專利名稱：雙環(huán)纖維蛋白原拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制血小板凝集的新的雙環(huán)化合物、含有這些化合物的藥物組合物和這些化合物的使用方法。
背景技術(shù)：
據(jù)信血小板凝集主要是由纖維蛋白原受體、或者GPIIb-IIIa血小板受體配合物介導(dǎo)的，該配合物是粘結(jié)受體中的一種，被稱作氧基哌吲哚。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)氧基哌吲哚受體的天然配體往往是含有Arg-Gly-Asp序列的蛋白。VolWillebrand因子和纖維蛋白原被認(rèn)為是GPIIb-IIIa受體的天然配體，在其主要結(jié)構(gòu)中具有Arg-Gly-Asp(單一字母氨基酸編碼為RGD)序列。這些蛋白質(zhì)的功能在于，它們能夠在鄰近的血小板上與GPIIb-IIIa受體結(jié)合和交聯(lián)，因此影響血小板的凝集。
粘連蛋白、vitronectin和糖蛋白G是含有RGD的蛋白，已表明該蛋白與GPIIb-IIIa結(jié)合。在血漿中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了粘連蛋白，并且發(fā)現(xiàn)其作為胞內(nèi)基質(zhì)中的結(jié)構(gòu)蛋白。該結(jié)構(gòu)蛋白與GPIIb-IIIa的結(jié)合可以引起血小板粘連，因此損傷血管壁。
在WO 89/05150(PCT US88/04403)中公開了與vitronectin結(jié)合并且含有RGD序列的直鏈和環(huán)狀肽。EP 0275748公開了與GPIIb-IIIa受體結(jié)合并且抑制血小板凝集的直鏈四肽或六肽和環(huán)狀六肽至八肽。在EP-A 0341915中報(bào)道了其他直鏈和環(huán)狀肽，所公開的內(nèi)容引入本文作為參考。但是，與這些抑制劑的結(jié)構(gòu)類似的肽常常在例如藥物釋放、代謝穩(wěn)定性和選擇性方法上存在問題。在EP-A 0372486、EP-A 0381033和EP-A 0478363中公開了不是由天然氨基酸序列構(gòu)成的纖維蛋白原受體抑制劑。WO 92/07568(PCT/US91/08166)公開了纖維蛋白原受體拮抗劑，它通過形成單環(huán)七元環(huán)結(jié)構(gòu)模擬RGD序列中的γ-反轉(zhuǎn)構(gòu)型。但是，仍然需要新的纖維蛋白原受體拮抗劑(例如GPIIb-IIIa蛋白抑制劑)，該拮抗劑具有體內(nèi)和體外作用，而不具有氨基酸序列的肽骨架結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明公開了新的雙環(huán)化合物，包括苯并吖庚因類和苯并二吖庚因類化合物，它們是GPIIb-IIIa受體抑制劑，并且抑制血小板凝集。某些5-苯基-1，4-苯并二吖庚因類化合物是已知的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用藥物，并且已經(jīng)用作抗焦慮藥。參見Sternbach，L.H.，J.Med.Chem.，22，2(1979)。本發(fā)明還公開了某些5-苯基-1，4-苯并二吖庚因類化合物拮抗縮膽囊素的作用。參見Friedinger，Med.Res.Rev.，9，271(1989)。在WO 93/08174(PCT/US92/08788)、WO 93/00095(PCT/US92/05463)和口WO 94/14776(PCT/US93/12436)中公開了某些具有纖維蛋白原拮抗活性的雙環(huán)化合物。
發(fā)明概述本發(fā)明一方面是下文所公開的抑制血小板凝集的化合物。
本發(fā)明還涉及抑制血小板凝集或血塊形成的藥物組合物，該組合物含有本發(fā)明化合物和可藥用載體。
本發(fā)明還包括下文所述化合物在制備抑制血小板凝集的藥物中的應(yīng)用。
另一方面，本發(fā)明提供了抑制纖維蛋白溶解治療或血管成形術(shù)后哺乳動(dòng)物的靜脈或動(dòng)脈再閉合的方法，該方法包括內(nèi)服有效量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還涉及治療中風(fēng)、短時(shí)局部缺血發(fā)作或心肌梗塞的方法。
發(fā)明詳述盡管不受任何特定的作用機(jī)理限制，據(jù)信本發(fā)明化合物抑制纖維蛋白原與血小板結(jié)合纖維蛋白原受體GPIIb-IIIa的結(jié)合，并且可以借助假定的RGD結(jié)合位點(diǎn)的拮抗作用與其他粘合蛋白相互作用。
本發(fā)明化合物為式(I)所包括 其中A1是NH或CH2。
R是H、C1-6烷基、芐基或羧基保護(hù)基。優(yōu)選R是H。
R3是H、C1-6烷基、C3-6鏈烯基、Ar-C0-6烷基、C3-7環(huán)烷基C0-6烷基、或Het-C0-6烷基。尤其是R3可以是氫、甲基、異丙基、正丁基、異戊基、2，2-二甲基丁基、芐基、苯乙基、苯戊基、2-噻吩基乙基、或環(huán)己基乙基。
R6是4-脒基-Ar-N(CH3)CO、4-脒基-Ar-CONH、[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基、(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基、[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基、[[[3-(4-哌啶基]丙基]甲氨基]羰基、1-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基、[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基、[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基、[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基、或[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基。
X是H、C1-4烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、三氟烷基、N(R’)2、CO2R’、CON(R’)2、OH、F、Cl、Br或I。優(yōu)選X為H。
本發(fā)明還包括可藥用加成鹽、配合物或本發(fā)明化合物的前藥。前藥被認(rèn)為是共價(jià)結(jié)合的載體，該載體在體內(nèi)釋放出式(I)活性母體藥物。
在一個(gè)小組中，A1是NH并且形成優(yōu)選在8位被取代的1，4-苯并二吖庚因，R6是[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基、[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基或[[4-(氨基亞氨基甲基)-3-氟苯基]甲氨基]羰基。優(yōu)選R6為[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基。
在另一個(gè)小組中，A1是NH并且形成優(yōu)選在7位被取代的1，4-苯并二吖庚因，R6是(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基、[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基、[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基、[[[3-(4-哌啶基]丙基]甲氨基]羰基、1-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基或[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基。優(yōu)選R6為(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基。
在另一個(gè)小組中，A1是CH2并且形成優(yōu)選在7或8位被取代的2-苯并吖庚因，R6是(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基、[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]甲氨基、[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基或[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是 和 其中，如果X是H，R3不是苯乙基或者，僅僅對(duì)于(III)而言，R3不是環(huán)己基乙基。其中X是H并且R3是苯乙基或環(huán)己基乙基的這些化合物在WO 94/14776中已有描述，并且不是本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明的一般化合物包括(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)-3-氟苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[[[1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(4-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-丁基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；2-芐基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸酯；2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(5-苯戊基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸酯；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異戊基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-(3，3-二甲基丁基)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-環(huán)己基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-[2-(4-氟苯基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-丙酸；(+)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(-)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸鈉；(R)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-7-[4-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基]-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-[2-(2-噻吩基)乙基]-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[[3-(4-哌啶基)丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-7-[[[3-(4-哌啶基)丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-2，3，4，5-四氫-4-(2-苯乙基)-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；和(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]甲氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。
特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-甲基-8-[[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸鈉；(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸。
其中R3是H或C1-4烷基(特別是H、甲基或丙基)的本發(fā)明化合物具有特別有利的藥理學(xué)和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
除非另外指明，在任何一處出現(xiàn)的任何取代基的含義與在任何其他地方出現(xiàn)的任何其他取代基的含義是無依賴關(guān)系的。除非另外指明，當(dāng)本發(fā)明化合物具有一個(gè)或多個(gè)手性中心時(shí)，本發(fā)明包括每一個(gè)可以合成和通過常規(guī)技術(shù)拆分的非外消旋化合物。一般來說，在連接有乙酸基的手性環(huán)碳原子處具有S構(gòu)型的化合物是優(yōu)選的。
在本文中使用肽和化學(xué)領(lǐng)域常用的縮寫和符號(hào)描述本發(fā)明化合物。一般來說，氨基酸的縮寫采用Eur.J.Biochem.，158，9(1984)中所述的IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature。
本文所用的C1-4烷基意指包括任意取代的甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和叔丁基。C1-6烷基此外還包括戊基、正戊基、異戊基、新戊基和己基及其簡(jiǎn)單的脂族異構(gòu)體。C0-4烷基和C0-6烷基此外還表示不需存在烷基(例如存在一個(gè)共價(jià)鍵)。
本文所用的C3-6鏈烯基意指任意取代的3-6個(gè)碳原子的烷基，其中一個(gè)碳-碳單鍵被碳-碳雙鍵取代。C3-6鏈烯基包括1-丙烯、2-丙烯、1-丁烯、2-丁烯、異丁烯和幾個(gè)異構(gòu)的戊烯和己烯基。包括所有的順式和反式異構(gòu)體。
本文所用Ar或芳基意指苯基或萘基，或者是指被1-3個(gè)X基團(tuán)取代的苯基或萘基。尤其是，X可以是H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、三氟烷基、N(R’)2、CO2R’、CON(R’)2、OH、F、Cl、Br或I。
C1-6烷基或C3-6鏈烯基上的取代基，例如X可以在任何一個(gè)可以導(dǎo)致結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的碳原子上，并且可以通過常規(guī)合成技術(shù)得到。
Het或雜環(huán)是指任意被取代的、含有1-3個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的五元或六元單環(huán)或九或十元雙環(huán)，這些雜環(huán)是穩(wěn)定的，并且可以通過常規(guī)化學(xué)方法合成。所述雜環(huán)是例如苯并呋喃、苯并咪唑、苯并吡喃、苯并噻喃、呋喃、咪唑、二氫吲哚、嗎啉、哌啶、哌嗪、吡咯、吡咯烷、四氫吡啶、吡啶、噻唑、噻吩、喹啉、異喹啉和四氫-、六氫-喹啉和異喹啉。任何在Het環(huán)上最多達(dá)三個(gè)取代基，例如選自X的可能的組合可以通過化學(xué)方法合成獲得，并且在本發(fā)明范圍內(nèi)是穩(wěn)定的。
C3-7環(huán)烷基是指具有3-7個(gè)碳原子的任意被取代的碳環(huán)系統(tǒng)，它最多可以含有2個(gè)不飽和的碳-碳鍵。典型的C3-7環(huán)烷基是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、和戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基和環(huán)庚基。任何在環(huán)烷基環(huán)上最多達(dá)三個(gè)取代基(例如選自X)的可能的組合可以通過化學(xué)合成方法獲得，并且在本發(fā)明范圍內(nèi)是穩(wěn)定的。
t-Bu是指叔丁基，Boc是指叔丁氧羰基，F(xiàn)moc是指芴基甲氧羰基，Ph是指苯基，Cbz是指芐氧羰基，BrZ是指鄰溴芐氧羰基，CIZ是指鄰氯芐氧羰基，Bzl是指芐基，4-MBzl是指4-甲基芐基，Me是指甲基，Et是指乙基，Ac是指乙?；?，Alk是指C1-4烷基，Nph是指1-或2-萘基，并且chex是指環(huán)己基。
DCC是指二環(huán)己基碳化二亞胺，DMAP是指4-(二甲氨基)吡啶，DIEA是指二異丙基乙基胺，EDC是指N-乙基-N’-(二甲氨基丙基)碳化二亞胺。HOBt是指1-羥基苯并三唑，THF是指四氫呋喃，DMF是指二甲基甲酰胺，NBS是指N-溴琥珀酰亞胺，Pd/C是指披鈀碳催化劑，PPA是指1-丙烷膦酸環(huán)酐，DPPA是指二苯基磷?；B氮化物，BOP是指六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)鏻，HF是指氫氟酸，TEA是指三乙胺，TFA是指三氟乙酸，PCC是指氯鉻酸吡啶鎓。
通過以任何順序用試劑處理結(jié)構(gòu)如下的化合物可以制備本發(fā)明化合物 其中A1、X、R和R3如上所定義，并且R6’是其中任何堿性氮原子被保護(hù)的R6基團(tuán)，(i)從R6’基團(tuán)除去氨基保護(hù)基；并且如果需要，(ii)從CO2R基團(tuán)除去羧基保護(hù)基；和(iii)形成其可藥用鹽。
R6’的典型實(shí)例是其中脒基、氨基或哌啶基被芐氧基、叔丁氧羰基或三氟乙?；Ｗo(hù)的R6基團(tuán)。
通常通過式(XI)化合物與式(XII)化合物反應(yīng)制備式(IV)化合物 R6″-L2(XI) (XII)其中A1和R3如對(duì)式(I)所定義，其中所有的活性官能團(tuán)均被保護(hù)，R是C1-6烷基、芐基或羧基保護(hù)基，L1是CO2H或NHR’，其中R’是H或C1-4烷基、特別是甲基。
L1和L2是能夠通過反應(yīng)形成酰胺鍵的官能團(tuán)。如果L1是CO2H，那么L2是堿性含氮基團(tuán)，例如氨基、甲氨基或哌啶基氮。例如R6″-L2是4-脒基-Ar-NHR’、2-(4-哌啶基)(N-甲基)乙胺、4-(4-哌啶基)哌啶、4-(2-氨基乙基)哌啶、3-(4-哌啶基)丙基(N-甲基)胺、4-(4-吡啶基)哌嗪、2-(2-氨基-哌啶-4-基)乙基(N-甲基)胺或(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)胺，其中無活性的脒基、哌啶基或氨基的堿性氮被氨基保護(hù)基保護(hù)。
如果L1是NHR’，那么L2是羧酸基，例如R6″-L2是3-(4-哌啶基)丙酸或4-脒基-Ar-CO2H，其中哌啶基或脒基的堿性氮是被保護(hù)的。
式(XI)化合物是苯并二吖庚因類和苯并吖庚因類化合物，并且通過本領(lǐng)域已知的一般方法制備，例如按照WO 93/00095(PCT/US/92/05463)和WO94/14776(PCT/US93/12436)所述方法制備，這兩篇文獻(xiàn)引入本文作為參考。式(XII)化合物通常含有兩個(gè)堿性中心，其中一個(gè)是被保護(hù)的，并且對(duì)于本領(lǐng)域來說同樣是已知的。參見例如WO94/14776。
本文所用的偶合劑是指那些可以用于形成酰胺鍵的試劑。典型的偶合方法使用碳化二亞胺、活化的酸酐和酯及酰鹵。典型的試劑是例如EDC、DCC、DPPA、PPA、BOP試劑、HOBt、N-羥基琥珀酰亞胺和草酰氯。
形成酰胺鍵的偶合方法通常是本領(lǐng)域眾所周知的。Bodansky等的THEPRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS，Springer-Verlag，Berlin，1984，Ali等，J.Med.Chem.，29，984(1986)和J.Med.Chem.，30，2291(1987)中一般列舉的肽合成方法一般性地說明了該技術(shù)，這些文獻(xiàn)均引入本文作為參考。
形成酰胺鍵的溶液合成采用用于形成酰胺鍵的常規(guī)方法完成。通常，使用合適的碳化二亞胺偶合劑例如N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)或EDC，任選地在催化劑例如1-羥基苯并三唑(HOBt)和二甲氨基吡啶(DMAP)存在下，通過胺或苯胺的游離氨基將其與合適的羧酸底物偶合。其他方法，例如形成適當(dāng)保護(hù)的酸底物的羧基的活化酯、酸酐或酰鹵，然后任選地在堿存在下與適當(dāng)保護(hù)的胺的游離胺反應(yīng)也是適用的。例如，在無水溶劑例如二氯甲烷或四氫呋喃(THF)中，在堿例如N-甲基嗎啉、DMAP或三烷基胺存在下，用了甲酸異丁酯處理被保護(hù)的Boc-氨基酸或Cbz-脒基苯甲酸，形成“活化的酸酐”，然后將其與第二個(gè)被保護(hù)的氨基酸或苯胺的游離胺反應(yīng)。
