DC的質(zhì)量比為6:1，將加入交聯(lián)劑后的溶液在37°C水浴鍋中攪拌反應(yīng)24小時，將交聯(lián)后的溶液澆鑄到模具中；
[0038](3)將步驟⑵所澆鑄的模具中的溶液在_20°C下預(yù)凍4小時，然后在_80°C條件下預(yù)凍24小時以上，然后真空冷凍干燥48小時；
[0039](4)將步驟(3)所得的冷凍干燥產(chǎn)物在1MPa的壓力下進(jìn)行壓片，保持此壓力I分鐘，即得到具有多孔結(jié)構(gòu)的一層CMC-Gel膜；
[0040](5)在步驟(4)所得的多孔膜一面涂覆含EDC-NHS的膠原溶液6mg/mL，其中膠原與EDC的質(zhì)量比為6:1，涂層膜在室溫下自然風(fēng)干后，即得到具有一面多孔，而另一面致密的梯度結(jié)構(gòu)材料。
[0041]實施例2
[0042]以羧甲基殼聚糖(CMC)、明膠(Gel)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和膠原(Col)為原料，制備一種CMC-Gel-PVP涂層膠原膜材料。聚乙烯吡咯烷酮是一種水溶性的高分子，具有優(yōu)異的溶解性、成膜性和保護(hù)膠作用，被廣泛用于生物、醫(yī)藥、化妝品和食品等部門。這種CMC-Gel-PVP涂層膠原膜材料的制備步驟如下:
[0043](I)將羧甲基殼聚糖和明膠原料溶解，抽濾純化后，用去離子水配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的羧甲基殼聚糖溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6%的明膠溶液；用去離子水配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的聚乙烯吡咯烷酮溶液；將從牛筋中提取的I型膠原純化，用乙酸溶液配制濃度為8mg/mL的膠原溶液；
[0044](2)按照羧甲基殼聚糖、明膠與聚乙烯吡咯烷酮的質(zhì)量比為2:7.5:0.5配制三者的共混溶液，加入EDC-NHS溶液(EDC:NHS = 4:1)進(jìn)行交聯(lián)，羧甲基殼聚糖-明膠溶液中的明膠與EDC的質(zhì)量比為6:1，將加入交聯(lián)劑后的溶液在37°C水浴鍋中攪拌反應(yīng)24小時，將交聯(lián)后的溶液澆鑄到模具中；
[0045](3)將步驟⑵所澆鑄的模具中的溶液在_20°C下預(yù)凍4小時，然后在_80°C條件下預(yù)凍24小時以上，然后真空冷凍干燥48小時；
[0046](4)將步驟(3)所得的冷凍干燥產(chǎn)物在1MPa的壓力下進(jìn)行壓片，保持此壓力2分鐘，即得到具有多孔結(jié)構(gòu)的一層CMC-Gel-PVP膜；
[0047](5)在步驟(4)所得的多孔膜一面涂覆加入含EDC-NHS的8mg/mL的膠原溶液，其中膠原與EDC的質(zhì)量比為6:1，涂層膜在室溫下自然風(fēng)干后，即得到具有一面多孔，而另一面致密的梯度結(jié)構(gòu)材料。
[0048]實施例3
[0049]以羧甲基殼聚糖(CMC)、明膠(Gel)、透明質(zhì)酸(HA)和膠原(Col)為原料，制備一種CMC-Gel-HA涂層膠原膜材料。透明質(zhì)酸以其獨特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機(jī)體內(nèi)顯示出多種重要的生理功能，它所具有的獨特的保水作用，是目前發(fā)現(xiàn)的自然界中保濕性最好的物質(zhì)，其生理功能是能使水分進(jìn)入細(xì)胞間隙，并與蛋白質(zhì)結(jié)合而形成蛋白凝膠，將細(xì)胞粘在一起，發(fā)揮正常的細(xì)胞代謝作用，起到保持細(xì)胞水分，保護(hù)細(xì)胞不受病原菌的侵害，加快組織的恢復(fù)，提高創(chuàng)口愈合再生能力，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥，保養(yǎng)品和化妝品行業(yè)。這種CMC-Gel-HA涂層膠原膜材料的制備步驟如下:
[0050](I)將羧甲基殼聚糖和明膠原料溶解，抽濾純化后，用去離子水配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的羧甲基殼聚糖溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的明膠溶液；用去離子水配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的透明質(zhì)酸溶液；將從牛筋中提取的I型膠原純化，用乙酸溶液配制濃度為10mg/mL的膠原溶液；
[0051](2)按照羧甲基殼聚糖、明膠與透明質(zhì)酸的質(zhì)量比為3:6:1配制三者的共混溶液，加入EDC-NHS溶液(EDC:NHS = 4:1)進(jìn)行交聯(lián)，羧甲基殼聚糖-明膠溶液中的明膠與EDC的質(zhì)量比為6:1，將加入交聯(lián)劑后的溶液在37°C水浴鍋中攪拌反應(yīng)24小時，將交聯(lián)后的溶液澆鑄到模具中；
[0052](3)將步驟⑵所澆鑄的模具中的溶液在_20°C下預(yù)凍4小時，然后在_80°C條件下預(yù)凍24小時以上，然后真空冷凍干燥48小時；
