本發(fā)明涉及保健食品加工技術領域，具體涉及一種具有降血糖作用的組合物及其制備的餅干。

背景技術：

糖尿病是一種以高血糖、胰島素抵抗為主要特征的慢性進展性疾病，可能誘發(fā)高胰島素血癥、血栓、高血壓、腎臟疾病、炎癥等多種代謝綜合征。目前，全球約3.8億人患有糖尿病(大部分為2型糖尿病)，每年約有290萬人死于糖尿病及其并發(fā)癥，且其發(fā)病率正呈逐年上升的趨勢。針對糖尿病的預防及控制，并沒有通用的方法。對于已確診為糖尿病的患者，常用的治療手段為口服降糖類藥物或注射胰島素，這些治療方法降血糖效果顯著，但長期服用會對糖尿病患者造成一定的毒副作用，如影響消化道反應及損傷肝、腎等。因此，在飲食中添加某些天然食品成分可以抑制腸道對葡萄糖的吸收、減緩餐后血糖反應、改善胰島素抵抗，進而預防和控制糖尿病是一種有效的方法。

孜然(Cuminumcyminum)，傘形科孜然芹屬一年或兩年生草本植物，是除胡椒外世界第二大香料作物，同時也是傳統(tǒng)的藥食兩用植物，具有很高的營養(yǎng)價值。傳統(tǒng)醫(yī)學認為，孜然味辛、性溫，具有醒腦通脈、降火平肝、祛寒除濕、理氣開胃等功效，對胃寒腹痛、消化不良等也具有顯著療效。此外，孜然也是食品工業(yè)的天然原料，其營養(yǎng)豐富，富含精油、油樹脂、膳食纖維、蛋白質(zhì)、多酚、黃酮及微量礦物質(zhì)等。

孜然油樹脂中富含多種不飽和脂肪酸，體外實驗表明孜然油樹脂具有抗氧化、抗癌、降血糖等功效，但是目前只被作為調(diào)味品使用，并沒有得到廣泛的關注與開發(fā)。膳食纖維被稱為人類“第七大營養(yǎng)素”，能夠增強飽腹感、抑制肥胖、改善腸道菌群、清除外源有害物質(zhì)、抑制和/或降低結(jié)腸癌的發(fā)病率，并且可以預防和/或改善糖尿病、高血壓、高血脂及多種心腦血管疾病，因此在食品、保健品等行業(yè)具有較高的應用價值。植物源多酚是植物莖葉、種子或果皮的主要成分，文獻報道植物源多酚具有延緩衰老、抗癌、增強免疫調(diào)節(jié)及降血糖等多種活性。薯類，例如甘薯和馬鈴薯，富含抗性淀粉、膳食纖維、維生素和多種氨基酸，有較低的預估血糖指數(shù)，具有增強飽腹感、促進腸道蠕動、吸收水分、促進排便等作用。孜然油樹脂、膳食纖維、植物源多酚與薯類全粉組合復配，可明顯提高各自的降血糖作用，具有協(xié)同增強生理活性的優(yōu)勢。

目前，以孜然油樹脂、膳食纖維、植物源多酚和薯類全粉復配制作餅干用于降血糖用途的研究尚屬空白，開發(fā)一種具有降血糖作用的食用營養(yǎng)餅干，對于控制血糖、減少糖尿病并發(fā)癥、增強飽腹感、緩解長期服用降糖藥物產(chǎn)生的副作用等具有重要意義。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種具有降血糖作用的組合物，包括如下重量份的組分：薯類全粉10～100份，孜然可溶性膳食纖維1～15份、孜然不溶性膳食纖維1～10份、孜然油樹脂0.2～1.5份和植物源多酚0.5～5份?？扇苄陨攀忱w維黏度高，發(fā)酵能力強，可以抑制機體對腸道中葡萄糖和膽汁酸的吸收，也可以經(jīng)過腸道微生物發(fā)酵形成短鏈脂肪酸，起到延緩餐后血糖上升、調(diào)節(jié)血脂等作用。不溶性膳食纖維具有很高的保水性和吸水膨脹性，可增強飽腹感，抑制食欲，減少機體對食物的攝取量。孜然油樹脂富含糖脂、磷脂、皂苷、精油等成分，可以調(diào)節(jié)血糖濃度、減緩機體餐后血糖水平快速升高等。薯類全粉中富含膳食纖維，以上幾種物質(zhì)配合使用，可起到降血糖的作用。

優(yōu)選的，所述孜然可溶性纖維的純度大于85％，進一步優(yōu)選大于90％。

優(yōu)選的，所述孜然可溶性纖維由如下方法制備得到：1)去除孜然中的精油和油樹脂，得脫脂孜然，將所述脫脂孜然與水按質(zhì)量體積比1:30～1:40的比例混勻，得脫脂孜然的水溶液；

2)將所述脫脂孜然的水溶液在6500～7500r/min的條件下乳化處理25～35min；調(diào)節(jié)所述乳化處理后的孜然水溶液的pH為7.5～8.0，加入為底物濃度4.0～5.0％的堿性蛋白酶，在55℃下酶解150～160min，得酶解液；將所述酶解液離心，將所得的沉淀烘干，得孜然膳食纖維；

