專利名稱：：一種sod復(fù)合膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種SOD復(fù)合膠囊及其制備方法，所述的膠囊含有超氧化物歧化酶制劑、白藜蘆醇、鵝肝提取物、輔酶QIO、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物；可以抗氧化，緩解體力疲勞，增強(qiáng)人體免疫力。
背景技術(shù)：
：超氧化物歧化酶(SOD，S叩eroxidedismutace)是一種提取于動(dòng)物紅細(xì)胞的酶(它在植物界也廣泛存在)，它的主要作用是分解和清除機(jī)體內(nèi)過剩的氧自由基。S0D的生理功能可概括為清除機(jī)體代謝工程中產(chǎn)生過量的氧自由基，延緩由于自由基侵害而出現(xiàn)的衰老現(xiàn)象，如延緩皮膚衰老和脂褐素沉淀的出現(xiàn)；提高人體對由于自由基侵害而誘發(fā)疾病的抵抗力，包括腫瘤、炎癥、肺氣腫、白內(nèi)障和自身免疫疾病等；提高人體對自由基外界誘發(fā)因子的抵抗力，如煙霧、輻射、有毒化學(xué)品和有毒醫(yī)藥等，增強(qiáng)機(jī)體對外界環(huán)境的適應(yīng)力；減輕腫瘤患者在進(jìn)行化療、放療時(shí)的疼痛及嚴(yán)重的副作用，如骨髓損傷及白細(xì)胞減少等；消除機(jī)體疲勞，增強(qiáng)對超負(fù)荷大運(yùn)動(dòng)量的適應(yīng)力。據(jù)科學(xué)研究證明，人體的衰老和90%以上的疾病與自由基有關(guān)。可惜的是人的機(jī)體在25歲以后，隨著細(xì)胞組織的老化，超氧化物歧化酶的產(chǎn)生率及活力將逐漸降低，再加上外部因素造成氧自由基生成過多，打破了機(jī)體原有的自由基生成與清除的動(dòng)態(tài)平衡，使機(jī)體免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂和全身多部位細(xì)胞組織損傷，導(dǎo)致人體疾病的發(fā)生與加重，并且加快了機(jī)體的衰老，所以人在25歲以后應(yīng)適當(dāng)外源性補(bǔ)充一些超氧化物歧化酶，保護(hù)機(jī)體正常的細(xì)胞組織，預(yù)防疾病，推遲、減緩老年病的發(fā)生。針對上述存在的問題，中國專利200710048552.X公開了一種用牦牛血制作修飾牦牛血源SOD及修飾牦牛血源SOD抗癌保健食品。此發(fā)明中，制備修飾牦牛血源S0D包括溶血熱變、超濾濃縮、純化、修飾的步驟。該保健食品中每克含有修飾牦牛血源、竹根竹葉提取物、蟲草提取物、杜仲提取物。其中，該保健品中每克含有修飾牦牛血源S0D3000-8000活性單位，可以制成膠囊服用。但是該保健食品存在以下缺點(diǎn)其中的超氧化物歧化酶容易受到胃酸的破壞，降低了其有效性；該調(diào)理食品中的原料組合缺乏靶向性、穩(wěn)定性，不能真正發(fā)揮SOD的抗氧化增強(qiáng)作用；由于采用牦牛血源取S0D，故容易造成血液制品交叉感染。因此，需要提出一種新的SOD復(fù)合膠囊及其制備方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種SOD復(fù)合膠囊及其制備方法，所述的膠囊含有超氧化物歧化酶制劑、白藜蘆醇、鵝肝提取物、輔酶QIO、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物；可以抗氧化，緩解體力疲勞，增強(qiáng)人體免疫力。本發(fā)明的目的是由下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種SOD復(fù)合膠囊，其特征在于所述復(fù)合膠囊中含有超氧化物歧化酶制劑、白藜蘆醇、輔酶QIO、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜盧醇輔酶QIO鵝肝提取物小麥胚芽提取物紅花提取物苦蕎提取物10—50，10—75，75—150，75—150，75-150，200-500;本發(fā)明中，每百克所述的復(fù)合膠囊中含有40000—4000000活力單位的超氧化物歧化酶，該超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。本發(fā)明的另一目的是由下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種SOD復(fù)合膠囊的工藝制備方法，其特征在于所述的膠囊中含有超氧化物歧化酶制劑、白藜蘆醇、輔酶QIO、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量份數(shù)配比為白藜盧醇輔酶Q10鵝肝提取物小麥胚芽提取物紅花提取物苦蕎提取物10—50，10—75，75—150，75—150，75-150，200-500;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有40000—4000000活力單位的超氧化物歧化酶，該超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。I、超氧化物歧化酶的制備A、按需要量取新鮮蝌蚪進(jìn)行潔凈處理然后進(jìn)行滅菌處理；B、將滅菌處理后的蝌蚪混入海藻糖、維生素E后于一2(TC冷凍處理；所述蝌蚪、海藻糖、維生素E的重量比是1:0.025:0.0001;C、將冷凍處理的蝌蚪破碎，加入磷酸鉀緩沖液中進(jìn)行勻漿處理，生成蝌蚪勻漿物，所述蝌蚪與磷酸鉀緩沖液的重量比是1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是0.lmol/L、pH值7.6;D、將所述的蝌鈄勻漿物用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，進(jìn)行超聲破碎處理，生成蝌蚪超聲破碎物；在0'C—4'C靜置6—24小時(shí)；E、向所述蝌蚪超聲破碎物中加入鮮雞蛋、無水乙醇，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.6;在2(TC—3(TC條件下攪拌20—40分鐘，靜置30_60分鐘，得到蝌蚪酶解液；所述蝌蚪超聲破碎物、鮮雞蛋、無水乙醇的體積比是9-12:1.5-2.5:4.5-7.0;無水乙醇溫度是一10。C一-20°C;F、對所述的蝌鈄酶解液進(jìn)行多級沉淀分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；第一級處理包括在所述的蝌蚪酶解液中加入該液體重量30%的硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解一級上清液；第二級處理包括在蝌蚪酶解一級上清液中加入該液體重量40%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解二級上清液；第三級處理包括在蝌蚪酶解二級上清液中加入該液體重量50%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解三級上清液；第四級處理包括在蝌蚪酶解三級上清液中加入該液體重量60%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解四級上清液；第五級處理包括在蝌蚪酶解四級上清液中加入該液體重量70%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；G、將所述的蝌蚪粗酶上清液在95。C一10(TC的水浴鍋內(nèi)快速升溫到65°C—68°C，移出水浴鍋靜置降溫到56'C—58"C，再移入水浴鍋快速升溫到65。C一68"，移出水浴鍋靜置保溫5—15分鐘，快速冷卻到15匸，然后進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪去雜蛋白上清液；H、將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪一級SOD濃縮液；I、將所述的蝌蚪一級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪二級SOD濃縮液；所述蝌蚪一級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:4.5-5.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是2.5mmol/L、pH值7.6;處理溫度(TC-4。C;J、將所述的蝌蚪二級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪三級SOD濃縮液;所述蝌蚪二級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25ramol/L、pH值7.6;處理溫度0。C-4。C;K、將所述的蝌蚪三級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪四級SOD濃縮液;所述蝌蚪三級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度0。C-4。C;L、將所述的蝌蚪四級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪五級SOD濃縮液；所述蝌蚪四級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:0.8-1.2，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是75mraol/L、pH值7.6;處理溫度(TC-4。C;M、將所述的蝌蚪五級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪六級SOD濃縮液；所述蝌蚪五級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度CTC-4。C;N、將所述的蝌蚪六級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪七級SOD濃縮液；所述六級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度0。C-4。C;0、向所述的蝌蚪七級SOD濃縮液中，加入2.5-3.5倍體積的、在0—4"C下預(yù)冷過的去離子水，初次離心處理得上清液；然后將該上清液中加入0.8-1.2倍體積的、在0—4i:下預(yù)冷過的去離子水，第二次離心處理得上清液；然后將第二次離心處理得到的上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行第三次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蚪除鹽SOD濃縮液；P、將所述的蝌蚪除鹽SOD濃縮液進(jìn)行真空濃縮；Q、將真空濃縮處理的蝌蚪除鹽SOD濃縮液在一20。C進(jìn)行凍結(jié)；冷凍干13燥，得到蝌蚪SOD初級凍干粉；R、向所述的蝌蚪SOD初級凍干粉中加入預(yù)冷到0—4'C的重蒸水，在一4'C的操作環(huán)境中離心分離處理，收集上清液；將該上清液真空濃縮后放入一2(TC進(jìn)行凍結(jié)，再進(jìn)行真空冷凍干燥、粉碎處理，得到S0D復(fù)合酶蝌蚪凍干粉；II、SOD復(fù)合酶蝌鈄凍干粉的修飾a.采用高碘酸鈉活化，得到活化的右旋糖苷；b.將所述的活化的右旋糖苷溶解于無水碳酸鈉緩沖液，加入所述的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸、丙酮，在4'C的條件下靜置30分鐘，得到沉淀物；將所述的沉淀物進(jìn)行冷凍真空干燥處理，得到修飾過的S0D復(fù)合酶蝌蚪凍干粉；所述的右旋糖苷、無水碳酸鈉緩沖液、SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸的重量比為0.4-0.8:4800-5200:18-22:4-7:23-26:48-52;III.鵝肝提取物制備a.取鵝的肝臟進(jìn)行潔凈處理并磨成肝漿；b.向所述的肝漿中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到鵝肝超聲破碎物；所述的肝漿與磷酸緩沖液的體積比為0.8-1.2:1.8-2.5;所述的磷酸緩沖液的濃度為0.lmol/L，pH值為7.6;c.將所述的鵝肝超聲破碎物進(jìn)行粗濾，得到鵝肝濾液；d.向所述的鵝肝濾液中加入硅藻土，攪拌均勻后，離心分離處理，收集鵝肝初級上清液和鵝肝初級沉淀物；e.將所述的鵝肝初級上清液過濾，得到鵝肝精濾液；鵝肝精濾液噴霧干燥，得到鵝肝粉末A;f.將所述的鵝肝初級沉淀物中加入鹽酸溶液，攪拌加熱處理，得到鵝肝水解液；所述的鵝肝沉淀物與鹽酸溶液的重量比為0.8-1.2:3.5-4.5;所述的鹽酸溶液的濃度為6ramol/L;g.將所述的鵝肝水解液減壓蒸餾濃縮處理到原來體積的1/4，得到鵝肝一級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝一級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝二級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝二級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝三級濃縮液；再將鵝肝三級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝三級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝四級濃縮液；h.將所述的鵝肝四級蒸餾液進(jìn)行脫色、過濾處理，得到鵝肝脫色過濾液;i.將所述的鵝肝脫色過濾液減壓蒸餾、噴霧干燥，得到鵝肝粉末B;j.合并所述的鵝肝粉末A和鵝肝粉末B，混合后粉碎，得到鵝肝提取物備用;IV.小麥胚芽提取物制備a.將小麥胚芽進(jìn)行潔凈處理并磨漿，得到小麥胚芽漿；b.向所述的小麥胚芽漿中加入堿液進(jìn)行提取處理，得到小麥胚芽提取液；所述的小麥胚芽漿與堿液的體積比為0.8-1.2:6.5-7.5;所述的堿液的pH值為8.0;c.將所述的小麥胚芽提取液進(jìn)行離心處理，分別收集小麥胚芽一次沉淀物和小麥胚芽一次上清液；d.將所述的小麥胚芽一次上清液過濾、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末A;e.將所述的小麥胚芽一次沉淀物烘干、粉碎，得到小麥胚芽粉碎物；f.向所述的小麥胚芽粉碎物中加入乙醇水溶液，微波萃取處理，得到小麥胚芽萃取液；所述的小麥胚芽粉碎物與乙醇水溶液的重量比為5.5-6.5:0.8-1.2;所述的乙醇水溶液的濃度為50%;g.將所述的小麥胚芽萃取液進(jìn)行離心處理，收集小麥胚芽二次上清液；h.將所述的小麥胚芽二次上清液過濾，得到小麥胚芽濾液；；i.將所述的小麥胚芽濾液進(jìn)行濃縮、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末B;j.將所述的小麥胚芽粉末A和小麥胚芽粉末B混合、過篩，得到小麥胚芽提取物，備用；V.紅花提取物的制備a.將紅花冰凍、粉碎、過篩，得到紅花粉末；b.向所述的紅花粉末中加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，分別收集紅花一次沉淀物和紅花一次上清液；所述的紅花粉末與蒸餾水的重量比為O.8—1.2:12.5—13.5;c.向所述的紅花一次沉淀物加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，得到紅花二次上清液；d.合并所述的紅花一次上清液和紅花二次上清液，過濾后得到紅花濾液；e.