專利名稱：從血漿中分離纖維蛋白的方法和設(shè)備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從血漿中分離血液成分例如纖維蛋白單體的方法，該方法包括將血漿輸入由器壁限定的第二室，之后，在加入適宜的酶時(shí)使含非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分分離出來。
背景技術(shù)：
EP-PS No.592,242介紹了用于全新的纖維蛋白密封膠的方法和組合物，包括使所需部位與包含纖維蛋白單體的組合物接觸，在接觸步驟同時(shí)將該單體轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白聚合物。術(shù)語“纖維蛋白”可定義為纖維蛋白I、纖維蛋白II和/或命名符為ββ的纖維蛋白。
分離血液成分例如纖維蛋白單體的另外的方法和設(shè)備可從EP0654669中了解。這種分離含有不同比重的幾種成分的液體中的成分的方法所包括的步驟有把血液集中在設(shè)備的第一室中，該室由基本上軸向?qū)ΨQ的外壁和內(nèi)壁限定。通過使設(shè)備圍繞第一室的對(duì)稱軸旋轉(zhuǎn)使血液進(jìn)行離心，以便在血液成分之間建立同軸界面。在設(shè)備連續(xù)離心的過程中，優(yōu)選通過縮減第一室的容積使至少一種血液成分(例如血漿)基本上轉(zhuǎn)移到設(shè)備的第二室。在第一室中設(shè)置基本上軸向?qū)ΨQ的內(nèi)壁，以保證全部血液受到分離所需的離心旋轉(zhuǎn)的作用。上述內(nèi)壁的半徑適合于所需旋轉(zhuǎn)速度，因此在第一室的所有部位形成足夠的離心力，從而保持上述同軸分離。
在第二室中，借助適宜的酶從血漿中分離出含有非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分，然后將該部分再溶解成纖維蛋白單體，并通過縮減第二室容積將該單體經(jīng)過過濾器轉(zhuǎn)移到注射器中。
但結(jié)果是，僅僅通過在以上類型的設(shè)置中過濾來從血液中分離例如纖維蛋白單體成分不能提供滿意的結(jié)果。這主要是由于很難保證在第二室中令人滿意地分離含纖維蛋白單體的部分這一事實(shí)，因此，在該方法后面的步驟中，當(dāng)隨后將流體部分從第二室轉(zhuǎn)移到第一室時(shí)，血液中含有的大量血纖維蛋白會(huì)丟失。
此外，在較早的纖維蛋白單體方法中，上述采用適宜的酶處理血漿中的纖維蛋白原會(huì)在第二室底部產(chǎn)生粘稠凝膠物質(zhì)狀的非交聯(lián)纖維蛋白聚合物。為形成所需纖維蛋白單體溶液，需要大量的再溶解緩沖劑，并伴隨強(qiáng)烈攪拌。這導(dǎo)致了一些缺點(diǎn)。首先，例如象EP 592,242中供用作纖維蛋白密封膠的優(yōu)選的纖維蛋白單體法需要濃的纖維蛋白單體溶液，而溶解上述凝膠物質(zhì)所需的大量再溶解緩沖劑或溶劑形成不能使用的稀溶液。其次，將凝膠物質(zhì)溶解成纖維蛋白單體溶液所需的強(qiáng)烈攪拌會(huì)對(duì)設(shè)備和血纖維蛋白本身造成損害。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的目的是提供改進(jìn)的分離血液成分例如纖維蛋白單體的方法。
本發(fā)明包括提供用于在圓筒形室中從血漿部分中分離非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的方法，這種分離在離心過程中進(jìn)行，因此非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在圓筒形室的外壁上，隨后從該室中排出聚集的室內(nèi)的剩余流體部分，室內(nèi)所剩的基本上沉積在外壁上的含非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分通過添加溶劑以及離心攪動(dòng)而溶解。
