長柱重樓單體皂苷組合及其藥物組合物和其在制藥中的應(yīng)用
【專利摘要】提供長柱重樓[Paris forrestii(Takht.)H.Li]總皂苷PFE?PT3及單體皂苷組合PFE?PT65，其為活性成分的藥物組合物，及其在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌和耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用。長柱重樓總皂苷PFE?PT3及單體皂苷組合PFE?PT65對耐阿霉素的人乳腺癌MCF?7/ADM細(xì)胞有顯著的抑制作用，耐藥指數(shù)小于2；對耐紫杉醇的人鼻咽癌KBvin細(xì)胞生長有顯著的抑制作用，耐藥指數(shù)小于2。
【專利說明】
長柱重樓單體皂苷組合及其藥物組合物和其在制藥中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉長柱重樓總皂苷PFE-PT3及其單體皂苷組合 PFE-PT65和其制備方法及其在制備預(yù)防或治療耐藥腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】：
[0002] 長柱重樓[Paris forrestii(Takht. )H.Li]為延齡草科重樓屬植物，其根莖入藥， 具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚的功效，用于治療癰疽瘡瘍、無名腫毒、毒蛇咬傷、咽喉 腫痛、聰腺炎、扁桃體炎和大頭瘟(朱兆云.云南天然藥物圖鑒.第6卷.昆明：云南科技出版 社，2010 : 127)。專利申請"一種治療癌癥的植物藥及其制備方法與應(yīng)用"（公開號： CN104706896A)公開了長柱重樓PFE-PT3部位具有顯著抗癌活性;專利申請"長柱重樓抗癌 活性部位PFE-PT3的化學(xué)成分分離和鑒定方法"（公開號：CN105106556A)公開了PFE-PT3的 主要化學(xué)成分；專利申請"長柱重樓抗癌活性組分及其藥物組合物和其應(yīng)用" (201610058385.6)公開了長柱重樓組分的抗癌活性。目前尚未有長柱重樓總皂苷及其單體 皂苷組合對耐藥腫瘤預(yù)防和治療方面的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0003] 本發(fā)明提供長柱重樓總皂苷PFE-PT3及單體皂苷組合PFE-PT65,同時(shí)提供上述組 合為有效成分的藥物組合物，并提供它們在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌和耐藥鼻咽癌的藥 物中的應(yīng)用。本發(fā)明長柱重樓總皂苷PFE-PT3及單體皂苷組合PFE-PT65對耐藥乳腺癌細(xì)胞 和耐藥鼻咽癌細(xì)胞生長具有顯著的抑制作用。
[0004] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
[0005] 長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65,由長柱重樓總皂苷PFE-PT3所含化學(xué)成分重樓 皂苷I和重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比1:1組合所得。
[0006] 藥物組合物，其中含有治療有效量的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65和藥學(xué)上可 接受的載體。
[0007] 長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65的制備方法，以長柱重樓干燥根莖粉碎后用95% 乙醇浸泡7天，過濾，濾渣繼續(xù)提取，總共提取4次，合并濾液，回收溶劑，得浸膏PFE-PTM^ PFE - PT 1用水制成混懸液，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取部位PFE - PT2， 乙酸乙酯萃取后的母液繼續(xù)用正丁醇萃取，回收正丁醇，得正丁醇萃取部位PFE-PT3;取 PFE-PT3經(jīng)硅膠柱層析用10:1，5:1，3:1，1:1的氯仿-甲醇混合溶劑梯度洗脫，劃段，得到 Fr. A、Fr. B、Fr. C和Fr. D4個(gè)部分，取Fr. B部分經(jīng)C18反相硅膠柱層析，甲醇-水，10:90-100: 0，得到？181、？182、？18 3、？184、？185和？1866個(gè)部分；??？183部分，過1^-20凝膠柱層 析，甲醇洗脫后，再用硅膠柱層析5:1氯仿-甲醇洗脫得到β-蛻皮激素，取Fr.B 4部分，用半制 備高效液相色譜純化得到甲基原重樓皂苷I和甲基原重樓皂苷V，取Fr.B5部分，用半制備高 效液相色譜純化得到Pariposide A、重樓皂苷II、重樓皂苷III、重樓皂苷I和重樓皂苷V;取 Fr. B6部分，半制備高效液相色譜純化得到化合物PGRR和重樓皂苷H，將上述的重樓皂苷I和 重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比例1:1組合，得到PFE-PT65。
