一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液及其制備方法；本發(fā)明以有益菌群發(fā)酵中草藥作為飼料添加劑來預(yù)防口蹄疫的一種方法。所述中草藥包含黃芪，黃芩，黃蓮，二花，赤芍，甘草，魚腥草，白頭翁，生地，半夏，柴胡，枇杷葉，連翹，大青葉，板藍(lán)根等。上述中草藥經(jīng)挑選、粉碎、浸泡、煎煮、發(fā)酵而制得預(yù)防口蹄疫的飼料添加劑，在發(fā)酵過程中使用有效益生菌種主要為布拉氏酵母菌，丁酸梭菌，膠質(zhì)紅假單胞菌，飼料類芽孢桿菌，蒼黃鏈霉菌等。本發(fā)明的中草藥活性發(fā)酵液具有預(yù)防口蹄疫兼具促生長、增強免疫力的功效，并具有易于使用，中草藥用量少，活菌含量高以及具有無殘留、無耐藥性等優(yōu)點。
【專利說明】
一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及到一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法及用途，特別是涉及一種利用有益生物菌群發(fā)酵植物中草藥制成的具有預(yù)防口蹄疫效果的高效活性發(fā)酵液的制備方法及用途。
【背景技術(shù)】
[0002]口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人畜共患的急性、熱性、高度接觸性傳染病。本病具有流行快、傳播快、發(fā)病急、危害大等流行病學(xué)特點，疫區(qū)發(fā)病率可達(dá)50%_100%，犢牛死亡率較高?，F(xiàn)今，在世界各地主要都還是采用疫苗或西藥洗滌二種方法防治牲畜口蹄疫。但是，疫苗種類有對應(yīng)性，并且疫苗產(chǎn)生免疫力遲緩，維持免疫力時間有限，使用成本高。而西藥洗滌治療是治標(biāo)不治本，對嚴(yán)重的流行性牲畜口蹄疫效果不好。而中藥可以抗畜禽口蹄疫已被臨床和實驗所證實，能抗畜禽口蹄疫的中草藥多屬于解表藥和清熱藥。中草藥可以通過發(fā)汗、解熱、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)咳祛痰平喘、抗炎、抗過敏、抗菌、抗病毒及促進(jìn)機體免疫功能(解表藥)和抗病原微生物、抗細(xì)菌毒素、解熱抗炎、促進(jìn)機體免疫功能及抗血凝、抗DIC、改善血液流變性、保肝利膽(清熱藥)等藥理作用達(dá)到防治口蹄疫的目的。現(xiàn)有防治口蹄疫的方法基本上都是將中草藥或直接加入飼料中或進(jìn)行煎取提取，但都存在有效成份利用率低，添加量高等缺點。直接利用益生菌群發(fā)酵中草藥，能破壞中草藥的細(xì)胞壁，大大提高中草藥的有效成份的利用率，并在發(fā)酵過程中產(chǎn)生多種促生長因子與益生菌，對畜禽的生長發(fā)育能夠有效改善肉質(zhì)，提高抗病力，增強免疫力的功效，并具有易于使用，中草藥用量少，活菌含量高以及具有無殘留、無耐藥性等優(yōu)點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供具有預(yù)防口蹄疫效果的中草藥活性發(fā)酵液及其制備方法。
[0004]本發(fā)明的另外一個目的提高中草藥的有效成份的利用率，減少中草藥的用量。
[0005]本發(fā)明的另一個目的提供本發(fā)明中草藥活性發(fā)酵液在預(yù)防口蹄疫的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明用于預(yù)防禽流感的中草藥活性發(fā)酵液是在大量調(diào)查及的基礎(chǔ)上，根據(jù)產(chǎn)品的設(shè)計功用要求對140多種中草藥進(jìn)行篩選，依據(jù)傳統(tǒng)的中藥的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理論，逐個篩選并對篩選出的中草藥有效成份、抑菌作用進(jìn)行提取、驗證，最終確定配方。再從500多種有益微生物中篩選出5種能夠共生共存的，能大大提高中草藥的有效成份的利用率，并在發(fā)酵過程中產(chǎn)生多種促生長因子的益生菌。