3)將所述孜然膳食纖維與pH為5.8～6.2的醋酸鈉緩沖溶液混勻，按28～32U/g孜然膳食纖維加入蟲漆酶，在300MPa的超高壓條件下處理23～27min；按320～340U/g孜然膳食纖維加入纖維素酶，在200MPa處理12～18min；將酶解后的物料在沸水浴中煮沸12～18min，離心，將所得上清液凍干，得孜然可溶性膳食纖維。

優(yōu)選的，所述孜然不溶性纖維的純度大于85％，進一步優(yōu)選大于90％。

優(yōu)選的，所述孜然不溶性膳食纖維由如下方法制備得到：

1)去除孜然中的精油和油樹脂，得脫脂孜然，將所述脫脂孜然與水按質(zhì)量體積比1:30～1:40的比例混勻，得脫脂孜然的水溶液；

2)將所述脫脂孜然的水溶液在6500～7500r/min的條件下乳化處理25～35min；在所述乳化處理后的孜然水溶液中加入為底物濃度4.0～5.0％的堿性蛋白酶，調(diào)節(jié)pH為7.5～8.0，在55℃下酶解150～160min，得酶解液；將所述解液用沸水浴煮沸15min，將所述煮沸后的酶解液離心，將所得的沉淀烘干，得孜然膳食纖維；

3)將所述孜然膳食纖維與pH為5.8～6.2的醋酸鈉緩沖溶液混勻，按28～32U/g孜然膳食纖維加入蟲漆酶，在300MPa的超高壓條件下處理23～27min；按320～340U/g孜然膳食纖維加入纖維素酶，在200MPa處理12～18min；將酶解后的物料在沸水浴中煮沸12～18min，離心，將所得沉淀凍干，得孜然可溶性膳食纖維。

優(yōu)選的，所述孜然油樹脂的純度大于85％，進一步優(yōu)選大于90％。

優(yōu)選的，所述孜然油樹脂由如下方法制備得到：將孜然粉置于超臨界CO₂萃取釜內(nèi)，在壓力33～37MPa、溫度42～48℃條件下萃取1.5～2.5h。

優(yōu)選的，所述薯類全粉為馬鈴薯全粉、甘薯全粉或木薯全粉中的一種或幾種；優(yōu)選馬鈴薯全粉或木薯全粉。

優(yōu)選的，所述植物源多酚選自茶多酚、蘋果多酚、孜然多酚、葡萄籽多酚或甘薯莖葉多酚中的一種或幾種；優(yōu)選孜然多酚或甘薯莖葉多酚。

優(yōu)選的，包括如下重量份的組分：薯類全粉10～30份，孜然可溶性膳食纖維2～15份，孜然不溶性膳食纖維5～10份、孜然油樹脂0.2～1.5份、植物源多酚1～5份。

本發(fā)明的另一目的是保護由本發(fā)明所述的降血糖組合物制備成的降血糖餅干，由包括如下重量份的原料制備而成，薯類全粉10-100份、植物源蛋白1-10份、孜然可溶性膳食纖維1-15份、孜然不溶性膳食纖維1-10份、孜然油樹脂0.2-1.5份、植物源多酚0.5-5份、糖10-30份、小蘇打0.2-1.5份、油脂2-10份、氯化鈉0.2-1.0份、碳酸氫銨0.2-1.0份和水25-60份。

優(yōu)選地，所述降血糖餅干由包括如下原料制備而得：薯類全粉30-100份、蛋白3-8份、孜然可溶性膳食纖維5-14份、孜然不溶性膳食纖維5-10份、孜然油樹脂0.4-1.0份、植物源多酚2-5份、糖12-26份、小蘇打0.8-1.3份、油脂5-10份、氯化鈉0.5-0.8份、碳酸氫銨0.3-0.6份和水30-55份。

進一步優(yōu)選，所述降血糖餅干由包括如下原料制備而成：薯類全粉100份、蛋白8.0份、孜然可溶性膳食纖維14份、孜然不溶性膳食纖維6.0份、孜然油樹脂0.8份、植物源多酚4.0份、糖15份、小蘇打1.0分、油脂10份、氯化鈉0.6份、碳酸氫銨0.5份和水50份。

優(yōu)選的，所述蛋白為馬鈴薯蛋白、甘薯蛋白、孜然蛋白、鷹嘴豆蛋白、花生蛋白、大豆蛋白、乳清分離蛋白、酪蛋白、乳清蛋白濃縮物的一種或幾種；優(yōu)選孜然蛋白、甘薯蛋白。

優(yōu)選的，所述糖為海藻糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、阿拉伯糖、糊精、環(huán)糊精、β-葡聚糖、阿拉伯木聚糖、糖醇的一種或幾種；優(yōu)選糖醇、β-葡聚糖。

優(yōu)選的，所述油脂為奶油、羊油、牛油、豬油、花生油、大豆油、葵花籽油、菜籽油、玉米油中的一種或幾種；優(yōu)選奶油、花生油。

優(yōu)選的，所述薯類全粉、蛋白、孜然可溶性膳食纖維、孜然不溶性膳食纖維、植物源多酚的粒徑為100-150目，優(yōu)選120目。

優(yōu)選的，上述餅干的制備方法包括如下步驟：

1)先用50-100℃水溶解糖、氯化鈉、碳酸氫銨，得混合液，備用；

2)將薯類全粉、蛋白、植物源多酚、小蘇打和碳酸氫銨混合，加入食用油和所述混合液，在80-150rpm下攪拌5-20min，于0-20℃下放置15-30min，形成生面團；

