治療Tau病變的方法
【專利說明】治療Tau病變的方法
[0001] 交叉引用
[0002] 本申請要求2012年8月16日提交的美國臨時專利申請No. 61/683, 902,2013年1 月18日提交的61/754, 085, 2013年3月14日提交的61/781，823, 2013月4月19日提交 的61/813, 797,和2013年6月10日提交的61/833, 355的權(quán)益，每項申請通過提及完整并 入。
[0003] 通過提及并入作為文本文件提供的序列表
[0004] 序列表與本文一起以文本文件提供，"IPRN-745W0 SeqList_ST25. txt"，其在2013 年8月15日創(chuàng)建，并且具有69KB的大小。文本文件的內(nèi)容通過提及完整并入本文。
[0005] 發(fā)明背景
[0006] 微管相關(guān)蛋白tau是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中豐富的，并且由神經(jīng)元生成。tau的主要功能 是穩(wěn)定微管。成年人腦中存在6種tau同種型；tau同種型是單一基因的可變剪接的產(chǎn)物。
[0007] tau病變（Tauopathy)是一類源自tau蛋白在腦的所謂神經(jīng)原纖維纏結(jié) (neurofibrillary tangle, NFT)中的病理聚集的神經(jīng)變性性疾病。tau病變的一些例 子包括額顳葉癡呆（frontotemporal dementia, FTD)、阿爾茨海默氏病（Alzheimer' s disease)、進(jìn)行性核上性麻痹（progressive supranuclear palsy)、皮質(zhì)基底變性 (corticobasal degeneration)、和客頁顳葉變性（frontotemporal lobar degeneration) 〇
[0008] 本領(lǐng)域中需要治療tau病變的方法，及適合于在此類方法中使用的試劑。
[0009] 發(fā)明概述
[0010] 本公開內(nèi)容提供了治療tau病變的方法，其涉及施用抗Tau抗體。本公開內(nèi)容還 提供了在所述方法中使用的抗Tau抗體和包含其的配制劑。
[0011] 特征
[0012] 本公開內(nèi)容提供了分離的人源化單克隆抗體，其特異性結(jié)合Tau多肽的氨基酸 15-24內(nèi)的表位。在一些情況中，表位不包含磷酸化的氨基酸。在一些情況中，表位不包含 硝化的氨基酸。在一些情況中，表位包含磷酸化的氨基酸、硝化的氨基酸、或磷酸化的氨基 酸和硝化的氨基酸兩者。
[0013] 本公開內(nèi)容提供了分離的抗體，其包含人源化輕鏈框架區(qū)；和人源化重鏈框架區(qū)， 其中分離的抗體與包含以下的抗體競爭對Tau多肽的N端區(qū)中的表位的結(jié)合：a)輕鏈區(qū)， 其包含：i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的八CDRl ; (ii)包含SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的八CDR2;和（iii)包含 SEQ ID NO:3 或 SEQ ID NO:9 的氨基酸序列的' CDR3 ;和b)重鏈區(qū)，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10氨 基酸序列的Vh CDRl ;(ii)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和 (iii)包含SEQ ID N0:6或SEQ ID N0:12的氨基酸序列的￥11 CDR3。在一些情況中，輕鏈 區(qū)和重鏈區(qū)存在于不同的多肽中。在一些情況中，輕鏈區(qū)和重鏈區(qū)存在于單一多肽中。在 一些情況中，重鏈區(qū)是同種型IgGl、IgG2、IgG3或IgG4的。在一些情況中，重鏈區(qū)是同種型 IgG4的。在這些中的一些實施方案中，鉸鏈區(qū)包含S241P取代。參見例如Angal等（1993) Mol. Immunol. 30:105。在一些情況中，抗體是 Fv、scFv、Fab、F (ab'）2 或 Fab'。在一些情 況中，抗體包含共價連接的非肽合成聚合物，例如聚（乙二醇）聚合物。在每種情況中，所 述抗體直接或經(jīng)由接頭與促進(jìn)穿過血腦屏障的載體分子、肽或蛋白質(zhì)融合。在一些情況中， 表位在Tau多肽的氨基酸15-24內(nèi)。在一些情況中，人源化輕鏈框架區(qū)包含表3中描述的 1、2、3、4、5、6、7、8、9或10處氨基酸取代。在一些情況中，人源化重鏈框架區(qū)包含表2中描 述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12處氨基酸取代。