[0008] 所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻 咽癌的藥物中的應(yīng)用。
[0009] 如所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥 鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其中PFE - PT65的每日劑量為1~100mg/kg體重。
[0010]如所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥 鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其中PFE-PT65每日給藥劑量為60mg/kg體重，制備成每日3次/每次 1片20mg普通片劑，每日2次/每次1片30mg普通片劑或每日1次/每次1片60mg的片劑。
[0011] 如所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥 鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其中PFE-PT65每日給藥劑量為90mg/kg體重，制備成每日3次/每次 1片30mg普通片劑、每日2次/每次1片45mg普通片劑或每日1次/每次1片90mg的緩控式片劑。
[0012] 長柱重樓抗癌活性部位PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥 物中的應(yīng)用。
[0013] 如所述的PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用， 其中PFE-PT3每日給藥劑量為60mg/kg體重，制備成每日3次/每次1片20mg普通片劑，每日2 次/每次1片30mg普通片劑或每日1次/每次1片60mg的片劑。
[0014]如所述的PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用， 其中PFE-PT3每日給藥劑量為90mg/kg體重，制備成每日3次/每次1片30mg普通片劑、每日2 次/每次1片45mg普通片劑或每日1次/每次1片90mg的緩控式片劑。
[0015] 本發(fā)明的PFE-PT3的制備更具體地采用：長柱重樓[Paris forrestii(Takht.) H. Li ]干燥根莖（4.4kg)，粉碎后用95 %乙醇（13L)浸泡7天，過濾，濾渣繼續(xù)提取?？偣蔡崛?4次，合并濾液，回收溶劑，得浸膏（編號PFE - PT I) 550g。將PFE - PT 1用水(2L)制成混懸液，用 乙酸乙酯萃?。?LX3)，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取部位(編號PFE-PT2)19g。乙酸乙酯 萃取后的母液，繼續(xù)用正丁醇萃取(2LX3)，回收正丁醇，得正丁醇萃取部位(編號PFE-PT3) 290g〇
[0016] PFE-PT3所含化學(xué)成分的分離：
[0017] 取重量為180g的PFE-PT3經(jīng)硅膠柱層析用氯仿-甲醇混合溶劑梯度（10:1，5:1，3: 1，1:1)洗脫劃段，得到？14(148)、？18(1018)、？^(：(458)和?1〇(128)4個(gè)部分。取?18部 分 30g 經(jīng) C18 反相硅膠柱層析（甲醇-水，10:90-100:0)，得到？181(1.(^){18 2(0.58)、 Fr·B3(0·8g)、Fr·B4(4·6g)、Fr·B5(16·lg)和Fr·B6(l·0g)6個(gè)部分。
