專利名稱：新的金屬蛋白酶抑制劑、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的金屬蛋白酶抑制劑、一種它們的制備方法和含有它們的藥物組合物。
生理狀態(tài)中，結(jié)締組織的合成與細(xì)胞外基質(zhì)的降解處于動(dòng)態(tài)平衡。該降解作用是由于已有的基質(zhì)細(xì)胞分泌鋅蛋白酶(金屬蛋白酶)的結(jié)果；那些蛋白酶包括(但不限于)膠原酶(MMP-1)、明膠酶或Ⅳ型膠原酶(MMP-2、MMP-9)和溶基質(zhì)素(MMP-3)。
正常狀態(tài)下，上述異化酶可通過其合成與分泌進(jìn)行調(diào)節(jié)，也可用天然抑制劑調(diào)節(jié)其細(xì)胞外的酶活性，天然抑制劑如α2-巨球蛋白或TIMPs(金屬蛋白酶的組織抑制劑)可與金屬蛋白酶形成無(wú)活性配合物。
涉及那些酶的病理學(xué)中的一個(gè)共同因素是活化酶的活性與其天然抑制劑活性之間的不平衡，其結(jié)果是組織降解過度。
金屬蛋白酶催化了細(xì)胞外基質(zhì)的再吸收作用，從而導(dǎo)致了失控的和加速的膜降解作用，后者是大量病理學(xué)條件的共同參數(shù)，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)炎、腫瘤發(fā)生與生長(zhǎng)(包括惡性擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移瘤的形成)、潰瘍、動(dòng)脈硬化等。
BB94是一種金屬蛋白酶抑制劑，近來(lái)在臨床應(yīng)用中表現(xiàn)出抗腫瘤活性，已證實(shí)有抗卵巢癌活性(Becket等《DDT》1996,1(1),16)。
因此可以預(yù)期金屬蛋白酶抑制劑將恢復(fù)蛋白酶與抑制劑之間的平衡，從而令人欣慰地矯正那些病理狀態(tài)的發(fā)展。
在文獻(xiàn)中已有描述一定數(shù)量的金屬蛋白酶抑制劑，尤其是如專利申請(qǐng)WO95/35275、WO95/35276、EP606046和WO96/00214中所述的化合物。
本發(fā)明化合物不僅是新穎的，而且已被證明是金屬蛋白酶抑制劑，這使它們可潛在地用于治療癌癥、風(fēng)濕性疾病，如關(guān)節(jié)炎與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈硬化等。
具體來(lái)說，本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物，其異構(gòu)體，及其與一種藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽
其中m代表一個(gè)1至4的整數(shù)，含1和4，n與p可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)0至4的整數(shù)，含0和4，X代表一個(gè)氧原子或硫原子或一根單鍵，R1代表一個(gè)氫原子、一個(gè)鹵原子、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷基、一個(gè)羥基、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷氧基，R2、R3與R4可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，R5代表一個(gè)氫原子、一個(gè)鹵原子、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、一個(gè)芳氧基或一個(gè)雜芳氧基，R6、R7與R8可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或與連接基團(tuán)R6的氮原子以及連接基團(tuán)R7與R8的碳原子共同(R6與R7或R6與R8)構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)，其余的基團(tuán)(分別為R8或R7)具有上述含義之一，R9代表任一種下列基團(tuán)*-SO3H，
*-CO2R10，其中R10代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，*-CO-NR11R12，其中R11與R12可以相同或不同，每個(gè)代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或者R11和R12與連接它們的氮原子共同構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)，*-NR13R14，其中R13與R14可以相同或不同，每個(gè)代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或者R13和R14與連接它們的氮原子共同構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到-芳基用來(lái)指苯基、萘基、二氫萘基或四氫萘基，這些基團(tuán)的每一個(gè)均可選被一或多個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自鹵素、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷氧基或羥基，-雜芳基用來(lái)指一個(gè)芳基，該芳基可選被一或多個(gè)如上定義的基團(tuán)取代，且含有一、二或三個(gè)相同或不同的選自氧、氮或硫的雜原子，-雜環(huán)用來(lái)指飽和或不飽和的單環(huán)或雙環(huán)的4至7元基團(tuán)，該基團(tuán)含有一、二或三個(gè)相同或不同的選自氧、氮或硫的雜原子，所述雜環(huán)還可能可選被一或多個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自鹵素、直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、羥基、氨基(可選被一或兩個(gè)相同或不同的直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代)，或者所述雜環(huán)還可能可選被另一個(gè)雜環(huán)取代。