3)將步驟2)所形成的生面團輥壓成3-5mm的薄面片，并將薄面片反復折疊輥壓5-20次，使面片厚薄均勻、形態(tài)平整、表面光滑、質(zhì)地細膩；

4)將步驟4)制成的薄面片用各種形狀的模具制成餅坯，整齊擺放在涂好油的烤盤內(nèi)；

5)將步驟5)制成的餅坯放入烤箱，面火溫度170-210℃，底火溫度130-180℃，烤制4-30min至餅干呈金黃色為止，于室溫冷卻至15-20℃即得成品。

在本發(fā)明所述制備方法中，步驟2)中，所述水的溫度為50-100℃。

本發(fā)明的另一目的是保護本發(fā)明所述的組合物制備的降血糖食品和保健品。

本發(fā)明所述降血糖食品具有如下有益效果：

1)本發(fā)明所述的降血糖組合物以薯類全粉、孜然蛋白、孜然油樹脂、孜然可溶性膳食纖維、孜然不溶性膳食纖維和植物源多酚為主要原料，對人體無任何毒副作用，長期服用不僅能降低患者血糖含量，而且可以降低血脂、提高患者免疫力；

2)包括本發(fā)明所述含有孜然主要活性成分的降血糖餅干色澤自然，香味濃郁，滋味柔和，口感清爽；

3)采用本發(fā)明所述方法實現(xiàn)了孜然膳食纖維、蛋白、油樹脂、植物源多酚和薯類全粉的綜合利用，提高了附加值，且操作簡單，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說明

圖1為實施1中含有孜然主要活性成分的降血糖餅干；

圖2為大鼠胰腺病理切片；

圖2a為正常對照組大鼠的胰腺切片；圖2b為糖尿病模型組大鼠的胰腺切片；圖2c為攝入二甲雙胍后糖尿病大鼠的胰腺切片；圖2d-圖2f分別為糖尿病大鼠分別攝入高、中、低劑量的實施例1降血糖餅干后的胰腺切片圖；圖2g-圖2i為攝入高、中、低劑量對比例1所得餅干后的胰腺切片圖。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明并不限于以下實施例。本發(fā)明所述的降血糖組合物可制備成多種種類的食品，實施例中以餅干為例。

所述方法如無特別說明均為常規(guī)方法。所述原材料如無特別說明均能從公開商業(yè)途徑而得。應當指出的是，對本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明中所用鏈脲佐菌素為化學試劑，批號S0130，購于Sigma公司；其他試劑均為分析純，購于北京國藥集團。

實施例1

本實施例涉及一種含有孜然主要活性成分的降血糖餅干，由如下原料制備而得：薯類全粉100份、甘薯蛋白8.0份、孜然可溶性膳食纖維14份、孜然不溶性膳食纖維6.0份、孜然油樹脂0.8份、甘薯莖葉多酚4.0份、糖15份、小蘇打1.0分、油脂10份、氯化鈉0.6份、碳酸氫銨0.5份和水50份。本實施例所得餅干的外形圖如圖1。

實施例2

本實施例涉及一種含有孜然主要活性成分的降血糖餅干，由如下原料制備而得：薯類全粉30份、孜然蛋白3份、孜然可溶性膳食纖維5份、孜然不溶性膳食纖維5份、孜然油樹脂0.4份、蘋果多酚2份、糖12份、小蘇打0.8份、油脂5份、氯化鈉0.5份、碳酸氫銨0.3份和水30份。

實施例3

本實施例涉及一種含有孜然主要活性成分的降血糖餅干，由如下原料制備而得：薯類全粉100份、大豆蛋白8份、孜然可溶性膳食纖維14份、孜然不溶性膳食纖維10份、孜然油樹脂1.0份、葡萄籽多酚5份、糖26份、小蘇打1.3份、油脂10份、氯化鈉0.8份、碳酸氫銨0.6份和水55份。

實施例4

本實施例涉及一種含有孜然主要活性成分的降血糖餅干，由如下原料制備而得：薯類全粉10份、大豆蛋白1份、孜然可溶性膳食纖維1份、孜然不溶性膳食纖維1份、孜然油樹脂0.2份、蘋果多酚0.5份、糖10份、小蘇打0.2份、油脂2份、氯化鈉0.2份、碳酸氫銨0.2份和水25份。

實施例5

本實施例涉及一種含有孜然主要活性成分的降血糖餅干，由如下原料制備而得：薯類全粉100份、孜然蛋白10份、孜然可溶性膳食纖維15份、孜然不溶性膳食纖維10份、孜然油樹脂1.5份、孜然多酚5份、糖30份、小蘇打1.5份、油脂10份、氯化鈉1.0份、碳酸氫銨1.0份和水60份。