[0007]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成:黃芪2-6份，黃芩2-6份，黃蓮2-4份，二花3-7份，赤芍4_6份，甘草2_4份，魚腥草1-3份，白頭翁3_5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷葉4-8份，連翹2_6份，大青葉2_8份，板藍(lán)根2_10份，鹽2-4份、糖蜜40-60份，水850份、10億CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，10億CFU/ml 丁酸梭菌5-15份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌5-15份，100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌5-15份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌5-15份;將上述中草藥經(jīng)粉碎、浸泡、加熱保溫、發(fā)酵而制得預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液。
[0008]其中，預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法，包括如下步驟:
⑴、將從市場上購買的各種中草藥單獨粉碎成100目細(xì)粉；
⑵、在發(fā)酵罐中依次加入:黃芪2-6份，黃芩2-6份，黃蓮2-4份，二花3-7份，赤芍4_6份，甘草2-4份，魚腥草1-3份，白頭翁3-5份，生地2-4份，半夏2_4份，柴胡4_8份，枇杷葉4_8份，連翹2-6份，大青葉2-8份，板藍(lán)根2-10份，鹽2-4份，糖蜜40-60份，水850份。浸泡30分鐘后，加熱至85°C，保溫兩小時，冷卻至30°C ；
(3)、在步驟⑵制取的冷卻液加入100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌5-15份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌5-15份，10億CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份;30°C_33°C，開攪拌120-160r/min，每分鐘通無菌空氣量與發(fā)酵液體積比為I: 1-1.5:1;發(fā)酵36小時后，再向發(fā)酵罐中加入10億CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌5-15份，30-35°C靜止培養(yǎng)120-150小時，檢測其pH低于4.0，活菌含量達(dá)到1億CFU/ml，即可結(jié)束發(fā)酵；
⑷、放出菌液，包裝成品。
[0009]其中，預(yù)防口蹄疫的使用方法為添加在日常飼料中攪拌均勻，添加比例控制在
0.1%-0.2%O
[0010]其中，在步驟⑶中的飼料類芽孢桿菌、蒼黃鏈霉菌、布拉氏酵母菌、丁酸梭菌、膠質(zhì)紅假單胞菌的生產(chǎn)可采用現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供以下方法:
①、飼料類芽孢桿菌液體菌種的制備
取出菌種保藏管，用LB固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30°C培養(yǎng)48小時。在平板下挑取單個菌落接種50毫升LB培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30°(:震蕩培養(yǎng)24小時。種子采用5%的接種量，接種至裝有2L的飼料類芽孢桿菌液體菌種培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，30 °C震蕩培養(yǎng)20-28小時，檢測其菌液濃度，芽孢含量超過100億CFU/ml，即可作為飼料類芽孢桿菌液體菌種接種。其中，所述LB固體培養(yǎng)基:蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20 g，水100mL，pH7.2;其中所述飼料類芽孢桿菌液體菌種培養(yǎng)基:葡萄糖10g/L，玉米粉15 g/L,豆柏粉35 g/L，硫酸鎂0.5 g/L，硫酸錳0.5 g/L，磷酸二氫鉀0.5 g/L，磷酸氫二鉀1.5 g/L，pH7.2。各培養(yǎng)基滅菌的條件為:0.10-0.15MPa，121°C滅菌30分鐘。
[0011]②、蒼黃鏈霉菌菌種的制備
取出菌種保藏管，用TOA固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30°C培養(yǎng)48小時。在平板下挑取單個菌落劃線至裝有PDA固體培養(yǎng)基的茄子瓶中，在培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)3-5天，待菌種，產(chǎn)生大量的孢子后，用無菌生理鹽水刮下，調(diào)整蒼黃鏈霉菌孢子濃度為I億CFU/ml，即為蒼黃鏈霉菌菌種。
