專利名稱：鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健制品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種集補(bǔ)鈣與調(diào)節(jié)人體免疫功能為一體的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑及制備方法。
眾所周知，適量的鈣是保證人體健康所必需的，鈣的缺乏容易引起多種疾病，如嚴(yán)重威脅中老年人的骨質(zhì)疏松癥、鈣缺乏癥。我國居民傳統(tǒng)的膳食結(jié)導(dǎo)致多數(shù)人對鈣的攝入量不足，據(jù)全國營養(yǎng)調(diào)查結(jié)果顯示大多數(shù)人的實(shí)際鈣攝入量還不到應(yīng)攝入量的一半。因此適量補(bǔ)鈣正為大多數(shù)人所重視。
目前市面上已有一些補(bǔ)鈣產(chǎn)品，如“勁得鈣”、“真珠鈣”等，它們所采用的主要強(qiáng)化劑是碳酸鈣、乳酸鈣、磷氫酸鈣等，由于有機(jī)體對它們的吸收率低而必須輔以維生素D來幫助腸道對其的吸收。另有一種較易被人體吸收產(chǎn)品一氨基酸鈣，中國專利文獻(xiàn)報道《氨基酸鈣的制備方法及應(yīng)用》(CN1154358)，它是將甘氨酸和氧化鈣按比例配合、攪拌、反應(yīng)、靜置、過濾制得的甘氨酸鈣，它較為符合人體吸收機(jī)制，較容易被吸收，但由于它是一種人工合成產(chǎn)品，沒有生理活性。
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種鈣含量高、且易于被人體吸收，并且還具營養(yǎng)滋補(bǔ)功能和免疫調(diào)節(jié)效果的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑及制備方法。
鱉甲做為純天然的滋補(bǔ)珍品，在我國的傳統(tǒng)中醫(yī)藥上被廣為采用?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》將鱉甲列為中品，有“滋陰潛陽、軟堅散結(jié)、退熱除蒸”之功效。鱉甲主含動物膠、角蛋白、18種氨基酸，還含有鐵、鋅、硒、鉻、硼等10種人體必需的微量元素，尤其是其中的鈣含量高達(dá)230mg/g以上，非常適于作為純天然的有機(jī)鈣源。但單純以鱉甲制成補(bǔ)鈣劑，尤其是采用常規(guī)的粉碎方法制備，人體對鈣的吸收存在一定問題。
本發(fā)明經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，氨基酸與鈣可形成可溶性絡(luò)合物，有利于人體對鈣質(zhì)的吸收，另一方面，身體需滋補(bǔ)者，往往免疫功能低下，體質(zhì)虛弱，營養(yǎng)欠佳，而豐富的游離氨基酸，能促進(jìn)免疫活性細(xì)胞的生長及分子代謝，有效發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。因此，本發(fā)明在鱉甲中加入適量的胎盤蛋白或復(fù)合氨基酸，其配方為(重量％)鱉甲細(xì)粉45-90％，胎盤蛋白或復(fù)合氨基酸10-55％。上述配方可進(jìn)行以下優(yōu)選(重量％)鱉甲細(xì)粉60-80％，胎盤蛋白或復(fù)合氨基酸20-30％。
為加強(qiáng)本發(fā)明的補(bǔ)鈣以及營養(yǎng)功效，本發(fā)明中還可適量加入碳酸鈣細(xì)粉0-25％和維生素D0-100IU、鋅元素0-1mg、鐵元素0-0.1mg、硒元素0-15μg、碘0-4μg，復(fù)合維生素0-10μg。由此提高產(chǎn)品的鈣含量，使鈣磷比更趨于合理，呈弱酸性，更易吸收利用，讓產(chǎn)品兼?zhèn)溆袡C(jī)生物鈣和無機(jī)碳酸鈣的優(yōu)點(diǎn)，同時還富含各類微量元素。