實施例6

實施例1～5所述餅干的制備方法，包括如下步驟：

1)按比例稱取薯類全粉、蛋白、孜然可溶性膳食纖維、孜然不溶性膳食纖維、孜然油樹脂、植物源多酚、糖、小蘇打、油脂、氯化鈉、碳酸氫銨和水；

2)先用50℃水溶解糖、氯化鈉、碳酸氫銨，得混合液，備用；

3)將薯類全粉、蛋白、植物源多酚、小蘇打和碳酸氫銨混合，加入食用油和步驟2)所得的混合液，在100rpm下攪拌20min，于10℃下放置20min，形成生面團；

4)將步驟3)形成的生面團輥壓成3-5mm的薄面片，并將薄面片反復折疊輥壓5-20次，使面片厚薄均勻、形態(tài)平整、表面光滑、質(zhì)地細膩；

5)將步驟4)制成的薄面片用各種形狀的模具制成餅坯，整齊擺放在涂好油的烤盤內(nèi)；

6)將步驟5)制成的餅坯放入烤箱，面火溫度190℃，底火溫度150℃，烤制20min至餅干呈金黃色為止，于室溫冷卻至15-20℃即得成品。

對比例1

與實施例1相比，區(qū)別僅在于：去除薯類全粉、孜然可溶性膳食纖維、孜然不溶性膳食纖維、植物源多酚，將薯類全粉替換為小麥粉，將孜然油樹脂替換為花生油。

對比例2

與實施例1相比，區(qū)別僅在于：將薯類全粉替換為小麥粉，其余的原料相同。

對比例3

與實施例1相比，區(qū)別僅在于：除了將孜然油樹脂替換為花生油，其余的原料相同。

對比例4

與實施例1相比，區(qū)別僅在于：不添加植物源多酚，其余的原料相同。

對比例5

與實施例1相比，區(qū)別僅在于：將孜然可溶性膳食纖維替換為孜然不溶性膳食纖維，即原料中不添加可溶性膳食纖維，僅添加不溶性膳食纖維，其余的原料相同。

實驗例1含有孜然主要活性成分的降血糖餅干的基本成分分析

對實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1-對比例5中所得餅干中各項成分進行分析檢測，所得結(jié)果見表1-1，檢測方法如下：

1、具體檢測方法

1)蛋白質(zhì)含量測定：稱取0.50g提取的脫油孜然膳食纖維粉末放入消化管中，加濃硫酸(濃度98％)10ml，消化溫度420℃，時間1.5小時，用凱氏定氮儀測定膳食纖維中的蛋白質(zhì)含量(瑞典Foss公司KIELTEC ANALYSISER凱氏定氮儀)。

2)脂肪測定：稱取1.0g提取的脫油孜然膳食纖維粉末放置在潔凈的紙?zhí)淄仓?，加入少量脫脂棉，在浸提燒杯中?0ml石油醚，用福斯特卡托公司Soxtec Avanti 2050自動脂肪檢測儀提取樣品中脂肪。浸提結(jié)束后，取出提取杯，并將提取杯置于100℃干燥箱中30分鐘，在干燥器中冷卻再稱重，計算脂肪含量。

脂肪含量(％)＝(W₂/W₁)×100％

W₁—浸提前樣品重量，g；

W₂—浸提干燥后脂肪重量，g。

3)水分測定：水分測定采用GB 5009.3—2010。取潔凈鋁制稱量瓶，置于101℃-105℃干燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，加熱1.0h，取出蓋好，置干燥器內(nèi)冷卻0.5h，稱量，并重復干燥至前后兩次質(zhì)量差不超過2mg，即為恒重。稱取混合均勻的脫油孜然膳食纖維粉末3g-5g(精確至0.0001g)，放稱量瓶中，試樣厚度不超過5mm，加蓋，精密稱量后，置101℃-105℃干燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，干燥2h-4h后，蓋好取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱量。然后再放入101℃-105℃干燥箱中干燥1h左右，取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5h后再稱量。并重復以上操作至前后兩次質(zhì)量差不超過2mg，即為恒重。

結(jié)果計算

水分含量(％)＝100×(m₁-m₂)/(m₁–m₃)

式中：

m₁——稱量瓶和試樣的質(zhì)量，g；

m₂——稱量瓶和試樣干燥后的質(zhì)量，g；

m₃——稱量瓶的質(zhì)量，g。

水分含量≥1g/100g時，計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字；水分含量＜1g/100g時，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

注：兩次恒重值在最后計算中，取最后一次的稱量值。

4)灰分測定：灰分測定參照GB 5009.4—2010的方法。具體步驟為：取大小適宜的瓷坩堝置馬弗爐中，在550℃±25℃下灼燒0.5h，冷卻至200℃左右，取出，放入干燥器中冷卻30min，準確稱量。重復灼燒至前后兩次稱量相差不超過0.5mg為恒重。然后，取3g～10g(精確至0.0001g)樣品置于瓷坩堝中，先在電熱板上以小火加熱使樣品充分炭化至無煙，然后置于馬弗爐中，在550℃±25℃灼燒4h。冷卻至200℃左右，取出，放入干燥器中冷卻30min，稱量前如發(fā)現(xiàn)灼燒殘渣有炭粒時，應向試樣中滴入少許水濕潤，使結(jié)塊松散，蒸干水分再次灼燒至無炭粒即表示灰化完全，方可稱量。重復灼燒至前后兩次稱量相差不超過0.5mg為恒重。按下式計算。

X₁＝100×(m₁-m₂)/(m₃-m₂)