由于在連續(xù)離心過程中進(jìn)行用酶處理血漿，因此作用在所得的非交聯(lián)血纖維蛋白聚合物上的離心力使該聚合物作為基本上粘附在圓筒形室的環(huán)形壁上的凝膠薄膜析出。當(dāng)停止離心時(shí)，剩余的血漿液沉積在室底，可采用任何常規(guī)方法將其排出。然后，通過向室內(nèi)導(dǎo)入適宜的再溶解緩沖液，并使緩沖液在被上述凝膠涂覆的室中進(jìn)行離心攪動(dòng)，形成所需纖維蛋白單體溶液。該方法優(yōu)于先前的方法。首先，由緩沖液對(duì)上述非交聯(lián)凝膠的重新溶解非常有效，這部分由于與以前的方法中形成的纖維蛋白凝膠物質(zhì)相比，相同體積的本方法形成的纖維蛋白凝膠具有很大的表面積。因此，該凝膠可用少量的再溶解緩沖液溶解，從而產(chǎn)生合乎要求的濃的纖維蛋白單體溶液。其次，對(duì)由凝膠涂覆的室中的緩沖液進(jìn)行的離心攪動(dòng)作用是比較和緩的方法，不會(huì)對(duì)設(shè)備或纖維蛋白單體產(chǎn)物造成損害。所得高濃度血纖維蛋白單體溶液的濃度為10-30mg血纖維蛋白單體/ml溶液，優(yōu)選為約25mg/ml。
本發(fā)明還包括一種方法，它包括優(yōu)選在抗凝血?jiǎng)┐嬖谙聦⒀狠斎朐O(shè)備的第一環(huán)形室，該環(huán)形室由圓筒形外壁和圓筒形內(nèi)壁以及上壁和下壁限定，其中內(nèi)外二壁圍繞公共軸同軸延伸，上壁或下壁由可在第一室內(nèi)移動(dòng)的活塞體構(gòu)成，該方法還包括使裝置圍繞公共軸離心，以將血液基本上分離成細(xì)胞部分和血漿部分，隨后，在受到活塞體的作用時(shí)將所得血漿部分轉(zhuǎn)移到由與公共軸同軸延伸的圓筒形外壁限定的第二室，由此在加入適宜的酶時(shí)，在第二室中分離出含非交聯(lián)血纖維蛋白聚合物的部分。根據(jù)本發(fā)明，該方法的特征在于，含纖維蛋白原的血漿部分在離心過程中經(jīng)受酶的作用，從而使產(chǎn)生的非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在第二室的圓筒形外壁上，然后，在受到活塞體作用時(shí)，將聚集在第二室底部的流體部分轉(zhuǎn)移到第一室，在第二室中所剩的基本上沉積在圓筒形外壁上的含非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分通過添加溶劑以及離心攪動(dòng)而溶解。隨后，如果需要，可除去酶，如此產(chǎn)生的纖維蛋白單體溶液可轉(zhuǎn)移到所需任何接收器中。
因此，很容易保持收集溶液的無菌條件。纖維蛋白單體再溶解后可轉(zhuǎn)移到接收器中，例如在先有技術(shù)中介紹的供進(jìn)一步使用的注射器中。在轉(zhuǎn)移之前可采用常規(guī)方法除去酶。
通過圍繞中心旋轉(zhuǎn)軸的離心作用從液體中分離其成分的裝置包括由圍繞旋轉(zhuǎn)軸同心配置的圓筒形外壁和圓筒形內(nèi)壁以及上壁和下壁限定的第一環(huán)形室，其中下壁由可在第一室內(nèi)移動(dòng)的活塞體構(gòu)成。該裝置還包括通過第一通道與第一室連通的第二室，第二室由圍繞旋轉(zhuǎn)軸同心配置的圓筒形外壁、活塞體和下壁限定，在離心分離過程中，第二室配接位于第一室下面，該裝置還包括向第一室加入血液的血液加入裝置和為促進(jìn)分離而加入組合物的組合物加入裝置，以及連接至少一個(gè)液體接收容器的接收裝置，該接收裝置通過第二通道與第二室連通。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，活塞桿構(gòu)成第一室的內(nèi)壁。
實(shí)施本發(fā)明方法的本發(fā)明裝置的特征在于，上述第一通道包括至少一條在第一室上壁的開孔和第二室下壁的開孔之間延伸的通道。
