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可用于穩(wěn)定微管的珊瑚素和五加苷素的制作方法

文檔序號:1072137閱讀:586來源:國知局

專利名稱::可用于穩(wěn)定微管的珊瑚素和五加苷素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明分別涉及珊瑚素(sarcodictyin)A和B、五加苷素(eleutherobin)及其衍生物,并且涉及其制備方法。具體來說,本申請涉及珊瑚素和五加苷素的類似物并涉及其合成和使用以及含有這些化合物的藥物組合物。政府權(quán)利本發(fā)明受政府支持,國家衛(wèi)生協(xié)會(NationalInstitutesofHealth)給予授權(quán)號CA46446。美國政府對本發(fā)明擁有一定的權(quán)利。
背景技術(shù)
:珊瑚素A(7)和B(8)(合成方案1)是由Pietra等人在地中海多莖目珊瑚Sarcodictyonroseum中發(fā)現(xiàn)的并是在1987年第一次報(bào)告的(D’Ambrosio等人,瑞士化學(xué)學(xué)報(bào)1987,70,2019—2027;D’Ambrosio等人,瑞士化學(xué)學(xué)報(bào)1988,71,964—976)。珊瑚素C—F隨后由相同的人員公開(D’Ambrosio等人,瑞士化學(xué)學(xué)報(bào)1988,71,964—976)。合成方案1紫杉醇TM(1)、epothilonesA(2)和B(3)、五加苷素(4)、eleuthosidesA(5)和B(6)和珊瑚素A(7)和B(8)(Ac=乙?;珺z=苯甲?;?的分子結(jié)構(gòu)五加苷素是由Fenical等人從Eleutherobia種的軟珊瑚(可能是E.a(chǎn)lbifloraAlcynacea,Alcyoniidea,采集自靠近澳大利亞西部Bennett’s沙洲的印度洋)中分離的并且于1995第一次進(jìn)行了報(bào)道(Fenical等人,美國專利5473057,1995年12月5日)。eleuthosidesA(5)和B(6)是從Eleutherobiaaurea種的軟珊瑚(采集自南非Kwazula—Natal海岸附近)中分離的并且是由Kashman等人報(bào)道的(Ketzinel等人,J.Nat.Prod.1996,59,873—875)。這些物質(zhì)與五加苷素(4)密切相關(guān)。valdivone(6)是由Kennart和Watson第一次報(bào)道的(Lin等人,四面體,1993,49,7977—7984)。這些物質(zhì)從結(jié)構(gòu)上和其生物作用上也都與五加苷素(4)相關(guān)并且與eleuthosidesA(5)和B(6)也相關(guān)(合成方案1)。上述所有四種海洋衍生的天然產(chǎn)物(4—8)都與土壤衍生(粘細(xì)菌)的epothilonesA(2)和B(3)和存在于森林中的紫杉醇_(1)(合成方案1)具有相同的作用機(jī)制(Lindel等人,美國化學(xué)會志,1997,119,8744—8745;Long等人,癌癥研究,1988,58,1111—1115)。該機(jī)制包括微管蛋白聚合和微管穩(wěn)定。所需要的是具有增強(qiáng)生物活性的珊瑚素A和B以及五加苷素的合成類似物,和生產(chǎn)這些天然產(chǎn)物及其生物活性類似物的合成方法。本發(fā)明概述本發(fā)明涉及五加苷素、eleuthosidesA和B以及珊瑚素A和B的生物活性類似物,并且涉及其合成方法和促進(jìn)微管蛋白裝配和/或穩(wěn)定微管的用途。尤其是,本發(fā)明的一個(gè)重要方面涉及五加苷素、eleuthosidesA和B以及珊瑚素A和B的類似物。優(yōu)選的類似物由下式[A]表示上述結(jié)構(gòu)中優(yōu)選的R1基團(tuán)包括基團(tuán)—OH和—OAc(Ac=乙酰基)或任何由下列結(jié)構(gòu)表示的基團(tuán)優(yōu)選的R2基團(tuán)包括下列基團(tuán)—OH、—O(C1—C6烷基)、—OCH2CF3、—O—異丙基、—O—叔丁基、—O—芐基、—OCH2CH=CH2、—OCH2CCH、—O(CH2)2—OH、—NHMe、—NMe2、—NHEt、—NEt2、—NH—正丙基、—N—(丙基)2、—NH—異丙基、—N—(丁基)2、—NH—芐基、—N—芐基2、—SH、—SMe、—SEt、—S—正丙基、—S—異丙基、—S—正丁基、—S—芐基和—S—苯基(Me=甲基、Et=乙基)。優(yōu)選的R3基團(tuán)包括下列基團(tuán)—CH2OC(O)CH3、—CH2OC(O)—苯基、—CH2OC(O)O—CH3、—CH2OC(O)NH—苯基、—CH2—OH、—CH(O)、—CH2—O—三異丙基甲硅烷基、—CH2O—Ac、—CH2—F、—CH2N3、—OHNAc、—CH2NBz、—C(O)—O(C1—C6烷基)、—C(O)—CH2CF3、—C(O)—CH2CHCH2、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH(CH3)、—C(O)CH2Ph、—C(O)CH2—苯基—OMe、—CH2—O—四氫吡喃、—CH2—O—C(O)CHCl2、—CH2—O—C(O)—CCl3、—CH2—O—C(O)CHBr2、—CH2—O—C(O)—CF3、—CH2—O—C(O)CHPh2、EtC(O)—O—CH2—、CH2=CHC(O)—O—CH2—、HCCC(O)—O—CH2—、正丙基—C(O)—O—CH2—、i—PrC(O)—O—CH2—、環(huán)丙基—C(O)—O—CH2—、n—BuC(O)—O—CH2—、i—BuC(O)—O—CH2—、t—BuC(O)—O—CH2—、環(huán)—C6H11C(O)—O—CH2—、苯基—O—CH2—、2—呋喃基—C(O)—O—CH2—、PhCH=CHC(O)—O—CH2—、2—噻吩—C(O)—O—CH2—、(C1—C6烷基)—O—CH2—、異丙基—O—CH2—、烯丙基—O—CH2—、芐基—O—CH2—、AcOCH2CH2—O—CH2—、—COOH、—COO—(C1—C6烷基)、—COO—異丙基、—COO—叔丁基、—COO—芐基、—COOCH2CH=CH2、—COOCH2CCH、—COO—環(huán)C6H11、—CONHBn、—CONH(C1—C6烷基)、—CONH—丙基和—COO—C8H17;以及選自下列結(jié)構(gòu)所表示的基團(tuán)(Me=甲基、Et=乙基、Ac=乙酰基、Bz=Bn=芐基、i—Pr=異丙基、n—Bu=正丁基、i—Bu=異丁基、t—Bu=叔丁基)優(yōu)選的R4基團(tuán)包括下列基團(tuán)—OH、—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—。優(yōu)選的R5基團(tuán)包括—OAc和—OH。優(yōu)選的R6基團(tuán)包括—OAc和—OH。優(yōu)選的R7基團(tuán)包括—H和甲基。優(yōu)選的R8基團(tuán)包括—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—。然而,存在下列條件a.如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能同時(shí)為—CO2—甲基或—CO2—乙基;b.如果R1是并且R2為—O—甲基,那么R3不能為其中R4是—OAc,R5是羥基,R6是羥基,并且R7是氫;如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能為其中R4是—OAc,R5是羥基,R6是—OAc,并且R7是氫;和d.如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能為其中R4和R5是—OAc,R6是—OH,并且R7是氫。本發(fā)明的另一方面涉及由下列結(jié)構(gòu)表示的第一高級中間體(具體參見化合物Ⅲ*,見下文中的合成方案2)優(yōu)選的R1和R3基團(tuán)定義與上文珊瑚素A和B以及五加苷素的類似物中的定義相同,只是沒有附加條件。本發(fā)明的另一方面涉及由下列結(jié)構(gòu)表示的第二高級中間體(尤其是化合物Ⅱ*,見下文中的合成方案2)優(yōu)選的R1和R3基團(tuán)定義與上文珊瑚素A和B以及五加苷素的類似物中的定義相同,只是沒有附加條件。本發(fā)明的另一方面涉及一種環(huán)化上文所述的第一高級中間體(尤其是化合物Ⅲ*,見下文中的合成方案2)產(chǎn)生上文所述的第二高級中間體(尤其是化合物Ⅱ*,見下文中的合成方案2)的方法。該方法采用了環(huán)化第一高級中間體產(chǎn)生第二高級中間體的步驟。本發(fā)明的另一方面涉及一種環(huán)化上文所述的第二高級中間體(尤其是化合物Ⅱ*,見下文中的合成方案2)產(chǎn)生第三高級中間體(尤其是化合物Ⅰ,合成方案2)的方法。第三高級中間體可由下列結(jié)構(gòu)來表示優(yōu)選的R1和R3基團(tuán)定義與上文珊瑚素A和B以及五加苷素的類似物中的定義相同,只是沒有附加條件。該方法采用了環(huán)化第二高級中間體產(chǎn)生第三高級中間體的步驟。然后,五加苷素、eleuthosidesA和B、珊瑚素A和B的優(yōu)選類似物可通過在第三高級中間體上進(jìn)行R2取代來產(chǎn)生。本發(fā)明詳述本發(fā)明涉及珊瑚素A和B、五加苷素、珊瑚素類似物、五加苷素類似物、珊瑚素和五加苷素類似物二者的數(shù)據(jù)庫,和利用固相和溶液相化學(xué)制備這些化合物的方法。本發(fā)明提供在珊瑚素A和B、五加苷素和eleuthosidesA(5)和B(6)的全合成中產(chǎn)生的類似物,五加苷素(4)的絕對立體化學(xué)和大量這些化合物的類似物的構(gòu)造。本發(fā)明的另一實(shí)施方案涉及固相化學(xué),它提供組合的珊瑚素?cái)?shù)據(jù)庫及其生物學(xué)評價(jià),由此發(fā)現(xiàn)了比那些天然產(chǎn)品具有更高的抗腫瘤功效的類似物。所獲得的知識提供了關(guān)于結(jié)構(gòu)活性與珊瑚素—五加苷素分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系的重要信息并確定了本領(lǐng)域進(jìn)一步前進(jìn)的方向。在本公開中,下列縮寫具有下列含義Me表示甲基;Et表示乙基;i—Pr是異丙基;n—Pr是正丙基;t—Bu、tert—Bu或tBu表示叔丁基;i—Bu是異丁基;Bz是芐基;Ph是苯基;c—Pro是環(huán)丙基;c—Bu是環(huán)丁基;Ac是乙酰基;其它縮寫在本文中使用時(shí)是不言而喻的或毋須解釋的。優(yōu)選地,本發(fā)明涉及式[A]化合物,其中R1是R2是選自—O—Me、—O—Et和—O—CH2CF3的基團(tuán);并且R3是選自—C(O)—O—Me、—C(O)—O—Et、—C(O)—O—正丙基、—C(O)—O—正丁基、—C(O)—(CH2)3—CH2—Phe、—C(O)—O—CH2CH2OBn、—C(O)—NHMe、—C(O)—蒽—9—基、—C(O)—O—CH2CH=CH2、—C(O)—O—(CH2)2CH2Cl和—C(O)—NH—芐基的基團(tuán)。更優(yōu)選地,本發(fā)明涉及式[A]化合物,其中R1如上段所定義,R2是選自—O—Me、—O—Et和—O—CH2CF3的基團(tuán);并且R3是選自—C(O)—O—Me、—C(O)—O—Et、—C(O)—O—正丙基、—C(O)—O—CH2CH=CH2、—C(O)—O—(CH2)2CH2Cl和—C(O)—NH—芐基的基團(tuán)。更優(yōu)選地,本發(fā)明涉及式[A]化合物,其中R1是R2是—O—甲基或—O—乙基,并且R3是—C(O)—甲基、—CH(OMe)2或—C(O)—NH—芐基。更優(yōu)選地,本發(fā)明也涉及式[A]化合物,其中R1是R2是—O—甲基或—O—乙基,并且R3是—C(O)—O—甲基、—C(O)—O—乙基、—C(O)—O—正丙基、—C(O)—O—正丁基、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)—O—(CH2)3—CH2—苯基、—C(O)—O—CH2CH2—O—芐基、—C(O)—O—CH2CH=CH2、CH(OMe)2、—C(O)—NH—甲基或—C(O)—O—蒽—9—基甲基。最優(yōu)選地,本發(fā)明涉及實(shí)施例中所描述的化合物600、730—750和/或850,或者實(shí)施例中所描述的化合物600、610、630、660—700、730、760、850和/或920。最優(yōu)選的是化合物600、610、670和/或680。式〔A〕化合物,包括它們的鹽(如果存在任何成鹽基團(tuán)),也可以以水合物的形式得到,或者例如,它們的結(jié)晶中可包括結(jié)晶用的溶劑。本發(fā)明也涉及制備方法,其中在該方法的任何步驟中可作為中間體獲得的化合物被用作原料并且進(jìn)行剩余的工藝步驟,或者其中在反應(yīng)條件下形成原料或使用其衍生物形式,例如其保護(hù)形式或其鹽的形式,或者在工藝條件下產(chǎn)生通過本發(fā)明方法可獲得的化合物并在現(xiàn)場進(jìn)一步處理。在本發(fā)明的方法中,優(yōu)選使用那些產(chǎn)生本文一開始作為特別有價(jià)值的化合物描述的式Ⅰ化合物的原料。具體優(yōu)選類似于實(shí)施例中描述的反應(yīng)條件。藥物制劑本發(fā)明也涉及治療溫血?jiǎng)游锛膊〉姆椒?,所述溫血?jiǎng)游锘荚鲋臣膊?,特別是腫瘤疾病并且特別是對抑制微管蛋白解聚有響應(yīng)的疾病,該方法包括給予需要該治療作用的溫血?jiǎng)游镆种颇[瘤有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽,或者利用式Ⅰ化合物治療。本發(fā)明也涉及式Ⅰ化合物或其可藥用鹽在抑制溫血?jiǎng)游锏鞍准っ窩中的應(yīng)用或在制備用于治療人或動物疾病的藥物組合物中的應(yīng)用。依賴于物種、年齡、個(gè)體條件、給藥方式和特定臨床圖象,給予體重大約70kg的溫血?jiǎng)游锏挠行┝?,例如每日劑量大約為0.01—1000mg,特別是0.1—500mg。本發(fā)明也涉及藥物組合物,它包含有效量特別是有效預(yù)防或治療上述疾病之一量的活性組分和可藥用載體,所述載體適用于局部、腸內(nèi)例如口服或直腸,或非腸道給藥并且可以是無機(jī)或有機(jī)的固體或液體。用于口服給藥的制劑特別是片劑或明膠膠囊劑,后者包含活性組分和稀釋劑,例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素和/或甘油,和/或潤滑劑,例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸或其鹽,如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣,和/或聚乙二醇。片劑也可以包含粘合劑,例如硅酸鎂鋁、淀粉,如玉米淀粉、小麥淀粉或大米淀粉、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮,并且如果需要,可以包含崩解劑,例如淀粉、瓊脂、藻酸或其鹽,如藻酸鈉,和/或泡騰混合物,或吸附劑,染料,矯味劑和甜味劑。具有藥理活性的本發(fā)明化合物也可以以非腸道給藥的組合物形式使用或以輸注液形式使用。優(yōu)選地,例如,該溶液是單獨(dú)或與載體如甘露糖醇一起包含活性組分的凍干組合物在使用前配制成的等滲水溶液或懸浮液。所述藥物組合物可以是滅菌的和/或可以包含賦形劑,例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑和/或乳化劑、加溶劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。用本身已知的方法,例如通過常規(guī)的混合、制粒、調(diào)制、溶解或凍干方法來制備本發(fā)明藥物組合物,如果需要,該藥物組合物中可包含其它具有藥理活性的物質(zhì)如抗生素,并且包含大約1%—100%,特別是大約1%—大約20%的活性組分。下列實(shí)施例用于說明本發(fā)明—它們不以任何方式限制本發(fā)明范圍。實(shí)施例Ⅰ.珊瑚素A和B的全合成該實(shí)施例提供具有微管蛋白聚合和微管穩(wěn)定性質(zhì)的細(xì)胞毒性海洋天然產(chǎn)品珊瑚素A(7)和B(8)的全合成。已發(fā)現(xiàn)兩種與這些靶分子有關(guān)的方法,它們都是利用(+)—香芹酮(9)作為起始物質(zhì)。第一種方法涉及炔屬醛27(參見下面合成方案4)的立體選擇性構(gòu)造,而第二種方法是通過對類似的中間體36(參見下面合成方案6)更直接的但選擇性較差的順序進(jìn)行的。兩種策略都涉及在堿性條件下,將炔屬醛前體閉環(huán)得到10元環(huán),然后將炔鍵加工和選擇性還原得到順式雙鍵。這促進(jìn)橋接以便形成所需要的珊瑚素的三環(huán)骨架(參見下面合成方案7中27→37→38→39→4,并參見下面合成方案9中37→44→45→46→47→42)和(參見下面合成方案10中36→4→45)。通過用混合的酸酐52酯化,得到(E)—N(6’)—甲基尿刊酸殘基的結(jié)構(gòu),而C—3酯部分是通過標(biāo)準(zhǔn)的脫保護(hù)、氧化和酯化方法安置的。逆合成分析和策略珊瑚素(Ⅰ*,合成方案2)的一般結(jié)構(gòu)的特征是其上有許多側(cè)枝的剛性三環(huán)骨架。合成方案2五加苷素(4)、eleuthosidesA(5)和B(6)以及珊瑚素A(7)和B(8)核心結(jié)構(gòu)的逆合成分析。Ra—C(O)—O—優(yōu)選具有與式[A]定義的R3相應(yīng)的含義;Rb—O—優(yōu)選具有與式[A]定義的R2相應(yīng)的含義;并且Rc—O—優(yōu)選具有與式[A]定義的R1相應(yīng)的含義。(A)=乙炔化物醛加成;(B)=乙炔化物酮加成;并且(C)=諾文葛耳縮合反應(yīng)這些側(cè)基中主要是C—3位的羧酸鹽基團(tuán)、C—4位的羥基和載有(E)—N(6)—甲基尿刊酸殘基的C—8位的酯基。包含在C—4位上的內(nèi)半縮醛官能基中的橋接氧允許策略性斷開,解開Ⅰ的[6.2.1]雙環(huán)結(jié)構(gòu)形成10—元環(huán)Ⅱ*。按合成方向,后一結(jié)構(gòu)預(yù)期能自動折疊恢復(fù)成Ⅰ*。Ⅱ*中的5,6—順式—雙鍵可由相應(yīng)的乙炔部分衍生,通過逆乙炔化物—醛加成使C4—C5斷開而導(dǎo)致開鏈的炔屬醛Ⅲ*。結(jié)構(gòu)式Ⅲ*中經(jīng)過逆乙炔化物—酮加成和諾文葛耳縮合反應(yīng)進(jìn)行兩次進(jìn)一步的斷開產(chǎn)生中間體Ⅳ*,其結(jié)構(gòu)高度啟示(+)—香芹酮(9)。該逆合成分析產(chǎn)生合成策略,其實(shí)施有效地全合成珊瑚素A(7)和B(8)。該過程可分為三步構(gòu)建關(guān)鍵的環(huán)化前體、環(huán)化并形成三環(huán)骨架以及構(gòu)建剩余的側(cè)鏈。構(gòu)建環(huán)化前體27和36該合成方案要求首先構(gòu)建通式(Ⅲ*,合成方案2)的環(huán)化前體??紤]保護(hù)基和可能的途徑來確定作為子靶的結(jié)構(gòu)27(參見下文合成方案4)和作為其構(gòu)建所需關(guān)鍵中間體的化合物14(參見下文合成方案3)。Trost等人在美國化學(xué)會志,1991,113,670—672中的研究進(jìn)一步加強(qiáng)了(+)—香芹酮(9)作為該合成起始物質(zhì)的要求,該文獻(xiàn)描述了將所述起始物質(zhì)轉(zhuǎn)化為化合物13(合成方案3)。因此,通過對文獻(xiàn)中所述方法的改進(jìn),按照合成方案3所示的方法制備13。合成方案3合成關(guān)鍵中間體(14)。試劑和條件a)1.2當(dāng)量H2O2,0.3當(dāng)量NaOH,甲醇,2小時(shí),0℃;b)H2,0.005當(dāng)量PtO2,乙醇,12小時(shí),25℃,兩步總產(chǎn)率87%;c)1.4當(dāng)量LDA,5.0當(dāng)量CH2O,THF,—78—0℃,2小時(shí);d)1.2當(dāng)量TBSCl,4.0當(dāng)量三乙胺,二氯甲烷,12小時(shí),兩步總產(chǎn)率53%;e)1.2當(dāng)量L—selectride,THF,—78℃,2小時(shí),93%;f)1.2當(dāng)量MsCl,2.5當(dāng)量三乙胺,二氯甲烷,0℃,0.5小時(shí);g)5.0當(dāng)量萘基鈉,THF,0℃,0.5小時(shí),兩步總產(chǎn)率85%;h)40當(dāng)量CH3C(OEt)3,0.1當(dāng)量正丁酸,170℃,72小時(shí),74%;i)1.2當(dāng)量DIBAL,二氯甲烷,—78℃,0.5小時(shí),97%。LDA=二異丙基氨化鋰,TBS=叔丁基二甲基甲硅烷基,MsCl=甲磺酰氯,DIBAL=二異丁基氫化鋁在堿性過氧化氫條件下,將(+)—香芹酮環(huán)氧化,然后,將該外向環(huán)雙鍵氫化得到10,總產(chǎn)率87%。用LDA(縮寫參見合成方案的說明)處理10,然后用甲醛猝滅并將所得到的醇甲硅烷基化得到甲硅烷基醚11,總產(chǎn)率53%。將11中的酮官能團(tuán)進(jìn)行立體選擇性L-Selectride_還原,得到12(93%)。接著甲磺?;?,然后用萘基鈉還原得到烯丙基醇13(總產(chǎn)率85%)。最后,將13暴露到CH3C(OEt)3和n—PrCO2H中,通過克萊森重排作用得到預(yù)期的乙基酯,將其用DIBAL還原得到醛14(兩步總產(chǎn)率72%)。合成方案4顯示將14立體選擇性轉(zhuǎn)化為27。合成方案4第一種合成乙炔—醛化合物27的方法。試劑和條件a)1.5當(dāng)量(EtO)2P(O)CH2CO2Et,2.0當(dāng)量NaH,THF,0℃,1小時(shí),然后25℃,4小時(shí),100%;b)4.0當(dāng)量DIBAL,二氯甲烷,—78℃,2小時(shí),91%;c)0.2當(dāng)量Ti(OiPr)4,0.24當(dāng)量L—酒石酸二乙酯,2.0當(dāng)量t—BuOOH,4_MS,二氯甲烷,—20℃,8小時(shí),91%;d)5.0當(dāng)量MsCl,6.0當(dāng)量三乙胺,二氯甲烷,—20℃,1小時(shí);e)5.0當(dāng)量萘基鈉,THF,0℃,10分鐘,兩步總產(chǎn)率90%;f)5.0當(dāng)量PMBOC(=NH)CCl3,1.0當(dāng)量PPTS,二氯甲烷,25℃,48小時(shí);在大約50%轉(zhuǎn)化率的基礎(chǔ)上產(chǎn)率為89%;g)1.1當(dāng)量Hg(OAc)2,甲醇,25℃,12小時(shí);然后1.0當(dāng)量Li2PdCl4,3.0當(dāng)量CuCl2,甲醇,55℃,3小時(shí),65%;h)15當(dāng)量HCCMgBr(0.5M的THF溶液),二氯甲烷THF(3∶1),—78—25℃,12小時(shí);i)4.0當(dāng)量TBAF,THF,25℃,1小時(shí),兩步總產(chǎn)率72%,ds比大約為7∶1;j)1.5當(dāng)量Dess—Martin過碘烷(periodinane),20當(dāng)量吡啶,20當(dāng)量碳酸氫鈉,二氯甲烷,0—25℃,4小時(shí);k)30當(dāng)量NCCH2COOEt,4.0當(dāng)量β—丙氨酸,95%乙醇,25℃,72小時(shí);l)5.0當(dāng)量TMSOTf,10當(dāng)量iPr2NEt,二氯甲烷,—78℃,10分鐘,三步的總產(chǎn)率71%;m)10當(dāng)量DIBAL,二氯甲烷,—78℃,4小時(shí),然后—40℃1小時(shí),80%;n)10當(dāng)量TIPSOTf,20當(dāng)量乙基—二異丙基胺,二氯甲烷,—78℃,1小時(shí),91%。TBS=叔丁基二甲基甲硅烷基;DIBAL=二異丁基氫化鋁;PMB=對甲氧基芐基;PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓;TMS=三甲基甲硅烷基;TIPS=三異丙基甲硅烷基;Ms=甲磺酰基;TBAF=四—正丁基氟化銨;D—M[O]=Dess—Martin氧化;Tf=三氟甲磺酸鹽;MS=分子篩;THF=四氫呋喃因此,在NaH存在下,將醛14用膦?;宜崛阴ザ肯┗玫揭一?5。將15進(jìn)行DIBAL還原,得到烯丙醇16,產(chǎn)率91%,并接著進(jìn)行Sharpless不對稱環(huán)氧化(L—酒石酸二乙酯),得到環(huán)氧化物17(產(chǎn)率91%)。通過甲磺酸酯18,將環(huán)氧化物17轉(zhuǎn)化為烯丙醇19,總產(chǎn)率90%。19被保護(hù)成PMB醚[PMBOC(=NH)CCl3,PPTS,基于約50%轉(zhuǎn)化率的產(chǎn)率為89%],然后依次用Hg(OAc)2和Li2PdCl4—CuCl2l8處理產(chǎn)生甲基酮21(產(chǎn)率65%)。HCCMgBr(過量)螯合受控加成為酮21,然后用TBAF脫甲硅基化獲得作為主要非對映異構(gòu)體的炔屬二醇22(產(chǎn)率72%,約7∶1de)。用過量的Dess—Martin試劑試圖將醇22氧化為醛23形成內(nèi)酯Z(合成方案5),m.p.5120—121C(乙醚—己烷),產(chǎn)率60%。合成方案5合成Z(高級中間體22的絕對立體化學(xué)是由Z的X—射線圖推斷的)。a)3.0當(dāng)量的Dess—Martin過碘烷、20當(dāng)量的碳酸氫鈉、二氯甲烷0—25℃,12小時(shí),70%該結(jié)晶化合物的意外制得允許相對立體化學(xué)在22和隨后的中間體中排布(通過X—射線結(jié)晶學(xué)分析)。在吡啶和碳酸氫鈉存在下用1.5當(dāng)量的Dess—Martin試劑控制氧化22以好的產(chǎn)率產(chǎn)生所需的醛23。在β—丙氨酸存在下用氰基乙酸乙酯使醛23進(jìn)行諾文葛耳縮合反應(yīng),用TMSOTf和i—Pr2NEt甲硅烷基化后,經(jīng)24產(chǎn)生(E)—α,β—不飽和氰基酯25(總產(chǎn)率為71%)。通過成功閉環(huán)為中間體37(參見下文合成方案7)來證實(shí)具有雙鍵的氰基酯的幾何形狀。用DIBAL高度區(qū)域選擇性地還原25的氰基酯部分以80%的產(chǎn)率產(chǎn)生羥基醛26。最后,用TMSOTf和i—Pr2NEt保護(hù)26中的伯醇以91%的產(chǎn)率產(chǎn)生靶向保護(hù)的炔屬醛前體27。如合成方案6所示,也可進(jìn)行第二種環(huán)化前體炔屬醛36的途徑(立體選擇性小但更直接)。合成方案6第二種合成乙炔—醛化合物36的方法。試劑和條件a)2.0當(dāng)量CH2=CH(OEt),1.8當(dāng)量t—BuLi(1.7M的THF溶液),THF,—78℃—0℃,1小時(shí),然后冷卻至—78℃并加入14的THF溶液;然后緩慢溫?zé)嶂?0℃;b)濃H2SO4,乙醚,25℃,2分鐘,兩步總產(chǎn)率82%,大約1.25∶1非對映異構(gòu)體混合物;c)5.0當(dāng)量溴化乙炔鎂(0.5MTHF溶液),THF,—78℃—20℃,14小時(shí),76%,29(43℃)加7,8—非對映異構(gòu)體(33%);d)29,2.0當(dāng)量TBAF(1.0M的THF溶液),TdF,0℃—25℃,1小時(shí)92%;e)5.0當(dāng)量TESOTf,10當(dāng)量三乙胺,二氯甲烷,25℃,2小時(shí);100%;f)0.1當(dāng)量PPTS,甲醇∶二氯甲烷(3∶1),25℃,45分鐘,98%;g)0.05當(dāng)量TPAP,1.5當(dāng)量NMO,二氯甲烷,4_MS,1.5小時(shí),98%;h)30當(dāng)量氰基乙酸乙酯,4.0當(dāng)量β—丙氨酸,95%乙醇,72小時(shí),50℃,95%;i)10當(dāng)量DIBAL,己烷,—78℃,6小時(shí),然后—40℃1小時(shí),然后—10℃1小時(shí),90%;j)5.0當(dāng)量TIPSOTf,10當(dāng)量iPr2NEt,二氯甲烷,—78℃,1小時(shí),93%。THF=四氫呋喃,TBAF=四—正丁基氟化銨,TESOTf=三氟甲磺酸三乙基甲硅烷基酯,PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓,TPAP=四—正丙基過釕酸銨,NMO=4—甲基嗎啉N—氧化物,MS=分子篩;DIBAL=二異丁基氫化鋁,TIPSOTf=三氟甲磺酸三異丙基甲硅烷基酯因此,將醛14(Nicolaou等人,美國化學(xué)會志,1997,119,11353—11354)與1—乙氧基乙烯基鋰反應(yīng),然后暴露到酸中,得到1.25∶1的C8—差向異構(gòu)羥基酮28的混合物,總產(chǎn)率82%。然后通過立體選擇性方法,將該混合物與過量溴化乙炔基鎂反應(yīng),得到可通過色譜方法分離的兩種差向異構(gòu)炔屬二醇29(產(chǎn)率43%)及其C7、C8—非對映異構(gòu)體(產(chǎn)率33%)的混合物。通過暴露到TBAF中除掉29的甲硅烷基保護(hù)基,在閃式柱色譜層析后,得到純?nèi)?0(92%)。通過與由22(如上所述,其結(jié)構(gòu)可通過X—射線分析明確地證明)得到的可信樣品比較來確定30的特性。30轉(zhuǎn)化為醛33需要由中間體31(用TESOTf—三乙胺過甲硅烷基化(persilylation),產(chǎn)率100%)和32(用PPTS的甲醇溶液選擇性脫甲硅基化,產(chǎn)率98%)確定的步驟和將后一化合物用TPAP—NMO在二氯甲烷中氧化(產(chǎn)率98%)。如上對33所述,通過將33與氰基乙酸乙酯平穩(wěn)地進(jìn)行諾文葛耳縮合反應(yīng),得到(E)—α,β—不飽和—氰基酯34(產(chǎn)率95%),將其進(jìn)行DIBAL還原,得到區(qū)域選擇性羥基醛35(產(chǎn)率90%)。將35用TIPSOTf和i—Pr2NEt甲硅烷基化,最終得到所需要的炔屬醛前體36,產(chǎn)率93%。環(huán)化并形成三環(huán)骨架第一種合成珊瑚素的方法涉及關(guān)鍵中間體27且其最初的子靶為三環(huán)化合物42(合成方案7)。合成方案7第一種合成珊瑚素三環(huán)核心結(jié)構(gòu)42的方法。試劑和條件a)、1.5當(dāng)量LiHMDS,THF,25℃,10分鐘;b)、2.5當(dāng)量Dess—Martin過碘烷,20當(dāng)量碳酸氫鈉,二氯甲烷,0—25℃,4.5小時(shí),兩步總產(chǎn)率85%;c)、1.0當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,30分鐘,94%;d)、0.3當(dāng)量Lindlar’s催化劑,H2,甲苯,25℃,20分鐘,75%的40,加上15%的5,6—二氫類似物;e)、1.0當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,10分鐘,100%;f)、10當(dāng)量Na—液態(tài)NH3,—78℃;然后加入41的THF—乙醇溶液,5分鐘,產(chǎn)率95%,42與5,6—二氫—類似物43的大約2∶1的混合物。THF=四氫呋喃;LiHMDS=雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰;PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓;Lindlar催化劑=Pd/CaCO3/Pb。42∶43=大約2∶1∶通過在25℃下,在THF中的LiHMDS作用,將27閉環(huán),得到預(yù)期的10—元環(huán)狀醇(兩種異構(gòu)體的混合物),將其用Dess—Martin試劑氧化得到烯炔酮37,總產(chǎn)率85%。然后通過暴露到PPTS的甲醇溶液中,將37的TMS基除掉,得到醇38,產(chǎn)率94%。將烯炔酮38在Lindlar催化劑存在下氫化,形成三環(huán)體系40(產(chǎn)率75%),據(jù)推測,這是由最初形成的二烯酮39自發(fā)折疊形成的。通過暴露到PPTS的甲醇溶液中,半縮酮40定量地轉(zhuǎn)化為它的甲氧基衍生物41。為了連接側(cè)鏈,用液態(tài)NH3(THF—乙醇)中的Na除掉41上的PMB基并得到目標(biāo)三環(huán)體系42及其C5—C6飽和的對應(yīng)物,化合物43(總產(chǎn)率95%,比例大約為2∶1)。合成方案9顯示的是略加改進(jìn)的步驟。合成方案9制備三環(huán)核心42的另一途徑。試劑和條件a)、2.0定量DDQ,二氯甲烷H2O(18∶1),25℃,0.5小時(shí),80%;b)、1.0當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,1小時(shí),80%;c)、0.05當(dāng)量[Rh(nbd)(dppb)]BF4,H2,丙酮,25℃,10分鐘;d)、0.5當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,10分鐘,兩步總產(chǎn)率80%。DDQ=2,3—二氯—5,6—二氰基—1,4—苯醌;PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓;nbd=2,5—降冰片二烯,dppb=1,4—二(二苯基膦)丁烷特別地,在用DDQ的二氯甲烷水溶液處理后,除掉37的PMP—醚,得到羥基炔酮44,產(chǎn)率80%。通過加入PPTS的甲醇溶液游離出炔丙基羥基部分,得到二醇45,產(chǎn)率80%。用[Rh(nbd)(dppb)]BF4作為氫化反應(yīng)的催化劑證明是有益的,因?yàn)樵谛纬杉谆s酮官能團(tuán)(PPTS,甲醇)后,分離到三環(huán)醇42,產(chǎn)率80%。