將所述的紅花濾液濃縮為原來體積的1/4，然后噴霧干燥，得到紅花提取物備用；VI.苦蕎提取物制備a.將苦喬麩皮粉碎，過篩，得到麩皮粉；b.向所述的麩皮粉中加入乙醇溶液，進(jìn)行浸泡，得到苦蕎浸泡液；所述的麩皮粉與乙醇水溶液的重量比為0.8-1.2:4^55;所述的乙醇水溶液的濃度為85%;c.將所述的苦蕎浸泡液進(jìn)行微波萃取處理，得到苦蕎萃取液；d.將所述的苦蕎萃取液離心處理，收集苦蕎上清液；e.將所述的苦蕎上清液過濾，得到苦蕎濾液；f.將所述的苦蕎濾液濃縮處理，得到苦蕎浸膏；將所述的苦蕎浸膏干燥、粉碎、過篩，得到苦蕎提取物，備用；VE.輔酶Q10制備a.取豬的心臟潔凈處理并絞成心槳液；b.向所述的心漿液中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到豬心超聲破碎液；所述的心漿液與磷酸鉀鹽緩沖液的重量比為1.5-2.5:0.8-1.2,所述的磷酸鉀鹽緩沖液的濃度為0.lraol/L，pH值為7.6，溫度為4。C;c.向所述的豬心超聲破碎液中加入氫氧化鈉-乙醇溶液，進(jìn)行皂化處理，得豬心皂化液；所述的豬心超聲破碎液與氫氧化鈉-乙醇溶液的體積比為0.8-1.2:1.5-2.5;所述的氫氧化鈉-乙醇溶液中，氫氧化鈉與無水乙醇的重量比為0.8-1.2:8-12;d.向所述的豬心皂化液中加乙醚、水，過濾處理，得到豬心一級濾液和豬心一級沉淀物；向所述的豬心一級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心二級濾液和豬心二級沉淀物；向所述的豬心二級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心三級濾液和豬心三級沉淀物；所述的豬心皂化液、乙醚、水的體積比為8-12:0.8-1.2:0.8-1.2;所述的豬心一級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5;所述的豬心二級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5;所述的豬心三級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5;e.合并所述的豬心一級濾液、豬心二級濾液，和豬心三級濾液，得到豬心總濾液；向所述的豬心總濾液中加入蒸餾水，萃取處理，得到豬心水洗萃取液；f.將所述的豬心水洗萃取液過濾，再濃縮處理，得到豬心濃縮液；所述的豬心水洗萃取液與豬心濃縮液的體積比為0.8-1。2:8-12;g.將所述的豬心濃縮液進(jìn)行層析處理，得到豬心輔酶Q10洗脫液；i.將所述的豬心輔酶Q10洗脫液進(jìn)行濃縮、溶解、過濾、結(jié)晶，得到輔酶QIO，備用；環(huán).白藜蘆醇制備a.將葡萄皮粉碎、過篩，得到葡萄皮粉末；b.向所述的葡萄皮粉末加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮一次萃取液；所述的葡萄皮粉末與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45;c.將所述的葡萄皮一次萃取液離心處理，收集葡萄皮一次上清液和葡萄皮一次沉淀物；d.向所述的葡萄皮一次沉淀物中加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮二次萃取液；所述的葡萄皮一次沉淀物與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45;e.將所述的葡萄皮二次萃取液離心處理，得到葡萄皮二次上清液；f.合并所述的葡萄皮一次上清液和葡萄皮二次上清液，過濾后得到葡萄皮濾液；g.將所述的葡萄皮濾液，濃縮處理，得到葡萄皮濃縮固體；h.將所述的葡萄皮濃縮固體溶解后，進(jìn)行層析處理，得到白藜蘆醇洗脫液；i.將所述的白藜蘆醇洗脫液濃縮、噴霧干燥，得到白藜蘆醇，備用；將所述的修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、輔酶QIO、苦蕎提取物、白藜蘆醇按照上述重量配比進(jìn)行混合，混合后均勻分裝膠囊，即得SOD復(fù)合膠囊成品。本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明在制備超氧化物歧化酶的過程中，使用無毒的有機(jī)溶劑，從而避免了外源有毒物質(zhì)的引入及對超氧化物歧化酶活性的影響。2.本發(fā)明在制備超氧化物歧化酶的原料，選用抗氧化能力很強(qiáng)的健康蝌蚪作為原料，避免了血液制品的交叉感染，也克服了植物來源的超氧化物歧化酶活性低、和人的同源性少，生理有效性差的弊端。4、本發(fā)明提取出的超氧化物歧化酶經(jīng)過修飾、微粒吸附、分子包埋延長了超氧化物歧化酶復(fù)合酶的半衰期。5、本發(fā)明膠囊制備的整個(gè)工藝過程全部采用低溫、中性多孔微粒載體吸附、低溫噴霧涂膜包衣、真空冷凍干燥法制備。在沒有用對超氧化物歧化酶活性有損失的粘合劑、增溶劑、有機(jī)溶劑的情況下，保持酶活性。6、為了保證不怕酸堿的穩(wěn)定配伍藥物在人體內(nèi)快而好的在胃腸吸收，同時(shí)又不破壞怕酸堿的超氧化物歧化酶不穩(wěn)定酶的活性讓其在直腸吸收，本發(fā)明膠囊制備的整個(gè)工藝過程采用對超氧化物歧化酶進(jìn)行分子修飾、低溫氣流粉碎，流化床中性多孔微粒載體吸附、低溫噴霧涂膜包衣、真空冷凍干燥法制備成超氧化物歧化酶酶顆粒，對其他配伍料單獨(dú)制粒，然后與其它配伍料按處方量快速混合，采用胃溶膠囊殼填裝；工藝條件穩(wěn)定，適于工業(yè)化生產(chǎn)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:一種SOD復(fù)合膠囊，其特征在于所述復(fù)合膠囊中含有超氧化物歧化酶制劑、白藜戶醇、輔酶QIO、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜蘆醇10—50，輔酶QIO10—75，鵝肝提取物75—150，小麥胚芽提取物75—150，紅花提取物75-150，苦蕎提取物200-500;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有40000—4000000活力單位的超氧化物歧化酶，該超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。本實(shí)施例所用的單位可以是克、千克。所述的白藜蘆醇、輔酶Q10可以在市場上購買得到，也可以參照實(shí)施例4的方法制備；本實(shí)施例中，所述的SOD復(fù)合膠囊的各組分可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉。該各個(gè)組分的制備也可以參照實(shí)施例5公開的方法實(shí)施；實(shí)施例2:本實(shí)施例是在實(shí)施例l基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案，所用原料(組分)的質(zhì)量與實(shí)施例1相同，所述的復(fù)合膠囊中個(gè)組分的重量份數(shù)配比為白藜盧醇20，輔酶QIO50，鵝肝提取物100，小麥胚芽提取物100，紅花提取物100，苦蕎提取物310;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有2000000活力單位的超氧化物歧化酶。本實(shí)施例的檢測結(jié)果如下一、修飾SOD復(fù)合酶凍干粉活性測定1.取修飾SOD復(fù)合酶凍干粉lg溶解于10ml的62.5mmol/LpH7.8磷酸緩沖液(PBS)中，再從中取lml用62.5mmol/LpH7.8磷酸緩沖液(PBS)定容到100ml，搖勻后在冰凍離心機(jī)6000轉(zhuǎn)/分鐘，4'C高速離心15分鐘，制備為含SOD復(fù)合酶lmg/ml的上清液進(jìn)行下列測定。(1)超氧化物歧化酶SOD活性測定方法采用黃嘌呤氧化酶法，操作步驟按南京建成生物工程研究所試劑盒推薦程序測定，于波長550nm處測定測定管、對照管吸光度，借助反應(yīng)體系得稀釋倍數(shù)，通過公式計(jì)算可求出被測液的SOD活力。被測液SOD活性定義為<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>混勻10分鐘后倒入1cm光徑比色杯中，蒸餾水調(diào)零，波長550nm.計(jì)算SOD比活力U/mg蛋白=(對照管吸光度一測定管的吸光度)+對照管吸光度+50XX稀釋倍數(shù)+蛋白含量結(jié)果SOD比活力U/mg為4000-8000U/ragFolin-酚法或雙縮脲法測樣品蛋白質(zhì)含量。(2).過氧化氫酶CAT活性測定試劑A:25°C的ph7.050mM磷酸鉀緩沖液B:0.036%(w/w)H202溶液C:CAT溶液(用預(yù)冷的試劑A配置成濃度為50-100u/ml溶液)過氧化氫酶CAT活性定義為每毫克蛋白在37。C每分鐘轉(zhuǎn)化lumol的底物所需的酶量為一個(gè)酶活力單位方法移取取2.9mlB溶液放入到比色皿，恒溫測定波長240nm處的吸光值，加入0.lral的溶液C，立即混合記下A240nm吸光單位從0.45降到0.40所需的時(shí)間，以3.0ml的溶液A為空白計(jì)算樣品活性比U/mg:過氧化氫酶CAT活性U/ml二(測定管OD-空白管0D)+呈色物摩爾消光系數(shù)乂(反應(yīng)液總體積+取樣量)+(光徑X反應(yīng)時(shí)間)+勻漿蛋白含量1^/1111Folin-酚法測樣品蛋白質(zhì)含量結(jié)果過氧化氫酶CAT比活力為1000—3000U/mg蛋白(3).谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px的活性方法谷胱甘肽過氧化物酶用二硫代雙硝基苯甲酸(DTNB)法測定。<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>37t:恒溫水浴反應(yīng)3分鐘(嚴(yán)格控制時(shí)間)偏磷酸沉淀液ml4.004.003000r/min離心10min離心上清液mL2.002.00雙蒸水mL0.400偏磷酸沉淀液mL1.600.32mol/LNa2HPO4mL2.502.502.50DTNB顯色劑mL0.5000.5000.500顯色反應(yīng)lmin，于420nm波長，讀OD值計(jì)算GSH-PX比活力單位規(guī)定每毫克蛋白質(zhì)，每分鐘，扣除非酶反應(yīng)后使GSH濃度降低lpmol/L為一個(gè)酶活力單位。[非酶管OD—樣品管OD]xA**x5GSH-Px比活力(U/mg蛋白)=-3minx樣品蛋白質(zhì)的mg數(shù)*標(biāo)準(zhǔn)GSH濃度(imiol/L)**A=-即標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率。標(biāo)準(zhǔn)GSH光密度(OD)*Folin-酚法測樣品蛋白質(zhì)含量結(jié)果GSH-Px的活性=800-1500U/mg蛋白二、修飾SOD復(fù)合酶凍千粉的穩(wěn)定性試驗(yàn)(一)、修飾S0D復(fù)合酶凍干粉的耐熱、耐酸、耐堿試驗(yàn)1、采用南京建成SOD試劑盒分別檢測天然SOD和修飾SOD的活性2、分別配制lmg的天然SOD和lmg的修飾SOD溶解于10ral蒸餾水、lOral25。Cra5.2磷酸鹽緩沖液、10ml25°CPH10.5磷酸鹽緩沖液中制備溶液。3、如下處理后采用南京建成SOD試劑盒分別檢測其活性。結(jié)果如下處理前天然SOD活性5210S0DU/mg，修飾S0D3012U/mg<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>保溫6h25"CPH10.5磷酸鹽緩沖液磷酸鹽保溫6h3141.62385.560.379.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該修飾酶不僅保留了天然酶的活性，而且在耐熱性，耐酸性和胃蛋白酶水解能力等方面都優(yōu)于天然酶。修飾酶較天然酶穩(wěn)定，具有較高的實(shí)用意義。(二)口腹修飾SOD復(fù)合酶凍干粉的半衰期試驗(yàn)1、方法取150—180g健康成年SD大鼠，全雌性，隨意分為2組，每組20只。分別按lml/100g.bw空腹灌胃(其中SOD=1000U/ml)，分別于1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、7小時(shí)分批處死大鼠，收集血液，進(jìn)行Cu-ZnSOD測試.2、測試采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)測定蝌蚪SOD的活力，試劑釆用由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的SOD試劑盒，均按試劑盒說明書進(jìn)行操作。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>4、結(jié)論從測試結(jié)果中可以看出，兩組血液中的S0D活力在2小時(shí)后逐漸開始升高，其中A組在7小時(shí)后開始下降，而B組在7小時(shí)后比較穩(wěn)定。三、SOD復(fù)合膠囊SOD含量測定取S0D復(fù)合膠囊3批次各一粒，研細(xì)，用50ralpH7.8磷酸鹽緩沖液分?jǐn)?shù)次研磨，并移人100ml量瓶中，用緩沖液洗滌研缽數(shù)次，洗液合并于50ml量瓶中，用緩沖液稀釋至刻度并搖勻，用0.45ixm濾膜過濾，得透明清液，取透明液按照國標(biāo)(GB/T5009.171——2003)測定，定義25。C時(shí)抑制鄰苯三酚自氧化速率50%時(shí)所需的SOD量為一個(gè)活力單位。表l:<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>20071218910410120071219891399合格范圍標(biāo)示量在90—110%之間結(jié)果三批抗氧化膠囊的含量測定結(jié)果表示標(biāo)示量在90—110%之間，符合規(guī)定。平均SOD含量為9000U/粒。四、SOD復(fù)合膠囊體外釋放溶出度為測定l方法波長選擇:選擇處方比例稱取適量輔料，置于100ml的容量瓶中，用pH6.8磷酸鹽緩沖液定量至刻度，搖勻，0.45iim濾膜過濾,取續(xù)濾液，于紫外分光光度計(jì)2.00—400nn波長范圍掃描，輔料在325nn處沒有吸收，對檢測無影響，故選用測定波長為325nm。釋放度測定S0D在215ii/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，取本品1粒，照中國藥典二00五年版中國藥典二部附錄釋放度測定法[附錄XD第二法]測定。采用溶出度測定法第一法裝置，以0.lmol/L鹽酸溶液900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)120分鐘時(shí)，取溶液5ml濾過，作為供試品溶液(l)，然后加人37'C的pH6.8磷酸鈉緩沖液900ml，繼續(xù)溶出，分別于1，2，6小時(shí)取溶液5ral濾過，作為供試品溶液(2)，同時(shí)補(bǔ)充相同體積緩沖液。取供試品溶液(l)，以O(shè).ImQl/L鹽酸溶液為空白，在325nm波長處測定吸收度，吸收值不得大于0.25。另取SOD原料藥(1000U/mg)對照品0.5mg，置100ml量瓶中，加P服.8磷酸鈉緩沖液適量使溶解，并稀釋至刻度，作為對照品溶液。取供試品溶液(2)和對照品溶液，以磷酸鈉緩沖液(0.05mol/L)為空白，在325nm波長處比色測定吸收度，計(jì)算出每粒的釋放量。