一種多肽在制備治療或預防代謝綜合征的藥物中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種多肽在制備治療和/或預防代謝綜合征的藥物中的應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 代謝綜合征及其并發(fā)癥，是一種復雜的代謝紊亂癥候群，具有極高的發(fā)病率與致 死率，嚴重威脅全球人口的健康。代謝綜合征與II型糖尿病、非酒精性脂肪肝、胰島素抵 抗、肥胖或者超重、動脈粥樣硬化、高血壓、高胰島素血癥、葡萄糖耐量損傷、糖尿病性心肌 病、血脂異常、腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)。其中，每年至少280萬人死于肥胖或者超重。高熱量飲食 的攝入可誘發(fā)多器官炎癥反應，打亂細胞代謝的動態(tài)平衡，是代謝綜合征的首要誘發(fā)因素。
[0003] TRB3(TribblesHomologue3)是Tribbles同源蛋白家族成員之一，最早在果蠅中 被鑒定到，并發(fā)現(xiàn)該蛋白能抑制有絲分裂，調(diào)節(jié)發(fā)育過程中細胞的增殖、遷移及形態(tài)形成。 在哺乳動物中，有三種Tribbles同源蛋白：TRB1，TRB2和TRB3,它們都是假激酶蛋白家族 成員。這三種蛋白都含有Ser/Thr蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域（Kinaselikedomain,KD)，但卻缺乏 ATP的結(jié)合位點和催化殘基，因此沒有激酶活性。盡管如此，Tribbles蛋白卻具有接頭蛋 白樣的功能，參與多種蛋白復合體的組裝。在哺乳動物Tribbles家族成員中，TRB3的研究 最為深入，其相互作用蛋白包括轉(zhuǎn)錄因子、泛素連接酶、細胞膜上II型BMP受體以及MAPK、 PI3K信號通路成員。通過與這些蛋白相互作用，TRB3參與了糖脂代謝、脂肪細胞分化、凋 亡、應激和膠原表達等的調(diào)控。近來，多種證據(jù)表明，TRB3在代謝綜合征及其相關(guān)疾病的發(fā) 生發(fā)展過程中都具有重要的調(diào)節(jié)作用。高糖誘導的代謝綜合征大鼠脂肪組織中檢測到TRB3 基因的高度表達；在小鼠中TRB3被證明可調(diào)控脂質(zhì)代謝過程；在小鼠糖尿病性心肌病模型 中，沉默TRB3基因可改善胰島素抵抗以及代謝相關(guān)的心臟損傷；在高脂飲食誘導的肥胖小 鼠模型中，基因敲除TRB3可以維持肝臟的胰島素、血糖穩(wěn)定。TRB3在腫瘤的發(fā)展過程中發(fā) 揮重要的促進作用。這些結(jié)果提示TRB3可能是治療代謝綜合征及其相關(guān)性疾病的潛在靶 點。
[0004] 近年來，眾多研究證明自噬可調(diào)控代謝綜合征及其相關(guān)性疾病。經(jīng)典的自噬被定 義為通過溶酶體途徑清除細胞內(nèi)冗余、錯誤折疊蛋白以及損傷細胞器，防止氧自由基堆積 與炎癥。近年來，自噬被證明可調(diào)控脂類的代謝，稱為"脂自噬"。P62是自噬過程中重要 的"貨車蛋白"。P62蛋白結(jié)構(gòu)域中含有泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域（Ubiquitinassociateddomain, UBA)，與泛素化蛋白（Ubiquitin，Ub)結(jié)合，作為"貨車"將受損細胞器或蛋白募集于自噬小 體膜上的LC3,這個過程主要通過P62蛋白的LIR(LC3_InteractingRegion，LIR)結(jié)構(gòu)域 實現(xiàn)，介導泛素化蛋白的降解，同時，P62的表達水平也隨之降低。當自噬受到抑制或自噬 流被阻斷時，P62與其結(jié)合的泛素化蛋白不能及時降解，在胞漿內(nèi)堆積而表達升高。因此， 研究和開發(fā)TRB3蛋白的抑制劑，或者阻斷其與P62蛋白結(jié)合的物質(zhì)，具有很好的恢復自噬 流，治療代謝綜合征及其相關(guān)性疾病發(fā)生和發(fā)展的成藥前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對目前缺乏能有效利用的TRB3蛋白抑制劑的現(xiàn) 狀，而提供一種能特異性結(jié)合TRB3的多肽及其衍生物在制備治療和/或預防代謝綜合征的 藥物中的應用。
[0006] 本發(fā)明的發(fā)明人在研究的過程中發(fā)現(xiàn)，在高脂飲食誘導的小鼠肝臟中，發(fā)現(xiàn)自噬 相關(guān)指標LC3、Becline-1、PI3K3C受到抑制，發(fā)明人還進一步發(fā)現(xiàn)TRB3的表達量升高，同 時，P62蛋白水平增加，其機制為TRB3與p62發(fā)生相互作用，阻斷了自噬流，造成蛋白與脂 質(zhì)的堆積?；诎l(fā)明人的研究工作，本發(fā)明提供下述技術(shù)方案。