每個(gè)合成片段側(cè)鏈的活性官能團(tuán)按照本領(lǐng)域己知的方法適當(dāng)保護(hù)。合適的保護(hù)基公開于Greene，PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC CHEMISTRY，JohnWiley and Sons，New York，1981中。例如，Boc、Cbz、鄰苯二甲?；騀moc基團(tuán)可以用于保護(hù)氨基(或者哌啶基的氮)或脒基。一般來說，Boc基團(tuán)優(yōu)選用于保護(hù)氨基。甲基、乙基、叔丁基、cHex、芐基、取代的芐基、(新戊酰)甲基或(2-甲基-2-甲氧基丙酰)甲基酯可以用于保護(hù)羧基。芐基或適當(dāng)取代的芐基(例如4-甲氧基芐基或2，4-二甲氧基芐基)用于保護(hù)巰基或羥基。甲苯磺酰基可以用于保護(hù)咪唑基，并且甲苯磺酰基或硝基用于保護(hù)胍基。適當(dāng)取代的芐酯基或芐基也可以用于保護(hù)羥基或氨基。適當(dāng)取代的芐酯基或芐基保護(hù)基是被氯、溴、硝基、甲氧基或甲基鄰和/或?qū)ξ蝗〈?，并且適用于改變保護(hù)基的活性。除了Boc基團(tuán)之外，最方便的是，氨基保護(hù)基不會(huì)被中等酸處理除去。通過本領(lǐng)域已知的如催化氫化、液氨中的鈉或HF處理等方法可以除去這些保護(hù)基。
羧基或氨基保護(hù)基的去除方法是本領(lǐng)域眾所周知的。例如，通過堿性水解，例如在合適的溶劑如醇的水溶液中，用堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰水解，可以除去烷基或環(huán)烷基酯。芐基酯通常是通過在鈀催化劑上氫化除去。被叔丁氧羰基或叔丁基酯保護(hù)的堿性氮通常是通過用酸處理除去，例如用任意用溶劑如二氯甲烷和/或二噁烷稀釋的三氟乙酸或鹽酸處理。芐氧羰基一般是通過在鈀催化劑上氫化除去。三氟乙酰基通常是通過堿性水解除去，例如用在合適溶劑中的堿金屬氫氧化物處理。一種適合的保護(hù)哌啶基堿性氮的合成方法是通過如哌啶基的合成方法載帶可以被鉑催化劑還原、并且在合成的最后被“除去”的保護(hù)基團(tuán)。
本發(fā)明化合物的酸加成鹽是在合適的溶劑和過量的酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、馬來酸、琥珀酸或甲磺酸中，由母體化合物制備的。多數(shù)這些化合物形成可以被接受的內(nèi)鹽或兩性離子化合物。通過用過量的堿性試劑例如含有合適的陽離子的氫氧化物、碳酸鹽或醇鹽；或者用合適的有機(jī)堿處理母體化合物可以制備陽離子鹽。陽離子例如Li+、Na+、K+、Ca++、Mg++和NH4+是可藥用鹽中存在的陽離子的具體實(shí)例。
本發(fā)明提供了含有式(I)化合物和可藥用載體的藥物組合物。因此，式(I)化合物可以用于制備藥物。如上所述的式(I)化合物的藥物組合物可以配制成非腸道用溶液或凍干粉。粉劑可以在使用前通過加入合適的稀釋劑或其他可藥用載體進(jìn)行配制。液體制劑可以是緩沖、等滲的水溶液。適合的稀釋劑的實(shí)例是等滲生理鹽水溶液、標(biāo)準(zhǔn)的5％葡萄糖水溶液或緩沖的乙酸鈉或乙酸銨溶液。該制劑特別適合于經(jīng)非腸道給藥，但是也可用于口服或者包含在計(jì)量劑量的吸入器或噴霧器中供吹入給藥用。還可以加入賦形劑例如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、羥基纖維素、阿拉伯膠、聚乙二醇、甘露糖醇、氯化鈉或檸檬酸鈉。
或者，可以將這些化合物包封在膠囊中、壓成片或制備成供口服的乳液或糖漿?？梢约尤肟伤幱玫墓腆w或液體載體以加強(qiáng)或穩(wěn)定該組合物，或者便于制備該組合物。固體載體包括淀粉、乳糖、二水合硫酸鈣、石膏粉、硬脂酸鎂或硬脂酸、滑石、果膠、阿拉伯膠、瓊脂或明膠。液體載體包括糖漿、花生油、橄欖油、鹽水和水。載體還可以包括持續(xù)釋放物質(zhì)例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，其單獨(dú)使用或與蠟結(jié)合使用。固體載體的量是可以變化的，但是優(yōu)選的是每劑量單位含約20毫克至約1克。該藥物制劑按照制藥領(lǐng)域常規(guī)的技術(shù)進(jìn)行制備，對(duì)于片劑形式，包括研磨、混合、造粒和需要時(shí)壓制；或者對(duì)于硬明膠膠囊形式，包括研磨、混合和填充。當(dāng)使用液體載體時(shí)，該制劑將是糖漿、酏劑、乳液或含水或非水懸浮液。該液體制劑可以直接經(jīng)口服用，或者填充到軟明膠膠囊中。
對(duì)于直腸給藥來說，本發(fā)明組合物還可以與賦形劑例如可可脂、甘油、明膠或聚乙二醇混合，并鑄模形成栓劑。
本發(fā)明化合物可以在體外抑制血液和血液產(chǎn)品中的血小板凝集，例如在貯藏過程中，或者用于離體處理例如用于診斷、治療或研究。
本發(fā)明還提供了抑制哺乳動(dòng)物、特別是人的血小板凝集和血塊形成的方法，該方法包括內(nèi)服式(I)化合物和可藥用載體。這些治療的適應(yīng)癥包括急性心肌梗塞(AMI)、深度靜脈血栓形成、肺栓塞、壁間動(dòng)脈瘤、短時(shí)局部缺血發(fā)作(TIA)、中風(fēng)和其他與梗塞有關(guān)的疾病和不穩(wěn)定的絞痛。本發(fā)明化合物還適用于預(yù)防血管成形術(shù)后哺乳動(dòng)物動(dòng)脈或靜脈的再狹窄。慢性或急性聚集力過強(qiáng)，例如播散性血管內(nèi)凝集(DIC)、敗血病、外科手術(shù)或傳染性休克、手術(shù)后和產(chǎn)后損傷、心肺分流術(shù)、不相容的輸血、胎盤早期脫離、血栓形成性血小板減少性紫癜(TTP)、蛇毒和免疫疾病同樣對(duì)該治療產(chǎn)生應(yīng)答。據(jù)信這些化合物還適用于血管成形術(shù)后的附帶治療。此外，本發(fā)明化合物可用于治療或預(yù)防轉(zhuǎn)移疾病，預(yù)防或治療真菌或細(xì)菌感染，誘發(fā)免疫刺激，治療鐮刀細(xì)胞疾病，和預(yù)防或治療骨吸收為起因的疾病，例如骨質(zhì)疏松。
本發(fā)明化合物與其他抑制血小板凝集的藥物一起服用也是有利的。例如，本發(fā)明化合物可以與環(huán)氧合酶抑制劑類化合物、血栓烷拮抗劑、血栓烷合成酶抑制劑、肝素、凝血酶抑制劑、ADP受體抑制劑/拮抗劑和噻氯匹定一起服用。這類藥物的實(shí)例是阿司匹林、芐丙酮香豆素和氯吡格雷。
該肽以血漿中藥物的濃度足以抑制血小板凝集或其他適應(yīng)癥的方式，或者經(jīng)口服用、或者經(jīng)非腸道給藥。含有肽的藥物組合物以和患者的疾病相容的方式、以約0.2-約50毫克/公斤的劑量施用。對(duì)于急性病的治療，優(yōu)選非腸道給藥。對(duì)于持續(xù)的凝集力過強(qiáng)癥狀，盡管肌內(nèi)注射濃縮藥團(tuán)就足夠了，但是最有效的是靜脈輸注在5％葡萄糖水溶液或生理鹽水中的肽。
對(duì)于慢性的、但是不危急的血小板凝集能力的癥狀，口服膠囊或片劑、或者肌內(nèi)注射濃縮藥團(tuán)是適合的。該化合物以約0.4-約50毫克/公斤的劑量每天服用1-4次，達(dá)到約0.4-約200毫克/公斤/天的總?cè)談┝俊?br> 本發(fā)明還提供了抑制纖維蛋白溶解治療后動(dòng)脈或靜脈再閉合或再狹窄的方法，該方法包括內(nèi)服式(I)化合物和纖維蛋白溶解劑。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在纖維蛋白溶解治療中施用一種化合物或者可以完全預(yù)防再閉合，或者延長(zhǎng)再閉合的時(shí)間。
當(dāng)用于本發(fā)明中時(shí)，術(shù)語纖維蛋白溶解藥物意指可直接或間接引起纖維蛋白塊溶解的任何化合物，它們可以是天然的或合成的。纖維蛋白溶酶原活化劑是眾所周知的一組纖維蛋白溶解藥。有用的纖維蛋白溶酶原活化劑包括，例如anistreplase、尿激酶(UK)、尿激酶原(pUK)、鏈激酶(SK)、組織纖維蛋白溶酶原活化劑(tPA)及其突變體或變異體，這些突變體或變異體保持了纖維蛋白溶酶原活化劑的活性，例如經(jīng)化學(xué)修飾的變異體，或者其中加入、減少或取代了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的變異體，或者其中一個(gè)或多個(gè)官能區(qū)被加入、減少或改變的變異體，例如通過一個(gè)纖維蛋白溶酶原活化劑的活性位點(diǎn)與另一個(gè)纖維蛋白溶酶原活化劑的纖維蛋白結(jié)合區(qū)或纖維蛋白結(jié)合分子的結(jié)合而改變。其他說明性的變異體包括其中一個(gè)或多個(gè)糖基化位點(diǎn)被改變的tPA分子。優(yōu)選的纖維蛋白溶酶原活化劑是其中的主要氨基酸序列在生長(zhǎng)因子區(qū)被改變以增加纖維蛋白溶酶原活化劑的血清半衰期的tPA的變異體。例如Robinson等在EP-A 0297589和Browne等在EP-A 0240334中公開了tPA生長(zhǎng)因子變異體。其他變異體包括雜交蛋白，例如EP 0028489、EP 0155387和EP0297882中公開的那些，所有這些文獻(xiàn)均引入本文作為參考。Anistreplase是優(yōu)選用于本發(fā)明的雜交蛋白。纖維蛋白溶解藥可以從天然來源中分離，但是通常是通過傳統(tǒng)的基因工程方法生產(chǎn)的。
例如，在EP-A 0211592、EP-A 0092182和US 4568543中公開了tPA、SK、UK和pUK的適用的制劑，所有這些文獻(xiàn)均引入本文作為參考。通常纖維蛋白溶解藥可以配制成含水緩沖的等滲溶液，例如用乙酸鈉或乙酸銨或己二酸鈉或己二酸銨緩沖至pH為3.5-5.5。還可以加入其他的賦形劑，例如聚乙烯吡咯烷酮、凝膠、羥基纖維素、阿拉伯膠、聚乙二醇、甘醇、甘露糖醇和氯化鈉?？梢詫⑦@樣的組合物凍干。
可以將該藥物組合物配制成式(I)化合物與纖維蛋白溶解藥在同一容器中，但是優(yōu)選將其配制在不同的容器中。當(dāng)兩種藥物以溶液的形式提供時(shí)，它們可以包含在輸注/注射系統(tǒng)中以同時(shí)或先后施用。
這些治療的適應(yīng)癥包括心肌梗塞、深度靜脈血栓形成、肺栓塞、中風(fēng)和其他與梗塞有關(guān)的疾病。在經(jīng)非腸道施用tPA或其他纖維蛋白溶解藥之前、同時(shí)、或之后施用該化合物?？梢宰C明，可期望在再灌注形成之后用該化合物連續(xù)治療足夠的時(shí)間以最大限度地抑制治療后再閉合。tPA、SK、UK或pUK的有效劑量可以是0.5-5毫克/公斤，肽的有效劑量可以是約0.1-25毫克/公斤。
為了便于該抑制劑和纖維蛋白溶解藥同時(shí)或不同時(shí)給藥，制備一個(gè)藥盒，該藥盒包括一個(gè)單一的容器，例如盒、紙板或其他容器、獨(dú)立的瓶、袋、小瓶或其他容器，每個(gè)容器含有如上所述的供非腸道給藥的有效量的抑制劑和如上所述的供非腸道給藥的有效量的tPA或其他纖維蛋白溶解藥。這種藥盒可以含有例如于獨(dú)立的容器或同一容器中的兩種藥物，任選地為凍干物，并且含有供再配制用的溶液。此藥盒的變化的形式是其在單一容器的兩個(gè)室中包括供再配制用的溶液和凍干物，它們可以在使用前混合。按照這種方式，可以將纖維蛋白溶解藥和本發(fā)明化合物分別包裝在兩個(gè)容器中，或者以粉末的形式凍干在一起并以單一容器的形式出現(xiàn)。
當(dāng)兩種藥物以溶液的形式出現(xiàn)時(shí)，它們可以包含在輸注/注射系統(tǒng)中供同時(shí)或先后施用。例如，靜脈注射形式或輸注袋形式的血小板凝集抑制劑通過插管按順序與第二個(gè)輸注袋中的纖維蛋白溶解藥連結(jié)在一起。采用這種系統(tǒng)，患者可以開始時(shí)接受的藥團(tuán)形式的該抑制劑的注射或輸注，然后輸注纖維蛋白溶解藥。
本發(fā)明化合物的藥理活性可通過其抑制3H-SK&F 107260(一種已知的RGD-纖維蛋白原拮抗劑)與GPIIbIIIa受體的結(jié)合能力進(jìn)行評(píng)價(jià)；它們能夠體外抑制血小板凝集，并且能夠體內(nèi)抑制血栓形成。抑制RGD-介導(dǎo)的GPIIb-IIIa結(jié)合按照WO 93/00095(PCT/US/92/05463)所公開的方法，通過對(duì)該化合物抑制3H-SK&F 107260(一種已知的RGD-纖維蛋白原拮抗劑)與GPIIbIIIa受體的結(jié)合能力的評(píng)價(jià)證明了RGD-介導(dǎo)的GPIIb-IIIa結(jié)合抑制作用。抑制血小板凝集按照WO 93/00095(PCT/US/92/05463)所公開的方法證明血小板凝集的抑制作用。
本發(fā)明化合物通常抑制由ADP刺激的人血小板凝集的IC50值小于0.1uM。實(shí)施例7、22、23和26化合物的IC50值為0.2-11uM，實(shí)施例4化合物的IC50值為約75uM。優(yōu)選的化合物的IC50值小于0.04uM。
為了評(píng)價(jià)該化合物對(duì)血漿蛋白酶的穩(wěn)定性，在加入興奮藥之前將該化合物在PRP中培養(yǎng)3小時(shí)(而非3分鐘)。體內(nèi)抑制血小板凝集按照Aiken等在Prostaglandins，19，629(1980)中所述的方法，通過記錄給麻醉的狗輸注該化合物的全身和血液動(dòng)力學(xué)效應(yīng)證明體內(nèi)抑制血栓形成。或者，按照Nichols等在J.Pharmacol.Exp.Ther.，270，614(1994)中所公開的方法可以測(cè)定血栓形成抑制作用和生物利用度。
下列實(shí)施例并非意在以任何方式限制本發(fā)明的范圍，而是說明如何制備和使用本發(fā)明化合物。對(duì)于本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員來說，許多其他的實(shí)施方案將是顯而易見的和容易實(shí)現(xiàn)的。
實(shí)施例在實(shí)施例中，所有的溫度均為攝氏度。質(zhì)譜是采用快原子轟擊(FAB)或電噴霧(ES)離子化進(jìn)行的。熔點(diǎn)是在Thomas-Hoover毛細(xì)熔點(diǎn)裝置中測(cè)定的，并且未經(jīng)校正。
除非另外指明，NMR是在250MHz、用Bruker AM 250光譜儀記錄的。化學(xué)遷移是以從四甲基甲硅烷開始的下游(downfield)的ppm(δ)值表示的。NMR譜的峰裂數(shù)如下表示s＝單峰，d＝雙峰，t＝三峰，q＝四峰，m＝多峰，dd＝雙雙峰，dt＝雙三峰等，并且br表示寬單峰。J表示NMR偶合常數(shù)，以合赫茲表示。
Celite是由酸洗滌的硅藻土組成的過濾助劑，其由Mansville Corp.，Denver，Colorado.注冊(cè)商標(biāo)。Florisil是活化的硅酸鎂色譜載體，并且由Floridon Co.，Pittsburgh，Pennsylvania注冊(cè)商標(biāo)。Analtech硅膠GF和EM硅膠薄層板用于進(jìn)行薄層色譜。閃式色譜和重力色譜在Merck 60(230-400目)硅膠上進(jìn)行。ODS是指八癸基甲硅烷基衍生的硅膠色譜載體。AN/W-TFA是指含有0.1％TFA的所示百分?jǐn)?shù)的乙腈水溶液的權(quán)利平等主義(isocratic)洗脫系統(tǒng)。5μApex-ODS是指具有5μ公稱粒度的八癸基甲硅烷衍生的硅膠載體，由Jones Chromatography，Littleton，Colorado生產(chǎn)。YMC ODS-AQ是ODS色譜載體，并且由YMC Co.Ltd.，Kyoto，Japan注冊(cè)商標(biāo)。PRP-1是聚合(苯乙烯-二乙烯基苯)色譜載體，并且由Hamilton Co.，Reno，Nevada注冊(cè)商標(biāo)。
制備1制備N-甲基-2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙胺a)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺在0℃攪拌N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺(10克，74毫摩爾)在二氯甲烷(250毫升)中的溶液，并用二碳酸二叔丁基酯(16克，74毫摩爾)和三乙胺(10.2毫升，74毫摩爾)處理。將該混合物攪拌24小時(shí)，用氯仿稀釋，用5％碳酸氫鈉洗滌。將有機(jī)相干燥并濃縮，得到標(biāo)題化合物。b)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-(4-哌啶基)乙胺將制備1(a)的化合物(4.4克，18毫摩爾)在乙醇(30毫升)中的溶液冷卻到0℃，用3N鹽酸(6毫升)調(diào)節(jié)pH至5，用氧化鉑(350毫克)處理，并與氫氣一起振搖2小時(shí)。該混合物經(jīng)硅藻土過濾，用10％氫氧化鈉(4毫升)處理濾液并濃縮，得到標(biāo)題化合物。c)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙胺將制備1(b)的化合物(4.4克，18毫摩爾)和三乙胺(2.5毫升，18毫摩爾)在二甲基甲酰胺(100毫升)中的混合物在0℃攪拌，并用N-(芐氧羰基)琥珀酰亞胺(4.4克，18毫摩爾)處理。該混合物在室溫?cái)嚢?5小時(shí)，濃縮，并將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，80％乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物(5.2克，77％)。d)N-甲基-2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙胺用TFA(5毫升)處理制備1(c)的化合物(2.2克，5.8毫摩爾)在二氯甲烷(15毫升)中的溶液，并攪拌2.5小時(shí)。該混合物用氯仿稀釋，用10％氫氧化鈉洗滌，洗滌有機(jī)相、干燥并濃縮。殘余物用甲苯處理并濃縮，得到標(biāo)題化合物。
制備2制備4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]-3-氟-N-甲基苯胺a)2-氟-4-(甲氨基)芐腈向2-氟-4-氨基芐腈[Ind.Chim.Belg.，39，490-500(1974)](3.8克，28毫摩爾)在無水原甲酸三乙酯(50毫升)中的溶液中加入三氟乙酸(0.16克，1.4毫摩爾)。將該溶液加熱回流45分鐘，冷卻并濃縮，得到黃色晶狀固體。在0℃向該固體在無水乙醇(60毫升)中的溶液中加入硼氫化鈉(3.2克，84毫摩爾)。在室溫?cái)嚢杷脩腋∫?0分鐘，加熱回流1小時(shí)，冷卻并濃縮，得到無色固體。該殘余物在乙醚和水之間分配，用乙醚萃取水層。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌并干燥(硫酸鈉)。濃縮得到白色固體，將其在35％乙酸乙酯∶己烷(200毫升)中制漿并過濾，得到標(biāo)題化合物(3.7克，88％)。mp 110-112℃；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35(m，1H)，6.4(dd，1H)，6.3(dd，1H)，2.9(s，3H).b)2-氟-4-(甲氨基)-[N-(芐氧羰基)]芐脒在0℃、用5分鐘，向氯化銨(3.8克，72毫摩爾)在無水甲苯(40毫升)中的懸浮液中滴加三甲基鋁在甲苯(2.0M，72毫摩爾)中的溶液。在室溫?cái)嚢柙撊芤?5分鐘。一次加入制備2(a)的化合物(3.6克，24毫摩爾)，并在80℃加熱所得溶液22小時(shí)，冷卻并倒入硅膠(120克)和氯仿(350毫升)漿中。將此漿料攪拌45分鐘，過濾并用甲醇(700毫升)洗滌濾餅。將濾液濃縮成黃色固體，并將該固體溶于THF和水的混合物中。在0℃，向該溶液中加入5M氫氧化鈉(14毫升，75毫摩爾)，然后用5分鐘滴加氯甲酸芐酯(4.1克，24毫摩爾)。將冷卻的該溶液攪拌30分鐘并濃縮。所得含水懸浮液用二氯甲烷萃取，然后用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到黃色固體，該固體經(jīng)色譜凈化(硅膠，2％甲醇∶二氯甲烷)，得到白色粉末狀的標(biāo)題化合物(2.6克，34％)。mp 128-30℃.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.2(t，1H)，7.5-7.25(m，5H)，6.4(dd，1H)，6.25(dd，1H)，5.2(s，2H)，4.6(b，1H)，2.8(d，3H).