[0012]③、布拉氏酵母菌液體菌種的制備
取出菌種保藏管，用TOA固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30°C培養(yǎng)48小時。在平板下挑取單個菌落接種50毫升PDA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30°C震蕩培養(yǎng)24小時。種子采用5%的接種量，接種至裝有布拉氏酵母菌種子培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，每個裝液量為2L，30°C震蕩培養(yǎng)20-28小時，檢測其菌液濃度，菌含量超過10億CFU/ml，即可作為布拉氏酵母菌液體菌種接種。
[0013]其中，所述的PDA固體培養(yǎng)基:土豆200g，蔗糖20g，瓊脂20g，水1000mL。其中所述的布拉氏酵母菌種子培養(yǎng)基:葡萄糖20 g/L，酵母膏3 g/L，蛋白胨5 g/L，硫酸錢5 g/L，硫酸鎂0.5 g/L。各培養(yǎng)基滅菌的條件為:0.10-0.15MPa，121°C滅菌30分鐘。
[0014]④、丁酸梭菌液體菌種的制備
取-80°C甘油管保藏的菌種ImL接種于裝有9mLRCM培養(yǎng)基的試管中，37°C條件下靜態(tài)厭氧活化48h，將活化好的菌種按1%(ν/ν)的接種量轉(zhuǎn)接到滅過菌的100L 丁酸梭菌培養(yǎng)基中，37°C條件下靜態(tài)厭氧培養(yǎng)24h~36h，菌含量超過10億CFU/ml，即可作為丁酸梭菌液體菌種；
其中，所述的RCM培養(yǎng)基:胰蛋白陳10g/L，牛肉膏10g，酵母膏10g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉5g/L，可溶性淀粉lg/L，半胱氨酸鹽酸鹽0.5克/L，醋酸鈉3g/L，pH7.0，121°C滅菌20min;
其中，所述的丁酸梭菌培養(yǎng)基::酵母膏15g/L，牛肉膏5g/L，KH2P04 2g/L硫酸鎂lg/L，半胱氨酸鹽酸鹽lg/L，NaHC03 lg/L，CaC03 lg/L，葡萄糖20g/L，PH7.0，121°C滅菌20min。
[0015]⑤、膠質(zhì)紅假單胞菌液體菌種的制備
取出膠質(zhì)紅假單胞菌種保藏管，用膠質(zhì)紅假單胞菌固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，在光照培養(yǎng)箱中35°C培養(yǎng)72小時。光照強度:10001ex-60001ex。在平板下挑取單個菌落接種50毫升膠質(zhì)紅假單胞菌液體培養(yǎng)基中，在光照培養(yǎng)箱中35°C厭氧培養(yǎng)120小時。種子采用10%的接種量，接種至裝有4.5L的膠質(zhì)紅假單胞菌液體培養(yǎng)基的5L大三角瓶，在光照培養(yǎng)箱中35°C厭氧培養(yǎng)72-96小時，檢測其菌液濃度，菌含量超過30億CFU/ml，即可作為膠質(zhì)紅假單胞菌液體菌種種子接種。其中所述膠質(zhì)紅假單胞菌固體培養(yǎng)基:磷酸二氫鉀lg，氯化鈣
0.18，碳酸鈉38，醋酸鈉18，氯化鎂0.58，氯化銨18，氯化鈉化，瓊脂2(^，？!17.5，水1000111匕其中所述膠質(zhì)紅假單胞菌液體培養(yǎng)基:磷酸二氫鉀Ig，氯化鈣0.1g，碳酸鈉2g，醋酸鈉4g，氯化鎂0.5g，氯化銨lg，氯化鈉lg，pH7.5，水1000mL。各培養(yǎng)基滅菌的條件為:0.10-0.15MPa，121 °C滅菌30分鐘。
[0016]本發(fā)明中的發(fā)酵液中含有豐富的活性布拉氏酵母菌，布拉氏酵母菌富含維生素B群，能有效改善畜禽體內(nèi)消化道菌群平衡，增強機體免疫力，提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，從而達(dá)到防治消化道疾病和提高免疫等多重作用。