藥學(xué)上可接受的酸例如可包括(但不限于)氫氯酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、抗壞血酸、草酸、甲磺酸、樟腦酸等。
藥學(xué)上可接受的堿例如可包括(但不限于)氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺等。
本發(fā)明還延及式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于使用一種式(Ⅱ)的外消旋形式或純對(duì)映體形式的D-色氨酸化合物作為起始物質(zhì)，
其中R1、R2、R3和R4如式(Ⅰ)定義，吲哚環(huán)系的胺官能團(tuán)被一種式(Ⅲ)的鹵代化合物取代，Z-(CH2)m-CO2Ra(Ⅲ)其中m如式(Ⅰ)定義，Z代表一個(gè)鹵原子，Ra代表一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，得到一種式(Ⅳ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，式(Ⅳ)化合物側(cè)鏈的胺官能團(tuán)被催化氫化反應(yīng)脫保護(hù)，得到一種式(Ⅴ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，該化合物在一種強(qiáng)酸和甲醛的存在下，環(huán)化得到一種式(Ⅵ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，該式(Ⅵ)化合物在一種堿性介質(zhì)中與一種式(Ⅶ)鹵化物縮合，
其中R5如式(Ⅰ)定義，Z代表一個(gè)鹵原子，得到一種式(Ⅷ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、Ra和m如上定義，該化合物在一種堿性介質(zhì)中且在二環(huán)己基碳二亞胺的存在下，與一種式(Ⅸ)的O-取代的羥胺縮合，H2N-O-R15(Ⅸ)其中R15代表一個(gè)烯丙基或芐基，得到一種式(Ⅹ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R15、Ra和m如上定義，該化合物的羧酸官能團(tuán)在例如三氟乙酸的存在下脫保護(hù)，得到一種式(Ⅺ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R15和m如上定義，該化合物與一種式(Ⅻ)的胺縮合，
其中R6、R7、R8、R9、n和p如式(Ⅰ)定義，得到一種式(ⅩⅢ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R15、m、
n和p如上定義，式(ⅩⅢ)化合物的羥胺官能團(tuán)脫保護(hù)，得到一種式(Ⅰ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、m、n和p如上定義，該式(Ⅰ)化合物必要時(shí)按照常規(guī)精制技術(shù)進(jìn)行精制，適當(dāng)情況下按照常規(guī)分離技術(shù)分離為異構(gòu)體，需要時(shí)用一種藥學(xué)上可接受的酸或堿轉(zhuǎn)化為其加成鹽。
式(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅶ)、(Ⅸ)和(Ⅻ)是商業(yè)產(chǎn)品或按照常規(guī)的有機(jī)合成法制得。
本發(fā)明還延及藥物組合物，該組合物含有至少一種式(Ⅰ)化合物、其旋光異構(gòu)體或其與一種藥學(xué)上可接受的酸或堿形成的加成鹽作為活性成分，單用或結(jié)合一或多種藥學(xué)上可接受的、惰性的、無(wú)毒的賦型劑或載體。按照本發(fā)明的藥物組合物尤其涉及那些適用于口服、胃腸外(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)、鼻腔、直腸、經(jīng)皮或透皮、經(jīng)舌、眼部或呼吸給藥者，特別是片劑、糖衣丸、舌下片、軟明膠膠囊、硬膠囊、栓劑、乳膏、軟膏、皮膚凝膠、注射劑、飲用懸液、氣霧劑、滴眼劑或滴鼻劑等。
按照病癥的性質(zhì)與嚴(yán)重性、給藥途徑、任何輔助治療的給藥方式、以及患者的年齡與體重，可對(duì)使用劑量進(jìn)行調(diào)整。每天劑量從0.01g至2g不等，可一或多次給藥。
下列實(shí)施例說明本發(fā)明，但無(wú)論如何不起限定作用。
所用起始原料是已知的，或按照已知方法制備。
制備步驟A至G得到的合成中間體用于制備本發(fā)明的化合物。
實(shí)施例與制劑例中所述化合物的結(jié)構(gòu)已按照慣用的分光光度技術(shù)(紅外、NMR、質(zhì)譜……)進(jìn)行了測(cè)定。