本發(fā)明對配方中的各組份都采用超細(xì)粉碎技術(shù)制成超微細(xì)粉。超細(xì)粉碎技術(shù)的顆粒特點(diǎn)是在常溫下利用高壓氣體通過噴嘴產(chǎn)生的高速氣流所孕育的巨大功能，使物質(zhì)功能發(fā)生相互碰撞沖擊，達(dá)到粉碎的目的。經(jīng)超微粉碎，物料的粉碎粒度很微小，一般粒度小于10μm。物質(zhì)是由無限個原子集合表現(xiàn)出來的，而超微細(xì)粉是由有限個原子集合表現(xiàn)出來的。物質(zhì)變成超細(xì)顆粒后，因其“體積效應(yīng)”即量子化效應(yīng)和表面效應(yīng)，使物質(zhì)的性能顯著區(qū)別于一般的顆?；驂K體，成為“物質(zhì)的新狀態(tài)”，使用時可獲得超常的作用。隨著粒度的變化，其物理化學(xué)性質(zhì)也隨之變化，如表面積增大，表面能增加，吸附和反應(yīng)活性增強(qiáng)。起細(xì)粉碎技術(shù)不破壞物質(zhì)的活性成份，鱉甲經(jīng)過超微化處理之后，有效成分得到了充分利用，提高了生物利用度。復(fù)合氨基酸、胎盤蛋白、碳酸鈣經(jīng)超微粉碎后，更有利于人體吸收。
本發(fā)明的制備工藝如下1．將天然鱉甲清洗后，在50℃±5℃下干燥，水分控制在8％以內(nèi)。
2．將鱉甲進(jìn)行粗粉碎，使用控溫粉碎，過80目篩。
3．將鱉甲粗粉和復(fù)合氨基酸或胎盤蛋白分別進(jìn)行真空干燥，溫度控制在40℃±5℃以內(nèi)，水分控制到5％以下，復(fù)合氨基酸、胎盤蛋白過80目篩。
4．將鱉甲粗粉用氣流粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎，粉碎壓力(表壓)0.7-1.0MPa加料壓力0.2-0.5MPa，空氣量17-18m3/min，出料粒度小于10μm。
以上步驟1、2、3、4處理目的均是為了保證本產(chǎn)品中鱉甲中的活性物質(zhì)在生產(chǎn)過程中不受損。
5．對食用碳酸鈣進(jìn)行干燥，溫控在80℃±5℃之間，水分控制在5％以內(nèi)，然后進(jìn)入氣流粉碎機(jī)粉碎，粉碎壓力(表壓)0.6-0.8MPa，加料壓力0.2-0.5MPa，空氣量15.2-20.6m3/min，控制粒度小于10μm，得超微細(xì)粉。
6．按比例將各組份進(jìn)行活性分子配伍，并進(jìn)行微波滅菌，控制頻率為2450MHZ，功率350WH-1，時間90秒左右，以減少對活性成份的損失，最后進(jìn)行質(zhì)檢、包裝等常規(guī)程序。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明是一種全新高效的補(bǔ)鈣劑，利用了鱉甲富含鈣元素的特點(diǎn)，并輔以氨基酸或胎盤蛋白等，提高人體對鈣的吸收率，達(dá)到高效補(bǔ)鈣、營養(yǎng)滋補(bǔ)的功效。
本發(fā)明另一個顯著的優(yōu)點(diǎn)是兼具免疫調(diào)節(jié)功能，它創(chuàng)造性地將氨基酸或胎盤蛋白與鱉甲進(jìn)行配伍。對于免疫功能低下者，由于大量豐富的游離氨基酸進(jìn)入人體，可滿足機(jī)體在免疫調(diào)節(jié)時期免疫活性細(xì)胞及分子代謝旺盛的需要，有效促進(jìn)本發(fā)明免疫調(diào)節(jié)功能的發(fā)揮。
本發(fā)明的上述兩個功能在人體產(chǎn)生的效果并不是孤立的，人體免疫力的提高，可促進(jìn)鈣的吸收，而補(bǔ)充身體的鈣質(zhì)，同樣也有利于免疫力的增強(qiáng)，因此本發(fā)明可使補(bǔ)鈣與免疫調(diào)節(jié)在人體中相互作用，相輔相成，達(dá)到補(bǔ)鈣與免疫調(diào)節(jié)共同效果。食用本發(fā)明產(chǎn)品，可以根本上改善人體內(nèi)鈣營養(yǎng)狀況，有效調(diào)節(jié)機(jī)體代謝，迅速達(dá)到新的鈣營養(yǎng)平衡，促進(jìn)骨質(zhì)細(xì)胞生長，對鈣缺乏者和骨疏松癥有極好的預(yù)防和康復(fù)作用，對免疫力低下者也有良好的免疫調(diào)節(jié)作用，提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)機(jī)體全面健康。
