Bmp通路抑制劑在制備卡波氏肉瘤病毒感染疾病治療藥物中的用圖
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域；更具體地，本發(fā)明涉及BMP通路抑制劑在制備卡波氏 肉瘤病毒感染疾病治療藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 卡波氏肉瘤病毒（Kaposi'ssarcomaassociatedherpesvirus，KSHV)，即人類痛 疫病毒8型（Humanherpesvirus-8，HHV-8)，是近年來于卡波氏肉瘤（KS)病損組織中發(fā) 現(xiàn)的一種新型皰疹病毒，與KS、原發(fā)性滲出性淋巴瘤（PEL)、多中心性卡斯特曼?。∕CD)有 明顯的相關性。KS是AIDS患者中最常見的惡性腫瘤，在接受器官移植的病人中也有較高的 發(fā)病率，其惡性程度高，甚至有廣泛臟器侵犯，導致多器官功能衰竭，致死率高。在世界范圍 內(nèi)，KSHV在艾滋病患者中感染率在40%以上，在普通人群中的感染率則具有地域性分布特 征，一般地區(qū)人群感染率在5%左右，但在非洲撒哈拉地區(qū)感染率可達20-40%。在中國浙江、 廣東、湖北等地普通人群中的KSHV感染率平均為5%，而新疆地區(qū)平均感染率則高達20. 4%， 柯爾克孜族及維族的KSHVIgG陽性率己接近非洲，分別為48%和30. 4%。不容忽視的是，我 國人群HIV-I感染者數(shù)量已超過100萬人，并呈快速增長趨勢?；贏IDS-KS的流行規(guī)律， 中國未來將有較多的AIDS-KS患者。
[0003] 內(nèi)皮來源的紡錘形細胞（SpindleCell)是KSHV主要感染的細胞，也是主要的腫 瘤細胞。KSHV在紡錘形細胞里主要以潛伏感染形式存在，只有少部分細胞處于自發(fā)的裂解 復制中。因此，潛伏期表達的基因產(chǎn)物被認為是病毒致瘤的原始力量。KSHV在潛伏感染中 主要表達LANA，v-FLIP，v-Cyclin，KSHV-miRNAs等。其中LANA是最主要的病毒潛伏期蛋 白，它能抑制重要腫瘤抑制基因p53,RB-E2F的活性，LANA也能通過與GSK3b結(jié)合，穩(wěn)定了 3-catenin的表達。本發(fā)明人以前的工作也證實，LANA通過抑制SellO介導的Notch胞內(nèi) 段（ICN)的降解，穩(wěn)定ICN表達并促進細胞增殖。然而，由于缺少KS細胞株和穩(wěn)定有效的 KSHV細胞轉(zhuǎn)化模型，這些信號通路在KS發(fā)生發(fā)展中的意義仍有待驗證。
[0004]目前，晚期階段的KS預后差，死亡率高，開發(fā)特異針對KS的高效靶向藥物具有重 要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供BMP通路抑制劑在制備卡波氏肉瘤病毒感染疾病治療藥 物中的用途。
[0006] 在本發(fā)明的第一方面，提供BMP信號通路抑制劑在制備改善或治療卡波氏肉瘤病 毒感染疾病的組合物中的用途。
[0007] 在一個優(yōu)選例中，所述卡波氏肉瘤病毒感染疾病包括：卡波氏肉瘤，原發(fā)性滲出性 淋巴瘤，多中心性卡斯特曼病。
[0008] 在另一優(yōu)選例中，所述的BMP信號通路抑制劑包括：Dorsomorphin(亦名Compound C，C24H25N5O)和WSS25;或它們的類似物。
[0009] 在本發(fā)明的另一方面，提供BMP信號通路或其通路蛋白的用途，用于篩選改善或 治療卡波氏肉瘤病毒感染疾病的潛在物質(zhì)。
[0010] 在本發(fā)明的另一方面，提供一種篩選改善或治療卡波氏肉瘤病毒感染疾病的潛在 物質(zhì)的方法，所述方法包括：
[0011] (1)用候選物質(zhì)處理包含BMP信號通路或其通路蛋白的體系；
[0012] (2)檢測所述體系中BMP信號通路蛋白的表達量或活性；
[0013] 其中，若所述候選物質(zhì)可降低（優(yōu)選顯著降低，如降低20%以上，較佳的降低50% 以上；更佳的降低80%以上）BMP信號通路蛋白的表達量或活性，則表明該候選物質(zhì)是改善 或治療卡波氏肉瘤病毒感染疾病的潛在物質(zhì)。