制備3制備N2-(叔丁氧羰基)-7-氨基-1，2，3，4-四氧異喹啉a)7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉向7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹諾酮(1.50克，7.8毫摩爾)在THF(15毫升)中的混合物中滴加在THF(9.0毫升，18毫摩爾)中的2M甲硫化硼烷。添加完成后，將該澄清的溶液加熱回流4小時(shí)。將該溶液冷卻至室溫，向該溶液中鼓入無水氯化氫氣體至pH2。將該溶液加熱至回流1.5小時(shí)，冷卻至0℃，用乙醚稀釋。過濾所得白色固體并真空干燥，得到標(biāo)題化合物(1.62克，76％)。MS(ES)m/e179[M＋H]+。b)N2-(叔丁氧羰基)-7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉通過加入三乙胺將制備3(a)化合物(1.0克，5.6毫摩爾)、二碳酸二丁酯(1.8克，8.4毫摩爾)和4-(二甲氨基)吡啶(342毫克，2.8毫摩爾)在二氯甲烷(50毫升)中的溶液調(diào)節(jié)至pH8.0。4小時(shí)后，將所得溶液濃縮，并將殘余物溶于乙酸乙酯中。該溶液用5％檸檬酸、鹽水萃取，并干燥(硫酸鎂)。有機(jī)相用己烷稀釋、過濾，并將濾液真空干燥，得到標(biāo)題化合物(1.41克，93％)。MS(ES)m/e279[M＋H]+。c)N2-(叔丁氧羰基)-7-氨基-1，2，3，4-四氫異喹啉將制備3(b)化合物(1.41克，5.1毫摩爾)和Pd/BaSO4(100毫克)在甲醇(25毫升)中的混合物與氫氣(45psi)一起振搖1.5小時(shí)。將該混合物過濾并濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物(1.23克，90％總產(chǎn)率)。MS(ES)m/e249[M＋H]+。
制備4制備N-(叔丁氧羰基)-2-(4-哌啶基)乙胺采用制備1(a)-(b)的方法制備標(biāo)題化合物，不同的是用2-(4-吡啶基)乙胺代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺。
制備5制備(5-碘戊基)苯a)[5-(甲磺酰氧基)戊基]苯在0℃和氬氣氛下，用2分鐘，向5-苯戊醇(8.4毫升，50毫摩爾)和無水三乙胺(14毫升，100毫摩爾)在無水二氯甲烷(100毫升)中的溶液中滴加甲磺酰氯(4.3毫升，55毫摩爾)。45分鐘后，反應(yīng)物用乙醚稀釋，并依次用冷的1N鹽酸、水和鹽水洗滌。有機(jī)相用硫酸鎂干燥并濃度，得到標(biāo)題化合物(12.09克，100％)，為淡黃色油，該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(250，CDCl3)δ7.10-7.35(m，5H)，4.22(t，J＝6.5Hz，2H)，2.98(s，3H)，2.63(t，J＝7.6Hz，2H)，1.37-1.85(m，6H).b)(5-碘戊基)苯將制備5(a)化合物(12.09克，50毫摩爾)和碘化鈉(8.99克，60毫摩爾)在丙酮(250毫升)中的溶液加熱回流。3小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻并經(jīng)玻璃漏斗過濾，濃縮濾液。將殘余物溶于乙醚中，用1N硫代硫酸鈉洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)相，濃縮，并進(jìn)行色譜凈化(硅膠，己烷)，得到標(biāo)題化合物(11.5克，84％)，為無色油狀。1H NMR(250，CDCl3)δ7.05-7.40(m，5H)，3.18(t，J＝7.0Hz，2H)， 2.62(t，J＝7.6Hz，2H)，1.79-1.93(m，2H)，1.37-1.72(m，4H)；IR(CCl4)3020，2930，2850，1495，1451，1200cm-1；MS(DCI/NH3)m/e292.1[M＋NH4]+.
制備6制備N-甲基-3-[N-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基]]丙胺將制備6(a)的化合物(2.0克，8.3毫摩爾)溶于二氯甲烷(25毫升)中，用三乙胺(0.86克，8.6毫摩爾)處理，并在0℃攪拌。所得混合物用triflic酐(2.5克，8.8毫摩爾)處理，在0℃攪拌30分鐘，并在0℃緩緩加入到在二氯甲烷中的甲胺溶液中。攪拌該混合物并將其溫?zé)嶂潦覝?小時(shí)。將該混合物濃縮，殘余物進(jìn)行閃式色譜凈化(硅膠，5-20％甲醇∶氯仿)，得到標(biāo)題化合物(2.8克)。MS(ES)m/e257[M＋H]+。
制備7制備(R，S)-[7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)3-甲基-4-硝基苯甲酸叔丁酯在40℃，向3-甲基-4-硝基苯甲酸(9.06克，50毫摩爾)在無水吡啶(25毫升)中的溶液中快速加入苯磺酰氯(12.8毫升，100毫摩爾)。該反應(yīng)適度放熱。將該絮狀橙色溶液攪拌5分鐘，然后加入叔丁醇(4.7毫升，50毫摩爾，1當(dāng)量)。1小時(shí)后，將橙紅色混合物倒入冰/水(200毫升)中，將所得混合物輕快地?cái)嚢?小時(shí)。吸濾收集固體，用水洗滌，并溶于甲苯(200毫升)中。將該溶液干燥(硫酸鎂)，經(jīng)硅膠墊過濾，用甲苯洗脫。濃縮后得到黃色油狀標(biāo)題化合物，將其在真空下結(jié)晶(9.67克，82％)。b)4-硝基-3-[N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯將制備7(a)化合物(4.75克，20毫摩爾)、N-溴琥珀酰亞胺(3.92克，22毫摩爾)和過氧化苯甲酰(0.24克，1毫摩爾)在四氯化碳(50毫升)中的混合物加熱回流。16小時(shí)后，過濾該混合物以除去琥珀酰亞胺，將濾液濃縮得到黃色油。該芐基溴不需純化即可使用。將上述得到的粗品芐基溴溶于無水THF(50毫升)中，加入固體碳酸氫鈉(2.52克，30毫摩爾)。輕快地?cái)嚢柙摶旌衔?，加入苯乙?3.8毫升，30毫摩爾)。溶液的顏色漸漸地變成深黃色。幾分鐘內(nèi)，上述混合物變得非常渾濁。4小時(shí)后，將溶液濃縮，殘余物在水(50毫升)和乙醚(100毫升)之間分配。分離各相，用乙醚萃取，用硫酸鎂干燥并濃縮，得到黃色油。進(jìn)行色譜凈化(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物(2.86克，40％)，為黃色油。c)4-硝基-3-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基-乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯在室溫，將所有二碳酸二叔丁酯(2.10克，9.62毫摩爾)一次加入制備7(b)化合物(2.86克，8.02毫摩爾)在氯仿(30毫升)中的溶液中。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)物2.5小時(shí)，然后回流0.5小時(shí)。濃縮并進(jìn)行色譜凈化(硅膠，15％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物(3.70克)，為黃色油。d)4-氨基-3-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基-乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯在氫氣氛(50psi)下振搖制備7(c)的化合物(2.66克，5.83毫摩爾)、10％Pd/C(0.62克，0.58毫摩爾)和乙酸乙酯(60毫升)的混合物。3小時(shí)后，過濾該混合物以除去催化劑，濃縮濾液至干。進(jìn)行色譜凈化(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為黃色泡沫油狀，其緩慢地部分固化(2.26克，91％)。e)(R，S)-4-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]-3-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)-氨基甲基]苯甲酸叔丁酯在氬氣氛下，將制備7(d)的化合物(1.98克，4.64毫摩爾)、二甲酸二甲基二亞乙基酯(1.14毫升，9.28毫摩爾)和甲醇(9，3毫升)的混合物加熱回流。得到均勻的溶液。1小時(shí)后，將該溶液濃縮成黃色油。進(jìn)行色譜凈化(硅膠，1∶1乙酸乙酯∶己烷)，得到黃色油。該產(chǎn)物不需進(jìn)一步純化即可使用。TLC Rf0.61(主要產(chǎn)物)，Rf0.41(次要產(chǎn)物)(30％乙酸乙酯/己烷)。
將上述得到的黃色油溶于乙酸乙酯(93毫升)中，加入10％Pd/C(1.48克，1.39毫摩爾Pd，0.3當(dāng)量)。在氫氣氛(45psi)和室溫下振搖該混合物5小時(shí)，然后過濾以除去催化劑。濃縮濾液，得到無色的油，將該油進(jìn)行色譜凈化(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物，為無色的油(2.49克，94％)。f)(R，S)-7-羧基-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在0℃和氮?dú)夥障?，將所有的TFA(9毫升)一次加入制備7(e)化合物(2.11克，3.70毫摩爾)在無水二氯甲烷(9毫升)中的溶液中。將所得淡黃色溶液溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)并濃縮。將殘余物溶于甲苯中，并從甲苯中再濃縮以除去殘余的TFA。將所得的淡黃色油溶于無水甲醇(18.5毫升)中，并在氬氣氛下將該溶液冷卻至0℃。用5分鐘滴加新配制的甲醇鈉/甲醇(1.0M；18.5毫升，18.5毫摩爾)。移開冰浴，用10分鐘使該黃色溶液溫?zé)嶂潦覝?，并在氬氣氛下加熱回流?.5小時(shí)后，在冰中冷卻該混合物，用冰醋酸(2.1毫升，37毫摩爾)終止反應(yīng)。將該混合物濃縮，殘余物在乙酸乙酯(50毫升)和水(50毫升)之間分配。分離各層，水層用乙酸乙酯(每份50毫升)徹底萃取直到所有的固體溶解。將合并的有機(jī)層干燥(硫酸鎂)并濃縮至開始結(jié)晶。所得混合物在冰中徹底冷卻。吸濾得到無色結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物(1.0克，71％)。濃縮母液，殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，10％甲醇/氯仿-微量乙酸)，得到另一份粗產(chǎn)物。從含有少量甲醇的乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到另一份純的標(biāo)題化合物(1.23克，總分離產(chǎn)率為87％)。g)(R，S)-[7-[[4-[N-(芐氧羰基)氨基-亞氨基甲基)]苯基]氨基]羰基]-1，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備7(f)化合物(95.6毫克，0.25毫摩爾)與SOCl2(2.5毫升)一起回流15分鐘，并將該黃色溶液濃縮至干。將黃色油狀固體溶于無水二氯甲烷(2.5毫升)中，加入4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基-甲基]苯胺(134.7毫克，0.5毫摩爾)。在氬氣氛下，將該混合物在冰/水中冷卻，滴加無水吡啶(0.061毫升，0.75毫摩爾)。將所得橙黃色混合物溫?zé)嶂潦覝亍?.5小時(shí)后，用5％碳酸氫鈉(5毫升)終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯徹底萃取。用硫酸鈉干燥，濃縮，進(jìn)行色譜凈化(硅膠，3∶2乙酸乙酯∶氯仿-0.5％甲醇)，并且將色譜的混合餾分進(jìn)行制備TLC(同樣的溶劑系統(tǒng))，得到淡黃色油狀標(biāo)題化合物(110.2毫克，70％)。h)(R，S)-[7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸在氫氣氛下輕快地?cái)嚢柚苽?(f)化合物(87.0毫克，0.1373毫摩爾)在含有10％Pd/C(29.2毫克，0.0275毫摩爾)和TFA(0.011毫升，0.137毫摩爾)的1∶1乙酸乙酯∶甲醇(4.6毫升)中的溶液。1小時(shí)后，將該混合物過濾以除去催化劑，用乙酸乙酯和乙酸乙酯/甲醇充分洗滌濾墊。濃縮該溶液，得到黃色油狀固體(83.0毫克)。將該固體溶于甲醇(4.6毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.41毫升，0.41毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙摰S色溶液過夜，冷卻至0℃，用TFA(0.106毫升，1.373毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮至干得到橙黃色油。該物質(zhì)經(jīng)制備HPLC純化(PRP-1，梯度，A5％乙腈/水-0.1％TFA，5分鐘，增至B23％乙腈/水-0.1％TFA，用A洗脫5分鐘，用B洗脫24分鐘)。合并含有純產(chǎn)物的餾分并濃縮至出現(xiàn)沉淀。加入最小量的乙腈使固體溶解，將溶液凍干得到微黃色粉末狀的標(biāo)題化合物(50％)。
制備8制備(R，S)-[7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]-甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)3-溴-4-甲基苯甲酸叔丁酯在70℃，向3-溴-4-甲基苯甲酸(85％；10.75克，42.5毫摩爾)在甲苯(100毫升)中的懸浮液中滴加二甲基甲酰胺二甲乙縮醛(48毫升，200毫摩爾)。在70-80℃再攪拌該反應(yīng)物0.5小時(shí)，然后冷卻，依次用水和5％碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鈉干燥。經(jīng)硅膠墊過濾該混合物，用甲苯洗滌濾墊。濃縮濾液得到黃色油狀標(biāo)題化合物，(8.0克，69％)。TLC(甲苯)Rf0.68。b)3-溴-4-(溴甲基)苯甲酸叔丁酯將制備8(a)化合物(1.36克，5毫摩爾)、N-溴琥珀酰亞胺(0.98克，5.5毫摩爾)和過氧化苯甲酰(61毫克，0.25毫摩爾)在四氯化碳(25毫升)中的混合物加熱回流。4小時(shí)后，將該混合物冷卻并過濾，濃縮濾液。所得物質(zhì)不需純化即可使用。TLC Rf0.39(5∶95乙酸乙酯∶己烷)。c)3-溴-4-[[(2-苯乙基)氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯將制備8(b)的化合物溶于無水乙醚(25毫升)中，加入苯乙胺(1.9毫升，15毫摩爾)。添加過程中適度放熱，并且反應(yīng)物變得渾濁。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)物過夜，然后用乙醚(75毫升)稀釋，并依次用5％碳酸氫鈉和鹽水(25毫升)洗滌。用硫酸鎂干燥，濃縮并進(jìn)行硅膠色譜凈化(33％乙酸/己烷)，得到標(biāo)題化合物(1.26克，65％)，為淡黃色油。TLC Rf0.42(30∶70乙酸乙酯∶己烷)。d)3-溴-4-[[[N-(2-苯乙基)-N-叔丁氧羰基]氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯在室溫，將所有二碳酸二叔丁酯(845毫克，3.88毫摩爾)一次加入制備8(c)化合物(1.26克，3.23毫摩爾)在氯仿(16毫升)中的溶液中。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)物1.5小時(shí)，然后回流0.5小時(shí)。濃縮并進(jìn)行色譜凈化(硅膠，10％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物(1.57克，99％)，為無色油，該油在真空中固化。TLC Rf0.49(10∶90乙酸乙酯∶己烷)。e)3-甲氧羰基-4-[[5-(叔丁氧羰基)-2-[[N-(2-苯乙基)-N-(叔丁氧羰基)氨基]甲基]苯基]-2-丁烯酸甲酯和3-甲氧羰基-4-[[5-(叔丁氧羰基)-2-[[N-(2-苯乙基)-N-(叔丁氧羰基)氨基]甲基]苯基]-3-丁烯酸甲酯通過一次排空/氬清洗循環(huán)，使制備8(d)化合物(1.34克，2.73毫摩爾)、衣康酸二甲酯(648毫克，4.10毫摩爾)、乙酸鈀(II)(30.7毫克，0.14毫摩爾)、三鄰甲苯膦(83.2毫克，0.27毫摩爾)、無水三乙胺(0.76毫升，5.46毫摩爾)和無水乙腈(27毫升)的混合物脫氧，然后在氬氣氛下加熱回流。6小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻，加入更多的乙酸鈀(II)(30.7毫克，0.14毫摩爾)、三鄰甲苯膦(83.2毫克，0.27毫摩爾)。經(jīng)過三次排空/氬清洗循環(huán)使該混合物脫氧，然后在氬氣氛下加熱回流過夜(16.5小時(shí))。濃縮反應(yīng)物，將殘余物溶于乙醚中，并用水和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥，濃縮，進(jìn)行色譜凈化(硅膠，15％乙酸乙酯/己烷；然后是40％乙酸乙酯/己烷)，得到黃色油狀的粗品標(biāo)題化合物。該殘余物再次進(jìn)行色譜凈化(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)，得到淡黃色油狀的標(biāo)題化合物(1.36克，88％)。該物質(zhì)不需進(jìn)行異構(gòu)反應(yīng)產(chǎn)物分離即可使用。f)3-甲氧羰基-4-[5-(叔丁氧羰基)-2-[[[N-(2-苯乙基)-N-叔丁氧羰基]氨基]甲基]苯基]丁酸甲酯。
將制備8(e)化合物(1.18克，2.08毫摩爾)溶于無水甲醇(21毫升)中，加入碳載氫氧化鈀(II)(0.21克)。所得混合物在室溫和氫氣氛(47psi)下振搖2小時(shí)，然后經(jīng)硅藻土過濾。濃縮濾液并在同樣的反應(yīng)條件下再操作一次。再過5.5小時(shí)后，如前所述過濾該混合物，并濃縮濾液，得到無色油狀標(biāo)題化合物(1.13克，95％)。g)(R，S)-7-羧基-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在0℃和氬氣氛下，將所有的TFA(11毫升)一次加入制備8(f)化合物(1.30克，2.28毫摩爾)在無水二氯甲烷(11毫升)中的絮狀溶液中。將所得淡黃色溶液溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?小時(shí)并濃縮。殘余物從1，2-二氯甲烷中濃縮一次以除去殘余的TFA，得到淡綠色油狀的3-甲氧羰基-4-[5-羧基-2-[[N-(2-苯乙基)氨基]甲基]苯基]丁酸甲酯。
將將油溶于無水甲醇(11毫升)中，并和氬氣氛下將該溶液冷卻至0℃。加入新配制的1.0M甲醇鈉/甲醇(11毫升，11毫摩爾)，并移開冰浴。用5分鐘使該黃色溶液溫?zé)嶂潦覝兀⒃跉鍤夥障录訜峄亓鳌?小時(shí)后，在冰中冷卻該反應(yīng)物，用冰醋酸(1.3毫升，22.8毫摩爾)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯(100毫升)稀釋反應(yīng)物并用水洗滌。合并的水相用乙酸乙酯反萃取，合并的乙酸乙酯層用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到淡綠色殘余物。將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，10％甲醇/氯仿/0.1％乙酸)，得到黃色泡沫狀標(biāo)題化合物。從含有少量氯仿的甲醇中結(jié)晶，得到米色固體狀的標(biāo)題化合物(528.2毫克，61％)。熔點(diǎn)214-216℃；TLC Rf0.49(10∶90甲醇∶氯仿)。h)(R，S)-[7-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基)]苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將制備8(g)化合物(117.9毫克，0.31毫摩爾)與亞硫酰氯(3毫升)一起回流15分鐘，并將該黃色溶液濃縮。從無水甲苯(3毫升)中濃縮殘余物以除去殘余的亞硫酰氯，并將所得物質(zhì)溶于無水二氯甲烷(0.5毫升)中。在0℃和氬氣氛下，用1-2分鐘向4-(甲氨基)-(N-芐氧羰基)芐脒(263毫克，0.93毫摩爾)和無水吡啶(0.125毫升，1.55毫摩爾)在無水二氯甲烷(10毫升)中的溶液中滴加上述溶液。將所得黃色混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪?.5小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋，并用5％碳酸氫鈉洗滌。用硫酸鈉干燥，濃縮，進(jìn)行色譜凈化(硅膠，10％乙酸乙酯/甲苯)，得到淡黃色油狀標(biāo)題化合物(174.8毫克，87％)。TLC Rf0.45(9∶1甲苯∶乙酸乙酯)。i)(R，S)-[7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯向制備8(h)化合物(174.8毫克，0.27毫摩爾)和TFA(0.021毫升，0.27毫摩爾)在乙酸乙酯/甲醇(1∶1，9毫升)中的溶液中小心地加入10％Pd/C(58毫克，0.054毫摩爾)，并在氫氣氛(球壓)下輕快地?cái)嚢柙摶旌衔铩?.5小時(shí)后，該混合物經(jīng)硅藻土過濾，用乙酸乙酯和甲醇充分洗滌濾墊。濃縮，得到標(biāo)題化合物。j)(R，S)-[7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸將制備8(i)化合物溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，然后濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該微黃色溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化(C-18硅膠，25％AN/W-TFA)。濃縮并凍干，得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(123毫克，67％)。
下列實(shí)施例說明制備本發(fā)明藥物活性化合物和組合物的方法。