[0014] 本公開內(nèi)容提供了分離的抗體，其中抗體是Fv、scFv、Fab、F(ab'）2或Fab'，且其 中抗體與包含以下的抗體競爭對Tau多肽的N端區(qū)中的表位的結(jié)合：a)輕鏈區(qū)，其包含：i) 包含 SEQ ID NO: 1 或 SEQ ID NO: 7 的氨基酸序列的 ' CDRl; (ii)包含 SEQ ID NO: 2 或 SEQ ID NO:8的氨基酸序列的' CDR2 ;和（iii)包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:9的氨基酸序 列的' CDR3 ;和b)重鏈區(qū)，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨基酸序列 的 Vh CDRl ;(ii)包含 SEQ ID NO: 5 或 SEQ ID NO: 11 的氨基酸序列的 Vh CDR2 ;和（iii)包 含SEQ ID N0:6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的Vh OTR3。在一些情況中，分離的抗體包含 人源化輕鏈框架區(qū)。在一些情況中，人源化輕鏈框架區(qū)包含表3中描述的1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10處氨基酸取代。在一些情況中，分離的抗體包含人源化重鏈框架區(qū)。在一些情況 中，人源化重鏈框架區(qū)包含表2中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12處氨基酸取代。
[0015] 本公開內(nèi)容提供了分離的抗體，其中分離的抗體包含人輕鏈恒定區(qū)和人重鏈恒定 區(qū)，且其中分離的抗體與包含以下的抗體競爭對Tau多肽的N端區(qū)中的表位的結(jié)合：a)輕 鏈區(qū)，其包含：i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO:7的氨基酸序列的八CDRl; (ii)包含 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的 ' CDR2 ;和（iii)包含 SEQ ID NO:3 或 SEQ ID NO:9的氨基酸序列的' CDR3;和b)重鏈區(qū)，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨基酸序列的Vh CDRl ; (ii)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的 Vh CDR2 ;和（iii)包含 SEQ ID NO:6 或 SEQ ID NO: 12 的氨基酸序列的 Vh CDR3。
[0016] 本公開內(nèi)容提供了藥物配制劑，其包含：a)本公開內(nèi)容的抗Tau抗體；和b)藥學(xué) 可接受賦形劑。
[0017] 本公開內(nèi)容提供了藥物配制劑，其包含：a)特異性結(jié)合Tau的N端部分內(nèi)的表位 的抗體，其中該抗體包含：⑴包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的' CDRl ; (ii)包含 SEQ ID NO: 2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的八 CDR2; (iii)包含 SEQ ID NO: 3 或SEQ ID NO:9的氨基酸序列的八CDR3;(iv)包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨 基酸序列的Vh CDRl ; (V)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和 (vi)包含SEQ ID NO: 6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的Vh CDR3 ;和b)適合于對人施用的 藥學(xué)可接受賦形劑，其中配制劑不含內(nèi)毒素。