以下對本發(fā)明產(chǎn)品的毒理學(xué)安全性檢測和功能性檢測情況一．安全性檢結(jié)果(以下本產(chǎn)品簡稱為氨基酸鈣膠囊)1．急性毒性試驗(yàn)1．1大鼠急性毒性試驗(yàn)觀察期間大鼠未見異常反應(yīng)，無死亡發(fā)生。測得大鼠經(jīng)口LD50＞10g/kg。按急性毒性分極標(biāo)準(zhǔn)氨基酸膠囊屬實(shí)際無毒。1．2小鼠急性毒性試驗(yàn)觀察期間小鼠未見異常反應(yīng)，無死亡發(fā)生。測得小鼠經(jīng)口LD50＞10g/kg。按急性毒性分極標(biāo)準(zhǔn)氨基酸膠囊屬實(shí)際無毒。2．致突變試驗(yàn)2．1 Ames試驗(yàn)在受試劑量范圍內(nèi)(16-100001μg/皿)，各菌析均未見突變菌落數(shù)明顯增加。陽性對照組菌落數(shù)明顯增加，均超過陰性對照組2倍以上。表明在正常試驗(yàn)條件下，氨基酸鈣膠囊在受試劑量范圍內(nèi)無致基因突變作用。見表1。2．2微核試驗(yàn)氨基酸鈣膠囊各劑量組NCE/PCE比值在正常范圍內(nèi)，對骨髓無毒性作用。各劑量組微核率與陰性對照組比較無顯著笥(P＞0.05)。陽性環(huán)磷酰對照組微核發(fā)生率明顯高于陰性對照組(P＜0.01)，故氨基酸鈣膠囊在本試驗(yàn)條件下對小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核無影響。見表2。2．3精子畸變試驗(yàn)由表3鏡檢結(jié)果所見，陽性組畸變發(fā)生率明顯高于各劑量組(P＜0.01)，各劑量組與陰性對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)，說明氨基酸鈣膠囊在本實(shí)驗(yàn)條件下對小鼠精子畸變率無影響。見表3。2．4睪丸染色體畸變試驗(yàn)受試物各劑量組斷片、易位、畸變率、常染色單價體、性染色單價體實(shí)際觀察數(shù)用Sin-1√p轉(zhuǎn)換后分別進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果各劑量組與陰性對照組比較無顯著差異(P＞0.05)，而陽性對照組與陰性對照組比較，差異非常顯著(p＜0.01)，故氨基酸鈣膠囊在本實(shí)驗(yàn)條件下無致小鼠生殖細(xì)胞染色體畸變作用。見表4。3．30天喂養(yǎng)試驗(yàn)3．1動物生長發(fā)育與健康狀況 在觀察期間，各組動物食欲、活動正常，未觀察到中毒癥狀和不良反應(yīng)。各劑量組體重和食物利用率與陰性對照組比較無顯著差異(P＞0.05)。見表5，表6。3．2血液學(xué)檢查各劑量組血液學(xué)指標(biāo)與陰性對照組比較無顯著差異(P＞0.05)，且在正常范圍內(nèi)。結(jié)果見表7。3．3血液生化測定各劑量組血液指標(biāo)與陰性對照組比較無顯著差異(P＞0.05)，結(jié)果見表8。3．4臟器系數(shù) 各劑量組大鼠肝、腎的重量及相應(yīng)臟體比與陰性對照組比較無顯著差異(P＞0.05)。見表9。3．5解剖及病理組織學(xué)檢查將各組動物進(jìn)行大體解剖，未見明顯異常。病理組織學(xué)檢查肝、腎等臟器，發(fā)現(xiàn)部分大鼠肝細(xì)胞輕度空泡變性及匯管區(qū)炎細(xì)胞浸潤，但劑量組和陰性對照組間未見顯著性差異，屬非特異性病變，與本檢品無關(guān)。30天喂養(yǎng)試驗(yàn)表明，氨基酸鈣膠囊較長期給樣后未引起大鼠的毒性反應(yīng)。
表1氨基酸鈣膠囊Ames試驗(yàn)結(jié)果(回變菌落數(shù)/皿)(X±S)
表2氨基酸鈣膠囊骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)結(jié)果
表3氨基酸鈣膠囊小鼠精子畸形試驗(yàn)結(jié)果
表4氨基酸鈣膠囊對小鼠睪丸染色體的影響
**與陰性對照比較P＜0.01表5氨基酸鈣膠囊30天喂養(yǎng)試驗(yàn)大鼠體重(g)
表6氨基酸鈣膠囊30天喂養(yǎng)試驗(yàn)食物利用率(％)
表7氨基酸鈣膠囊30天喂養(yǎng)試驗(yàn)血液學(xué)檢查結(jié)果
