龍膽苦苷栓劑的制備及在解熱藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明使用從龍膽科植物秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)中提取的龍膽苦苷，用混合脂肪酸甘油脂做成直腸栓劑，使用中國藥典中家兔熱源檢查法為動物實驗?zāi)Ｐ?，以阿司匹林為陽性對照，證明了龍膽苦苷栓劑具有解熱作用。
【專利說明】
龍膽苦苷栓劑的制備及在解熱藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及龍膽苦苷或含龍膽苦苷50%以上的龍膽總苷栓劑的制備方法及其在解 熱藥物中的應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002] 發(fā)燒，是醫(yī)學(xué)臨床中常見的病癥。主要表現(xiàn)就是體溫升高。引起發(fā)燒的原因很多， 主要是細菌、病毒感染、腫瘤、自身免疫病、血液病等以及不明發(fā)燒。相比之下，兒童發(fā)燒尤 為常見，兒童發(fā)燒除外感風(fēng)寒風(fēng)熱外主要是積食引起。
[0003] 龍膽苦苷是從中藥天然藥物中提取的化學(xué)成分，含量在98%以上，具有抗菌、抗病 毒、促進胃腸動力的作用，適用小兒發(fā)燒癥狀的解除，產(chǎn)生解熱作用。另外，栓劑使用方便， 痛苦少，藥物通過直腸直接吸收，進入毛細血管，易吸收入血，作用快捷。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供龍膽苦苷或含龍膽苦苷50%以上的龍膽總苷栓劑的制備方 法及其在解熱鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
[0005] 解決上述技術(shù)問題的方案是： 龍膽苦苷栓劑的制備方法是:有效成份為龍膽苦苷或含龍膽苦苷50%以上的龍膽總苷， 使用脂溶性基質(zhì)或水溶性基質(zhì)，加熱熔化法制成栓劑。優(yōu)選的情況下，選用以混合脂肪酸甘 油脂為基質(zhì)。
[0006] 上述制備方法制備得到的龍膽苦苷栓劑在解熱藥物中的應(yīng)用，所述龍膽苦苷栓劑 最好為直腸栓劑。
[0007] 本發(fā)明使用從龍膽科植物秦充(Gentiana macrophylla Pall.)中提取的龍膽苦 苷，用混合脂肪酸甘油脂做成直腸栓劑，使用中國藥典中家兔熱源檢查法為動物實驗?zāi)Ｐ停?以阿司匹林為陽性對照，證明了龍膽苦苷栓劑具有解熱作用。
[0008] 說明書附圖 圖1家兔給藥后體溫實測圖； 圖2家兔給藥后的溫度變化值； 圖3家兔給藥后的溫度變化圖。
【具體實施方式】
[0009] 為更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用實驗及結(jié)果說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。
[0010] 本發(fā)明從秦艽或龍膽科其它植物中提取分離出龍膽苦苷或龍膽總苷(本專利申請 是用西北大學(xué)陜西省生物醫(yī)藥重點實驗室提供的龍膽總苷，批號為20160503)，以混合脂肪 酸甘油脂為基質(zhì)，加熱熔化法制成栓劑，使用Ig的栓劑模型放冷成型。制備大劑量組、中劑 量組、小劑量組、空白對照組、陽性藥組(阿司匹林為陽性對照藥），以家兔為實驗動物，注射 細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生家兔發(fā)燒病理模型，用上述制成的栓劑治療觀察。經(jīng)統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示陽 性對照組、給藥組都有解熱作用，使發(fā)燒家兔的體溫降低，其中小劑量組與阿司匹林陽性對 照組相當(dāng)（P>〇. 05)。
[0011] 實施例1 1.受試藥物龍膽苦苷，味苦，白色結(jié)晶性固體，經(jīng)HPLC法測定含量為98.6%。
[0012]陽性對照藥物阿司匹林腸溶片，市售，含量240mg/片，進口藥品注冊證號 H20130078,進口分裝企業(yè)，拜耳醫(yī)藥保健有限公司。
[0013]栓劑的制備 3.1實驗材料和試劑 水浴鍋、小燒杯、玻璃棒、小刀、子彈型栓劑模型、天平、混合脂肪酸甘油酯、拜阿司匹 林腸溶片、甘油。