X₁—試樣中灰分含量，g/100g；

m₁—坩堝和灰分的質(zhì)量，g；

m₂—坩堝的質(zhì)量，g；

m₃—坩堝和試樣的質(zhì)量，g。

注：在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術平均值的5％。

5)淀粉測定：按照AOAC996.11的方法測定。取磨碎的樣品(10mg)加入到玻璃試管中(16×120mm)，輕敲試管，以確保所有的樣品都落到試管底部；添加0.2ml80％乙醇到樣品中增加其溶解性，用渦旋混合器混勻；立即加入3ml的耐高溫α-淀粉酶(bottel 1稀釋成1:30的試劑1；100mM醋酸鈉緩沖液，pH5.0)，在沸水浴中孵育6min(在第2、4、6min大力震蕩試管)；加入0.ml bottle2(淀粉葡萄糖酶，330U淀粉)，用渦旋混合器混勻，50℃下水浴30min；將全部試驗的試管轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中，用洗瓶徹底沖洗干凈，用蒸餾水定容，混勻，等分溶液在3000r下離心10min；轉(zhuǎn)移等分(0.1ml)后的稀釋溶液到玻璃試管中；添加3ml的GOPOD試劑到每個試管中(包括D-葡萄糖控制組和空白組)，50℃下水浴20min；D-葡萄糖控制組包括0.1mlD-葡萄糖溶液和3.0ml GOPOD試劑，空白組包括0.1ml水合3.0ml GOPOD試劑；在510nm下測定樣品、D-葡萄糖控制組和空白組的吸光度。按下述公式進行計算：

淀粉含量(％)＝(A₁-A₂)×(F/W)×F_V×0.9

A₁—樣品的吸光度；

A₂—空白組的吸光度；

F—100/控制組的吸光度；

W—樣品重量，g；

F_V—最終定容的體積，ml。

6)膳食纖維測定：參照AOAC991.43的方法測定。

分別稱取未改性和改性孜然膳食纖維粉末1.000±0.005g(精確到0.1mg)于100mL燒杯中，加入40mLMES-TRIS緩沖液，pH8.2，攪拌至分散均勻；加入50μL耐熱α-淀粉酶液，磁力攪拌器低速攪拌，并于沸水浴中孵育30min后，冷卻至60℃，10mL蒸餾水沖洗燒杯內(nèi)壁上殘渣；加入5mL0.561M的HCl，并不斷攪拌，后用1M的NaOH或HCl于60℃下調(diào)節(jié)pH值至4.0-4.7；加入100μL淀粉葡萄糖苷酶溶液，充分混勻，60℃下振蕩孵育30min；加入100uL蛋白酶溶液，充分混勻，60℃下振蕩孵育30min；向酶解液中加入預熱至60℃的95％乙醇(95％乙醇與酶解液體積比為4:1)，室溫下沉淀1h；將乙醇沉淀后酶解液轉(zhuǎn)移至坩堝中抽濾，用78％乙醇清洗燒杯中殘渣，一并轉(zhuǎn)入坩堝中抽濾，再分別用78％乙醇、95％乙醇和丙酮清洗坩堝2次，然后將坩堝置于105℃烘箱中放置過夜至恒重，記錄坩堝及殘渣重量(W2)。測定殘渣中蛋白質(zhì)、灰分的含量，其重量分別記為P、A。

結(jié)果計算：

總膳食纖維含量(％)＝100×(W₂-W₁)/W-P-A

W—樣品重量，g；

W₁—坩堝和硅藻土的重量，g；

W₂—坩堝、硅藻土和殘渣的重量，g；

P—殘渣中蛋白質(zhì)的含量，g/100g；

A—殘渣中灰分的含量，g/100g。

注：在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術平均值的5％。

7)總酚含量測定

稱取0.5g的甘薯莖葉青粉按料液比1:20(w/v)加入10mL 70％的乙醇→超聲波條件下(50℃，59KHz)浸提30min→離心(7000g，20℃)10min→收集上清液，殘渣按照上述方法重復提取兩次，合并提取液，45℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇，用蒸餾水定容至30mL，制得植物源多酚粗提液。

取0.5mL上述粗提液加入1.0mL10％(v/v)的福林酚試劑，在30℃水浴鍋中反應30min，然后加入2.0mL10％(w/v)的碳酸鈉溶液，充分混勻后在30℃水浴鍋中反應30min，立即在736nm下測定吸光光度值。采用0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL的綠原酸標準品溶液建立標準曲線，得線性回歸方程y＝8.7671x+0.0068，R2＝0.9994。樣品溶液的總酚含量表示為mg綠原酸當量(chlorogenic acid equivalent,CAE)/mL樣品溶液。

2、實驗結(jié)果

基本成分分析見表1-1。

表1-1餅干的基本成分分析(g/100g)

從表1-1中可以看出，本發(fā)明實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干中蛋白質(zhì)、脂肪、膳食纖維、總酚、淀粉等含量豐富，蛋白質(zhì)可以提供人體所需要能量，并增加必需氨基酸的供給；膳食纖維可以預防心血管疾病、癌癥、糖尿病、肥胖以及其它疾病；總酚可以增強抗氧化、抗衰老、提高機體免疫力等，淀粉(主要是抗性淀粉)可提供人體所需的熱量，且消化速度慢，對餐后血糖快速升高有一定的抑制作用。而對比例1不添加薯類全粉、孜然可溶性與不溶性膳食纖維、孜然油樹脂和多酚類物質(zhì)，因此所得餅干中膳食纖維含量(可溶性膳食纖維與不溶性膳食纖維之和，下同)僅為2.93g/100g，總酚含量僅為0.74g/100g，蛋白含量僅為5.97g/100g，淀粉含量最高，為56.05g/100g，且大部分為快速消化淀粉，因此，不利于餐后血糖水平的控制。對比例2未添加薯類全粉，只添加小麥粉，因此所得餅干中蛋白質(zhì)、膳食纖維含量低于實施例1，淀粉含量略高于實施例2。對比例3采用花生油替代孜然油樹脂，因此其脂肪含量較高，多酚含量較低。對比例4未添加植物源多酚，因此所得餅干中多酚含量僅為0.56g/100g，其他成分與實施例1相比未見顯著差異。對比例5將孜然可溶性膳食纖維替換為孜然不溶性膳食纖維，因此所得餅干中不溶性膳食纖維含量為22.68g/100g，而可溶性膳食纖維含量僅為1.28g/100g。