在一些情況中，抗體包含人源化輕鏈框架區(qū)。 在一些情況中，人源化輕鏈框架區(qū)包含表3中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10處氨基酸取 代。在一些情況中，抗體包含人源化重鏈框架區(qū)。在一些情況中，人源化重鏈框架區(qū)包含表 2中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12處氨基酸取代。在一些情況中，抗體是在脂質(zhì) 體中包囊的。在一些情況中，抗體用促進(jìn)穿過血腦屏障的藥劑配制。在每種情況中，所述抗 體直接或經(jīng)由接頭與促進(jìn)穿過血腦屏障的載體分子、肽或蛋白質(zhì)融合。在一些情況中，抗體 是 Fv、scFv、Fab、F(ab'）2 或 Fab'。
[0018] 本公開內(nèi)容提供了重組表達(dá)載體，其包含編碼本公開內(nèi)容的抗Tau抗體的核苷酸 序列，其中所述核苷酸序列與在真核細(xì)胞中有活性的轉(zhuǎn)錄控制元件可操作連接。本公開內(nèi) 容提供了體外宿主細(xì)胞，其用本公開內(nèi)容的重組表達(dá)載體遺傳修飾。
[0019] 本公開內(nèi)容提供了無菌容器，其包含本公開內(nèi)容的藥物配制劑。在一些情況中，容 器是注射器。
[0020] 本公開內(nèi)容提供了治療個體中的tau病變的方法，該方法包括對個體施用本公開 內(nèi)容的抗Tau抗體，或本公開內(nèi)容的藥物組合物。
[0021] 本公開內(nèi)容提供了治療個體中的tau病變的方法，該方法包括對個體施用藥物組 合物，所述藥物組合物包含：a)與包含以下的抗體競爭對Tau多肽的N端區(qū)中的表位的結(jié) 合的抗體：i)圖IB中描繪的抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)（CDR);和圖IA中描繪的抗體的重鏈 ⑶R ;或ii)圖2B中描繪的抗體的輕鏈⑶R ;和圖2A中描繪的抗體的重鏈⑶R ;和b)適合 于對人施用的藥學(xué)可接受賦形劑。在一些情況中，抗體包含：（i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的八CDRl; (ii)包含SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:8的氨基酸序列 的八CDR2 ; (iii)包含SEQ ID N0:3或SEQ ID N0:9的氨基酸序列的八CDR3 ; (iv)包含 SEQ ID NO:4 或 SEQ ID NO: 10 的氨基酸序列的 Vh CDRl; (V)包含 SEQ ID NO:5 或 SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和（vi)包含SEQ ID NO:6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列 的Vh OTR3。在一些情況中，抗體包含人源化輕鏈框架區(qū)。在一些情況中，抗體包含人源化 重鏈框架區(qū)。在一些情況中，抗體是在脂質(zhì)體中包囊的。在一些情況中，抗體用促進(jìn)穿過血 腦屏障的藥劑配制。在每種情況中，所述抗體直接或經(jīng)由接頭與促進(jìn)穿過血腦屏障的載體 分子、肽或蛋白質(zhì)融合.在一些情況中，抗體是？￥、80?￥、？813、？(313'）2或？313'。在一些情 況中，施用是靜脈內(nèi)的。在一些情況中，施用是鞘內(nèi)的。
[0022] 在一些情況中，主題抗Tau抗體的施用導(dǎo)致下列一項或多項的變化：a)腦組織中 游離的胞外tau的量；b)間質(zhì)液（ISF)中游離的胞外tau的量；c)腦脊液（CSF)中游離的 胞外tau的量；d) tau的神經(jīng)元至神經(jīng)元擴(kuò)散；e)神經(jīng)元內(nèi)tau聚集體的量；f)小角質(zhì)和/ 或星細(xì)胞活化的程度；g)磷酸化的或超磷酸化的Tau的量；h) ISF或CSF中總的Tau或游離 的tau的量；i)胞內(nèi)N端tau片段的量；j)神經(jīng)元活動過度；k)CSF中Αβ 40和/或Αβ 42 的量；1)Αβ斑負(fù)荷；m)A|3 40和/或Αβ 42自神經(jīng)元的分泌；η)淀粉樣前體蛋白（APP)促 進(jìn)劑活性；〇) APP mRNA和/或蛋白質(zhì)水平；ρ) beta-分泌酶和/或gamma分泌酶的活性；q)