在第一種方法中C5—C6雙鍵還原的顯著程度(在將38氫化為40的反應(yīng)中可見)加速制備第二種合成珊瑚素方法的進(jìn)行,所述第二種方法涉及攜帶易于除掉的不同保護(hù)基的中間體36(合成方案10),合成方案10詳細(xì)描述了將所述中間體轉(zhuǎn)化為關(guān)鍵性二羥基炔酮45的方法。合成方案10第二種合成炔酮45的方法。試劑和條件a)、2.0當(dāng)量LiHMDS,THF,—20℃,20分鐘;b)、Dess—Martin氧化2.0當(dāng)量Dess—Martin過碘烷,6.0當(dāng)量碳酸氫鈉,6.0當(dāng)量吡啶,二氯甲烷,0℃,1小時(shí),兩步總產(chǎn)率89%;c)、5.0當(dāng)量三乙胺·3HF,THF(1∶5),25℃,1.5小時(shí),78%。LiHMDS=雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰;THF=四氫呋喃因此,如上所述,在—20℃下,在THF中,用LiHMDS處理36,得到10—元環(huán)狀醇48(非對映異構(gòu)體的混合物),將其立即用Dess—Martin試劑氧化,得到烯炔酮49(兩步總產(chǎn)率89%)。通過暴露到三乙胺·3HF中,選擇性除掉兩個(gè)TES基(產(chǎn)率78%),得到二醇45并確定選擇性氫化和內(nèi)部環(huán)化步驟。為此,利用炔屬底物37(合成方案7),38(合成方案7)和45(合成方案10)和各種氫化條件進(jìn)行合成方案8和表1中所概述的試驗(yàn)。合成方案8和表1構(gòu)建珊瑚素三環(huán)核心的選擇性氫化研究。試劑和條件(A)(=表1中的條件);a)、1.0當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,30分鐘,94%;b)、Lindlar’scat.=Pd/CaCO3/Pb;PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓;nbd=2,5—降冰片二烯;dppb=1,4—二(二苯基膦)丁烷。合成方案8表1該研究很快引導(dǎo)用在丙酮溶液中的銠復(fù)合物[Rh(nbd)(dppb)]BF4作為選用的催化劑(約>10∶1的比例有利于以80%產(chǎn)率獲得所需產(chǎn)物42)?,F(xiàn)在解決了還原問題,唯一剩下的任務(wù)是在達(dá)到最終目標(biāo)之前構(gòu)建側(cè)鏈。構(gòu)建側(cè)鏈和完成合成采用混合酸酐方法連接C—8酯官能團(tuán)(參見Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,2520—2524),參見合成方案11。合成方案11珊瑚素A(7)和B(8)的全合成;a)、1.05當(dāng)量LiOH·H2O,THFH2O,1∶1,25℃,12小時(shí),100%;b)、1.1當(dāng)量t—BuC(O)Cl,THF,25℃,12小時(shí),75%;c)、2.0當(dāng)量的52,20當(dāng)量的三乙胺,1.0當(dāng)量的4—DMAP,二氯甲烷,25℃,48小時(shí),83%;d)、2.0當(dāng)量TBAF,THF,25℃,2小時(shí),100%;e)、2.0當(dāng)量Dess—Martin過碘烷,10當(dāng)量碳酸氫鈉,二氯甲烷,25℃,0.5小時(shí),100%;f)、6.0當(dāng)量NaClO2,6.0當(dāng)量NaH2PO4,50當(dāng)量2—甲基—2—丁烯,THF,t—BuOH,H2O,2小時(shí);g)、過量CH2N2,乙醚,10分鐘,兩步總產(chǎn)率88%;h)、過量CH3CH2N2,乙醚,0.5小時(shí),兩步總產(chǎn)率89%;i)、2.0當(dāng)量CSA,二氯甲烷H2O(10∶1),25℃,48小時(shí),7的產(chǎn)率為80%,8的產(chǎn)率為86%。THF=四氫呋喃,4—DMAP=4—(N,N’—二甲基氨基)吡啶;TBAF=四—正丁基氟化銨;CSA=10—樟腦磺酸為此,通過加入NaOH(THF—H2O,100%)將(E)—N(6)—甲基尿刊酸乙酯(50,合成方案11;Viguerie等人,雜環(huán),1994,37,1561—1576)按順序轉(zhuǎn)化為其鈉鹽51并通過用t—BuCOCl的THF溶液處理轉(zhuǎn)化為叔丁基混合酸酐52(產(chǎn)率75%)。在三乙胺和4—DMAP存在下,將42與52反應(yīng)得到酯53,產(chǎn)率83%。為了在C—3上連接側(cè)鏈,如下在該位置上形成羧酸基(ⅰ)用TBAF脫甲硅基化得到醇54,產(chǎn)率100%;(ⅱ)Dess—Martin氧化得到醛55;和(ⅲ)進(jìn)一步用NaClO2氧化55得到56。將羧酸暴露到CH2N2或CH3CHN2中得到甲氧基—珊瑚素A(57,從54得到的總產(chǎn)率為88%)或甲氧基—珊瑚素B(58,從54得到的總產(chǎn)率為86%)。最后,通過用CSA的二氯甲烷—H2O溶液處理,分別從其甲氧基衍生物中得到珊瑚素A(7)和B(8)(7的產(chǎn)率為80%并且8的產(chǎn)率為86%)。為了評價(jià)珊瑚素的C5—C6雙鍵在生物活性方面的重要性,將C5—C6二氫珊瑚素A(61)作為化學(xué)合成的目標(biāo)。合成方案12概述了從中間體45合成61的有效途徑。合成方案12合成C5,C6—二氫—珊瑚素A61。試劑和條件a)、1.0當(dāng)量5%Pd/BaSO4,EtOAc,25℃,1小時(shí);b)、2.0當(dāng)量PPTS,甲醇,25℃,6小時(shí),兩步總產(chǎn)率64%;c)、5.0當(dāng)量的52,20當(dāng)量的三乙胺,2.0當(dāng)量的4—DMAP,二氯甲烷,25℃,48小時(shí),83%;d)、2.0當(dāng)量TBAF,THF,25℃,2小時(shí),100%;e)、2.5當(dāng)量Dess—Martin過碘烷,10當(dāng)量碳酸氫鈉,二氯甲烷,25℃,0.5小時(shí);f)、6.0當(dāng)量NaClO2,3.0當(dāng)量NaH2PO4,50當(dāng)量2—甲基—2—丁烯,THF,t—BuOH,H2O;g)、過量CH2N2,乙醚,三步總產(chǎn)率88%。PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓,4—DMAP=4—(N,N’—二甲基氨基)吡啶,TBAF=四—正丁基氟化銨,D—M[O]=Dess—Martin氧化因此,通過將45在含5%Pd/BaSO4的EtOAc中氫化,然后暴露到PPTS的甲醇溶液中,得到其中C5—C6鍵完全還原的三環(huán)化合物43(總產(chǎn)率64%)。如對化合物42(合成方案9)所述并通過化合物59和60平穩(wěn)地構(gòu)建兩個(gè)側(cè)鏈,以極好的總產(chǎn)率得到所需二氫珊瑚素A(61)(參見合成方案12)。珊瑚素A(7)和B(8)以及C5—C6二氫—珊瑚素A(61)兩種方法利用分子內(nèi)乙炔化物—醛加成來構(gòu)建10—元環(huán),其加工和選擇性氫化形成過渡的羥基—二烯酮,它自動產(chǎn)生珊瑚素A和B的三環(huán)體系。然后在C—8和C—15位適當(dāng)?shù)剡B接側(cè)基來完成合成。所設(shè)計(jì)的策略允許固相合成、特定類似物構(gòu)建和組合庫產(chǎn)生。在下列實(shí)施例Ⅱ中描述了珊瑚素A和B及其類似物的固相合成方法。這些研究有利于進(jìn)行珊瑚素及其相關(guān)化合物的化學(xué)生物研究。實(shí)施例Ⅱ組合珊瑚素庫的固相和溶液相合成和生物學(xué)評價(jià)在該實(shí)施例中,我們公開了(a)珊瑚素A(7)和B(8)的第一個(gè)全合成方法,它是溶液和固相方法的組合,通過將共同的前體1880或200結(jié)合在固體載體上,由此產(chǎn)生共軛物230和240,然后進(jìn)行常規(guī)的化學(xué)處理;(b)通過溶液和固相化學(xué)法修飾C—8酯、C—15酯和C—4縮酮官能基來構(gòu)建珊瑚素的組合庫,由此產(chǎn)生通式330、370和400的類似物;(c)此庫中物質(zhì)的微管蛋白聚合特性;和(d)選定數(shù)目的這些化合物對各種腫瘤細(xì)胞(包括紫杉醇耐受的細(xì)胞系)的細(xì)胞毒性作用。與天然產(chǎn)物比較,證實(shí)了某些合成的類似物具有相同或更好的生物活性(如,600、610、630、660—700、730、760、850、920),表明在癌癥化療領(lǐng)域中具有進(jìn)一步開發(fā)的前景。分子多樣性設(shè)計(jì),固相策略檢查珊瑚素A(7)和B(8)的結(jié)構(gòu)揭示分子的多樣化可能有三個(gè)分支;它們來源于骨架碳C—3、C—4和C—8(編號參見合成方案2結(jié)構(gòu)Ⅰ*)。而且,與固體載體結(jié)合的合適的共同中間體的易得性和在C—3、C—4和C—8位官能基的潛在反應(yīng)活性對于在結(jié)構(gòu)Ⅰ**中描述的珊瑚素總庫的設(shè)計(jì)和構(gòu)建來說具有吸引力(合成方案13)。合成方案13說明珊瑚素庫(Ⅰ)的逆合成分析。(A)反式—縮酮化開裂;(B)官能基加工;(C)FG化學(xué);(D)酯或碳酸酯形成;(E)裝載。優(yōu)選地,R—O—具有任意的與式[A]定義的R1相應(yīng)的意思;R’—O—具有任意的與式[A]定義的R2相應(yīng)的意思;并且R”’具有任意的與式[A]定義的R3相應(yīng)的意思因此,通過用各種醇進(jìn)行反式縮酮化作用并同時(shí)從樹脂Ⅱ**上斷裂下來,得到化合物Ⅰ**,然而,可通過在指定部位進(jìn)行各種官能基(FG)處理由Ⅲ**來制備后一結(jié)構(gòu)(Ⅱ*)??赏ㄟ^形成酯鍵或氨基甲酸酯鍵從Ⅳ**得到結(jié)構(gòu)Ⅲ**。最后,將共軛物Ⅳ**斷開使得可能的前體、珊瑚素的骨架(scaffold)Ⅴ**、適宜的連接劑Ⅵ**和式Ⅶ**彼此解開(合成方案13)。構(gòu)建用于連接的樹脂和底物在固相合成珊瑚素A(7)和B(8)及其庫的過程中,如合成方案14所示設(shè)計(jì)和構(gòu)建官能化樹脂10、12和14(Nicolaou等人.自然(London)1997,387,268—272;Nicolaou等人,美國化學(xué)會志1998,120,5132—5133;Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,2097—2103)。合成方案14合成用于在固相上裝載珊瑚素核心的樹脂100、120和140。試劑和條件a)、戊二酸酐(4.0當(dāng)量),三乙胺(5.0當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,8小時(shí);b)、t—BuCOCl(3.0當(dāng)量),三乙胺(5.0當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,6小時(shí),兩步總產(chǎn)率>90%;c)、1,4—丁二醇(4.0當(dāng)量),NaH(4.0當(dāng)量),碘化四丁基銨(“n—BuNI”)(0.1當(dāng)量),DMF,25℃,15小時(shí),99%;d)、I2(4.0當(dāng)量),PH3P(4.0當(dāng)量),咪唑(4.0當(dāng)量),二氯甲烷,0℃,4小時(shí),>95%;e)、PH3P(10.0當(dāng)量),100℃,15小時(shí),>95%;f)、LiHMIDS(1.3當(dāng)量),THF,25℃,2小時(shí),>90%。LiHMDS=二(三甲基甲硅烷基)氨基鋰;THF=四氫呋喃;●=聚苯乙烯在三乙胺存在下,將羥甲基聚苯乙烯樹脂(90)與過量戊二酸酐反應(yīng),然后在相同的條件下,用新戊酰氯封端,得到樹脂100,總產(chǎn)率>90%。另一方面,將Merrifield樹脂(110)與過量1,4—丁二醇的一鈉醇鹽反應(yīng),得到樹脂120,產(chǎn)率99%。將后者(12)用I2—Ph3P—咪唑碘化,得到碘化物130(產(chǎn)率>95),通過在100℃下用Ph3P處理將所述碘化物轉(zhuǎn)化為其鏻鹽(產(chǎn)率95%)并因此通過加入LiHMDS得到正膦140(產(chǎn)率>90%)(縮寫參見合成方案的描述)。將這些樹脂與適宜的珊瑚素骨架如160、170、180和200偶聯(lián)(合成方案15)。如合成方案15所示,從先前合成的中間體47開始制備后者。合成方案15從47開始合成所限定的珊瑚素核心160、170、180和200。試劑和條件a)、PPTS(1.0當(dāng)量),二醇∶二氯甲烷(2∶1),25℃,2小時(shí),1,2—乙二醇的產(chǎn)率91%,1,4—丁二醇的產(chǎn)率92%;b)、乙酸酐(3.0當(dāng)量),吡啶(5.0當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,1小時(shí),96%;c)、PPTS(1.0當(dāng)量),1,6—己二醇(10當(dāng)量),二氯甲烷,92%;d)、Dess—Martin過碘烷(2.0當(dāng)量),吡啶(5.0當(dāng)量),碳酸氫鈉(10當(dāng)量),二氯甲烷,2小時(shí),96%。PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓因此,在PPTS存在下,將47與乙二醇或1,4—丁二醇偶聯(lián),分別得到化合物160(91%)和170(94%)。另一方面,將47乙?;玫?80(96%),將其在PPTS存在下與1,6—己二醇反應(yīng),得到190(92%)。將190用Dess—Martin試劑氧化,得到所需要的醛200,產(chǎn)率96%。將珊瑚素骨架裝載到固體支持物上。出乎意料地,珊瑚素衍生物160和170與過量官能化樹脂100在三乙胺和4—DMAP存在下反應(yīng)分別得到共軛物210和220,產(chǎn)率>95%。衍生物160和170是通過它們的仲羥基而不是伯羥基連接到樹脂上的驚人事實(shí)顯而易見于210和220對酸性條件下斷開的抵抗力和在堿性條件下重新獲得這些骨架的容易性。這引導(dǎo)我們?nèi)パ芯繕渲?20和140,參見合成方案16。合成方案16將珊瑚素核心裝載到固體支持物上。試劑和條件a)、100(5.0當(dāng)量),三乙胺(10.0當(dāng)量),4—DMAP(0.5當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,8小時(shí),>95%;然后甲醇(20當(dāng)量);b)、120(10當(dāng)量),PPTS(1.0當(dāng)量),4_MS,二氯甲烷,25℃,48小時(shí),50%;然后用MOM—Cl(20當(dāng)量)/iPr2NEt(20當(dāng)量)封端,DMF,25℃,24小時(shí);c)、140(5.0當(dāng)量),THF,—78—25℃,4小時(shí),>95%;然后用CH3CHO(20當(dāng)量)封端。4—DMAP=4—(二甲基氨基)吡啶;PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓,MOM—Cl=甲氧基甲基氯;DMF=二甲基甲酰胺;THF=四氫呋喃;灰色的環(huán)=聚苯乙烯因此,在PPTS存在下,將180結(jié)合到樹脂120上得到230,盡管嘗試用脫水劑驅(qū)動反應(yīng)完成,但產(chǎn)率只有50%。相反,平穩(wěn)地進(jìn)行醛200與樹脂140的偶聯(lián),然后用乙醛封端,得到共軛物240,產(chǎn)率>95%,使得該樹脂成為進(jìn)一步的化學(xué)研究更有吸引力的起點(diǎn)。固相合成珊瑚素A和B。因?yàn)槲覀兪诸^上現(xiàn)有樹脂230和240,所以我們研究它們在合成珊瑚素庫中的應(yīng)用。作為庫構(gòu)建的開始和為了發(fā)展該合成所需要的化學(xué)過程,我們首先瞄準(zhǔn)天然存在的珊瑚素A(7)和B(8)。如合成方案17中所證明的,兩種樹脂可同等好地完成合成任務(wù)。合成方案17固相合成珊瑚素A(7)和B(8)。a)、NaOMe(5.0當(dāng)量),甲醇THF(1∶3),25℃,12小時(shí),>95%;b)、260(5.0當(dāng)量),三乙胺(10當(dāng)量),4—DMAP(2.0當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,48小時(shí),大約90%;c)、TBAF(10當(dāng)量),THF,25℃,8小時(shí),>95%;d)、Dess—Martin過碘烷(5.0當(dāng)量),碳酸氫鈉(15當(dāng)量),吡啶(15當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,2小時(shí),95%;e)、NaClO2(12當(dāng)量),NaH2PO4(12當(dāng)量),2—甲基—2—丁烯(50當(dāng)量),THF∶t—BuOH∶H2O(5∶5∶1),25℃,48小時(shí),>95%;f)、甲醇(10當(dāng)量),DDC(10當(dāng)量),4—DMAP(5.0當(dāng)量),DMF,25℃,48小時(shí),大約90%;g)、CSA(3.0當(dāng)量),二氯甲烷∶H2O(2∶1),25℃,40小時(shí),大約75%。珊瑚素A的總產(chǎn)率從240開始合成大約為51%并且從230開始合成大約為44%。珊瑚素B的總產(chǎn)率從240開始合成大約為48%并且從230開始合成大約為42%。4—DMAP=4—(二甲基氨基)吡啶;TBAF=四正丁基氟化銨;DCC=二環(huán)己基碳化二亞胺;THF=四氫呋喃;灰色的環(huán)=聚苯乙烯因此,NaOMe誘導(dǎo)230或240脫乙?;椒€(wěn)得到250(>95%),將其在三乙胺和4—DMAP存在下與混合酸酐260偶聯(lián),得到共軛物270,產(chǎn)率大約為90%。將270脫甲硅基化(>95%),然后進(jìn)行Dess—Martin氧化(>95%),有效得到醛280。將280用NaClO2進(jìn)一步氧化(>95%)并將所得到的羧酸在DCC存在下,用甲醇或乙醇酯化,分別得到珊瑚素A和B共軛物290和300,產(chǎn)率大約為90%。最后,通過暴露到CSA的二氯甲烷∶H2O(2∶1)溶液中,從相應(yīng)的樹脂上得到天然物質(zhì)(7和8)。珊瑚素A(7)的總產(chǎn)率從240開始合成大約為51%并且從230開始合成大約為44%;珊瑚素B(8)的總產(chǎn)率從240開始合成大約為48%并且從230開始合成大約為42%。7和8的光譜性能與先前在實(shí)驗(yàn)室通過溶液全合成得到的可信樣品所顯示光譜性能相同。構(gòu)建珊瑚素組合庫。在下面合成方案20和表2中所顯示的珊瑚素庫是通過聯(lián)合固相(合成方案18)和溶液(合成方案19)方法構(gòu)建的。對于固相化學(xué)來說,使用樹脂240,因?yàn)樗谄湫纬?、功效和反?yīng)性能方面是杰出的。應(yīng)用兩種平行的和組合的技術(shù),后者利用RadiofrequencyEncodedCombinatorial(REC)化學(xué)(Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1995,34,2289—2291;Moran等人,美國化學(xué)會志,1995,117,10787—10788;Niclaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,2097—2103)。合成方案18在固相上合成珊瑚素庫。試劑和條件a)、NaOMe(5.0當(dāng)量),甲醇THF(1∶3),25℃,12小時(shí),>95%;b1)、LG—Rm(5.0當(dāng)量),三乙胺(10當(dāng)量),4—DMAP(2.0當(dāng)量),DMF,50℃,48小時(shí),90—95%;b2)、LG—Rm(10當(dāng)量),DCC(10當(dāng)量),4—DMAP(2.0當(dāng)量),DMF,50℃,48小時(shí),90—95%;c)、TBAF(10當(dāng)量),THF,25℃,8小時(shí),>95%;d)、LG—Rn(10當(dāng)量),三乙胺(10當(dāng)量),4—DMAP(2.0當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,20小時(shí),70—95%;e)、PPTS(3.0當(dāng)量),甲醇,25℃,24小時(shí),60—90%;f)、Dess—Martin過碘烷(5.0當(dāng)量),碳酸氫鈉(15當(dāng)量),吡啶(15當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,2小時(shí),95%;g)、NaClO2(25當(dāng)量),KH2PO4(25當(dāng)量),2—甲基—2—丁烯(50當(dāng)量),THF∶t—BuOH∶H2O(5∶5∶1),25℃,48小時(shí),>95%;h)、HO—Rp(10當(dāng)量),DEAD(10當(dāng)量),Ph3P(10當(dāng)量),THF,0—25℃,12小時(shí),>95%;i)、H2N—Rp(10當(dāng)量),DCC(10當(dāng)量),4—DMAP(5當(dāng)量),DMF,25℃,20小時(shí),>95%;j)、CSA(3.0當(dāng)量),HO—Ro,25℃,15小時(shí),60—90%;k)、(PhO)2PON3(10當(dāng)量),DEAD(10當(dāng)量),Ph3P(10當(dāng)量),THF,0—25℃,4小時(shí),>95%;l)、Ph3P(10當(dāng)量),H2O(30當(dāng)量),THF,25℃,8小時(shí),>95%;m)、LG—Rq(10當(dāng)量),三乙胺(15當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,10小時(shí),>90%。LG=離去基團(tuán);4—DMAP=4—(二甲基氨基)吡啶;TBAF=四—正丁基氟化銨;DEAD=偶氮二羧酸二乙酯;DCC=二環(huán)己基碳化二亞胺;THF=四氫呋喃;DMF=二甲基甲酰胺;灰色環(huán)=聚苯乙烯下列合成方案18(a)—18(e)是對上述部分反應(yīng)的詳細(xì)描述下列合成方案18(f)—18(i)是對上述部分反應(yīng)的詳細(xì)描述下列合成方案18(j)—18(k)是對上述部分反應(yīng)的詳細(xì)描述在合成方案18〔包括18(A),18(B),18(C)和18(a)—18(k)〕中,Ro代表H、O—Me、O—Et、O—CH2CF3和O—正丙基;O—Rp代表—Me、O—Et、O—正丙基、O—丁基、O—CH2CF3、或代表HN—Me、HN—正丙基、因此,利用裝有樹脂250或裝有含樹脂250的IRORIMicrokanesTM21的各燒瓶實(shí)施合成方案18中所描述的化學(xué)過程。因此,在適宜的偶聯(lián)條件下,將250(由240脫乙?;a(chǎn)生)與LG—Rn[酸酐、酰氯、羧酸或異氰酸酯]反應(yīng),得到一系列酯和氨基甲酸酯(90—95%),將其用TBAF脫保護(hù)得到羥基酯310(>95%)。在適宜的偶聯(lián)條件下,將部分反應(yīng)物(樹脂或MicrokansTM,310)用LG—Rn[酸酐、酰氯或異氰酸酯]處理,在HO—Ro存在下用PPTS誘導(dǎo)斷裂后,通過共軛物320得到一系列珊瑚素330(60—90%)(參見合成方案18(A))。將第二部分反應(yīng)物310進(jìn)行Dess—Martin氧化,得到醛樹脂340,產(chǎn)率>95%。將340進(jìn)一步用NaClO2氧化得到羧酸樹脂350(>95%),將其在Mitsunobu條件下與醇[HO—Rp]或在DCC/4—DMAP條件下與胺[H2N—Rp]進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。然后,在HO—Ro中將所得到的酯或酰胺(360)暴露到酸(CSA)中,斷裂后得到子庫370(60—90%)(參見合成方案18(B))。通過(PhO)2PON3,DEAD和Ph3P的作用,將第三部分反應(yīng)物31轉(zhuǎn)化為疊氮化物380,產(chǎn)率>95%。將380的疊氮基用Ph3P—H2O還原,得到相應(yīng)的胺(95%),將其與LG—Rq[酸酐或酰氯]偶聯(lián),得到酰胺衍生物390。然后通過暴露到HO—Ro存在下的PPTS中,從樹脂390得到化合物400(60—90%)。得到的各庫成分大約為1—5mg并通過硅膠色譜層析(閃式柱色譜層析或薄層色譜層析)或HPLC純化。更寬范圍的斷裂產(chǎn)率取決于動力學(xué)原因和/或各產(chǎn)品由于延長在酸性條件下的暴露時(shí)間所引起的不穩(wěn)定性。由于在固相進(jìn)行DCC偶聯(lián)得到的產(chǎn)品的產(chǎn)率低,所以,通過常規(guī)溶液方法制備許多珊瑚素類似物。特別是,如合成方案19所述,合成珊瑚素420—540。合成方案19在溶液中合成珊瑚素類似物480—540。試劑和條件a)、酸Ar—Ⅰ或Ar—Ⅱ或Ar—Ⅲ(1.3當(dāng)量),DCC(2.0當(dāng)量),4—DMAP(0.5當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,36小時(shí);b)、TBAF(2.0當(dāng)量),THF,25℃,1小時(shí),420兩步的總產(chǎn)率為73%,430兩步的總產(chǎn)率為61%,440兩步的總產(chǎn)率為79%;c)、Dess—Martin過碘烷(2.5當(dāng)量),碳酸氫鈉(大約10當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,0.5小時(shí),450的產(chǎn)率為44%,460的產(chǎn)率為40%,470的產(chǎn)率為8496;d)、NaClO2(6.0當(dāng)量),NaH2PO4(3.0當(dāng)量),2—甲基—2—丁烯(50當(dāng)量),THF∶t—BuOH∶H2O(5∶5∶1),0℃,2小時(shí);e)、CH2N2或CH3CH2N2,0℃,10分鐘,480兩步的總產(chǎn)率為43%,490兩步的總產(chǎn)率為71%,500兩步的總產(chǎn)率為87%;f)、乙酸酐(5.2當(dāng)量),三乙胺(6.8當(dāng)量),4—DMAP(1.6當(dāng)量),二氯甲烷,25℃,2小時(shí),100%;g)、CSA(催化劑,10%mol),二氯甲烷∶H2O(10∶1),25℃,72小時(shí),95%;h)、DAST(2.0當(dāng)量),二氯甲烷,—78℃,3小時(shí),99%;i)、Ph3PCHCO2Me(1.5當(dāng)量),苯,80℃,95—98%;j)、LiOH(3.0當(dāng)量),THF∶H2O(1∶1),25℃,100%。DCC=二環(huán)己基碳化二亞胺;4—DMAP=4—(二甲基氨基)吡啶;TBAF=四—正丁基氟化銨;THF=四氫呋喃;CSA=樟腦磺酸;DAST=二乙基氨基硫三氟化物*)美國化學(xué)會志,34,8661—73(1998)因此,在C—8位引入許多酯側(cè)鏈并且改性在C—4位的側(cè)基以包括CH2OH、CH2OAc和CH2F。因此,DCC/4—DMAP協(xié)助410與羧酸Ar—Ⅰ、Ar—Ⅱ和Ar—Ⅲ(通過維蒂希烯化—皂化反應(yīng),由相應(yīng)的已知吡啶、噻唑(Nicolaou等人,美國化學(xué)會志,1997,119,7960—7973;Nicolaou等人,美國化學(xué)會志,1997,119,7974—7991)和噁唑(Kende等人,四面體通訊,1995,36,4741—4744)醛衍生,產(chǎn)率高)偶聯(lián),在TBAF消除硅保護(hù)基后,分別得到酯420(73%)、430(61%)和440(79%)。將這些羥基酯進(jìn)行Dess—Martin氧化,分別得到醛450(44%)、460(40%)和470(84%)。進(jìn)一步用NaClO2氧化450、460和470并用CH2N2或CH3CH2N2處理所得到的羧酸,分別得到珊瑚素480(43%)、490(71%)和500(87%)。通過DAST的作用,從先前合成的化合物51(K.C.Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.1998,37,1418—1421)得到氟化珊瑚素52(K.C.Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.1998,37,1418—1421)(99%),同時(shí),如合成方案19所示,通過在二氯甲烷∶H2O中,相繼用乙酸酐/三乙胺/4—DMAP和CSA處理,從化合物54開始制備乙酸酯53(K.C.Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.1998,37,1418—1421)和54。珊瑚素的生物學(xué)評價(jià)。利用在37℃下過濾比色測定和100μM化合物來篩選所合成的用于誘導(dǎo)微管蛋白聚合的珊瑚素庫(如合成方案20所示)(結(jié)果列于表3中;Bollag等人,癌研究,1995,55,2325—2333)。合成方案20和表2珊瑚素類似物的各種結(jié)構(gòu)和微管蛋白聚合性。表2珊瑚素類似物(X1)—(X20)的微管蛋白聚合性能<在上述研究后,用卵巢癌細(xì)胞(1A9)(包括兩個(gè)紫杉醇耐受系(1A9PTX10和1A9PTX22;Giannakakou等人,生物化學(xué)雜志,1995,272,17118—17125)進(jìn)行細(xì)胞毒性研究。表3列出了在任何實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系中都顯示出IC50值低于2000nM的實(shí)驗(yàn)。表3列出了具有下列微管蛋白聚合作用的珊瑚素的細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)和珊瑚素的細(xì)胞毒性(a)、除了調(diào)節(jié)藥物濃度(100μM)和孵育時(shí)間(90分鐘)外,在37℃下測定微管蛋白聚合作用。(b)、如上所述,進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(參見Giannakakou等人,生物化學(xué)雜志,1995,272,17118—17125Nicolaou等人,Angew.chem.Int.Ed.En91.1997,36,2097—2103)。表3珊瑚素的微管蛋白聚合和細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)揭示了各種重要的結(jié)構(gòu)活性之間的關(guān)系(SARs)。因此,優(yōu)選的化合物600、730—750和850顯示優(yōu)于珊瑚素A(7)或B(8)的微管蛋白聚合特性。在細(xì)胞毒性研究中,特別優(yōu)選的化合物600、610、630、660—700、730、760、850和920顯示與天然物質(zhì)(7和8)類似的或更高的效力。格外驚人的是更優(yōu)選化合物600、610、670、680對紫杉醇耐受的腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞毒性,并且廣義地來說也包括730、760、850和920。感興趣的是,這些化合物中的某些的微管蛋白聚合能力不總是與其細(xì)胞毒性作用一致(如,化合物610和700)。這些觀察結(jié)果暗示這些化合物有另外的作用機(jī)制如DNA烷基化作用。C—8酯側(cè)鏈的重要性因可多次取代而變得明顯。因此,用乙酸酯(化合物1070,合成方案2,表2)或氨基甲酸苯基酯(化合物1010)替代天然尿刊酸側(cè)鏈導(dǎo)致活性的高度喪失。同樣地,用苯基取代雜環(huán)同時(shí)保持酯側(cè)鏈的α,β—不飽和部分僅僅產(chǎn)生可忽略不計(jì)的生物活性(化合物990)。甚至對于吡啶(化合物480,合成方案20,表2和3)、噻唑(化合物490)或噁唑(化合物500)部分而言咪唑衍生的天然取代基的更敏感取代使活性明顯喪失,因此暗示在其作用機(jī)制中天然產(chǎn)物的兩個(gè)氮原子起作用。相對地,C—4縮酮中心的改性對生物活性來說似乎更耐受。因此,天然產(chǎn)物的羥基用OMe部分取代增強(qiáng)對紫杉醇耐受細(xì)胞系的活性(化合物600和610),而用O—nPr或OCH2CF3取代總體上使細(xì)胞毒性下降(化合物740和840)。C—15還原的化合物及其衍生物(如化合物510—530和550—590,合成方案20,表2和3)不顯示強(qiáng)微管蛋白聚合或細(xì)胞毒性特性,而C—15位還原并且糖基化的五加苷素(4)顯示強(qiáng)的生物活性,這確實(shí)是有趣的。感興趣的是,C—15醛縮二甲醇(化合物730)顯示與天然產(chǎn)物(7和8)類似的生物活性,由此表明酯官能度對活性來說不是必需的。與天然產(chǎn)物相比,C—2酯基醇組分的改性對這些化合物的生物活性產(chǎn)生明顯的調(diào)節(jié)作用。因此,用乙基(化合物610)、正丙基(化合物680)或烯丙基(化合物700)取代甲基(化合物600)增強(qiáng)生物活性。注意到用龐大的取代基如正丁基(化合物630)或異戊基(化合物710)使趨勢反轉(zhuǎn)。然而,有趣的是,龐大部分的蒽基(化合物920)、芐氧基乙基(化合物690)和4—丁基苯基(化合物660)顯示與天然產(chǎn)物類似或更好的細(xì)胞毒性(盡管其微管蛋白聚合能力是適度的)。合成方案21概要地描述了迄今在珊瑚素類化合物中所獲得的SARs。合成方案21珊瑚素的結(jié)構(gòu)活性關(guān)系(SARs)。a)用乙酸酯、氨基甲酸苯基酯或肉桂酰酯置換側(cè)鏈不能耐受。b)吡啶、噻唑或噁唑置換取代的咪唑雜環(huán)使活性降低。c)對甲基和乙基縮酮具有好的耐受性,而對丙基或三氟乙基縮酮不是這樣。