實(shí)施例1鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲?；?甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺步驟A:1-[(叔丁氧基羰基)甲基]-Nα-芐氧基羰基-D-色氨酸在-78℃、一種惰性氣氛下，向100g Nα-芐氧基羰基-D-色氨酸的一升無(wú)水四氫呋喃溶液中滴加600ml NaHMDS(1,1,1,3,3,3-六甲基二硅氮烷的鈉鹽)的四氫呋喃溶液(1M)。一小時(shí)后，將溫度升至0℃，滴加64g溴乙酸叔丁酯在50ml無(wú)水四氫呋喃中的溶液。然后將反應(yīng)混合物溫度升至室溫，隨后在真空中蒸去溶劑。殘余物用二氯甲烷稀釋，所得溶液通過加入4N氫氯酸溶液進(jìn)行酸化。用二氯甲烷萃取后，有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，然后在真空中濃縮。得到136g預(yù)期化合物。
步驟B:1-[(叔丁氧基羰基)甲基]-D-色氨酸將136g步驟A中得到的產(chǎn)物用1.5升甲醇稀釋，在1.2巴H2壓力下，在5g 10％Pd/C的存在下，進(jìn)行氫化反應(yīng)。在室溫下反應(yīng)12小時(shí)后，將溶液過濾，然后在真空中濃縮。以淺褐色粉末的形式得到87g預(yù)期化合物。熔點(diǎn)260℃步驟C:9-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2,3,4,9-四氫-β-咔啉-(3R)-羧酸向85g步驟B中得到的產(chǎn)物的600ml水懸液中加入130ml 0.1N硫酸溶液，然后滴加130ml 37％甲醛溶液。在室溫下反應(yīng)48小時(shí)后，將反應(yīng)混合物過濾，用水洗滌，然后經(jīng)P2O5干燥。得到相應(yīng)于預(yù)期化合物的82.6g白色固體。熔點(diǎn)230℃步驟D:9-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-羧酸向80g步驟C中得到的產(chǎn)物的1.5升二噁烷溶液中加入750ml水，再加入85ml三乙胺。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，滴加用100ml二噁烷稀釋過的60g 4-甲氧基苯磺酰氯。然后將反應(yīng)混合物溫度升至室溫，攪拌12小時(shí)。在真空中蒸發(fā)掉二噁烷后，殘余的溶液用水稀釋，然后通過加入4N氫氯酸溶液進(jìn)行酸化，用二氯甲烷萃取。有機(jī)相合并，隨后用水洗滌，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，在真空中濃縮。殘余物從戊烷重結(jié)晶，以白色粉末的形式得到115.2g所需化合物。熔點(diǎn)150℃步驟E:9-[(叔丁氧基羰基)甲基]-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-烯丙氧基)羧酰胺在0℃下，向100g步驟D中得到的化合物的1.5升二甲基甲酰胺溶液中加入24.1g O-烯丙基羥胺、27g羥基苯并三唑、41.2g二環(huán)己基碳二亞胺和31ml三乙胺。在室溫下攪拌12小時(shí)后，反應(yīng)混合物在真空中濃縮。殘余物用乙酸乙酯稀釋，然后連續(xù)用10％碳酸氫鈉水溶液、水和飽和氯化鈉溶液洗滌。然后，有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，以油形式得到120g預(yù)期化合物。
步驟F:2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-[(N-烯丙氧基)羧酰胺]-9-乙酸在0℃下，向50g步驟E中得到的化合物的500ml無(wú)水二氯甲烷溶液中加入70ml三氟乙酸。在室溫下12小時(shí)后，反應(yīng)混合物在真空中濃縮，所得殘余物從乙醚結(jié)晶，以淺褐色固體的形式得到30.8g所需化合物。熔點(diǎn)160℃步驟G:2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲?；?甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-烯丙氧基)羧酰胺在0℃下，向3.5g步驟F中得到的化合物的50ml二甲基甲酰胺溶液中加入1ml N-(3-氨基丙基)嗎啉、0.95g羥基苯并三唑和1.5g二環(huán)己基碳二亞胺。在室溫下12小時(shí)后，反應(yīng)混合物首先過濾以除去過量的二環(huán)己基碳二亞胺，然后在真空中濃縮。殘余物用二氯甲烷稀釋，用水洗三次、然后用飽和氯化鈉溶液洗滌；隨后，有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，然后減壓蒸發(fā)。預(yù)期化合物隨后用硅膠層析法分離(洗脫劑二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨95/5/0.5)。
步驟H鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲?；?甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺在室溫、一種惰性氣氛下，向2.5g步驟G中得到的化合物的50ml二氯甲烷溶液中加入0.7ml 乙酸和0.14g Pd(PPh3)2Cl2。5分鐘后，加入2.3ml氫化三正丁基錫，反應(yīng)混合物在室溫下保持一小時(shí)，然后蒸發(fā)至干。殘余物然后用己烷稀釋。生成一沉淀，濾出，用氫氯酸水溶液稀釋；后者用水、然后用己烷洗滌。過濾和冷凍干燥后，得到2g預(yù)期化合物。