[0014] 純基質(zhì)栓的制備 純基質(zhì):混合脂肪酸甘油酯 稱取IOg混合脂肪酸甘油酯置于小燒杯中，于60°C水浴上加熱，待2/3基質(zhì)熔化后停止 加熱，不斷攪拌使其全部熔化，待基質(zhì)成粘稠狀態(tài)時，迅速傾入涂有甘油的Ig栓劑模型中， 冷卻凝固后用刀片削去栓模上溢出部分，脫模，得到完整的純基質(zhì)栓數(shù)枚。
[0015] 阿司匹林栓劑（陽性對照）的制備 阿司匹林栓劑含量:240mg/粒 將阿司匹林腸溶片研細為粉末(藥粉必須過六號篩）。稱取一定量的藥粉和適量的混合 脂肪酸甘油酯，先在60°C恒溫水浴下將2/3的混合脂肪酸甘油酯熔融后停止加熱，攪拌至全 部熔化后分次加入藥粉，不斷攪拌使藥品均勻分散在基質(zhì)中，待其呈現(xiàn)粘稠狀時，迅速將其 注入涂有甘油的Ig的栓模中，待其冷卻后，用刀片削去溢出部分，脫模，得到完整的含藥栓。
[0016] 龍膽苦苷栓劑的制備 龍膽苦苷栓劑含量:①大劑量240mg/粒②中劑量160mg/粒③小劑量80mg/粒。
[0017] 按照上述含量稱取一定量的藥物粉末(藥物必須過六號篩)與混合脂肪酸甘油酯， 先在50°C恒溫水浴下將2/3的基質(zhì)熔化后停止加熱，攪拌使全部熔化，后分次加入藥品，不 斷攪拌使藥品均勻分散在基質(zhì)中，待混合物呈粘稠狀時，迅速傾入涂有甘油的Ig栓模中，冷 卻凝固后用刀片削去溢出部分，脫模，得到完整的含藥栓數(shù)枚。
[0018] 解熱活性測定 4.1實驗動物 實驗動物:雄性新西蘭兔20只，體重在1.8kg~2.5kg，由西安市迪樂普生物資源開發(fā)有 限公司，許可證號:SYXK(陜)2014-001，實驗單位使用許可證編號:SYXK(陜)2010-004。
[0019] 飼養(yǎng)條件:飼料為實驗動物專用飼料(西安市迪樂普生物資源開發(fā)有限公司生產(chǎn)） 和新鮮的蓮花白，在實驗室喂養(yǎng)，適應(yīng)一周;實驗期間動物分籠飼養(yǎng)于15~25 °C的室溫下， 空氣流通，相對濕度約42%~45%，隨意攝食飲水。
[0020] 實驗材料與試劑 材料:5ml玻璃注射器、鑷子，白布帶、木板、電子體溫計(歐姆龍有限公司生產(chǎn)）、100ml 量筒、酒精棉球、手術(shù)小剪刀，體重稱(江蘇蘇宏醫(yī)療器械有限公司）。
[0021 ]試劑:0.9%生理鹽水、凡士林，細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（來源于中國食品藥品檢定 研究院批號 150601-201580 80EU/支） 4.3實驗方法 4.3.1細菌內(nèi)毒素的配制 將80 EU/支的細菌內(nèi)毒素先用少量0.9%氯化鈉溶液反復(fù)溶解，待完全溶解后倒入 100mL量筒中，再用0.9%氯化鈉溶液將細菌內(nèi)毒素稀釋至14.5 EU/ml。
[0022] 實驗動物分組 對雄性新西蘭兔稱重后隨機分為5組，每組2只。分別是： ⑴空白對照組：純基質(zhì) ⑵陽性對照組:阿司匹林栓劑含量:240mg/粒 ⑶小劑量組:龍膽苦苷栓劑含量:80mg/粒 ⑷中劑量組:龍膽苦苷栓劑含量：160mg/粒 (5)大劑量組:龍膽苦苷栓劑含量:240mg/粒 以上實驗共重復(fù)三次，且保證相鄰次數(shù)間所用兔子不同；每次測量8小時，每個劑量組 共做6只。
[0023] 實驗步驟： ㈠ 實驗前家兔需禁食12h，第二天實驗時將家兔隨機分為五組，即空白組，陽性對照組， 大劑量組，中劑量組，小劑量組。分組完畢后，稱量每只家兔的體重并記錄。
[0024] (二)用注射器吸取大約5ml的溫開水給家兔灌腸，使其體腔道內(nèi)殘留的糞便排出。排 出糞便后，將家兔固定于木板上，背部朝上，固定約1.5h，待其安靜后。
[0025] ㈢待家兔安靜后，再用體溫計測量它的初始體溫(將體溫計的末端涂上凡士林，然 后插入家兔的肛門約5cm，待體溫計穩(wěn)定后讀數(shù)。初始體溫必須測量兩次或以上，待相鄰兩 次測量體溫之差不超過〇. 2 °C即可記錄，求兩次平均值即為初始體溫。） (H)待其體溫恒定時，將家兔放在固定盒中將其頭部固定，把每只家兔耳緣部的毛剪掉 以使耳緣靜脈清晰可見，然后從耳部靜脈注射細菌內(nèi)毒素，注射量與家兔的體重有關(guān)，為29 EU/kg〇