SOD復(fù)合膠囊體外釋放溶出度為測定<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>2結(jié)果和討論從三批SOD復(fù)合膠囊的體外釋放溶出度測定結(jié)果可以得出結(jié)果SOD抗氧化膠囊在O.lm01/L鹽酸溶液中2h穩(wěn)定，在磷酸鹽緩沖液(p朋.8)6h的溶出度情況良好。釋放度分別為85.7%，82.5%和81.8%，均符規(guī)定五、SOD復(fù)合膠囊的生物利用度參比SOD復(fù)合膠囊按處方量采用未修飾的SOD粉末配制膠囊的填充料，以腸溶膠囊空殼制作腸溶膠囊。體內(nèi)分析方法評價(jià)取10位健康人空白血樣，分別精確加入SOD復(fù)合膠囊的標(biāo)準(zhǔn)對照品，配制成25，50，100，200，300，400，500，600，700，800ng*ml-l，SOD復(fù)合膠囊的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品。血漿樣品預(yù)處理和HPLC方法測定相同。按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法，以血漿中測得的蝌蚪S0D抗氧化膠囊的峰高A為縱軸，以相應(yīng)的濃度C為橫軸，得到回歸方程為A48.16C+87.92,相關(guān)系數(shù)F0.9991。SOD血漿濃度在2.5415.3ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，最低檢測濃度為2.5ng/mL.采用低濃度25ng/mL、中濃度100ng/mL、高濃度400ng/mL三個(gè)濃度，評價(jià)本法測定血漿中SOD含量的方法回收率及萃取回收率分別(88.1±2.7)%、(87.3±2.4)%、(86.1±2.1)%。方法回收率分別為(96.2±2.5)%、(97.1±2.2)%、(98.1±2.3)%。日內(nèi)、日間RSD均小于7%。符合生物等效性研究方法學(xué)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)10位健康男性受試平均年齡(22.34土0.91)歲，平均體重(65.98±0.87)kg.身體健康狀況良好，無明顯腦、心、肝、肺、腎、血液疾患.連續(xù)3個(gè)月未服用同類產(chǎn)品。禁煙、酒、咖啡。IO位健康男性受試者按隨機(jī)交叉試驗(yàn)分兩組。受試者禁食12h后，于早上8:OO分別單劑量、空腹、用30。C一4(TC200mL水服用蝌蚪S0D抗氧化膠囊、或參比膠囊。服藥前1h及服藥后2h禁止飲水，服藥后4h及10h統(tǒng)一進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)餐。受試者服藥前及服藥后O.5h，0.75h，1.0h，1.5h，2.0h,3.0h,5.0h，8.0h，12.0h,17.0h，23.0h，30h，38h，取靜脈血3mL。間隔2周后，交叉單劑量服用SOD復(fù)合膠囊或參比膠囊，并于相同時(shí)間點(diǎn)采集血樣。血樣置肝素管中，立即離心，分離出血漿，于-20。C冰箱中貯藏。采用HPLC方法測定人血漿中的藥物濃度，并比較其生物利用度。數(shù)據(jù)處理SOD復(fù)合膠囊血藥濃度、時(shí)間曲線下面積值由梯形計(jì)算AUC，其中AUC0-38由SOD復(fù)合膠囊血藥濃度實(shí)際測算值計(jì)算，AUC38-w根據(jù)消除相尾部，lnc-t直線斜率K值和38h點(diǎn)SOD復(fù)合膠囊血藥濃度計(jì)算。以S0D參比膠囊AUC0-oo。為參照計(jì)算SOD復(fù)合膠囊相對生物利用度。選擇NDST5.0統(tǒng)計(jì)分析程序，對主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)cmax和AUCOw進(jìn)行三因素方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)(顯著性水平a=0.05)。試驗(yàn)結(jié)果對10位受試者交叉試驗(yàn)因素方差分析，SOD復(fù)合膠囊的體內(nèi)動(dòng)態(tài)過程呈一級吸收的二房室開放模型。并經(jīng)雙-單側(cè)t檢驗(yàn)SOD復(fù)合膠囊具有高的相對生物利用度?？诜骃0D復(fù)合膠囊平均生物利用度為77y。，對兩種膠囊進(jìn)行臨床對照研究表明在Cmax、Tmax和AUC存在顯著的差異。S0D復(fù)合膠囊吸收快、完全。平均最大血藥濃度增加30%，AUC增加21LS0D復(fù)合膠囊比參比膠囊口服后平均生物利用度提高了10%以上的相對生物利用度為121.03%±12.8%(Z±s，n=10)。cmax分別為(414.51±284.35)ng/ml、(318.85±218.73)ng/ml;tmax分別為(2.08±0.19)h、(3.12±0.22)h;tl/2P分別為(9.08±0.37)h、(10.73±0.46)h;AUC0^分別為(3403.94±364.22)ng*h/ml、(2813.17±301.01)ng承h/ml。，六、S0D復(fù)合膠囊抗氧化功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1材料和方法1.1樣品S0D復(fù)合膠囊每粒膠囊內(nèi)容物重300mg。人體推薦劑量2.4g/d/60kg.BW.。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選13月齡清潔級健康雌性Wistar大鼠40只，根據(jù)大鼠體重和血漿中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平，隨機(jī)分為四組，每組10只，分別是對照組體重317士20.3g，低劑量實(shí)驗(yàn)組體重316士20.4g，中劑量實(shí)驗(yàn)組體重316土21.6g和高劑量實(shí)驗(yàn)組體重317±23.6g。1.3劑量選擇與受試物給予方式人推薦量為2.4g/d,即0.04g/kg.BW.(以60kg體重計(jì))，按相當(dāng)于人體推薦量的5倍、10倍和30倍確定低、中、高三組劑量，分別為0.2g/kg.BW.、0.4g/kg.BW.、1.2g/kg.BW.。用蒸餾水溶解膠囊內(nèi)容物，以灌胃方式給予受試物。對照組灌服同等量的蒸餾水。1.4主要儀器與試劑儀器紫外分光光度法、冷凍高速離心機(jī)、恒溫及煮沸水浴鍋、組織勻漿器。試劑硫代巴比妥酸、四乙氧基丙烷、谷胱甘肽(還原型)、正丁醇、鹽酸羥胺、黃嘌呤、甲萘胺、對氨基苯磺酸、迭氮鈉磷酸鹽等。1.5實(shí)驗(yàn)方法1.5.1連續(xù)灌胃30天，實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死動(dòng)物。制備血液和肝組織勻漿樣本-乙醚麻醉，腹腔動(dòng)脈取血，加入5《EDTA-Na抗凝，待測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)脂質(zhì)過氧化物(MDA)和超氧化物歧化酶(S0D)。取肝臟用冰冷生理鹽水洗兩次，在冰浴上用濾紙吸干后用病理刀切下0.5克左右(三分)，稱重后分別放入冷凍管中立即投入液氮中速凍后，存低溫冰箱保存待測GSH-Px和MDA。1.5.2脂質(zhì)過氧化物(MDA)的測定用TBA法，由南京建成生物工程研究所提供試劑盒，將抗凝血樣本3000r/rain離心10min。取血漿100y1加入各種反應(yīng)試劑，混勻后避光沸水浴60rain，流水冷卻至室溫，3000r/min離心10min，取上清液，532nm處比色測定各管吸光度。通過與標(biāo)準(zhǔn)管相比較，計(jì)算出血樣本中MDA含量組織中MDA含量測定根據(jù)組織重量加入10倍的冷生理鹽水，超速勻漿器20000r/min勻漿10秒，間歇30秒，重復(fù)3次。勻槳于4。C3000r/min離心15min，取上清O.lral，其它步驟同血漿中MDA測定。1.5.3谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)的測定DTNB法，處死動(dòng)物當(dāng)日測血中GSH-Px活力。取10y1上述抗凝血加入到990ul雙蒸水中，充分震蕩，使之全部溶血，取0.4ml，加入所需試劑，37。C水浴中進(jìn)行酶促反應(yīng)3min，終止反應(yīng)。3000r/min離心10min，加入所需試劑顯色，于423nm波長讀OD值，按照公式計(jì)算出酶活力單位，組織中GSH-Px活力測定當(dāng)日從低溫冰箱取出肝組織，根據(jù)肝組織重量加入20倍的冷生理鹽水，超速勻漿器20000r/min勻漿10秒，間歇30秒。勻漿以10000r/min離心10min，取上清液測定(步驟同血測定)。1.5.4超氧化物歧化酶(SOD)的測定羥胺法(由南京建成生物工程研究所提供試劑盒)。動(dòng)物處死后當(dāng)日測SOD活性，將前述抗凝血3000r/min，離心10min。取血漿30ul，加所需試劑，混勻，于37。C水浴30min，加試劑終止反應(yīng)，顯色15min后，于550nm處測定0D值，根據(jù)0D值計(jì)算出SOD活力單位數(shù)。1.6實(shí)驗(yàn)資料統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)用SAS軟件進(jìn)行方差分析，如方差齊性或正態(tài)性不能滿足分析要求，在數(shù)據(jù)進(jìn)行轉(zhuǎn)換后進(jìn)行。1.7結(jié)果判定過氧化脂質(zhì)含量中任意指標(biāo)和抗氧化酶活性任一指針均為陽性，可判定該受試抗氧化物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。2.結(jié)果SOD復(fù)合膠囊對大鼠體重的影響表lSOD復(fù)合膠囊對大鼠體重的影響(I±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>從表l結(jié)果可見，各劑量組大鼠體重與老齡對照組相比無差異(P>0.05)。sOD復(fù)合膠囊對大鼠血中MDA含量影響表2SOD復(fù)合膠囊對大鼠血中MDA含量影(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>與老齡對照組相比*P<0.05由表2可見，實(shí)驗(yàn)前各劑量組大鼠血中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平與老齡對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。經(jīng)口給予所述的膠囊30天，與與老齡對照組相比，高、中計(jì)量組能明顯降低大鼠血中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平(P<0.05)。SOD復(fù)合膠囊對大鼠血中SOD、GSH-Px活力影響表3SOD復(fù)合膠囊對大鼠血中S0D、GSH-Px活力影響(I±SD)劑量(g/kg,BW.)NSOD(NU/ml血)GSH-Px(U/ml血)0.0010171.6±18.0519.8±1.880.2010179.1±17.3120.2±2.050.4010199.8±22.86*22.3±2.171.2010223.1±20.78**24.1±2.10*與老齡對照組相比*P<0.05**P<0.01由表3可見，與老齡對照組相比，經(jīng)口給予S0D復(fù)合膠囊30天，高劑量能明顯升高大鼠血中谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)活力(P<0.05)，高、中劑量均能明顯升高大鼠血中超氧化物歧化酶(SOD)活力(P〈0.01，P〈0.05)。2.4SOD復(fù)合膠囊對大鼠肝組織中MDA含量及GSH-Px活力的影響—表4SOD復(fù)合膠囊對大鼠肝組織中MDA含量及GSH-Px活力的影響(X±SD)劑量(g/kg.BW.)N肝中MDA(nmol/mg組織)肝組織中GSH-Px(U/mg組織)0.00100.129±0.01814.26±0.450.20100.118±0.01514.57±1.130.40100.116±0.03114.69±1.401.20_IQ_0.097+0.021*_16.97±0.70*與老齡對照組相比*P<0.05由表4可見，經(jīng)口給予S0D復(fù)合膠囊30天，與老齡對照相比高劑量組能明顯升高大鼠肝組織中谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)活力(P〈0.05)，并明顯降低大鼠肝組織中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平(P〈0.05)。小結(jié)經(jīng)口給予S0D復(fù)合膠囊30天，與老齡對照組相比，高、中劑量能明顯升高大鼠血中超氧化物歧化酶(SOD)活力(P<0.01，P〈0.05)，并能明顯降低大鼠血中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平(P〈0.05);高劑量能明顯升高大鼠血中和肝組織中谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)活力(P〈0.05)，并明顯降低大鼠肝組織中脂質(zhì)過氧化物(MDA)水平(P〈0.05)。按《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范一2003》結(jié)果判定，蝌蚪SOD膠囊抗氧化功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。七、SOD復(fù)合膠囊抗氧化功能人體試食試驗(yàn)1材料與方法1.1樣品SOD復(fù)合膠囊每粒膠囊內(nèi)容物300mg。人體推薦劑量2.4g/d/60kg.BW.。1.2受試人群按自愿原則選擇符合下述標(biāo)準(zhǔn)者。1.2.1受試者的選擇標(biāo)準(zhǔn)年齡在45-65歲，身體健康狀況良好，無明顯腦、心、肝、肺、腎、血液疾患，無長期服藥史，自愿受試并保證配合的中老年人。1.2.2受試者排除標(biāo)準(zhǔn)孕期或哺乳期婦女；合并有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病患者；近30天服用過與受試功能有關(guān)的物品者；未按規(guī)定服用受試樣品者；數(shù)據(jù)不全無法判定功效或安全性者。1.3試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組采用自身和組間兩種對照設(shè)計(jì)。受試者按照MDA、S0D、GSH-Px水平隨機(jī)分為試食組(50人)和對照組(50人)，對可能影響結(jié)果的主要因素如年齡、性別、生活飲食習(xí)慣等進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。1.4服用劑量及時(shí)間試食組每人每日服用2.4g(300mg/粒，每次4粒，每日2次)，連續(xù)服用3個(gè)月。陰性對照組不作任何處理。試驗(yàn)期間受試者不改變原來的生活和飲食習(xí)慣，正常飲食。1.5觀察指標(biāo)1.5.1—般狀況包括受試者的精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等。1.5.2安全性指標(biāo)血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)、X線胸部透視、腹部B超、心電圖、肝功能、腎功能。1.5.3功效性指標(biāo)測定在實(shí)驗(yàn)前和終止實(shí)驗(yàn)時(shí)，采集對照組和實(shí)驗(yàn)組受試者空腹12小時(shí)血液，測定MDA、S0D及GSH-Px。