實驗例2含有孜然主要活性成分的降血糖餅干的感官評定

對實施例1所得的含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1-對比例5所得餅干的感官品質(zhì)進行評價，評價標準見表1-2：

表1-2感官評價項目及相應標準

按照表1-2的感官評價標準對實施例1和對比例1中所得的含有孜然主要活性成分的餅干的感官品質(zhì)進行評價，所得結(jié)果如表1-3所示：

表1-3含有孜然主要活性成分的餅干的感官評價結(jié)果

從表1-3中可以看出，本發(fā)明實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干與對比例1-5所得餅干相比，其感官得分無顯著性差異。所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干呈金黃色，色澤均勻，外形完整，花紋清晰，厚薄基本均勻，不收縮，不變形，不起泡；斷面結(jié)構(gòu)呈多孔狀，細密，無大孔洞，香味濃郁，無異味，口感松脆細膩，不黏牙。

實驗例3含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠體重和攝食量的影響

對實施例1所得的含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠體重和攝食量進行評價，所得結(jié)果見表1-4，評價方法如下：

1、具體檢測方法：七周大雄性Wistar大鼠110只(195-200g)，隨機留取10只作為正常對照，其余80只大鼠腹腔注射0.1M STZ溶液(40mg/Kg)，連續(xù)注射5d后，大鼠空腹過夜，尾部取血測定空腹血糖，從造模大鼠中篩選空腹血糖超過16.67mmol/L大鼠80只，分為糖尿病模型組、二甲雙胍(0.5g/Kg)陽性對照組、實施例1和對比例1所得餅干分別分為4％、8％和12％三劑量組，每組10只，連續(xù)喂養(yǎng)4周，每周稱2次體重，每天測定攝食量。所得數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標準差表示，p<0.05作為顯著性檢驗標準。

2、實驗結(jié)果

1)表1-4是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠體重的影響。

表1-4含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠體重(g)的影響

從表中可以看出，注射低劑量鏈脲佐菌素(STZ)并用高糖高脂飲食誘導后，8組糖尿病大鼠的體重相對于控制組來說有顯著的降低(15.91％-20.31％)，這符合2型糖尿病患者“體重減輕”的癥狀。在4周實驗期內(nèi)，正常對照組大鼠的體重逐漸增大，而糖尿病模型鼠的體重在實驗期內(nèi)呈逐漸下降的趨勢。攝入不同劑量實施例1所得孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠的體重均呈不同程度的提高，且均高于模型對照組，其中，攝入高劑量(12％)實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，糖尿病大鼠體重的增加速度高于其他5組，但略低于二甲雙胍組。表1-4的結(jié)果說明實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠的體重有一定的改善作用，且高劑量的效果最好。

對比例1未使用薯類全粉，也未添加孜然可溶性膳食纖維、孜然不溶性膳食纖維、孜然油樹脂和植物源多酚，因此，糖尿病大鼠攝入對比例1配方所得餅干后，體重并沒有明顯的提高，與糖尿病模型鼠的體重相差不大，這說明對比例1所得餅干不能改善糖尿病大鼠的體重。而對比例2-對比例5由于缺少部分降血糖組合物，因此，糖尿病大鼠的體重有少量增加，但仍低于實施例1。

2)表1-5是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠攝食量的影響。

表1-5含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠平均攝食量(g/d)的影響

從表1-5中可以看出，實驗期內(nèi)，正常對照組大鼠的攝食量較穩(wěn)定，均維持在24-26g/d，而糖尿病模型大鼠的攝食量明顯高于控制組，這符合糖尿病患者“飲食增加”的癥狀。攝入不同劑量實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，糖尿病大鼠的攝食量均有不同程度的減少，且高劑量營養(yǎng)餅干在減少攝食量方面效果較好。而不同劑量的對比例1所得餅干對糖尿病大鼠攝食量的降低沒有效果。此外，對比例2-對比例5因為部分降血糖組合物的配比不足或未添加降血糖組合物，因此，大鼠攝食量低于對比例1大鼠的攝食量，但是高于實施例1大鼠的攝食量。

實驗例4含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠血糖、胰島素和脂聯(lián)素等指標的影響

對實施例1所得的含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠血糖、胰島素和脂聯(lián)素等指標進行評價，所得結(jié)果見表1-6，評價方法如下：

1、具體檢測方法：將實驗例3中分組的七周大雄性Wistar大鼠連續(xù)喂養(yǎng)4周，4周實驗結(jié)束后，大鼠空腹過夜，腹主動脈取血，離心，收集血漿，測定各組大鼠血漿中葡萄糖、糖化血紅蛋白、胰島素、瘦素和脂聯(lián)素的濃度。所得數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標準差表示，p<0.05作為顯著性檢驗標準。