畜禽胃腸道內(nèi)寄生了大量的微生物，這些微生物在合適的營養(yǎng)底物下能夠保持正常的生長代謝，這將有利于維護(hù)各菌系之間的代謝平衡，并為畜禽胃腸道消化吸收功能提供一個良好的微生態(tài)環(huán)境，使得進(jìn)入畜禽的各種養(yǎng)分在胃腸道內(nèi)能被充分吸收和利用，酵母菌為兼性厭氧菌，可在畜禽體內(nèi)生長繁殖，能消耗腸道內(nèi)的氧氣形成厭氧環(huán)境，并輔助乳桿菌代謝產(chǎn)生乳酸等有機酸，有利于乳酸菌，雙歧桿菌，等有益菌的生長，抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的生長，從而改善胃腸道環(huán)境和菌群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)胃腸對營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收和利用。酵母菌中含有超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽，而它們都是重要的抗氧化劑和自由基消除劑。酵母菌內(nèi)的超氧化物歧化酶(SOD)可對抗與阻斷因氧自由基對細(xì)胞造成的損害，并及時修復(fù)受損細(xì)胞。谷胱甘肽在酵母細(xì)胞內(nèi)含量較高，可消除自由基，能起到強有力的保護(hù)作用。谷胱甘肽還具有整合解毒作用，能與體內(nèi)的有毒化合物、重金屬離子或致癌物質(zhì)等相結(jié)合，并促進(jìn)其排出體外，起到中和解毒作用。谷胱甘肽可阻止氧化血紅蛋白，有利于酶活性的發(fā)揮，并且使酶重新恢復(fù)活性。酵母菌代謝能產(chǎn)生多種酶及多種代謝產(chǎn)物，降解中草藥中的高分子物質(zhì)，可降低腸道內(nèi)的食糜黏度，促進(jìn)胃腸對營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收和利用。酵母細(xì)胞富含畜禽生長需要的多種營養(yǎng)物質(zhì)，蛋白質(zhì)含量達(dá)到45%?60%，可以和大豆蛋白相媲美;氨基酸組成合理，畜禽必需的8種氨基酸含量均很高，富含B族維生素如煙酸、膽堿、核黃素、泛酸、葉酸等，畜禽對其吸收率可達(dá)60%以上，是一種理想的VB2補充源，為乳酸菌，雙歧桿菌提供多種營養(yǎng)成分。
[0017]本發(fā)明的發(fā)酵液中含有蒼黃鏈霉菌，蒼黃鏈霉菌在發(fā)酵中草藥過程中會產(chǎn)生豐富的纖維素酶，木聚糖酶，葡聚糖酶等非淀粉多糖酶以及淀粉酶，蛋白酶，破壞了中草藥的細(xì)胞壁，能將中草藥的有效成份的含量提高數(shù)倍，并在發(fā)酵過程中產(chǎn)生蒼黃菌素(一種抗病毒的抗生素)，具有較強抗口蹄疫病毒的活性，有機的結(jié)合了益生菌與中草藥的功效，能極大促進(jìn)畜禽的生長發(fā)育，能夠有效改善肉質(zhì)，提高抗病力，增強免疫力的功效。
[0018]本發(fā)明中含有飼料類芽孢桿菌，飼料類芽孢桿菌在自然界分布廣泛，易分離培養(yǎng)，其能產(chǎn)豐富的淀粉酶，纖維素酶與蛋白酶，是一種具有廣譜抑菌活性的細(xì)菌產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物的能力較強，其分泌的抗生素、抗菌蛋白或多肽類物質(zhì)等起到較好的生物防治效果。飼料類芽孢桿菌作為一種益生菌，在其生長過程中可產(chǎn)生多種抑菌物質(zhì)，如抑菌蛋白，脂肽類抗生素，多肽類物質(zhì)。Wong等從飼料類芽孢桿菌中分離純化得到對多種病菌具有抑制活性的抑菌蛋白baciamin，分子質(zhì)量為50 ku，可以使病原真菌的膜通透性增加，降低人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，同時對肝癌、乳腺癌、結(jié)腸癌細(xì)胞具有抑制作用。
[0019]飼料類芽孢桿菌發(fā)酵中草藥的過程中，以中草藥為培養(yǎng)基，會合成一些新的中草藥官能團(tuán)活性因子以及促生長因子，經(jīng)檢測，其抑菌蛋白與脂肽類抗生素，多肽類物質(zhì)基本上比一般培養(yǎng)基提高了 20%以上，增強其治病，防病的效果。