d)酯比相應(yīng)的酰胺的活性更強(qiáng);對酯基的取代具有好的耐受性;將酯還原為醇及其衍生物不能耐受(五加苷素4除外)。a.側(cè)鏈對活性是決定性的b.兩個(gè)氮原子都是重要的c.對縮酮取代具有好的耐受性d.酯比酰胺優(yōu)選;將酯還原為醇不能耐受在本實(shí)施例中,我們舉例說明開發(fā)固相化學(xué)方法用于化學(xué)合成天然存在的珊瑚素A(7)和B(8)并將其應(yīng)用于構(gòu)建珊瑚素組合庫。該庫用溶液方法合成的化合物來補(bǔ)充并用微管蛋白聚合作用和細(xì)胞毒性進(jìn)行生物評價(jià)。該結(jié)果對于此類新結(jié)構(gòu)化合物的新合成方法開發(fā)和結(jié)構(gòu)活性關(guān)系都是有用的。而且,本文所描述的化學(xué)方法表明在化學(xué)生物研究中使用REC化學(xué)方法(Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1995,34,2289—2291;Moran等人,美國化學(xué)會志,1995,117,10787—10788;Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1995,36,2097—2103)并且為在癌癥化療領(lǐng)域中進(jìn)一步開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。實(shí)施例Ⅲ.合成五加苷素和eleuthosidesA和B該實(shí)施例描述細(xì)胞毒性的海洋天然產(chǎn)物五加苷素(4)和eleuthosidesA(5)和B(6)的全合成方法。合成方案包括用阿拉伯糖—衍生的三氯亞氨代乙酸酯(trichloroacetimidate)900(合成方案23,參見下文)將(+)—香芹酮衍生的中間體35糖苷化,然后在堿性條件下誘導(dǎo)閉環(huán)并加工而產(chǎn)生二羥基烯炔酮1900。選擇性氫化1900產(chǎn)生二烯酮2000,其分子內(nèi)折疊得到2100并由此產(chǎn)生具有靶向分子所需結(jié)構(gòu)骨架的22。最后,用混合的酸酐2400酯化然后脫去保護(hù)產(chǎn)生用作eleuthosidesA(5)和B(6)前體的五加苷素(4)。五加苷素α—糖苷端基異構(gòu)體,化合物2700(參見下文合成方案25)也通過使用開發(fā)的化學(xué)方法來合成,表明在產(chǎn)生設(shè)計(jì)的用于生物篩選的類似物時(shí)順序的靈活性。逆合成分析和策略除了D—阿拉伯糖基吡喃糖部分外,五加苷素(4)和eleuthosidesA(5)和B(6)的結(jié)構(gòu)特征類似于珊瑚素(7、8)。其總的合成策略來自類似的逆合成分析,對碳水化合物單元的引入具有合適的前提。合成方案2(參見上文)描述了五加苷素(4)和eleuthosides(5,6)核心結(jié)構(gòu)的逆合成分析。因此,從靶向結(jié)構(gòu)(Ⅰ*)中除去(E)—N(6)—甲基尿刊酸殘基并拆開中心雙環(huán)核的氧橋產(chǎn)生10—元環(huán)二羥基二烯酮Ⅱ*,其原料可追溯到開鏈炔屬醛Ⅲ*。如合成方案23(見下文)所示,進(jìn)一步的碳—碳鍵開裂和逆糖苷化產(chǎn)生羥基乙炔35,它與(+)—香芹酮的關(guān)系是顯然的。令人鼓舞的是知道雖然選擇香芹酮(+)—對映體作為最初原料,但在天然物質(zhì)的絕對立體化學(xué)需要時(shí),也使用(—)—對映體。全合成方法中所需的三氯亞氨代乙酸酯900追溯到D—阿拉伯糖四乙酸酯1000。按下文所述方法進(jìn)行五加苷素(4)和eleuthosidesA(5)和B(6)的全合成。五加苷素(4)的全合成在上文的實(shí)施例中已經(jīng)描述了構(gòu)建(+)—香芹酮衍生的羥基醛片段35(參見下文的合成方案23)。所以,我們這里將從必要的片段,三氯亞氨代乙酸酯900的合成(合成方案22)開始。合成方案22構(gòu)建糖苷供體900。試劑和條件a)1.1當(dāng)量的NaH,DMF,0℃,30分鐘;然后1.2當(dāng)量的PMB—Cl,2小時(shí),93%;b)0.1當(dāng)量的TsOH·H2O,乙二醇—甲醇(1∶10),25℃,6小時(shí),84%;c)4.0當(dāng)量的TBS—OTf,10當(dāng)量的三乙胺,二氯甲烷,10℃,2小時(shí),97%;d)3.4當(dāng)量的NBS,11當(dāng)量的吡啶,丙酮—H2O(93∶7),80%(約2∶1比例的端基異構(gòu)體);e)0.1當(dāng)量的NaH,5.0當(dāng)量的Cl3CCN,二氯甲烷,25℃,3.5小時(shí),93%。Ts=對甲苯磺?;?,TBSOTf=叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸鹽,NBS=N—溴代琥珀酰亞胺,PMB=對甲氧基芐基因此,通過最近來自這些實(shí)驗(yàn)室報(bào)道的順序,將阿拉伯糖四乙酸酯(1000)有效地轉(zhuǎn)化為硫代糖苷1100(Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,2520—2524)。然后,在NaH存在下通過PMB—Cl作用來將1100的羥基保護(hù)為PMB的醚(93%產(chǎn)率)并且通過在乙二醇甲醇(1∶10)中用TsOH處理來去掉所得化合物1200的丙酮化物基團(tuán),以84%的產(chǎn)率產(chǎn)生二醇1300。然后將1300中的兩個(gè)羥基甲硅烷基化(TBSOTf—三乙胺,1400的產(chǎn)率為97%)并且通過在含水丙酮中由NBS—吡啶作用使端基異構(gòu)的位置游離,產(chǎn)生內(nèi)半縮醛1500(產(chǎn)率80%,約為2∶1的端基異構(gòu)體混合物)。最后,用NaH處理1500,然后加入Cl以93%的產(chǎn)率獲得作為主要異構(gòu)體的所需三氯亞氨代乙酸酯900(純度大于95%)。通過用短柱進(jìn)行閃式色譜層析(二氧化硅,10%乙醚/己烷,含有1%三乙胺)純化這種敏感的中間體。下一任務(wù)是確定用阿拉伯糖衍生的碳水化合物供體900立體特異性地糖苷化羥基醛35的合適條件。為此,進(jìn)行合成方案24和表4的研究合成方案24和表4五加苷素(4)全合成中的關(guān)鍵中間體條件。糖部分結(jié)合的研究。a)原料濃度為0.1M,TMSOTf(2—5%),1.5當(dāng)量亞氨酸酯;b)原料濃度為0.07M,TMSOTf(2—5%),2.5當(dāng)量亞氨酸酯;c)通過NMR確定兩種端基異構(gòu)體的比例。TES=三乙基甲硅烷基,PMB=對甲氧基芐基,TBS=叔丁基二甲基甲硅烷基,NIS=N—碘代琥珀酰亞胺表4五加苷素(4)全合成中的關(guān)鍵中間體條件<tablesid="table4"num="007"><table>條件產(chǎn)物(比例25∶26)c產(chǎn)率(%)二氯甲烷,—78℃a1∶352(2500和2600的混合物)己烷,—78℃a1∶834(2500和2600的混合物)乙腈,—35℃a1∶462(2500和2600的混合物)乙醚,—80℃a2∶165(2500和2600的混合物)乙醚,0℃a2.5∶154(2500)乙醚,25℃a3∶160(2500和2600的混合物)二噁烷∶甲苯(1∶1),0℃b7∶167(2500)二噁烷∶甲苯(2∶1),0℃b8∶175(2500)二噁烷∶甲苯(3∶1),0℃b7∶170(2500)</table></tables>的確,通過改變實(shí)驗(yàn)條件逆轉(zhuǎn)形成的糖苷鍵的立體選擇性是可能的。因此,雖然在TMSOTf作為催化劑存在下于—78℃用己烷中的900與35反應(yīng)獲得α—端基異構(gòu)體2600占優(yōu)勢的約8∶1比例的糖苷(總產(chǎn)率75%),但使用二噁烷∶甲苯(2∶1)作為溶劑于0℃下產(chǎn)生所需β—端基異構(gòu)體2500占優(yōu)勢的約8∶1比例的產(chǎn)物(閃式色譜層析純化后,產(chǎn)率為75%)。閃式色譜層析產(chǎn)生的純2500為下一步備用。在THF中于—30℃溫度下,純β—端基異構(gòu)體2500與LiHMDS反應(yīng)而平穩(wěn)環(huán)化,其間經(jīng)乙炔化物的形成并且分子內(nèi)攻擊醛基產(chǎn)生中間體仲醇(非對映異構(gòu)體的混合物),立即用Dess—Martin試劑氧化為二烯酮1600(合成方案23;Chen等人,Angew.Chem.Int.Ed.1998,37,789—792)。合成方案23五加苷素(4)的全合成。試劑和條件a)900,TMS—OTf,參見圖25;b)2.0當(dāng)量的LiHMDS,THF,—30℃,20分鐘;c)2.0的Dess—Martin過碘烷,10當(dāng)量的碳酸氫鈉,10當(dāng)量的吡啶,二氯甲烷,0℃,15分鐘,兩步的產(chǎn)率93%;d)2.2當(dāng)量的DDQ,二氯甲烷H2O(20∶1),25℃,91%;e)12當(dāng)量的乙酸酐,16當(dāng)量的三乙胺,0.5當(dāng)量的4—DMAP,二氯甲烷,25℃,1小時(shí),95%;f)三乙胺·3HF∶THF(1∶7),25℃,3小時(shí),81%;g)H2,50摩爾%Lindlar’s催化劑,PhCH3,25℃,20分鐘;h)0.2當(dāng)量的PPTS,甲醇,25℃,20分鐘,兩步產(chǎn)率76%;i)10當(dāng)量的2400,15當(dāng)量的三乙胺,2.0當(dāng)量的4—DMAP,二氯甲烷,25℃,18小時(shí),97%;j)17當(dāng)量的TBAF,4.0當(dāng)量的AcOH,THF,25℃,2.5小時(shí),96%。TMSOTf=三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸鹽,LiHMDS=鋰六甲基—二硅氮烷,DDQ=2,3—二氯—5,6—二氰基—1,4—苯醌,4—DMAP=4—二甲基—氨基吡啶,Lindlar’s催化劑=Pd/CaCO3/Pb,PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓,TBAF=四正丁基氟化銨現(xiàn)在要將乙酸酯基團(tuán)結(jié)合到吡喃糖環(huán)的C—2位上。用DDQ從1600上選擇性地去除PMB基團(tuán)以91%的產(chǎn)率形成相應(yīng)的羥基化合物1700(合成方案23)。然后進(jìn)行常規(guī)的乙?;纬梢宜狨?800(產(chǎn)率95%)。通過THF中的Et3N3HF于25℃下的識別作用從1800上去掉兩個(gè)TES基團(tuán)而沒有損害TBS基團(tuán)來產(chǎn)生二醇1900。合成中的下一個(gè)目的是產(chǎn)生關(guān)鍵性的二烯酮2000,它是短暫的中間體,期望它易于折疊成它的橋連異構(gòu)體2100(合成方案23)。的確,乙炔部分的選擇性氫化(Lindlar催化劑,H2,甲苯,25℃)后,化合物1900產(chǎn)生期望獲得的內(nèi)半縮醛2100,明確證實(shí)它轉(zhuǎn)化為甲氧基縮酮2200(甲醇,PPTS,從1900的產(chǎn)率為76%)。在二氯甲烷中的三乙胺和4—DMAP存在下于25℃溫度下醇2200與混合的酸酐2400反應(yīng)將(E)—N(6)—甲基尿刊酸殘基結(jié)合到靶向分子的主結(jié)構(gòu)上(Yang等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,166—168;Nicolaou等人,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997,36,525—526),產(chǎn)生酯化的產(chǎn)物2300(產(chǎn)率97%)。最后,將2300暴露于THF中的TBAF—AcOH使TBS基團(tuán)裂解并且以96%的產(chǎn)率釋放五加苷素(4)。合成的五加苷素(4)顯示與天然物質(zhì)相同的物理數(shù)據(jù)。而且,旋光性[α]D—67(c=0.2,甲醇)與天然五加苷素相同,后者的絕對立體化學(xué)對應(yīng)于(+)—香芹酮和結(jié)構(gòu)4。通過下列與4相同的途徑(合成方案23所示)由α—端基異構(gòu)體2600(合成方案24)合成五加苷素的α—糖苷類似物2700(合成方案25)。合成方案25合成五加苷素α—端基異構(gòu)體(2700),即,將2600轉(zhuǎn)化為2700。反應(yīng)條件如合成方案23所示該構(gòu)建中所涉及步驟的產(chǎn)率類似于五加苷素步驟中的產(chǎn)率。eleuthosides的全合成按合成方案26所示方法由五加苷素(4)合成eleuthosidesA(5)和B(6)。合成方案26合成eleuthosidesA(5)和B(6)(合成方案26(A))和衍生物3100和3200(合成方案26(B))。試劑和條件a)1.1當(dāng)量的乙酸酐,3.0當(dāng)量的三乙胺,0.2當(dāng)量的4—DMAP,0℃,1小時(shí),2800的產(chǎn)率16%,2900和3000混合物的產(chǎn)率為73%(經(jīng)NMR測定,比例為2.2∶1);b)2.0當(dāng)量的CSA,二氯甲烷∶H2O(10∶1),25℃,48小時(shí),5和6混合物的產(chǎn)率為80%(基于原料87%轉(zhuǎn)化率計(jì)算);c)4.0當(dāng)量的TBAF,THF,25℃,6小時(shí),4(22%),3100(60%)和3200(8%)。4—DMAP=4—二甲基氨基吡啶,CSA=10—樟腦磺酸因此,在過量三乙胺和0.2當(dāng)量的4—DMAP存在下,在二氯甲烷中于0℃下,將4暴露于1.1當(dāng)量的乙酸酐形成三乙酸酯2800(12%的產(chǎn)率)和二乙酸酯2900和3000(75%的產(chǎn)率,經(jīng)1H—NMR測定,約為1∶2的混合物,2900占多數(shù)),外加某些未反應(yīng)的原料(13%)。將二乙酸酯的不能分離混合物(2900和3000)暴露于在潮濕二氯甲烷中的CSA,產(chǎn)生eleuthosidesA和B(5+6)的混合物(合成方案26(A))。不能通過常規(guī)的色譜層析法分離該混合物并且其特征是在所有方面都與天然的eleuthosidesA(5)和B(6)的數(shù)據(jù)相同。雙—TBS醚2300(或4)與TBAF在THF中于25℃下混合使2—位乙酸酯基團(tuán)緩慢遷移至4—羥基上,形成異構(gòu)五加苷素3100(60%產(chǎn)率)以及脫乙酰作用產(chǎn)生脫乙酰氧基五加苷素3200(8%產(chǎn)率)(合成方案26B)。3100的結(jié)構(gòu)通過NMR波譜法來確定(1H1D—和2D—COSY)并與4和2300比較。因此,簡而言之,實(shí)施例Ⅲ教導(dǎo)了一種類似于實(shí)施例Ⅰ和Ⅱ中對珊瑚素A和B所述的合成方案;通過在閉環(huán)之前將阿拉伯糖吡喃糖苷部分結(jié)合到分子中,完成海洋天然產(chǎn)物五加苷素(4)和eleuthosidesA(5)和B(6)的全合成。另外,描述了化學(xué)合成糖苷鍵定向在α—位的異構(gòu)體五加苷素(2700)以及eleuthoside類似物2800—3200。所描述的化學(xué)方法不僅允許制備稀有的天然產(chǎn)物,而且也允許制備設(shè)計(jì)的類似物和用于生物篩選目的的組合庫。與其吸引人的微管蛋白聚合作用和微管穩(wěn)定作用的機(jī)制相結(jié)合,所描述的技術(shù)使五加苷素s和eleuthosides用作一類新的潛在抗癌劑成為吸引人的建議。應(yīng)當(dāng)注意按照與合成方案20和表2所示化合物所述的相同條件合成合成方案27—33所述的化合物。盡管本發(fā)明的優(yōu)選形式顯示在附圖中并進(jìn)行了描述,但由于優(yōu)選形式的改變對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的,因此本發(fā)明應(yīng)當(dāng)不受所示和所描述的具體形式的限制,而是按權(quán)利要求書中所描述的內(nèi)容來解釋。實(shí)驗(yàn)詳述一般技術(shù)·除非另外說明,所有反應(yīng)在無水條件下,在氬氣氛和干燥新蒸餾溶劑中進(jìn)行。四氫呋喃(THF)、甲苯和乙醚是從二苯酮鈉中蒸餾得到的,并且二氯甲烷是從氫化鈣中蒸餾得到的。無水溶劑也可以通過將它們通過市售氧化鋁得到。除非另外說明,產(chǎn)率是指色譜和光譜(1HNMR)均質(zhì)材料。除非另外說明,所購試劑具有最高產(chǎn)品品質(zhì)并且不必進(jìn)一步純化即可使用。通過在0.25mmE.Merck硅膠板(60F—254)上進(jìn)行的薄層色譜層析監(jiān)測反應(yīng),用UV光作為顯影劑(visualizingagent)并且用7%乙醇化磷鉬酸或?qū)钕闳┤芤汉图訜嶙鳛檎归_劑。E.Merck硅膠(60,粒度0.040—0.063mm)用于閃式柱色譜層析。在0.25、0.50或1mmE.Merck硅膠板(60F—254)上進(jìn)行制備型薄層色譜層析(PTLC)分離。在BrukerDRX—600、AMX—500或AMX—400儀器上記錄NMR譜并且利用殘余非氘代溶劑作為內(nèi)參考進(jìn)行校正。下列縮寫用于解釋多重性s=單峰,d=雙峰,t=三重峰,q=四重峰,sept=七重峰,m=多重峰,br=寬峰。在Perkin—Elmer1600系列的FT—IR光譜儀上測定IR譜。在Perkin—Elmer241旋光儀上記錄旋光度。在VGZAB—ZSE質(zhì)譜儀上于快速原子轟擊(FAB)條件下用NBA作為基質(zhì)來測定高分辨質(zhì)譜(HRMS)。熔點(diǎn)(mp)未經(jīng)校正并且在ThomasHooverUnimelt毛細(xì)管熔點(diǎn)儀上測定。按合成方案3所述從S—(+)—香芹酮開始合成環(huán)氧化物10在0℃下,將4NNaOH溶液(48ml,192.0mmol,0.3當(dāng)量)緩慢地加到S—(+)—香芹酮(100.0g,665mmol,1.0當(dāng)量)的甲醇(1000ml)溶液中,然后用3小時(shí)的時(shí)間滴加35%過氧化氫溶液(70.0ml,792.6mmol,1.2當(dāng)量)。通過TLC分析確定反應(yīng)完成后,通過緩慢地加入飽和Na2SO3溶液(200ml)中止反應(yīng)并用二氯甲烷(3×300ml)萃取。將有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮,得到不必進(jìn)一步純化即可應(yīng)用的香芹酮過氧化物。將該過氧化物(101.8g,612.4mmol,1.0當(dāng)量)和PtO2(0.72g,3.18mmol,0.095當(dāng)量)的乙醇(500ml)溶液在25℃氫氣氛(1atm)下攪拌12小時(shí)。然后,將該反應(yīng)混合物通過Celite_(硅藻土,CeliteCorp.)墊過濾,用乙醚洗脫并濃縮。將粗品通過閃式色譜層析純化(硅膠,5%EtOAc/己烷),得到環(huán)氧化物10(97.8g,兩步的總產(chǎn)率為87%)的無色油狀物。Rf=0.4(硅膠,EtOAc—己烷,1∶10);FTIR(純凈)vmax2959,2873,1708,1466,1438,1369,1111,884和814cm—1。按合成方案3所示通過甲醛的醛醇縮合反應(yīng)合成11。在78℃下,向二異丙胺(14.06ml,107.26mmol,1.2當(dāng)量)的THF(400ml)溶液中,加入1.6Mn—BuLi的己烷溶液(67.1ml,107.3mmol,1.2當(dāng)量)。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂?℃并攪拌30分鐘,然后在—78℃下,用1.5小時(shí)的時(shí)間,通過套管滴加酮10(15.0g,89.2mmol,1.0當(dāng)量)的THF(100ml)溶液并繼續(xù)攪拌30分鐘。將通過在140℃下裂解多聚甲醛(33.0g,1.10mol,12.2當(dāng)量)并在—78℃下,將所得到的氣體鼓泡吹過THF(500ml)45分鐘制備的甲醛溶液在—78℃下,用1小時(shí)的時(shí)間,通過套管加到烯醇鹽溶液中。然后,將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃,通過加入飽和NH4Cl溶液(100ml)猝滅并用乙醚(3×300ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品通過短的二氧化硅墊過濾并用10%EtOAc/己烷洗脫,得到相應(yīng)的醇(大約10.9g,大約63%)。在0℃下,向該醇(10.9g,55.0mmol,1.0當(dāng)量)、三乙胺(46ml,330mmol,6.0當(dāng)量)和4—DMAP(328mg,2.68mmol,0.05當(dāng)量)的二氯甲烷(200ml)溶液中加入TBSCl(9.9g,66.0mmol,1.2當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌12小時(shí)并且在通過TLC分析確定反應(yīng)完成后,通過加入甲醇(10ml)和水(100ml)猝滅。將有機(jī)層分離,用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品通過閃式色譜層析純化(硅膠,3%EtOAc/己烷),得到甲硅烷基醚11(8.21g,兩步的總產(chǎn)率為53%)。Rf=0.7(硅膠,EtOAc—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax2958,2931,2856,1705,1471,1254,1109,882,835,777cm—1。按合成方案3所示通過對映體選擇性還原酮11合成12。在1.5小時(shí)內(nèi),通過套管將1.0M在THF中的L—Selectride(73.7ml,73.7mmol,1.2當(dāng)量)加到—78℃溫度下的酮11(19.2g,61.4mmol)的THF(300ml)溶液中。在同樣的溫度下將反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘,并且通過TLC確定起始酮完全消耗之后,加入飽和NH4Cl溶液(100ml)使反應(yīng)停止并允許反應(yīng)物溫?zé)岬?℃。然后加入過量的35%過氧化氫(8.0ml,79.8mmol,1.3當(dāng)量)溶液并在0℃下將混合物攪拌1小時(shí)。用EtOAc(3×200ml)萃取反應(yīng)混合物,有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,5%乙酸乙酯/己烷)純化粗產(chǎn)物產(chǎn)生仲醇12(18.0g,93%),為淡黃色油狀物。Rf=0.32(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)3553,3506,2955,2882,1471,1436,1388,1266,1255,1092,1068,1006,960,905,836,776cm—1。按合成方案3所述通過相應(yīng)的甲磺酸酯合成烯丙醇13。在1小時(shí)內(nèi),將甲磺酰氯(8.2ml,106.3mmol,1.15當(dāng)量)滴加到0℃的醇12(29.0g,92.2mmol,1.0當(dāng)量)和三乙胺(33.8ml,243.0mmol,2.6當(dāng)量)的二氯甲烷(250ml)溶液中。在0℃下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)(通過TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)程),通過加入鹽水中止反應(yīng)并用乙酸乙酯萃取(3×300ml)。硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物并濃縮。將產(chǎn)物用乙醚洗脫濾過硅膠短墊產(chǎn)生期望的甲磺酸酯,它不用進(jìn)一步純化立即用于下一步驟中。通過將金屬鈉(12.3g,535.6mmol,5.8當(dāng)量)加到萘(80.3g,627.1mmol,6.8當(dāng)量)的THF溶液(1800ml)中并將混合物攪拌2小時(shí)來制備NaC10H8,在0℃溫度下,通過套管將甲磺酸酯的THF溶液(300ml)滴加到NaC10H8中。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘(用TLC監(jiān)測),通過加入飽和氯化銨溶液(200ml)使反應(yīng)中止,用鹽水處理并用乙酸乙酯萃取(3×300ml)。硫酸鈉干燥有機(jī)萃取物。通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙醚/己烷,然后是10%乙酸乙酯/己烷)純化粗品制得烯丙醇13(24.2g,85%,兩步),為無色油狀物。Rf=0.53(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3351,2956,2931,2857,1468,1254,1095,1058,837,776cm—1。按合成方案3所述合成關(guān)鍵中間體醛14。將醇13(1.61g,5.42mmol,1.0當(dāng)量),原乙酸三乙基酯(39.6ml,216.8mmol,40.0當(dāng)量)和丙酸(0.04ml,0.542mmol,0.1當(dāng)量)的混合物在170℃溫度下加熱72小時(shí)。通過真空蒸餾(25mmHg)除去過量的原乙酸三乙基酯,并且通過閃式色譜層析(硅膠,3%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物以產(chǎn)生期望的乙基酯(1.50g,74%),它不用進(jìn)一步純化即可用于下一步。逐漸將1.0MDIBAL的二氯甲烷溶液(4.6ml,4.60mmol,1.2當(dāng)量)加到—78℃溫度下的乙基酯(1.41g,3.83mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(19ml)溶液中并在該溫度下攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。通過加入飽和的氯化銨溶液(20ml)并在室溫下攪拌2小時(shí)使反應(yīng)中止。分出有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,5%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物獲得醛14(1.20g,97%),無色油狀物。乙基酯的數(shù)據(jù)Rf=0.34(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶30);FT—IR(純凈)vmax2929,2857,1738,1470,1369,1255,1156,1100,837,775cm—1。按合成方案4所述合成α,β—不飽和酯15。在0℃下,通過套管向氫化鈉(60%w/w的礦物油溶液,542mg,13.55mmol,2.0當(dāng)量)的THF(30ml)溶液中逐漸加入膦?;宜崛阴?2.7ml,13.55mmol,2.0當(dāng)量)的THF(10ml)溶液。加完后,在冷卻回到0℃之前,將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌30分鐘。在0℃下,通過套管將醛(2.20g,6.78mmol,1.0當(dāng)量)的THF溶液(15ml)緩慢地加到該反應(yīng)混合物中,并在相同的溫度下將該反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí),在25℃下攪拌4小時(shí)。通過TLC確定該反應(yīng)完成后,通過加入飽和NH4Cl溶液(50ml)將該反應(yīng)混合物猝滅,用乙酸乙酯(2×100ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。并且通過閃式色譜層析(硅膠,2%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到α,β—不飽和酯15(2.67g,100%)的無色油狀物。Rf=0.53(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax2956,1722,1651,1465,1367,1258,1159,1078,841cm—1。按合成方案4所述從酯15合成烯丙醇16。在—78℃下,將1.0MDIBAL(12.20ml,12.20mg,4.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液逐漸加到α,β—不飽和乙酯15(1.2g,3.05mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(15ml)溶液中,并在相同的溫度下,將該反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。通過加入飽和NH4Cl溶液(30ml)將該反應(yīng)混合物猝滅,在室溫下劇烈攪拌2小時(shí),用二氯甲烷(3×50ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到烯丙醇16(980mg,91%)的淡黃色油狀物。Rf=0.21(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax3326,2925,1464,1385,1253,1106,1005,836,774,668cm—1。按合成方案4所述從烯丙醇16合成環(huán)氧化物17。在—20℃下,向L—酒石酸二乙酯(0.28ml,1.50mg,0.2當(dāng)量)和粉末狀4_分子篩(MS)(6.8g)的二氯甲烷(90ml)溶液中加入異丙氧化鈦(Ⅳ)(0.4ml,1.25mmol,0.2當(dāng)量),然后加入5.0M叔丁基過氧化氫溶液(2.7ml.13.5mmol,2.0當(dāng)量)。將該混合物在相同的溫度下攪拌40分鐘后,通過套管滴加烯丙醇16(2.38g,6.75mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(5ml)溶液。將該混合物在相同的溫度下攪拌8小時(shí),進(jìn)一步用二氯甲烷(150ml)稀釋并通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)猝滅。將該混合物通過硅藻土墊過濾,用二氯甲烷洗脫并將有機(jī)相分離,用水和鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到環(huán)氧醇17(2.25g,91%)的無色油狀物。Rf=0.47(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3442,2927,1465,1387,1253,1104,838,775,668cm—1。按合成方案4所述通過相應(yīng)的甲磺酸酯合成烯丙醇19。在—20℃下,向環(huán)氧醇17(1.05g,2.82mmol,1.0當(dāng)量)和三乙胺(2.4ml,16.9mmol,6.0當(dāng)量)的二氯甲烷(28ml)溶液中滴加甲磺酰氯(1.4ml,18.08mmol,4.9當(dāng)量)。1小時(shí)后(TLC監(jiān)測),通過加入飽和NH4Cl溶液(20ml)將反應(yīng)混合物猝滅,用二氯甲烷(2×50ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物通過短硅膠墊過濾,用二氯甲烷洗脫,濃縮并不用進(jìn)一步純化立即用于下一步中。在0℃下,通過套管將甲磺酸酯的THF(28ml)溶液加到用與合成烯丙醇13所述相同的方法產(chǎn)生的0.3M萘鈉(4.7ml,14.1mmol,5.0當(dāng)量)的THF溶液中。10分鐘后,通過加入飽和NH4Cl溶液(50ml)將反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚(2×50ml)萃取,用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,5%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到烯丙醇19(895mg,90%)的無色油狀物。Rf=0.34(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax3420,2955,1464,1387,1254,1073,837,775cm—1。按合成方案4所述合成PMB—醚20。在25℃下,向烯丙醇19(445mg,1.57mmol,1.0當(dāng)量)和對甲氧基芐基—2,2,2—三氯亞氨代乙酸酯(2.22g,7.85mmol,5.0當(dāng)量)的二氯甲烷(8ml)溶液中加入對甲苯磺酸吡啶鎓(395mg,0.31mmol,0.2當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在相同的溫度下攪拌48小時(shí),通過TLC確定反應(yīng)完成后,將反應(yīng)混合物通過加入碳酸氫鈉溶液(10ml)猝滅。分離有機(jī)相并將含水相用二氯甲烷(2×10ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—戊烷,1∶99)純化殘余物,得到PMB—醚20(240mg,根據(jù)50%轉(zhuǎn)化計(jì)算,產(chǎn)率為89%)的淡黃色油狀物。Rf=0.61(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax2954,1614,1514,1464,1250,1080,837,775cm—1。按合成方案4所述合成甲酮21。