[0007] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：一種可特異性結(jié)合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物 在制備治療和/或預防代謝綜合征的藥物中的應用；
[0008] 所述的多肽的氨基酸序列為如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示 序列中的任一種；
[0009] 所述多肽的衍生物為所述多肽與細胞穿膜肽接連所形成的嵌合肽。
[0010] 本發(fā)明中，所述的如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示的氨基酸 序列中，可適當引入氨基酸替換，缺失或添加，只要改變后的氨基酸序列仍然能夠形成能與 TRB3特異性結(jié)合的多肽且該多肽仍然保持改變前的活性即可。
[0011] 本發(fā)明中，所述的細胞穿膜肽為本領(lǐng)域常規(guī)所述的細胞穿膜肽，只要其能輔 助將所述多肽送入細胞以發(fā)揮作用即可，一般而言，所述的細胞穿膜肽為由10~30 個氨基酸組成的短肽分子。所述的細胞穿膜肽較佳地為Pep2多肽，其氨基酸序列 如SEQ ID NO :4所示；即在本發(fā)明中，所述的多肽衍生物較佳地為以P印2多肽連接 如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示序列中的任一種多肽后所形成的 嵌合多肽。所述的細胞穿膜肽還可以為HIV-I病毒反轉(zhuǎn)錄激活因子（Trans-activator transcription，Tat)蛋白的 TAT 肽（YGRKKRRQRRR，其氨基酸序列如 SEQ ID :5 所示)、 果蠅觸角同源異型蛋白的轉(zhuǎn)錄因子Antp肽（RQIKIWFQNRRMKWKK，其氨基酸序列如SEQ ID :6 所示）、P印-1 肽（KETWWETffffTEWSQPKKKRKV，其氨基酸序列如 SEQ ID :7 所示）、MPG 肽（GALFLGFLGAAGSTMGAWSQPKSKRKV，其氨基酸序列如 SEQ ID :8 所示）和 RGD 肽（Ar g-Gly-Asp，其氨基酸序列如SEQ ID N0:9所示）中的任一種或多種。所述細胞穿膜肽較佳 地連接在所述多肽的N端或者C端，更佳的是N端。
[0012] 本發(fā)明所述的多肽及其衍生物可以作為活性成分用于制備預防和/或治療代謝 綜合征的藥物。所述的"活性成分"是指具有預防和/或治療代謝綜合征功能的化合物，即 所述多肽或所述多肽的衍生物用于制備預防和/或治療代謝綜合征的藥物。在該藥物中， 所述多肽或所述多肽的衍生物可以單獨作為活性成分，也可以和其他化合物一起作為活性 成分。
[0013] 本發(fā)明中，所述的藥物可以包含生理學或藥學上可接受的載體，所述的載體可以 為任意合適的生理學或藥學上可接受的藥物輔料，較佳地選自殼聚糖及其衍生物、卡波姆 和脂質(zhì)體中的一種或多種。因此，在本發(fā)明中，所述的多肽或所述多肽的衍生物較佳地與所 述藥物輔料組成藥物組合物。所述的藥物組合物可以為本領(lǐng)域常規(guī)所述的各種劑型，較佳 地是固體、半固體或液體的形式，可以是水溶液、非水溶液或混懸液，更佳地是片劑、膠囊、 顆粒劑、注射劑或輸注劑等。所述藥物組合物的給藥途徑較佳地為注射給藥或口服給藥，所 述注射給藥較佳地包括：靜脈注射、肌肉注射、腹腔注射、皮內(nèi)注射或皮下注射途徑給藥。
[0014] 本發(fā)明所述的藥物組合物在治療時的使用劑量根據(jù)患者的年齡和病情而定，使用 劑量較佳地為0. 1~15mg/kg，更佳地為5~10mg/kg，最優(yōu)選為5mg/kg，給藥次數(shù)較佳地為 一天一次或數(shù)次。
[0015] 本發(fā)明中，所述的代謝綜合征為本領(lǐng)域常規(guī)所指，一般指多種代謝成分異常聚集 的病理狀態(tài)，包括：（1)腹部肥胖或超重，（2)致動脈粥樣硬化血脂異常(高甘油三酯（TG)血 癥及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C)低下，（3)高血壓及（4)胰島素抗性和/葡萄糖耐量異 常。所述的代謝綜合征較佳地包括非酒精性脂肪肝、糖尿病性心肌炎、糖尿病性腎炎、主動 脈炎癥、胰島素抵抗、糖耐量損傷和高胰島素血癥。
[0016] 所述非酒精性脂肪肝為本領(lǐng)域常規(guī)所指，一般是指除外酒精和其他明確的損肝因 素所致的肝細胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，與胰島素抵抗和遺傳易感 性密切相關(guān)的獲得性代謝應激性肝損傷，一般包括單純性脂肪肝（simplefattyliver, SFL)、非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)及其相關(guān)肝硬化。 [0017] 所述的主動脈炎癥為本領(lǐng)域常規(guī)所指，一般指主動脈壁的炎癥性疾病，可以由