[0018]取Fr.B3部分150mg，過LH-20凝膠柱層析（甲醇洗脫）后，再用硅膠柱層析氯仿-甲 醇（5:1)洗脫得到β-蛻皮激素（39. Omg)。取Fr. B4部分130mg，用半制備高效液相色譜（安捷 倫1200，Zorbax SB_&8色譜柱，9.4 X 250mm;甲醇-水，72:28，流速2mL/min)純化得到甲基原 重樓皂苷I (30.0 mg，保留時(shí)間25.31 3min)和甲基原重樓皂苷V( 14. Omg，保留時(shí)間 27.236!1^11)。取?185部分12011^，用半制備高效液相色譜（安捷倫1200,2〇外 &138-(：18色譜 柱，9 · 4 X 250mm;乙腈-水，50: 50，流速2mL/min)純化得到Pariposide A(4 · 5mg，保留時(shí)間 12.788min)、重樓皂苷II(1.4mg，保留時(shí)間14.634min)、重樓皂苷III(14.4mg，保留時(shí)間 18.07〇111丨11)、重樓皂苷1(12.711^，保留時(shí)間21.019111丨11)和重樓皂苷￥(4.411^，保留時(shí)間 26.0291^1〇。取?18 6部分13211^，半制備高效液相色譜(安捷倫1200,2〇43138-(：18色譜柱， 9.4 X 250mm;乙腈-水，40 : 60，流速2mL/min)純化得到化合物PGRR( 4 . Img，保留時(shí)間 18.421111丨11)和重樓皂苷!1(9.〇11^，保留時(shí)間23.58711^11)。
[0019]將PFE-PT3中主要成分重樓皂苷I和重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比例1:1組合，得到 PFE-PT65。
[0020] 本發(fā)明的上述抗癌活性組分或其藥用鹽可經(jīng)口或不經(jīng)過口給藥，給藥量因藥物不 同而各有不同，對成人來說，使用含有長柱重樓活性組分的藥物組合物，每天1~200mg比較 合適。優(yōu)選5~200mg范圍內(nèi)。
[0021] 經(jīng)口服給藥時(shí)，首先使活性組分與常規(guī)的藥用輔劑如賦形劑、崩解劑、黏合劑、潤 滑劑、抗氧化劑、包衣劑、著色劑、芳香劑、表面活性劑等混合，將其制成顆粒劑、膠囊、片劑 等形式給藥;非經(jīng)口給藥時(shí)可以注射液、輸液劑或栓劑等形式給藥。制備上述制劑時(shí)，可使 用常規(guī)的制劑技術(shù)。
[0022] 長柱重樓總皂苷或單體皂苷組合藥物的給藥劑量可選擇1:使用長柱重樓總皂苷 或單體皂苷組合樣品作為藥物活性成分制備開發(fā)的藥物組合物，每日給藥劑量為60mg，可 分別制備成每日3次/每次1片20mg普通片劑，每日2次/每次1片30mg普通片劑或每日1次/每 次1片60mg的片劑類型。
[0023] 長柱重樓總皂苷或單體皂苷組合藥物的給藥劑量也可選擇2:使用長柱重樓總皂 苷或單體皂苷組合樣品作為藥物活性成分制備開發(fā)的藥物組合物，使用長柱重樓活性組分 樣品作為藥物的活性成分，每日給藥劑量為90mg，可制備成每日3次/每次1片30mg普通片 劑、每日2次/每次1片45mg普通片劑或每日1次/每次1片90mg的緩控式片劑類型。
[0024]需要說明的問題:本發(fā)明涉及的藥物組合物在有效成分的給藥劑量上存在有許多 因素影響，例如：用于預(yù)防和治療的用途不同而造成每日用藥劑量的不同；患病性質(zhì)與患病 嚴(yán)重程度不同而造成每日用藥劑量的不同；患者性別、年齡、體表面積的不同，給藥途徑、給 藥次數(shù)、治療目的不同而造成每日用藥劑量的不同；此外，劑型間存在的吸收和血藥濃度不 同等，亦造成本發(fā)明在使用活性成分的每日合適劑量范圍為0.01~150mg/kg體重，優(yōu)選為1 ~100mg/kg體重。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際的預(yù)防與治療不同情況需求制定不同的長柱重樓有效 成分總劑量方案，并可分為多次或一次給藥方式完成。
[0025]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下述的優(yōu)異效果：
[0026] 長柱重樓總皂苷PFE-PT3及單體皂苷組合PFE-PT65對耐阿霉素的人乳腺癌MCF-7/ ADM細(xì)胞均有顯著的抑制作用，耐藥指數(shù)小于2,遠(yuǎn)低于阿霉素耐藥指數(shù)，后者的耐藥指數(shù)為 50794;長柱重樓總皂苷PFE-PT3及單體皂苷組合PFE-PT65對耐紫杉醇的人鼻咽癌KBvin細(xì) 胞生長有顯著的抑制作用，耐藥指數(shù)小于2,遠(yuǎn)低于紫杉醇耐藥指數(shù)，后者的耐藥指數(shù)為 1799〇
【具體實(shí)施方式】：
[0027]下面用本發(fā)明的實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此來限定本 發(fā)明。