單位紅細(xì)胞(1012/L)，血色素(g/L)，白細(xì)胞總數(shù)(109/L)，血小板109/L)。
表8氨基酸鈣膠囊30天喂養(yǎng)試驗(yàn)血清生化指標(biāo)測定結(jié)果
單位谷丙、谷草轉(zhuǎn)氨酶為單位/L；小于28單位為正常。總蛋白、白蛋白為g／L。血糖、尿素氨、膽固醇為mol/L。表9氨基酸鈣膠囊30天喂養(yǎng)試驗(yàn)大鼠臟體比值
結(jié)論1．氨基酸鈣膠囊大、小鼠經(jīng)口急性毒性LD50均大于10g/kg，屬實(shí)際無毒。
2．氨基酸鈣膠囊經(jīng)Ames試驗(yàn)，小鼠微核試驗(yàn)，精子畸變試驗(yàn)，睪丸染色體試驗(yàn)證實(shí)，未見致突變作用。
3．30天喂養(yǎng)試驗(yàn)表明，較長期受試氨基酸鈣膠囊對大鼠生長、發(fā)育、血液、生化、病理等指標(biāo)未見異常，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)最大無作用劑量大于5000mg/kg。二．功能性檢測結(jié)果1．對遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的影響各劑量組24小時及48小時足趾腫脹度與對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)，見表1表1氨基酸鈣膠囊小鼠足趾增厚度測定結(jié)果(X±S)
2．對小鼠血清溶血素抗體積數(shù)的影響456mg/kg、1140mg/kg劑量組抗體積數(shù)明顯增加與對照比較有顯著差異(P＜0.01)，見表2表2氨基酸鈣膠囊小鼠血清溶血素抗體積數(shù)據(jù)測定結(jié)果(X±S)
3．對小鼠碳廊清的影響456mg/kg、1140mg/kg劑量組吞噬指數(shù)較對照明顯增加(P＜0.01)。見表3表3氨基酸鈣膠囊小鼠碳廊清試驗(yàn)免疫指標(biāo)測定結(jié)果(X±S)
4．對小鼠免疫器官的影響3個劑量組胸腺/體重比值，脾臟/體重比值與陰性對照比較無明顯增加(P＞0.05)，見表4表4氨基酸鈣膠囊對免疫器官/體重比值的影響(X±S)
小結(jié)分別經(jīng)口按114mg、1140mg/kg給予BALB/C小鼠氨基酸鈣膠囊30天。遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)(足趾增厚法)各劑量組足趾增厚度與對照比較無顯著性差異(P＞0.05)。免疫器官胸腺/體重比值，脾臟／體重比值與陰性對照比較無明顯增加(P＞0.05)。小鼠血清溶血素抗體積數(shù)在456mg/kg、1140mg/kg劑量下與陰性對照比較抗體積數(shù)顯著增加(P＜0.01)。小鼠碳廊清試驗(yàn)吞噬指數(shù)在456mg/kg、1140mg/kg劑量下與對照比較有明顯增強(qiáng)(P＜0.01)。結(jié)論根據(jù)衛(wèi)生部監(jiān)督司1996年頒布的“保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗(yàn)方法”中免疫調(diào)節(jié)作用結(jié)果判定依據(jù)，氨基酸膠囊具有免疫調(diào)節(jié)作用。
例3，以100g產(chǎn)品(膠囊內(nèi)容物)計，配方如下鱉甲超微細(xì)粉 65g復(fù)合氨基酸10g碳酸鈣超微細(xì)粉25g例4，以100g產(chǎn)品(膠囊內(nèi)容物)計，配方如下鱉甲超微細(xì)粉 65g復(fù)合氨基酸10g碳酸鈣25g鋅1mg鐵0.1mg硒15μg例5，以100g產(chǎn)品(膠囊內(nèi)容物)計，配方如下鱉甲超微細(xì)粉 65g胎盤蛋白 10g碳酸鈣25gVD75IU例6，以100g產(chǎn)品(膠囊內(nèi)容物)計，配方如下鱉甲超微細(xì)粉 65g胎盤蛋白 10g碳酸鈣25g 例7，以100g產(chǎn)品(片劑)計，配方如下鱉甲超微細(xì)粉 70g胎盤蛋白 10g碳酸鈣10g賦形劑10g賦形劑常規(guī)選取，如可選用淀粉、糖漿、硬脂酸鈉(鎂)、香精糊精等。[制法]鱉甲用清水洗凈后，在50℃±5℃，水分控制在8％以內(nèi)；先經(jīng)粗粉碎，過80目篩；將鱉甲粗粉放入真空干燥機(jī)里，在40℃±5℃的條件下干燥，水分控制到5％以下；再進(jìn)入氣流粉碎機(jī)，粉碎壓力(表壓)0.7-1.0Mpa，加料壓力0.2-0.5Mpa，空氣量17-18m3/min，出料粒度小于10μm，制得鱉甲超微細(xì)粉。