1.5.3.1過氧化脂質(zhì)含量用TBA法，觀察試驗(yàn)前后MDA的變化情況。使用南京建成生物工程研究所試劑盒及推薦程序進(jìn)行血漿含量測定。1.5.3.2超氧化物歧化酶用羥胺法，觀察試驗(yàn)前后S0D變化的情況。使用南京建成生物工程研究所試劑盒及推薦程序進(jìn)行血漿SOD活力測定。1.5.3.3谷胱甘肽過氧化物酶用DTNB法，觀察試驗(yàn)前后GSH-Px的變化情況。使用南京建成生物工程研究所試劑盒及推薦程序測定全血GSH-Px活力。1.6實(shí)驗(yàn)資料統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)使用SAS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。各指標(biāo)試驗(yàn)前后差異的自身比較采用配對t檢驗(yàn)。試驗(yàn)前、后試食組和對照組間差異的比較用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)采用t'檢驗(yàn)。1.7結(jié)果判定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性可判定受試樣品具有抗氧化功能的作用。2結(jié)果2.1—般狀況試驗(yàn)期間受試者的精神、飲食、睡眠、大小便均未見異常。2.2安全性指標(biāo)觀察結(jié)果試驗(yàn)前后受試者心率、血壓、心電圖、X線胸部透視、腹部B超、尿常規(guī)、大便常規(guī)、血常規(guī)、血液生化指針及肝腎功能指針均在正常范圍。血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)及生化指標(biāo)檢測結(jié)果見表l。試食組和對照組試驗(yàn)前后各項(xiàng)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)，并且試食前后無顯著性差異。表明本樣品對血常規(guī)及生化指標(biāo)無明顯影響。表1實(shí)驗(yàn)前后血液學(xué)檢測指標(biāo)a±SD)項(xiàng)目對照組(n=50)_i式食組(n=50)試食前試食后_試食前_試食后4.46±0.374.38±0.434.45±0.324.48±0.36紅細(xì)胞總數(shù)(1012/L)血紅蛋白(g/L)白細(xì)胞總數(shù)(109/L)血小板(109/L)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(U/L)谷草轉(zhuǎn)氨酶(U/L)總膽紅素(umol/L)133.60±14.906.83.±2.15140.11±36.1217.76±7.601.08±5.1315.14±4.44132.34±15.446.52±1.80148.12±38.7019.13±8.6122.69±7.0114.89±4.81132.46±12.706.49±1.57144.08±51.3220.16±8.1322.69±6.6615.21±5.17131.12±12.466.40±1.25147.90±57.202037±7.1523.15±6.2615.32±4.63總蛋白(g/L)白蛋白(g/L)尿素氮(mmol/L)肌酐(umol/L)尿常規(guī)MM_72.32±3.3446.02±2.185.54±1.0897.04±12.33正常JES_73.14±3.7845.91±2.626.01±1.64101.12±12.86正常JE1_74.85±3.5546.19±2.005.88±1.31104.66±13.14正常認(rèn)75.34±3.4246.89±2.786.02±1.54103.30±12.06正常_JE1_2.3功效性指標(biāo)測定結(jié)果試驗(yàn)前后過氧化脂質(zhì)(MDA)含量、超氧化物歧化酶(S0D)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性見表2。表2實(shí)驗(yàn)前后MDA含量、SOD和GSH-Px活性(X土SD)表2實(shí)驗(yàn)前后MDA含量、SOD和GSH-Px活性(X土SD)指標(biāo)對照組(N=50)_試食組(N=50)__實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)后_實(shí)驗(yàn)前_實(shí)驗(yàn)后MDA(nmol/ml)1.65±1.261.63±1.051.64±1.781.48±1.07SOD(NU/ml)2365.0±801.32295.6±722.42288.4±779.12587.3±832.2GSH-PxOJ/ML)128.17±24.10130.67±22.45132.18±27.80138.63±23.21自身前后比較*p<0.05;組間比較、<0.05從表2可見，實(shí)驗(yàn)前試食組與對照組比較MDA含量、S0D和GSH-Px活性均無顯著差異(p<0.05)，實(shí)驗(yàn)后試食組MDA含量與試驗(yàn)前比較顯著降低(p<0.05)，與對照組比較，試食組實(shí)驗(yàn)后MDA含量顯著降低(P<0.05)。試食組實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前比較SOD活力顯著增高(p〈0.05)，與對照組比較亦有顯著增高(p<0.05)，試食組實(shí)驗(yàn)前后GSH-Px活力無顯著差別(p<0.05)，與對照組比較亦無顯著性差別(p〈0.05)。3小結(jié)SOD復(fù)合膠囊抗氧化功能人體試食試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)期間受試者的精神、飲食、睡眠、大小便未見異常，血常規(guī)、尿常規(guī)、血液學(xué)和生化指針、肝腎功能及胸透、心電圖、腹部B超均未見異常，未發(fā)現(xiàn)本樣品對人體的不良影響。試食組實(shí)驗(yàn)后MDA含量與實(shí)驗(yàn)前比較顯著降低(p<0.05)。與對照組比較，試食組實(shí)驗(yàn)后MDA含量降低(p<0.05)。試食組實(shí)驗(yàn)后與實(shí)驗(yàn)前及對照組比較SOD活力均顯著增高(p〈0.05，p<0.05)，試食組實(shí)驗(yàn)前后GSH-Px活力無顯著差別(p<0.05)，與對照組比較亦無顯著性差別(p<0.05),按《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范一2003》有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)判定，蝌蚪SOD膠囊有抗氧化功能作用。實(shí)施例3:本實(shí)施例是在實(shí)施例l基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案，所用原料(組分)的質(zhì)量與實(shí)施例1相同，所述的復(fù)合膠囊中個(gè)組分的重量份數(shù)配比為白藜戸醇15，輔酶QIO15，鵝肝提取物18，小麥胚芽提取物80，紅花提取物80，苦蕎提取物95;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有2000000活力單位的超氧化物歧化酶。實(shí)施例4:本實(shí)施例是在實(shí)施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案，所用原料(組分)的質(zhì)量與實(shí)施例1相同，所述的復(fù)合膠囊中個(gè)組分的重量份數(shù)配比為白藜盧醇70，輔酶QIO75，鵝肝提取物150，小麥胚芽提取物150，紅花提取物150，苦蕎提取物150;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有1000000活力單位的超氧化物歧化酶。實(shí)施例5:一種SOD復(fù)合膠囊的制備方法，其特征在于所述復(fù)合膠囊中含有白藜蘆醇、輔酶QIO、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為，10—50:10—75:75—150:75—150:75一150:200—500，每百克所述組合物中含有40000—4000000活力單位的超氧化物歧化酶，制備步驟如下I、超氧化物歧化酶的制備A、按需要量取新鮮蝌蚪進(jìn)行潔凈處理然后進(jìn)行滅菌處理；具體的操作為先進(jìn)行清洗取活的蝌蚪洗凈，浸泡24小時(shí)后過濾水分；再進(jìn)行消毒稱消毒處理的蝌鈄新鮮濕重30-160重量份，優(yōu)選為90重量份，在預(yù)冷的4°C用0.lmol/LpH7.6的磷酸鉀鹽緩超聲波洗滌滅菌10分鐘；過濾水分；B、將滅菌處理后的蝌蚪混入海藻糖、維生素E后于一2(TC冷凍處理；所述蝌蚪、海藻糖、維生素E的重量比是1:0.025:0.0001;c、將冷凍處理的蝌蚪破碎，加入磷酸鉀緩沖液中進(jìn)行勻漿處理，生成蝌蚪勻漿物，所述蝌蚪與磷酸鉀緩沖液的重量比是1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是0.lmol/L、pH值7.6所述的勻漿處理溫度4。C;處理時(shí)間1分鐘；D、將所述的蝌蚪勻漿物用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，進(jìn)行超聲破碎處理，生成蝌蚪超聲破碎物，將其在0'C—4'C靜置6—24小時(shí)，優(yōu)選為15小時(shí)；所述的超聲破碎的時(shí)間為45分鐘，溫度為4。C;E、向所述蝌鈄超聲破碎物中加入鮮雞蛋、無水乙醇，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.6;在20。C一30。C條件下攪拌20—40分鐘，靜置30—60分鐘，得到蝌蚪酶解液，最佳溫度為25°C，最佳攪拌時(shí)間為30分鐘，最佳靜置時(shí)間為45分鐘；再用4mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)蝌蚪酶解液的pH值為7.6;所述蝌蚪超聲破碎物、鮮雞蛋、無水乙醇的體積比是9-12:1.5-2.5:4.5-7.0，優(yōu)選為10:2:5;無水乙醇溫度是一10。C一_2(TC;所述的攪拌轉(zhuǎn)速為150-200rpm;F、對所述的蝌蚪酶解液進(jìn)行多級沉淀分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；第一級處理包括在所述的蝌蚪酶解液中加入該液體重量30%的硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解一級上清液；第二級處理包括在蝌蚪酶解一級上清液中加入該液體重量40%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解二級上清液；第三級處理包括在蝌蚪酶解二級上清液中加入該液體重量50%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解三級上清液；第四級處理包括在蝌蚪酶解三級上清液中加入該液體重量60%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解四級上清液；第五級處理包括在蝌抖酶解四級上清液中加入該液體重量70%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000rpm,時(shí)間為20分鐘，溫度為25。C;G、將所述的蝌蚪粗酶上清液在95。C一100。C的水浴鍋內(nèi)快速升溫到65°C_68°C，移出水浴鍋靜置降溫到56'C—58'C，再移入水浴鍋快速升溫到65'C一68'C，移出水浴鍋靜置保溫5—15分鐘，優(yōu)選為10分鐘，快速冷卻到15°C，然后進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪去雜蛋白上清液;所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為15°C;H、將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪一級SOD濃縮液；具體的操作方法為將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液冷卻到4°C，然后在-5'C以下的操作溫度下，以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，濃縮液為原液體積的10%20%;濃縮液進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪一級SOD濃縮液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；I、將蝌蚪一級S0D濃縮液；加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌鈄二級S0D濃縮液；所述蝌蚪一級S0D濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:4.5-5.5，優(yōu)選為1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是2.5mmol/UpH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；J、將蝌鈄二級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪三級S0D濃縮液；所述蝌酙二級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，優(yōu)選為l:3;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；K、將蝌蚪三級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C,獲得蝌蚪四級SOD濃縮液；所述蝌蚪三級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，優(yōu)選為l:2;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50ramol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%:所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；L、將蝌蚪四級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4t:，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪五級SOD濃縮液；所述蝌蚪四級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:0.8-1.2，優(yōu)選為l:1，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是75mmol/UPH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpra，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；M、將蝌蚪五級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪六級SOD濃縮液；所述蝌蚪五級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，優(yōu)選為l:2，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行;N、將蝌蚪六級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4t:，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蚪七級SOD濃縮液；所述蝌蚪六級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，優(yōu)選為l:3，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；0、向所述的蝌蚪七級SOD濃縮液中，加入2.5-3.5倍體積的，優(yōu)選為3倍體積比的、在0—4t:下預(yù)冷過的去離子水，初次離心處理得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C;然后將該上清液中加入0.8-1.2倍體積，優(yōu)選為等體積的、在0—4t:下預(yù)冷過的去離子水，第二次離心處理得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C;然后將第二次離心處理得到的上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行第三次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪除鹽SOD濃縮液；所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理和第二次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的第三次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；P、分子蒸餾將所述的蝌蚪除鹽SOD濃縮液用真空旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器進(jìn)行真空濃縮；得到蝌蚪SOD初級凍干粉；R、將所述的蝌蚪SOD初級凍干粉中加入預(yù)冷到0—4'C重蒸水，攪拌均勻后，一4。