實(shí)施例1制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基1羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-8-[[[2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用EDC(2.2毫摩爾)、1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用N-甲基-2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ6.5-7.5(m，7H)，2.6-4.1(m，24H)，0.9-1.8(m，7H)；MS(ES)m/e551[M＋H]+，[M＋HCO3-]-595.b)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用10％氫氧化鈀處理實(shí)施例1(a)化合物(0.06毫摩爾)在甲醇(25毫升)中的溶液，該溶液中含有1.0M氯化氫的乙醚(0.6毫升)溶液，并將該混合物在氫氣氛(40psi)下振搖1小時(shí)。將該混合物過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e417[M＋H]+。c)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例1(b)化合物(0.26毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化(C-18硅膠，AN/W-TFA)。濃縮并凍干，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e 403[M＋H]+；1H NMR(DMSO-d6)δ8.1-8.6(m，2H)，6.4-7.0(m，3H)，5.9-6.0(m，1H)，5.4-5.5(d，1H)，5.0-5.1(m，1H)，3.8-3.9(d，1H)，1.0-3.5(m，22H)；(C24H35.25N4O8.875)的分析，計(jì)算值C，48.91；H，5.71；N，9.51。實(shí)測(cè)值C，49.19；H，5.64；N，9.42。
實(shí)施例2制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸在0℃，向無水FMD(200毫升)中通入干燥的異戊胺氣體15分鐘。向該冷卻的胺溶液中滴加4-溴甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯(5.0克，15.8毫摩爾)(Int..J.Peptide.Res.，36，31(1990))在DMF(10毫升)中的溶液。在0℃攪拌該溶液30分鐘，并倒入水中。該混合物用乙酸乙酯萃取，合并的有機(jī)層用水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮，得到黃棕色油。該油經(jīng)硅膠色譜凈化，得到4-(異戊氨基)甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯。
將4-(異戊氨基)甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯(5.3毫摩爾)、三乙胺(2.1克，21毫摩爾)和二碳酸二叔丁酯(3.44克，15.8毫摩爾)在THF(50毫升)中的溶液攪拌24小時(shí)。將該混合物濃縮，將殘余物溶于乙酸乙酯(200毫升)中。該溶液用水萃取，用硫酸鈉干燥并濃縮，得到黃色油，該油經(jīng)硅膠色譜凈化，得到4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯。
將4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯(2.27毫摩爾)在含有10％披鈀碳(0.5克)的乙醇(100毫升)中的溶液氫化(40psi)。30分鐘后，將該混合物過濾并濃縮，得到3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯。
向3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯(2.7毫摩爾)在甲醇(50毫升)中的溶液中加入二亞乙基二甲酸二甲酯(0.34克，2.4毫摩爾)。將該溶液加熱回流1小時(shí)，用二亞乙基二甲酸二甲酯(0.17克，1.2毫摩爾)處理，并加熱回流1小時(shí)。將該混合物冷卻，過濾，濃縮，殘余的黃色油在硅膠上進(jìn)行色譜凈化，得到(E，Z)-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁烯基)氨基]苯甲酸叔丁酯。
在室溫將(E，Z)-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁烯基)氨基]苯甲酸叔丁酯在含有10％Pd/C(0.5克)的甲醇(50毫升)中的溶液氫化(45psi)。4小時(shí)后，將懸浮液過濾并濃縮，得到淡黃色油。該殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜凈化，得到4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯。
向4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(異戊基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯(0.3毫摩爾)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液中加入TFA(50毫升)。攪拌該混合物4小時(shí)并濃縮，得到4-[N-(異戊基)氨基甲基]-3-[N-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)]-N-(甲基)氨基]苯甲酸。
將上述苯甲酸溶于甲醇(20毫升)中，并用在甲醇(0.2毫升，0.87毫摩爾)中的25％甲醇鈉處理。將該混合物加熱至50℃，保持2小時(shí)，冷卻，并用在乙醚(2毫升)中的1M鹽酸處理。將該混合物濃縮，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用EDC(2.2毫摩爾)和1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的實(shí)施例2(a)化合物(2.0毫摩爾)。用N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氧化鉑(5毫克)處理實(shí)施例2(b)化合物(0.2毫摩爾)和0.6N鹽酸(0.6毫升)在甲醇(30毫升)中的溶液，并氫化(45psi)過夜。將該混合物過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e473[M＋H]+。d)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例2(c)化合物(0.27毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，然后濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e459[M＋H]+。
實(shí)施例3制備(R，S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)-3-氟苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-8-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]-3-氟苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用制備8(h)的方法，不同的是用(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯代替制備8(g)化合物，并且用2-氟-4-(甲氨基)-[N-(芐氧羰基)]芐脒代替4-(甲氨基)-(N-芐氧羰基)芐脒，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(t，1H)，7.4(d，2H)，7.4-7.15(m，8H)，7.1(d，2H)，6.9(dd，1H)，6.75(dd，1H)，6.65(s，1H)，6.6(d，1H)，6.4(d，1H)，5.25(d，1H)，5.15(s，2H)，4.9(q，1H)，4.25(d，1H)，3.7(s，3H).3.65(m，2H)，3.55(d，1H)，3.45(s，3H)，2.95(dd，1H)，2.7(m，2H)，2.6(dd，1H).b)(R，S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)-3-氟苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸用10％披鈀碳(0.06克)處理實(shí)施例3(a)化合物(0.06毫摩爾)在甲醇(25毫升)中的溶液，該溶液中含有1.0M氯化氫的乙醚(0.6毫升)溶液，并將該混合物在氫氣氛(40psi)下振搖1小時(shí)。將該混合物過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物的甲酯。
將上述甲酯(0.27毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，然后濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.75(t，1H)，7.4(d，1H)，7.25-7.05(m，6H)，6.8(d，1H)，6.7(s，1H)，6.5(d，1H)，5.35(d，1H)，5.05(m，1H)，3.8(d，1H)，3.65(m，2H)，3.4(s，3H)，2.9(dd，1H)，2.7(m，2H)，2.6(dd，1H).MS(ES)m/e518.0[M＋H]+.
實(shí)施例4制備(R，S)-8-[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-8-[[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用EDC(2.2毫摩爾)和1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-8-羧基-1，2，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-3H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)。用N2-(叔丁氧羰基)-7-氨基-1，2，3，4-四氫異喹啉(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-8-[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例4(a)化合物(0.56毫摩爾)溶于二氯甲烷(25毫升)和TFA(5毫升)的混合物中。1小時(shí)后，濃縮該混合物，得到標(biāo)題化合物的甲酯。
將上述甲酯(0.27毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，然后濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。[C29H30N4O4·0.6(C2HF3O2)·1.5(H2O)]的分析，計(jì)算值C，60.55；H，5.44；N，9.31。實(shí)測(cè)值C，60.45；H，5.80；N，9.28。
實(shí)施例5制備(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-7-羧基-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氧化鉑(5毫克)處理(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(1.2毫摩爾)和0.6N鹽酸(4.0毫升)在甲醇(50毫升)中的溶液，并氫化(45psi)。將該混合物過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用EDC(2.2毫摩爾)和1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的實(shí)施例5(a)化合物(2.0毫摩爾)。用N-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例5(b)化合物(0.56毫摩爾)溶于二氯甲烷(25毫升)和TFA(5毫升)的混合物中。1小時(shí)后，濃縮該混合物，得到標(biāo)題化合物。d)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例5(c)化合物(0.3毫摩爾)懸浮在丙酮(2毫升)中，并用在水(2毫升)中的水合氫氧化鋰(25毫克)處理。將該混合物攪拌過夜，用甲醇處理，分兩批，用9小時(shí)加入另一份水合氫氧化鋰(5.5毫克)。將該混合物濃縮，用鹽酸中和含水殘余物并濃縮。將殘余物在冰箱中放置過夜，并過濾。濾餅用冷水、丙酮和乙醚洗滌，得到標(biāo)題化合物。[C30H44N4O4·2.5(C2HF3O2)·2(H2O)]的分析，計(jì)算值C，49.70；H，6.02；N，6.62。實(shí)測(cè)值C，49.43；H，6.02；N，6.62。
實(shí)施例6制備(R，S)-7-[[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-7-[[4-(N-叔丁氧羰基)(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用DCC(458毫克，2.2毫摩爾)和1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用N-(叔丁氧羰基)-2-(4-哌啶基)乙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-7-[[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例6(a)化合物(0.56毫摩爾)溶于二氯甲烷(25毫升)和TFA(5毫升)的混合物中。1小時(shí)后，濃縮該混合物，得到標(biāo)題化合物的甲酯。
將上述甲酯(0.27毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，然后濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，并用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，殘余物經(jīng)倒相閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e479[M＋H]+，477[M＋H]-。
實(shí)施例7制備(R，S)-7-[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例4的方法，不同的是用(R，S)-7-羧基-1，2，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-3H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯代替(R，S)-8-羧基-1，2，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-3H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯，得到標(biāo)題化合物。[C29H30N4O4·2(C2HF3O2)·0.75(H2O)]的分析，計(jì)算值C，53.55；H，4.36；N，7.57。實(shí)測(cè)值C，53.80；H，4.56；N，7.56。
實(shí)施例8制備(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)3-甲基-4-硝基苯甲酸叔丁酯將3-甲基-4-硝基苯甲酸(500克，2.76毫摩爾)加入吡啶(1.25升)中，并攪拌至溶解。快速加入苯磺酰氯(609克，3.45摩爾)，同時(shí)用冰浴保持內(nèi)部溫度＜30℃。添加結(jié)束時(shí)形成沉淀，加入吡啶(500毫升)以易于攪拌。將該混合物攪拌30分鐘，并在＜30℃的溫度下，用30分鐘滴加叔丁醇(523毫升)。攪拌該混合物2小時(shí)后，將該混合物溶于己烷∶乙酸乙酯(4∶1；2.5升)中，所得混合物用水萃取。濃縮有機(jī)相，得到淡黃色油，該油經(jīng)冷卻結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(635克，97％)。熔點(diǎn)56-58℃。b)3-溴甲基-4-硝基苯甲酸叔丁酯攪拌實(shí)施例8(a)化合物(635克，2.68摩爾)在四氯化碳(6升)中的溶液，并用N-溴琥珀酰亞胺(476.5克，2.68毫摩爾)處理。對(duì)該混合物進(jìn)行照射，并用低于溶液平面的3只反光燈加熱回流。分四次加入過氧化苯甲酰(6克)，同時(shí)將該混合物加熱回流，最后一份是在達(dá)到回流后2小時(shí)加入的。將該混合物照射回流12小時(shí)，冷卻，放置幾小時(shí)，過濾并濃縮，得到棕色油(870.7克)。將該油溶于己烷(3升)和乙醚(500毫升)(煮沸的)中，過濾，通過煮沸部分濃縮濾液。將所得溶液放置過夜，濾出所形成的米色晶狀固體，用己烷洗滌并干燥，得到標(biāo)題化合物(396.6克，46.8％)。熔點(diǎn)80-83℃；1H NMR(250MHz)δ4.5(2H)；TLC Rf0.7(硅膠，1∶9乙酸乙酯/己烷)。將濾液放置得到第二批產(chǎn)物(73克)。熔點(diǎn)61-65℃。c)3-(甲氨基)甲基-4-硝基苯甲酸叔丁酯向在丙酮/冰浴中的于-5℃并攪拌著的二甲基甲酰胺(2.5升)中加入40％甲胺水溶液(623毫升)。用1小時(shí)滴加實(shí)施例8(b)化合物(238克，0.753毫摩爾)在乙酸乙酯(600毫升)中的溶液，同時(shí)保持內(nèi)部溫度為0℃至-5℃。將澄清的黃色反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘，并用等體積的水稀釋。加入己烷，分離有機(jī)相，用己烷萃取水相。合并的有機(jī)提取物用水洗滌，并濃縮，得到淡黃色油狀標(biāo)題化合物(217.8克)。d)3-[N-(叔丁氧羰基)-(甲氨基)-甲基]-4-硝基苯甲酸叔丁酯攪拌實(shí)施例8(c)化合物(0.753摩爾)在乙酸乙酯(1升)中的溶液，并一次加入二碳酸二叔丁酯(180.8克，0.828摩爾)進(jìn)行處理。反應(yīng)物快速產(chǎn)生氣體，在二碳酸酯添加完成后氣體停止發(fā)生。再攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，并用4％碳酸鈉水溶液和水萃取。濃縮有機(jī)相，得到淡黃色油，將該油溶于己烷中，并在干冰/丙酮浴中冷卻，使其開始結(jié)晶。將該混合物貯藏在冰箱中，過濾并干燥，得到標(biāo)題化合物(129克，47％)，該產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)。熔點(diǎn)56-58℃。1H NMR(CDCl3)δ8.05(2H，s)，7.95(1H，s)，4.8(2H，d)，2.9(2H，s)，1.6(9H，s)，1.5(9H，s)；HPLC tR27分鐘(Zorbax RX C18，梯度，4.6×150mm，A甲醇B水-0.1％TFA，50-90％甲醇，40分鐘，在210nm進(jìn)行UV測(cè)定)。e)4-氨基-3-[N-(叔丁氧羰基)-(甲氨基)甲基]苯甲酸叔丁酯在氬氣氛下和氫化瓶中，用被乙酸乙酯潤(rùn)濕的10％Pd/C(40克)處理實(shí)施例8(d)化合物(129克，0.352摩爾)在乙酸乙酯/甲醇(1∶1，1.5升)中的溶液。該瓶用氫氣吹掃并振搖，直至理論量的氫氣被吸收。該混合物經(jīng)硅藻土過濾，并將含有標(biāo)題化合物的濾液用于下一步反應(yīng)。f)(E/Z)-3-[N-(叔丁氧羰基)(甲氨基)甲基]-4-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁烯基)氨基]苯甲酸叔丁酯在室溫和氬氣氛下攪拌實(shí)施例8(e)化合物(118.3克，0.352摩爾)在甲醇∶乙酸乙酯(1.5升)中的溶液，用30分鐘滴加二亞乙基二甲酸二甲酯(50克，0.352摩爾)，并將該混合物加熱回流16小時(shí)。將該混合物冷卻，并一次加入二亞乙基二甲酸二甲酯(6.0毫升，0.0488摩爾)。將反應(yīng)混合物加熱回流2.5小時(shí)。將含有標(biāo)題化合物的所得溶液冷卻，并用于下一步反應(yīng)。g)(R，S)-3-[N-(叔丁氧羰基)-(甲氨基)-甲基]-4-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯在氬氣氛下和氫化瓶中，向用乙酸乙酯潤(rùn)濕的10％Pd/C(20克)中加入實(shí)施例8(f)化合物(約168克，0.352摩爾)在乙酸乙酯∶甲醇(1.5升)中的溶液。該混合物在氫氣中振搖，并加熱至48℃，直至理論量的氫氣被吸收，冷卻，排氣，經(jīng)硅藻土過濾，并濃縮濾液，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(173.4克)。HPLC tR18.9分鐘(Zorbax RX C18，4.6×150mm，1毫升/分鐘，梯度，A甲醇B水-0.1％TFA，50-90％甲醇，40分鐘，在210nm進(jìn)行UV測(cè)定)。h)(R，S)-4-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代丁基)氨基]-3-[(甲氨基)甲基]苯甲酸酯用30分鐘向攪拌著的TFA(684毫升)和二氯甲烷(1550毫升)的溶液中加入實(shí)施例8(g)化合物(0.348摩爾)在二氯甲烷(50毫升)中的溶液；內(nèi)部溫度為18℃-25℃。將該溶液在室溫?cái)嚢柽^夜，并濃縮，得到棕色油狀標(biāo)題化合物(254.6克)。HPLC tR19分鐘(Zorbax RX C18，4.6×150mm，梯度，1毫升/分鐘，A甲醇B水-0.1％TFA，10-60％甲醇，50分鐘，在210nm進(jìn)行UV測(cè)定)。i)(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例8(h)化合物[112.7克(0.348摩爾)]與TFA(141.9克)在甲醇(2升)中的溶液冷卻到0℃至-5℃，并在氬氣氛下攪拌。用2小時(shí)加入在甲醇中的甲醇鈉(25％；396毫升，1.94摩爾)，保持內(nèi)部溫度為0℃至-5℃。添加完成后，使溫度緩緩上升，并攪拌該混合物45分鐘。向反應(yīng)混合物中加入冰醋酸(42毫升)，然后加入水(1.5升)。開始形成晶狀沉淀，并通過小心地加入12N鹽酸調(diào)節(jié)該混合物的pH至4.5。攪拌該混合物幾分鐘，過濾并用水洗滌沉淀，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(77.6克，76％)。1H NMR(250MHz，DMSOd6)δ7.5(2H，m)，6.5(2H，m)，5.5(1H，d)，5.2(1H，m)，3.9(1H，d)，3.6(3H，s)，2.9(3H，s)，2.9-2.6(2H，m)；熔點(diǎn)276-277℃，HPLC tR 23.2分鐘(Zorbax RX C18，4.6×150mm，1毫升/分鐘，梯度，A甲醇B水-0.1％TFA，10-60％甲醇，50分鐘，在210nm進(jìn)行UV測(cè)定)。(C14H16N2O5)的分析，計(jì)算值C，57.53；H，5.52；N，9.58。實(shí)測(cè)值C，57.27；H，5.41；N，9.17。熔點(diǎn)280-280.5℃。j)(R，S)-7-[[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用實(shí)施例5(b)的方法，不同的是用實(shí)施例8(i)化合物代替(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯，得到標(biāo)題化合物。k)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用實(shí)施例5(c)的方法，不同的是用實(shí)施例8(i)化合物代替實(shí)施例5(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。1)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例5(d)的方法，不同的是用實(shí)施例8(k)化合物代替實(shí)施例5(c)化合物，并且用氫氧化鈉代替氫氧化鋰，得到標(biāo)題化合物。[C23H32N4O4·2(C2HF3O2)·2.5(H2O)]的分析，計(jì)算值C，46.22；H，5.46；N，7.99。實(shí)測(cè)值C，46.33；H，5.45；N，7.97。