食用碳酸鈣經(jīng)80℃±5℃干燥，水分控制5％以內(nèi)，進(jìn)入氣流粉碎機(jī)，粉碎壓力(表壓)0.6-0.8Mpa，加料壓力0.2-0.5Mpa，空氣量15.2-20.6m3/min，控制粒度小于10μm，制得食用碳酸鈣超微細(xì)粉。
復(fù)合氨基酸或胎盤蛋白置真空干燥機(jī)里，在40℃±5℃的條件下干燥，水分控制到5％以下，過80目篩。
將各種原料混勻，減壓干燥，微波滅菌，控制頻率為2450MHZ，功率350WH-1，時間90秒左右，以減少對活性成份的損失，最后進(jìn)行質(zhì)檢、包裝等常規(guī)程序。
權(quán)利要求
1．鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑，其特征在于配方為(重量％)鱉甲細(xì)粉45-90％，胎盤蛋白細(xì)粉或復(fù)合氨基酸細(xì)粉10-55％。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑，其特征在于上述配方可優(yōu)選為(重量％)鱉甲細(xì)粉60-80％，胎盤蛋白細(xì)粉或復(fù)合氨基酸細(xì)粉20-30％。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑，其特征在于還可加入以下組份(重量％)碳酸鈣細(xì)粉0-25％、維生素D0-100IU、鋅元素0-1mg、鐵元素0-0.1mg、硒元素0-15μg、碘0-4μg，復(fù)合維生素0-10mg，加至總量100％。
4．根據(jù)權(quán)利要求3所述的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑，其特征在于所述細(xì)粉均為超微細(xì)粉。
5．制備權(quán)利要求1所述的鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑的方法①將天然鱉甲清洗后，在50℃±5℃下干燥，水分控制在8％以內(nèi)；②將鱉甲粗粉碎，過80目篩；③將鱉甲粗粉和復(fù)合氨基酸或胎盤蛋白分別真空干燥，溫度控制在40℃±5℃，水分控制到5％以下，復(fù)合氨基酸或胎盤蛋白過80目篩；④用氣流粉碎機(jī)分別對鱉甲粗粉進(jìn)行超微粉碎，鱉甲的粉碎壓力(表壓)0.7-1.0MPa，加料壓力0.2-0.5MPa，空氣量17-18m3/in，出料粒度小于10μm；⑤對食用碳酸鈣進(jìn)行干燥，溫控在80℃±5℃之間，水分控制在5％以內(nèi)，然后進(jìn)入氣流粉碎機(jī)粉碎，粉碎壓力(表壓)0.6-0.8MPa，加料壓力0.2-0.5MPa，空氣量15.2-20.6m3/min，控制粒度小于10μm，得超微細(xì)粉。⑥按比例將各組分進(jìn)行活性分子配伍，并通過滅菌，最后質(zhì)檢、包裝。
全文摘要
本鱉甲氨基酸鈣免疫調(diào)節(jié)制劑及制備方法,其配方為鱉甲超微細(xì)粉(重量%)45—90%、胎盤蛋白細(xì)粉或復(fù)合氨基酸細(xì)粉10—55%,還可有碳酸鈣超微細(xì)胞0—25%,維生素DO－100IU和各種微量元素,本制劑鈣含量高,易于被人體吸收,具有營養(yǎng)滋補(bǔ)功能和免疫調(diào)節(jié)效果。
文檔編號A61P37/02GK1284341SQ9911744
公開日2001年2月21日 申請日期1999年12月9日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月9日
發(fā)明者鄒全明 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)