C的操作環(huán)境中離心處理，除去不溶物，收集上清液，將該上清液減壓濃縮后放入一20'C進(jìn)行凍結(jié)；再進(jìn)行真空冷凍干燥，得到蝌蚪SOD復(fù)合酶凍干塊；所述的蝌蚪S0D初級凍干粉與重蒸水的重量比為1:3;所述的離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為20-30分鐘，優(yōu)選為25分鐘；S、將所述的蝌蚪SOD復(fù)合酶凍干塊進(jìn)行低溫氣流粉碎后，得到SOD復(fù)合酶蝌酙凍干粉，即為超氧化物歧化酶-2(TC儲藏備用；II、SOD復(fù)合酶凍干粉的修飾a.采用高碘酸鈉活化，得到活化的右旋糖苷具體的操作方法為向右旋糖苷溶液中加入高碘酸鈉溶液，得到混合溶液A，4。C避光保存18-24小時(shí)，優(yōu)選為22小時(shí)；然后向所述的混合溶液A中加入亞硫酸氫鈉溶液，還原過量的高碘酸鈉，得到混合溶液B;所述的右旋糖苷溶液的由0.5重量份的右旋糖苷溶解于5重量份的蒸餾水配制而成，所述的蒸餾水的溫度為4'C;所述的高碘酸鈉溶液的重量百分比濃度為12%;所述的右旋糖苷溶液與高碘酸鈉溶液的體積比為10:l;，所述的亞硫酸氫鈉溶液的重量百分比濃度為5%,溫度為4。C;再將混合溶液B進(jìn)行透析處理18-22小時(shí)，得到透析液B;再向透析液B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到沉淀物B;所述的透析液B與所述的丙酮的體積比為1:2，所述的丙酮的溫度為-20'C;再向所述的沉淀物B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到二次沉淀物B;所述的沉淀物B與所述的丙酮的重量比為1:2，所述的丙酮的溫度為-2(TC;再向所述的二次沉淀物B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到三次沉淀物B;所述二次的沉淀物B與所述的丙酮的重量比為1:2，所述的丙酮的溫度為-20°C;再將所述的三次沉淀物B進(jìn)行冷凍干燥處理，即得到活化的右旋糖苷；b.將所述的活化的右旋糖苷溶解于無水碳酸鈉緩沖液，得到混合溶液C;向所述的混合溶液C中加入所述的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉，在4'C的條件下避光保存17小時(shí)，得到混合溶液D，再用硼酸調(diào)節(jié)pH值為7.6;再向所述的混合溶液D中加入牛血清白蛋白、戊二醛水溶液，得到混合溶液E，靜置保存3小時(shí)；所述的戊二醛水溶液的濃度為25%;向所述的混合溶液E中加入甘氨酸，得到混合溶液F，在4'C的條件下放置4小時(shí)，用硼氫化鈉調(diào)節(jié)其pH值為7.6;向調(diào)節(jié)pH值后的混合溶液F中加入丙酮，在4'C的條件下靜置30分鐘，得到沉淀物F;所述的調(diào)節(jié)pH值后的混合溶液F與丙酮的體積比為1:2;所述的丙酮的溫度為-2(TC。將所述的沉淀物F進(jìn)行冷凍干燥處理，得到修飾過的S0D復(fù)合酶凍干粉；所述的右旋糖苷、無水碳酸鈉緩沖液、SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸的重量比為0.4-0.8:4800-5200:18-22:4-7:23-26:48-52，優(yōu)選為0.5:5000:20:5:25:51;III.鵝肝提取物制備a.取鵝的肝臟進(jìn)行潔凈處理并絞成肝漿；將鵝宰殺后取出肝臟，并去除脂肪、結(jié)締組織和血，用生理鹽水清洗肝臟；清洗后立即將肝臟浸入磷酸鉀鹽緩沖液中保存；所述的磷酸緩沖液的濃度為0.lmol/L，pH值為7.6，溫度為4'C;所述的保存溫度為0-4'C;取出保存的肝臟磨成肝槳；b.向所述的肝漿中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到鵝肝超聲破碎物；所述的肝漿與磷酸緩沖液的體積比為0.8-1.2:1.8-2.5，優(yōu)選為1:2;所述的磷酸緩沖液的濃度為0.lmol/L，pH值為7.6，溫度為4。C;所述的處理溫度為4'C;C.將所述的鵝肝超聲破碎物；粗濾，得到鵝肝濾液；粗濾的方法可以是將所述的鵝肝超聲破碎物用三層醫(yī)用紗布過濾，得到鵝肝濾液；d.向所述的鵝肝濾液中加入硅藻土，攪拌均勻后，離心分離處理，收集鵝肝初級上清液和鵝肝初級沉淀物；所述的濾液與硅藻土的重量比為100:5;e.將所述的鵝肝初級上清液過濾，得到鵝肝精濾液；鵝肝精濾液瞬間噴霧干燥，得到鵝肝粉末A;所述的過濾采用0.45lim的濾膜；f.將所述的鵝肝初級沉淀物中加入鹽酸溶液，攪拌加熱處理，得到水解液；所述的沉淀物與鹽酸溶液的重量比為0.8-1.2:3.5-4.5，優(yōu)選為1:4;所述的鹽酸溶液的濃度為6mmol/L;攪拌加熱的溫度為11(TC-12(TC，優(yōu)選為115°C，處理時(shí)間為24小時(shí)；攪拌加熱處理在水解罐中進(jìn)行；g.將所述的鵝肝水解液減壓蒸餾濃縮處理到原來體積的1/4,得到鵝肝一級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝一級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝二級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝二級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝三級濃縮液；再將鵝肝三級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝三級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝四級濃縮液；h.將所述的鵝肝四級蒸餾液進(jìn)行脫色、過濾處理，得到鵝肝脫色過濾液；具體的操作為將所述的鵝肝四級蒸餾液中加入蒸餾水，用氨水調(diào)整pH值為3.5-4.0，加入活性碳、硅土，進(jìn)行脫色反應(yīng)得到鵝肝脫色液；將鵝肝脫色液過濾后得到鵝肝脫色過濾液；所述的四級蒸餾液與蒸餾水的體積比為1:2;所述的活性炭與調(diào)整pH值后的四級蒸餾液-蒸餾水混合液的重量比為1:5，所述的硅土與調(diào)整pH值后的四級蒸餾液-蒸餾水混合液的重量比為1:20;所述的脫色反應(yīng)溫度為90'C，反應(yīng)時(shí)間為l小時(shí)；i.將所述的鵝肝脫色過濾液減壓蒸餾、噴霧干燥，得到鵝肝粉末B;j.合并所述的鵝肝粉末A和鵝肝粉末B，混合后粉碎，得到鵝肝提取物備用；IV.小麥胚芽提取物制備a.將小麥胚芽進(jìn)行潔凈處理并磨漿，得到小麥胚芽漿；具體的操作為將新鮮的小麥胚芽用鹽水洗滌干凈后，用紗布包裹，并甩干多余水分；向小麥胚芽中加入堿液磨漿，得到小麥胚芽漿；所述的小麥胚芽與堿液的重量比為2:1;所述的堿液的pH值為8.0;b.向所述的小麥胚芽漿中加入堿液進(jìn)行提取處理，得到小麥胚芽提取液；所述的小麥胚芽漿與堿液的體積比為0.8-1.2:6.5-7.5，優(yōu)選為1:7;所述的堿液的pH值為8.0;所述的提取處理的在溫度25'C條件下進(jìn)行，處理時(shí)間為8h;c.將所述的小麥胚芽提取液進(jìn)行離心處理，分別收集小麥胚芽一次沉淀物和小麥胚芽一次上清液；離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘；d.將所述的小麥胚芽一次上清液過濾、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末A;所述的過濾采用0.45ym濾膜；e.將所述的小麥胚芽一次沉淀物烘干、粉碎，得到小麥胚芽粉碎物；所述的烘干溫度為115'C，時(shí)間為30分鐘；所述沉淀物的在容器上鋪成厚度為lcm的薄層進(jìn)行烘干；f.向所述的小麥胚芽粉碎物中加入乙醇水溶液，微波萃取處理，得到小麥胚芽萃取液；所述的小麥胚芽粉碎物與乙醇水溶液的重量比為5.5-6.5:0.8-1.2，優(yōu)選為6:1;所述的乙醇水溶液的濃度為50%;所述的微波萃取處理的方式是將所述的小麥胚芽粉碎物與乙醇水溶液的混合物微波萃取20秒后，取出微波萃取設(shè)備冷卻至室溫，再重新放入微波萃取設(shè)備萃取，直到累計(jì)微波萃取時(shí)間至2分鐘，得到小麥胚芽萃取液；g.將所述的小麥胚芽萃取液進(jìn)行離心處理，收集小麥胚芽二次上清液；在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpra，時(shí)間為25分鐘；h.將所述的小麥胚芽二次上清液過濾，得到小麥胚芽濾液所述的過濾采用0.45iim濾膜；i.將所述的小麥胚芽濾液進(jìn)行濃縮、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末B;j.將所述的小麥胚芽粉末A和小麥胚芽粉末B混合、過篩，得到小麥胚芽提取物，備用；所述的過篩采用20目篩子；V.紅花提取物的制備a.將紅花冰凍、粉碎、過篩，得到紅花粉末；所述的紅花為干燥的紅花；所述的冰凍溫度為一2(TC，冰凍時(shí)間為12小時(shí)；所述的粉碎、過篩均在無菌條件下進(jìn)行，操作溫度為0t:—4t:;所述的過篩采用40目篩子；b.向所述的紅花粉末中加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，分別收集紅花一次沉淀物和紅花一次上清液；所述的紅花粉末與蒸餾水的重量比為0.8-1.2:12.5-13.5，優(yōu)選為1:13;所述的蒸餾水的溫度為IO(TC;所述的蒸煮在密封容器中進(jìn)行，蒸煮的時(shí)間為15分鐘；所述的降溫的方法為自然放涼；在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；c.向所述的紅花一次沉淀物加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，得到紅花二次上清液；所述的紅花一次沉淀物沉淀物與蒸餾水的重量比為1-5;所述的蒸餾水的溫度為IOO'C;所述的蒸煮在密封容器中進(jìn)行，蒸煮的時(shí)間為10分鐘；所述的降溫的方法為自然放涼；在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；d.合并所述的紅花一次上清液和紅花二次上清液，過濾后得到紅花濾液；所述的過濾采用O.45"m微孔濾膜；e.將所述的紅花濾液濃縮為原來體積的1/4，然后噴霧干燥，得到紅花提取物備用；VI.苦蕎提取物制備a.將苦喬麩皮粉碎，過篩，得到麩皮粉；所述的過篩采用40目篩子；b.向所述的麩皮粉中加入乙醇溶液，進(jìn)行浸泡，得到苦蕎浸泡液；所述的麩皮粉與乙醇水溶液的重量比為0.8-1.2:45-55，優(yōu)選為1:50;所述的乙醇水溶液的濃度為85%;所述的浸泡時(shí)間為8小時(shí)；c.將所述的苦蕎浸泡液進(jìn)行微波萃取處理，得到苦蕎萃取液；所述的微波萃取處理的方式是將所述的苦蕎浸泡液微波萃取20秒后，取出微波萃取設(shè)備冷卻至室溫，再重新放入微波萃取設(shè)備萃取，直到累計(jì)微波萃取時(shí)間至2分鐘，得到苦蕎萃取液；所述的萃取液的溫度為80。C-IO(TC，優(yōu)選為9(TC;d.將所述的苦蕎萃取液離心處理，收集苦蕎上清液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘；e.將所述的苦蕎上清液過濾，得到苦蕎濾液；所述的過濾采用O.45um微孔濾膜；f.將所述的苦蕎濾液減壓濃縮處理，得到苦蕎浸膏；將所述的苦蕎浸膏干燥、粉碎、過篩，得到苦蕎提取物，備用；所述的干燥溫度為7(TC;所述的過濾采用20目篩子；VH.輔酶Q10制備a.取豬的心臟潔凈處理并絞成心漿液；取豬的心臟，清洗、冷凍、切成豬心切片；向所述的豬心切片中加入焦性沒食子酸，絞成心槳液；所述的冷凍時(shí)間為12小時(shí)；所述的豬心切片與焦性沒食子酸的重量比為100:7;b.向所述的心漿液中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到豬心超聲破碎液；所述的心漿液與磷酸鉀鹽緩沖液的重量比為1.5-2.5:0.8-1.2，優(yōu)選為2:1，所述的磷酸鉀鹽緩沖液的濃度為0.lmol/L，pH值為7.6，溫度為4'C;超聲破碎處理時(shí)間為45分鐘；c.向所述的豬心超聲破碎液中加入氫氧化鈉-乙醇溶液，進(jìn)行皂化處理，得豬心皂化液；所述的豬心超聲破碎液與氫氧化鈉-乙醇溶液的體積比為0.8-1.2:1.5-2.5，優(yōu)選為1:2;所述的氫氧化鈉-乙醇溶液中，氫氧化鈉與無水乙醇的重量比為0.8-1.2:8-12，優(yōu)選為l:10;皂化處理的方式為將所述的豬心超聲破碎液、氫氧化鈉-乙醇溶液混合液在溫度為9(TC的條件下加熱回流25分鐘，再冷卻至室溫，得到豬心皂^;液；所述的冷卻方法為將裝有加熱回流處理的豬心超聲破碎液、氫氧化鈉-乙醇溶液混合液的容器放入0'C-4'C的氯化鈉溶液中，直至冷卻到室溫；d.向所述的豬心皂化液中加乙醚、水，過濾處理，得到豬心一級濾液和豬心一級沉淀物；向所述的豬心一級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心二級濾液和豬心二級沉淀物；向所述的豬心二級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心三級濾液和豬心三級沉淀物；所述的豬心皂化液、乙醚、水的體積比為8-12:0.8-1.2:0.8-1.2，優(yōu)選為10:1:1;所述的豬心一級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5，優(yōu)選為l:1;所述的豬心二級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5，優(yōu)選為l:1;所述的豬心三級沉淀物與乙醚的重量比為1:1;在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘；所述的過濾采用紗布；e.