[0028] 實(shí)施例1:
[0029] 1.本發(fā)明的活性部位PFE-PT3的制備及其所含化學(xué)成分的分離：
[0030] PFE- PT3的制備：長柱重樓[Pari s forresti i (Takht ·)H · Li ]干燥根莖(4 · 4kg)，粉 碎后用95%乙醇（13L)浸泡7天，過濾，濾渣繼續(xù)提取。總共提取4次，合并濾液，回收溶劑， 得浸膏（編號PFE - PT I) 550g。將PFE - PT 1用水（2L)制成混懸液，用乙酸乙酯萃?。?L X 3)，回 收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取部位(編號PFE-PT2)19g。乙酸乙酯萃取后的母液，繼續(xù)用正丁 醇萃取(2LX3)，回收正丁醇，得正丁醇萃取部位(編號PFE-PT3)290g。
[0031] PFE-PT3所含化學(xué)成分的分離：
[0032] 取重量為180g的PFE-PT3經(jīng)硅膠柱層析用氯仿-甲醇混合溶劑梯度（10:1，5:1，3: 1，1:1)洗脫劃段，得到？14(148)、？18(1018)、？^(：(458)和?1〇(128)4個(gè)部分。取?18部 分 30g 經(jīng) C18 反相硅膠柱層析（甲醇-水，10:90-100:0)，得到？181(1.(^){18 2(0.58)、 Fr·B3(0·8g)、Fr·B4(4·6g)、Fr·B5(16·lg)和Fr·B6(l·0g)6個(gè)部分。
[0033]取Fr.B3部分150mg，過LH-20凝膠柱層析（甲醇洗脫）后，再用硅膠柱層析氯仿-甲 醇（5:1)洗脫得到β-蛻皮激素（39. Omg)。取Fr. B4部分130mg，用半制備高效液相色譜（安捷 倫1200，Zorbax SB_&8色譜柱，9.4 X 250mm;甲醇-水，72:28，流速2mL/min)純化得到甲基原 重樓皂苷I (30.0 mg，保留時(shí)間25.31 3min)和甲基原重樓皂苷V( 14. Omg，保留時(shí)間 27.236!1^11)。取?185部分12011^，用半制備高效液相色譜（安捷倫1200,2〇外 &138-(：18色譜 柱，9 · 4 X 250mm;乙腈-水，50: 50，流速2mL/min)純化得到Pariposide A(4 · 5mg，保留時(shí)間 12.788min)、重樓皂苷II(1.4mg，保留時(shí)間14.634min)、重樓皂苷III(14.4mg，保留時(shí)間 18.07〇111丨11)、重樓皂苷1(12.711^，保留時(shí)間21.019111丨11)和重樓皂苷￥(4.411^，保留時(shí)間 26.0291^1〇。取?18 6部分13211^，半制備高效液相色譜(安捷倫1200,2〇43138-(：18色譜柱， 9.4 X 250mm;乙腈-水，40 : 60，流速2mL/min)純化得到化合物PGRR( 4 . Img，保留時(shí)間 18.421111丨11)和重樓皂苷!1(9.〇11^，保留時(shí)間23.58711^11)。
[0034] 2.利用高效液相色譜(HPLC)技術(shù)對PFE-PT3的主要化學(xué)成分含量進(jìn)行測定，高效 液相色譜儀型號為Agilent 1200,配二極管陣列（DAD)檢測器，色譜柱選用Agilent (：18柱 (4.6mm X 150mm，5μπι)，檢測方法參照2015版《中華人民共和國藥典》（一部)方法。檢測結(jié)果 見表1。
[0035] 表1.PFE-PT3的主要化學(xué)成分含量
[0038] 2.本發(fā)明的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65的制備：
[0039]將PFE-PT3中主要成分重樓皂苷I和重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比例1:1組合，得到 PFE-PT65。
[0040] 實(shí)施例2:
[0041 ]采用改良MTT法測定細(xì)胞毒活性。取對數(shù)生長期的細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，在37 SC，5 %C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，加入測試樣品。陰性對照組加入等體積的生理鹽水，陽性對 照組加入阿霉素或紫杉醇。培養(yǎng)48h后，加入MTT，IOyL/孔。繼續(xù)培養(yǎng)4h后，加入三聯(lián)液[10% SDS-5% 異丁醇-0.012mol/l HCL(W/V/W) ]，IOOyL/孔，放置過夜后，用酶標(biāo)儀在570nm， 630nm雙波長下測定各孔的OD值。實(shí)際OD值=實(shí)驗(yàn)孔OD值-空白對照孔OD均值;細(xì)胞增殖抑 制率（％ ) = 1〇〇%-(加樣孔的實(shí)際OD值/陰性對照孔的實(shí)際OD值）X 100% ;用GWBASIC軟件 計(jì)算樣品的IC5Q值。耐藥指數(shù)(Resistance Index，RI)=耐藥細(xì)胞株的IC5〇/敏感細(xì)胞株的 ICso0
[0042] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2與表3。重樓皂苷I、重樓皂苷m、PFE-PT3和PFE-PT65對耐阿霉素的 乳腺癌MCF- 7/ADM細(xì)胞均有很好的抑制作用，耐藥指數(shù)小于2，相比之下，阿霉素耐藥指數(shù)為 507941FE-PT31FE-PT65對耐紫杉醇鼻咽癌KBvin細(xì)胞生長也有很好的抑制作用，耐藥指 數(shù)小于2,而紫杉醇耐藥指數(shù)為1799。
[0043]表2.長柱重樓總皂苷、單體皂苷及其組合對耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADM細(xì)胞生長 抑制作用
[0046]表3.長柱重樓總皂苷對耐紫杉醇鼻咽癌KBvin細(xì)胞生長抑制作用
[0048] 實(shí)施例3:
[0049] 制備治療癌癥的藥物:長柱重樓總皂苷PFE-PT3,加入羧甲基淀粉鈉、淀粉適量，淀 粉糊制粒，干燥，整粒，加入滑石粉適量，混勻，壓片(每片〇.5g，相當(dāng)于長柱重樓根莖3g)，每 次2片，每日3次。
[0050] 實(shí)施例4:
[00511制備治療癌癥的藥物，按以下的重量百分比進(jìn)行混合:長柱重樓總皂苷PFE-PT3占 20-80%，分散劑2-20%，崩解劑3-5%，乳化劑3-8%，粘結(jié)劑0.2-2%，潤濕劑0.5-10%，其 余為填料。然后按常規(guī)藥物制備方法制得有效成分為PFE-PT3的抗癌藥。
[0052] 實(shí)施例5:
[0053]制備治療癌癥的藥物:長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65,加入羧甲基淀粉鈉、淀粉 適量，淀粉糊制粒，干燥，整粒，加入滑石粉適量，混勻，壓片（每片〇.5g，相當(dāng)于長柱重樓根 莖3g)，每次2片，每日3次。
[0054] 實(shí)施例6:
[0055]長柱重樓皂苷組合藥物劑型-片劑：
[0056]長柱重樓總皂苷PFE-PT3或/和單體皂苷組合PFE-PT65的藥物組合片劑的制備:使 用上述組合物作為藥物活性成分，使用表3所述賦形劑作為制備組合藥物片劑的輔料成分， 按照比例配比制成每片含有上述活性組合藥物成分5~60mg的片劑樣品，表4給出普通片劑 的配方比例：
[0057]表4長柱重樓總皂苷和單體皂苷組合藥物片劑的原料藥和輔料配方
[0059] 將表中的活性成分與賦形劑輔料制備成不同劑量片劑制劑的方法是將幾種賦形 劑輔料與原料藥均勻混合，加入1%羥甲基纖維素鈉溶液適量制成軟料，過篩制粒，濕粒烘 干并過篩整粒，加入硬脂酸鎂和滑石粉混合均勻后壓片即得。
[0060] 實(shí)施例7:
[0061 ]長柱重樓活性組分組合藥物劑型-膠囊：
[0062]含有長柱重樓總皂苷PFE-PT33或/和單體皂苷組合PFE-PT65作為有效成分的藥物 組合膠囊制劑的制備:使用PFE-PT33或/和PFE-PT65作為藥物活性成分，使用表5中幾種賦 形劑作為制備組合藥物片劑的輔料成分，按照比例配比制成每粒膠囊中含有有效藥物成分 5~50mg的膠囊制劑，表5給出普通膠囊制劑的配方比例：
[0063]表5長柱重樓總皂苷和單體皂苷組合藥物膠囊制劑的原料藥和輔料配方
[0065]將一定數(shù)量的表中活性成分樣品與賦形劑輔料制備成膠囊制劑的方法是:將幾種 賦形劑輔料與長柱重樓活性組合混合均勻，加入1 %羥甲基纖維素鈉溶液適量，制成濕粒烘 干過篩整粒，加入硬脂酸鎂混合均勻，裝入膠囊制得;或不使用制粒步驟，而直接將長柱重 樓總皂苷PFE-PT33或單體皂苷組合PFE-PT65與幾種賦形劑輔料混合均勻，過篩后，直接裝 入膠囊制得。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65,由長柱重樓總皂苷PFE-PT3所含化學(xué)成分重樓皂 苷I和重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比1:1組合所得。