在25℃下,將PMB—醚20(135mg,0.285mmol,1.0當(dāng)量)和醋酸汞(100mg,3.4mmol,1.2當(dāng)量)的甲醇(2ml)溶液攪拌12小時(shí)。然后通過套管將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到LiCl(24.1mg,0.568mmol,2.0當(dāng)量)、PdCl2(50.5mg,0.285mmol,1.0當(dāng)量)和CuCl2(0.115mg,0.855mmol,3.0當(dāng)量)的甲醇(1ml)溶液中并且在55℃下再攪拌3小時(shí)。加入飽和碳酸氫鈉溶液(5ml),并將該產(chǎn)品用乙醚(20×3ml)萃取。將有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過閃式色譜層析(硅膠,6%EtOAc/己烷)純化,得到甲酮21(90.5mg,65%)的無色油狀物。Rf=0.34(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶15);FT—IR(純凈)vmax2956,1714,1514,1249,1081,836cm—1。按合成方案4所述合成炔丙醇22。在78℃攪拌下,用15分鐘的時(shí)間,通過注射器向甲酮21(180mg,0.369mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷THF(3∶1,20ml)溶液中加入溴化乙炔鎂(0.5M的THF溶液,11.8ml,5.40mmol,14.6當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌6小時(shí),然后將其溫?zé)嶂?5℃。將該反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl溶液(10ml)猝滅。分離水層并用乙醚(3×20ml)萃取,將合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物溶解在THF(2ml)中并在25℃下用1.0MTBAF的THF溶液(1.47ml,1.47mmol,4.0當(dāng)量)處理。2小時(shí)后(TLC監(jiān)測),將反應(yīng)物用水猝滅并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。將合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,5%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到二醇22(106mg,兩步的總產(chǎn)率為72%)的無色油狀物。Rf=0.24(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1);FT—IR(純凈)vmax3305,2958,1614,1514,1248,1090,1035,820cm—1。按合成方案4所述通過氧化—諾文葛耳縮合保護(hù)反應(yīng)合成氰基酯25。將碳酸氫鈉(504mg,5.99mmol,20.0當(dāng)量),吡啶(0.485ml,5.99mmol,20.0當(dāng)量),Dess—Martin過碘烷(191mg,0.449mmol,1.5當(dāng)量)和二醇22(0.120g,0.300mmol,1.0當(dāng)量)的混合物在25℃溫度下攪拌4小時(shí)。然后,向該反應(yīng)物中加入飽和碳酸氫鈉溶液(15ml),并將產(chǎn)品用乙醚(3×25ml)萃取。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥,通過硅藻土過濾,用乙醚洗脫并濃縮,得到不必進(jìn)一步純化即可用于下一步中的醛23。向該醛23的95%乙醇(1.8ml)溶液中加入氰基乙酸乙酯(0.963ml,9.00mmol,30當(dāng)量)和β—丙氨酸(107mg,1.20mmol,4.0當(dāng)量)。在25℃下72小時(shí)后,將反應(yīng)混合物通過硅膠墊過濾,用乙醚洗脫并濃縮,得到不必進(jìn)一步純化即可在下一步中使用的α,β—不飽和氰基酯24。將24的殘余物溶解在二氯甲烷中,并加入N,N—二異丙基乙胺(0.522ml,2.99mmol,10當(dāng)量)。將該反應(yīng)物冷卻至—78℃并用15分鐘的時(shí)間加入TMSOTf(0.288ml,1.49mmol,5.0當(dāng)量)。2小時(shí)后,將該反應(yīng)物用過量甲醇(1.0ml)猝滅并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,6%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到25(0.12g,三步的總產(chǎn)率為71%)。Rf=0.27(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax2959,2231,1730,1614,1513,1248,1078,1022,842cm—1。按合成方案4所述合成α,β—不飽和醛27。在—78℃下,向氰基酯25(280mg,0.497mmol,1.0當(dāng)量)的己烷(25ml)溶液中滴加1.0MDIBAL(5.0ml,5.0mmol,10.0當(dāng)量)的THF溶液。在—78℃下7小時(shí)并在—40℃下1小時(shí)后,加入EtOAc(5ml)并溫?zé)嶂?5℃。加入水(30ml)并在室溫下攪拌1小時(shí)完成處理過程。將該反應(yīng)混合物用乙醚(3×50ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化該產(chǎn)品,得到醇26(210mg,80%)。向26(50.0mg,0.0949mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(0.95ml)溶液中加入N,N—二異丙基乙胺(0.33ml,1.90mmol,20.0當(dāng)量),并將所得到的混合物冷卻至—78℃,然后滴加TIPSOTf(0.26ml,0.95mmol,10.0當(dāng)量)。1小時(shí)后(TLC監(jiān)測),將該反應(yīng)物通過加入甲醇(0.2ml)猝滅。10分鐘后,加入飽和NH4Cl水溶液(5ml)并將混合物溫?zé)嶂?5℃,乙醚(10ml)萃取并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,2%乙酸乙酯/己烷)純化殘余物,得到TIPS醚27(58.8mg,91%)的無色油狀物。Rf=0.33(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax3470,3300,2957,2360,2337,1672,1613,1513,1418,1370,1302,1250cm—1。按合成方案6所述合成非對映異構(gòu)的二醇29。在—78℃下,向乙基乙烯基醚(1.16g,16.0mmol,2.0當(dāng)量)的THF(70.0ml)溶液中加入1.7M叔丁基鋰的己烷溶液(8.5ml,14.4mmol,1.8當(dāng)量),并將該溶液溫?zé)嶂?℃。接著,反應(yīng)發(fā)生顏色變化,從黃色到無色。然后將所得到的乙烯基—陰離子溶液冷卻至—78℃并滴加醛14(2.60g,8.02mmol,1.0當(dāng)量)的THF(25ml)溶液,然后將該反應(yīng)混合物在—78℃下再攪拌30分鐘。通過加入飽和NH4Cl溶液(40ml)將該反應(yīng)物猝滅并用乙醚(3×150ml)萃取。將合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥并濃縮。將粗品溶解在乙醚中并在分液漏斗中用濃H2SO4處理同時(shí)劇烈振搖。水解并通過TLC確定反應(yīng)完成后,用水(20ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)洗滌,用硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析(硅膠,10%—15%乙醚/己烷)純化該殘余物,得到羥基酮28的不可分離立體異構(gòu)體混合物(通過NMR可知比例大約為1.25∶1)。在—78℃下,向混合物28的THF(78ml)溶液中加入溴化乙炔基鎂(0.5M的THF溶液,70.8ml,35.0mmol,4.4當(dāng)量),并將該反應(yīng)混合物在—78℃下攪拌6小時(shí),然后緩慢地溫?zé)嶂痢?0℃。通過加入飽和NH4Cl溶液(50ml)將該反應(yīng)物猝滅并用乙醚(3×100ml)萃取。將合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥并濃縮,通過閃式色譜層析(硅膠,10%—25%乙醚/己烷)純化殘余物,得到所需要的異構(gòu)體29(1.39g,44%)及其C—7,C—8立體異構(gòu)體(1.04g,33%)。29Rf=0.40(硅膠,乙醚∶己烷,1∶3)。按合成方案6所述合成三醇30。在0℃下,向二醇29(0.63g,1.59mmol,1.0當(dāng)量)的THF(16ml)溶液中加入TBAF(1.0M的THF溶液,3.18ml,3.18mmol,2.0當(dāng)量),并用1小時(shí)的時(shí)間將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。通過TLC確定反應(yīng)完成后,通過加入NH4Cl(50ml)將溶液猝滅并用乙醚(3×100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物濃縮并在硅膠上過濾將殘余物純化,得到三醇30(0.45g,100%)的淡黃色油狀物。Rf=0.12(硅膠,乙醚—己烷,3∶1);FT—IR(純凈)vmax3385,2958,1448,1368,1078,946cm—1。按合成方案6所述合成三甲硅烷基醚31。向三醇30(0.45g,1.59mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(16ml)溶液中加入三乙胺(2.3ml,16.5mmol,10.3當(dāng)量),并將該溶液冷卻至0℃。然后加入TESOTf(2.10g,8.00mmol,5.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。通過TLC確定起始物三醇消失后,通過加入飽和NH4Cl(50ml)將溶液猝滅并用二氯甲烷(3×100ml)萃取。合并有機(jī)萃取物,用硫酸鎂干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠(25%乙醚/己烷)純化,得到三甲硅烷基醚31(0.99g,100%)的淡黃色油狀物。Rf=0.6(硅膠,乙醚—己烷,1∶9);FT—IR(純凈)vmax3308,2956,2876,1459,1414,1378,1239,1115,1006cm—1。按合成方案6所述將伯氫氧化物(primaryhydroxide)選擇性脫保護(hù)制備醇32。向三甲硅烷基醚31(1.48g,2.37mmol,1.0當(dāng)量)在3∶1甲醇/二氯甲烷(20ml)的溶液中加入催化量PPTS(45mg,0.24mmol,0.1當(dāng)量)。反應(yīng)完成后(TLC監(jiān)測),通過加入飽和碳酸氫鈉(50ml)將反應(yīng)混合物處理并用乙醚(3×150ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鎂干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠過濾純化,用乙醚洗脫,得到醇32(1.18g,98%)的無色油狀物。Rf=0.12(硅膠,乙醚∶己烷,1∶9);FT—IR(純凈)vmax3490,3308,2955,2876,1459,1414,1378,1238,1109,1072,1004cm—1。按合成方案6所述合成醛33。向醇32(1.24g,2.43mmol,1.0當(dāng)量)和粉末狀活性4_MS(0.5g)的二氯甲烷(16ml)溶液中加入NMO(0.43g,3.64mmol,1.5當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。然后加入TPAP(0.043g,0.181mmol,0.07當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌30分鐘。將該多相溶液通過短硅膠墊過濾并用二氯甲烷洗滌。濃縮后,得到醛33(1.20g,98%)的無色油狀物。Rf=0.42(硅膠,乙醚∶己烷,1∶9);FT—IR(純凈)vmax3309,2955,2876,1719,1458,1414,1378,1238,1073,1004cm—1。按合成方案6所述合成α,β—不飽和氰基酯34。將醛33(1.14g,2.25mmol,1.0當(dāng)量),氰基乙酸乙酯(7.63g,67.0mmol,30當(dāng)量)和β—丙氨酸(0.080g,9.00mmol,4.0當(dāng)量)的乙醇(15ml)溶液在50℃下攪拌72小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物濃縮并通過短硅膠墊過濾,用10%乙醚/己烷洗脫。得到氰基酯34(1.28g,95%)的無色油狀物。Rf=0.40(硅膠,乙醚∶己烷,1∶9);FT—IR(純凈)vmax3308,2958,2878,2201,1735,1619,1461,1370,1249,1117,1008cm—1。按合成方案6所述合成羥基醛35。在—78℃下,向氰基酯34(101mg,0.168mmol,1.0當(dāng)量)的己烷(8.4ml)溶液中加入DIBAL(1.0M的甲苯溶液,1.7ml,1.70mmol,10.0當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在—78℃下攪拌6小時(shí)。將該溶液用乙酸乙酯(0.2ml)猝滅,加入飽和NH4Cl(10ml)溶液,并將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí),然后將其通過短硅藻土墊過濾,用乙醚洗脫并用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物濃縮并通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙醚/己烷)純化,得到羥基醛35(79.8mg,90%)的淡黃色油狀物。Rf=0.42(硅膠,乙醚∶己烷,1∶1);FT—IR(純凈)vmax3447,3307,2957,2877,1677,1459,1414,1380,1239,1117,1008cm—1。按合成方案6所述合成三甲硅烷基醚36。在—78℃下,向羥基醛35(930.0mg,1.65mmol,1.0當(dāng)量)和iPr2NEt(2.8ml,16.07mmol,9.7當(dāng)量)的二氯甲烷(8ml)溶液中加入TIPSOTf(2.2ml,8.25mmol,5.0當(dāng)量),并將該溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。通過加入甲醇(0.5ml)將該反應(yīng)混合物猝滅,然后加入飽和NH4Cl(10ml)溶液。然后將該反應(yīng)混合物用乙醚(10ml)萃取,并合并有機(jī)萃取物,用硫酸鈉干燥并濃縮。將所得到的殘余物通過閃式色譜層析(硅膠,2%乙酸乙酯—己烷)純化,得到三甲硅烷基醚36(1.10g,93%)的淡黃色油狀物。Rf=0.33(硅膠,己烷);FT—IR(純凈)vmax3309,2957,2872,2361,1675,1462,1381,1239,1167,1117,1007,882,819,741cm—1。按合成方案7所述通過分子內(nèi)乙炔化物與醛27加成合成炔酮37。在25℃下,將LiHMDS(1.0M的THF溶液,0.037ml,0.037mmol,當(dāng)量)的溶液滴加到醛27(17.0mg,0.025mmol,1.0當(dāng)量)的IHF(1.2ml)溶液中。10分鐘后(TLC監(jiān)測),通過加入飽和NH4Cl(5ml)溶液將反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚(2×10ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物溶解在二氯甲烷(1.0ml)中,在0℃下,將碳酸氫鈉(41.8mg,0.497mmol,20當(dāng)量)加到該溶液中。40分鐘后,在相同的溫度下,將Dess—Martin過碘烷(10.6mg,0.025mmol,1.0當(dāng)量)加到該反應(yīng)混合物中,并將該溶液溫?zé)嶂?5℃。在室溫下攪拌4小時(shí)后,將該反應(yīng)混合物用乙醚(5ml)稀釋并通過連續(xù)加入飽和碳酸氫鈉溶液(5ml)和硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3·5H2O,65mg,0.26lmmol,10.4當(dāng)量)猝滅。將所得到的溶液用乙醚(2×10ml)萃取,并將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品通過閃式色譜層析(硅膠,1%乙酸乙酯/己烷)純化,得到烯炔酮37(14.4mg,兩步總產(chǎn)率85%)的無色油狀物。Rf=0.46(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax2961,2361,2197,1650,1611,1512,1461,1384,1461,1384,1248,1175,1095,1035,841,760,685cm—1。按合成方案7所述合成炔丙醇38。在25℃下,向三甲基甲硅烷基醚37(3.2mg,0.0047mmol,1.0當(dāng)量)的甲醇(1ml)溶液中加入PPTS(1.18mg,0.0047mmol,1.0當(dāng)量),并將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(1ml)將該反應(yīng)物猝滅并用乙醚(2×10ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品通過閃式色譜層析(硅膠,15%乙酸乙酯/己烷)純化,得到醇38(2.7mg,94%)的無色油狀物。Rf=0.45(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)。按合成方案7所述合成基本三環(huán)核心40。在25℃氬氣下,向炔酮38(6.2mg,0.0135mmol,1.0當(dāng)量)的甲苯(1ml)溶液中加入5%在用Pb處理的CaSO4上的Pd(Lindlar催化劑,14.0mg,0.00675mmol,0.5當(dāng)量)。然后在H2環(huán)境中(1大氣壓)于相同溫度下,將懸浮液攪拌20分鐘,并經(jīng)Celite_過濾反應(yīng)混合物并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗殘余物(硅膠,10%乙酸乙酯—己烷)產(chǎn)生半縮酮40(6.2mg,75%),為無色油狀物,以及它的5,6—二氫類似物(1.5mg,15%)。Rf=0.55(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3418,2866,1615,1515,1463,1248,1017cm—1。按合成方案7所述合成甲基縮酮41。在半縮酮40(4.0mg,0.0066mmol,1.0當(dāng)量)的甲醇(0.5ml)溶液中加入PPTS(1.65mg,0.0066mmol,1.0當(dāng)量)。10分鐘后,通過加入飽和的碳酸氫鈉溶液(5ml)使反應(yīng)停止。然后用二氯甲烷萃取兩相體系(3×10ml)并合并有機(jī)萃取液,硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化產(chǎn)物(硅膠,5%乙酸乙酯—己烷)產(chǎn)生縮酮41(4.5mg,100%),為淡黃色油狀物。Rf=0.68(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax2957,2866,1614,1514,1463,1250,1064cm—1。按合成方案7所述由PMB醚41合成醇42。將醚41(5.0mg,0.0080mmol,1.0當(dāng)量)的THF(1ml)溶液和乙醇(2滴)加到—78℃溫度下的液氨(2ml)中。然后加入鈉(1.8mg,0.078mmol,9.8當(dāng)量),并在—78℃溫度下將反應(yīng)物攪拌20分鐘。經(jīng)TCL確證脫保護(hù)結(jié)束后,通過加入固體氯化銨(50mg)使反應(yīng)停止,溫?zé)岬绞覝貋碚羧グ保靡颐演腿?3×10ml),硫酸鈉干燥,濃縮并通過閃式色譜層析純化(硅膠,15%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生醇42以及它的5,6—二氫類似物43,為不可分離的混合物(約2∶1,3.8mg,95%)。按合成方案9所述由羥基炔酮45合成醇42。在25℃氫氣環(huán)境下,將[Rh(nbd)(dppb)]BF4(1.9mg,0.0027mmol,0.05當(dāng)量)加到α,β—炔酮45(26.8mg,0.055mmol,1.0當(dāng)量)的丙酮(3ml)溶液中。然后將反應(yīng)燒瓶抽空并用氫氣處理(1大氣壓)。10分鐘后,通過加入飽和碳酸氫鈉(10ml)使反應(yīng)中止,用乙醚萃取(3×10ml),硫酸鈉干燥并濃縮為粗殘余物。于25℃溫度下,將PPTS(6.9mg,0.027mmol,0.5當(dāng)量)加到該殘余物的甲醇(6ml)溶液中。10分鐘后,通過加入飽和碳酸氫鈉(10ml)使反應(yīng)中止,用乙醚萃取(3×20ml),硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化殘余物(硅膠,15%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生甲基縮酮42(22.2mg,80%,兩步產(chǎn)率),為無色油狀物。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3456,2940,2866,1466,1366,1047,881cm—1。按合成方案12所述由羥基炔酮45合成5,6—二氫類似物43。在酮45(4.5mg,0.0092mmol,1.0當(dāng)量)的乙酸乙酯(0.5ml)溶液中加入5%在硫酸鋇上的Pd(19.6mg,0.0092mmol,1.0當(dāng)量)。在氫氣環(huán)境中(1大氣壓)于25℃溫度下,將懸浮液攪拌1小時(shí)。然后,經(jīng)celite_過濾反應(yīng)混合物并通過蒸發(fā)而濃縮。將PPTS(4.6mg,0.018mmol,2.0當(dāng)量)加到該粗殘余物的甲醇(0.5ml)溶液中,并在25℃溫度下攪拌6小時(shí)。加入碳酸氫鈉飽和溶液(5ml),并用乙醚萃取反應(yīng)混合物(3×10ml),硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗殘余物(硅膠,15%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生5,6—二氫甲基縮酮類似物43(3.0mg,64%,兩步)。Rf=0.50(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3422,2961,2865,2361,1464,1383,1122,1047,882,684cm—1。按合成方案9所述合成雙環(huán)醇44。在PMB—醚37(31.0mg,0.045mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(4.6ml)和水(0.3ml)溶液中加入DDQ(21.0mg,0.091mmol,2.0當(dāng)量),并且在25℃溫度下將反應(yīng)物攪拌30分鐘。通過TLC證實(shí)原料消失后,通過加入飽和碳酸氫鈉(3ml)使反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚(3×10ml)萃取,并且用硫酸鈉干燥。通過閃式色譜層析純化粗殘余物(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶99)產(chǎn)生醇44(20.4mg,80%),為無色油狀物。Rf=0.57(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax3490,2959,2866,2197,1651,1464,1384,1252,1122,1095,1021,864,843cm—1。按合成方案10所述合成炔酮49。在—20℃下,向醛36(243.0mg,0.338mmol,1.0當(dāng)量)的THF(17ml)溶液中滴加1.0MLiHMDS(0.68ml,0.68mmol,2.0當(dāng)量)的THF溶液。在該溫度下將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘,然后通過用飽和NH4Cl溶液(30ml)使反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚(2×50ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮得到粗品殘余物。在0℃下,將該殘余物的二氯甲烷溶液(9ml)加到碳酸氫鈉(170.0mg,2.0mmol,5.9當(dāng)量)、吡啶(0.16ml,2.0mmol,5.9當(dāng)量)和Dess—Martin試劑(286.0mg,0.67mmol,2.0當(dāng)量)的二氯甲烷(9ml)溶液中。在該溫度下,將反應(yīng)物攪拌1小時(shí),然后通過連續(xù)加入飽和碳酸氫鈉(20ml)和Na2S2O3·5H2O(1.17g,4.7mmol,13.9當(dāng)量)將其猝滅。將其再攪拌30分鐘,用乙醚(2×50ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。然后將該粗品殘余物通過閃式色譜層析(硅膠,0.5%乙酸乙酯/己烷)純化,得到二環(huán)炔酮49(216mg,兩步的總產(chǎn)率為89%)的淡黃色油狀物。Rf=0.74(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶10);FT—IR(純凈)vmax2957,2362,1652,1460,1383,1212,1114,1004,883,732,684cm—1。按合成方案10所述合成二醇45。在25℃下,向三甲硅烷基醚49(200mg,0.28mmol,1.0當(dāng)量)的THF(1ml)溶液中加入三乙胺·3HF(0.23ml,1.40mmol,5.0當(dāng)量)。1.5小時(shí)后,將反應(yīng)混合物冷卻至0℃,通過加入飽和碳酸氫鈉(10ml)使反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚(3×10ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。得到粗品殘余物。將該殘余物通過閃式色譜層析(硅膠,25%乙酸乙酯/己烷)純化,得到二醇45(107mg,78%)的無色油狀物。Rf=0.26(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);FT—IR(純凈)vmax3411,2941,2867,2202,1650,1465,1385,1207,1089,1018,883,757,685cm—1。按合成方案1l所述合成芳族側(cè)鏈52的混合酸酐。在25℃下,向乙酯50(750mg,4.16mmol,1.0當(dāng)量)的(1∶1)THF水(32.0ml)溶液中加入LiOH·H2O(192mg,4.57mmol,1.1當(dāng)量)并在相同的溫度下,將反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)。減壓除掉溶劑,將固體與苯(5ml×5)共沸并在高真空下干燥。該酸鹽51不必進(jìn)一步純化即可使用。在25℃下,向51的THF(40ml)溶液中加入新戊酰氯(0.54ml,4.58mmol,1.1當(dāng)量)并在相同的溫度下將該反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)。通過TLC判斷反應(yīng)完成后,將反應(yīng)混合物過濾,并將濾液減壓濃縮并在高真空下干燥,得到酸酐52(698mg,75%)。將該酸酐以0.2M二氯甲烷溶液的形式儲存并以該形式用于酯化反應(yīng)中。通過連接芳族側(cè)鏈合成53(合成方案11)。在25℃下,將醇42(61.0mg,0.120mmol,1.0當(dāng)量)、4—DMAP(14.7mg,0.120mmol,1.0當(dāng)量)、三乙胺(0.3ml,2.15mmol,17.9當(dāng)量)和混合酸酐52(6.0ml0.2M二氯甲烷溶液,1.22mmol,10.0當(dāng)量)的混合物攪拌22小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮并通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到酯53(75.0mg,98%)。Rf=0.42(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax2940,2864,1704,1639,1465,1384,1269,1154,1060,994cm—1。按合成方案11所述合成醇54。向甲硅烷基醚53(75.0mg,0.117mmol,1.0當(dāng)量)的THF(2ml)溶液中加入1.0MTBAF的THF溶液(0.22ml,0.22mmol,1.9當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在25℃下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)完成后(薄層色譜層析監(jiān)測),將該反應(yīng)混合物濃縮并通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到醇54(50.0mg,89%)。Rf=0.23(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax3380,2961,2361,1700,1636,1450,1382,1269,1156,1036,731cm—1。按合成方案11所述合成醛55。向烯丙醇54(50mg,0.104mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入碳酸氫鈉(88.0ml,0.595mmol,10.0當(dāng)量)和Dess—Martin試劑(84.8mg,0.20mmol,2.0當(dāng)量),并將該反應(yīng)物在室溫下攪拌30分鐘,然后加入異丙醇(0.1ml)和乙酸乙酯(10ml)。將沉淀過濾掉并將濾液濃縮和通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到醛55(49.5mg,100%)。Rf=0.43(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)。按合成方案11所述合成甲酯57,中間經(jīng)過酸56。在0℃下,向醛55(14.0mg,0.0291mmol,1.0當(dāng)量)的t—BuOH∶H2O(5∶1,總共1.2ml)溶液中加入2.0M2—甲基—2—丁烯的THF溶液(1ml,2.0mmol,68.7當(dāng)量)、NaH2PO4(10.5mg,0.087mmol,2.9當(dāng)量)和NaClO2(15.7mg,0.174mmol,6.0當(dāng)量)。將該反應(yīng)物在相同的溫度下攪拌2小時(shí),然后加入CH2N2的乙醚溶液(過量)并將反應(yīng)物在25℃下再攪拌10分鐘。將過量的CH2N2用氫氣流除掉,將反應(yīng)物用乙酸乙酯(3×15ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品殘余物濃縮并通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到甲酯57(13.1mg,兩步總產(chǎn)率88%)。Rf=0.42(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax3410,2960,1711,1637,1435,1384,1269,1155,1048,732cm—1。按合成方案11所述合成珊瑚素A(7)。向甲酯57(6.0mg,0.0117mmol,1.0當(dāng)量)的10∶1二氯甲烷∶水(1.1ml)溶液中加入CSA(10mg,0.043mmol,6.4當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在25℃下攪拌16小時(shí),然后加入三乙胺并將反應(yīng)物濃縮。將所得到的粗品混合物通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到珊瑚素A(7)(4.6mg,79%)的白色固體。Rf=0.32(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax2958,2361,1711,1636,1244,1153,1050cm—1。按合成方案11所述合成乙酯58。