專利名稱：一種具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于以中草藥提取物作為活性成分而制成的藥物制劑及其制備領(lǐng)域，特別 是涉及一種具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊及其制備方法。
背景技術(shù)：
據(jù)世界衛(wèi)生組織的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，每年約有200萬(wàn)人患癌，2005年就有760萬(wàn)人死 于癌癥，占全世界5800萬(wàn)死亡總數(shù)的13%。目前臨床上常用的治療手段主要包括手術(shù)、放 療、化療。這三種治療手段的療效固然顯著，但對(duì)人體都不同程度地存在損傷或毒副作用。 采用西醫(yī)的化學(xué)合成藥物來(lái)治療癌癥療效顯著，但缺點(diǎn)是患者容易產(chǎn)生抗藥、耐藥性，并且 治療時(shí)難于區(qū)分腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞。具有抗腫瘤作用的中藥具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制血 管生成、逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化之功效，并且由于其為天然產(chǎn)物，因此不良 反應(yīng)及遺傳毒性低，所以可以在治療癌癥的同時(shí)對(duì)機(jī)體的功能從根本上進(jìn)行恢復(fù)，因此采 用中藥治療或輔助治療癌癥也是目前臨床上用于治療癌癥的一個(gè)重要手段。中藥重樓為百合科重樓屬植物滇重樓(Paris polyphylla Smith var. yannanensis)及七葉一枝花(paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara)的 根莖，具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效，用于治療臃腫、咽喉腫痛、毒蛇咬傷、跌打 傷痛、涼風(fēng)抽搐等癥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，重樓的醇提物、水提物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有抑 制作用，對(duì)動(dòng)物移植性腫瘤S180、S37、EAC、ARS、L759的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，并且具有 明顯的抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用。但到目前為止尚未發(fā)現(xiàn)以重樓總皂苷作為活性成分而制成的藥物 制劑見諸報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種具有較好的穩(wěn)定性，服用方便，并 且生物利用度高的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊。本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述重樓總皂苷膠囊的制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的重樓總皂苷膠囊是由重樓提取物重樓總皂苷 和藥學(xué)上常用的輔料組成，其中輔料包括稀釋劑、崩解劑和助流劑，重樓總皂苷、稀釋劑、 崩解劑和助流劑的重量比為2-40 100-400 0-20 0_20，重樓總皂苷粉中重樓皂 苷ΥΠ、重樓皂苷H、重樓皂苷I、重樓皂苷II的含量分別為5. 75士0. 25%,9. 58士0. 46%, 6. 92士0. 34%, 1. 82士0. 09%，總計(jì) 24. 08士 1. 20%。所述的稀釋劑選自淀粉、乳糖、糊精、甘露醇、微晶纖維素和糖粉中的一種或多種。所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和 交聯(lián)聚維酮中的一種或多種。所述的助流劑選自硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、硬脂酸、十二烷基硫酸鈉和十二 烷基硫酸鎂中的一種或多種。本發(fā)明提供的重樓總皂苷膠囊制備方法包括按順序進(jìn)行的下列步驟