[0026] (1)注射完內(nèi)毒素后，每隔0.5h記錄一次家兔的體溫，共記錄2小時。
[0027]㈥確認(rèn)家兔發(fā)熱模型已經(jīng)建立后，將制備好的栓劑塞入家兔的肛門內(nèi)（給藥時，先 握住家兔的尾巴，將其臀部微微抬起后，確認(rèn)好肛門的位置之后進行給藥），空白組給藥純 基質(zhì)栓劑，陽性對照組給藥240mg/粒阿司匹林栓劑，大劑量組給藥含量為240mg/粒的龍膽 苦苷栓劑，中劑量組給藥含量為160mg/粒的龍膽苦苷栓劑，小劑量組給藥含量為80mg/粒的 龍膽苦苷的栓劑。從給藥后開始計時，每隔30min記錄一次體溫，共記錄6h。
[0028] 注意：①給藥后應(yīng)立即用衛(wèi)生紙輕輕堵住肛門處5分鐘，防止栓劑在家兔體內(nèi)融 化后流出來，從而影響實驗結(jié)果； ② 每次測量溫度時都需要將溫度計上涂取適量的凡士林，以免破壞家兔直腸腔道內(nèi)粘 月旲出血； ③ 實驗時盡可能保證室內(nèi)安靜且溫度恒定，以免對測量溫度有所影響。
[0029] 數(shù)據(jù)處理 計算每只家兔相鄰時間點的溫度變化值ΛΤ，再求出每組六只家兔ΛΤ的平均值寵和 標(biāo)準(zhǔn)差S，計算結(jié)果最終用靈土S表示;數(shù)據(jù)比較采用t檢驗。處理后的結(jié)果如下： 裘i E門桂對Iil內(nèi)霉素致熱后家兔體徵變表

注5組_進行？檢驗、茍望臼組比，V也私 由表1可知與空白對照組對比，其他組的體溫總趨勢均有明顯降低;經(jīng)過計算可得知降 溫效果為：中劑量組〈大劑量組〈小劑量組〈阿司匹林，而與空白組相比，中劑量組體溫也明 顯下降，但相比較于小劑量和大劑量弱些，可能是量效區(qū)間直線范圍造成基家兔個體性差 異引起。由上表中的空白組可看出發(fā)熱模型建立后，與發(fā)熱時的溫度相比，純基質(zhì)溫度趨于 上升，即給純基質(zhì)藥物對家兔的體溫沒有很大影響;在給陽性對照藥品和龍膽苦苷后，其體 溫均有下降趨勢，同時大劑量組、小劑量組、陽性對照組和空白組栓劑t檢驗，均有顯著性差 異(Ρ〈0·01)〇
[0030] 由圖1，可知當(dāng)家兔發(fā)熱模型已經(jīng)建立后，對其進行給藥，除空白組外，其他均有明 顯的降溫，給藥4.5小時以后，兔子的體溫趨于穩(wěn)定。在給藥2-2.5h時，體溫下降最為明顯， 總體來說，可以看出龍膽苦苷具有降溫作用。
[0031] 由圖2、圖3可知，與動物發(fā)熱均數(shù)相比，在給藥后，空白對照組沒有降溫現(xiàn)象，可說 明純基質(zhì)不會導(dǎo)致家兔體溫降低；陽性對照組降溫很明顯，與陽性對照組相比，小劑量組的 降溫效果也很明顯，其次是大劑量，中劑量的溫度變化較不明顯。在4.5h時，體溫趨于穩(wěn)定。 綜上所述，說明龍膽苦苷對家兔內(nèi)毒素導(dǎo)致的發(fā)熱有明顯的降溫作用。
[0032] 實施例2 藥用龍膽苦苷或龍膽苦苷 8~24克 混合脂肪酸甘油酯約 100克 制備工藝按栓劑常規(guī)制法制作成約100粒。
[0033] 實施例3 藥用龍膽苦苷或龍膽苦苷 8~48克 混合脂肪酸甘油酯約 100克 制備工藝按栓劑常規(guī)制法制作成約100粒。
[0034] 實施例4 藥用龍膽苦苷或龍膽苦苷 8~48克 水溶性基質(zhì)（如S-40)約 100克 制備工藝按栓劑常規(guī)制法制作成約100粒。
【主權(quán)項】
1. 龍膽苦苷栓劑的制備方法，其特征在于:有效成份為龍膽苦苷或含龍膽苦苷50%以上 的龍膽總苷，使用脂溶性基質(zhì)或水溶性基質(zhì)，加熱熔化法制成栓劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：以混合脂肪酸甘油脂為基質(zhì)。3. 權(quán)利要求1所述制備方法制備得到的龍膽苦苷栓劑在解熱藥物中的應(yīng)用。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述應(yīng)用，其特征在于所述龍膽苦苷栓劑為直腸栓劑。
【文檔編號】A61P29/00GK106074587SQ201610462221
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月24日
【發(fā)明人】孫文基, 尚平平, 謝人明, 楊洋, 翟西峰, 任梅梅, 姚青
【申請人】西北大學(xué)