一種棉酚及其衍生物棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種藥物載體的制備方法，具體為一種棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法。
【背景技術】
[0002]棉酚是一類多酚羥基雙萘醛類化合物，是從錦葵科植物棉花的種子中提取的一種天然產(chǎn)物。
[0003]棉酚具有有效的抑制精子形成的作用，曾作為一種男用避孕藥被廣泛使用。近年來棉酚及其衍生物的抗腫瘤特性被人們所發(fā)現(xiàn)，它們對于多種腫瘤細胞具有抑制細胞增殖的作用，尤其對前列腺癌有很好的療效。棉酚及其衍生物還可以降低DNA聚合酶的活性，抑制腫瘤細胞增值。棉酚及其衍生物也可以和腫瘤細胞線粒體BcL-2受體結合，促使腫瘤細胞產(chǎn)生細胞凋亡。
[0004]但是棉酚及其衍生物在使用的時候尚有一些缺點，它們的水溶性差，且在環(huán)境中容易氧化。所以將棉酚及其衍生物負載于載體中是一種很好的選擇。目前有關棉酚及其衍生物制劑的專利主要集中在口服液、針劑等方面?？乱槐５热酥苽淞怂苄悦薹又苿?，包括口服液、針劑、散劑、片劑和膠囊等制劑(水溶性棉酚制劑及其制備方法，申請?zhí)?95111745.9);厲保秋制備并申請了專利“治療腫瘤的棉酚靜脈注射脂肪乳劑”和“用于治療腫瘤的左旋棉酚或其醋酸鹽的環(huán)糊精包合物”(申請?zhí)?201010164008.3與201110051335.2);但是這些口服給藥的劑型對于抗腫瘤治療效果有限，靜脈注射的乳劑劑型由于本身載體尺度較大，亦不利于藥物作用于腫瘤組織。納米尺度的載體可以利用腫瘤組織本身的增強透過性與滯留效應，使藥物載體在腫瘤組織內(nèi)部停留更長時間，達到更好的治療效果。目前關于棉酚的納米載體的報道并不多，詹勇華等人用介孔氧化硅負載棉酚(一種一鍋法制備多功能棉酚納米制劑的方法，申請?zhí)?201310162469.0)，以及介孔氧化娃負載另一種棉酸衍生物(一種攜載棉酸衍生物的多功能介孔娃納米制劑的制備方法，申請?zhí)?201310016135.2)。以上研究大都使用介孔氧化硅氧化硅、硅凝膠等載體負載棉酚，但是介孔氧化硅和硅凝膠在體內(nèi)不能很快降解，影響了其在體內(nèi)的應用。李科等人發(fā)明了“自組裝法制備棉酚及其衍生物普郎尼克納米粒子的方法”(申請?zhí)?201410668713.5)。該方法利用表面活性劑對疏水性的棉酚及其衍生物進行包裹，大量的表面活性劑不利于其在生物體內(nèi)使用。
[0005]棕櫚蠟是一種從棕櫚科植物棕櫚的葉子中提取的天然植物蠟，具有減少植物水分蒸發(fā)的作用。棕櫚蠟本身具有良好的乳化性，是工業(yè)中使用最為廣泛的植物蠟之一。作為一種天然產(chǎn)物，棕櫚蠟也有著良好的生物相容性。
[0006]目前有關棕櫚蠟作為制劑的專利大都是將其用于涂料、造紙、車輛保養(yǎng)液等工業(yè)產(chǎn)品領域。棕櫚蠟作為天然產(chǎn)物用作日常使用報道主要是化妝品。陸飛等人將棕櫚蠟作為口紅的主要成分(一種可食用口紅的制作方法，申請?zhí)朇N201310309559.8)。將棕櫚蠟用作藥物載體的報道很少，溫德爾*G.門多薩等人使用棕櫚蠟制備檸檬酸鉀蠟基質片劑(生產(chǎn)緩釋檸檬酸鉀蠟基質片劑的方法，申請?zhí)?CN201280075895.4)。將棕櫚蠟作為藥物納米載體制劑并未見有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法，將脂溶性藥物棉酚及其衍生物負載于棕櫚蠟納米顆粒之中，其載藥量高，生物相容性好，可用于靜脈注射；采用超聲乳化法制備藥物固體脂納米顆粒，其生產(chǎn)工藝簡單，產(chǎn)品穩(wěn)定性好，納米顆粒粒徑均勾。
[0008]為了達到上述目的，本發(fā)明的技術方案是這樣實現(xiàn)的。
[0009]—種棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法，包括以下步驟:
[0010]步驟一、將5-100mg棉酚及其衍生物溶解在l_20mL有機溶劑中，在100K Hz超聲下進行分散，分散時間為3-30分鐘，制成棉酚有機溶劑混合物；
[0011]所述棉酚及其衍生物包括:醋酸棉酸，阿樸棉酸，左旋棉酸，阿樸棉酚酮(ApoG2)，棉酚酮，甲基棉酚，棉酚席夫堿，單醛棉酚，乙酰棉酚或單醚棉酚中的一種；
[0012]所述有機溶劑為乙醇、氯仿、乙醚、環(huán)己烷、正己烷中的一種或兩種有機溶劑在比 1:1-1:10 (V/V)之間的混合物；