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1)將重樓粉碎至顆粒狀，然后加入70% -90%的乙醇溶液，重樓與乙醇溶液的加 入比為Ig 4ml，將上述混合物加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每 毫升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮液用5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大 孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附樹脂干重的重量比為3 1-6 1，之后用水和 20% -30%的乙醇溶液依次對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用60% -90%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集 用60% -90%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、過(guò)篩而得到粉末狀重樓總皂苷；2)將上述重樓總皂苷與稀釋劑、崩解劑和助流劑以 2-40 100-400 0-20 0_20的重量比混合均勻，然后用常用的方法制成顆粒，干燥后裝 入由普通骨膠材料制成的硬膠囊即制成重樓總皂苷膠囊。本發(fā)明的重樓總皂苷膠囊是利用醇提和大孔吸附樹脂法來(lái)提取純化原料重樓中 的有效成分，并保持其活性，這樣不僅可使藥物中有效成分的溶出度大大提高，而且有助于 藥物的吸收，從而能夠提高其生物利用度。另外，膠囊劑具有吞服方便、穩(wěn)定性好、藥物與胃 腸道的接觸面積大，因而作用和吸收完全等諸多優(yōu)點(diǎn)，尤其便于老年及兒童患者服用。此 外，本發(fā)明的藥物中活性成分為天然物質(zhì)，因而患者長(zhǎng)期服用后毒副作用很小，所以安全性 好。此外，本發(fā)明的制備方法工藝簡(jiǎn)單，操作方便。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊及其制 備方法進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1 本實(shí)施例提供的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊組成如下重樓總皂苷IOg糊精8g乳糖80g交聯(lián)聚維酮2g制備方法將Ikg重樓粉碎至顆粒狀，然后加入4升70%的乙醇溶液，將上述混合物加熱回 流提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每毫升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮液 用5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附樹 脂干重的重量比為3 1，之后用3. 5升水、6升20%的乙醇溶液對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用 12升60%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集用60%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、 過(guò)篩而得到IOg粉末狀重樓總皂苷；將IOg重樓總皂苷、8g糊精、80g乳糖和2g交聯(lián)聚維酮 混合均勻，用90 %的乙醇溶液制成軟材，過(guò)篩制成顆粒，烘干，整粒，裝入由普通骨膠材料制 成的硬膠囊即可制成200粒重樓總皂苷膠囊。實(shí)施例2 本實(shí)施例提供的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊組成如下重樓總皂苷IOg乳糖85g交聯(lián)聚維酮5g
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制備方法將Ikg重樓粉碎至顆粒狀，然后加入4升80%的乙醇溶液，將上述混合物加熱回 流提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每毫升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮 液用5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附 樹脂干重的重量比為4 1之后用3. 5升水、5. 5升25%乙醇溶液對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用 11升70%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集用70%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、 過(guò)篩而得到IOg粉末狀重樓總皂苷；將IOg重樓總皂苷、85g乳糖和5g交聯(lián)聚維酮混合均 勻，用95%的乙醇溶液制成軟材，過(guò)篩制成顆粒，烘干，整粒，裝入由普通骨膠材料制成的硬 膠囊即可制成200粒重樓總皂苷膠囊。實(shí)施例3 本實(shí)施例提供的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊組成如下重樓總皂苷IOg糊精20g乳糖60g甘露醇5g羧甲基淀粉鈉5g將Ikg重樓粉碎至顆粒狀，然后加入4升80 %的乙醇溶液，將上述混合物加熱回流 提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每毫升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮液用 5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附樹脂 干重的重量比為5 1，之后用4升水、5升30%的乙醇溶液對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用10. 