數(shù)為1.8-2.0X109c化/ml,混勻后培養(yǎng)在35-37 °C條件下培養(yǎng)35-48 小時。
[0032] 在本步驟中，能夠充分培養(yǎng)上述兩種菌，避免括抗。
[0033] S2:將上述步驟得到的菌種與德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacillus de化rueckii subsp .bulgaricus)按（3.6-4.8): (0.9-1.3)比例進(jìn)行混合，并 W8-12% (v/ W)的接種量接種于MRS培養(yǎng)基，在39±rC條件下培養(yǎng)12-24小時，并加入50ml/l的挪汁，調(diào) 整其菌數(shù)為2.4-3.2 X l〇9cfu/ml，pH值為5.5-6.5。
[0034] 在本步驟中，加入挪汁可W防褐化，增強(qiáng)營養(yǎng)，從而保證Ξ種菌劑的快速有效培 養(yǎng)，避免了菌種之間的括抗作用，有效的提高了菌劑的活性。
[0035] 本發(fā)明的又一實(shí)施例為該復(fù)合乳酸菌菌劑在番茄上的應(yīng)用，從番茄春季開花坐果 期開始，按化/畝，2次/月隨水誘施于植物根部。
[0036] 本發(fā)明實(shí)施例所提供的運(yùn)Ξ種乳酸菌復(fù)配的復(fù)合菌劑對番茄的生長代謝有明顯 的促進(jìn)作用，尤其可W協(xié)同促進(jìn)番茄的番茄紅素和Vc含量，提升番茄的品質(zhì)，進(jìn)而增加種植 效益。
[0037] 為了更清楚詳細(xì)地介紹本發(fā)明實(shí)施例所提供的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌 菌劑及制備方法，W下將結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)行說明。
[0038] 實(shí)施例1:該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌(Xactobacillus planta;rum)P-8和干 酪乳桿菌化actobaci llus casei )Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacil lus de化rueckii subsp.bulgaricus)按1.8:1.8:0.9的比例組成，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌 總數(shù)含量2.4 X l〇9cfu/ml。
[0039] 實(shí)施例2:該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌(Xactobacillus planta;rum)P-8和干 酪乳桿菌化actobaci llus casei )Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacil lus de化rueckii subsp.bulgaricus)按2.4:2.4:1.3的比例組成，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌 總數(shù)含量 2.8Xl〇9cfu/ml。
[0040] 實(shí)施例3:該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿菌(Xactobacillus planta;rum)P-8和干 酪乳桿菌化actobaci llus casei )Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種化actobacil lus de化rueckii subsp.bulgaricus)按2:2:1的比例組成，所述復(fù)合乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)含 量 3.2Xl〇9cfu/ml。
[0041 ]不同乳酸菌對番茄生長的影響試驗(yàn)
[0042] 試驗(yàn)時間：2016年6月-7月；試驗(yàn)地點(diǎn)：青島農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)習(xí)基地;試驗(yàn)材料：W番茄 '毛粉802'為試驗(yàn)材料。
[0043] 分組情況為：
[0044] (1)空白對照組:噴施清水；
[0045] (2)德氏乳桿菌保加利亞亞種:噴施德氏乳桿菌保加利亞亞種，活菌總數(shù)含量0.8- 1.0X10?cfu/ml；
[0046] (3)復(fù)合菌1:噴施植物乳桿菌+干酪乳桿菌菌液，活菌總數(shù)含量1.8-2.0 X 109cfu/ ml，兩種菌的數(shù)量比為1:1，使用時加 MRS培養(yǎng)液稀釋，使活菌總數(shù)為0.9-1.0 X 109c化/ml
[0047] (4)復(fù)合菌2:噴施植物乳桿菌+干酪乳桿菌液+德氏乳桿菌保加利亞亞種，活菌總 數(shù)含量2.4-3.2 X 109cfu/ml，^種菌的數(shù)量比為2:2:1，使用時加 MRS培養(yǎng)液稀釋，使活菌總 數(shù)為 〇.8-1.05Xl〇9cfu/ml
[0048] 從番茄春季開花坐果期開始，按化/畝，2次/月隨水誘施于植物根部。
[0049] 分別測定各處理對番茄的單果重和單株產(chǎn)量的影響，番茄紅素和Vc含量，番茄可 溶性糖和可溶性固形物的含量，具體數(shù)據(jù)參見下表1。
[0050] 表1乳酸菌對番茄各項(xiàng)指標(biāo)的影響
[0化1 ]
[0052] 注:復(fù)合菌1為植物乳桿菌+干酪乳桿菌，復(fù)合菌2為植物乳桿菌+干酪乳桿菌+保加 利亞乳桿菌；與空白對照組比較，Ap<0.01;復(fù)合菌2與保加利亞乳桿菌組比較，*P<0.01; 復(fù)合菌2與復(fù)合菌1組比較，·Ρ<0.01。
[0053] 乳酸菌對番茄產(chǎn)量的影響如圖1、表1所示，施加巧巾乳酸菌的番茄其單果重較空白 對照組分別提高了3.05%、4.57%、11.17% ;3種乳酸菌對番茄單株產(chǎn)量的影響也較明顯， 尤其是復(fù)合菌2對其作用最大，達(dá)到2.44kg/株，較空白對照組(2.1化g/株)提高了 12.96 %。 復(fù)合菌2相比復(fù)合菌1或保加利亞乳桿菌或?qū)φ战M的差異均有極顯著的統(tǒng)計學(xué)意義（P< 0.01)。