合并所述的豬心一級濾液、豬心二級濾液，和豬心三級濾液，得到豬心總濾液；向所述的豬心總濾液中加入蒸餾水，萃取處理，直到得到的豬心水洗萃取液為中性；f.將所述的豬心水洗萃取液過濾，再濃縮處理，得到豬心濃縮液；所述的豬心水洗萃取液與豬心濃縮液的體積比為0.8-1.2:8-12，優(yōu)選為10:1;所述的過濾采用O.45um微孔濾膜；所述的濃縮處理在減壓濃縮罐中進(jìn)行，濃縮處理的溫度為40。C-50°C，優(yōu)選為45。C;g.將所述的豬心濃縮液進(jìn)行層析處理，得到豬心輔酶Q10洗脫液；所述的層析方法為將所述的豬心濃縮液引入硅膠柱中，待豬心濃縮液進(jìn)入硅膠后，先用石油醚洗去雜質(zhì)，再用乙醚-石油醚混合液洗脫，分段收集黃色部分的洗脫液，即為豬心輔酶Q10洗脫液；將豬心輔酶Q10洗脫液存于棕色瓶中；所述的乙醚-石油醚混合液中，乙醚和石油醚的體積比為1:1;i.將所述的豬心輔酶Q10洗脫液進(jìn)行濃縮、溶解、過濾、結(jié)晶，得到輔酶QIO，備用；所述的操作方法為將所述的豬心輔酶Q10洗脫液減壓濃縮，得到豬心稠狀物；向所述的豬心稠狀物中加入無水乙醇，微熱溶解，趁熱過濾，得到豬心輔酶Q10濾液；將所述的豬心輔酶Q10濾液放置在4'C環(huán)境中15-18小時(shí)后，得到黃色晶體，即為輔酶QIO，備用；所述的豬心稠狀物與無水乙醇的重量比為20:1;VDI.白藜戸醇制備a.將葡萄皮粉碎、過篩，得到葡萄皮粉末；所述的過篩采用40目篩子；b.向所述的葡萄皮粉末加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮一次萃取液；所述的葡萄皮粉末與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45，優(yōu)選為1:40;所述的萃取處理采用進(jìn)行微波萃取；c.將所述的葡萄皮一次萃取液離心處理，收集葡萄皮一次上清液和葡萄皮一次沉淀物；在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm,時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；d.向所述的葡萄皮一次沉淀物中加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮二次萃取液；所述的葡萄皮一次沉淀物與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45，優(yōu)選為l:40;所述的萃取處理采用進(jìn)行微波萃??；e.將所述的葡萄皮二次萃取液離心處理，得到葡萄皮二次上清液；在所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；f.合并所述的葡萄皮一次上清液和葡萄皮二次上清液，過濾后得到葡萄皮濾液；所述的過濾采用O.45ym微孔濾膜；g.將所述的葡萄皮濾液，濃縮處理，得到葡萄皮濃縮固體；將所述的葡萄皮濃縮固體用石油醚洗滌，得到洗滌后的葡萄皮濃縮固體；所述的葡萄皮濃縮固體與石油醚的重量比為1:2;h.將所述的葡萄皮濃縮固體溶解后，進(jìn)行層析處理，得到白藜蘆醇洗脫液；用于溶解所述的固體的液體可以是乙酸乙酯；所述的層析方法為將溶于乙酸乙酯的固體引入硅膠柱，再用洗脫劑甲醇-水混合液洗脫，得到白藜蘆醇洗脫液；所述的甲醇-水溶液中，甲醇與水的體積比為4:1;所述的層析處理在中壓下進(jìn)行；i.將所述的白藜蘆醇洗脫液濃縮、噴霧干燥，得到白藜蘆醇，備用；所述的濃縮采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮；將所述的修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、輔酶QIO、苦蕎提取物、白藜蘆醇按照上述重量配比進(jìn)行混合，混合后均勻分裝膠囊，即得SOD復(fù)合膠囊成品。本實(shí)施例中，提供一種優(yōu)選的SOD復(fù)合膠囊的工藝制備方法，其特征在于所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉10-50輔酶QIO10-75a-硫辛酸75-120鵝肝提取物75-150小麥胚芽提取物75-150紅花提取物75-150苦蕎提取物200-500透明質(zhì)酸鈉0.5-1.5小麥面筋微粉50-150羧甲基纖維素10-50硬脂酸鎂10-50微粉硅膠10-50;所述的膠囊的制備方法為A.SOD腸溶顆粒制備a.初次包埋按上述配比將修飾SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、透明質(zhì)酸鈉、小麥面筋凍干粉混合后，粉碎處理，得到粉碎顆粒；所述的粉碎處理采用低溫液氮制冷氣流粉碎機(jī)，可以是QYF-100低溫液氮制冷氣流粉碎機(jī)；b.制粒將所述的粉碎顆粒進(jìn)行制粒，得到顆粒；所述的造粒方法為干法造粒，可以選用GK80干式制粒機(jī)，制粒溫度為4(TC;c.二次包埋先后用水溶性絲素蛋白的飽和溶液和殼聚糖溶液給所述的顆粒進(jìn)行噴霧處理，在所述的顆粒外表面形成保護(hù)膜，得到帶膜顆粒；所述的水溶性絲素蛋白的分子量為50000D;所述的水溶性絲素蛋白的飽和溶液中含有占溶液體積30%的乙醇，和占溶液重量40%的氯化鈣；所述的殼聚糖溶液的濃度為1%，該溶液用0.6%乙酸配制；所述的噴霧處理的工藝條件為溫度為4(TC，進(jìn)風(fēng)量1.4mV分鐘，空氣壓力0.4MPa，噴速為15ml/分鐘；d.包衣用聚丙烯酸樹脂將所述的帶膜顆粒噴霧處理，在其外表面形成包衣，得到SOD腸溶顆粒；所述的包衣液體的制造方法為將聚丙烯酸樹脂溶于中、加入鄰苯二乙酯和聚山梨酯一80;所述的聚丙烯酸樹脂、無水乙醇、鄰苯二甲酸二乙酯、聚山梨酯一80的重量比為9:88:1.5:1.5;所述的聚丙烯酸樹脂的型號為II號；所述的噴霧處理的工藝條件為溫度為40'C，噴速為30ml/rain，空氣壓力為0.25MPa，噴漿速度15ml/min;將所述的SOD腸溶顆粒在-40'C真空冷凍干燥。B.余料制粒按照上述配比將所述的鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、輔酶QIO、苦蕎提取物、白藜蘆醇、a-硫辛酸分別過篩、混合均勻、進(jìn)行造粒、整粒，得到余料混合物；所述的過篩采用120目篩；所述的混合采用等量遞加混合法，混合的設(shè)備可以是三維混料機(jī)；所述的制粒溫度為4(TC，制粒的設(shè)備可以是GK80干式制粒機(jī)；C.膠囊填充物制備按上述配比將所述的SOD腸溶顆粒中分別加入微粉硅膠、羧甲基纖維素、硬脂酸鎂、所述的余料混合物，混勻處理，得到膠囊填充物；所述的混勻方法為等量遞加法；所述的混勻處理的設(shè)備可以是三維混料機(jī)；D.成品將所述的膠囊填充物填充在胃溶膠囊殼中，每個(gè)膠囊裝O.3g膠囊填充物；裝瓶、密封后即得成品，低溫干燥保存。本實(shí)施例中所述的各種操作設(shè)備均為常規(guī)設(shè)備，可以在市場購買得到；所述的勻漿機(jī)，可以是美國ProSciencetfic公司生產(chǎn)的ProSciencetfic400D型勻漿器；所述的磨漿機(jī)，可以是青島即墨市超微粉碎機(jī)廠生產(chǎn)的FMJ系列不銹鋼雙盤臥式磨漿機(jī)；所述的離心機(jī)可以是上海安亭科學(xué)醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)的GL-20B4000r/min高速冷凍離心機(jī)；所述的中空纖維超濾機(jī)可以是德國Sartorius公司生產(chǎn)的sartoriusVivaflow200型切向流超濾器；所述的微波萃取處理，可以使用美國CEM公司生產(chǎn)的MARS2X微波爐(簡稱為MX爐)，溫度可調(diào)；所述的真空冷凍干燥，可以使用北京四環(huán)科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的LGJ-10C型凍干機(jī)；所述的減壓蒸餾，可以使用環(huán)球(香港)科技有限公司生產(chǎn)的AD1160型自動(dòng)減壓蒸餾儀；所述的減壓濃縮，可以使用溫州市利宏輕工機(jī)械有限公司生產(chǎn)的ZN-50型減壓濃縮罐；所述的真空旋轉(zhuǎn)薄膜濃縮器，可以是沈陽靚馬生物制藥設(shè)備有限公司生產(chǎn)的XB系列真空旋轉(zhuǎn)薄膜濃縮器；所述的低溫氣流粉碎，可以使用常州市百靈干燥設(shè)備有限公司生產(chǎn)的DFZ型低溫粉碎機(jī)；所述的冷凍干燥，可以使用北京博醫(yī)康試驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn)的FD-1A-50型冷凍干燥機(jī)；所述的水解罐，可以是寶雞寶冶鈦鎳制造有限責(zé)任公司生產(chǎn)的鈦制水解罐；所述的減壓蒸餾，可以使用環(huán)球(香港)科技有限公司生產(chǎn)的AD1160型自動(dòng)減壓蒸餾儀；所述的噴霧干燥，可以使用上海世遠(yuǎn)生物設(shè)備工程有限公司生產(chǎn)的SY-6000小型噴霧干燥儀；所述超聲波洗滌，可以使用寧波海曙科生超聲設(shè)備有限公司生產(chǎn)的KS-80D超聲波清洗機(jī)；所述的三維混料機(jī)，可以是武漢粉體設(shè)備制造廠生產(chǎn)的XH-1型三維混料機(jī)。實(shí)施例6:本實(shí)施例在實(shí)施例5基礎(chǔ)上說明所述的SOD復(fù)合酶凍干粉的修飾，所用原料(組分)的配比和品質(zhì)與實(shí)施例5相同，所用的設(shè)備與實(shí)施例5相同。SOD復(fù)合酶凍干粉的修飾的步驟為a.采用高碘酸鈉活化，得到活化的右旋糖苷具體的操作方法為向右旋糖苷溶液中加入高碘酸鈉溶液，得到混合溶液A，4'C避光保存18-24小時(shí)，優(yōu)選為22小時(shí)；然后向所述的混合溶液A中加入亞硫酸氫鈉溶液，還原過量的高碘酸鈉，得到混合溶液B;所述的右旋糖苷溶液的由0.5重量份的右旋糖苷溶解于5重量份的蒸餾水配制而成，所述的蒸餾水的溫度為4°C;所述的高碘酸鈉溶液的重量百分比濃度為12%;所述的右旋糖苷溶液與高碘酸鈉溶液的體積比為10:l;，所述的亞硫酸氫鈉溶液的重量百分比濃度為5%，溫度為4。C;再將混合溶液B進(jìn)行透析處理18-22小時(shí)，得到透析液B;再向透析液B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到沉淀物B;所述的透析液B與所述的丙酮的體積比為1:2，所述的丙酮的溫度為-2(TC;再向所述的沉淀物B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到二次沉淀物B;所述的沉淀物B與所述的丙酮的重量比為1:2，所述的丙酮的溫度為-20°C;再向所述的二次沉淀物B中加入丙酮，進(jìn)行離心處理，得到三次沉淀物B;所述二次的沉淀物B與所述的丙酮的重量比為1:2，所述的丙酮的溫度為-20。C;再將所述的三次沉淀物B進(jìn)行冷凍干燥處理，即得到活化的右旋糖苷；b.將所述的活化的右旋糖苷溶解于無水碳酸鈉緩沖液，得到混合溶液C;向所述的混合溶液C中加入所述的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉，在4'C的條件下避光保存17小時(shí)，得到混合溶液D，再用硼酸調(diào)節(jié)pH值為7.6;再向所述的混合溶液D中加入牛血清白蛋白、戊二醛水溶液，得到混合溶液E，靜置保存3小時(shí)；所述的戊二醛水溶液的濃度為25%;向所述的混合溶液E中加入甘氨酸，得到混合溶液F，在4'C的條件下放置4小時(shí)，用硼氫化鈉調(diào)節(jié)其pH值為7.6;向調(diào)節(jié)pH值后的混合溶液F中加入丙酮，在4。C的條件下靜置30分鐘，得到沉淀物F;所述的調(diào)節(jié)pH值后的混合溶液F與丙酮的體積比為l:2;所述的丙酮的溫度為-2(TC。將所述的沉淀物F進(jìn)行冷凍干燥處理，得到修飾過的S0D復(fù)合酶凍干粉；所述的右旋糖苷、無水碳酸鈉緩沖液、SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸的重量比為0.4-0.8:4800-5200:18-22:4-7:23-26:48-52，優(yōu)選為0.5:5000:20:5:25:51;本實(shí)施例采用右旋糖苷修飾S0D復(fù)合酶凍干粉，可以延長其半衰期，增強(qiáng)其穩(wěn)定性，利于長期保存。實(shí)施例7:本實(shí)施例在實(shí)施例5基礎(chǔ)上說明所述的膠囊的制備方法，所用原料(組分)的配比和品質(zhì)與實(shí)施例5相同，所用的設(shè)備與實(shí)施例5相同。所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉10-50白藜戸醇10-50輔酶QIO10-75a-硫辛酸75-120鵝肝提取物75-150小麥胚芽提取物75-150紅花提取物75-150苦蕎提取物200-500透明質(zhì)酸鈉0.5-1.5小麥面筋微粉50-150羧甲基纖維素10-50硬脂酸鎂10-50微粉硅膠10-50;所述的膠囊的制備方法為A.SOD腸溶顆粒制備a.初次包埋按上述配比將修飾SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、透明質(zhì)酸鈉、小麥面筋凍干粉混合后，粉碎處理，得到粉碎顆粒；所述的粉碎處理采用低溫液氮制冷氣流粉碎機(jī)，可以是QYF-100低溫液氮制冷氣流粉碎機(jī)；b.制粒將所述的粉碎顆粒進(jìn)行制粒，得到顆粒；所述的造粒方法為干法造粒，可以選用GK80干式制粒機(jī)，制粒溫度為40'C;C.二次包埋先后用水溶性絲素蛋白的飽和溶液和殼聚糖溶液給所述的顆粒進(jìn)行噴霧處理，在所述的顆粒外表面形成保護(hù)膜，得到帶膜顆粒；所述的水溶性絲素蛋白的分子量為50000D;所述的水溶性絲素蛋白的飽和溶液中含有占溶液體積30%的乙醇，和占溶液重量400%的氯化鈣；所述的殼聚糖溶液的濃度為1%，該溶液用0.6%乙酸配制；所述的噴霧處理的工藝條件為溫度為4(TC，進(jìn)風(fēng)量1.4m7分鐘，空氣壓力0.4MPa，噴速為15ml/分鐘；d.包衣用聚丙烯酸樹脂將所述的帶膜顆粒噴霧處理，在其外表面形成包衣，得到SOD腸溶顆粒；所述的包衣液體的制造方法為將聚丙烯酸樹脂溶于中、加入鄰苯二甲酸二乙酯和聚山梨酯一80;所述的聚丙烯酸樹脂、無水乙醇、鄰苯二甲酸二乙酯、聚山梨酯一80的重量比為9:88:1.5:1.5;所述的聚丙烯酸樹脂的型號為II號；所述的噴霧處理的工藝條件為溫度為40'C，噴速為30ml/min，空氣壓力為0.25MPa，噴槳速度15ml/min;將所述的SOD腸溶顆粒在-4(TC真空冷凍干燥。B.余料制粒按照上述配比將所述的鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、輔酶QIO、苦蕎提取物、白藜蘆醇、ci-硫辛酸分別過篩、混合均勻、進(jìn)行造粒、整粒，得到余料混合物；所述的過篩采用120目篩；所述的混合采用等量遞加混合法，混合的設(shè)備可以是三維混料機(jī)；所述的制粒溫度為40'C，制粒的設(shè)備可以是GK80干式制粒機(jī)；C.膠囊填充物制備按上述配比將所述的SOD腸溶顆粒中分別加入微粉硅膠、羧甲基纖維素、硬脂酸鎂、所述的余料混合物，混勻處理，得到膠囊填充物；所述的混勻方法為等量遞加法；所述的混勻處理的設(shè)備可以是三維混料機(jī)；D.