5升 80%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集用80%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、過(guò)篩而 得到IOg粉末狀重樓總皂苷；將IOg重樓總皂苷、IOg糊精、60g乳糖、5g甘露醇和5g羧甲 基淀粉鈉混合均勻，用95 %的乙醇溶液制成軟材，過(guò)篩制成顆粒，烘干，整粒，裝入由普通骨 膠材料制成的硬膠囊即可制成200粒重樓總皂苷膠囊。實(shí)施例4本實(shí)施例提供的具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊組成如下重樓總皂苷IOg糊精24g乳糖60g羧甲基淀粉鈉5g硬脂酸鎂Ig將Ikg重樓粉碎至顆粒狀，然后加入4升90 %的乙醇溶液，將上述混合物加熱回流 提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每毫升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮液用 5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附樹脂 干重的重量比為6 1，之后用4升水、5升30%的乙醇溶液對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用10升 90%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集用90%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、過(guò)篩而 得到IOg粉末狀重樓總皂苷；將IOg重樓總皂苷、25g糊精、50g乳糖，5g羧甲基淀粉鈉和Ig 硬脂酸鎂混合均勻，用95 %的乙醇溶液制成軟材，過(guò)篩制成顆粒，烘干，整粒，裝入由普通骨 膠材料制成的硬膠囊即可制成200粒重樓總皂苷膠囊。
下面對(duì)由上述實(shí)施例中制備出的重樓總皂苷膠囊中重樓皂苷ΥΠ、重樓皂苷H、重樓 皂苷II、重樓皂苷I的含量測(cè)定如下1、儀器與試藥Agilent高效液相色譜儀，蒸發(fā)光檢測(cè)器，色譜柱Kromasil C18(4. 6mmX 250mm, 5 μ m)。重樓皂苷ΥΠ、H、II、I對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。2、色譜條件色譜柱Kromasil C18 (4. 6X250mm，5 μ m)，流動(dòng)相乙腈(A)-水⑶梯度洗脫，流速 1. OmL/min,柱溫30°C。流動(dòng)相梯度洗脫見表1。表1流動(dòng)相梯度洗脫表 3、對(duì)照品溶液配制分別精密稱取重樓皂苷I、II、VD、H對(duì)照品置于IOmL容量瓶中，用甲醇溶解并稀 釋至刻度，得濃度為1. 298,0. 417,0. 234,0. 300 μ g/ μ L的混合對(duì)照品溶液，于4°C下保存4、供試品溶液的制備取上述實(shí)施例1制備出的重樓總皂苷膠囊中內(nèi)容物1克，加入甲醇20毫升，超聲 處理30分鐘，濾過(guò)，取過(guò)濾液作為供試品溶液。5、線性關(guān)系考察(見表2)表2各種對(duì)照品的線性方程
化合物回歸方程R2線性范圍 (昭 mL"1)重樓皂苷νπY=1.5605x4- 1.21840.99869.5-190重樓皂苷HY=1.5442χ+ 1.18590.99939.9-198重樓皂苷IIY=1.2191χ +0.86460.99597.1-142重樓皂苷IY=1.4302χ+ 1.47500.998313.4-2686、精密度、重現(xiàn)性、回收率考察(見表3)表3高效液相色譜法方法學(xué)考察
6 7、重樓總皂苷中各留體皂苷的含量測(cè)定
精密吸取供試品溶液10 μ L進(jìn)樣，記錄峰面積，計(jì)算含量(％ )，結(jié)果見表4。
表 4 1■樓總皂苷中各留體皂苷的含量重樓皂苷VD重樓皂苷H重樓皂苷II重樓皂苷I總計(jì)