實(shí)施例9制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-7-[[[2-[4-(芐氧羰基)-1-哌嗪基]乙基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯用DCC(458毫克，2.2毫摩爾)和1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用2-[1-[4-(芐氧羰基)哌嗪基]-N-甲基乙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，并通過閃式色譜凈化殘余物，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸將實(shí)施例9(a)化合物(0.3毫摩爾)溶于甲醇(20毫升)中，并加到氫氧化鈀(100毫克)和3N鹽酸(1毫升)中。將該混合物氫化(40psi)6小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，用乙腈洗滌催化劑并濃縮濾液。
將上述甲酯(200毫克，0.3毫摩爾)溶于甲醇(4毫升)和1N氫氧化鈉(0.5毫升)中，攪拌，濃縮，用水稀釋，用3N鹽酸酸化，并濃縮。殘余物進(jìn)行HPLC色譜，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物。
實(shí)施例10制備(R，S)-2-丁基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸在室溫，將所有的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1.19克，6.23毫摩爾)一次加入(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(1.44克，5.19毫摩爾)、芐醇(2.7毫升，25.95毫摩爾)、二異丙基乙胺(1.8毫升，10.38毫摩爾)和4-(二甲氨基)哌啶(761毫克，6.23毫摩爾)在無水二甲基甲酰胺(26毫升)中的溶液中。攪拌該反應(yīng)物24小時(shí)并濃縮，得到淡黃色油。該油用乙酸乙酯(200毫升)稀釋，并依次用1N鹽酸和水洗滌該絮狀混合物。合并的水層用硫酸鎂干燥并濃縮。進(jìn)行硅膠色譜凈化，得到(R，S)-7-芐氧羰基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(1.59克，83％)。
將(R，S)-7-芐氧羰基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(220.4毫克，0.60毫摩爾)懸浮在甲苯(5-10毫升)中，并小心地濃縮該混合物以除去水和殘余的溶劑。將所得固體溶解在無水的1∶1THF∶DMF(12毫升)中，并加入1-碘丁烷(3.0毫摩爾)。加入氫化鈉(60％，在礦物油中，29毫克，0.72毫摩爾)使氣體發(fā)生，并漸漸溫?zé)帷?5分鐘后，將反應(yīng)物冷卻至0℃，用飽和氯化銨水溶液(2毫升)終止反應(yīng)。該混合物用乙醚(50毫升)稀釋，并用水洗滌。合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥并濃縮。進(jìn)行硅膠色譜凈化，得到(R，S)-7-芐氧羰基-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。
向(R，S)-7-芐氧羰基-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(0.60毫摩爾)在甲醇(12毫升)中的溶液中小心地加入10％Pd/C(64毫克，0.06毫摩爾)。用氫氣吹掃該混合物，并在室溫和氫氣氛(球壓)下輕快地?cái)嚢琛?5小時(shí)后，該混合物經(jīng)硅藻土(Celite)過濾，濃縮濾液，得到(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。
室溫和氬氣氛下，向(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(0.39毫摩爾)、N-甲基-2-(吡啶-4-基)乙胺(64毫克，0.47毫摩爾)、1-羥基苯并三唑(63毫克，0.47毫摩爾)和二異丙基乙胺(0.14毫升，0.78毫摩爾)在無水二甲基甲酰胺(2毫升)中的溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(90毫克，0.47毫摩爾)。攪拌該反應(yīng)物23小時(shí)并濃縮。將殘余物在乙酸乙酯和水之間分配。分離各層，有機(jī)相用水洗滌。合并的水層用乙酸乙酯反萃取，合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮，得到黃色油。將合并的水層濃縮，加入氯化鈉。所得混合物用氯仿徹底萃取。合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮，得到黃色油，該油與乙酸乙酯相的產(chǎn)物合并。進(jìn)行硅膠色譜凈化，得到(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。
向(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(0.35毫摩爾)和1N鹽酸(0.35毫升，0.35毫摩爾)在甲醇(3.5毫升)中的溶液中加入氧化鉑(4毫克)，在氫氣氛(球壓)下輕快地?cái)嚢柙摶旌衔铩?小時(shí)后，該反應(yīng)物經(jīng)硅藻土過濾并濃縮，將殘余物溶于甲醇(3.5毫升)中。加入氧化鉑(4毫克)，在氫氣氛(球壓)下輕快地?cái)嚢柙摶旌衔?6.5小時(shí)。經(jīng)硅藻土過濾并濃縮，得到(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。
將(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-丁基-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯溶于甲醇(12毫升)中，并冷卻至0℃。滴加1N氫氧化鈉(1.05毫升，1.05毫摩爾)，并將該溶于溫?zé)嶂潦覝?。在室溫?cái)嚢柙摲磻?yīng)物24小時(shí)并濃縮。從1∶1乙腈∶水(4毫升)中濃縮殘余物以除去甲醇，將殘余物溶于1∶1乙腈∶水(4毫升)中，并在冰中冷卻。加入TFA(0.27毫升，3.5毫摩爾)，并濃縮反應(yīng)物。殘余物進(jìn)行倒相閃式色譜凈化。濃縮并凍干，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e444[M＋H]+。
實(shí)施例11-12a)采用實(shí)施例10將2-氨基烷基化以及使芐基酯脫芐基化的方法，不同的是用芐基溴或(5-碘戊基)苯替代碘丁烷，然后采用實(shí)施例1(a)-(b)的方法，不同的是用Pd/C替代氫氧化鈀，得到下列化合物11(a).2-芐基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。MS(ES)m/e492[M＋H]+。12(a).2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(5-苯戊基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。MS(ES)m/e548[M＋H]+。b)采用實(shí)施例1(c)的方法，不同的是用實(shí)施例11-12(a)的化合物替代實(shí)施例1(b)化合物，得到下列化合物11(b).2-芐基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。12(b).2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(5-苯戊基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。
實(shí)施例13制備(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸采用制備8(c)-(j)的方法，不同的是在制備8(c)的方法中用異丙胺替代2-苯乙胺，并且在制備8(g)的方法中用2，4，6-可力丁代替在甲醇中的甲醇鈉，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e437[M＋H]+。
實(shí)施例14-17采用制備8(c)-(g)的方法，不同的是在制備8(c)的方法中用a)異丙胺、b)異戊胺、c)3，3-二甲基丁胺或d)環(huán)己胺替代2-苯乙胺，并且任選地在制備8(g)的方法中用在甲苯中的2，4，6-可力丁、三乙胺或者在二甲苯中的二異丙基乙胺代替在甲醇中的甲醇鈉，并依次采用實(shí)施例2(b)-(d)的方法，不同的是用六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)膦代替1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺，得到下列化合物14.(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。MS(ES)m/e430[M＋H]+。15.(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異戊基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。MS(ES)m/e458[M＋H]+。16.(R，S)-2-(3，3-二甲基丁基)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。MS(ES)m/e472[M＋H]+。17.(R，S)-2-環(huán)己基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。MS(ES)m/e470[M＋H]+。
實(shí)施例18制備(R，S)-2-[2-(4-氟苯基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸采用制備8(c)-(g)的方法，不同的是在制備8(c)的方法中用4-(氟)苯乙胺替代苯乙胺，并且在制備8(g)的方法中用在二甲苯中的二異丙基乙胺代替在甲醇中的甲醇鈉，并采用實(shí)施例1的方法，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e510[M＋H]+。
實(shí)施例19制備(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-7-氨基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(2.67毫摩爾)、三乙胺(0.42毫升，5.87毫摩爾)和二苯基磷酰基疊氮化物(0.62毫升，2.80毫摩爾)在甲苯(20毫升)中的混合物在105℃加熱0.5小時(shí)。在溫度降至80℃后，用芐醇(0.60毫升，0.42毫摩爾)處理該混合物，攪拌14小時(shí)并濃縮。殘余物經(jīng)閃式色譜凈化，得到(R，S)-7-(芐酯基)氨基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯。
將上述Cbz化合物(0.68克，1.38毫摩爾)溶于甲醇(10毫升)中，加入披鈀碳(5％，50毫克)。將該混合物氫化1小時(shí)，經(jīng)硅藻土過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-7-[[[4-(N-芐氧羰基)-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(2.2毫摩爾)、1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]苯甲酸(2.0毫摩爾)，并用二異丙基乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用實(shí)施例19(a)的化合物(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，殘余物經(jīng)閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將實(shí)施例19(b)的化合物(0.1 5毫摩爾)和10％Pd/C(20毫克)在甲醇(40毫升)和乙酸(8滴)中的溶液在氫氣氛(45psi)下振搖30分鐘。將該混合物過濾，真空濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物。d)(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸在室溫和氬氣氛下，將實(shí)施例19(c)的化合物(65毫克，012毫摩爾)在THF水溶液中的氫氧化鋰中的溶液攪拌過夜。用3N鹽酸(1毫升)處理該混合物，并真空濃縮。殘余物經(jīng)HPLC純化。MS(ES)m/e485[M＋H]+，483[M－H]-。
實(shí)施例20制備(R，S)-2-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-吡啶基)乙基]羰基]氨基-]2-(苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯采用實(shí)施例19(b)的方法，不同的是用4-(吡啶基)丙酸代替4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]苯甲酸，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-2-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸采用實(shí)施例2(c)的方法，不同的是用實(shí)施例20(a)的化合物代替實(shí)施例2(b)的化合物，然后采用實(shí)施例2(d)的方法，不同的是用在THF水溶液中的氫氧化鋰代替在甲醇水溶液中的氫氧化鈉，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e484[M＋H]+，482[M－H]-。
實(shí)施例21制備(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-4-乙酸甲酯采用制備8(a)-(g)的方法，不同的是用4-溴-3-甲基苯甲酸代替3-溴-4-甲基苯甲酸，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并二吖庚因-4-乙酸采用實(shí)施例5(b)-(d)的方法，不同的是用實(shí)施例21(a)化合物代替實(shí)施例5(a)化合物，得到標(biāo)題化合物。(C31H39N3O4·H2O)的分析，計(jì)算值C，69.78；H，7.71；N，7.84。實(shí)測(cè)值C，69.38；H，7.68；N，7.37。
實(shí)施例22制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)[7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-丙酸a)5-[5-(叔丁氧羰基)-2-[[[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)]氨基]甲基]苯基]-4-乙氧羰基-4-戊烯酸乙酯和5-[5-(叔丁氧羰基)-2-[[[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)]氨基]甲基]苯基]-4-乙氧羰基-3-戊烯酸乙酯采用制備8(e)的方法，不同的是用2-亞甲基戊二酸二乙酯代替[Tet.Lett.，30，7381(1989)]衣康酸二甲酯，得到標(biāo)題化合物。b)5-[5-(叔丁氧羰基)-2-[[[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)]氨基]甲基]苯基]-4-(乙氧羰基)戊酸乙酯采用制備8(f)的方法，不同的是用實(shí)施例22(a)的化合物代替制備8(e)的化合物，并用在乙醇∶乙酸乙酯中的Pd/C代替在甲醇中的氫氧化鈀，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-丙酸乙酯采用制備8(g)的方法，不同的是用實(shí)施例22(b)化合物代替制備8(f)化合物，并且用在二噁烷中的氯化氫代替TFA，得到標(biāo)題化合物。d)(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-[7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-丙酸采用實(shí)施例1的方法，不同的是用實(shí)施例22(c)化合物代替(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e506[M＋H]+，540[M－H]-。(C30H39N3O4·HCl·3/8H2O)的分析，計(jì)算值C，65.68；H，7.48；N，7.66。實(shí)測(cè)值C，65.67；H，7.55。
實(shí)施例23-24a)對(duì)(R，S)-7-[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯進(jìn)行HPLC色譜，tR16分鐘和19.8分鐘(Chiracel OD，21.1×250mm，10毫升/分鐘，甲醇，在250nm處進(jìn)行UV測(cè)定)，得到下列化合物23(a)(+)-7-[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。24(a)(-)-7-[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。b)采用實(shí)施例5(c)-(d)的方法，不同的是用實(shí)施例23-24(a)化合物代替實(shí)施例5(b)化合物，得到下列化合物23(b)(+)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸[α]D+128(c0.5，CH3OH)；[α]D+80(c＝0.5，水)；(C30H38N4O4·2C2HF3O2·1.5H2O)的分析，計(jì)算值C，52.78；H，5.60；N，7.24。實(shí)測(cè)值C，52.70；H，5.89；N，7.47。24(b)(-)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸[α]D-118(c 0.5，CH3OH)；(C30H38N4O4·2C2HF3O2)的分析，計(jì)算值C，54.69；H，5.40；N，7.50。實(shí)測(cè)值C，54.59；H，5.40；N，7.85。
實(shí)施例25制備(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-7-羧基-4-異丙基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用制備7(b)-(f)的方法，不同的是在制備7(b)中用異丙胺代替苯乙胺，并且在制備7(f)中用在回流的二甲苯中的二異丙基乙胺代替在甲醇中的甲醇鈉，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例5(b)-(c)的方法，不同的是用實(shí)施例25(a)化合物代替實(shí)施例5(a)化合物，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用制備8(j)的方法，不同的是用實(shí)施例25(b)化合物代替制備8(i)化合物，得到標(biāo)題化合物。HPLC k’4.27(PRP-1；15％乙腈/水/0.1％TFA)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.12(d，J＝1.9 Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.3，1.9 Hz，1H)，6.59(d，J＝8.3 Hz，1H)，5.29(d，J＝17.0Hz，1H)，5.17(dd，J＝8.9，5.2 Hz，1H)，4.72-4.84(m，1H)，4.10(d，J＝17.0 Hz，1H)，3.34-3.45(m，2H)，2.70-3.15(m，5H)，2.63(dd，J＝16.8，5.2 Hz，1H)，1.92-2.05(m，2H)，1.69-1.88(m，2H)，1.35-1.54(m，4H)，1.16-1.31(m，2H)，1.20(d，J＝6.8 Hz，3H)，1.03(d，J＝6.9 Hz，3H)；MS(ES)m/e 457.2[M＋H]+；(C25H36N4O4·1.5CF3CO2H·1.5H2O)的分析，計(jì)算值C，51.37；H，6.24；N，8.56。實(shí)測(cè)值C，51.49；H，6.39；N，8.46。