[0020]本發(fā)明中含有膠質(zhì)紅假單胞菌，是一種具有很高營養(yǎng)價值的古老菌體，個體極小，但營養(yǎng)成分非常豐富，它含有大量的蛋白質(zhì)和氨基酸，是一種優(yōu)質(zhì)蛋白源，膠質(zhì)紅假單胞菌菌體含有蛋白質(zhì)65.45%，脂肪7.18%，粗纖維2.78%，可溶性糖20.31%，灰分4.28%，每克干菌體相當(dāng)于21KJ熱量。光合細(xì)菌含有豐富的B族維生素，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)(yg/g):維生素BI 12，維生素B2 30，維生素B6 5，維生素B12 21(是酵母的200倍)，煙酸125，，泛酸30，葉酸60，生物素65。光合細(xì)菌還含有輔酶QlO，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為酵母、菠菜葉和玉米幼芽的13.94和82倍。膠質(zhì)紅假單胞菌光合色素由細(xì)菌葉綠素(Bchl)和類胡蘿卜素組成，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌葉綠素有a、b、c、d、e 5種，每種都有固定的光吸收波長;迄今已發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)紅假單胞菌的類胡蘿卜素有80多種，其中包括番茄紅素、葉黃素等。它還含有鋅、碘、砸等多種微量元素和多種酶類，產(chǎn)生并分泌多種促進(jìn)生長因子、促免疫因子、抗病毒因子等。通過拌料或直接飲水的方式應(yīng)用于畜禽，膠質(zhì)紅假單胞菌主要作用在于改善動物營養(yǎng)條件，促進(jìn)畜禽生長發(fā)育，縮短生長周期，增強免疫力，提高防病抗病能力，提高成活率和產(chǎn)肉、產(chǎn)蛋、產(chǎn)奶率，并改善肉、蛋、奶品質(zhì)，降解有害物質(zhì)殘留，提高飼料利用率，降低飼料用量。
[0021]本發(fā)明中含有丁酸梭菌，其在發(fā)酵過程中可以將中草藥活性發(fā)酵液最終pH低于4，能起到酸化劑的作用，增加適口性。改善腸道微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)畜禽腸道有益菌的增殖，阻止或抑制有害菌繁殖，糾正腸內(nèi)菌群紊亂，調(diào)整腸道菌群平衡；抑制腐敗菌，防止腸道內(nèi)有害物質(zhì)的產(chǎn)生。改善和優(yōu)化禽畜飼養(yǎng)生態(tài)環(huán)境，減少環(huán)境污染；提高動物的抗應(yīng)激能力；提高動物的免疫機能，有效地預(yù)防或減少細(xì)菌性疾病的發(fā)生；提高動物飼料轉(zhuǎn)化率，降低生產(chǎn)成本。促進(jìn)動物生產(chǎn)和提高生產(chǎn)性能；改善肉質(zhì)，提高產(chǎn)品品位從而獲得較高的經(jīng)濟(jì)效益。
[0022]本發(fā)明的優(yōu)異效果是:
①、本發(fā)明的技術(shù)方案通過多年的微生態(tài)研究以及養(yǎng)殖經(jīng)驗反復(fù)試驗而成的，符合傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)的理論;從發(fā)明中草藥配方是從140多種中草藥進(jìn)行篩選，依據(jù)傳統(tǒng)的中藥的君臣佐使、七情配伍、十八反、十九畏等理論，逐個篩選并對篩選出的中草藥有效成份、抑菌作用進(jìn)行提取、驗證，最終確定配方，通過益生菌發(fā)酵證明能有效預(yù)防口蹄疫及其并發(fā)癥，而且有很好的促生長的效果。
[0023 ]②、本發(fā)明的中草藥活性發(fā)酵液中的中草藥在益生菌(蒼黃鏈霉菌，飼料類芽孢桿菌，布拉氏酵母菌，丁酸梭菌，膠質(zhì)紅假單胞菌)的發(fā)酵作用下，破壞了中草藥的細(xì)胞壁，能將中草藥的有效成份的含量提高1-4倍，并在發(fā)酵過程中產(chǎn)生蒼黃菌素(一種抗病毒的抗生素)，具有較強抗口蹄疫病毒的活性，增強預(yù)防口蹄疫及其并發(fā)癥的效果，并在發(fā)酵過程中產(chǎn)生多種促生長因子與益生菌，有機的結(jié)合了益生菌與中草藥的功效，能極大促進(jìn)畜禽的生長發(fā)育，能夠有效改善肉質(zhì)，提高抗病力，增強免疫力的功效并具有易于使用，中草藥用量少，活菌含量高以及具有無殘留、無耐藥性等優(yōu)點。
[0024]③、本發(fā)明中的各種益生菌是從500多種有益微生物中篩選出5種能夠大大提高中草藥的有效成份的利用率，并在發(fā)酵過程中可共生共存，互相促進(jìn)。其在發(fā)酵過程中可以將中草藥活性發(fā)酵液最終pH低于4，能起到酸化劑的作用，增加適口性。改善腸道微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)畜禽腸道有益菌的增殖，阻止或抑制有害菌繁殖，糾正腸內(nèi)菌群紊亂，調(diào)整腸道菌群平衡；抑制腐敗菌，防止腸道內(nèi)有害物質(zhì)的產(chǎn)生。改善和優(yōu)化禽畜飼養(yǎng)生態(tài)環(huán)境，減少環(huán)境污染；提高動物的抗應(yīng)激能力；提高動物的免疫機能，有效地預(yù)防或減少細(xì)菌性疾病的發(fā)生；提高動物飼料轉(zhuǎn)化率，降低生產(chǎn)成本。促進(jìn)動物生產(chǎn)和提高生產(chǎn)性能；改善肉質(zhì)，提高產(chǎn)品品位從而獲得較高的經(jīng)濟(jì)效益。