[0053](4)將步驟(3)所得的冷凍干燥產(chǎn)物在1MPa的壓力下進(jìn)行壓片，保持此壓力3分鐘，即得到具有多孔結(jié)構(gòu)的一層CMC-Gel-HA膜；
[0054](5)在步驟(4)所得的多孔膜一面涂覆加入含EDC-NHS的10mg/mL的膠原溶液，其中膠原與EDC的質(zhì)量比為6:1，涂層膜在室溫下自然風(fēng)干后，即得到具有一面多孔，而另一面致密的梯度結(jié)構(gòu)材料。
【主權(quán)項】
1.一種角膜組織修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將羧甲基殼聚糖和明膠原料溶解，抽濾純化，用去離子水分別配制羧甲基殼聚糖溶液和明膠溶液；然后混合得共混溶液，加入交聯(lián)劑，在37°c水浴鍋中攪拌24小時，將交聯(lián)后的溶液澆鑄到模具中； (2)將步驟(I)所澆鑄的模具中的溶液在-20°C下預(yù)凍4小時，然后在-80°C條件下預(yù)凍24小時以上，然后真空冷凍干燥48小時以上； (3)將步驟(2)所得的冷凍干燥產(chǎn)物進(jìn)行壓片，即得到角膜組織修復(fù)材料的多孔層； (4)在步驟(3)所得多孔層材料的一面涂覆含交聯(lián)劑的膠原溶液，涂層膜在室溫下自然風(fēng)干后，即得到角膜組織修復(fù)材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述膠原溶液是將從牛筋中提取的I型膠原純化，用乙酸溶液配制的膠原溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述膠原溶液中膠原的質(zhì)量體積濃度為 6.0 ?10.0mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的羧甲基殼聚糖溶液中的羧甲基殼聚糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2?5%，明膠溶液中明膠的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3?6%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)、(4)所述交聯(lián)劑為1-乙基-3 (3- 二甲基氨丙基)碳化二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺的水溶液，1-乙基-3 (3- 二甲基氨丙基)碳化二亞胺與N-羥基丁二酰亞胺的質(zhì)量比為4:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述明膠與1-乙基-3(3-二甲基氨丙基)碳化二亞胺的質(zhì)量比為6:1 ;步驟(4)所述含交聯(lián)劑的膠原溶液中的膠原與1-乙基-3 (3- 二甲基氨丙基)碳化二亞胺的質(zhì)量比為6:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的制備方法，其特征在于，在步驟(I)中所述共混溶液中羧甲基殼聚糖與明膠的質(zhì)量比為(1.5?3.0): (7.0?8.5)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的制備方法，其特征在于，在步驟(I)中所述的共混溶液中還加有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或透明質(zhì)酸(HA)，共混溶液中羧甲基殼聚糖、明膠與聚乙烯吡咯烷酮或透明質(zhì)酸的質(zhì)量比為(1.5?3.0): (7.0?8.5): (0.5?1.1)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述進(jìn)行壓片的壓力為lOMpa，保持此壓力I分鐘以上。
10.權(quán)利要求1?9任一項方法制備的角膜組織修復(fù)材料，其特征在于，該材料的一面致密，而另一面具有多孔結(jié)構(gòu)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種角膜組織修復(fù)材料及其制備方法，包括以下步驟：(1)分別配制羧甲基殼聚糖溶液和明膠溶液；然后混合，加入交聯(lián)劑，在37℃水浴鍋中攪拌24小時，將交聯(lián)后的溶液澆鑄到模具中；(2)將步驟(1)所澆鑄的模具中的溶液在-20℃下預(yù)凍4小時，然后在-80℃條件下預(yù)凍24小時以上，然后真空冷凍干燥48小時以上；(3)將所得的冷凍干燥產(chǎn)物進(jìn)行壓片，即得到角膜組織修復(fù)材料的多孔層；(4)在步驟(3)所得多孔層材料的一面涂覆含交聯(lián)劑的膠原溶液，涂層膜在室溫下自然風(fēng)干后，即得到角膜組織修復(fù)材料。材料可用于醫(yī)療領(lǐng)域中受損角膜組織的修復(fù)和替代，其制備工藝簡單，設(shè)備簡易，原料價廉易得。
【IPC分類】A61L27-56, C08J7-04, A61L27-26, C08J9-28, C08J3-24
【公開號】CN104548201
【申請?zhí)枴緾N201510033213
【發(fā)明人】任力, 王迎軍, 劉楊, 劉卅
【申請人】華南理工大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月22日