實(shí)施例26-27制備(R)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；和(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)通過手性HPLC分離實(shí)施例8(j)化合物，得到下列化合物26(a).(R)-7-[[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；[α]D+140(c1，CH3OH)；HPLC tR12.9分鐘(Chiralcel OD，21.2×250mm，10毫升/分鐘，甲醇，在325nm處進(jìn)行UV測(cè)定)27(a).(S)-7-[[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；[α]D-142.5(c1，CH3OH)；HPLC tR15.1分鐘(Chiralcel OD，21.2×250mm，10毫升/分鐘，甲醇，在325nm處進(jìn)行UV測(cè)定)。b)采用實(shí)施例8(c)的方法，不同的是用實(shí)施例26(a)和27(a)化合物代替實(shí)施例8(j)化合物，得到下列化合物26(b).(R)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；HPLC tR14.3分鐘(U1trasphere C18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)27(b).(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；HPLC tR14.61分鐘(Ultrasphere C18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)c)采用制備8(j)的方法，不同的是用實(shí)施例26(b)和27(b)化合物代替制備8(i)化合物，得到下列化合物26(c).(R)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸[α]D+92.4(c0.5，CH3OH)；MS(ES)m/e429[M＋H]+，427[M－H]-。HPLC tR12.7分鐘(Ultrasphere C18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；(C23H32N4O4·4.5CF3CO2H·3.33H2O)的分析，計(jì)算值C，37.44；H，4.16；N，5.29。實(shí)測(cè)值C，37.43；H，3.81；N，5.20。27(c).(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸[α]D-105.9(c 0.6，CH3OH)；MS(ES)m/e429[M＋H]+，427[M－H]-。HPLC tR12.6分鐘(Ultrasphere C18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；(C23H32N4O4·3CF3CO2H·1.25H2O)的分析，計(jì)算值C，43.92；H，4.77；N，7.06。實(shí)測(cè)值C，44.09；H，5.00；N，7.29。
實(shí)施例28制備(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-申基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；a)4-氟-3-甲基苯甲酸用5分鐘，向在無水THF(250毫升)中的干冰(10克)的混合物中加入溴化4-氟-3-甲基苯基鎂在THF中的溶液(1.0M，250毫升，250毫摩爾)，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭饪s。殘余物在水(500毫升)和乙醚(250毫升)之間分配，分離各層。水層用乙醚(2×250毫升)洗滌，并用濃鹽酸酸化至pH1。將所得混合物在冰浴中冷卻并過濾。用水洗滌固體并干燥，得到標(biāo)題化合物(25.92克，67％)，為米色固體1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90-8.02(m，2H)，7.09(t，J＝8.9Hz，1H)，2.34(d，J＝1.7 Hz，3H)；IR(氯仿)3400-2300(寬)，1694cm-1；MS(ES)m/e155[M＋H]+；m/e153[M－H]-.b)4-氟-3-甲基苯甲酸叔丁酯在-78℃和壓力瓶中，向?qū)嵤├?8(a)化合物(3.08克，20毫摩爾)在無水乙醚(15毫升)中的懸浮液中通入異丁烯，使反應(yīng)體積達(dá)到50毫升。滴加三氟乙磺酸(0.09毫升，1毫摩爾)，將反應(yīng)瓶封緊，并溫?zé)嶂潦覝亍?小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻并打開反應(yīng)瓶。加入5％碳酸氫鈉，并在溫水浴中攪拌該混合物，以除去過量的異丁烯。加入乙醚并分離各層。乙醚層用5％碳酸氫鈉和鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥。濃縮，得到標(biāo)題化合物(3.83克，91％)，為黃色油，該油不需進(jìn)一步純化即可使用TLC(甲苯)Rf0.73；1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.77-7.89(m，2H)，7.01(t，J＝8.9 Hz，1H)，2.30(d，J＝1.8Hz，3H)，1.59(s，9H)；IR(CCl4)1715，1369，1296，1258，1167，1124，1117，1105cm-1；MS(ES)m/e443[2M＋Na]+，421[2M＋H]+，211[M＋H]+，155[M＋H－C4H8]+.c)4-氟-3-(甲氨基甲基)苯甲酸叔丁酯將實(shí)施例28(b)化合物(3.83克，18.22毫摩爾)、N-溴琥珀酰亞胺(3.57克，20.24毫摩爾)、過氧化苯甲酰(0.22克，0.91毫摩爾)和四氯化碳(90毫升)的混合物加熱回流。16小時(shí)后，在冰浴中冷卻反應(yīng)物，過濾，并濃縮濾液。使殘余物通過短硅膠墊，然后用20％乙酸乙酯∶己烷洗滌，并濃縮濾液。將殘余物溶于THF(90毫升)中，快速加入40％甲胺水溶液(7.9毫升，91.1毫摩爾)。將反應(yīng)物攪拌過夜并濃縮。殘余物用乙醚稀釋，并依次用1.0N氫氧化鈉、水和鹽水洗滌。有機(jī)相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的10％甲醇)，得到標(biāo)題化合物(2.58克，59％)，為黃色油TLC(甲苯)Rf0.49(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的10％甲醇)；1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.97(dd，J＝7.3，2.3Hz，1H)，7.90(ddd，J＝8.4，5.2，2.3Hz，1H)，7.07(app t，1H)，3.83(s，2H)，2.46(s，3H)，1.59(s，9H)；IR(CCl4)1714，1368，1297，1248，1164，1106 cm-1；MS(ES)m/e240[M＋H]+，184[M＋H－C4H8]+.d)(S)-4-氟-3-[[[4-甲氧基-1，4-二氧代-2-[[芐氧羰基]氨基]丁基]甲氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯在室溫，向?qū)嵤├?8(c)化合物(478.6克，2毫摩爾)、N-Cbz-L-天冬氨酸β-甲酯[J.Am.Chem.Soc.，79，5697(1957)；J.Am.Chem.Soc.，85，2483(1963)](618.8毫克，2.2毫摩爾)和1-羥基苯并三唑水合物(297.3毫克，2.2毫摩爾)在無水二甲基甲酰胺(5毫升)中的溶液中加入二環(huán)己基碳化二亞胺(453.9毫克，2.2毫摩爾)。24小時(shí)后，用乙醚(25毫升)稀釋該混合物，并過濾。濃縮濾液，殘余物用乙醚(50毫升)稀釋，并用水(2×10毫升)和鹽水(10毫升)洗滌。用硫酸鎂干燥，濃縮，并進(jìn)行色譜凈化(硅膠，2∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到標(biāo)題化合物(0.87克，87％)，為無色的油TLC Rf0.44(硅膠，2∶1己烷∶乙酸乙酯)；1H NMR(250MHz，CDCl3)酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物；δ7.75-8.00(m，2H)，7.15-7.45(m，5H)，7.00-7.15(m，1H)，5.72-5.92(m，1H)，4.91-5.25(m，3H)，4.45-4.63(m，2H)，3.66(s，3H)，3.13和2.89(2xs，3H)，2.58-2.94(m，2H)，1.56(s，9H)；IR(CCl4)3415，3260，1736，1716，1652，1497，1368，1296，1252，1207，1163，1117，1109 cm-1；MS(ES)m/e1027[2M＋Na]+，1005[2M＋H]+，503[M＋H]+，447[M＋H－C4H8]+e)(S)-4-氟-3-[[[4-甲氧基-1，4-二氧代-2-氨基丁基]甲氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯在室溫和氫氣氛(50psi)下，振搖實(shí)施例28(d)化合物(0.87克，1.73毫摩爾)、10％Pd/C(184毫克，0.17毫摩爾)和甲醇(17毫升)的混合物。1.5小時(shí)后，反應(yīng)物經(jīng)硅藻土過濾并濃縮。進(jìn)行色譜凈化(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的10％甲醇)，得到標(biāo)題化合物(579.8毫克，91％)，為無色的油TLC Rf0.50(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯中的10％甲醇)；1H NMR(250MHz，CDCl3)酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物；δ7.80-8.05(m，2H)，7.02-7.18(m，1H)，4.55-4.88(m，2H)，4.15-4.28(m，1H)，3.71和3.70(2xs，3H)，3.11和2.95(2xs，3H)，2.76(dd，J＝16.3，5.4Hz，1H)，2.48-2.67(m，1H)，1.74和1.57(2xs，9H)；IR(CCl4)3380，1735，1717，1653，1370，1298，1253，1164，1112cm-1；MS(ES)m/e369[M＋H]+，313[M＋H－C4H8]+.f)(S)-(-)-2，3，4，5-四氫-7-(叔丁氧羰基)-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在氬氣氛和油浴中，將實(shí)施例28(e)(416.1毫克，1.13毫摩爾)和2，6-二叔丁基吡啶(0.51毫升，2.26毫摩爾)在無水二甲基亞砜(5.7毫升)中的溶液在120-125℃加熱。17.5小時(shí)后，在冰浴中冷卻反應(yīng)物，并用水稀釋。該混合物用乙酸乙酯萃取，合并的乙酸乙酯層用水和鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥并濃縮，進(jìn)行色譜凈化(硅膠，3∶2乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物(221.8毫克，56％)，為幾乎無色的固體；TLC Rf0.41(3∶2乙酸乙酯/己烷)；[α]D-202.7°(c1.0，CH3OH)；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.68(dd，J＝8.5，1.8Hz，1H)，7.59(d，J＝1.8Hz，1H)，6.50(d，J＝8.5Hz，1H)，5.44(d，J＝16.4Hz，1H)，5.08-5.16(m，1H)，4.54(brd，J＝4.5Hz，1H)，3.76(d，J＝16.4Hz，1H)，3.75(s，3H)，3.08(s，3H)，3.00(dd，J＝16.0，6.9Hz，1H)，2.67(dd，J＝16.0，6.3Hz，1H)，1.57(s，9H)；IR(chloroform)3560-3240(br)，1731，1695，1663，1610，1369，1302，1252，1171，1146，1134cm-1；MS(ES)m/e719[2M＋Na]+，697[2M＋H]+，349[M＋H]+.g)(S)-(-)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例28(f)化合物(176.4毫克，0.506毫摩爾)在無水二氯甲烷(2.5毫升)中的溶液冷卻至0℃，并通過三次排空/氬沖洗循環(huán)脫氧。用3分鐘滴加TFA(2.5毫升)，并將所得溶液攪拌2小時(shí)，此間溫度升至+15℃。將反應(yīng)物濃縮(20℃)，殘余物從甲苯中再次濃縮(35℃)以除去殘余的TFA，得到標(biāo)題化合物。h)(S)-(-)-7-[1-[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例28(g)化合物、水合1-羥基苯并三唑(82毫克，0.607毫摩爾)和4-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶(163毫克，0.607毫摩爾)溶于無水二甲基甲酰胺(2.5毫升)中，在氬氣氛下將該溶液冷卻至0℃。加入二異丙基乙胺(0.18毫升，1.01毫摩爾)，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(116毫克，0.607毫摩爾)，并將反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝亍?1小時(shí)后，濃縮反應(yīng)物，將殘余物在水和氯仿之間分配。用硫酸鎂干燥，濃縮并進(jìn)行色譜凈化(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的10％甲醇)，得到標(biāo)題化合物(215.4毫克，78％)，為黃色泡沫TLC Rf0.50(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯中的10％甲醇)；[α]D-140.2°(c1.0，CH3OH)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.08-7.15(m，2H)，6.52(d，J＝8.3Hz，1H)，5.44(dd，J＝16.4Hz，1H)，5.06(t，J＝6.6Hz，1H)，3.90-4.80(brm，4H)，3.75(s，3H)，3.73(d，J＝16.4Hz，1H)，3.08(s，3H)，2.99(dd，J＝15.8，6.6Hz，1H)，2.56-2.93(m，5H)，1.60-1.83(m，4H)，1.46(s，9H)，1.08-1.42(m，6H)；IR(CCl4)3290，1735，1689，1669，1610，1436，1426，1365，1286，1173cm-1；MS(ES)m/e1085(2M＋H)+，565[M＋Na]+，543[M＋H]+，502，487[M＋H－C4H8]+.i)(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例27(b)-(c)的方法，將實(shí)施例28(h)化合物轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。
實(shí)施例29制備(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)4-氟-3-氰基苯甲酸向2-氟-5-甲基芐腈(13.5克，0.1摩爾)、溴化四丁基胺(1.61克，5毫摩爾)和三水合氯化釕(III)(0.261克，1毫摩爾)在二氯甲烷(150毫升)中的混合物中加入次氯酸鈉溶液(345毫升，0.45摩爾)，用20％硫酸中和至pH9。在室溫?cái)嚢柙摲磻?yīng)混合物，并通過加入20％氫氧化鈉溶液保持在pH 9。3小時(shí)后，分離水相，并用20％硫酸中和至pH2，過濾所形成的固體，得到標(biāo)題化合物(3.4克，20％)。熔點(diǎn)177-8℃。1H NMR(CDCl3)δ7.35(t，J＝8.70Hz，1H)，8.38(m，1H)，8.42(m，1H).b)4-氟-3-氰基苯甲酸叔丁酯在80℃，用10分鐘，向攪拌著的實(shí)施例29(a)化合物(100毫克，0.6毫摩爾)在甲苯(20毫升)中的溶液中加入N，N-二甲基甲酰胺二叔丁基乙縮醛(1毫升，4毫摩爾)在甲苯(2毫升)中的溶液。加熱該反應(yīng)混合物1小時(shí)，冷卻，用飽和碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(70毫克，52％)。MS(ES)m/e222[M＋H]+.1HNMR(CDCl3)δ1.60(9H，s)，7.29(t，J＝8.62Hz，1H)8.25(m，1H)，8.28(m，1H).c)N-[[2-氰基-4-叔丁氧羰基]苯基]-L-天冬氨酸β-甲酯將實(shí)施例29(b)化合物(6克，27毫摩爾)、L-天冬氨酸β-甲酯鹽酸鹽(6.1克，33毫摩爾)和碳酸氫鈉(8.37克，100毫摩爾)在水(20毫升)和二甲基亞砜(80毫升)中的混合物在72℃加熱24小時(shí)。反應(yīng)混合物用冰冷卻的稀鹽酸稀釋，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用冷的飽和碳酸氫鈉水溶液萃取。合并堿性提取液，用冷的稀鹽酸酸化至pH2，并用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)提取液用硫酸鎂干燥，并濃縮，得到標(biāo)題化合物(7.1克，75％)，MS(ES)m/e349[M＋H]+；1H NMR(CDCl3)δ 1.57(s，9H)，3.01(m，2H)，3.75(s，1H)，4.64(m，1H)，5.77(d，J＝8.49Hz，1H)，6.71(d，J＝8.93Hz，1H)，8.02(dd，J＝8.93，1.85Hz，1H)，8.08(d，J＝1.89Hz，1H).d)N-[[2-甲酰基-4-叔丁氧羰基]苯基]-L-天冬氨酸β-甲酯將實(shí)施例29(c)化合物(7.0克，20毫摩爾)溶于乙酸(65毫升)中并置于氫化瓶中。冷卻后，加熱濕的阮內(nèi)鎳(14克)、水(65毫升)和吡啶(65毫升)。所得混合物用氬氣吹掃氧0.5小時(shí)，并在60℃和氫氣氛下振搖5小時(shí)。將該混合物脫氣，過濾，濾液與甲苯在50℃和高真空下共沸。將殘余的油溶解在乙酸乙酯(300毫升)中，并用冷的稀鹽酸洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為淡橙色非晶態(tài)固體(5.9克，84％)。
MS(ES)m/e352[M＋H]+；1HNMR(CDCl3)δ1.59(s，9H)，3.00(m，2H)，3.74(s，1H)，4.77(m，1H)，6.73(d，J＝8.88Hz，1H)，8.03(d，J＝8.85Hz，1H)，8.20(d，J＝2.12Hz，1H)，9.20(d，J＝8.31Hz，1H)，9.88(s，1H).e)N-[[2-(N-甲基)氨基甲基-4-叔丁氧羰基]苯基]-L-天冬氨酸β-甲酯在氫化瓶中，將實(shí)施例29(d)化合物(5.9克，16.7毫摩爾)在乙酸乙酯(100毫升)中的溶液用氬氣吹掃氧0.5小時(shí)。加入氧化鉑(0.6克)、無水硫酸鎂(5.9克，49毫摩爾)和甲胺溶液(3.2M，在甲醇中，150毫升，480毫摩爾)。將所得混合物在氫氣氛(50psi)下振搖5小時(shí)，并在室溫放置18小時(shí)。在冷卻下加入乙酸(75毫升)后，將該混合物再在氫氣氛(50psi)下振搖2小時(shí)，并過濾。將濾液濃縮，并與甲苯共沸，殘余物經(jīng)XAD-2(350克)柱脫鹽，用水(1.5升)洗脫，然后用50％乙腈∶水洗脫。收集兩個(gè)餾分(300毫升)，濃縮，將殘余物凍干，得到米色粉末。將該粉末溶于二氯甲烷(200毫升)中，濃縮，殘余物與甲苯共沸，并干燥，得到標(biāo)題化合物(5.2克，85％)。MS(ES)m/e367[M＋H]+。f)(S)-7-(叔丁氧羰基)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-甲基-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在室溫和氬氣氛下，向?qū)嵤├?9(e)(5.2克，14.2毫摩爾)和三乙胺(2.0毫升，14.4毫摩爾)在二氯甲烷(250毫升)中的溶液中加入六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)膦(6.5克，14.7毫摩爾)。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜，并用冰冷卻的稀鹽酸溶液、水、5％碳酸氫鈉、飽和鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥。將該溶液過濾，濃縮，并將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，40％乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物(1.1克，22％)。
MS(ES)m/e349.2[M＋H]+；1H NMR(CDCl3)δ1.57(s，9H)，2.67(dd，J＝15.93，6.30Hz，2H)，3.00(dd，J＝15.93，6.77Hz，2H)，3.08(s，3H)，3.75(s，1H)，3.76(d，J＝16.44Hz，1H)4.51(d，J＝4.61，1H)，5.11(m，1H)5.45(d，J＝16.44Hz，1H)，6.50(d，J＝8.44Hz，1H)，7.55(d，J＝1.88Hz，1H)，8.20(dd，J＝8.48，1.88Hz，1H)；[α]D-225.1°(c1，CH3OH).g)(S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-甲基-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在室溫和氬氣氛下，向?qū)嵤├?9(f)化合物(160毫克，0.46毫摩爾)在二氯甲烷(5毫升)中的溶液中加入4M鹽酸∶二噁烷(5毫升，20毫摩爾)。攪拌該反應(yīng)混合物18小時(shí)。濃縮該懸浮液，得到米色固體狀標(biāo)題化合物。h)(S)-7-[(4-叔丁氧羰基-4’-聯(lián)哌啶)-1-基羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例29(g)化合物、1-羥基苯并三唑(75毫克，0.55毫摩爾)和4-叔丁氧羰基-4’-聯(lián)哌啶溶于無水二甲基甲酰胺(2.5毫升)中。加入二異丙基乙胺(0.16毫升，0.92毫摩爾)，然后加入1-(二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(105毫克，0.55毫摩爾)，并在室溫和氬氣氛下攪拌該反應(yīng)混合物過夜。將該反應(yīng)混合物在冰水(50毫升)和乙酸乙酯(30毫升)之間分配。分離各層，水相用乙酸乙酯(2×30毫升)萃取。合并的有機(jī)相用硫酸鎂干燥，濃縮并將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，2％甲醇∶二氯甲烷)，得到標(biāo)題化合物(162毫克，59％)。
MS(ES)m/e599.0[M＋H]+；1HNMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.20(m，6H)，1.70(m，4H)，2.66(dd，J＝16.08，6.04Hz，2H)，2.81(brs，4H)，2.98(dd，J＝16.08，7.31Hz，2H)，3.06(s，3H)，3.71(d，J＝16.44Hz，1H)，3.73(s，1H)，3.76(d，J＝16.44Hz，1H)4.13(brs，4H)，5.07(m，1H)5.45(d，J＝16.44Hz，1H)，6.52(d，J＝8.51Hz，1H)，7.09(m，2H)；[α]D-139.3°(c1，CH3OH).i)(S)-7-[1-[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例27(b-c)的方法，將實(shí)施例29(h)化合物轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。
