一種中藥組合物在制備治療急性心肌梗死的藥物中的應(yīng)用
【專利說明】
[0001] 本申請是分案申請，原申請的發(fā)明名稱為：一種中藥組合物在制備減少腎臟 水通道蛋白2表達的藥物中的應(yīng)用；原申請的申請?zhí)枮椋?00910074701.9 ;申請日為： 2009.06.10〇
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及一種中藥組合物的新用途，具體地，涉及一種中藥組合物在制備減少 腎臟水通道蛋白2表達的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003] 慢性心力衰竭（CHF)的發(fā)生、發(fā)展是一個由諸多神經(jīng)體液因素參與的過程，過度 的神經(jīng)體液激活，引起體液潴留等病理生理表現(xiàn)。已有證據(jù)表明，由精氨酸加壓素（AVP)調(diào) 節(jié)的腎臟水通道蛋白2 (AQP2)增加集合管對水的重吸收，對CHF時水潴留起著重要的作用。
[0004] 中醫(yī)絡(luò)病理論認為，心氣虛乏、運血無力是充血性心衰發(fā)生的中醫(yī)病機之本；絡(luò)脈 瘀阻是發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，津液不循脈絡(luò)運行，滲出脈外而為水濕之邪發(fā)為水腫，瘀血水飲阻 滯絡(luò)脈，日久結(jié)聚成形導(dǎo)致心絡(luò)絡(luò)息成積是其發(fā)展加重的結(jié)果。與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)提出的神經(jīng)內(nèi) 分泌系統(tǒng)過度激活引起血流動力學(xué)改變，導(dǎo)致心肌重塑，進而出現(xiàn)慢性心力衰竭的基本機 制相一致。因此，當(dāng)代預(yù)防治療慢性心力衰竭的關(guān)鍵，已經(jīng)從過去的改善臨床癥狀，轉(zhuǎn)變?yōu)?阻斷神經(jīng)-內(nèi)分泌的過度激活，抑制心肌重塑
[0005] 本發(fā)明是在中國專利ZL 02146573. 8的基礎(chǔ)上進行的改進發(fā)明，在此全文引用該 專利文件記載的內(nèi)容。中國專利ZL 02146573. 8未記載該中藥組合物在制備減少腎臟水通 道蛋白2表達的藥物中的應(yīng)用；

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明目的是提供一種中藥組合物在制備減少腎臟水通道蛋白2表達的藥物中 的應(yīng)用；
[0007] 本發(fā)明還提供了該中藥組合物在制備改善心臟功能藥物中的應(yīng)用；
[0008] 本發(fā)明中藥組合物的有效成分主要包括黃芪、附子、丹參及藶葶子等祖國傳統(tǒng)中 藥材，以益氣溫陽藥為治絡(luò)強心之本，輔以活血通絡(luò)藥，使氣旺血行絡(luò)通，阻斷血瘀絡(luò)阻的 病理中心環(huán)節(jié)，兼用利水消腫藥以治其標(biāo)，可以有效減少腎臟水通道蛋白2的表達，并且有 效改善心臟功能。
[0009] 本發(fā)明中藥組合物中，作為活性組分的原料藥的拉丁名及其加工方法來自《中藥 大辭典》（1977年7月，第一版，上海科學(xué)技術(shù)出版社）和《中國藥典》（2005年版，化學(xué)工業(yè) 出版社）。
[0010] 所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成：
[0011] 黃芪150-450份、附子40-120份、人參或黨參75-225份、丹參75-225份、葶藶子 50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、澤瀉75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、紅 花30-90份、陳皮25-75份；
[0012] 優(yōu)選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成：
[0013] 黃芪450份、附子112. 5份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子150份、香加 皮或南五加皮180份、澤瀉225份、玉竹75份、桂枝90份、紅花90份、陳皮75份；
[0014] 或：
[0015] 黃芪250份、附子112. 5份、人參或黨參200份、丹參120份、葶藶子135份、香加 皮或南五加皮150份、澤瀉200份、玉竹60份、桂枝75份、紅花75份、陳皮60份。
[0016] 本發(fā)明還提供了所述中藥組合物的活性成分由下列步驟制成：
[0017] 1)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮加7-9倍量70%乙醇提 取，濾過，濃縮提取液至60°C測定相對密度為1. 25-1. 30的清膏；
[0018] 2)用水提取桂枝、陳皮的揮發(fā)油，得揮發(fā)油A、水溶液B、藥渣C ;
[0019] 3)加6-10倍量水煎煮附子、丹參、玉竹、紅花2次，每次2小時，將所得水溶液濾 過，得濾液D ;
[0020] 4)將桂枝、陳皮提揮發(fā)油后的水溶液B濾過，收集得水溶液濾液E，再加水煎煮藥 渣C，濾過得濾液F ;
[0021] 5)合并濾液D、濾液E、濾液F，濃縮至相對密度為1. 25-1. 30清膏，攪拌中加入乙 醇，至醇濃度70%，靜置，濾過，濾液濃縮至60°C測定相對密度為1. 25-1. 30清膏G ;