2、實驗結(jié)果

表1-6是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠血糖、胰島素和脂聯(lián)素等指標的影響。

表1-6含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠血糖、胰島素和脂聯(lián)素等指標的影響

從表1-6中可以看出，與正常對照組相比，8組糖尿病大鼠的空腹血糖含量均顯著提高。4周試驗期后，糖尿病模型大鼠的空腹血糖值高于初始值38.56％，當攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，糖尿病大鼠的空腹血糖值較初始值分別降低了17.24％,19.41％,和20.27％，而三個劑量的對比例1所得餅干對大鼠的空腹血糖幾乎沒有改善作用。此外，對比例2-對比例5所得餅干因為缺少部分降血糖組合物，因此其降低空腹的血糖效果不如實施例所得餅干的效果。

糖化血紅蛋白可以反映糖尿病患者長期的葡萄糖代謝的過程。從表1-6中可以看出，糖尿病模型組和攝入高、中、低劑量的對比例1所得餅干的糖尿病大鼠的糖化血紅蛋白值均較高，且顯著高于正常對照組、二甲雙胍組和三個劑量的實施例1所得孜然主要活性成分的降血糖餅干組。與糖尿病模型組相比，攝入低、中、高劑量的含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠的糖化血紅蛋白含量分別降低了12.12％、15.15％和19.70％，二甲雙胍組大鼠的糖化血紅蛋白含量降低了27.27％。而三個劑量的對比例1所得餅干對糖尿病大鼠血漿中糖化血紅蛋白的濃度沒有明顯的改善作用。此外，對比例2-對比例5所得餅干因為缺少部分降血糖組合物，因此，大鼠的糖化血紅蛋白含量高于對比例1，但是低于實施例1。

胰島素可以反映葡萄糖的負荷情況。表1-6結(jié)果顯示，與正常對照組相比，糖尿病模型組的胰島素濃度上升了48.72，這說明糖尿病模型組大鼠出現(xiàn)了胰島素抵抗。當攝入低、中、高劑量的含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠空腹胰島素濃度分別降低了16.67％、21.84％和27.59％，且中劑量餅干組大鼠的胰島素濃度下降程度與二甲雙胍組相似(25.86％)。而攝入低、中、高劑量的對比例1所得餅干后，大鼠的空腹胰島素濃度僅降低了4.02％、5.17％和6.32％。而三個劑量的對比例1所得餅干對糖尿病大鼠血漿中胰島素的濃度沒有明顯的改善作用。

瘦素和脂聯(lián)素是存在于脂肪細胞中的兩種內(nèi)分泌激素。從表1-6中可以看出，與正常對照組相比，糖尿病模型鼠血漿瘦素濃度提高了44.68％，胰島素可以刺激瘦素分泌，出現(xiàn)代謝綜合征的大鼠體內(nèi)瘦素濃度較高。攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠血漿瘦素濃度分別下降了14.71％、26.47％和35.29％，其中高劑量營養(yǎng)餅干組大鼠的空腹血漿胰島素濃度與二甲雙胍組相似(降低了36.76％)。攝入低、中、高劑量對比例1所得餅干后，大鼠血漿瘦素濃度僅分別下降了4.41％、4.41％和2.94％。而三個劑量的對比例1所得餅干對糖尿病大鼠血漿中瘦素和脂聯(lián)素的濃度沒有明顯的改善作用。此外，對比例2-對比例5所得餅干因為缺少部分降血糖組合物，因此，其對比例所得餅干對糖尿病大鼠瘦素和胰島素含量的改善效果優(yōu)于對比例1，但不如實施例1。

表1-6的結(jié)果說明實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后可以緩解糖尿病大鼠機體存在的血糖代謝異常，其血糖敏感性和胰島素耐受性得到了一定的改善，機體能夠通過較好的調(diào)節(jié)血糖的體系來降低空腹血糖值。其中以高劑量組的效果最佳。而對比例1因為沒有添加孜然主要活性成分和植物源多酚，因此所得餅干對糖尿病大鼠的血糖代謝沒有調(diào)節(jié)作用。

實驗例5含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠肝臟脂質(zhì)的影響

對實施例1所得的含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1-對比例5所得餅干對糖尿病大鼠肝臟脂質(zhì)的影響進行評價，所得結(jié)果見表1-7，評價方法如下：

1、具體檢測方法：將實驗例3中分組的七周大雄性Wistar大鼠連續(xù)喂養(yǎng)4周，4周實驗結(jié)束后，致死大鼠，取肝臟于-80℃保存。測定肝臟TC、TG、LDL-C和HDL-C之前，將凍存的肝臟取出，研磨成肝臟勻漿，用于測試。

2、實驗結(jié)果

表1-7是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1所得餅干對糖尿病大鼠肝臟脂質(zhì)的影響。

表1-7含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠肝臟脂質(zhì)的影響

從表1-7中可以看出，糖尿病模型鼠肝臟中TC、TG和LDL-C的濃度最高，分別為189.65mg/ml、1.1mmol/l和86.4mg/ml，這說明糖尿病大鼠存在明顯的肝臟脂質(zhì)代謝異常，導致肝臟脂質(zhì)的大量堆積，可能誘發(fā)脂肪肝。相比于糖尿病模型鼠，攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠肝臟中TC、TG和LDL-C的濃度均有不同程度的下降，且隨著營養(yǎng)餅干攝入量的增加其下降趨勢越明顯。此外，與正常對照組相比，糖尿病模型鼠的血漿HDL-C的濃度下降了30.47％，而攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠血漿HDL-C的濃度分別上升了23.60％、31.46％和35.96％；而攝入低、中、高劑量對比例1所得餅干后，大鼠肝臟中TC、TG、LDL-C和HDL-C的濃度變化不大。對比例2-對比例5因未添加部分降血糖組合物，因此所得餅干對糖尿病大鼠血脂的調(diào)節(jié)作用不如實施例1所得餅干，但優(yōu)于對比例1所得餅干。這說明實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干有降低肝臟脂質(zhì)的效果，且高劑量效果最明顯。