2. 藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65和藥學(xué)上可接受的載體。3. 長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65的制備方法，以長柱重樓干燥根莖粉碎后用95%乙 醇浸泡7天，過濾，濾渣繼續(xù)提取，總共提取4次，合并濾液，回收溶劑，得浸膏PFE-PT1，將 PFE - PT1用水制成混懸液，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取部位PFE - PT2， 乙酸乙酯萃取后的母液繼續(xù)用正丁醇萃取，回收正丁醇，得正丁醇萃取部位PFE-PT3;取 PFE-PT3經(jīng)硅膠柱層析用10:1，5:1，3:1，1:1的氯仿-甲醇混合溶劑梯度洗脫，劃段，得到 Fr. A、Fr. B、Fr. C和Fr. D4個(gè)部分，取Fr. B部分經(jīng)C18反相硅膠柱層析，甲醇-水，10:90-100: 0，得到？181、？18 2、？183、？184、？185和？1866個(gè)部分；取？18 3部分，過1^-20凝膠柱層 析，甲醇洗脫后，再用硅膠柱層析5:1氯仿-甲醇洗脫得到β-蛻皮激素，取Fr.B 4部分，用半制 備高效液相色譜純化得到甲基原重樓皂苷I和甲基原重樓皂苷V，取Fr.B5部分，用半制備高 效液相色譜純化得到Pariposide A、重樓皂苷II、重樓皂苷III、重樓皂苷I和重樓皂苷V;取 Fr. B6部分，半制備高效液相色譜純化得到化合物PGRR和重樓皂苷H，將上述的重樓皂苷I和 重樓皂苷III按摩爾質(zhì)量比例1:1組合，得到PFE-PT65。4. 權(quán)利要求1所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或 耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用。5. 如權(quán)利要求4所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌 或耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其特征在于PFE-PT65的每日劑量為1~100mg/kg體重。6. 如權(quán)利要求4所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌 或耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其特征在于PFE-PT65每日給藥劑量為60mg/kg體重，制備成 每日3次/每次1片20mg普通片劑，每日2次/每次1片30mg普通片劑或每日1次/每次1片60mg 的片劑。7. 如權(quán)利要求4所述的長柱重樓單體皂苷組合PFE-PT65在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌 或耐藥鼻咽癌的藥物中的應(yīng)用，其特征在于PFE-PT65每日給藥劑量為90mg/kg體重，制備成 每日3次/每次1片30mg普通片劑、每日2次/每次1片45mg普通片劑或每日1次/每次1片90mg 的緩控式片劑。8. 長柱重樓抗癌活性部位PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥物 中的應(yīng)用。9. 如權(quán)利要求8所述的PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥物中 的應(yīng)用，其特征在于PFE-PT3每日給藥劑量為60mg/kg體重，制備成每日3次/每次1片20mg普 通片劑，每日2次/每次1片30mg普通片劑或每日1次/每次1片60mg的片劑。10. 如權(quán)利要求8所述的PFE-PT3在制備預(yù)防或治療耐藥乳腺癌或耐藥鼻咽癌的藥物中 的應(yīng)用，其特征在于PFE-PT3每日給藥劑量為90mg/kg體重，制備成每日3次/每次1片30mg普 通片劑、每日2次/每次1片45mg普通片劑或每日1次/每次1片90mg的緩控式片劑。
【文檔編號】A61P35/00GK106074588SQ201610516640
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月4日
【發(fā)明人】王躍虎, 周軼平, 梅任強(qiáng), 陳英杰, 楊珺, 施敏, 羅吉鳳, 楊永平, 李恒
【申請人】中國科學(xué)院昆明植物研究所, 昆明醫(yī)科大學(xué)