成品將所述的膠囊填充物填充在胃溶膠囊殼中，每個(gè)膠囊裝O.3g膠囊填充物；裝瓶、密封后即得成品，低溫干燥保存。本實(shí)施例膠囊制備的整個(gè)工藝過程全部采用低溫、中性多孔微粒載體吸附、低溫噴霧涂膜包衣、真空冷凍干燥法制備。沒有用對SOD復(fù)合酶酶活性有損失的粘合劑、增溶劑、有機(jī)溶劑，有利于保持其酶活性。為了保證不怕酸堿的穩(wěn)定配伍藥物在人體的胃腸內(nèi)迅速、充分吸收，同時(shí)又不破壞怕酸堿的SOD復(fù)合酶不穩(wěn)定酶的活性讓其在直腸吸收，本實(shí)施例膠囊制備的整個(gè)工藝過程采用對SOD復(fù)合酶進(jìn)行分子修飾、低溫氣流粉碎，流化床中性多孔微粒載體吸附、低溫噴霧涂膜包衣、真空冷凍干燥法制備成SOD復(fù)合酶顆粒，對其他配伍料單獨(dú)制粒，然后與其他配伍料按處方量快速混合，采用胃溶膠囊殼填裝；工藝條件穩(wěn)定，適于工業(yè)化生產(chǎn)。實(shí)施例8:本實(shí)施例在實(shí)施例5基礎(chǔ)上說明所述的超氧化物歧化酶的制備，所用原料(組分)的配比和品質(zhì)與實(shí)施例4相同，所用的儀器設(shè)備與實(shí)施例5相同。I、超氧化物歧化酶的制備A、按需要量取新鮮蝌蚪進(jìn)行潔凈處理然后進(jìn)行滅菌處理;具體的操作為先進(jìn)行清洗取活的蝌蚪洗凈，浸泡24小時(shí)后過濾水分；再進(jìn)行消毒稱消毒處理的蝌蚪新鮮濕重30-160重量份，優(yōu)選為90重量份，在預(yù)冷的4°C用0.lmol/LpH7.6的磷酸鉀鹽緩超聲波洗滌滅菌10分鐘；過濾水分；B、將滅菌處理后的蝌蚪混入海藻糖、維生素E后于一2(TC冷凍處理所述蝌蚪、海藻糖、維生素E的重量比是1:0.025:0.0001;c、將冷凍處理的蝌蚪破碎，加入磷酸鉀緩沖液中進(jìn)行勻漿處理，生成蝌蚪勻漿物，所述蝌蚪與磷酸鉀緩沖液的重量比是1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是0.lmol/L、pH值7.6所述的勻漿處理溫度4。C;處理時(shí)間1分鐘；D、將所述的蝌蚪勻漿物用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，進(jìn)行超聲破碎處理，生成蝌鈄超聲破碎物，將其在0'C—4'C靜置6—24小時(shí)，優(yōu)選為15小時(shí)；所述的超聲破碎的時(shí)間為45分鐘，溫度為4。C;E、向所述蝌蚪超聲破碎物中加入鮮雞蛋、無水乙醇，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.6;在20。C-30。C條件下攪拌20—40分鐘，靜置30—60分鐘，得到蝌鈄酶解液，最佳溫度為25°C，最佳攪拌時(shí)間為30分鐘，最佳靜置時(shí)間為45分鐘；再用4mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)蝌蚪酶解液的pH值為7.6;所述蝌蚪超聲破碎物、鮮雞蛋、無水乙醇的體積比是9-12:1.5-2.5:4.5-7.0，優(yōu)選為10:2:5;無水乙醇溫度是一10'C—-20°C;所述的攪拌轉(zhuǎn)速為150-200rpm;F、對所述的蝌蚪酶解液進(jìn)行多級沉淀分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；第一級處理包括在所述的蝌蚪酶解液中加入該液體重量30%的硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解一級上清液第二級處理包括在蝌蚪酶解一級上清液中加入該液體重量40%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解二級上清液；第三級處理包括在蝌蚪酶解二級上清液中加入該液體重量50%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解三級上清液；第四級處理包括在蝌蚪酶解三級上清液中加入該液體重量60%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解四級上清液；第五級處理包括在蝌蚪酶解四級上清液中加入該液體重量70%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000卬m，時(shí)間為20分鐘，溫度為25。C;G、將所述的蝌蚪粗酶上清液在95。C一100。C的水浴鍋內(nèi)快速升溫到65°C一68i:，移出水浴鍋靜置降溫到56'C—58。C,再移入水浴鍋快速升溫到65。C一68。C，移出水浴鍋靜置保溫5—15分鐘，優(yōu)選為10分鐘，快速冷卻到15'C，然后進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪去雜蛋白上清液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為3000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為15。C;H、將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌鈄一級SOD濃縮液；具體的操作方法為將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液冷卻到4。C，然后在-5X:以下的操作溫度下，以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，濃縮液為原液體積的10%20%;濃縮液進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，迅速冷卻到4'C，獲得蝌鈄一級S0D濃縮液；所述的離心處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；I、將蝌蚪一級S0D濃縮液；加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蚪二級SOD濃縮液；所述蝌蚪一級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:4.5-5.5，優(yōu)選為1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是2.5ramol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；J、將蝌蚪二級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C,然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪三級SOD濃縮液；所述蝌蚪二級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，優(yōu)選為l:3;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在_5卩以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；K、將蝌蚪三級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蚪四級SOD濃縮液；所述蝌蚪三級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，優(yōu)選為l:2;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4。C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5。C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；L、將蝌蚪四級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C,獲得蝌蚪五級SOD濃縮液；所述蝌蟲斗四級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:0.8-1.2,優(yōu)選為l:1，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是75mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpra，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；M、將蝌蚪五級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蟲斗六級SOD濃縮液；所述蝌蚪五級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，優(yōu)選為l:2，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4'C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；N、將蝌蚪六級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過初次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C，然后該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行再次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蟲斗七級SOD濃縮液；所述蝌蚪六級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，優(yōu)選為l:3,所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度為4。C;所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5。C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的再次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm,時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；0、向所述的蝌蚪七級SOD濃縮液中，加入2.5-3.5倍體積的，優(yōu)選為3倍體積比的、在0—4'C下預(yù)冷過的去離子水，初次離心處理得上清液，將該上清液迅速冷卻到4。C;然后將該上清液中加入0.8-1.2倍體積，優(yōu)選為等體積的、在0—4。C下預(yù)冷過的去離子水，第二次離心處理得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C;然后將第二次離心處理得到的上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行第三次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4'C，獲得蝌蚪除鹽SOD濃縮液；所述的超濾濃縮處理的具體操作方法為在-5'C以下的操作溫度下，將初次離心分離得到的上清液以10L/h30L/h的流速通過截留分子質(zhì)量為10000的中空纖維超濾器，得濃縮液，所述的濃縮液為原液體積的10%20%;所述的初次離心分離處理和第二次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為25分鐘，溫度為室溫；所述的第三次離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為20分鐘，溫度為室溫；所述的冷卻處理在冰箱或冰庫中進(jìn)行；P、分子蒸餾將所述的蝌蚪除鹽SOD濃縮液用真空旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器進(jìn)行真空濃縮；Q、將真空濃縮處理的蝌蚪除鹽S0D濃縮液在一2(TC進(jìn)行凍結(jié)；冷凍干燥得到蝌蚪SOD初級凍干粉；R、將所述的蝌蚪SOD初級凍干粉中加入預(yù)冷到0—4'C重蒸水，攪拌均勻后，一4'C的操作環(huán)境中離心處理，除去不溶物，收集上清液，將該上清液減壓濃縮后放入一20。C進(jìn)行凍結(jié)；再進(jìn)行真空冷凍干燥，得到蝌鈄SOD復(fù)合酶凍干塊；所述的蝌蚪SOD初級凍干粉與重蒸水的重量比為1:3;所述的離心分離處理中，離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為6000rpm,時(shí)間為20-30分鐘，優(yōu)選為25分鐘；S、將所述的蝌蚪SOD復(fù)合酶凍干塊進(jìn)行低溫氣流粉碎后，得到SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉，即為超氧化物歧化酶一20。C儲藏備用；本實(shí)施例選用抗氧化能力很強(qiáng)的健康蝌蚪作為原料，避免了血液制品的交叉感染，也克服了植物S0D活性低、和人的同源性少，生理有效性差的弊端。所述的七級濃縮提取方法，極大提高了所述SOD復(fù)合酶蝌抖凍干粉的純度。權(quán)利要求1、一種SOD復(fù)合膠囊，其特征在于所述復(fù)合膠囊中含有超氧化物歧化酶制劑、白藜蘆醇、輔酶Q10、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜蘆醇10-50，輔酶Q1010-75，鵝肝提取物75-150，小麥胚芽提取物75-150，紅花提取物75-150，苦蕎提取物200-500；每百克所述的復(fù)合膠囊中含有40000-4000000活力單位的超氧化物歧化酶，該超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的S0D復(fù)合膠囊，其特征在于所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜^醇輔酶QIO鵝肝提取物小麥胚芽提取物紅花提取物苦蕎提取物每百克所述的復(fù)合膠囊中含有2000000活力單位的超氧化物歧化3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的S0D復(fù)合膠囊，其特征在于所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜蘆醇15，輔酶QIO15，鵝肝提取物18，小麥胚芽提取物80，紅花提取物80，苦蕎提取物95;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有2000000活力單位的超氧化物歧化酶。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的S0D復(fù)合膠囊，其特征在于所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為白藜蘆醇70，輔酶QIO75，鵝肝提取物150，小麥胚芽提取物150，紅花提取物150，苦蕎提取物150;每百克所述的復(fù)合膠囊中含有1000000活力單位的超氧化物歧化酶。