元素微量分析CH NCl S％計(jì)算值54.06 5.83 11.26 5.70 5.15％實(shí)測(cè)值54.28 5.98 11.29 5.88 4.87實(shí)施例2乙酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(2-嗎啉-4-基乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用N-(2-氨基丙基)嗎啉作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CH NS％計(jì)算值55.14 5.90 11.09 5.08％實(shí)測(cè)值54.79 6.06 10.89 4.99實(shí)施例3鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(4-嗎啉-4-基丁基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用N-(4-氨基丁基)嗎啉作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CHN Cl S％計(jì)算值54.75 6.02 18.01 5.57 5.04％實(shí)測(cè)值54.53 6.27 10.58 5.75 5.23實(shí)施例4鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-3-甲基-9-[(2-嗎啉-4-基乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用2-[(芐氧基羰基)氨基]-2-甲基-3-(1H-3-吲哚基)-(2R)-丙酸作為底物，在步驟G中使用例2中所用的試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例5鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-3-甲基-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例4步驟A中所用的化合物作為底物，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例6鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-4,4-二甲基-9-[(2-嗎啉-4-基乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用2-[(芐氧基羰基)氨基]-3-甲基-3-(1H-3-吲哚基)-(2R)-丁酸作為底物，在步驟G中使用實(shí)施例2中所用的試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例7鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-4,4-二甲基-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例6中所用的底物，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例8:2-{[4-(4-吡啶氧基)苯基]磺?；鶀-9-[(2-嗎啉-4-基乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟D中使用4-(4-吡啶氧基)苯磺?；茸鳛樵噭诓襟EG中使用實(shí)施例2中所用的試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例9鹽酸2-{[4-(4-吡啶氧基)苯基]磺?；鶀-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟D中使用實(shí)施例8的試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例10鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-(2-[1,4’]-二哌啶-1’-基-2-氧-乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用[1,4’]-二哌啶作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CHNClS
％計(jì)算值57.62 6.24 10.84 5.49 4.96％實(shí)測(cè)值57.58 6.13 10.49 5.72 4.86實(shí)施例11鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-{[2-(2-嗎啉-4-基乙基sulphanyl)乙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用2-[(2-嗎啉代乙基)sulphanyl]乙胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CH NCl S％計(jì)算值52.13 5.73 10.48 5.31 9.60％實(shí)測(cè)值52.80 5.80 10.33 5.20 9.34實(shí)施例12鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-{[3-(3-嗎啉-4-基丙基sulphanyl)丙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用3-[(3-嗎啉代丙基)sulphanyl]丙胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析C HN Cl S％計(jì)算值53.486.0810.065.099.21％實(shí)測(cè)值53.106.049.60 5.058.95實(shí)施例13鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-9-{[2-(3-嗎啉-4-基丙基sulphanyl)乙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用2-[(3-嗎啉代丙基)sulphanyl]乙胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析C HN Cl S％計(jì)算值52.815.9110.265.209.40％實(shí)測(cè)值52.885.799.98 5.259.06