實驗例6含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠盲腸短鏈脂肪酸的影響

對實施例1所得含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1所得餅干對糖尿病大鼠盲腸短鏈脂肪酸的影響進行評價，所得結(jié)果見表1-8，評價方法如下：

1、具體檢測方法：將實驗例3中分組的七周大雄性Wistar大鼠連續(xù)喂養(yǎng)4周，4周實驗結(jié)束后，收集各組大鼠盲腸內(nèi)容物，于1000rpm條件下離心20min，取上清測定其短鏈脂肪酸(SCFA)組成，盲腸部位的SCFA濃度和組成采用高效陰離子交換色譜-脈沖安培檢測器進行分析。

2、試驗結(jié)果：表1-8是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1所得餅干對糖尿病大鼠盲腸中短鏈脂肪酸的影響。

表1-8含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠盲腸短鏈脂肪酸的影響

膳食纖維在人體和動物的盲腸部位能夠被部分或全部消化分解成短鏈脂肪酸。已有研究表明，膳食纖維的生理功能主要取決于SCFA的類型和數(shù)量，這些SCFA能夠刺激腸道對水和鈉的吸收，影響腸道pH和膽鹽沉淀。從表1-8中可以看出，乙酸、乳酸、丁酸和丙酸是盲腸中檢測到的四種主要短鏈脂肪酸。與正常對照組相比，糖尿病模型鼠盲腸中的乙酸濃度顯著提高了26.24％。與糖尿病模型鼠相比，攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠盲腸中乙酸濃度分別降低了7.45％、12.04％和19.83％；而攝入低、中、高劑量對比例1所得餅干后，大鼠盲腸中乙酸濃度未見明顯變化。此外，對比例2-5因為缺少部分降血糖物質(zhì)，因此其降血糖效果不如實施例1所得餅干，但優(yōu)于對比例1所得餅干。因此我們可以得出結(jié)論，實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干可以降低糖尿病大鼠盲腸中的乙酸含量。

從乳酸含量中可以發(fā)現(xiàn)，相比于正常對照組大鼠，糖尿病模型鼠盲腸中的乳酸、丁酸和丙酸的濃度顯著的降低了，而攝入低、中、高劑量的實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，各組大鼠盲腸中乳酸、丁酸和丙酸的濃度有一定程度的提高，提高量隨營養(yǎng)餅干攝入量的提高而增大。

實驗例7含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠胰腺病理切片的影響

對實施例1所得含有孜然主要活性成分的餅干和對比例1所得餅干對糖尿病大鼠胰腺病理切片的影響進行評價，所得結(jié)果見表1-9和說明書附圖2，評價方法如下：

1、具體檢測方法：將實驗例3中分組的七周大雄性Wistar大鼠連續(xù)喂養(yǎng)4周，4周實驗結(jié)束后，致死大鼠，取肝臟于10％福爾馬林溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色，Olympus PM-10AD生物顯微鏡觀察攝影，并對大鼠胰腺萎縮和胰島β細胞變性程度進行評價。

2、試驗結(jié)果：表1-9是實施例1所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干和對比例1所得餅干對糖尿病大鼠胰腺病理切片的影響。

表1-9含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對糖尿病大鼠胰腺病理切片的影響

〝—〞indicates no lesion；〝+〞,minor lesion；〝++〞,moderate lesion；〝+++〞,severe lesion.

表1-9和說明書附圖2結(jié)果顯示，正常對照組大鼠(圖2a)的胰島呈橢圓形或近似圓形，面積較大，結(jié)構(gòu)完整，β細胞分布規(guī)則，大小均勻，排列完整，未見變性，且胰島與β細胞邊界清晰可見。糖尿病模型組大鼠(圖2b)的胰腺重度萎縮，胰島面積重度縮小，著色程度較淺，β細胞嚴重變性，排列松散，邊界模糊不清。攝入二甲雙胍后，糖尿病大鼠(圖2c)的胰腺有明顯的改善，只表現(xiàn)出輕度病變，胰島面積顯著增大，β細胞的數(shù)量顯著增多，邊界較清楚。當糖尿病大鼠分別攝入高、中、低劑量的實施例1(圖2d-圖2f)所得含有孜然主要活性成分的降血糖餅干后，大鼠胰腺的病變程度較糖尿病模型鼠來說，有顯著的改善，分別出現(xiàn)了中度、輕度和中度病變。而攝入高、中、低劑量對比例1(圖2g-圖2i)所得餅干后，糖尿病大鼠的胰腺分別有中度、中度和重度病變，細胞著色程度較淺。

上述結(jié)果表明含有孜然主要活性成分的降血糖餅干對胰島和β細胞具有顯著的修復作用，從而改善胰島素的分泌和糖原合成，最終起到降低血糖的作用。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。