實(shí)施例30制備(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(S)-7-[[1’-(叔丁氧羰基)-4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例27(a)化合物(2.85克，5.3毫摩爾)溶于1∶1甲醇∶THF(30毫升)中，用氬氣吹掃，冷卻并用1N氫氧化鈉(6.3毫升，6.3毫摩爾)處理。在室溫和氬氣氛下攪拌所得溶液16小時(shí)。將該溶液濃縮，用水(10毫升)稀釋，并用1M乙酸調(diào)節(jié)pH至5(石蕊試紙)。將該溶液過濾，真空干燥固體，得到標(biāo)題化合物(2.46克，87％)。b)(S)-7-[[4，4’-聯(lián)哌啶]-1-基羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸在氬氣氛下，用在二噁烷(30毫升)中的4M鹽酸處理實(shí)施例30(a)化合物(1.46克，2.77毫摩爾)1小時(shí)。將該溶液濃縮，將殘余物溶于水中，用濃氫氧化銨調(diào)節(jié)pH至9(石蕊試紙)，并將所得溶液裝XAD-2柱(3×7.5cm)。該柱用水洗脫，然后用50％乙腈∶水洗脫。合并含有產(chǎn)物的餾分并凍干，得到標(biāo)題化合物(910毫克，77％)，將其從丙酮水溶液中重結(jié)晶。熔點(diǎn)(收縮193)218-220℃；1H NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.0-3.9(m，26H)，6.5-8.5(m，5H)；MS(ES)m/e429.2[M＋H]+。HPLC k’5.37(VyDac C18，4.5×250mm，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm進(jìn)行UV測(cè)定)；[α]D-180.3°(c1，MeOH)；(C23H32N4O4·2.33H2O)的分析，計(jì)算值C，58.71；H，7.81；N，11.91。實(shí)測(cè)值C，58.67；H，7.79；N，11.80。
實(shí)施例31制備(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例30的方法，不同的是用實(shí)施例8(j)化合物代替實(shí)施例27(a)化合物，得到標(biāo)題化合物，為晶狀固體，熔點(diǎn)(收縮193℃)219-220℃；MS(ES)m/e429[M＋H]+。HPLC k’6.5(Ulreasphere ODS，4.5×250mm，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm進(jìn)行UV測(cè)定)。
實(shí)施例32制備(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸鈉將實(shí)施例31化合物(10毫克，0.023毫摩爾)溶于水(1毫升)中，加入1M氫氧化鈉(0.024毫升，0.024毫摩爾)。將所得溶液凍干，粉末從丙酮水溶液中結(jié)晶，得到晶狀固體標(biāo)題化合物(2毫克)。熔點(diǎn)220-223℃[收縮204℃]。
實(shí)施例33-34a)通過手性HPLC分離實(shí)施例1(a)化合物，得到下列化合物33(a).(R)-8-[[[2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；HPLC tR30.4分鐘(Chiralpak AS，4.6×250mm，8毫升/分鐘，1∶1己烷∶乙醇-0.5％二乙胺，在325nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；HPLC tR25.8分鐘(Ulreasphere C18，4.6×250mm，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm進(jìn)行UV測(cè)定)34(a).(S)-8-[[[2-[N-(芐氧羰基)-4-哌啶基]乙基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；HPLC tR22.1分鐘(Chiralpak AS，21.2×250mm，8毫升/分鐘，1∶1己烷∶乙醇-0.5％二乙胺，在254nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；HPLC tR25.9分鐘(UlreasphereC18，4.6×250mm，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在325nm進(jìn)行UV測(cè)定)。b)將實(shí)施例33(a)和34(a)化合物(100毫克)分別溶解在含有乙酸(20滴)的甲醇(15毫升)中，用10％Pd/C(50毫克)處理，并在氫氣氛下振搖5小時(shí)。該混合物經(jīng)硅藻土過濾并濃縮，得到下列化合物33(b).(R)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。HPLC tR15.6分鐘(UltrasphereC18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)34(b).(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。HPLC tR15.5分鐘(UltrasphereC18，4.6×250mm，15毫升/分鐘，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)c)采用實(shí)施例1(c)的方法，不同的是用實(shí)施例33(b)和34(b)化合物代替實(shí)施例1(b)化合物，得到下列化合物33(c).(R)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸1H NMR(DMSOd6)δ6.4-8.6(m，5H)，5.0-5.6(m，2H)，1.0-3.9(m，22H)；[α]D+82.3(c 0.3，CH3OH)；MS(ES)m/e403[M＋H]+，[M－H]-401；HPLC k’5.0 HPLC tR15.6分鐘(Ultrasphere C18，4.6×250mm，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；(C21H30N4O4·2.25C2HF3O2·2.75H2O)的分析，計(jì)算值C，50.44；H，5.78；N，9.94。實(shí)測(cè)值C，50.42；H，5.89；N，10.17。34(c).(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸1H NMR(DMSOd6)δ 6.4-8.6(m，5H)，5.0-5.6(m，2H)，1.0-3.9(m，22H)；[α]D-110(c0.45，CH3OH)；MS(ES)m/e 403[M＋H]+，[M－H]-401；HPLC k’5.0 HPLC tR15.6分鐘(Ultrasphere C18，4.6×250mm，梯度，A乙腈，B水-0.1％TFA，5-60％乙腈，20分鐘，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；(C21H30N4O4·1.5C2HF3O2·1.25H2O)的分析，計(jì)算值C，43.22；H，5.37；N，7.91。實(shí)測(cè)值C，43.10；H，5.17；N，8.11。
實(shí)施例35制備(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(S)-4-[N-(叔丁氧羰基)-(甲氨基)-甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯用(R)-2-(三氟甲磺酰氧基)琥珀酸二甲酯[Liebigs Ann.Chem.，314-333(1986)](8.8克，0.03毫摩爾)和2，6-二叔丁基吡啶(6克，0.03毫摩爾)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液處理3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(甲基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯(10.4克，0.03毫摩爾)在二氯甲烷(75毫升)中的溶液，并將該混合物攪拌4天。用稀鹽酸洗滌該混合物，有機(jī)相用碳酸鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮，得到標(biāo)題化合物(73％)。b)(S)-4-(甲氨基)甲基-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯用在二噁烷(60毫升)中的4M鹽酸處理實(shí)施例35(a)化合物(14克，0.027毫摩爾)在二氯甲烷(25毫升)中的溶液，攪拌45分鐘，用5％碳酸鈉洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)相并濃縮，得到標(biāo)題化合物(6.5克)。c)(S)-8-(叔丁氧羰基)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實(shí)施例35(b)化合物(6.5克，0.015毫摩爾)在二甲苯(100毫升)中的溶液加熱至130℃，保持14.5小時(shí)，冷卻并濃縮。殘余物與乙醚一起攪拌，過濾并濃縮。將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，0.5-0.75％甲醇∶二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物的餾分，濃縮，并在冷卻下貯藏3天。過濾該混合物并濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物(2.7克，52％)。d)(S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯鹽酸鹽用在二噁烷(25毫升)中的4M鹽酸處理實(shí)施例35(c)化合物(2.8克)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液，攪拌16小時(shí)。將該混合物濃縮，得到標(biāo)題化合物。e)(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-[N-三氟乙?；?4-哌啶基]乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯向N-甲基-2-(N-三氟乙?；?4-哌啶基)乙胺鹽酸鹽(300毫克，1.1毫摩爾)、二異丙基乙胺(140毫克，1.1毫摩爾)和水合1-羥基苯并三唑(300毫克，1.1毫摩爾)在二甲基甲酰胺(2.5毫升)中的混合物中加入實(shí)施例35(d)化合物(310毫克，1.1毫摩爾)和二異丙基乙胺(285毫克，2.2毫摩爾)在二甲基甲酰胺(2.5毫升)中的溶液，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(220毫克，1.1毫摩爾)。攪拌該混合物16小時(shí)，濃縮，殘余物用乙酸乙酯和水研制。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。將殘余物進(jìn)行色譜凈化(硅膠，0.5-1.5％甲醇∶二氯甲烷)，合并含有產(chǎn)物的餾分并濃縮，得到標(biāo)題化合物(260毫克，51％)。[α]D-75.6(c1，CH3OH)；MS(ES)m/e513[M＋H]+，557[M＋HCO2-]-；HPLC tR8.22分鐘(WHELK-O，4.6×25mm，1毫升/分鐘，10％甲醇∶水，在220nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；(C24H31F3N4O5·1.5H2O)的分析，計(jì)算值C，53.33；H，6.34；N，10.36。實(shí)測(cè)值C，53.39；H，6.23；N，9.98。f)(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實(shí)施例35(e)化合物與在甲醇/水中的氫氧化鈉一起攪拌，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例36制備(S)-7-叔丁氧羰基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]肉桂酸甲酯向攪拌著的制備8(d)化合物(4.9克，10毫摩爾)在無水乙腈(15毫升)中的溶液中加入丙烯酸甲酯(3毫升，40毫摩爾)二異丙基乙胺(3.5毫升，20毫摩爾)、三鄰甲苯基膦(304毫克，1毫摩爾)和乙酸鈀(112毫克，0.5毫摩爾)。將反應(yīng)物中的氧氣反復(fù)排空，并用氬氣吹掃，然后加熱至80℃。1小時(shí)后，再加入三鄰甲苯基膦(304毫克，1毫摩爾)和乙酸鈀(112毫克，0.5毫摩爾)，并攪拌反應(yīng)物2小時(shí)。然后將反應(yīng)物冷卻至室溫，濃縮，懸浮在乙醚(100毫升)和石油醚(50毫升)中，濾出不溶性物質(zhì)并濃縮。殘留的油經(jīng)閃式色譜凈化(硅膠，15％乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物(4.91克，99％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)(酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.42和1.49(9H，2brs)，1.60(9H，s)，2.74和2.84(2H，2brs)，3.28和3.42(2H，2brs)，3.82(3H，s)，4.47和4.57(2H，2brs)，6.43(1H，d，J＝14.8Hz)，7.05-7.30(6H，m)，7.82-7.92(1H，m)，7.97(1H，dd)，8.15(1H，d，J＝1.4Hz).b)5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基丙酸甲酯在55psi氫氣壓下，用在甲醇(100毫升)中的10％Pd/C(2.5克)將實(shí)施例36(a)化合物(4.91克，9.9毫摩爾)氫化7小時(shí)。經(jīng)硅藻土墊過濾并濃縮，剩余的油經(jīng)閃式色譜凈化(硅膠，15％乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物，為澄清的油(4.48克，91％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)(酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.42和1.49(9H，2brs)，1.60(9H，s)，2.58(2H，t)，2.77和2.82(2H，2brs)，2.92(2H，brs)，3.31和3.42(2H，2brs)，3.70(3H，s)，4.38和4.47(2H，2brs)，7.07-7.31(6H，m)，7.78(1H，s)，7.81(1H，dd).c)5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基丙酸在室溫，用在二噁烷(50毫升)中的1N氫氧化鈉(10毫升)處理實(shí)施例36(b)化合物(4.48克，9毫摩爾)16小時(shí)。用1N鹽酸(10毫升)酸化后，該反應(yīng)物用乙酸乙酯(2×100毫升)萃取，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(4.12克，95％)。TLC Rf0.5(硅膠，95∶4∶1氯仿∶甲醇∶乙酸)。d)5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基丙酰氟在氬氣氛下，向攪拌著的實(shí)施例36(c)化合物(4.12克，8.5毫摩爾)在無水二氯甲烷(25毫升)中的溶液中加入吡啶(0.73毫升，9毫摩爾)，然后加入氰尿酰氟(0.56毫升，6.1毫摩爾)。攪拌2小時(shí)后，反應(yīng)物變成稠的懸浮液。然后將反應(yīng)物濃縮，溶于乙醚(100毫升)中，并經(jīng)硅藻土墊過濾以除去不溶性物質(zhì)。濾液用冷水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到無色油狀標(biāo)題化合物(4.21克，96％)。e)4(R)-芐基-3-[3-[5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基]丙?；鵠-2-噁唑烷酮在-78℃和氬氣氛下，用注射器向攪拌著的(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮(1.8克，10毫摩爾)在無水THF(25毫升)中的溶液中滴加在己烷中的2.5N正丁基鋰溶液(3.8毫升)。攪拌15分鐘后，用5分鐘滴加上述實(shí)施例36(d)化合物(4.21克，8.5毫摩爾)在THF(10毫升)中的溶液。在-78℃攪拌該反應(yīng)物1小時(shí)，并用飽和氯化銨水溶液(50毫升)終止反應(yīng)。使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，用乙酸乙酯萃取，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物經(jīng)閃式色譜凈化(硅膠，25％乙酸乙酯∶己烷)，得到白色固體狀標(biāo)題化合物(5.13克，89％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)(酰胺旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.42和1.49(9H，2brs)，1.59(9H，s)，2.75(1H，dd)，2.78(1H，m)，2.87(1H，m)，3.01(2H，m)，3.18(1H，m)，3.23(1H，dd)，3.31(1H，dd)，3.33(1H，m)，3.44(1H，m)，4.18(2H，m)，4.46和4.55(2H，2brs)，4.67(1H，m)，7.16(6H，m)，7.29(5H，m)，7.81(1H，d)，7.82(1H，s).f)4(R)-芐基-3-[3-[5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基]-2(S)-(甲氧羰基甲基)丙?；鵠-2-噁唑烷酮在-78℃和氬氣氛下，用注射器向攪拌著的實(shí)施例36(e)化合物(5.13克，8毫摩爾)在THF(75毫升)中的溶液中滴加1N六甲基二硅氮烷鋰在THF(8.2毫升)中的溶液。攪拌15分鐘后，一次加入溴乙酸甲酯(3.75毫升，40毫摩爾)。使反應(yīng)物溫?zé)嶂?28℃，再攪拌2小時(shí)，用飽和氯化銨終止反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物經(jīng)閃式色譜凈化(硅膠，20％乙酸乙酯∶己烷)，得到白色固體狀的標(biāo)題化合物(3.00克，53％)。HPLC k’2.9，次要非對(duì)映體k’6.4，d.e.88％(Ultrasphere，4.6×250mm，1.5毫升/分鐘，20％乙酸乙酯∶己烷，在254nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.40和1.47(9H，2brs)，1.52(9H，s)，2.44和2.52(1H，brs和brd)，2.70(1H，dd)，2.80(2H，m)，2.88(2H，m)，3.00(1H，dd)，3.31(1H，dd)，3.39(2H，m)，3.67(3H，s)，3.79(1H，t)，4.00(1H，d)，4.30和4.38(1H，brs和brd)，4.55(3H，m)，7.10-7.35(11H，m)，7.72(1H，s)，7.79(1H，dd).g)(S)-3-[5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基]-2-(甲氧羰基甲基)丙酸鹽酸鹽在0℃，向攪拌著的實(shí)施例36(f)化合物(1.47克，2毫摩爾)在(3∶1)THF水(16毫升)中的溶液中滴加氫過氧化鋰(由30％過氧化氫(0.7毫升)和水合氫氧化鋰(90毫克，2.1毫摩爾)制備)在水(2.1毫升)中的溶液。在0℃攪拌1小時(shí)后，在冷卻下，通過滴加亞硫酸鈉(1.28克)在水(6.2毫升)中的溶液破壞過量的過氧化物。然后用3N鹽酸酸化反應(yīng)物，并用二氯甲烷(2×50毫升)萃取，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。h)(S)-3-[5-(叔丁氧羰基)-2-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯基]-2-(甲氧羰基甲基)-丙酸鹽酸鹽用在二噁烷(15毫升)中的4N鹽酸溶液處理實(shí)施例36(g)化合物，在室溫?cái)嚢?0分鐘，并在不加熱的條件下濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯中并濃縮，以除去過量的鹽酸，并從乙酸乙酯∶乙醚中結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(0.75克，76％)，為白色固體。
1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ1.60(9H，s)，2.68(1H，dd)，2.81(1H，dd)，2.98-3.18(5H，m)，3.42(2H，m)，3.68(3H，s)，4.40(1H，d，J＝13.6Hz)，4.51(1H，d，J＝13.6Hz)，7.32(5H，m)，7.58(1H，d，J＝8.0 Hz)，7.90(1H，dd)，7.95(1H，d，J＝1.4Hz).i)(S)-7-叔丁氧羰基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸在0℃，在Dewer瓶中，向攪拌著的實(shí)施例36(h)化合物(0.35克，0.71毫摩爾)在無水N，N-二甲基甲酰胺(20毫升)中的溶液中加入三乙胺(200毫升，1.42毫摩爾)、碳酸氫鈉(300毫克，3.57毫摩爾)和二苯基磷酰疊氮化物(250毫升，1.2毫摩爾)。在0℃攪拌24小時(shí)后，將反應(yīng)物濃縮，溶于乙酸乙酯(100毫升)中，用水、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物經(jīng)閃式色譜凈化(硅膠，35％乙酸乙酯∶己烷)，得到標(biāo)題化合物，為粘性白色泡沫(243毫克，78％)。HPLC k’2.13，k’1.28(對(duì)映異構(gòu)體)＞99.5％旋光純度(Chiralpak AS，0.46×250mm，1毫升/分鐘，20％乙醇∶正己烷，在254nm處進(jìn)行UV測(cè)定)；[α]D-71.2(c 1.4，MeOH)；1HNMR(CDCl3.400MHz)δ1.60(9H，s)，2.42(1H，dd)，2.74(2H，t)，2.89(1H，dd)，3.02(2H，m)，3.60(1H，m)，3.72(3H，s)，3.81(1H，d，J＝16.7 Hz)，3.81(1H，m)，5.20(1H，d，J＝16.7 Hz)，7.00-7.23(6H，m)，7.69(1H，s)，7.71(1H，d).