實(shí)施例14鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-9-{[3-(2-嗎啉-4-基乙基sulphanyl)丙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用3-[(2-嗎啉代乙基)sulphanyl]丙胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CH NCl S％計(jì)算值52.81 5.91 10.26 5.20 9.40％實(shí)測(cè)值53.35 5.88 10.12 5.21 9.11實(shí)施例15鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[N-甲基-(2-嗎啉-4-基乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用N-甲基-3-(氨基丙基)嗎啉作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CH NCl S％計(jì)算值54.06 5.83 11.26 5.70 5.15％實(shí)測(cè)值54.32 5.81 10.86 5.81 4.68實(shí)施例16:2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(2-磺乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用2-氨基乙磺酸作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
質(zhì)譜[M-H]-=565實(shí)施例17鹽酸2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(1,1-二甲基-(2-嗎啉-4-基)乙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟G中使用N-[(2-氨基-2-甲基)丙基]嗎啉作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
元素微量分析CH NCl S％計(jì)算值54.75 6.02 11.01 5.57 5.04％實(shí)測(cè)值55.16 6.22 11.17 5.36 4.78實(shí)施例18二鹽酸6-羥基-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(3-羧丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用N-芐氧基羰基-5-羥基-D-色氨酸作為底物，在步驟G中使用4-氨基丁酸作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例19鹽酸6-甲氧基-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-[(3-氨甲酰丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用N-芐氧基羰基-5-甲氧基-D-色氨酸作為底物，在步驟G中使用4-氨基丁酰胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例20鹽酸6-甲氧基-2-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-9-{[(4-(N,N-二甲基)氨甲酰)丁基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例19步驟A所用的底物，在步驟G中使用N,N-二甲基-5-氨基戊酰胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例21鹽酸6-甲氧基-2-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-9-{[3-(N-乙基)氨甲酰)丙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例19步驟A所用的底物，在步驟G中使用N-乙基-4-氨基丁酰胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例22二鹽酸6-羥基-2-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-9-[(4-氨基丁基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例18步驟A所用的底物，在步驟G中使用1,4-丁二胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例23:6-甲氧基-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-{[6-(N,N-二甲基)氨基己基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例19步驟A所用的底物，在步驟G中使用N1,N1-二甲基-1,6-己二胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例24鹽酸6-甲氧基-2-[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠-9-{[2-(N-丙基)氨基乙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用實(shí)施例19步驟A所用的底物，在步驟G中使用N1-丙基-1,2-乙二胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例25:2-(4-氟苯磺酰基)-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲酰)甲基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟D中使用4-氟苯磺?