在0℃下,向醛55(27.8mg,0.058mmol,1.0當(dāng)量)的t—BuOH∶H2O(5∶1,總共1.2ml)溶液中加入2.0M2—甲基—2—丁烯的THF溶液(1ml,2.0mmol,34.4當(dāng)量)、NaH2PO4(20.9mg,0.174mmol,3.0當(dāng)量)和NaClO2(31.5mg,0.340mmol,2.9當(dāng)量)。將該反應(yīng)物在相同的溫度下攪拌2小時(shí),然后加入過量CH3CHN2的乙醚溶液并將反應(yīng)物在25℃下再攪拌10分鐘。將過量的CH3CHN2用氬氣流除掉,將反應(yīng)物用乙醚(2×15ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品殘余物濃縮并通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到乙酯58(27.0mg,兩步總產(chǎn)率89%)。Rf=0.41(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax2963,2960,1708,1636,1269,1154,1048cm—1。按合成方案11所述合成珊瑚素B(8)。向乙酯58(3.5mg,0.0067mmol,1.0當(dāng)量)的10∶1二氯甲烷∶水(1.1ml)溶液中加入CSA(10.0mg,0.043mmol,6.4當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在25℃下攪拌24小時(shí),然后加入三乙胺并將反應(yīng)物濃縮。將所得到的粗品混合物通過閃式色譜層析(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇)純化,得到珊瑚素B(8)(3.0mg,86%)的白色固體。Rf=0.32(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax3348,2926,2855,1708,1637,1458,1383,1299,1271,1244,1156,1051cm—1。按合成方案12所述合成C5,C6—飽和的類似物61。按照兩個(gè)天然產(chǎn)物(53,54,55,56,57,58)相同的反應(yīng)步驟,從醇43開始合成類似物61。Rf=0.32(硅膠,10∶10∶1,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇);FT—IR(純凈)vmax2959,1711,1638,1451,1247,1159,1043cm—1。按合成方案14所述合成混合酸酐樹脂100在25℃下,將羥甲基聚苯乙烯(5.00g,4.00mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(50ml)懸浮液用三乙胺(2.79ml,20.0mmol,5.0當(dāng)量)和戊二酸酐(1.87g,16.0mmol,4.0mmol)處理。將反應(yīng)混合物在25℃下輕輕攪拌(<300rpm)8小時(shí),然后將其傾入玻璃漏斗中,用二氯甲烷(50ml)、甲醇(50ml)、二氯甲烷(3×50ml)和乙醚(2×200ml)洗滌并在高真空下干燥至恒重。將所得到的樹脂在25℃下重新懸浮在二氯甲烷(50ml)中并用三乙胺(2.79ml,20.0mmol,5.0當(dāng)量)處理,然后用新戊酰氯(1.44g,12.0mmol,3.0當(dāng)量)處理。將該反應(yīng)混合物在25℃下輕輕攪拌6小時(shí),然后,將其傾入玻璃漏斗中并在氫氣氛下用下列蒸餾的溶劑洗滌二氯甲烷(50ml)、乙醚(50ml)、二氯甲烷(3×50ml)和乙醚(2×200ml)并在高真空下干燥至恒重(5.60g)。通過用芐醇滴定混合酸酐樹脂測定兩步的總產(chǎn)率>90%。因此,在三個(gè)分離試驗(yàn)中,將混合酸酐樹脂(300mg,0.207mmol,1.0當(dāng)量)用芐醇(15.6mg,0.145mmol,0.7當(dāng)量)、(20.1mg,0.186mmol,0.9當(dāng)量)和(24.5mg,0.227mmol,1.1當(dāng)量)處理,然后用三乙胺(43.2mg,0.310mmol,1.5當(dāng)量)和4—DMAP(5.0mg,0.041mmol,0.2當(dāng)量)處理。反應(yīng)混合物的TLC分析證實(shí),芐醇的總消耗為0.7和0.9當(dāng)量的試驗(yàn),其產(chǎn)率至少為90%。按合成方案14所述合成羥基樹脂120在0℃下,向NaH(60%的礦物油懸浮液,1.76g,44.0mmol,4.0當(dāng)量)的DMF(100ml)懸浮液中加入1,4—丁二醇(3.86ml,44.0mmol,4.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)。將Merrifield樹脂(10.0g,11.0mmol,1.0當(dāng)量)加到該反應(yīng)混合物中,然后加入碘化四正丁基銨(400mg,0.11mmol,0.1當(dāng)量)并將該混合物輕輕攪拌(小于300rpm)12小時(shí)。將樹脂傾入玻璃漏斗中,用HCl水溶液(1N,200ml)、DMF(2×300ml)、甲醇(200ml)、二氯甲烷(300ml)、甲醇(200ml)、二氯甲烷(2×300ml)和乙醚(2×200ml)洗滌并在高真空下干燥至恒重(9.98g,產(chǎn)率99%)。將該樹脂的樣品在25℃下懸浮在二氯甲烷中并用Fmoc—Cl(5.0當(dāng)量)和吡啶(5.0當(dāng)量)處理6小時(shí)。在25℃下,用10%三乙胺的二氯甲烷溶液處理Fmoc—樹脂8小時(shí),通過光度測定法,從釋放的Fmoc發(fā)色團(tuán)量來確定反應(yīng)性羥基的量。按合成方案14所述合成碘代樹脂130在0℃下,將羥基樹脂120(9.00g,9.39mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(100ml)懸浮液相繼用咪唑(2.55g,37.6mmol,4.0當(dāng)量)、Ph3P(9.85g,37.6mmol,4.0當(dāng)量)和碘(9.55g,37.6mmol,4.0當(dāng)量)處理。將該反應(yīng)混合物在0℃下輕輕攪拌4小時(shí),然后將其傾入玻璃漏斗中,用二氯甲烷(3×200ml)、甲醇(200ml)、二氯甲烷(2×200ml)和乙醚(2×200ml)洗滌并在高真空下干燥至恒重(9.95g,產(chǎn)率>95%)。將該樹脂按照合成120中所描述的方法進(jìn)行Fmoc測定,結(jié)果表明醇已經(jīng)完全消耗。按合成方案14所述合成正膦樹脂140將碘化物樹脂130(5.00g,4.45mmol,1.0當(dāng)量)和Ph3P(11.7g,44.5mmol,10當(dāng)量)在DMF(30ml)中的混合物在100℃下輕輕攪拌15小時(shí),然后將其傾入玻璃漏斗中,用溫?zé)岬?100℃)DMF(3×200ml)、二氯甲烷(2×200ml)和乙醚(3×300ml)洗滌并干燥至恒重6.10g(基于質(zhì)量增加的產(chǎn)率>95%)。在25℃下,將部分該樹脂(2.2g,1.57mmol,1.0當(dāng)量)再懸浮在THF(15ml)中,加入LiHMDS(1.0M的THF溶液,2.04ml,2.04mmol,1.3當(dāng)量),并將該反應(yīng)在室溫下攪拌2小時(shí),然后樹脂變成深紅色。通過套管插入術(shù)將上清液溶劑除掉,將樹脂用THF(3×15ml)洗滌并且所得到的樹脂不必再進(jìn)行任何處理即可用于下一步中(產(chǎn)率>90%)。按照下列方法測定產(chǎn)率。將內(nèi)鎓鹽用苯甲醛(5.0當(dāng)量,25℃,6小時(shí))猝滅并將所得到的樹脂進(jìn)行臭氧分解(二氯甲烷,—78℃,30分鐘),然后進(jìn)行還原處理(Me2S)。通過用可信的苯甲醛樣品校準(zhǔn)的HPLC吸收作用確定所回收的苯甲醛的量。按合成方案15所述合成乙酸酯180。在25℃下,將羥基化合物47(0.404g,0.806mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(10ml)溶液用吡啶(0.322g,4.03mmol,5.0當(dāng)量)和乙酸酐(0.246g,2.42mmol,3.0當(dāng)量)處理。將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時(shí),然后進(jìn)行TLC分析,結(jié)果表明反應(yīng)完成。將該反應(yīng)混合物傾入乙醚(150ml)中,用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×100ml)洗滌,用硫酸鎂干燥并濃縮。將所得到的粗品混合物通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)純化,得到純乙酸酯180(0.421g,產(chǎn)率96%)。Rf=0.20(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);[α]D25+47.8(c=2.32,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2942,2866,2363,2334,1739,1720,1459,1364,1239,1034cm—1。按合成方案15所述合成羥基縮酮190。在25℃下,將縮酮180(0.421g,0.774mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(5ml)溶液用1,6—己二醇(0.913g,7.74mmol,10當(dāng)量)和PPTS(0.194g,0.774mmol,1.0當(dāng)量)處理。將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌4小時(shí),然后進(jìn)行TLC分析,結(jié)果表明反應(yīng)完成。將該反應(yīng)混合物裝載到短的硅膠柱上并用乙酸乙酯—己烷(1∶2)洗脫,得到純羥基縮酮190(0.450g,產(chǎn)率92%)。Rf=0.15(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2);[α]D25+36.5(c=1.0,C6H6);FT—IR(純凈)vmax3427,2936,2864,1742,1465,1368,1238,1051,1032,880cm—1。按合成方案15所述合成醛縮酮200。在25℃下,向Dess—Martin過碘烷(0.451g,1.07mmol,1.5當(dāng)量)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入吡啶(0.280g,3.56mmol,5.0當(dāng)量)和碳酸氫鈉(0.598g,7.12mmol,10當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15分鐘,然后冷卻至0℃。加入醇190(0.450g,0.712mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(10ml)溶液。15分鐘后,將該反應(yīng)混合物從冷卻浴中取出并在25℃下再攪拌2小時(shí),然后進(jìn)行TLC分析,結(jié)果表明反應(yīng)完成。將該反應(yīng)混合物裝載到短的硅膠柱上并用乙酸乙酯—己烷(1∶3)洗脫,得到純品200(0.430g,產(chǎn)率96%)。Rf=0.18(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3);[α]D25+29.0(c=1.0,C6H6);FT—IR(純凈)vmax2940,2865,1939,1458,1369,1238,1032,996,880cm—1。按合成方案16所述通過縮酮轉(zhuǎn)移作用(transketalization)將珊瑚素核心180連接到樹脂120上。在25℃下,向含火焰干燥的4_分子篩(0.30g)的樹脂120(0.563g,0.54mmol,10當(dāng)量)的二氯甲烷(3ml)懸浮液中加入縮酮180(28mg,0.054mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1ml)溶液,然后加入PPTS(13mg,0.054mmol,1.0當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在室溫下在腕式(wrist)振蕩器上輕輕攪拌48小時(shí),然后過濾并用無水二氯甲烷(2×5ml)洗滌。將在合并濾液中未反應(yīng)的原料純化,回收14mg純180(按照所回收的原料計(jì)算,產(chǎn)率為50%)。通過在室溫下將樹脂重新懸浮在DMF(3ml)中24小時(shí),然后加入MOM—Cl(88mg,0.054mmol,20當(dāng)量)和iPr2NEt(126mg,1.1mmol,20當(dāng)量)而掩蓋樹脂上過量的醇。將樹脂在玻璃漏斗中過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷(3×50ml)和乙醚(2×50ml)洗滌并在高真空下干燥至恒重0.56g(0.039mmol/g珊瑚素核心)。按合成方案16所述方法通過維蒂希反應(yīng)將珊瑚素核心200連接到樹脂140上。向冷卻至—78℃下的內(nèi)鎓鹽140(0.75mmol,7.0當(dāng)量)的THF(2ml)懸浮液中加入醛200(67.6mg,0.107mmol,1.0當(dāng)量)的THF(5ml)溶液。將該反應(yīng)用2小時(shí)的時(shí)間緩慢升溫至室溫并在25℃下再攪拌2小時(shí),然后進(jìn)行TLC分析,結(jié)果表明,醛已經(jīng)全部消耗掉(產(chǎn)率>95%)。通過加入乙醛(99mg,2.25mmol,21當(dāng)量),將過量的內(nèi)鎓鹽猝滅,在玻璃漏斗上收集樹脂,用含1%三乙胺的THF(3×50ml)和乙醚(2×50ml)洗滌并在高真空下干燥至恒重836mg(0.128mmol/g珊瑚素核心)。在斷裂示范試驗(yàn)中,將該樹脂的樣品(225mg,28.8mmol,1.0當(dāng)量)在25℃下用PPTS(14.3mg,57.6mmol,2.0當(dāng)量)的甲醇(0.5ml)溶液處理30小時(shí),純化(硅膠,閃式柱色譜層析)后,得到14.2mg相應(yīng)的甲基縮酮(兩步的總產(chǎn)率為90%)。按合成方案17所述水解乙酸酯240和制備與聚合物結(jié)合的醇250。向樹脂240(3.12g,0.40mmol,1.0當(dāng)量)的THF(20ml)懸浮液中加入NaOMe(0.5M的甲醇溶液,4.0ml,2.0mmol,5.0當(dāng)量)。在室溫下,將該反應(yīng)混合物在腕式振蕩器上攪拌12小時(shí)。將樹脂過濾掉并用含1%三乙胺的甲醇(100ml)、含1%三乙胺的二氯甲烷(100ml)和乙醚(100ml)洗滌并在高真空下干燥。用PPTS(大約3當(dāng)量)的甲醇溶液將產(chǎn)物從樹脂上斷裂下來后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)已經(jīng)結(jié)束。將斷裂得到的粗品產(chǎn)物進(jìn)行NMR分析,可見與先前報(bào)道的產(chǎn)物410(合成方案19)相一致的單一化合物,產(chǎn)率>95%。盡管本發(fā)明僅提供了用樹脂240合成珊瑚素A(7)和B(8)的確切方法,但對于樹脂230來說,使用類似的方法并且得到類似的結(jié)果。按合成方案17所述連接尿刊酸側(cè)鏈和合成樹脂270。在50℃和Et3N(0.357ml,2.56mmol,10當(dāng)量)和4—DMAP(62mg,0.512mmol,2.0當(dāng)量)存在下,將羥基樹脂250(2.0g,0.256mmol,1.0當(dāng)量)的DMF(6ml)懸浮液用混合酸酐260(0.302g,1.28mmol,5.0當(dāng)量)處理24小時(shí)。將樹脂過濾掉,用含1%三乙胺的二氯甲烷(2×25ml)、乙醚(100ml)、含1%三乙胺的二氯甲烷(2×25ml)和乙醚(3×20ml)洗滌并在高真空下干燥。將產(chǎn)物從樹脂上斷裂下來后,通過加入PPTS(大約3當(dāng)量)和甲醇,進(jìn)行TLC分析,結(jié)果證明反應(yīng)已經(jīng)結(jié)束(該結(jié)果也證明,含5—10%弱極性副產(chǎn)物,據(jù)推測是由試劑260中的雜質(zhì)產(chǎn)生的)。將斷裂得到的粗品產(chǎn)物進(jìn)行NMR分析,證明它與16相符并且估計(jì)產(chǎn)率為90%。醇270的脫甲硅基作用和氧化作用。按合成方案17所述合成固體負(fù)載的醛280在25℃溫度下,用TBAF(1.0M,在THF中,384mmol,10當(dāng)量)處理樹脂270(300mg,38.4mmol,1.0當(dāng)量)的THF(1.5ml)懸浮液8小時(shí)。過濾樹脂,用含有1%三乙胺的THF(4×10ml)和乙醚(3×10ml)洗滌,然后在高真空下干燥。通過PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇作用使產(chǎn)品從樹脂樣品上裂解后,用TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成。NMR分析如此獲得的粗產(chǎn)品來對其進(jìn)行證實(shí)并確證脫保護(hù)步驟中的產(chǎn)率>95%。樹脂(250mg,32mmol,1.0當(dāng)量)被再懸浮在含有吡啶(12.8mg,160mmol,5.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0ml)中并用預(yù)先形成的在二氯甲烷(1.5ml)中的Dess—Martin過碘烷(67.2mg,160mmol,5.0當(dāng)量)、碳酸氫鈉(40.3mg,480mmol,15當(dāng)量)和吡啶(25.6mg,64mmol,5.0當(dāng)量)的懸浮液處理。允許混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)。然后過濾樹脂,用二氯甲烷(4×10ml),水(3×10ml),甲醇(2×5ml),二氯甲烷(2×5ml),乙醚(3×5ml)洗滌并在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)和甲醇使樹脂樣品裂解之后,通過TLC和NMR分析證實(shí)反應(yīng)完成、所得產(chǎn)品的一致性和反應(yīng)產(chǎn)率(>95%)。醛280的氧化和所得羧酸的酯化。按合成方案17所述合成與聚合物結(jié)合的珊瑚素A(290)和B(300)樹脂280(220mg,28.2mmol,1.0當(dāng)量)、亞氯酸鈉(63.3mg,704mmol,25當(dāng)量)、磷酸二氫鉀(83.7mg,704mmol,25當(dāng)量)和異丁烯(2M,在THF中,1.40mmol,50當(dāng)量)在THF∶叔丁醇∶水(4∶4∶1)中的混合物在室溫下反應(yīng)48小時(shí)。將所得樹脂過濾,用水(3×10ml)、甲醇(2×10ml)、0.5MPPTS的二氯甲烷(3×10ml)、二氯甲烷(2×10ml)和乙醚(2×10ml)洗滌,然后在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)的甲醇溶液使酸產(chǎn)品從樹脂上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。然后將樹脂分成兩份(每份100mg,12.8mmol,1.0當(dāng)量)并且每份用含DCC(26mg,128mmol,10當(dāng)量)和4—DMAP(7.7mg,64mmol,5.0當(dāng)量)的DMF(0.5ml)溶液處理。向第一份樹脂中加入甲醇(4.0mg,128mmol,10當(dāng)量)并且向第二份樹脂中加入乙醇(5.9mg,128mmol,10當(dāng)量)。將反應(yīng)容器在腕式振蕩器上攪拌48小時(shí),然后將各樹脂過濾并用二氯甲烷(4×5ml),甲醇(2×5ml),二氯甲烷(3×5ml),乙醚(3×5ml)洗滌。用CSA(約3當(dāng)量)和甲醇使各酯產(chǎn)品的樣品從固體支持物上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>90%。用CSA/H2O裂解與聚合物結(jié)合的珊瑚素A和B。按合成方案17所述合成珊瑚素A(7)和B(8)在25℃下,將樹脂290(92mg,11.7mmol,1.0當(dāng)量)或300(90mg,11.5mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷/水(2∶1,2.0ml)懸浮液用CSA(8mg,35.1mmol,3.0當(dāng)量)處理并劇烈攪拌40小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉(9.8mg,117mmol,10當(dāng)量)猝滅,過濾并將水層用二氯甲烷(3×1ml)洗滌。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥并濃縮,將產(chǎn)品通過PTLC(3%甲醇/二氯甲烷)純化,得到3.0mg天然珊瑚素A(7)(從290合成,產(chǎn)率大約為75%,從240合成,總產(chǎn)率大約為51%)或2.6mg珊瑚素B(8)(從300合成,產(chǎn)率大約為75%,從240合成,總產(chǎn)率大約為44%)。樹脂250與反式—肉桂酰氯的反應(yīng)。為了按合成方案18所述合成肉桂酸酯310。向樹脂250(600mg,0.077mmol)的DMF(5.0ml)懸浮液中加入肉桂酰氯(128mg,0.77mmol,10當(dāng)量)、三乙胺(0.215ml,1.54mmol,20當(dāng)量)和4—DMAP(46.5mg,0.385mmol,5.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在50℃下加熱12小時(shí)。然后將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷(5×20ml)和乙醚(2×100ml)洗滌,然后在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)的甲醇溶液使酯從固體支持物上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。DCC—介導(dǎo)的樹脂250與噻唑酸側(cè)鏈Ar—Ⅱ的酯化反應(yīng)。為了按合成方案18所述合成噻唑酯310。向樹脂250(200mg,0.026mmol)的DMF(3.0ml)懸浮液中加入噻唑酸側(cè)鏈Ar—Ⅱ(合成方案5和6)(48mg,0.26mmol,10當(dāng)量)、DCC(52mg,0.26mmol,10當(dāng)量)和4—DMAP(6.3mg,0.052mmol,2.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在50℃下加熱48小時(shí)。然后將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷(5×20ml)和乙醚(2×100ml)洗滌,然后在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)的甲醇溶液使酯從固體支持物上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率為90—95%。醇250與異氰酸苯酯的反應(yīng)。為了按合成方案18所述合成氨基甲酸苯酯310。向樹脂250(500mg,0.064mmol,1.0當(dāng)量)的DMF(4.0ml)懸浮液中加入異氰酸苯酯(77mg,0.64mmol,10當(dāng)量)和4—DMAP(39mg,0.32mmol,5.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在腕式振蕩器上振蕩10小時(shí)。將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷(3×15ml)和乙醚(2×15ml)洗滌,然后在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)/甲醇使底物從樹脂上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。一般的去甲硅基方法。按合成方案18所述合成羥基樹脂310。在25℃下,將甲硅烷基化樹脂(1.0當(dāng)量)的THF懸浮液與TBAF(10當(dāng)量,1.0M的THF溶液)反應(yīng)6小時(shí)。然后將樹脂過濾,用含1%三乙胺的THF、二氯甲烷(含1%三乙胺)和乙醚洗滌,然后在高真空下干燥。在PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇的作用下使相應(yīng)的醇從樹脂上裂解之后,證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。羥基樹脂310官能化的一般方法。按合成方案18(A)所述合成化合物320。在25℃下,將樹脂310(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷懸浮液用三乙胺(10當(dāng)量)、4—DMAP(2.0當(dāng)量)和乙酸酐(10當(dāng)量)或苯甲酰氯(10當(dāng)量)或氯甲酸甲酯(10當(dāng)量)或異氰酸苯酯(10當(dāng)量)處理。15小時(shí)后,將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷和乙醚洗滌并在高真空下干燥。在PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇裂解之后,通過TLC分析所得到的產(chǎn)品,由此監(jiān)測反應(yīng)??梢娖椒€(wěn)地?;⒈郊柞;托纬砂被姿狨?>95%),其中形成碳酸酯的產(chǎn)率為70%,并形成兩種弱極性未經(jīng)確認(rèn)的副產(chǎn)品。固體支持的羥基樹脂310進(jìn)行Dess—Martin氧化的一般方法。按合成方案18(B)所述合成醛樹脂340。向羥基樹脂310(1.0當(dāng)量)的含吡啶(5.0當(dāng)量)二氯甲烷懸浮液中加入預(yù)先制成的Dess—Martin過碘烷(5.0當(dāng)量)、碳酸氫鈉(15當(dāng)量)和吡啶(10當(dāng)量)的二氯甲烷懸浮液。將該混合物在室溫下反應(yīng)2小時(shí)。然后將樹脂過濾,用二氯甲烷、水、甲醇、乙醚洗滌并后在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)和甲醇處理使產(chǎn)品裂解之后,通過TLC分析估計(jì)產(chǎn)率>95%。亞氯酸鈉氧化醛樹脂340的一般方法。按合成方案18(B)所述合成羧酸350。將醛樹脂340(1.0當(dāng)量)、亞氯酸鈉(25當(dāng)量)、磷酸二氫鉀(25當(dāng)量)和異丁烯(2M的THF溶液,50當(dāng)量)在THF∶t—BuOH∶H2O(4∶4∶1)中的混合物在室溫下反應(yīng)48小時(shí)。將所得到的樹脂過濾,用水、甲醇、0.5MPPTS的二氯甲烷溶液、二氯甲烷、乙醚洗滌并在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)的甲醇溶液使酸產(chǎn)品從樹脂上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。DCC/4—DMAP—介導(dǎo)形成酯或酰胺珊瑚素類似物360的一般方法。向按合成方案18(B)所述的樹脂350(1.0當(dāng)量)的DMF懸浮液中加入DCC(10當(dāng)量)、4—DMAP(5.0當(dāng)量)、醇或胺(10當(dāng)量,胺以HCl或PPTS鹽形式使用)并將反應(yīng)混合物在室溫下反應(yīng)20小時(shí)。將樹脂過濾,用二氯甲烷、甲醇和乙醚洗滌并在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)和甲醇處理使產(chǎn)品裂解之后,通過TLC分析估計(jì)產(chǎn)率>85%。Ph3P/DEAD—介導(dǎo)形成酯珊瑚素類似物360的一般方法,如合成方案18(B)所述。將樹脂350(1.0當(dāng)量)在含Ph3P(10當(dāng)量)和醇(10當(dāng)量)的THF中的懸浮液冷卻至0℃。然后滴加DEAD(10當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。12小時(shí)后,將樹脂過濾,用二氯甲烷和乙醚洗滌并在高真空下干燥。用CSA(約3當(dāng)量)的甲醇溶液使酯從樹脂上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>90%。按合成方案18(C)所述通過Mitsunobu反應(yīng)合成疊氮化物380的一般方法。將樹脂310(1.0當(dāng)量)在含Ph3P(10當(dāng)量)和(PhO)2P(O)N3(10當(dāng)量)的THF中的懸浮液冷卻至0℃并用DEAD(10當(dāng)量,滴加)處理。加完后,并將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。4小時(shí)后,將樹脂過濾,用二氯甲烷(含1%三乙胺)和乙醚洗滌并在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇使疊氮化物產(chǎn)品從固體支持物上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成。通過NMR分析證實(shí)產(chǎn)率>95%(見化合物560的光譜數(shù)據(jù))。Ph3P/H2O—介導(dǎo)還原疊氮化物380的一般方法。為了按合成方案18(C)所述合成酰胺390。將樹脂380(1.0當(dāng)量)在含Ph3P(10當(dāng)量)和水(50當(dāng)量)的THF中的懸浮液加熱至50℃并在該溫度下攪拌8小時(shí)。然后將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷和乙醚洗滌并在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇使胺產(chǎn)品從固體支持物上裂解之后,通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成,由此估計(jì)產(chǎn)率>95%。按合成方案18(C)所述合成酰胺390的一般方法。在25℃下,將與樹脂結(jié)合的胺(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷懸浮液用三乙胺(15當(dāng)量)和乙酸酐(10當(dāng)量)或在室溫下用苯甲酰氯(10當(dāng)量)處理10小時(shí)。然后將樹脂過濾,用含1%三乙胺的二氯甲烷和乙醚洗滌并在高真空下干燥。用PPTS(約3當(dāng)量)和甲醇處理使產(chǎn)品裂解之后,通過TLC分析估計(jì)產(chǎn)率>90%。用PPTS/ROH裂解的一般方法。按合成方案18所述合成珊瑚素類似物330和400。在25℃下,將樹脂320或390(1.0當(dāng)量)的ROH懸浮液用PPTS(3.0當(dāng)量)處理。15小時(shí)后。將反應(yīng)用固體碳酸氫鈉(10當(dāng)量)猝滅并過濾,用二氯甲烷和甲醇洗滌。將合并的濾液濃縮并將產(chǎn)品通過PTLC純化(60—90%,見補(bǔ)充材料中各化合物的精確總產(chǎn)率)。用CSA/H2O裂解的一般方法。按合成方案18(B)所述合成珊瑚素類似物370。在25℃下,將樹脂290或300(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷/水(2∶1)懸浮液用CSA(3.0當(dāng)量)處理。40小時(shí)后。將反應(yīng)用固體碳酸氫鈉(10當(dāng)量)猝滅并過濾,用二氯甲烷洗滌。收集所合并濾液的有機(jī)層,用硫酸鎂干燥,濃縮并將產(chǎn)品通過PTLC純化(60—90%,見補(bǔ)充材料中各化合物的精確總產(chǎn)率)。用CSA/ROH進(jìn)行縮酮轉(zhuǎn)移作用的一般方法。按合成方案18(C)所述合成珊瑚素類似物370。在25℃下,將樹脂360的ROH(0.5ml)懸浮液用CSA(3.0當(dāng)量)處理。15小時(shí)后。將樹脂用碳酸氫鈉(10當(dāng)量)猝滅、過濾并用二氯甲烷和甲醇洗滌。將合并的濾液濃縮并將產(chǎn)品通過PTLC純化(60—90%,見補(bǔ)充材料中各化合物的精確總產(chǎn)率)。按合成方案19所述制備吡啶羧酸Ar—Ⅰ向2—吡啶羧甲醛(2.0g,18.7mmol,1.0當(dāng)量)的苯(37ml)溶液中加入Ph3PCHCO2Me(9.36g,28.0mmol,1.5當(dāng)量),并將反應(yīng)混合物加熱回流2小時(shí)。證實(shí)反應(yīng)結(jié)束后(TLC),將溶劑減壓蒸發(fā)并將粗品通過閃式色譜層析(硅膠,乙醚—己烷,1∶1,Rf=0.26)純化,得到預(yù)期α,β—不飽和甲酯(2.9g,產(chǎn)率95%)。在室溫下,將所制備的甲酯(1.5g,9.2mmol,1.0當(dāng)量)在THF∶H2O(1∶1,30ml)中用LiOH·H2O(1.16g,27.6mmol,3.0當(dāng)量)處理3小時(shí),證實(shí)反應(yīng)結(jié)束(TLC)。