實(shí)施例37制備(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯采用制備8(a)-(g)的方法，不同的是用4-溴-3-甲基苯甲酸代替3-溴-4-甲基苯甲酸，并用甲胺代替苯乙胺，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸采用實(shí)施例25(b)-(c)的方法，不同的是用實(shí)施例37(a)化合物代替實(shí)施例25(a)化合物，得到標(biāo)題化合物。HPLC k’3.23(PRP-1；15％乙腈/水-0.1％TFA)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.21-7.30(m，3H)，5.37(d，J＝16.6Hz，1H)，4.58-4.74(m，1H)，4.07(d，J＝16.6Hz，1H)，3.84-3.96(m，1H)，3.68-3.84(m，1H)，3.40(brd，J＝12.6Hz，2H)，3.17(dd，J＝17.7，4.0Hz，1H)，2.69-3.17(m，6H)，3.01(s，3H)，2.47(dd，J＝17.0，4.7Hz，1H)，1.10-2.10(m，10H)；MS(ES)m/e428.2[M＋H]+，214.6，205.4；(C24H33N3O4·2CF3CO2H·H2O)的分析，計(jì)算值C，49.93；H，5.54；N，6.24。實(shí)測(cè)值C，50.17；H，5.32；N，6.20。
實(shí)施例38制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-7-[4-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基]-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(2.2毫摩爾)、1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用1-(吡啶-4-基)哌嗪(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，殘余物經(jīng)閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。HPLC k’4.01(PRP-1；12％乙腈/水-0.1％TFA)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.17(d，J＝7.4Hz，2H)，7.12-7.24(m，4H)，6.63(d，J＝9.0Hz，1H)，5.59(d，J＝16.7Hz，1H)，5.21(dd，J＝9.0，5.1Hz，1H)，3.90(d，J＝16.7Hz，1H)，3.72-3.90(m，8H)，3.04(s，3H)，2.94(dd，J＝16.6，9.0Hz，1H)，2.66(dd，J＝16.8，5.1Hz，1H)；MS(ES)m/e 424.2[M＋H]+；(C22H25N5O4·2CF3CO2H)的分析，計(jì)算值C，47.93；H，4.18；N，10.75。實(shí)測(cè)值C，47.86；H，4.40；N，10.87。
實(shí)施例39制備(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-[2-(2-噻吩基)乙基]-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸采用制備8(c)-(j)的方法，不同的是在制備8(c)的方法中用2-(2-噻吩基)乙胺代替2-苯乙胺，并且在制備8(f)的方法中用硼氫化鈉和六水合氯化鎳代替Pd/C和氫，在制備8(g)的方法中用在回流甲苯中的三乙胺代替在甲醇中的甲醇鈉，并且在制備8(j)的方法中用在THF水溶液中的氫氧化鋰代替在甲醇中的氫氧化鈉溶液，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例40制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[[3-(4-哌啶基]丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸用六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)磷#(2.2毫摩爾)、1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-7-羧基-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用N-甲基-3-[N-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基]]丙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，殘余物經(jīng)閃式色譜凈化。
在室溫，將該產(chǎn)物溶于50％TFA/二氯甲烷中，并攪拌1小時(shí)。通過蒸發(fā)TFA和二氯甲烷濃縮該溶液，再溶解于二氯甲烷中，并再濃縮。
將一部分該化合物(0.26毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，并濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，并通過倒相閃式色譜(C-18硅膠，AN/W-TFA)純化殘余物。濃縮并凍干，得到標(biāo)題化合物。MS(ES)m/e507[M＋H]+，505[M－H]-。
實(shí)施例41制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-7-[[[3-(4-哌啶基]丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例40的方法，不同的是用實(shí)施例8(i)化合物代替(R，S)-7-羧基-4-(2-苯乙基)-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例42制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例2(a)的方法，不同的是在環(huán)合步驟中用異丙胺代替異戊胺，并且用在回流的二甲苯中的二異丙基乙胺代替在甲醇中的甲醇鈉，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用實(shí)施例2(b)的方法，不同的是用實(shí)施例42(a)化合物代替實(shí)施例2(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯采用實(shí)施例2(c)的方法，不同的是用實(shí)施例42(b)化合物代替實(shí)施例2(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。d)(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例2(d)的方法，不同的是用實(shí)施例42(c)化合物代替實(shí)施例2(c)化合物，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例43制備(S)-2，3，4，5-四氫-4-(2-苯乙基)-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸采用實(shí)施例2(d)的方法，不同的是在實(shí)施例35(a)中用3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯代替3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(甲基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例44制備(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]甲氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R，S)-7-(芐氧羰基)氨基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將(R，S)-7-羧基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯(2.67毫摩爾)、三乙胺(0.42毫升，5.87毫摩爾)和二苯基磷?；B氮化物(0.62毫升，2.80毫摩爾)在甲苯(20毫升)中的混合物在105℃加熱0.5小時(shí)。在溫度降至80℃后，用芐醇(0.60毫升，0.42毫摩爾)處理該混合物，攪拌14小時(shí)并濃縮。殘余物經(jīng)閃式色譜凈化，得到標(biāo)題化合物。b)(R，S)-7-[N-(芐氧羰基)甲氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯用在4∶1 THF∶二甲基甲酰胺中的氫化鈉和碘甲烷處理實(shí)施例169(a)化合物，得到標(biāo)題化合物。c)(R，S)-7-甲氨基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯采用實(shí)施例19(c)的方法，不同的是用實(shí)施例169(b)化合物代替實(shí)施例19(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。d)(R，S)-7-[[[4-(N-芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]甲氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯用在5∶4二氯甲烷∶THF中的4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]苯甲酸、BOP和三乙胺處理實(shí)施例169(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。e)(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯采用實(shí)施例19(c)-(d)的方法，不同的是用實(shí)施例169(c)化合物代替實(shí)施例19(b)化合物，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例45制備(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-甲基-8-[[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并三吖庚因-2-乙酸用六氟磷酸苯并三唑-1-基氧-三(二甲氨基)磷#(2.2毫摩爾)、1-HOBT(285毫克，2.1毫摩爾)處理溶解在DMF(30毫升)中的(R，S)-8-羧基-4-甲基-1，3，4，5-四氫-3-氧代-2H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(2.0毫摩爾)，并用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7。用2-[2-(氨基)吡啶-4-基]-N-(甲基)-乙胺(2.4毫摩爾)處理該混合物，在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮，殘余物經(jīng)閃式色譜凈化。
將一部分該化合物(0.25毫摩爾)溶于甲醇(9毫升)中，加入1.0N氫氧化鈉(0.81毫升，0.81毫摩爾)。在室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜，并濃縮。將殘余物溶于水/乙腈(3毫升)中，冷卻至0℃，用TFA(0.21毫升，2.7毫摩爾)酸化。將該溶液濃縮，并通過倒相閃式色譜(C-18硅膠，AN/W-TFA)純化殘余物。
實(shí)施例46非腸道劑量單位組合物如下制備含有20毫克實(shí)施例1化合物的無菌干粉制劑將20毫克該實(shí)施例化合物溶于15毫升蒸餾水中。將該溶液在無菌條件下過濾至25毫升多劑量安瓿中并凍干。通過加入20毫升供靜脈或肌內(nèi)注射用的5％葡萄糖水溶液(D5W)配制該粉末。因此，劑量由注射體積決定。通過將規(guī)定體積的該劑量單位加入到另一體積的注射用D5W中，或者將規(guī)定的劑量加入另一供分散藥物的裝置例如靜脈滴注瓶或袋或其他注射-輸注系統(tǒng)中進(jìn)行以后的稀釋。
實(shí)施例46口服劑量單位組合物如下制備口服膠囊劑將50毫克實(shí)施例1化合物與75毫克乳糖和5克硬脂酸鎂混合并研磨。將所得粉末過篩并裝入硬明膠膠囊中。
實(shí)施例47口服劑量單位組合物如下制備口服片劑將20毫克蔗糖、150毫克硫酸鈣二水合物和50毫克實(shí)施例1化合物與10％明膠溶液一起混合并造粒。將濕粒過篩，干燥，與10毫克淀粉、5毫克滑石粉和3毫克硬脂酸混合；并壓成片劑。
前面說明了本發(fā)明的制備和使用方法。但是本發(fā)明并不局限于本文所述的具體實(shí)施方案，而是包括后面權(quán)利要求范圍內(nèi)的所有改變。
權(quán)利要求
1.選自下列的化合物及其可藥用鹽(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異戊基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)-3-氟苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[[[1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[[1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-丁基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；2-芐基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸酯；2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(5-苯戊基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸酯；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異丙基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-2-異戊基-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-(3，3-二甲基丁基)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-環(huán)己基-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-[2-(4-氟苯基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-丙酸；(R)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-[2-(2-噻吩基)乙基]-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[[3-(4-哌啶基)丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-7-[[[3-(4-哌啶基)丙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-2，3，4，5-四氫-4-(2-苯乙基)-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；和(R，S)-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-甲基-8-[[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]甲氨基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸。
2.選自下列的化合物及其可藥用鹽(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-8-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；(+)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(-)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-異丙基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸鈉；(R，S)-8-[[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；和(R，S)-2，3，4，5-四氫-7-[1-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基]-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸。
3.式(III)化合物及其可藥用鹽 其中R是H、C1-6烷基、芐基或羧基保護(hù)基，R3是C1-6烷基、C3-6鏈烯基、Ar-C0-6烷基、C3-7環(huán)烷基C0-6烷基或Het-C0-6烷基，并且X是H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、三氟烷基、N(R’)2、CO2R’、CON(R’)2、OH、F、Cl、Br或I；條件是如果X是H，則R3不是苯乙基或環(huán)己基乙基。
4.式(II)化合物及其可藥用鹽 其中R是H、C1-6烷基、芐基或羧基保護(hù)基，R3是C1-6烷基、C3-6鏈烯基、Ar-C0-6烷基、C3-7環(huán)烷基C0-6烷基或Het-C0-6烷基，并且X是H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、三氟烷基、N(R’)2、CO2R’、CON(R’)2、OH、F、Cl、Br或I；條件是如果X是H，則R3不是苯乙基。
5.權(quán)利要求3或4的化合物，其中R3是H、甲基或異丙基。
6.權(quán)利要求3的化合物，是下列化合物或其可藥用鹽(R，S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；或(S)-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸。
7.權(quán)利要求4的化合物，是下列化合物或其可藥用鹽(R，S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸；或(S)-7-[(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基]羰基]-2，3，4，5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1，4-苯并二吖庚因-2-乙酸。
8.藥物組合物，該組合物含有權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物及可藥用載體。
9.抑制血小板凝集的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物。
10.治療心肌梗塞、血栓形成、栓塞、中風(fēng)和其他與梗塞有關(guān)的疾病、或血管成形術(shù)后再狹窄的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物。
11.抑制血栓溶解治療后靜脈或動(dòng)脈再閉合的方法，該方法包括施用權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物和血栓溶解藥。
12.權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物在制備抑制血小板凝集的藥物中的應(yīng)用。
13.權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物在制備治療心肌梗塞、血栓形成、栓塞、中風(fēng)和其他與梗塞有關(guān)的疾病、或血管成形術(shù)后再狹窄的藥物中的應(yīng)用。
14.權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物的制備方法，該方法包括以任何順序用試劑處理式(IV)的化合物 其中A1是NH或CH2；R是H、C1-6烷基、芐基或羧基保護(hù)基；R3是C1-6烷基、C3-6鏈烯基、Ar-C1-4烷基或Het-C1-4烷基；并且X是H、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、三氟烷基、N(R’)2、CO2R’、CON(R’)2、OH、F、Cl、Br或I；R6’是4-脒基-Ar-N(CH3)CO、4-脒基-Ar-CONH、[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基、(4，4’-聯(lián)哌啶-1-基)羰基、[4-(2-氨基乙基)哌啶-1-基]羰基、[[[3-(4-哌啶基]丙基]甲氨基]羰基、1-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基、[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基、[[2-(4-哌啶基)乙基]羰基]氨基、[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基、或[[(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基]羰基，其中任何堿性氮均被保護(hù)；(i)從R6’基團(tuán)除去氨基保護(hù)基；并且如果需要，(ii)從CO2R基團(tuán)除去羧基保護(hù)基；和(iii)形成其可藥用鹽。
15.藥物組合物的制備方法，該方法包括將權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物與可藥用載體混合。
全文摘要
某些式(I)化合物是血小板凝集抑制劑，其中A
文檔編號(hào)A61P9/10GK1143323SQ95191991
公開日1997年2月19日 申請(qǐng)日期1995年1月9日 優(yōu)先權(quán)日1994年1月7日
發(fā)明者W·E·邦迪奈爾, J·F·卡拉漢, W·F·哈夫曼, R·M·基南, T·W·F·顧, K·A·紐蘭達(dá), J·M·沙曼倫, I·N·烏辛斯卡斯 申請(qǐng)人:史密絲克萊恩比徹姆公司