查爾酮類化合物的抗腫瘤用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及查爾酬類化合物的抗腫瘤用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 肺癌是發(fā)病率和死亡率增長最快，對(duì)人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。 在所有肺癌中，80 %W上為非小細(xì)胞肺癌。
[0003] 肺腺癌是非小細(xì)胞肺癌中主要的病理類型之一，較容易發(fā)生于女性及不抽煙者。 起源于支氣管粘膜上皮，少數(shù)起源于大支氣管的粘液腺。發(fā)病率比鱗癌和未分化癌低，發(fā)病 年齡較小，女性相對(duì)多見。多數(shù)腺癌起源于較小的支氣管，為周圍型肺癌。
[0004] 肺癌的病因至今尚不完全明確，吸煙、職業(yè)和環(huán)境接觸、電離福射、既往肺部慢性 感染、遺傳、大氣污染等都被認(rèn)為是發(fā)生肺癌的高危因素。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了式（I)或式（II)所示查爾酬類化合物、或其順式異構(gòu)體、或其藥 學(xué)上的鹽在制備抗腫瘤藥物中的用途：
[0006]
[0007] 其中，Ri~R12分別獨(dú)立地選自氨、徑基或甲氧基，且Ri。~R12不同時(shí)為甲氧基。
[0008] 優(yōu)選地，在式（I)中，Ri選自氨，R2選自甲氧基，Rs選自氨，R4~Re分別獨(dú)立地 選自氨、徑基或甲氧基；在式（II)中，R,~Rg均選自甲氧基，Ri。~Ri2分別獨(dú)立地選自氨、 徑基或甲氧基，且Ri。~R12不同時(shí)為甲氧基。
[0009] 進(jìn)一步優(yōu)選地，在式（I)中，Ri選自氨，R2選自甲氧基，R3選自氨，R4選自氨、美圣 基或甲氧基，Rs選自徑基，Re選自氨、徑基或甲氧基；或者，Ri選自氨，R2選自甲氧基，Rs選 自氨，R4選自氨、徑基或甲氧基，R5選自甲氧基，Re選自氨、徑基或甲氧基。
[0010] 更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述查爾酬類化合物為如下之一：
[0011]
[0012] 進(jìn)一步地，所述抗腫瘤藥物是治療肺癌的藥物；更進(jìn)一步地，所述治療肺癌的藥物 是治療非小細(xì)胞肺癌的藥物；更進(jìn)一步地，所述治療非小細(xì)胞肺癌的藥物是治療肺腺癌的 藥物。
[0013] 本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它是W前述化合物、或其順式異構(gòu)體、或其藥學(xué) 上可接受的鹽為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料制備而成的制劑。本發(fā)明還提供了前 述藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。
[0014] 其中，所述抗腫瘤藥物是治療肺癌的藥物；優(yōu)選地，所述治療肺癌的藥物是治療非 小細(xì)胞肺癌的藥物；更優(yōu)選地是治療肺腺癌的藥物。
[0015] 所述"前述化合物"包括式（I)或式（II)所示的查爾酬類化合物，也包括更具 體的化合物1-5中的任一種
[0016] 抗腫瘤活性試驗(yàn)證明，本發(fā)明的查爾酬類化合物，尤其是化合物1、2、3、4、5,能夠 抑制腫瘤細(xì)胞增殖，尤其對(duì)肺癌，更具體的是非小細(xì)胞肺癌中的肺腺癌，療效確切，具有良 好臨床應(yīng)用前景。
[0017] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可W做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0018]W下通過實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于W下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例1化合物1的合成、純化、結(jié)構(gòu)鑒定和藥理活性測定
[0020] (1)實(shí)驗(yàn)材料： 陽02U ①試劑
[0022] 2' ,4'-二甲氧基苯乙酬（98%，100g，Alfa試劑公司）； 陽02；3] 4-徑基苯甲醒（99%，25g，阿達(dá)瑪斯試劑公司）；
[0024] 氨氧化鐘（成都科龍化工試劑廠）；
[0025] 95 %乙醇（成都科龍化工試劑廠）；
[0026] 甲醇（成都科龍化工試劑廠）；
[0027]二氯甲燒（成都科龍化工試劑廠）；
[0028] 二甲基亞諷（DMSO)(成都科龍化工試劑廠）；
[0029] 二甲基亞諷（色譜級(jí)）（Sigma公司）；
[0030] 1640培養(yǎng)基、胎牛血清曲clone公司生產(chǎn)）；
[0031] 膜蛋白酶（Gibco公司）；
[0032] MTT(Amresco公司）；
[0033] 所用其它試劑均為分析純。
[0034] ②實(shí)驗(yàn)儀器
[0035]HWCL-1恒溫磁力攬拌浴（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；