【具體實施方式】
[0025]以下是本發(fā)明的一些實施個例，本發(fā)明的實際使用不局限于實施例。
[0026]實施例1，用于預(yù)防口蹄疫的益生菌中草藥活性發(fā)酵液的制備
用于預(yù)防口蹄疫的益生菌中草藥活性發(fā)酵液的原料的重量配比范圍為:黃芪4份，黃芩4份，黃蓮3份，二花4份，赤芍5份，甘草4份，魚腥草2份，白頭翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷葉7份，連翹4份，大青葉4份，板藍(lán)根8份，鹽2份、糖蜜50份，水850份、1億CFU/ml布拉氏酵母菌10份，10億CFU/ml 丁酸梭菌10份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌10份，100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌1份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌1份;將上述中草藥經(jīng)粉碎、浸泡、加熱保溫、發(fā)酵而制得預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液。
[0027]其中，所述的預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法，包括如下步驟:
⑴、將從市場上購買的各種中草藥單獨粉碎成100目細(xì)粉；
⑵、在發(fā)酵罐中依次加入:黃芪4份，黃芩4份，黃蓮3份，二花4份，赤芍5份，甘草4份，魚腥草2份，白頭翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷葉7份，連翹4份，大青葉4份，板藍(lán)根8份，鹽2份、糖蜜50份，水850份。浸泡30分鐘后，加熱至85°C，保溫兩小時，冷卻至30°C ；
(3)、在步驟⑵制取的冷卻液加入100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌10份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌10份，10億CFU/ml布拉氏酵母菌10份;30°C_33°C，開攪拌140r/min，每分鐘通無菌空氣量與發(fā)酵液體積比為1:2:1;發(fā)酵36小時后，再向發(fā)酵罐中加入1億CFU/ml 丁酸梭菌1份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌10份，30-35°C靜止培養(yǎng)140小時，檢測其pH為3.8，活菌含量為11億CFU/ml，即結(jié)束發(fā)酵；
⑷、放出菌液，包裝成品。
[0028]實例2，用于預(yù)防口蹄疫的益生菌中草藥活性發(fā)酵液的制備
用于預(yù)防口蹄疫的益生菌中草藥活性發(fā)酵液的原料的重量配比范圍為:黃芪3份，黃芩5份，黃蓮3份，二花6份，赤芍5份，甘草3份，魚腥草2份，白頭翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷葉6份，連翹4份，大青葉6份，板藍(lán)根8份，鹽3份、糖蜜50份，水850份、1億CFU/ml布拉氏酵母菌10份，10億CFU/ml 丁酸梭菌10份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌10份，100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌1份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌1份;將上述中草藥經(jīng)粉碎、浸泡、加熱保溫、發(fā)酵而制得預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液。
[0029]其中，預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法，包括如下步驟:
⑴、將從市場上購買的各種中草藥單獨粉碎成100目細(xì)粉；