[0014] 在一個優(yōu)選例中，所述篩選不包括疾病診斷或治療方法相關的方法。
[0015] 在另一優(yōu)選例中，步驟（1)包括：在測試組中，將候選物質(zhì)加入到包含BMP信號通 路的體系中；和/或
[0016] 步驟（2)包括：檢測測試組的體系中BMP信號通路蛋白的表達量或活性，并與對照 組比較，其中所述的對照組是不添加所述候選物質(zhì)的包含BMP信號通路的體系；
[0017] 如果測試組中BMP信號通路蛋白的表達量或活性在統(tǒng)計學上低于（優(yōu)選顯著低 于，如低20%以上，較佳的低50%以上；更佳的低80%以上）對照組，就表明該候選物是改善 或治療卡波氏肉瘤病毒感染疾病的潛在物質(zhì)。
[0018] 在另一優(yōu)選例中，所述的BMP信號通路是BMP-Smadl-Id通路，所述的BMP信號通 路蛋白包括：BMP(骨形成蛋白，Bonemorphologyprotein)，Smadl(SMAD家族成員 1，SMAD FamilyMemberl),Id(DNA結(jié)合抑制蛋白，InhibitorofDNAbinding)。
[0019] 在另一優(yōu)選例中，所述的體系選自：細胞體系（如內(nèi)源存在BMP信號通路的細胞或 細胞培養(yǎng)物）、亞細胞體系、溶液體系、組織體系、器官體系或動物體系。
[0020] 在另一優(yōu)選例中，所述的體系是細胞體系。
[0021] 在另一優(yōu)選例中，所述的體系是內(nèi)源存在BMP信號通路的細胞（如KMM細胞、麗細 胞或293T細胞）。
[0022] 在另一優(yōu)選例中，所述的候選物質(zhì)包括（但不限于）：針對所述存在BMP信號通路 (含該通路的基因或蛋白）設計的小分子化合物，針對BMP信號通路或其上游或下游蛋白設 計的干擾分子、核酸抑制物、結(jié)合分子（如抗體或配體）等。
[0023] 在另一優(yōu)選例中，所述的方法還包括：對獲得的潛在物質(zhì)進行進一步的細胞實驗 和/或動物試驗，以從候選物質(zhì)中進一步選擇和確定對于改善或治療卡波氏肉瘤病毒感染 疾病有用的物質(zhì)。
[0024] 在本發(fā)明的另一方面，提供一種用于改善或治療卡波氏肉瘤病毒感染疾病的組合 物，所述的組合物含有：（I)BMP通路抑制劑；較佳地是Dorsomorphin，WSS25,或它們的類似 物；和（2)藥學上可接受的載體。
[0025] 本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對本領域的技術(shù)人員而言是顯而易見 的。
【附圖說明】
[0026] 圖I、LANA與BMP激活的p-Smadl在核內(nèi)相互作用。
[0027] A:通過串聯(lián)親和純化（TAP)技術(shù)發(fā)現(xiàn)新的LANA相互作用蛋白策略示意圖。B，C: 通過Co-IP驗證LANA與Smadl存在相互作用。D:LANA與BMP激活的p-Smadl在核內(nèi)相互 作用。
[0028] 圖2、LANA通過BMP-Smadl依賴方式在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)Id表達。
[0029] A，B:LANA在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)Id家族表達；C:BMP通路抑制劑Noggin能消除LANA 對于Idl轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)作用；D:BMP2能增強LANA對Idl轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)作用；E:LANA 上調(diào)Idl啟動子報告基因表達水平，但不能上調(diào)缺失Smadl結(jié)合位點的Idl啟動子報告基 因表達水平；F:在Knock-downSmadl的細胞中，LANA不能上調(diào)Idl啟動子報告基因表達水 平。
[0030] 圖3 :LANA維持p-Smadl的表達并促進其對Idl啟動子的結(jié)合。
[0031] A，B，C:LANA能顯著延