將該反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×20ml)萃取,并將合并的水萃取液用1MHCl酸化至pH4并進(jìn)一步用乙酸乙酯(4×20ml)萃取。將合并的有機(jī)溶液濃縮,以定量產(chǎn)率得到基本純羧酸Ar—Ⅰ(1.4g,產(chǎn)率100%)。Rf=0.35(硅膠,乙酸乙酯);mp141—142℃(乙酸乙酯);FT—IR(純凈)vmax3434,3091,1700,1644,1595,1568,1464,1319,1224,1016,980cm—1。按合成方案19所述制備噻唑羧酸Ar—Ⅱ按照合成吡啶衍生物Ar—Ⅰ所描述的方法,將相應(yīng)的噻唑醛(2.0g,16mmol,1.0當(dāng)量)與Ph3PCHCO2Me(8.0g,24.0mmol,1.5當(dāng)量)在苯(32ml)中反應(yīng),在層析純化(硅膠,乙醚—己烷,3∶1)后,得到預(yù)期α,β—不飽和噻唑甲酯(2.8g,產(chǎn)率97%)。Rf=0.42(硅膠,乙醚—己烷,3∶1);FT—IR(純凈)vmax3095,3048,1707,1631,1431,1300,1275,1170,1125,980cm—1。如上吡啶酸Ar—Ⅰ中所描述的,通過在THF∶H2O(1∶1,7ml)中的LiOH·H2O(0.33g,8.19mmol,3.0當(dāng)量)的作用,將所制備的甲酯(0.50g,2.73mmol,1.0當(dāng)量)皂化,得到噻唑酸Ar—Ⅱ(0.46g,產(chǎn)率100%)的白色結(jié)晶固體。Rf=0.35(硅膠,乙酸乙酯);mp172—173℃(乙酸乙酯);FT—IR(純凈)vmax3413,2919,1690,1672,1625,1496,1414,1308,1273,1196,1137cm—1。按合成方案19所述制備噁唑羧酸Ar—Ⅲ按照合成吡啶衍生物Ar—Ⅰ所描述的方法,將相應(yīng)的噁唑醛(0.7g,6.3mmol,1.0當(dāng)量)與Ph3PCHCO2Me(3.16g,9.45mmol,1.5當(dāng)量)在苯(13ml)中反應(yīng),在層析純化(硅膠,乙酸乙酯)后,得到預(yù)期α,β—不飽和噁唑甲酯(2.7g,產(chǎn)率96%)。Rf=0.61(硅膠,乙酸乙酯);FT—IR(純凈)vmax3132,3088,1716,1646,1439,1388,1336,1298,1209,1166,976,916,866,814cm—1。如上吡啶羧酸Ar—Ⅰ中所描述的,通過在THF∶H2O(1∶1,15ml)中的LiOH·H2O(0.22g,5.4mmol,3.0當(dāng)量)的作用,將該酯(0.3g,1.80mmol,1.0當(dāng)量)皂化,以定量產(chǎn)率得到噻唑酸Ar—Ⅲ(0.28g,100%)的白色結(jié)晶固體。Rf=0.33(硅膠,乙酸乙酯);mp165—166℃(乙酸乙酯);FT—IR(純凈)vmax3085,2938,2546,1668,1636,1598,1566,1429,1404,1274,1219,1105,981,915,870,796,692,637cm—1。連接吡啶側(cè)鏈并脫甲硅基化。按合成方案19所述合成化合物420。在25℃下,向羥基化合物410(23.0mg,0.046mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(2.2ml)溶液中加入4—DMAP(2.8mg,0.023mmol,0.5當(dāng)量)、吡啶羧酸Ar—Ⅰ(10.2mg,0.068mmol,1.5當(dāng)量)和DCC(18.8mg,0.091mmol,2.0當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20小時(shí),然后濃縮。將粗品混合物通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4,Rf=0.28)純化,得到相應(yīng)的酯(24.5mg,85%)。如下將后一化合物脫甲硅基將甲硅烷基醚(24.5mg,0.083mmol,1.0當(dāng)量)的THF(1ml)溶液用TBAF(1.0M的THF溶液,77ml,2.0當(dāng)量)處理并將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時(shí)。減壓除掉溶劑并將粗品通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)純化,得到醇420(16.1mg,87%)。Rf=0.10(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1);[α]D25—13.75(c=0.8,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3410,2961,1713,1647,1583,1468,1434,1319,1160,1034,986,786,752cm—1。連接噻唑側(cè)鏈并脫甲硅基化。按合成方案19所述合成化合物430。按照上述化合物420中所描述的方法,在25℃下,向羥基化合物410(15mg,0.030mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1.8ml)溶液中加入4—DMAP(1.8mg,0.015mmol,0.5當(dāng)量)、噻唑羧酸Ar—Ⅱ(6.5mg,0.039mmol,1.3當(dāng)量)和DCC(11.3mg,0.055mmol,1.7當(dāng)量)。閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,l∶4)后,得到相應(yīng)的酯(12mg,產(chǎn)率61%)。將后一化合物(6.0mg,9.1mmol,1.0當(dāng)量)在THF(1ml)中用TBAF(1.0M的THF溶液,18ml,2.0當(dāng)量)脫甲硅基,閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2)后,得到醇430(5.5mg,100%)。Rf=0.18(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2);[α]D25+19.6(c=0.55,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3414,2961,1711,1636,1450,1270,1158,1038cm—1。連接噁唑側(cè)鏈并脫甲硅基化。按合成方案19所述合成化合物440。按照上述化合物420中所描述的方法,將醇410(21mg,0.042mmol,1.0當(dāng)量)用4—DMAP(2.5mg,0.020mmol,0.5當(dāng)量)、噁唑羧酸Ar—Ⅲ(8.4mg,0.055mmol,1.3當(dāng)量)和DCC(16.9mg,0.082mmol,2.0當(dāng)量)的二氯甲烷(2ml)溶液處理,層析純化(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4,Rf=0.43)后,得到所需要的酯(23mg,86%)。按照上述化合物420中所描述的方法,通過TBAF(1.0M的THF溶液,72ml,2.0當(dāng)量)的作用,將后一化合物(23mg,0.036mmol,1.0當(dāng)量)脫保護(hù),層析純化(閃式柱色譜層析,硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)后,得到醇440(16mg,92%)。Rf=0.21(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1);[α]D25+8.1(c=1.6,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3410,2961,2865,1712,1651,1451,1302,1258,1160,1106,1035,998cm—1。氧化醇440。按合成方案19所述合成醛470。向醇440(16mg,0.033mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(2.0ml)溶液中加入碳酸氫鈉(20mg,0.238mmol,大約7當(dāng)量)和Dess—Martin過碘烷(25mg,0.060mmol,大約2當(dāng)量)的二氯甲烷(1.5ml)溶液并將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌50分鐘,然后加入異丙醇(過量)和乙酸乙酯(2.0ml)。通過短的硅膠墊將沉淀過濾掉并將濾液濃縮和通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)純化,得到所需要的醛470(13.3mg,84%)。Rf=0.56(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1);[α]D25+85.0(c=1.3,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2962,1697,1650,1450,1301,1256,1160,1107cm—1。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物480按照上述合成化合物470中所描述的方法,將醇420(16.0mg,0.033mmol,1.0當(dāng)量)用碳酸氫鈉(26.6mg,0.334mmol,大約10當(dāng)量)和Dess—Martin過碘烷(35.4mg,0.083mmol,大約2.5當(dāng)量)的二氯甲烷(1.5ml)溶液處理,層析純化(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4,Rf=0.35)后,得到相應(yīng)的醛(7.0mg,44%)。在0℃下,在THF∶t—BuOH∶H2O(5∶5∶1,2.2ml)中,將所得到的醛450(7.0mg,0.015mmol,1.0當(dāng)量)用2—甲基—2—丁烯(2.0M的THF溶液,1.5ml)、磷酸二氫鈉(5.3mg,0.044mmol,大約3當(dāng)量)和NaClO2(8.0mg,0.088mmol,大約6當(dāng)量)處理。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí),然后加入CH2N2的乙醚溶液(過量)并在25℃下再連續(xù)攪拌10分鐘。通過氬氣流將過量的CH2N2除掉并將反應(yīng)混合物用乙醚(3×8ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品殘余物通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4)純化,得到珊瑚素類似物480(3.2mg,兩步總產(chǎn)率43%)。Rf=0.56(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1);[α]D25—37.14(c=0.07,CHCl3)。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物490。按照上述合成化合物470中所描述的方法,向醇430(5.0mg,0.010mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0ml)溶液中加入碳酸氫鈉(6.7mg,0.080mmol,8.0當(dāng)量)和Dess—Martin過碘烷(8.5mg,0.02mmol,2.0當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌30分鐘,閃式層析純化(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4,Rf=0.45)后,得到相應(yīng)的醛460(2.0mg,40%),該醛可直接用于下一步中。因此,在0℃下,在t—BuOH∶H2O(5∶1,0.6ml)中,將醛460(2.0mg,0.004mmol,1.0當(dāng)量)用2—甲基—2—丁烯(2.0M的THF溶液,0.5ml,1.0mmol)、磷酸二氫鈉(1.4mg,0.012mmol,3.0當(dāng)量)和NaClO2(2.2mg,0.024mmol,6.0當(dāng)量)處理。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí),然后加入CH2N2的乙醚溶液(過量)并在25℃下再連續(xù)攪拌10分鐘。通過氬氣流將過量的CH2N2除掉并將反應(yīng)混合物用乙醚(3×5ml)萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品殘余物通過閃式色譜層析(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4)純化,得到珊瑚素類似物490(1.5mg,兩步總產(chǎn)率71%)。Rf=0.45(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4);[α]D25—13.4(c=0.10,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2960,2360,2337,1714,1636,1436,1268,1157cm—1。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物500。按照上述合成化合物490中所描述的方法,在t—BuOH∶H2O(5∶1,1.2ml)中,將醛470(8.5mg,0.017mmol,1.0當(dāng)量)用2—甲基—2—丁烯(2.0M的THF溶液,1.0ml)、磷酸二氫鈉(6.3mg,0.053mmol,大約3當(dāng)量)和NaClO2(9.6mg,0.106mmol,大約6當(dāng)量)處理。在二偶氮基乙烷處理和層析純化(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2)后,得到珊瑚素類似物500(8.0mg,兩步總產(chǎn)率87%)。Rf=0.35(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2);[α]D25+3.6(c=0.8,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2963,1713,1650,1449,1301,1250,1158,1049cm—1。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物520用DAST[(二乙基氨基)硫三氟化物](1.3ml,0.010mmol,約2當(dāng)量)處理—78℃溫度下的醇510(2.mg,0.0052mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0ml)溶液并在該溫度下攪拌3小時(shí)。通過加入固體碳酸氫鈉(30mg)使反應(yīng)混合物猝滅,溫?zé)岬?5℃,濃縮并通過閃式色譜層析純化(硅膠,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇,10∶10∶1);Rf=0.31(硅膠,乙酸乙酯∶二氯甲烷∶甲醇,10∶10∶1);[α]D25—32.4(c=0.25,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2961,1762,1637,1451,1384,1269,1156,1037,980cm—1。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物530在醇410(5.0mg,0.01mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0ml)溶液中加入乙酸酐(5.0mg,0.052mmol,5.2當(dāng)量),三乙胺(10ml,0.07mmol,6.8當(dāng)量)和4—DMAP(2.0mg,0.016mmol,1.6當(dāng)量)并在室溫下將混合物攪拌2小時(shí)。確證(TLC)反應(yīng)完成后,用飽和碳酸氫鈉溶液(2×2ml)猝滅,減壓下除去溶劑并閃式色譜層析進(jìn)行純化(硅膠,乙酸乙酯)定量產(chǎn)生珊瑚素類似物530(5.2mg,100%)。Rf=0.4l(硅膠,乙酸乙酯);[α]D25—16.2(c=0.55,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2961,1737,1704,1638,1450,1381,1233,1155,1039cm—1。按合成方案19所述制備珊瑚素類似物540在室溫?cái)嚢柘碌目s酮530(5.2mg,0.01mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷∶水(10∶1)溶液中加入催化量的CSA(10%mol)并將攪拌繼續(xù)72小時(shí)。通過TLC確證反應(yīng)完成后(40小時(shí)),用固體碳酸氫鈉使反應(yīng)中止,過濾并色譜層析純化(硅膠,乙酸乙酯),獲得珊瑚素類似物540(5.1mg,95%)。Rf=0.37(硅膠,乙酸乙酯);[α]D25—28.9(c=0.35,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3348,2962,1737,1704,1638,1233,1155cm—1。按合成方案22所述合成苯基硫代糖苷1200在0℃溫度下的NaH(60%,在礦物油中,0.408g,10.2mmol,1.2當(dāng)量)DMF(20ml)溶液中加入1100(2.55g,8.67mmol,1.0當(dāng)量;Nicolaou等人,四面體,1997,53,8751—8778;Lindle,T.Angew.Chem.Iht.Ed.1998,110,806—808)的DMF(30.0ml)溶液中并將混合物在0℃溫度下攪拌30分鐘,此后,加入PMB—Cl(1.6ml,11.0mmol,1.1當(dāng)量)。然后在室溫下將反應(yīng)物攪拌2小時(shí)并加入飽和氯化銨(10ml)使反應(yīng)停止,用乙醚(3×50ml)萃取,硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(硅膠,20%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生丙酮化合物1200(3.26g,93%)。Rf=0.64(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2);[α]D+40.4(c=1.0,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2986,2934,1612,1514,1379,1243,1074,833,745cm—1。按合成方案22所述合成苯基硫代糖苷二醇1300將丙酮化合物1200(3.26g,8.11mmol,1.0當(dāng)量)的甲醇(100ml)溶液加到乙二醇(10ml)中。然后,將溶液冷卻到0℃,加入TsOH·H2O(150mg,0.80mmol,0.1當(dāng)量)并將反應(yīng)物溫?zé)岬?5℃,攪拌5小時(shí)。反應(yīng)完成后(TLC分析),加入三乙胺(1.0ml),然后加入飽和的碳酸氫鈉溶液(30.0ml)。用乙酸乙酯(3×200ml)萃取反應(yīng)混合物,用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物并用硫酸鈉干燥。濃縮后,通過閃式色譜層析純化產(chǎn)物(硅膠,乙酸乙酯—己烷,3∶2)產(chǎn)生二醇1300(2.47g,84%)。Rf=0.54(硅膠,乙酸乙酯—己烷,2∶1);[α]D—25.9(c=1.0,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3369,2908,1613,1514,1249,1079,822cm—1。按合成方案22所述合成苯基硫代糖苷二—TBS醚1400在0℃溫度下的二醇1300(1.26g,3.48mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入三乙胺(4.7ml,33.5mmol,9.6當(dāng)量),然后加入TBS—OTf(3.1ml,13.5mmol,3.9當(dāng)量),在該溫度下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。完成后(TLC分析),加入水(5ml)使反應(yīng)物猝滅并用二氯甲烷(2×50ml)萃取。鹽水洗滌合并的萃取物,硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗殘余物(硅膠,乙醚—己烷,1∶30)產(chǎn)生甲硅烷基醚1400(2.00g,97%)。Rf=0.60(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶5);[α]D—40.42(c=1.0,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2930,2856,1612,1514,1472,1253,1109,840cm—1。按合成方案22所述合成二—TBS醚縮醛1500在0℃溫度的1400(1.66g,2.81mmol)的含水丙酮(93%丙酮,7%水)(40ml)溶液中加入N—溴代琥珀酰亞胺(3.3當(dāng)量,1.65g,9.27mmol),然后加入吡啶(11當(dāng)量,30.9mmol,2.5ml)。所得溶液在0℃下攪拌4小時(shí)并通過加入飽和亞硫酸鈉溶液猝滅。用乙醚(3×5ml)萃取反應(yīng)混合物,鹽水洗滌有機(jī)萃取物并在濃縮前用硫酸鈉干燥。通過閃式色譜層析純化粗殘余物(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生1500(1.12g,80%,為約2∶1的兩種端基異構(gòu)體混合物)。Rf=0.37,0.46(硅膠,乙醚—己烷,1∶1);FT—IR(純凈)3456,2930,2857,1513,1469,1253,1096,1034,836cm—1。按合成方案22所述合成三氯亞氨代乙酸酯900在0℃的端基異構(gòu)混合物1500(0.218g,437mmol)和CCl3CN(0.220ml,2.20mmol,5.0當(dāng)量)的二氯甲烷(5.0ml)溶液中加入NaH(0.002g,41.7mmol,0.1當(dāng)量)并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3.5小時(shí)(TLC分析),此后,將其濃縮并通過閃式色譜層析純化殘余物(硅膠,33%乙酸乙酯/己烷,含有2%三乙胺)產(chǎn)生900(0.261g,93%)。Rf=0.76(硅膠,乙醚—己烷,1∶3);[α]D—69.7(c=1.0,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3348,2930,2857,1670,1514,1252,1113,1006,837cm—1。按合成方案23所述合成烯炔酮1600在—30℃下,將LiHDMS的溶液(1.0M的THF溶液,0.150ml,0.150mmol,2.0當(dāng)量)滴加到35(77.5mg,0.0742mmol,1.0當(dāng)量)的THF(4.0ml)溶液中并將該反應(yīng)物在—30℃下攪拌10分鐘。通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成后,加入飽和氯化銨溶液(5ml)并將所得到的兩相混合物用乙醚(3×30ml)萃取。將合并的萃取液用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過短柱色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化。然后將純化的異構(gòu)體混合物立即用于下一步中。在0℃下,向該混合物的二氯甲烷(4.0ml)溶液中加入碳酸氫鈉(62.3mg,0.742mmol,10.0當(dāng)量)和吡啶(60ml,0.742mmol,10.0當(dāng)量),將所得到的溶液冷卻至0℃并攪拌10分鐘。加入Dess—Martin試劑(63.0mg,0.149mmol,2.0當(dāng)量),并將該反應(yīng)物在0℃下再攪拌15分鐘。通過TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成后,通過加入飽和Na2S2O3(2ml)將其猝滅。將該混合物用二氯甲烷(3×30ml)萃取,將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過短柱色譜層析(硅膠,5%乙酸乙酯/己烷)純化,得到1600(72.0mg,兩步總產(chǎn)率為93%)。Rf=0.80(硅膠,乙醚—己烷,1∶3);[α]D—11.5(c=0.46,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2954,2878,1663,1512,1462,1250,1115,1037,1004,834,777,741cm—1。按合成方案22所述合成烯炔酮醇1700在0℃下,向PMB—醚1600(202mg,0.194mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(7.0ml)溶液中加入DDQ(98.0mg,0.432mmol,2.3當(dāng)量)并將所得到的溶液溫?zé)嶂?5℃并攪拌20分鐘。TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成后,通過加入飽和Na2S2O3溶液(2ml)和碳酸氫鈉溶液(2.0ml)將其猝滅。將該混合物用二氯甲烷(3×40ml)萃取,將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過短柱色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化,得到醇1700(163mg,93%)。Rf=0.6(硅膠,乙醚—己烷,1∶5);[α]D—0.167(c=1.6,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2955,2929,2203,1663,1462,1336,1252,1214,1118,1076,1004,835,740cm—1。按合成方案23所述合成烯炔酮乙酸酯1800在0℃下,向醇1700(163mg,0.177mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(5.0ml)溶液中加入三乙胺(400ml,2.86mmol,16.1當(dāng)量)、4—DMAP(10.0mg,0.0818mmol,0.46當(dāng)量)和乙酸酐(0.2ml,2.12mmol,12.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)物溫?zé)嶂?5℃并攪拌l小時(shí)。TLC分析證實(shí)反應(yīng)完成后,通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(2.0ml)將反應(yīng)物猝滅。將該混合物用二氯甲烷(3×40ml)萃取,將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,10%乙酸乙酯/己烷)純化,得到乙酸酯1800(162mg,95%)。Rf=0.57(硅膠,乙醚—己烷,1∶5);[α]D—0.34(c=1.4,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2956,1746,1661,1461,1371,1237,1119,1004cm—1。按合成方案23所述合成烯炔酮二醇1900在0℃下,向甲硅烷基醚1800(161mg,0.167mmol,1.0當(dāng)量)的THF(4.2ml)溶液中加入三乙胺·3HF(0.6ml,3.68mmol,22.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃并攪拌4小時(shí)。反應(yīng)完成(TLC分析)后,通過在0℃下加入飽和碳酸氫鈉溶液(2.0ml)將反應(yīng)物猝滅。將該兩相混合物用乙醚(3×40ml)萃取,將合并的萃取液用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,50%乙酸乙酯/己烷)純化,得到二醇1900(100mg,81%)。Rf=0.40(硅膠,乙醚—己烷,3∶1);[α]D—53.5(c=0.85,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3410,2929,2856,1744,1652,1370,1254,1123,1063,1037,837,777cm—1。按合成方案23所述合成三環(huán)核心化合物2200。將烯炔酮1900(103mg,0.140mmol,1.0當(dāng)量)和Lindlar催化劑(148mg,0.069mmol,0.5當(dāng)量)的非均相混合物用氫(1atm)處理,并將反應(yīng)物在25℃下攪拌20分鐘。然后將反應(yīng)混合物通過硅藻土墊過濾,用乙醚洗脫并濃縮,得到不必進(jìn)一步純化即可使用的粗品殘余物。將該殘余物溶解在甲醇(4.0ml)中,加入PPTS(7.0mg,0.028mmol,0.2當(dāng)量),并將該反應(yīng)混合物在25℃下攪拌20分鐘。反應(yīng)完成(TLC監(jiān)測)后,通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(2.0ml)將反應(yīng)物猝滅。然后將反應(yīng)混合物用乙醚(3×20ml)萃取,將合并的萃取液用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,50%乙酸乙酯/己烷)純化,得到甲基縮酮2200(80.1mg,76%)。Rf=0.74(硅膠,乙醚—己烷,3∶1);[α]D—38.61(c=0.65,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax3448,2929,2856,1748,1254,1144,1038,837,775cm—1。按合成方案23所述合成五加苷素雙—TBS醚2300。向醇2200(64mg,0.0871mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(0.4ml)溶液中加入三乙胺(0.177ml,1.27mmol,15.0當(dāng)量)和4—DMAP(21mg,0.0017mmol,0.02當(dāng)量)。將該溶液冷卻至0℃并加入0.2M混合酸酐2400的二氯甲烷溶液(4.2ml,0.84mmol,9.6當(dāng)量,如上實(shí)施例2中所述)。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂?5℃并攪拌18小時(shí)。證實(shí)(TLC分析)反應(yīng)完成后,通過加入飽和碳酸氫鈉溶液將反應(yīng)物猝滅并用二氯甲烷(3×20ml)萃取。將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,67%乙酸乙酯/己烷)純化,得到尿刊酸的酯2300(73.0mg,97%)。Rf=0.35(硅膠,乙醚—己烷,1∶3);[α]D—61.3(c=0.6,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2929,2856,2362,2338,1746,1707,1639,1468,1367,1296,1253,1150,1062,1038,1001,886,837,775cm—1。按合成方案23所述合成五加苷素(4)。在0℃下,向二甲硅烷基醚2300(15.5mg,0.017mmol,1.0當(dāng)量)的THF(0.4ml)溶液中加入乙酸(1.0M的THF溶液,0.070ml,0.070mmol,4.1當(dāng)量)和TBAF(1.0M的THF溶液,0.30ml,0.30mmol,17.6當(dāng)量)。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂?5℃并攪拌2.5小時(shí)。然后加入水(1.0ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(1.0ml)并將該混合物用二氯甲烷(3×20ml)萃取。將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,含1%三乙胺的2%甲醇/二氯甲烷)純化,得到五加苷素4(11.0mg,96%)。Rf=0.22(硅膠,甲醇∶二氯甲烷,1∶20);[α]D—67(c=0.15,甲醇);FT—IR(純凈)vmax3386,2933,2851,1735,1708,1637,1247,1162,1039,998cm—1。按合成方案24所述合成β—糖苷2500。將醇7000(20.0mg,0.0355mmol,1.0當(dāng)量)和亞氨酸酯9000(62.1mg,0.0966mmol,2.7當(dāng)量)在2∶1二噁烷∶甲苯(6.0ml)中的溶液冷卻至0℃,加入TMSOTf(0.05M的乙醚溶液,40ml,0.002mmol,0.05當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在0℃下并攪拌10分鐘,然后加入三乙胺(20ml)和碳酸氫鈉溶液(3ml)。