；茸鳛樵噭?，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例26:2-[(4-甲氧基苯)磺?；鵠-9-{[3-(2-甲基哌啶子基)丙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟E中使用1-(3-氨基丙基)-2-甲基哌啶作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例27:2-[(4-甲氧基苯)磺?；鵠-9-{[3-(羥基磺?；?丙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟E中使用3-氨基-1-丙磺酸作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例28:2-[(4-甲氧基苯)磺?；鵠-9-{[2-(2-氨基乙氧基)乙基氨甲酰]甲基}-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟E中使用2-(2-氨基乙氧基)-1-乙胺作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例29:2-[(4-甲氧基苯)磺酰基]-9-[(3-嗎啉-4-基丙基氨甲酰)乙基]-2,3,4,9-四氫-1H-β-咔啉-(3R)-(N-羥基)羧酰胺按照與實(shí)施例1所述相同的方法，在步驟A中使用1-溴丙酸叔丁酯作為試劑，得到預(yù)期產(chǎn)物。本發(fā)明化合物的藥理學(xué)研究實(shí)施例30對(duì)金屬蛋白酶的酶抑制作用四種重組人體MMP-1酶(細(xì)胞間質(zhì)膠原酶)、MMP-2酶(72kDa明膠酶A)、MMP-3酶(溶基質(zhì)素1)和MMP-9酶(92kDa明膠酶B)用APMA(乙酸4-氨基苯基汞)激活。
用一種擬肽底物進(jìn)行酶試驗(yàn)DnpProChaGlyCys(Me)HisAlaLys(Nma)NH2該底物在甘氨酸與半胱氨酸之間斷開，生成一種熒光衍生物(《分析生物化學(xué)》Anal.Bio chem.212,58-64,1993)。
在37℃下，用100μl總體積中的20μM底物引發(fā)反應(yīng)，反應(yīng)在pH7.7的50mM Tris、200mM NaCl、5mM CaCl2、0.1％Brij的緩沖系中進(jìn)行。六小時(shí)后，在熒光計(jì)的96孔板中測(cè)量所得熒光度，熒光計(jì)裝配了用于激發(fā)和發(fā)射的340nm和440nm濾波器的組合。
試驗(yàn)中，本發(fā)明化合物對(duì)MMP-1酶的IC50值表現(xiàn)為30至400nM，對(duì)MMP-2、MMP-3和MMP-9酶的IC50值表現(xiàn)為0.1至42nM。具體來(lái)說，實(shí)施例2化合物對(duì)MMP-1酶的IC50值表現(xiàn)為32.6nM，實(shí)施例11化合物對(duì)MMP-2、MMP-3和MMP-9酶的IC50值分別表現(xiàn)為1.6nM、3.1nM和0.1nM。
實(shí)施例31體外血管生成按照Nicosia和Ottinetti(1990)的方法，將8至12周齡的雄性Fischer 344大鼠的部分胸主動(dòng)脈浸漬在Ⅰ型膠原質(zhì)凝膠中。在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)五天后，用顯微鏡檢查制劑，通過數(shù)字化與圖象分析后的血管密度定量分析擬血管的生成。
作為舉例，當(dāng)在1μM下進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，實(shí)施例2、13與15的化合物抑制了50至100％的新血管生成。
實(shí)施例32藥物組合物用于制備1000片的配方(每片含有10mg活性成分)實(shí)施例1化合物………………………………………10g羥丙基纖維素…………………………………………2g
小麥淀粉………………………………………………10g乳糖……………………………………………………100g硬脂酸鎂………………………………………………3g滑石……………………………………………………3g
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)的化合物，其異構(gòu)體，及其與一種藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽
其中m代表一個(gè)1至4的整數(shù)，含1和4，n與p可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)0至4的整數(shù)，含0和4，X代表一個(gè)氧原子或硫原子或一根單鍵，R1代表一個(gè)氫原子、一個(gè)鹵原子、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷基、一個(gè)羥基、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)三鹵代烷氧基，R2、R3與R4可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，R5代表一個(gè)氫原子、一個(gè)鹵原子、一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、一個(gè)芳氧基或一個(gè)雜芳氧基，R6、R7與R8可以相同或不同，彼此獨(dú)立地代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或與連接基團(tuán)R6的氮原子以及連接基團(tuán)R7與R8的碳原子共同(R6與R7或R6與R8)構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)，其余的基團(tuán)(分別為R8或R7)具有上述含義之一，R9代表任一種下列基團(tuán)*-SO3H，*-CO2R10，其中R10代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，*-CO-NR11R12，其中R11與R12可以相同或不同，每個(gè)代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或者R11和R12與連接它們的氮原子共同構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)，*-NR13R14，其中R13與R14可以相同或不同，每個(gè)代表一個(gè)氫原子或一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，或者R13和R14與連接它們的氮原子共同構(gòu)成一個(gè)可選被取代的雜環(huán)。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于使用一種式(Ⅱ)的外消旋形式或純對(duì)映體形式的D-色氨酸化合物作為起始物質(zhì)，
其中R1、R2、R3和R4如式(Ⅰ)定義，吲哚環(huán)系的胺官能團(tuán)被一種式(Ⅲ)的鹵代化合物取代，Z-(CH2)m-CO2Ra(Ⅲ)其中m如式(Ⅰ)定義，Z代表一個(gè)鹵原子，Ra代表一個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，得到一種式(Ⅳ)化合物，
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，式(Ⅳ)化合物側(cè)鏈的胺官能團(tuán)被催化氫化反應(yīng)脫保護(hù)，得到一種式(Ⅴ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，該化合物在一種強(qiáng)酸和甲醛的存在下，環(huán)化得到一種式(Ⅵ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、Ra和m如上定義，該式(Ⅵ)化合物在一種堿性介質(zhì)中與一種式(Ⅶ)鹵化物縮合，
其中R5如式(Ⅰ)定義，Z代表一個(gè)鹵原子，得到一種式(Ⅷ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、Ra和m如上定義，該化合物在一種堿性介質(zhì)中且在二環(huán)己基碳二亞胺的存在下，與一種式(Ⅸ)的O-取代的羥胺縮合，H2N-O-R15(Ⅸ)其中R15代表一個(gè)烯丙基或芐基，得到一種式(Ⅹ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R15、Ra和m如上定義，該化合物的羧酸官能團(tuán)在例如三氟乙酸的存在下脫保護(hù)，得到一種式(Ⅺ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R15和m如上定義，該化合物與一種式(Ⅻ)的胺縮合，
其中R6、R7、R8、R9、n和p如式(Ⅰ)定義，得到一種式(ⅩⅢ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R15、m、n和p如上定義，式(ⅩⅢ)化合物的羥胺官能團(tuán)脫保護(hù)，得到一種式(Ⅰ)化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、m、n和p如上定義，該式(Ⅰ)化合物必要時(shí)按照常規(guī)精制技術(shù)進(jìn)行精制，適當(dāng)情況下按照常規(guī)分離技術(shù)分離為異構(gòu)體，需要時(shí)用一種藥學(xué)上可接受的酸或堿轉(zhuǎn)化為其加成鹽。
3．含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1的化合物作為活性成分的藥物組合物，單用或結(jié)合一或多種藥學(xué)上可接受的、惰性的、無(wú)毒的賦型劑或載體。
4．根據(jù)權(quán)利要求3的藥物組合物，該藥物組合物含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1的活性成分，用作金屬蛋白酶抑制劑。
全文摘要
式(Ⅰ)的化合物、其異構(gòu)體,及其與藥學(xué)上可接受的酸或堿所形成的加成鹽,其中,m代表1至4的整數(shù),含1和4,n與p代表0至4的整數(shù),含0和4,X代表O、S或單鍵,R
文檔編號(hào)A61K31/435GK1217332SQ9812231
公開日1999年5月26日 申請(qǐng)日期1998年11月13日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月14日
發(fā)明者G·德, 南提烏爾, G·萊蒙德, J·帕拉迪諾, G·阿塔希, A·皮埃爾, G·塔克, J·伯奈特, M·薩巴蒂尼 申請(qǐng)人:阿迪爾公司