含量5.75+ 9.58土1.82土6.92 士24.08 士(%)0.25% 0.46%0.09%0.34%1.20%利用本發(fā)明提供的制備方法制成的重樓總皂苷膠囊具有抗腫瘤作用，其藥理作用 可通過(guò)以下藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證。本發(fā)明提供的重樓總皂苷膠囊對(duì)小鼠移植瘤S180、小鼠肝癌H22實(shí)體瘤的影響按移植性腫瘤研究法接種S18tl肉瘤株、小鼠肝癌H22實(shí)體瘤腫瘤細(xì)胞，每個(gè)瘤株分 別接種50只昆明小白鼠，接種后24小時(shí)稱重量，并隨機(jī)分為5組，每組10只，即陰性對(duì)照 組、重樓總皂苷膠囊高劑量組(lg/kg)、重樓總皂苷膠囊中劑量組(0. 5g/kg)、重樓總皂苷 膠囊低劑量組(0. 2g/kg)和陽(yáng)性藥物組(環(huán)磷酰胺30mg/kg)，陰性對(duì)照組給予等量的生理 鹽水，灌胃給藥，1次/天，連續(xù)灌胃10天，于試驗(yàn)結(jié)束時(shí)摘瘤，稱重，將所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué) 處理(t檢驗(yàn))，結(jié)果見表5、6。表5重樓總皂苷膠囊對(duì)小鼠移植瘤S180的抑制作用(X士 SD) (η = 10) *P < 0. 01與生理鹽水對(duì)照組比較表6重樓總皂苷膠囊對(duì)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤的抑制作用(X士SD) (η = 10) *P < 0. 01與生理鹽水對(duì)照組比較由此可見，本發(fā)明提供的重樓總皂苷膠囊對(duì)小鼠移植瘤S180和肝癌H22實(shí)體瘤具 有明顯的抑制作用。
權(quán)利要求
一種重樓總皂苷膠囊，其特征在于所述的重樓總皂苷膠囊是由重樓提取物重樓總皂苷和藥學(xué)上常用的輔料組成，其中輔料包括稀釋劑、崩解劑和助流劑，重樓總皂苷、稀釋劑、崩解劑和助流劑的重量比為2 40∶100 400∶0 20∶0 20，重樓總皂苷粉中重樓皂苷Ⅶ、重樓皂苷H、重樓皂苷Ⅰ、重樓皂苷Ⅱ的含量分別為5.75±0.25％，9.58±0.46％，6.92±0.34％，1.82±0.09％，總計(jì)24.08±1.20％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重樓總皂苷膠囊，其特征在于所述的稀釋劑選自淀粉、乳 糖、糊精、甘露醇、微晶纖維素和糖粉中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重樓總皂苷膠囊，其特征在于所述的崩解劑選自羧甲基淀 粉鈉、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和交聯(lián)聚維酮中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重樓總皂苷膠囊，其特征在于所述的助流劑選自硬脂酸鎂、 滑石粉、微粉硅膠、硬脂酸、十二烷基硫酸鈉和十二烷基硫酸鎂中的一種或多種。
5.一種如權(quán)利要求1所述的重樓總皂苷膠囊的制備方法，其特征在于所述的重樓總 皂苷膠囊的制備方法包括按順序進(jìn)行的下列步驟1)將重樓粉碎至顆粒狀，然后加入70%-90%的乙醇溶液，重樓與乙醇溶液的加入 比為Ig 4ml，將上述混合物加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，合并提取液并濃縮至每毫 升濃縮液相當(dāng)于Ig生藥；將上述濃縮液用5倍的水稀釋，過(guò)濾，然后將濾液通過(guò)DlOl大 孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，重樓與大孔吸附樹脂干重的重量比為3 1-6 1，之后用水和 20% -30%的乙醇溶液依次對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，再用60% -90%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集 用60% -90%乙醇溶液洗脫后的洗脫液，濃縮、干燥、粉碎、過(guò)篩而得到粉末狀重樓總皂苷；2)將上述重樓總皂苷與稀釋劑、崩解劑和助流劑以2-40 100-400 0-20 0-20的 重量比混合均勻，然后用常用的方法制成顆粒，干燥后裝入由普通骨膠材料制成的硬膠囊 即制成重樓總皂苷膠囊。
全文摘要
一種具有抗腫瘤作用的重樓總皂苷膠囊及其制備方法。膠囊是由重樓提取物重樓總皂苷和藥學(xué)上常用的輔料組成，輔料包括稀釋劑、崩解劑和助流劑，重樓總皂苷、稀釋劑、崩解劑和助流劑的重量比為2-40∶100-400∶0-20∶0-20。本發(fā)明的重樓總皂苷膠囊是利用醇提和大孔吸附樹脂法來(lái)提取純化原料重樓中的有效成分，并保持其活性，這樣不僅可使藥物中有效成分的溶出度大大提高，而且有助于藥物的吸收，從而能提高其生物利用度。另外，膠囊劑具有吞服方便、穩(wěn)定性好、藥物與胃腸道的接觸面積大，因而作用和吸收完全等諸多優(yōu)點(diǎn)，尤其便于老年及兒童患者服用。此外，本藥物中活性成分為天然物質(zhì)，因而患者長(zhǎng)期服用后毒副作用很小，所以安全性好。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101912514SQ20101023825
公開日2010年12月15日 申請(qǐng)日期2010年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月27日
發(fā)明者楊柳, 滿淑麗, 王潔銀, 高文遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:天津大學(xué)