⑵、在發(fā)酵罐中依次加入:黃芪3份，黃芩5份，黃蓮3份，二花6份，赤芍5份，甘草3份，魚腥草2份，白頭翁4份，生地3份，半夏3份，柴胡6份，枇杷葉6份，連翹4份，大青葉6份，板藍(lán)根8份，鹽3份、糖蜜50份，水850份。浸泡30分鐘后，加熱至85°C，保溫兩小時，冷卻至30°C ；
(3)、在步驟⑵制取的冷卻液加入100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌10份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌10份，10億CFU/ml布拉氏酵母菌10份;30°C_33°C，開攪拌140r/min，每分鐘通無菌空氣量與發(fā)酵液體積比為1:4:1;發(fā)酵36小時后，再向發(fā)酵罐中加入1億CFU/ml 丁酸梭菌1份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌10份，30-35°C靜止培養(yǎng)140小時，檢測其pH為3.5，活菌含量為12億CFU/ml，即結(jié)束發(fā)酵；
⑷、放出菌液，包裝成品。
[0030]預(yù)防口蹄疫的使用方法為添加在日常飼料中攪拌均勻，添加比例控制在0.1%-
0.2%。根據(jù)實驗，在滄縣大褚村400頭羊飼料中添加70天，試驗組比對照組(400頭)平均每頭增重1250克，在傳染病流行期間，試驗組無一頭羊發(fā)病，保護(hù)率100%，對照組發(fā)病55頭，發(fā)病率為 13.75%。
【主權(quán)項】
1.一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液，其特征在于，由以下重量份的原料制成:黃芪2-6份，黃芩2-6份，黃蓮2-4份，二花3-7份，赤芍4_6份，甘草2_4份，魚腥草1-3份，白頭翁3_5份，生地2-4份，半夏2-4份，柴胡4-8份，枇杷葉4-8份，連翹2_6份，大青葉2_8份，板藍(lán)根2_10份，鹽2-4份、糖蜜40-60份，水850份、10億CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份，10億CFU/ml 丁酸梭菌5-15份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌5-15份，100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌5-15份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌5-15份;將上述中草藥經(jīng)粉碎、浸泡、加熱保溫、發(fā)酵而制得預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: ⑴、將從市場上購買的各種中草藥單獨粉碎成100目細(xì)粉； ⑵、在發(fā)酵罐中依次加入:黃芪2-6份，黃芩2-6份，黃蓮2-4份，二花3-7份，赤芍4_6份，甘草2-4份，魚腥草1-3份，白頭翁3-5份，生地2-4份，半夏2_4份，柴胡4_8份，枇杷葉4_8份，連翹2-6份，大青葉2-8份，板藍(lán)根2-10份，鹽2-4份，糖蜜40-60份，水850份，浸泡30分鐘后，加熱至85°C，保溫兩小時，冷卻至30°C ； (3)、在步驟⑵制取的冷卻液加入100億CFU/ml飼料類芽孢桿菌5-15份，I億CFU/ml蒼黃鏈霉菌5-15份，10億CFU/ml布拉氏酵母菌5-15份;30°C_33°C，開攪拌120-160r/min，每分鐘通無菌空氣量與發(fā)酵液體積比為I: 1-1.5:1;發(fā)酵36小時后，再向發(fā)酵罐中加入10億CFU/ml丁酸梭菌5-15份，30億CFU/ml膠質(zhì)紅假單胞菌5-15份，30-35°C靜止培養(yǎng)120-150小時，檢測其pH低于4.0，活菌含量達(dá)到1億CFU/ml，即可結(jié)束發(fā)酵； ⑷、放出菌液，包裝成品。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種預(yù)防口蹄疫的中草藥活性發(fā)酵液，其特征在于，預(yù)防口蹄疫的使用方法為添加在日常飼料中攪拌均勻，添加比例控制在0.1%-0.2%。
【文檔編號】A23K10/18GK106074941SQ201610745874
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月29日
【發(fā)明人】蔣常德, 胡艷暉
【申請人】佛山市艷暉生物科技有限公司