然后將反應(yīng)混合物用乙醚(3×20ml)萃取,并將合并的萃取液用鹽水洗滌,用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,3%乙酸乙酯/己烷)純化,得到2500(27.9mg,75%)。Rf=0.56(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶5);[α]D—27.7(c=1.0,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2954,1676,1612,1512,1461,1364,1250,1114,1038,835,740cm—1。按合成方案24所述合成五加苷素的α—端基異構(gòu)體(2700)。按照合成方案23所描述的反應(yīng)步驟,從化合物2600開始構(gòu)建五加苷素(4)的α—端基異構(gòu)體。Rf=0.1(硅膠,甲醇∶二氯甲烷,1∶20)。按合成方案26(A)所述合成雙—乙酰氧基五加苷素(2800)和EleuthosideA和B的甲基—縮酮前體(2900+3000)。在0℃下,向天然五加苷素(4)(10.0mg,0.015mmol,1.0當(dāng)量)、三乙胺(6.0ml,0.043mmol,3.0當(dāng)量)和4—DMAP(0.40mg,0.0033mmol,0.2當(dāng)量)的二氯甲烷(0.6ml)溶液中加入乙酸酐(1.0M的二氯甲烷溶液,0.017ml,0.017mmol,1.1當(dāng)量),并將該反應(yīng)混合物在相同的溫度下攪拌1小時(shí)。然后通過加飽和碳酸氫鈉溶液(0.50ml)將反應(yīng)混合物猝滅并用二氯甲烷(5×20ml)萃取。將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,2%甲醇/二氯甲烷)純化,得到三乙酸酯2800(1.8mg,16%)和不可分離的eleuthosides2900和3000的混合物(7.8mg,73%)并回收到1(0.5mg,5%)。2800。Rf=0.44(硅膠,甲醇∶二氯甲烷,1∶20);[α]D—67.3(c=1.2,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2962,1746,1644,1634,1372,1226,1156,1068,759,668,617cm—1。按合成方案26(A)所述合成eleuthosideA和B(5+6)。在25℃下,向2700和2800混合物(7.8mg,0.011mmol,1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(2.0ml)和水(0.20ml)溶液中加入CSA(5.2mg,0.022mmol,2.0當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在相同的溫度下攪拌48小時(shí)。反應(yīng)完成(TLC監(jiān)測)后,通過加飽和碳酸氫鈉溶液(0.50ml)將反應(yīng)物猝滅并用二氯甲烷(5×20ml)萃取。將合并的萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮,得到粗品殘余物,將其通過閃式色譜層析(硅膠,3%甲醇的二氯甲烷溶液)純化,得到不可分離的eleuthosideA(5)和B(6)的混合物(5.3mg,80%)。5和6混合物的數(shù)據(jù)5和6混合物的Rf=0.32(硅膠,甲醇∶二氯甲烷,1∶20);FT—IR(純凈)vmax3734,3628,2962,2928,2866,1734,1700,1684,1652,1646,1636,1558,1456,1374,1252,1160,1065,1037,986,884,874cm—1。合成區(qū)域異構(gòu)體(regioisomeric)五加苷素(3100)和脫乙酰基(deaceto)五加苷素(3200)(合成方案26(B))。向二甲硅烷基醚2300(5.4mg,6.1mmol)的THF(350ml)溶液中加入TBAF(1.0M的THF溶液,20ml,20mmol,3.3當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。反應(yīng)完成(TLC分析)后,將粗品殘余物立即通過柱色譜層析(用2—10%甲醇的二氯甲烷溶液作為洗脫劑,逐漸增加洗脫劑的量)純化,得到五加苷素4(22%),副產(chǎn)品(migrationproduct)3100(60%)和三醇3200(8%)。3100.Rf=0.28(硅膠,×2,甲醇∶二氯甲烷,1∶20);FT—IR(純凈)vmax3355,2964,2925,1704,1638,1260,1070,800cm—1。如合成方案20和表2所示關(guān)鍵化合物的選定數(shù)據(jù)化合物550在制備型TLC純化后分離得到2.8mg(從24開始總產(chǎn)率為79%)。Rf=0.68(硅膠,乙酸乙酯);[α]D25—21.5(c=0.20,CHCl3);Rf=0.15(硅膠,乙酸乙酯—己烷,l∶3);FT—IR(純凈)max2961,1711,1637,1451,1271,1154,1068,1037,980,715cm—1?;衔?60在制備型TLC純化后分離得到2.4mg(從24開始總產(chǎn)率為64%)。Rf=0.56(硅膠,乙酸乙酯—己烷,4∶1);[α]D25—43.8(c=0.5,CHCl3);FT—IR(純凈)vmax2962,2104,1703,1639,1450,1270,1156cm—1?;衔?70在制備型TLC純化后分離得到1.5mg(從24開始總產(chǎn)率為41%)。Rf=0.52(硅膠,乙酸乙酯);FT—IR(純凈)vmax3333,2961,1709,1639,1543,1445,1315,1220,1160,1048cm—1。化合物580在制備型TLC純化后分離得到3.9mg(從24開始總產(chǎn)率為71%)。Rf=0.32(硅膠,3%甲醇/二氯甲烷)?;衔?90在制備型TLC純化后分離得到2.2mg(從24開始總產(chǎn)率為59%)?;衔?20在制備型TLC純化后分離得到2.3mg(從24開始總產(chǎn)率為64%)。Rf=0.41(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?30在制備型TLC純化后分離得到0.7mg(從24開始總產(chǎn)率為20%)。Rf=0.42(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?40在制備型TLC純化后分離得到1.9mg(從24開始總產(chǎn)率為55%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?50在制備型TLC純化后分離得到0.5mg(從24開始總產(chǎn)率為14%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?60在制備型TLC純化后分離得到1.8mg(從24開始總產(chǎn)率為46%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?70在制備型TLC純化后分離得到2.0mg(從24開始總產(chǎn)率為58%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?80在制備型TLC純化后分離得到2.0mg(從24開始總產(chǎn)率為61%)。Rf=0.44(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?90在制備型TLC純化后分離得到2.1mg(從24開始總產(chǎn)率為54%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?00在制備型TLC純化后分離得到2.3mg(從24開始總產(chǎn)率為69%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?10在制備型TLC純化后分離得到0.7mg(從24開始總產(chǎn)率為42%)。Rf=0.62(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?30在制備型TLC純化后分離得到2.0mg(從24開始總產(chǎn)率為61%)。Rf=0.39(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?40在制備型TLC純化后分離得到1.9mg(從24開始總產(chǎn)率為56%)。Rf=0.38(硅膠,3%甲醇/二氯甲烷)?;衔?50在制備型TLC純化后分離得到1.6mg(從24開始總產(chǎn)率為55%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?60在制備型TLC純化后分離得到2.9mg(從24開始總產(chǎn)率為62%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?70在制備型TLC純化后分離得到1.1mg(從24開始總產(chǎn)率為56%)。Rf=0.51(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?90在制備型TLC純化后分離得到1.3mg(從24開始總產(chǎn)率為33%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?00在制備型TLC純化后分離得到1.0mg(從24開始總產(chǎn)率為26%)。Rf=0.38(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?10在制備型TLC純化后分離得到1.3mg(從24開始總產(chǎn)率為34%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)。化合物820在制備型TLC純化后分離得到1.1mg(從24開始總產(chǎn)率為28%)。Rf=0.45(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?30在制備型TLC純化后分離得到1.1mg(從24開始總產(chǎn)率為28%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?40在制備型TLC純化后分離得到1.2mg(從24開始總產(chǎn)率為32%)。Rf=0.39(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?50在制備型TLC純化后分離得到2.2mg(從24開始總產(chǎn)率為69%)。Rf=0.32(硅膠,3%甲醇/二氯甲烷);[α]D25—1.9(c=0.21,乙醇);FT—IR(純凈)max2960,1712,1637,1435,1385,1299,1269,1245,1155,1050cm—1?;衔?60在制備型TLC純化后分離得到2.0mg(從24開始總產(chǎn)率為50%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?70在制備型TLC純化后分離得到0.8mg(從24開始總產(chǎn)率為46%)。Rf=0.74(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?80在制備型TLC純化后分離得到2.1mg(從24開始總產(chǎn)率為54%)。Rf=0.42(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?90在制備型TLC純化后分離得到1.8mg(從24開始總產(chǎn)率為45%)。Rf=0.43(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?00在制備型TLC純化后分離得到1.3mg(從24開始總產(chǎn)率為32%)。Rf=0.40(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?10在制備型TLC純化后分離得到1.0mg(從24開始總產(chǎn)率為25%)。Rf=0.42(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?20在制備型TLC純化后分離得到1.7mg(從24開始總產(chǎn)率為40%)。Rf=0.38(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?30在制備型TLC純化后分離得到1.0mg(從24開始總產(chǎn)率為23%)。Rf=0.41(硅膠,乙酸乙酯)?;衔?40在制備型TLC純化后分離得到0.5mg(從24開始總產(chǎn)率為17%)。Rf=0.74(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?50在制備型TLC純化后分離得到0.5mg(從24開始總產(chǎn)率為20%)。Rf=0.11(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?60在制備型TLC純化后分離得到1.7mg(從24開始總產(chǎn)率為62%)。Rf=0.46(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?70在制備型TLC純化后分離得到2.2mg(從24開始總產(chǎn)率為68%)。Rf=0.31(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)?;衔?80在制備型TLC純化后分離得到1.6mg(從24開始總產(chǎn)率為51%)。Rf=0.28(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶2);Rf=0.31(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?90在制備型TLC純化后分離得到2.2mg(從24開始總產(chǎn)率為68%)。Rf=0.50(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?000在制備型TLC純化后分離得到1.5mg(從24開始總產(chǎn)率為40%)。Rf=0.38(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶3)?;衔?010在制備型TLC純化后分離得到0.7mg(從24開始總產(chǎn)率為28%)。Rf=0.52(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)?;衔?020在制備型TLC純化后分離得到0.5mg(從24開始總產(chǎn)率為20%)。Rf=0.32(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)。化合物1030在制備型TLC純化后分離得到1.5mg(從24開始總產(chǎn)率為42%)。Rf=0.35(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)?;衔?040在制備型TLC純化后分離得到0.5mg(從24開始總產(chǎn)率為17%)。Rf=0.51(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)?;衔?050在制備型TLC純化后分離得到1.9mg(從24開始總產(chǎn)率為60%)。Rf=0.31(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)?;衔?060在制備型TLC純化后分離得到2.2mg(從24開始總產(chǎn)率為57%)。Rf=0.31(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶1)。化合物1070在制備型TLC純化后分離得到1.8mg(從24開始總產(chǎn)率為68%)。Rf=0.39(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4);[α]D25—2.1(c=0.10,CHCl3);FT—IR(純凈)max2960,1739,1719,1436,1370,1236,1049cm—1?;衔?080在制備型TLC純化后分離得到2.6mg(從24開始總產(chǎn)率為79%)。Rf=0.28(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4)?;衔?090在制備型TLC純化后分離得到1.7mg(從24開始總產(chǎn)率為61%)。Rf=0.44(硅膠,乙酸乙酯—己烷,1∶4)。1600的α—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+38.0(c0.40,CHCl3);FT—IR(純凈)max2955,2879,2205,1736,1653,1613,1513,1461,1366,1250,1049,1037,1004,835,777,740cm—1。1700的α—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+36.6(c0.80,CHCl3);FT—IR(純凈)max3471,2955,2879,2206,1653,1600,1461,1255,1159,1114,1091,1027,1004,834,777,740cm—1。1800的α—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+56.7(c0.76,CHCl3);FT—IR(純凈)max2956,2878,2206,1757,1659,1465,1368,1231,1116,1004,836,778,740cm—1。1900的β—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+42.8(c0.46,CHCl3);FT—IR(純凈)max3440,2957,2930,2856,2205,1739,1652,1468,1368,1254,1230,1168,1091,1057,1037,836,778cm—1。2200的β—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+47.1(c0.95,CHCl3);FT—IR(純凈)max3427,2957,2930,2856,1747,1469,1366,1254,1233,1096,1056,1038,837,777cm—1。23的β—端基異構(gòu)體的數(shù)據(jù)[α]D+23.1(c1.1,CHCl3);FT—IR(純凈)max2956,2929,2856,1748,1705,1639,1439,1468,1367,1253,1154,1095,1037,836,776cm—1。合成方案27五加苷素核中間體15111的一般合成。PG1=保護(hù)基(三—低級烷基甲硅烷基);R3=低級烷基2111將3N氫氧化鈉(0.15當(dāng)量)溶液緩慢加到0℃溫度下的S—(+)—香芹酮(1.0當(dāng)量,0.7M)的甲醇溶液中,并在3小時(shí)內(nèi)滴加35%過氧化氫溶液(1.3當(dāng)量)。通過加入飽和亞硫酸鈉溶液使反應(yīng)混合物猝滅并用二氯甲烷萃取。硫酸鈉干燥萃取物并濃縮以產(chǎn)生環(huán)氧化物(92%)。3111在室溫下,用H2處理2111(1.0當(dāng)量,1.3M)和PtO2(0.5%)的乙醇溶液6小時(shí)。然后經(jīng)Celite_墊過濾反應(yīng)混合物并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,5%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生3111(95%)。4111通過將1.6MBuLi的己烷溶液(1.1當(dāng)量)加到—78℃的二異丙基胺(1.2當(dāng)量)的THF溶液中產(chǎn)生LDA溶液。然后將溶液溫?zé)岬?℃并攪拌30分鐘,此后,在—78℃和1.5小時(shí)內(nèi)經(jīng)套管滴加3111(1.0當(dāng)量,1.0M)的THF溶液。將所得溶液攪拌30分鐘。通過在140℃下裂開多聚甲醛(10.0當(dāng)量)并在45分鐘內(nèi)使所得氣體冒泡經(jīng)過—78℃下的THF來制備甲醛溶液。然后在—78℃溫度下和1小時(shí)內(nèi)經(jīng)套管將甲醛溶液加到烯醇鹽溶液中。通過加入飽和氯化銨溶液使反應(yīng)物猝滅,允許溫?zé)岬绞覝?,并用乙醚萃取。硫酸鈉干燥萃取物并濃縮。通過閃式色譜層析純化脆產(chǎn)品(二氧化硅,10%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生4111(63%)。5111在溫度為0℃的4111(1.0當(dāng)量,0.25M),三乙胺(6.0當(dāng)量)和DMAP(0.05當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.0當(dāng)量)。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)并通過加入水使之猝滅。分出有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,3%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生5111(84%)。6111在溫度為—78℃的5111(1.0當(dāng)量,0.2M)的THF溶液中通過套管在1.5小時(shí)內(nèi)加入1.0ML—selectride的THF溶液(1.2當(dāng)量)。再攪拌反應(yīng)混合物30分鐘并通過加入飽和氯化銨溶液使之猝滅并允許其溫?zé)岬?℃。然后加入過量的35%過氧化氫溶液并在0℃下攪拌混合物1小時(shí)。用乙酸乙酯萃取反應(yīng)混合物,用硫酸鈉干燥萃取物并濃縮。閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,5%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生6111(100%)。7111在1小時(shí)內(nèi),將甲磺酰氯(1.2當(dāng)量)滴加到0℃溫度下的6111(1.0當(dāng)量,0.4M)和三乙胺(2.5當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中。在0℃溫度下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí),通過加入鹽水使之猝滅并用乙酸乙酯萃取。硫酸鈉干燥合并的萃取物并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,10%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生7111(91%)。8111通過將金屬鈉(5.0當(dāng)量)加到萘(5.0當(dāng)量)的THF溶液中并將混合物攪拌2小時(shí)來制備0.4M的NaC10H8溶液。然后在0℃溫度下經(jīng)套管滴加7111(1.0當(dāng)量,0.2M)的THF溶液。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘并通過加入飽和氯化銨溶液使之猝滅。將反應(yīng)物傾入鹽水中并用乙酸乙酯萃取。用硫酸鈉干燥萃取物并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,10%EtO2/己烷,然后10%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生8111(96%)。9111將8111(1.0當(dāng)量,0.1M),原乙酸三乙基酯(40.0當(dāng)量)和丙酸(0.1當(dāng)量)在170℃溫度下加熱4天。通過真空蒸餾除去過量的原乙酸三乙基酯,并且通過閃式色譜層析純化剩余的殘余物(二氧化硅,3%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生酯9111(74%)。10111將1.0M二異丁基氫化鋁(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液逐漸加入—78℃溫度下的乙基酯9111(1.0當(dāng)量,0.2M)的二氯甲烷溶液中并將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。通過加入飽和氯化銨溶液使反應(yīng)混合物猝滅并在室溫下攪拌2小時(shí)。分出有機(jī)層,用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,5%乙酸乙酯/己烷)獲得醛10111(92%)。11111在溫度為—78℃的乙基乙烯基醚(1.0當(dāng)量,0.4M)的THF溶液中加入1.7M叔丁基鋰的己烷溶液(1.8當(dāng)量),并將溶液溫?zé)岬?℃,此時(shí)溶液顏色從黃色變?yōu)闊o色。然后將溶液冷卻到—78℃并滴加10111(1.0當(dāng)量)的THF溶液,此后將反應(yīng)混合物在—78℃溫度下再攪拌30分鐘。通過加入飽和氯化銨溶液使反應(yīng)物猝滅并用乙醚萃取。硫酸鎂干燥萃取物并濃縮。然后將粗產(chǎn)品溶解在乙醚中并在劇烈振搖下用濃硫酸處理。用水和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌乙醚溶液,硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,10%—15%乙醚/己烷)獲得11111(98%)。12111在溫度為—78℃的11111(1.0當(dāng)量,0.1M)的THF溶液中加入0.5M乙炔基溴化鎂(4.5當(dāng)量)并在—78℃的溫度下將反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí),同時(shí)緩慢溫?zé)岬健?0℃。通過加入飽和氯化銨溶液使反應(yīng)混合物猝滅并用乙醚萃取。萃取液用硫酸鎂干燥并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,10%—25%乙醚/己烷)產(chǎn)生所需的12111(56%)。13111在溫度為0℃的12111(1.0當(dāng)量,0.1M)的THF溶液中加入1MTBAF(2.0當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?5℃。通過加入飽和氯化銨使反應(yīng)物猝滅并用乙醚萃取。濃縮萃取物并經(jīng)硅膠過濾純化殘余物而獲得13111(100%)。14111在13111(1.0當(dāng)量,0.1M)的二氯甲烷溶液中加入2,6—二甲基吡啶(6.0當(dāng)量)并將溶液冷卻到0℃。然后加入一部分三烷基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(trialkylsilyltriflate)(如,叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯)(3.0當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?5℃。通過加入飽和氯化銨使反應(yīng)物猝滅并用二氯甲烷萃取。硫酸鎂干燥萃取物并濃縮。經(jīng)二氧化硅(25%乙醚/己烷)過濾純化殘余物而獲得14111(100%)。15111在14111(1.0當(dāng)量,0.1M)的甲醇溶液中加入催化量的PPTS(0.1當(dāng)量)。通過加入飽和碳酸氫鈉處理反應(yīng)混合物并用乙醚萃取。用硫酸鎂干燥萃取物并濃縮。經(jīng)硅膠過濾純化殘余物而獲得15111(98%)。合成方案28五加苷素核24111的一般合成,PG=保護(hù)基16111.在醇15111(1.0當(dāng)量,0.1M)和活化4_分子篩的二氯甲烷溶液中加入NMO(1.5當(dāng)量)并將該反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。然后將TPAP(0.05當(dāng)量)加到該反應(yīng)混合物中,并在室溫下攪拌。將反應(yīng)混合物通過硅膠過濾并用二氯甲烷洗滌。濃縮后獲得醛15111(98%)。17111.將醛16111(1.0當(dāng)量,0.2M)、氰基乙酸乙酯(40.0當(dāng)量)和α—丙氨酸(4.0當(dāng)量)的乙醇溶液在50℃下攪拌72小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物濃縮并通過硅膠(10%乙醚/己烷)過濾純化,獲得17111(95%)。18111.在—78℃下,在氰基酯17111(1.0當(dāng)量,0.6M)的己烷溶液中加入1MDIBAL的甲苯溶液(10.0當(dāng)量)。將該反應(yīng)混合物在—78℃下攪拌6小時(shí),然后緩慢地溫?zé)嶂痢?0℃并保持2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋,通過加入飽和氯化銨溶液猝滅并用乙酸乙酯萃取。將萃取液濃縮并通過閃式色譜層析(二氧化硅,10%乙醚/己烷)純化,獲得18111(67%)。19111.在醇18111(1.0當(dāng)量,0.2M)的二氯甲烷溶液中加入堿(3.0當(dāng)量)和三烷基甲硅烷基氯(3.0當(dāng)量)并將所得到的溶液在25℃下攪拌。通過加入飽和氯化銨溶液將反應(yīng)物猝滅并濃縮。將殘余物通過閃式色譜層析(二氧化硅,2%乙酸乙酯/己烷)純化,獲得TIPS醚19111。20111.在25℃下,將1.0M雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰的THF溶液(1.5當(dāng)量)滴加到醛19111(1.0當(dāng)量,0.1M)的THF溶液中。10分鐘后,通過加入飽和氯化銨溶液將反應(yīng)物猝滅,用乙醚萃取,用硫酸鈉干燥并濃縮。21111在0℃下,將化合物20111溶解在二氯甲烷中并將碳酸氫鈉加到該溶液中。10分鐘后,在相同的溫度下,將Dess—Martin高碘酸鹽(periodinate)加到該反應(yīng)混合物中,然后將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?5℃。4小時(shí)后,將反應(yīng)混合物用乙醚稀釋并將飽和碳酸氫鈉水溶液加到該混合物中,然后加入硫代硫酸鈉五水合物。將所得到的溶液用乙醚萃取,將萃取液用硫酸鈉干燥并濃縮。將粗品通過閃式色譜層析(二氧化硅,1%乙酸乙酯/己烷)純化,得到21111的被保護(hù)醇(85%)。22111在25℃下,在21111的THF溶液中加入三乙胺·3HF(5∶1,THF/試劑,0.1M)。攪拌后,將反應(yīng)混合物濃縮并通過閃式色譜層析純化。23111在氬氣環(huán)境下,在小燒瓶中加入Lindlar’s催化劑(0.5當(dāng)量)。然后將22111(1.0當(dāng)量)的甲苯溶液加到該催化劑中,并在室溫下將反應(yīng)混合物用H2處理。20分鐘后,將反應(yīng)混合物通過Celite_過濾并濃縮,得到23111。24111在23111(1.0當(dāng)量)的甲醇溶液中加入PPTS(1當(dāng)量)。然后將該反應(yīng)混合物濃縮并將殘余物通過閃式色譜層析(二氧化硅,50%乙醚/己烷,含1%的三乙胺)純化,得到24111(77%)。合成方案29引入側(cè)鏈并合成珊瑚素及其類似物,其中Rs由合成方案31和32中制備的產(chǎn)物表示;Rr由合成方案33制備的產(chǎn)物表示;Rt包括下列基團(tuán)H、Me、Et、n—Pr、i—Pr、n—Bu、t—Bu、Bn、CH2CH=CH2、CH2CCH、c—C6Hn、C8H17和HO(CH2)2;Rv=THP、Ac、2—Cl—Ac、CCl3C(O)、2—Br—Ac、CF3C(O)、2—PhAc、EtC(O)、CH2=CHC(O)、HCCC(O)、n—PrC(O)、i—PrC(O)、環(huán)—PrC(O)、n—BUC(O)、i—BuC(O)、t—BuC(O)、Lev、環(huán)—C6H11C(O)、Bz、2—呋喃基C(O)、PhCH=CHC(O)、2—噻吩C(O)=Me、Et、n—Pr、i—Pr、All、Prop、n—Bu、Bn、AcOCH2CH2;RwH,Me,Et,n—Pr,i—Pr,n—Bu,t—Bu,Bn,CH2CH=CH2,CH2CCH,c—C6H11,C8H17(All=烯丙基,Bn=芐基,Ac=乙?;?,Pr=Prop=丙基,Bu=丁基,Ph=苯基,Me=甲基,Et=乙基,THP=四氫吡喃基)。反應(yīng)條件a.DCC,4—DMAP,CH2Cl2,25℃。b.混合的酸酐,三乙胺,4—DMAP,CH2Cl2,23℃。c.TBAF,THF,25℃;d—NH3,THF,乙醇,—78℃。e.DDQ,CH2Cl2,H2O,25℃。f.3,4—二氫—2H—吡喃,CSA,THF,25℃。g.Rv—OH,三乙胺,4—DMAP,CH2Cl2,25℃。h.Rv—OH,三乙胺,CH2Cl2,25℃。i.Rv—I,NaH,DMF,25℃。I.CSA,CHCl3,Rt—OH。m.Rr—OC(NH)CCl3,TMS—OTf,乙醚,0℃。n.Dess—Martin過碘烷,NaHCO3,吡啶,CH2Cl2,25℃。o.NaClO2,NaH2PO4,2—甲基—2—丁烯,THF,叔丁醇,H2O32111將化合物28111(1.0當(dāng)量)溶于二氯甲烷并將碳酸氫鈉(10當(dāng)量)加到0℃溫度下的該溶液中。10分鐘后,將Dess—Martin過碘烷(2.5當(dāng)量)加到相同溫度下的反應(yīng)混合物中,并將反應(yīng)混合物溫?zé)岬?5℃。1小時(shí)后,用乙醚稀釋反應(yīng)混合物并將飽和的碳酸氫鈉水溶液加到混合物中,然后加入硫代硫酸鈉五水合物。