5、一種SOD復(fù)合膠囊的制備方法，其特征在于所述復(fù)合膠囊中含有白藜蘆醇、輔酶QIO、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物，所述的膠囊中各個(gè)組分的重量比為，10—50:10—75:75—150:75—150:75—150-200—500,每百克所述復(fù)合膠囊中含有400004000000活力單位的超氧化物歧化酶，制備步驟如下I、超氧化物歧化酶的制備-A、按需要量取新鮮蝌蚪進(jìn)行潔凈處理然后進(jìn)行滅菌處理；B、將滅菌處理后的蝌蚪混入海藻糖、維生素E后于一20'C冷凍處理；所述蝌蚪、海藻糖、維生素E的重量比是1:0.025:0.0001;C、將冷凍處理的蝌蚪破碎，加入磷酸鉀緩沖液中進(jìn)行勻漿處理，生成蝌蚪勻漿物，所述蝌蚪與磷酸鉀緩沖液的重量比是1:5;所述磷酸鉀緩沖液的濃度是O.lmol/L、pH值7.6;D、將所述的蝌蚪勻漿物用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，進(jìn)行超聲破碎處理，生成蝌鈄超聲破碎物；在0。C—4X:靜置6—24小時(shí)；E、向所述蝌蚪超聲破碎物中加入鮮雞蛋、無水乙醇，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.6;在2(TC—3(TC條件下攪拌20—40分鐘，靜置30—60分鐘，得到蝌鈄酶解液；所述蝌鈄超聲破碎物、鮮雞蛋、無水乙醇的體積比是9-12:1.5-2.5:4.5-7.0;無水乙醇溫度是一l(TC一-20。C;F、對所述的蝌蚪酶解液進(jìn)行多級沉淀分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；第一級處理包括在所述的蝌蚪酶解液中加入該液體重量30%的硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解一級上清液；第二級處理包括在蝌鈄酶解一級上清液中加入該液體重量40%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解二級上清液；第三級處理包括在蝌蚪酶解二級上清液中加入該液體重量50。/^硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解三級上清液；第四級處理包括在蝌蚪酶解三級上清液中加入該液體重量60%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，收集上清液，即為蝌蚪酶解四級上清液；第五級處理包括在蝌蚪酶解四級上清液中加入該液體重量70%硫酸銨，沉淀處理，進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪粗酶上清液；G、將所述的蝌蚪粗酶上清液在95°C—IO(TC的水浴鍋內(nèi)快速升溫到65。C一68。C，移出水浴鍋靜置降溫到56°C—58°C，再移入水浴鍋快速升溫到65'C—68'C，移出水浴鍋靜置保溫5—15分鐘，快速冷卻到15°C，然后進(jìn)行離心分離處理，獲得蝌蚪去雜蛋白上清液；H、將所述的蝌蚪去雜蛋白上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪一級SOD濃縮液；I、將所述的蝌蚪一級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪二級SOD濃縮液；所述蝌蚪一級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:4.5-5.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是2.5mmol/L、pH值7.6;處理溫度0。C-4t;J、將所述的蝌蚪二級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪三級S0D濃縮液；所述蝌蚪二級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度0°C-4°C;K、將所述的蝌蚪三級S0D濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪四級S0D濃縮液；所述蝌蚪三級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是,0.8-1.2:1.5-2.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50mmol/L、pH值7.6;處理溫度0。C-4°C;L、將所述的蝌蚪四級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪五級SOD濃縮液；所述蝌鈄四級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:0.8-1.2，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是75隱ol/L、pH值7.6;處理溫度0°C-4°C;M、將所述的蝌蚪五級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪六級SOD濃縮液；所述蝌蚪五級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:1.5-2.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是50隱ol/L、pH值7.6;處理溫度(TC-4'C;N、將所述的蝌蚪六級SOD濃縮液加入磷酸鉀緩沖液中，經(jīng)過離心分離處理獲得上清液，對該上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，獲得蝌蚪七級SOD濃縮液；所述六級SOD濃縮液與磷酸鉀緩沖液的體積比是0.8-1.2:2.5-3.5，所述磷酸鉀緩沖液的濃度是25mmol/L、pH值7.6;處理溫度0°C-4°C;0、向所述的蝌蚪七級SOD濃縮液中，加入2.5-3.5倍體積的、在0—4。C下預(yù)冷過的去離子水，初次離心處理得上清液；然后將該上清液中加入0.8-1.2倍體積的、在0—4'C下預(yù)冷過的去離子水，第二次離心處理得上清液；然后將第二次離心處理得到的上清液進(jìn)行超濾濃縮處理，進(jìn)行第三次離心分離處理獲得上清液，將該上清液迅速冷卻到4°C，獲得蝌蚪除鹽SOD濃縮液；P、將所述的蝌蚪除鹽SOD濃縮液進(jìn)行真空濃縮；Q、將真空濃縮處理的蝌蚪除鹽S0D濃縮液在一2(TC進(jìn)行凍結(jié)；冷凍干燥，得到蝌蚪SOD初級凍干粉；R、向所述的蝌蚪SOD初級凍干粉中加入預(yù)冷到0—4t:的重蒸水，在一4r的操作環(huán)境中離心分離處理，收集上清液；將該上清液真空濃縮后放入一20'C進(jìn)行凍結(jié)，再進(jìn)行真空冷凍干燥、粉碎處理，得到SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉；II、SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉的修飾a.采用高碘酸鈉活化，得到活化的右旋糖苷；b.將所述的活化的右旋糖苷溶解于無水碳酸鈉緩沖液，加入所述的.SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸、丙酮，在4'C的條件下靜置30分鐘，得到沉淀物；將所述的沉淀物進(jìn)行冷凍真空干燥處理，得到修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉；所述的右旋糖苷、無水碳酸鈉緩沖液、SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、牛血清白蛋白、戊二醛水溶液、甘氨酸的重量比為0.4-0.8:4800-5200:18-22:4-7:23-26:48-52;in.鵝肝提取物制備a.取鵝的肝臟進(jìn)行潔凈處理并磨成肝漿；b.向所述的肝漿中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到鵝肝超聲破碎物；所述的肝漿與磷酸緩沖液的體積比為0.8-1.2:1.8-2.5;所述的磷酸緩沖液的濃度為0.lraol/L，pH值為7.6;c.將所述的鵝肝超聲破碎物進(jìn)行粗濾，得到鵝肝濾液；d.向所述的鵝肝濾液中加入硅藻土，攪拌均勻后，離心分離處理，收集鵝肝初級上清液和鵝肝初級沉淀物；e.將所述的鵝肝初級上清液過濾，得到鵝肝精濾液；鵝肝精濾液噴霧干燥，得到鵝肝粉末A;f.將所述的鵝肝初級沉淀物中加入鹽酸溶液，攪拌加熱處理，得到鵝肝水解液；所述的鵝肝沉淀物與鹽酸溶液的重量比為0.8-1.2:3.5-4.5;所述的鹽酸溶液的濃度為6mmol/L;g.將所述的鵝肝水解液減壓蒸餾濃縮處理到原來體積的1/4，得到鵝肝一級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝一級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝二級濃縮液；再將鵝肝一級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝二級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝三級濃縮液；再將鵝肝三級濃縮液中加入蒸餾水，減壓蒸餾濃縮處理，直到鵝肝三級濃縮液與蒸餾水總體積變?yōu)樵瓉淼?/4，得到鵝肝四級濃縮液；h.將所述的鵝肝四級蒸餾液進(jìn)行脫色、過濾處理，得到鵝肝脫色過濾液；i.將所述的鵝肝脫色過濾液減壓蒸餾、噴霧干燥，得到鵝肝粉末B;j.合并所述的鵝肝粉末A和鵝肝粉末B，混合后粉碎，得到鵝肝提取物備用；IV.小麥胚芽提取物制備a.將小麥胚芽進(jìn)行潔凈處理并磨漿，得到小麥胚芽槳；b.向所述的小麥胚芽漿中加入堿液進(jìn)行提取處理，得到小麥胚芽提取液；所述的小麥胚芽漿與堿液的體積比為0.8-1.2:6.5-7.5;所述的堿液的pH值8.0;c.將所述的小麥胚芽提取液進(jìn)行離心處理，分別收集小麥胚芽一次沉淀物和小麥胚芽一次上清液；d.將所述的小麥胚芽一次上清液過濾、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末A;e.將所述的小麥胚芽一次沉淀物烘干、粉碎，得到小麥胚芽粉碎物；f.向所述的小麥胚芽粉碎物中加入乙醇水溶液，微波萃取處理，得到小麥胚芽萃取液；所述的小麥胚芽粉碎物與乙醇水溶液的重量比為5.5-6.5:0.81.2;所述的乙醇水溶液的濃度為50%;g.將所述的小麥胚芽萃取液進(jìn)行離心處理，收集小麥胚芽二次上清液；'h.將所述的小麥胚芽二次上清液過濾，得到小麥胚芽濾液；i.將所述的小麥胚芽濾液進(jìn)行濃縮、噴霧干燥，得到小麥胚芽粉末B;j.將所述的小麥胚芽粉末A和小麥胚芽粉末B混合、過篩，得到小麥胚芽提取物，備用；V.紅花提取物的制備a.將紅花冰凍、粉碎、過篩，得到紅花粉末；b.向所述的紅花粉末中加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，分別收集紅花一次沉淀物和紅花一次上清液；所述的紅花粉末與蒸餾水的重量比為0.8-1.2:12.5-13.5;c.向所述的紅花一次沉淀物加入蒸餾水，蒸煮后降溫，再進(jìn)行離心處理，得到紅花二次上清液；d.合并所述的紅花一次上清液和紅花二次上清液，過濾后得到紅花濾液；e.將所述的紅花濾液濃縮為原來體積的1/4，然后噴霧干燥，得到紅花提取物備用；VI.苦蕎提取物制備a.將苦喬麩皮粉碎，過篩，得到麩皮粉；b.向所述的麩皮粉中加入乙醇溶液，進(jìn)行浸泡，得到苦蕎浸泡液；所述的麩皮粉與乙醇水溶液的重量比為0.8-1.2:45-55;所述的乙醇水溶液的濃度85%;c.將所述的苦蕎浸泡液進(jìn)行微波萃取處理，得到苦蕎萃取液；d.將所述的苦蕎萃取液離心處理，收集苦蕎上清液；e.將所述的苦蕎上清液過濾，得到苦蕎濾液；f.將所述的苦蕎濾液濃縮處理，得到苦蕎浸膏；將所述的苦蕎浸膏干燥、粉碎、過篩，得到苦蕎提取物，備用；W.輔酶Q10制備a.取豬的心臟潔凈處理并絞成心漿液；b.向所述的心漿液中加入磷酸鉀鹽緩沖液，超聲破碎處理，得到豬心超聲破碎液；所述的心漿液與磷酸鉀鹽緩沖液的重量比為1.5-2.5:0.8-1.2，所述的磷酸鉀鹽緩沖液的濃度為0.lmol/L，pH值為7.6，溫度為4"C;c.向所述的豬心超聲破碎液中加入氫氧化鈉-乙醇溶液，進(jìn)行皂化處理，得豬心皂化液；所述的豬心超聲破碎液與氫氧化鈉-乙醇溶液的體積比為0.8-1.2:1.5-2.5;所述的氫氧化鈉-乙醇溶液中，氫氧化鈉與無水乙醇的重量比為0.8-1.2:8-12;d.向所述的豬心皂化液中加乙醚、水，過濾處理，得到豬心一級濾液和豬心一級沉淀物；向所述的豬心一級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心二級濾液和豬心二級沉淀物；向所述的豬心二級沉淀物加入乙醚，過濾處理，得到豬心三級濾液和豬心三級沉淀物；所述的豬心皂化液、乙醚、水的體積比為8-12:0.8-1.2:0.8-1.2;所述的豬心一級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5;所述的豬心二級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0.5-1.5;所述的豬心三級沉淀物與乙醚的重量比為0.8-1.2:0,5-1.5;e.合并所述的豬心一級濾液、豬心二級濾液，和豬心三級濾液，得到豬心總濾液；向所述的豬心總濾液中加入蒸餾水，萃取處理，得到豬心水洗萃取液；f.將所述的豬心水洗萃取液過濾，再濃縮處理，得到豬心濃縮液；所述的豬心水洗萃取液與豬心濃縮液的體積比為0.8-1.2:8-12;g.將所述的豬心濃縮液進(jìn)行層析處理，得到豬心輔酶Q10洗脫液；i.將所述的豬心輔酶Q10洗脫液進(jìn)行濃縮、溶解、過濾、結(jié)晶，得到輔酶QIO，備用；Vffl.白藜戸醇制備a.將葡萄皮粉碎、過篩，得到葡萄皮粉末；b.向所述的葡萄皮粉末加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮一次萃取液；所述的葡萄皮粉末與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45;c.將所述的葡萄皮一次萃取液離心處理，收集葡萄皮一次上清液和葡萄皮一次沉淀物；d.向所述的葡萄皮一次沉淀物中加入甲醇，萃取處理，得到葡萄皮二次萃取液；所述的葡萄皮一次沉淀物與甲醇的重量比為0.8-1.2:35-45;e.將所述的葡萄皮二次萃取液離心處理，得到葡萄皮二次上清液;f.合并所述的葡萄皮一次上清液和葡萄皮二次上清液，過濾后得到葡萄皮濾液；g.將所述的葡萄皮濾液，濃縮處理，得到葡萄皮濃縮固體；h.將所述的葡萄皮濃縮固體溶解后，進(jìn)行層析處理，得到白藜蘆醇洗脫液；i.將所述的白藜蘆醇洗脫液濃縮、噴霧干燥，得到白藜蘆醇，備用；將所述的修飾過的SOD復(fù)合酶蝌蚪凍干粉、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、輔酶QIO、苦蕎提取物、白藜蘆醇按照上述重量配比進(jìn)行混合，混合后均勻分裝膠囊，即得SOD復(fù)合膠囊成品。全文摘要本發(fā)明涉及一種SOD復(fù)合膠囊及其制備方法，所述SOD復(fù)合膠囊中含有白藜蘆醇、輔酶Q10、鵝肝提取物、小麥胚芽提取物、紅花提取物、苦蕎提取物的重量比為10-50∶10-75∶75-150∶75-150∶200-500，每百克所述的復(fù)合膠囊中含有40000-4000000活力單位的超氧化物歧化酶，該超氧化物歧化酶是蝌蚪提取物。所述制備方法是將葡萄皮、豬心、鵝肝、小麥、紅花、苦蕎、蝌蚪分別進(jìn)行包括破碎、濃縮、離心分離、純化等步驟的處理，獲得各種原料的有效成分，再將蝌蚪提取物進(jìn)行多次包埋，再與其他各個(gè)組分進(jìn)行混合、制粒，即得成品。本發(fā)明具有抗氧化功能，可以緩解體力疲勞，增強(qiáng)人體免疫力。文檔編號A61K35/37GK101590223SQ20081011288公開日2009年12月2日申請日期2008年5月26日優(yōu)先權(quán)日2008年5月26日發(fā)明者劉安榮,董文婕申請人:劉安榮;董文婕