[0022] 6)步驟1)所得清膏、揮發(fā)油A和步驟5)所得清膏G構(gòu)成中藥組合物的活性成分。
[0023] 本發(fā)明中藥組合物還可以按常規(guī)的制劑工藝，例如，范碧亭《中藥藥劑學(xué)》（上?？?學(xué)出版社1997年12月第1版）記載的制備工藝，制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，例如 膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑等。
[0024] 為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的輔料，如范碧亭 《中藥藥劑學(xué)》（上?？茖W(xué)出版社1997年12月第1版）中各劑型記載的輔料，例如：填充劑、 崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括：淀粉、預(yù)膠 化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶 纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等； 潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷 酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、 羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑 包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯 扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括：PEG6000, PEG4000,蟲蠟等。
[0025] 本發(fā)明還提供了該中藥組合物膠囊劑的制備方法：
[0026] (1)將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮按照比例量稱取，加8 倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回 收乙醇，濃縮至60°C測定相對密度為1. 25-1. 30的清膏，備用；
[0027] (2)按照比例稱取桂枝、陳皮，蒸餾提取揮發(fā)油，提油后的水溶液濾過，備用，殘渣 再加8倍量水煎煮1小時，濾過，合并水煎液，備用；
[0028] (3)按比例量稱取附子、丹參、玉竹、紅花，加水9倍量煎煮2次，每次2小時，合并 提取液，濾過，與步驟（2)中桂枝、陳皮水煎液合并，濃縮至60°C測定相對密度為1. 25-1. 30 清膏，攪拌中加入乙醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃 縮至60°C測定相對密度為1. 25-1. 30清膏，與步驟（1)的醇提清膏混合，65-70°C烘干；
[0029] (4)將步驟⑶所得干膏粉碎成100目粉，加適量70%乙醇制粒，噴入步驟⑵所 得桂枝、陳皮揮發(fā)油，混勻，裝膠囊，即得。
[0030] 本發(fā)明中藥組合物的用量，按活性組分原料藥總重量計，為4-20克/日，可每日服 用一次，優(yōu)選為分2-4次服用，還優(yōu)選為6-12克/日，分2-4次服用，更優(yōu)選為7. 59克/日， 分3次服用。
[0031] 實驗例：
[0032] 為闡明本發(fā)明中藥組合物減少腎臟水通道蛋白2表達的活性，用按實施例1方法 所制得的藥物（以下稱本發(fā)明藥物）進行了下列試驗。
[0033] 1、材料和方法
[0034] I. 1主要試劑和儀器
[0035] 呋塞米片由上海萬安特公司生產(chǎn)，批號0200456 ;Trizol (Invitrogen Life Technologies公司）；cDNA合成試劑盒（Gene Copoeia公司）；小動物呼吸機（第二軍醫(yī) 大學(xué)DW-2000型）；冰點滲透壓儀（美國Advanced Instruments公司）；熒光定量PCR儀 (BI0-RAD公司）；彩色Doppler超聲顯像儀（Acuson公司）；精密電子天平（TA1003);顯微 照相攝像（OLYMPUS BX51) ;VerSi〇n4.0圖像分析系統(tǒng)（美國Kodak公司）；低溫超速離心機 (Sigma);超純水裝置（MilliQ) ;MPA-V型多道生物信號分析系統(tǒng)（第二軍醫(yī)大學(xué)）；電泳儀 (BIO-RAD);冰凍切片機（Sandon);酶標(biāo)儀（BioTek，ELX800);全自動生化分析儀（OLYMPUS AU640);兔抗大鼠多克隆抗體（購自Santa Cruz公司）；辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗（羊 抗兔IgG，購自武漢博士德公司）；羊抗兔熒光抗體IgG(北京中杉生物）；本發(fā)明藥物粉碎 藥粉（石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)）。
[0036] L 2 方法
[0037] 1. 2. 1實驗動物模型制作和分組
[0038] 雄性SD大鼠180~220g (由南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院實驗動物中心提供），采用左 冠狀動脈結(jié)扎致急性心肌梗死（AMI)后心力衰竭大鼠模型，在鹽酸戊巴比妥鈉（35mg. kg， 腹腔麻醉