[0036] WatersSynaptGzHDMS高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜（美國Waters);
[0037] 化址er-AV-GOO核磁共振儀（瑞:t化址er);
[0038] BP211D十萬分之一電子天平（瑞±Sartorius);
[0039] R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（瑞±腳邸1);
[0040] DZG-6050型真空干燥箱（上海森信）；
[0041]酶標(biāo)儀（Thermo3001，ThermoFisherScientific公司）；
[00創(chuàng) 電子天平（ESJ120-4型，沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司）；
[0043] 超凈臺(tái)（MCV-BieiFOO，日本SANYO公司）；
[0044] 顯微鏡（PrimoVert,AxioCamERc5s，ZEISS公司）；
[0045]C〇2培養(yǎng)箱（皿.CP-T，上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）。 W46] ③細(xì)胞
[0047]肺癌細(xì)胞A549來源于美國ATCC公司。 |；0048] 似2 ' , 4 '-二甲氧基苯乙酬（3mmo；L)、4-徑基苯甲醒（3mmo；L)、氨氧化鐘 (15mmol)和20血95%乙醇，室溫?cái)埌杷?，加水澤滅，終止反應(yīng)。將樣品蒸干后分散于二氯 甲燒-水（1:1)中，用分液漏斗萃取3次，每次2〇1^，收集二氯甲燒層，濃縮。將樣品上硅膠 柱色譜，W流動(dòng)相二氯甲燒-甲醇（30 : 1)進(jìn)行等度洗脫，結(jié)合薄層色譜對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行 追蹤檢測，合并含有目標(biāo)產(chǎn)物的相同部分，回收溶劑，得到濃縮物。濃縮物再經(jīng)制備薄層的 方法，W二氯甲燒：甲醇（20 : 1)為展開劑進(jìn)行展開，刮板得到目標(biāo)產(chǎn)物，采用二氯甲燒： 甲醇（3 : 1)洗脫，回收溶劑，得到化合物1(純度99. 2%，產(chǎn)率：75%)。 W例 餅化合物的結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)礎(chǔ)NMR (600MHz，CDC!3)δ:7.73aH，d，J =9. OHz, H-6 ' )，7. 64 (IH, d, J = 16. 2Hz，H-3)，7. 47 ( 2H，d，J = 9.0Hz,H-2",6 ") ,7. 37 (IH, d, J= 16.2Hz,H-2),6.87(2H, d, J= 9. 0Hz，H-3"，5" )，6. 56(lH，dd，J = 9. 0,2. 4Hz，H-5' )，6. 50(lH，d，J = 2. 4Hz，H-3')，3. 89 (3H,s,OMe)，3. 87 (3H,s,OMe); (+)-ESIMS m/z 285.1[M+H]+，307.1[M+Na]\
[0050] (4)抗腫瘤活性試驗(yàn)
[0051] ①細(xì)胞接種
[0052] 用0.25%膜酶消化對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞。用含10%FBS的細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)配成單 細(xì)胞懸液。采用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，將狀態(tài)良好的A549腫瘤細(xì)胞接種于96孔板，使細(xì)胞密度 為4X103個(gè)/mU每孔加入細(xì)胞懸液100 置于37°C，5%C〇2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2地。
[0053] ②藥物處理
[0054] 每個(gè)樣品從40μg/mL開始，用培養(yǎng)基梯度稀釋樣品，2倍稀釋，設(shè)置5個(gè)藥物濃度， 每個(gè)濃度做復(fù)孔測試。W濃度為40、20、10、5、2. 5μg/mL每孔加藥100μ以每個(gè)濃度設(shè)3個(gè) 復(fù)孔，重復(fù)3次。陰性對(duì)照組為含有適量DMSO的培養(yǎng)基溶液，空白對(duì)照組為不含細(xì)胞的培 養(yǎng)基和溶媒。將96孔板放回培養(yǎng)箱，37°C作用72h。 陽〇5引③顯色及ICs。的計(jì)算
[0056] 7化作用完畢后，避光條件下每孔加入MTT溶液巧g/L) 20μ以繼續(xù)溫育培養(yǎng)地 后，棄掉上清液，每孔加入150μLDMS0,置于搖床上慢速振搖lOmin，使甲瑣充分溶解后，用 酶標(biāo)儀測量570nm波長處的0D值，按下列公式計(jì)算增殖抑制率。
[0057] 細(xì)胞抑制增值率％= [1-(0D給藥組-0D空白組）/(00陰性組-0D空白組）]X100%
[005引不同濃度下的抑制率計(jì)算結(jié)果如表1所示：
[0059] 表1化合物1