[0013]步驟二、取0.5-lg棕櫚蠟，加熱融化；將步驟一中的棉酚及其衍生物有機溶劑混合物10-20mL與融化的棕櫚蠟充分混合，使用旋轉蒸發(fā)儀減壓蒸餾將體系中的有機溶劑去除，得到5-100mg/mL的棉酚棕櫚蠟混合物；
[0014]步驟三、配置濃度為0.5-1% (Μ/V)的表面活性劑水溶液:
[0015]所述的表面活性劑為普朗尼克F127、普朗尼克F68、十二烷基三甲基氯化銨、十六烷基三甲基溴化銨、吐溫-20、吐溫-80、司盤-80中的一種或比例在1:1-1:10 (M/M)之間的混合物；
[0016]步驟四、將步驟三中的棉酚棕櫚蠟混合物加熱融化，取50 μ L-lml于試管中，加入l-30mL表面活性劑水溶液，在冰水浴條件下，使用超聲探頭，采用100-400?功率超聲2_10分鐘，使其形成納米固體脂顆粒；
[0017]步驟五:使用截留分子量30萬道爾頓的離心透析管對樣品進行透析，去除體系中的表面活性劑；
[0018]步驟六、采用220nm濾膜過濾，得到負載棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體。
[0019]本發(fā)明所述的一種棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備工藝，將含有棉酚及其衍生物的有機溶劑溶液與棕櫚蠟在融融狀態(tài)下混合，減壓蒸餾除去有機溶劑，得到的混合物在超聲波的作用下，在表面活性劑水溶液中形成納米顆粒。透析除去表面活性劑，過濾滅菌后，所制備的棉酚及其衍生物棕櫚蠟固體脂藥物載體可直接用于靜脈注射給藥。
[0020]本發(fā)明選用棕櫚蠟作為藥物包材，首先制備了高濃度比例的棉酚及其衍生物棕櫚蠟混合物，然后將其在表面活性劑水溶液中超聲分散，形成固體脂納米顆粒；該制劑一方面克服了棉酚及其衍生物水溶性差的缺點，另一方面賦予棉酚及其衍生物穩(wěn)定的緩慢釋放特性，同時還具有良好的生物相容性，改善了棉酚及其衍生物的治療效果；得到了一種安全、穩(wěn)定、可靠、治療好的棉酚及其衍生物靜脈注射載藥體系。
【附圖說明】
[0021]圖1為棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體制備的流程圖。
[0022]圖2為棉酚及其衍生物的棕櫚蠟固體脂藥物載體的粒徑分布，分別為實施例一、六和十所得。
[0023]圖3為實施例四所得棉酚及其衍生物棕櫚蠟固體脂藥物載體的透射電鏡照片。
【具體實施方式】
[0024]下面結合附圖和【具體實施方式】對本發(fā)明做詳細敘述。
[0025]實施例一
[0026]—種醋酸棉酚的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法，包括以下步驟:
[0027]步驟一、將25mg醋酸棉酚在10mL乙醇中，在100K Hz超聲下進行分散，分散時間為3分鐘，制成醋酸棉酚乙醇混合物；
[0028]步驟二、取lg棕櫚蠟，加熱融化，將步驟一中的醋酸棉酚乙醇混合物10mL與融化的棕櫚蠟充分混合，使用旋轉蒸發(fā)儀減壓蒸餾將體系中的乙醇除去，得到25mg/mL的醋酸棉酚棕櫚蠟混合物；
[0029]步驟三、配置濃度為0.5% (Μ/V)的普朗尼克F127水溶液；
[0030]步驟四、將步驟三中的醋酸棉酚棕櫚蠟混合物加熱融化，取50 μ L于試管中，加入4mL 0.5% (Μ/V)普朗尼克F127溶液，在冰水浴條件下，使用超聲探頭，采用400w功率超聲2分鐘使其形成納米固體脂顆粒；
[0031]步驟五、使用截留分子量30萬道爾頓的離心透析管對樣品進行透析，從而去除體系中的表面活性劑；
[0032]步驟六、采用220nm濾膜過濾，得到負載醋酸棉酚的棕櫚蠟固體脂藥物載體。
[0033]本實施例中所用方法制備載醋酸棉酚的棕櫚蠟固體脂藥物載體粒徑為58nm，載藥量為2.5%。
[0034]實施例二
[0035]—種阿樸棉酚酮的棕櫚蠟固體脂藥物載體的制備方法，包括以下步驟:
[0036]步驟一、將50mg阿樸棉酚酮溶解在20mL乙醇中，在100K Hz超聲下進行分散，分散時間為30分鐘，制成阿樸棉酚酮乙醇混合物；
[0037]步驟二、取0.5g棕櫚蠟，加熱融化；將步驟一中的阿樸棉酚酮乙醇混合物20mL與融化的棕櫚蠟充分混合，使用旋轉蒸發(fā)儀減壓蒸餾將體系中的乙醇除去，得到100mg/mL的阿樸棉酚酮棕櫚蠟混合物；
[0038]步驟三、配置濃度為1% (Μ/V)的普朗尼克F127水溶液；
[0039]步驟四、將步驟三中的阿樸棉酚酮棕櫚蠟混合物加熱融化，取100 μ L于試管中，加入4mL 1% (Μ/V)普朗尼克F127溶液，在冰水浴條件下，使用超聲探頭，采用400w功率超聲10分鐘使其形成納米固體脂顆粒；
[0040]步驟五、使用截留分子量30萬道爾頓的離心透析管對樣品進行透析，從而去除體系中的表面活性劑；
[0041]步驟六、采用22