[0054] 如圖2、表1所示，3種乳酸菌對番茄的番茄紅素和Vc含量較空白對照組均有不同程 度的提高，其中復(fù)合菌2對其番茄紅素的作用較保加利亞乳桿菌及復(fù)合菌1明顯，番茄紅素 達(dá)到0.68g/kg，較空白對照組(5.3Ig/kg)提高了 28.25 %。巧中乳酸菌對番茄Vc較空白對照 組分別提高了 12.08%、13.93%、27.01 %。復(fù)合菌2相比復(fù)合菌1、保加利亞乳桿菌或?qū)φ盏?差異均有極顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P<〇.01)。
[0055] 如圖3、表1所示，復(fù)合菌2對番茄可溶性糖和可溶性固形物的提升作用最大，較對 照組分別提高了 22.09%和17.60%。保加利亞乳桿菌、復(fù)合菌1對番茄可溶性糖的影響較空 白對照組分別提高了 10.68%、11.89%，對番茄可溶性固形物的影響較空白對照組分別提 高了9.86%和11.22%，因此巧巾乳酸菌對番茄可溶性糖和可溶性固形物的影響表現(xiàn)為復(fù)合 菌2〉復(fù)合菌1〉保加利亞乳桿菌〉空白對照。
[0056]從上述圖1-3和表1中可W看出不同乳酸菌對番茄生長的影響不同，總體表現(xiàn)為復(fù) 合菌2〉復(fù)合菌1〉保加利亞乳桿菌〉空白對照組。結(jié)果表明，植物乳桿菌化actobacillus planta;rum)P-8、干酪乳桿菌化actobacillus casei)Zhang和德氏乳桿菌保加利亞亞種 (Lactobacillus de化rueckii subsp.bulgaricus)可W協(xié)同促進(jìn)番茄中活性成分含量的 提高，對番茄提質(zhì)增產(chǎn)能起到明顯的促進(jìn)作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，其特征在于，該復(fù)合乳酸菌菌劑由植物乳桿 菌（Lactobacillus plantarum)P_8、干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)Zhang和德氏乳桿 菌保加利亞亞種（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)按（1.8-2.4): (1 ·8_ 2.4): (0.9-1.3)的比例組成，其中植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)P_8和干酪乳桿 菌（Lactobacillus casei)Zhang的比例為1:1 〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，其特征在于，植物乳桿 菌（Lactobacillus plantarum)P_8和干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)Zhang和德氏乳 桿菌保加利亞亞種（1^(31：(^&(3；[11118(161131'116〇1<：；[131^8口.131118&1'；[(3118)按2:2:1的比例混 合。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，其特征在于，所述復(fù)合 乳酸菌菌劑的活菌總數(shù)含量為2.4-3.2 X 109cfu/ml。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑，其特征在于，所述符合 菌劑的活菌總數(shù)為3 X 109cfu/ml。5. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，其特 征在于，具體步驟如下： (1) 將所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)P_8和干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)Zhang接種于MRS培養(yǎng)基中，在37± 1°C條件下培養(yǎng)26-28小時，用無菌生理鹽水離心 洗滌3次，得到的菌體沉淀中加入8 % -12 %滅菌脫脂乳液，并調(diào)整其菌數(shù)為1.8 - 2.0 X 109cfu/ml，混勻后在35-37°C條件下培養(yǎng)35-48小時； (2) 將步驟（1)得到的菌株培養(yǎng)物與德氏乳桿菌保加利亞亞種（Lactobacillus delbrueckii subsp .bulgaricus)按比例進(jìn)行混合，接種于MRS培養(yǎng)基，在39± 1 °C條件下培 養(yǎng)12-24小時，并加入50ml/l的椰汁，調(diào)整其菌數(shù)為2.4-3.2 X 109cfu/ml，pH值為5.5-6.5。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，其特征在 于，步驟（1)植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)P_8和干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)Zhang的接種量各為4-10% (v/w)。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，其特征在 于，步驟（1)植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)P_8和干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)Zhang的接種量為1: 1。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑的制備方法，其特征在 于，步驟（1)得到的菌種與德氏乳桿菌保加利亞亞種（Lactobaci 1 lus delbruecki i subsp .bulgaricus)按（3.6-4.8): (0.9-1 · 3)的比例進(jìn)行混合，并以8-12% (v/w)的接種量 接種于MRS培養(yǎng)基。9. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的用于提升番茄品質(zhì)的復(fù)合乳酸菌菌劑的應(yīng)用，其特征在 于，從番茄春季開花坐果期開始，按2L/畝，2次/月隨水澆施于植物根部。
【文檔編號】A01P21/00GK106011041SQ201610654661
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年8月10日
【發(fā)明人】李海梅, 趙金山, 劉占民, 鄒曉霞, 任貽超, 李士美, 謝寶琦, 楊利輝
【申請人】青島科拓恒通乳酸菌產(chǎn)業(yè)化開發(fā)研究院有限公司