用乙醚萃取所得溶液,萃取物用硫酸鈉干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,10/10/1=乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇)產(chǎn)生醛32111(100%)。33111在0℃溫度下,將NaH2PO4(3.0當(dāng)量)和NaClO2(6.0當(dāng)量)加到32111(1.0當(dāng)量)和2.0M在THF中的2—甲基—2—丁烯(70當(dāng)量)的叔丁醇/水(5/1)溶液中。攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí),然后在其中加入CH2N2(過量)的乙醚溶液。濃縮反應(yīng)混合物并通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,10/10/1=乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇)產(chǎn)生酯33111(71%)。合成方案30另外的五加苷素和珊瑚素類似物,其中XRx選自下列基團(tuán)MeHN,Me2N,EtHN,Et2N,n—PrHN,n—Pr2N,i—PrHN,i—Pr2N,n—Bu2N,BnHN,Bn2N,HS,MeS,EtS,n—PrS,i—PrS,n—Bu,PhS和BnS。26111轉(zhuǎn)化為36111,28111轉(zhuǎn)化為37111并且37111轉(zhuǎn)化為38111和39111。反應(yīng)條件p.CSA,CHCl3,Rx—XH。q.Rx—XX—Rx,PPh3,THF。r.DAST,CH2Cl2,0℃。s.在下述方法O中的試劑、條件。t.CSA,CHCl3,Rt—OH合成方案31合成式[A]中R1的R1側(cè)鏈酸和酸酐。原料49111參見有機(jī)化學(xué)雜志44,2250—6(1979)和有機(jī)化學(xué)雜志58,4494—6(1993);53111和57111參見有機(jī)化學(xué)雜志61,4623—33(1996)。反應(yīng)條件u.LiOH,THF,H2O,25℃。v.Ph3=CHCO2Me,PhH,25℃。w.DIBAL—H,CH2Cl2,—78℃。x.(CH3)3—C(O)Cl,THF,25℃。y.Ph3=CMeCO2Me溶劑,25℃42111在41111(1.0當(dāng)量,0.3M)的THF溶液中加入新戊酰氯(2.0當(dāng)量)和三乙胺(2.0當(dāng)量)。在室溫下將反應(yīng)物攪拌過夜。然后經(jīng)Celite_過濾溶液,濃縮并溶解在二氯甲烷中產(chǎn)生0.2M儲液。合成方案32進(jìn)一步描述式[A]中R1側(cè)鏈酸和酸酐的合成。原料61111有機(jī)化學(xué)雜志61,4623—33(1996);66111和73111可從Aldrich處購得。反應(yīng)條件s.試劑條件參見下文方法O。u.LiOH,THF,H2O,25℃。v.Ph3P=CHCO2Me,PhH,25℃。w.DIBAL—H,CH2Cl2,—78℃。z.NaSMe,乙醇。合成方案33合成R2(式[A]中)側(cè)鏈亞氨酸酯,和進(jìn)行偶合后的設(shè)計(jì)步驟,其中R40選自Ac,2—Cl—Ac,CCl3C(O),2—Br—Ac,CF3C(O),2—PhAc,EtC(O),CH2=CHC(O),HCCC(O),n—PrC(O),i—PrC(O),c—PrC(O),n—BuC(O),i—BuC(O),t—BuC(O),環(huán)C6H11C(O),Bz,2—呋喃基C(O),PhCH=CHC(O)和2—噻吩C(O)。反應(yīng)條件a.NaH,PMB—Cl,DMF,25℃。b.p—TsOH,(CH2OH)2,甲醇,25℃。c.TBS—OTf,三乙胺,二氯甲烷,25℃。d.NBS,吡啶,丙酮,水,0℃。e.Cl3CCN,NaH,CH2Cl2,25℃。f.方法E(參見說明部分)。g.方法G(參見說明部分)。h.方法H(參見說明部分)。I.方法I(參見說明部分)。j.方法C(參見說明部分)。k.TBS—Cl,咪唑,DMF,25℃。I.(R40)2O,三乙胺,4—DMAP,二氯甲烷。m.叔丁醇鉀,DMSO。n.HgCl2,HgO,丙酮,H2O。*)=偶合后77111在0℃溫度下,將76111(1.0當(dāng)量,0.30M)的DMF溶液加到NaH(1.2當(dāng)量,0.51M)的DMF溶液中并將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30分鐘,此后,加入PMBCl(1.3當(dāng)量)。然后在室溫下攪拌反應(yīng)物2小時(shí)并通過加入飽和氯化銨使之猝滅,用乙醚萃取,硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,20%乙酸乙酯/己烷)獲得77111(93%)。78111在室溫下,將CSA(0.1當(dāng)量)加到77111(1.0當(dāng)量,0.07M)的甲醇和乙二醇(甲醇∶乙二醇=10∶1)溶液中,并在室溫下將混合物攪拌2小時(shí),然后通過加入飽和碳酸氫鈉使混合物猝滅,用乙酸乙酯萃取、硫酸鎂干燥并濃縮.通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,60%乙酸乙酯/己烷)獲得78111(84%)。79111在0℃溫度下,將TBDMSOTf(4當(dāng)量)加到78111(1.0當(dāng)量,0.14M)和三乙胺(10.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中,并在0℃下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí),然后通過加入飽和碳酸氫鈉使混合物猝滅,用乙酸乙酯萃取、硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,3%乙醚和1%三乙胺/己烷)獲得79111(93%)。80111在0℃溫度下,將N—溴代琥珀酰亞胺(3.3當(dāng)量)和吡啶(11.0當(dāng)量)加到79111(1.0當(dāng)量,0.07M)的含水丙酮(93%丙酮,7%水)溶液中。在0℃下將所得溶液攪拌4小時(shí),然后通過加入飽和亞硫酸鈉溶液使之猝滅。用乙醚萃取反應(yīng)混合物,并用鹽水洗滌萃取物,硫酸鎂干燥并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,10%乙酸乙酯/己烷)獲得80111(80%)。81111在0℃溫度下,將NaH(0.1當(dāng)量)加到80111(1.0當(dāng)量,0.09M)和CCl3CN(5.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中并在室溫下將反應(yīng)物攪拌3.5小時(shí),此后濃縮并通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,33%乙酸乙酯/己烷,含有2%三乙胺)獲得81111(93%)。87111如由76111合成81111所述由82111合成。89111在醇88111(1.0當(dāng)量,0.1M)的DMF溶液中加入咪唑(6.0當(dāng)量)和TBDMSCl(2.4當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。90111在醇89111(1.0當(dāng)量,0.1M)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(3.0當(dāng)量),4—DMAP(0.3當(dāng)量)和酸酐(如,乙酸酐)(2.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。91111在溫度為0℃的90111(1.0當(dāng)量,0.1M)的含水丙酮(93%丙酮,7%水)溶液中加入N—溴代琥珀酰亞胺(3.3當(dāng)量)和吡啶(11.0當(dāng)量)。然后將所得溶液在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。92111在溫度為0℃的91111(1.0當(dāng)量,0.1M)和CCl3CN(5.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中加入NaH(0.1當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。94111在醇93111(1.0當(dāng)量,0.1M)的DMF溶液中加入咪唑(6.0當(dāng)量)和TBDMSCl(2.4當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。95111在0℃溫度下,在NaH(1.2當(dāng)量,0.5M)的THF溶液中加入94111(1.0當(dāng)量,0.3M)的THF溶液并在0℃溫度下攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。然后加入PMBCl(1.3當(dāng)量)。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。96111在醇95111(1.0當(dāng)量,0.1M)的DMSO溶液中加入叔丁醇鉀(0.3當(dāng)量)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物,猝滅,濃縮并通過閃式色譜層析純化產(chǎn)生C—1乙烯基醚。然后在所得乙烯基醚(1.0當(dāng)量,0.1M)的THF和水(THF∶水=20∶1)溶液中加入HgCl2(0.3當(dāng)量)。在70℃溫度下將反應(yīng)混合物攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。97111在溫度為0℃的96111(1.0當(dāng)量,0.1M)和CCl3CN(5.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中加入NaH(0.1當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法A(合成方案29中的(a))在醇(如,24111)(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中加入DCC(1.8當(dāng)量),4—DMAP(0.5當(dāng)量)和含有羧酸官能基的側(cè)鏈前體(1.5當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法B(合成方案29中的(b))在醇(如,24111)(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(10.0當(dāng)量),4—DMAP(2.0當(dāng)量)和側(cè)鏈的混合酸酐(5.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法C(合成方案29中的(c),合成方案33中的(j))在乙醚(如,27111)(1.0當(dāng)量)的THF溶液(0.1M)中加入TBAF(4.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)、用水猝滅、用二氯甲烷萃取,濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法D(合成方案29中的(d))將27111(1.0當(dāng)量)的THF∶乙醇(20∶1,0.1M)溶液加入到液氨(0.05M)中,然后加入金屬鈉(10當(dāng)量)并在—78℃溫度下將反應(yīng)物攪拌20分鐘。用固體氯化銨使反應(yīng)混合物猝滅,用乙醚稀釋,過濾并濃縮,通過閃式色譜層析純化。方法E(合成方案29中的(e),合成方案33中的(f))將27111(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷∶水(18∶1,0.01M)溶液加入到DDQ(2.0當(dāng)量)中,并在室溫下將反應(yīng)物攪拌30分鐘。用飽和碳酸氫鈉溶液使反應(yīng)混合物猝滅,用二氯甲烷萃取,硫酸鈉干燥,過濾并濃縮,通過閃式色譜層析純化。方法F(合成方案29中的(f))25℃溫度下,在28111(1.0當(dāng)量,0.1M)的THF溶液中加入3,4—二氫—2H—吡喃(10.0當(dāng)量)和CSA(1.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法G(合成方案29,合成方案33中的(a))在醇28111(1.0當(dāng)量,0.1M)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(3.0當(dāng)量),4—DMAP(0.3當(dāng)量)和酸酐(如,乙酸酐)(2.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法H(合成方案29,合成方案33中的(h))在28111(1.0當(dāng)量,0.1M)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(3.0當(dāng)量)和氯化物(如,BzCl)(2.0當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法I(合成方案29,合成方案33中的(i))0℃溫度下,在28111(1.0當(dāng)量,0.1M)的DMF溶液中加入NaH(1.3當(dāng)量)并將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。0℃溫度下,在此混合物中加入碘化物(如,MeI),然后將所得混合物在室溫下攪拌、猝滅、濃縮并通過閃式色譜層析純化。方法J(合成方案29中的(j))在酸33111(1.0當(dāng)量)的THF(0.1M)溶液中加入CH2N2(過量)的乙醚溶液。通過TLC監(jiān)測反應(yīng)。原料消失后,將反應(yīng)混合物濃縮并通過閃式色譜層析純化殘余物(二氧化硅,10/10/1=乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇)以高產(chǎn)率產(chǎn)生酯34111。方法K(合成方案29中的(k))在酸33111(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(0.1M)溶液中加入醇R5OH(2.0當(dāng)量),DMAP(0.5當(dāng)量)和DCC(1.5當(dāng)量)。通過TLC監(jiān)測反應(yīng)。原料消失后,將反應(yīng)混合物濃縮,用水洗滌,用二氯甲烷萃取并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物以高產(chǎn)率產(chǎn)生酯34111。方法L(合成方案30中的(p))室溫下,在26111(1.0當(dāng)量)的氯仿(0.1M)溶液中加入醇R6OH(2.0當(dāng)量),然后加入催化量的CSA(0.1當(dāng)量)并通過TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)度。反應(yīng)完成后,加入飽和碳酸氫鈉并用乙醚萃取有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物以高產(chǎn)率產(chǎn)生縮醛36111。方法M(合成方案30中的(q))—20℃溫度下,在26111(1.0當(dāng)量)的乙醚(0.1M)溶液中加入BF3·乙醚(1.0當(dāng)量),然后加入硫醇RX—SH(1.2當(dāng)量)并通過TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)度。反應(yīng)完成后,加入飽和碳酸氫鈉并用乙醚萃取有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物以高產(chǎn)率產(chǎn)生硫縮醛36111。方法N(合成方案30中的(r))0℃溫度下,在醇28111(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷(0.1M)溶液中加入DAST(1.2當(dāng)量),然后使溶液溫?zé)岬绞覝?。通過TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)度。反應(yīng)完成后,加入飽和碳酸氫鈉并用乙醚萃取有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物以高產(chǎn)率產(chǎn)生氟化物37111。方法O(合成方案30,合成方案32中的(s))0℃溫度下,在28111(1.0當(dāng)量,0.4M)和三乙胺(2.5當(dāng)量)的二氯甲烷溶液中經(jīng)1小時(shí)滴加甲磺酰氯(1.2當(dāng)量)。在0℃溫度下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí),通過加入鹽水使之猝滅并用乙酸乙酯萃取。硫酸鈉干燥合并的萃取物并濃縮。通過閃式色譜層析純化粗產(chǎn)品(二氧化硅,10%乙酸乙酯/己烷)產(chǎn)生相應(yīng)的甲磺酸酯(91%)。室溫下,在甲磺酸酯(1.0當(dāng)量)的DMF(0.1M)溶液中加入預(yù)先干燥的CsF(1.2當(dāng)量),并使溶液溫?zé)岬?0℃。通過TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)度。反應(yīng)完成后,加入飽和碳酸氫鈉并用乙醚萃取有機(jī)層,硫酸鈉干燥并濃縮,通過閃式色譜層析純化殘余物以高產(chǎn)率產(chǎn)生氟化物37111。方法P(合成方案31,合成方案32中的(u))在酯(1.0當(dāng)量,0.4M)的THF/水(3∶4)溶液中加入氫氧化鈉(1.1當(dāng)量),并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)。然后將溶液濃縮并在高真空下干燥12小時(shí)產(chǎn)生酸的鹽。方法Q(合成方案31,合成方案32中的(v))在醛(1.0當(dāng)量,0.2M)的苯溶液中加入Ph3P=CHCO2Me(1.5當(dāng)量),并將反應(yīng)混合物加熱到80℃。完成后,濃縮反應(yīng)混合物并通過閃式色譜層析純化殘余物。方法R(合成方案31,合成方案32中的(W))—78℃溫度下,在酯(1.0當(dāng)量,0.2M)的二氯甲烷溶液中加入1.0MDIBAL(1.0當(dāng)量)的二氯甲烷溶液。通過加入飽和氯化銨溶液使反應(yīng)猝滅,用乙醚萃取,濃縮并通過閃式色譜層析純化。權(quán)利要求1.一種下列結(jié)構(gòu)[A]表示的化合物其中R1選自基團(tuán)—OH、OAc和由下列結(jié)構(gòu)表示的基團(tuán)R2選自基團(tuán)—OH、—O(C1—C6烷基)、—OCH2CF3、—O—異丙基、—O—叔丁基、—O—芐基、—OCH2CH=CH2、—OCH2CCH、—O(CH2)2—OH、—NHMe、—NMe2、—NHEt、—NEt2、—NH—正丙基、—N—(丙基)2、—NH—異丙基、—N—(丁基)2、—NH—芐基、—N—芐基2、—SH、—SMe、—SEt、—S—正丙基、—S—異丙基、—S—正丁基、—S—芐基和—S—苯基;R3選自基團(tuán)—CH2OC(O)CH3、—CH2OC(O)—苯基、—CH2OC(O)O—CH3、—CH2OC(O)NH—苯基、—CH2—OH、—CH(O)、—CH2—O—三異丙基甲硅烷基、—CH2O—Ac、—CH2—F、—CH2N3、—CH2NAc、—CH2NBz、—C(O)—O(C1—C6烷基)、—C(O)—CH2CF3、—C(O)—CH2CHCH2、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH(CH3)、—C(O)CH2Ph、—C(O)CH2—苯基—OMe、—CH2—O—四氫吡喃、—CH2—O—C(O)CHCl2、—CH2—O—C(O)—CCl3、—CH2—O—C(O)CHBr2、—CH2—O—C(O)—CF3、—CH2—O—C(O)CHPh2、EtC(O)—O—CH2—、CH2=CHC(O)—O—CH2—、HCCC(O)—O—CH2—、正丙基—C(O)—O—CH2—、i—PrC(O)—O—CH2—、環(huán)丙基—C(O)—O—CH2—、n—BuC(O)—O—CH2—、i—BuC(O)—O—CH2—、t—(BuC(O)—O—CH2—、環(huán)—C6H11C(O)—O—CH2—、苯基—O—CH2—、2—呋喃基—C(O)—O—CH2—、PhCH=CHC(O)—O—CH2—、2—噻吩—C(O)—O—CH2—、(C1—C6烷基)—O—CH2—、異丙基—O—CH2—、烯丙基—O—CH2—、芐基—O—CH2—、AcOCH2CH2—O—CH2—、—COOH、—COO—(C1—C6烷基)、—COO—異丙基、—COO—叔丁基、—COO—芐基、—COOCH2CH=CH2、—COOCH2CCH、—COO—環(huán)C6H11、—CONHBn、—CONH(C1-C6烷基)、—CONH—丙基和—COO—C8H17以及由下列結(jié)構(gòu)所表示的基團(tuán)其中R4選自基團(tuán)—OH、—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—;R5選自基團(tuán)—OAc和—OH;R6選自基團(tuán)—OAc和—OH;R7選自基團(tuán)—H和甲基;R8選自基團(tuán)—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—;然而,存在下列條件a.如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能同時(shí)為—CO2—甲基或—CO2—乙基;b.如果R1是并且R2為—O—甲基,那么R3不能為其中R4是—OAc,R5是羥基,R6是羥基,并且R7是氫;c.如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能為其中R4是—OAc,R5是羥基,R6是—OAc,并且R7是氫;和d.如果R1是并且R2為—OH,那么R3不能為其中R4和R5是—OAc,R6是—OH,并且R7是氫。2.根據(jù)權(quán)利要求l的化合物,其中R1為R2選自基團(tuán)—O—Me、—O—Et和—O—CH2CF3;并且R3選自基團(tuán)—C(O)—O—Me、—C(O)—O—Et、—C(O)—O—正丙基、—C(O)—O—正丁基、—C(O)—(CH2)3—CH2—Phe、—C(O)—O—CH2CH2OBn、—C(O)—NHMe—、—C(O)—蒽—9—基甲基、—C(O)—O—CH2CH=CH2、—C(O)—O—(CH2)2CH2Cl、—CH(OMe)2和—C(O)—NH—芐基。3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物,其中R1如上所述,R2選自基團(tuán)—O—Me、—O—Et和—O—CH2CF3;并且R3選自基團(tuán)—C(O)—O—Me、—C(O)—O—Et、—C(O)—O—正丙基、—C(O)—O—CH2CH=CH2、—C(O)—O—(CH2)2CH2Cl和—C(O)—NH—芐基。4.一種由下列結(jié)構(gòu)表示的高級中間體其中R1選自—O—對甲氧基芐基、—O—三乙基甲硅烷基和由下列結(jié)構(gòu)表示的基團(tuán)R3選自基團(tuán)—CH2OC(O)CH3、—CH2OC(O)—苯基、—CH2OC(O)O—CH3、—CH2OC(O)NH—苯基、—CH2—OH、—CH(O)、—CH2—O—三異丙基甲硅烷基、—CH2O—Ac、—CH2—F、—CH2N3、—CH2NAc、—CH2NBz、—C(O)—O(C1—C6烷基)、—C(O)—CH2CF3、—C(O)—CH2CHCH2、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH(CH3)、—C(O)CH2Ph、—C(O)CH2—苯基—OMe、—CH2—O—四氫吡喃、—CH2—O—C(O)CHCl2、—CH2—O—C(O)—CCl3、—CH2—O—C(O)CHBr2、—CH2—O—C(O)—CF3、—CH2—O—C(O)CHPh2、EtC(O)—O—CH2—、CH2=CHC(O)—O—CH2—、HCCC(O)—O—CH2—、正丙基—C(O)—O—CH2—、i—PrC(O)—O—CH2—、環(huán)丙基—C(O)—O—CH2—、n—BuC(O)—O—CH2—、i—BuC(O)—O—CH2—、t—BuC(O)—O—CH2—、環(huán)—C6H11C(O)—O—CH2—、苯基—O—CH2—、2—呋喃基—C(O)—O—CH2—、PhCH=CHC(O)—O—CH2—、2—噻吩—C(O)—O—CH2—、(C1—C6烷基)—O—CH2—、異丙基—O—CH2—、烯丙基—O—CH2—、芐基—O—CH2—、AcOCH2CH2—O—CH2—、—COOH、—COO—(C1—C6烷基)、—COO—異丙基、—COO—叔丁基、—COO—芐基、—COOCH2CH=CH2、—COOCH2CCH、—COO—環(huán)C6H11、—CONHBn、—CONH(C1—C6烷基)、—CONH—丙基和—COO—C8H17以及由下列結(jié)構(gòu)所表示的基團(tuán)其中R4選自基團(tuán)—OH、—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—、和2—噻吩—C(O)O—;R5選自基團(tuán)—OAc和—OH;R6選自基團(tuán)—OAc和—OH;R7選自基團(tuán)—H和甲基;和R8選自基團(tuán)—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—。5.—種由下列結(jié)構(gòu)表示的高級中間體其中R1選自—O—對甲氧基芐基、—O—三乙基甲硅烷基和由下列結(jié)構(gòu)表示的基團(tuán)R3選自基團(tuán)—CH2OC(O)CH3、—CH2OC(O)—苯基、—CH2OC(O)O—CH3、—CH2OC(O)NH—苯基、—CH2—OH、—CH(O)、—CH2—O—三異丙基甲硅烷基、—CH2O—Ac、—CH2—F、—CH2N3、—CH2NAc、—CH2NBz、—C(O)—O(C1—C6烷基)、—C(O)—CH2CF3、—C(O)—CH2CHCH2、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH(CH3)、—C(O)CH2Ph、—C(O)CH2—苯基—OMe、—CH2—O—四氫吡喃、—CH2—O—C(O)CHCl2、—CH2—O—C(O)—CCl3、—CH2—O—C(O)CHBr2、—CH2—O—C(O)—CF3、—CH2—O—C(O)CHPh2、EtC(O)—O—CH2—、CH2=CHC(O)—O—CH2—、HCCC(O)—O—CH2—、正丙基—C(O)—O—CH2—、i—PrC(O)—O—CH2—、環(huán)丙基—C(O)—O—CH2—、n—BuC(O)—O—CH2—、i—BuC(O)—O—CH2—、t—BuC(O)—O—CH2—、環(huán)—C6H11C(O)—O—CH2—、苯基—O—CH2—、2—呋喃基—C(O)—O—CH2—、PhCH=CHC(O)—O—CH2—、2—噻吩—C(O)—O—CH2—、(C1—C6烷基)—O—CH2—、異丙基—O—CH2—、烯丙基—O—CH2—、芐基—O—CH2—、AcOCH2CH2—O—CH2—、—COOH、—COO—(C1—C6烷基)、—COO—異丙基、—COO—叔丁基、—COO—芐基、—COOCH2CH=CH2、—COOCH2CCH、—COO—環(huán)C6H11、—CONHBn、—CONH(C1—C6烷基)、—CONH—丙基和—COO—C8H17以及由下列結(jié)構(gòu)所表示的基團(tuán)其中R4選自基團(tuán)—OH、—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—;R5選自基團(tuán)—OAc和—OH;R6選自基團(tuán)—OAc和—OH;R7選自基團(tuán)—H和甲基;并且R8選自基團(tuán)—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—。6.一種將第一中間體環(huán)化為第二中間體的方法,其中第一中間體是權(quán)利要求2中所描述的化合物,第二中間體是權(quán)利要求3中所描述的化合物,該方法包括下列步驟將第一中間體環(huán)化用于產(chǎn)生第二中間體。7.一種將第一中間體環(huán)化為第二中間體的方法,其中第一中間體是權(quán)利要求3中所描述的化合物,第二中間體由下列結(jié)構(gòu)表示其中R1選自—O—對甲氧基芐基、—O—三乙基甲硅烷基和由下列結(jié)構(gòu)表示的基團(tuán)R3選自基團(tuán)—CH2OC(O)CH3、—CH2OC(O)—苯基、—CH2OC(O)O—CH3、—CH2OC(O)NH—苯基、—CH2—OH、—CH(O)、—CH2—O—三異丙基甲硅烷基、—CH2O—Ac、—CH2—F、—CH2N3、—CH2NAc、—CH2NBz、—C(O)—O(C1—C6烷基)、—C(O)—CH2CF3、—C(O)—CH2CHCH2、—C(O)—O—CH2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH2Cl、—C(O)O(CH2)2CH(CH3)、—C(O)CH2Ph、—C(O)CH2—苯基—OMe、—CH2—O—四氫吡喃、—CH2—O—C(O)CHCl2、—CH2—O—C(O)—CCl3、—CH2—O—C(O)CHBr2、—CH2—O—C(O)—CF3、—CH2—O—C(O)CHPh2、EtC(O)—O—CH2—、CH2=CHC(O)—O—CH2—、HCCC(O)—O—CH2—、正丙基—C(O)—O—CH2—、i—PrC(O)—O—CH2—、環(huán)丙基—C(O)—O—CH2—、n—BuC(O)—O—CH2—、i—BuC(O)—O—CH2—、t—BuC(O)—O—CH2—、環(huán)—C6H11C(O)—O—CH2—、苯基—O—CH2—、2—呋喃基—C(O)—O—CH2—、PhCH=CHC(O)—O—CH2—、2—噻吩—C(O)—O—CH2—、(C1—C6烷基)—O—CH2—、異丙基—O—CH2—、烯丙基—O—CH2—、芐基—O—CH2—、AcOCH2CH2—O—CH2—、—COOH、—COO—(C1—C6烷基)、—COO—異丙基、—COO—叔丁基、—COO—芐基、—COOCH2CH=CH2、—COOCH2CCH、—COO—環(huán)C6H11、—CONHBn、—CONH(C1—C6烷基)、—CONH—丙基和—COO—C8H17以及由下列結(jié)構(gòu)所表示的基團(tuán)其中R4選自基團(tuán)—OH、—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—;R5選自基團(tuán)—OAc和—OH;R6選自基團(tuán)—OAc和—OH;R7選自基團(tuán)—H和甲基;并且R8選自基團(tuán)—OAc、2—Cl—AcO—、CCl3C(O)O—、2—Br—AcO—、CF3C(O)O—、2—苯基—AcO—、(C1—C6烷基)—C(O)O—、CH2=CHC(O)O—、HCCC(O)O—、異丙基—C(O)O—、環(huán)丙基—C(O)O—、異丁基—C(O)O—、叔丁基—C(O)O—、環(huán)—C6H11—C(O)O—、苯基—O—、2—呋喃基—C(O)O—、PhCH=CHC(O)O—和2—噻吩—C(O)O—;該方法包括下列步驟將第一中間體環(huán)化用于產(chǎn)生第二中間體。8.促進(jìn)微管蛋白裝配的方法,該方法包括下列步驟將微管蛋白與用于促進(jìn)微管蛋白裝配的權(quán)利要求1所述化合物接觸。9.穩(wěn)定眾多微管的方法,該方法包括下列步驟將微管蛋白與用于穩(wěn)定眾多微管的權(quán)利要求1所述化合物接觸。10.治療腫瘤疾病的方法,該方法包括給予需要該治療的病人足夠治療所述腫瘤疾病量的根據(jù)權(quán)利要求1的式[A]化合物。11.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的式[A]化合物在治療腫瘤疾病中的用途。12.用于診斷或治療溫血?jiǎng)游锛膊〉母鶕?jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的式[A]化合物。13.一種包含根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的式[A]化合物和至少一種可藥用載體的藥物組合物。全文摘要利用固相和溶液相化學(xué)過程合成的珊瑚素A和B、五加苷素及其生物活性類似物(A)。所述合成方法利用將普通前體,例如化合物1880或200連接在固體支持物上,產(chǎn)生共軛物230和240然后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)處理。用改性的C-8酯、C-15酯和C-4縮酮官能基構(gòu)建珊瑚素和五加苷素類似物的組合庫并篩選對微管蛋白聚合的活性和對抗腫瘤細(xì)胞(包括紫杉醇耐受的細(xì)胞系)的細(xì)胞毒活性。與其相應(yīng)的天然產(chǎn)物相比,化合物600、610、630、660—700、730、760、850和920的生物活性相同或更好。文檔編號A61P35/00GK1278825SQ98810502公開日2001年1月3日申請日期1998年10月22日優(yōu)先權(quán)日1997年10月24日發(fā)明者K·C·尼科拉奧,F·萬戴爾夫特,細(xì)川誠二郎,S·基姆,T·李,大嶼孝志,J·普費(fèi)佛科恩,D·沃爾勞米斯,徐錦優(yōu),N·溫欣格申請人:諾瓦提斯公司,斯克里普思研究院
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