由于提供的裝置相當(dāng)簡便，且該裝置不受活塞位置的限制，因此可保證順利而迅速地將上述部分從一個(gè)室轉(zhuǎn)移到另一個(gè)室，尤其是在分離出含纖維蛋白I的部分之后能保證容易、快速地把流體部分從第二室轉(zhuǎn)移到第一室。造成上述流體轉(zhuǎn)移的原因特別是由于當(dāng)停止離心時(shí)，流體自動(dòng)集中在第二室底部，由此可通過移動(dòng)活塞，例如通過壓縮第二室內(nèi)的空氣將流體向上壓入傳輸通道，由此可將流體順利地轉(zhuǎn)移到第一室。
根據(jù)本發(fā)明，特別優(yōu)選上述通道穿過第一和第二兩室的圓筒形外壁的內(nèi)部延伸，因此該裝置特別簡單，且易于制造。
根據(jù)本發(fā)明，第二室下壁上的一條或一條以上通道的開孔優(yōu)選位于該室中央，與下壁形成的凹槽連接。因此，上述流體部分可順利而迅速地直接流向通道入口。
此外，另根據(jù)本發(fā)明，每一通道可由穿過活塞體管構(gòu)成，而其兩端分別固定在第一室上壁和第二室下壁的管道構(gòu)成，該管道與終止在各室中的通道部分相通。
根據(jù)本發(fā)明，第一室和第二室可以用特別簡單的方式包括由外圓筒和內(nèi)圓筒成型的公共圓筒外壁，外圓筒和內(nèi)圓筒相互密封貼合，并在它們之間限定一條軸向延伸的通道，上述圓筒可以在一端終止于端壁，該端壁帶有使連接在活塞體上的活塞桿通過的開孔，活塞體構(gòu)成第一室的下壁，并將第一室與第二室隔開，通道在圓筒的端壁之間一直延伸到緊靠活塞桿或鄰近活塞桿的開孔。
如上所述，本發(fā)明的方法涉及分離和離析單一血液成分或含有這種成分的溶液的改進(jìn)的工藝。不過，本方法適用于任何可適應(yīng)于圓筒形離心器的工藝，其中第一種溶液在離心過程中采用催化劑或試劑處理，從而使中間體形式的所需產(chǎn)物沉積在離心機(jī)壁上，然后，其中的中間體在有離心攪動(dòng)的情況下采用適宜的再溶解溶液重新溶解，從而形成在這種再溶解溶液中的所需濃度的所需產(chǎn)物。本文所述方法也可包括從另一種溶液中離心分離第一種溶液，即從全血中分離血漿?？傻靡嬗谏鲜龇椒ǖ钠渌哼^程包括(但不局限)任何血液成分的離析，例如富血小板血漿，血小板濃縮物，低溫沉淀纖維蛋白原，血漿中的其他蛋白質(zhì)，例如凝血酶和fibronectin等的離析。優(yōu)選血液取自單一供體，最優(yōu)選血液取自血液成分將要給與的同一個(gè)人。
雖然在下文中就制備纖維蛋白單體溶液說明本方法，但正如本領(lǐng)域的熟練人員將能理解，本發(fā)明的范圍不應(yīng)僅限于此。
本文所用術(shù)語“離心攪動(dòng)”系指裝置的轉(zhuǎn)動(dòng)，其中再溶解緩沖液導(dǎo)入設(shè)備中，以便從室外壁上重新溶解中間產(chǎn)物，例如非交聯(lián)纖維蛋白聚合物凝膠。上述轉(zhuǎn)動(dòng)或離心攪動(dòng)可包括離心過程，以確保所有暴露的凝膠表面均受到再溶解液的作用，并優(yōu)選包括在離心后沿相同方向停止和開始旋轉(zhuǎn)和/或沿相反方向停止和開始旋轉(zhuǎn)。典型的離心攪動(dòng)包括(但不局限)在任何需要的時(shí)間內(nèi)，在反復(fù)的正轉(zhuǎn)/反轉(zhuǎn)循環(huán)中以2,000-5,000轉(zhuǎn)/分鐘正轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)各5-30秒，優(yōu)選5-10秒。在本發(fā)明的方法中，優(yōu)選在1-2分鐘的反復(fù)的正轉(zhuǎn)/反轉(zhuǎn)循環(huán)中，以約3,000轉(zhuǎn)/分鐘正轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)各5-10秒。如上所述，在此之前可以是稍長的旋轉(zhuǎn)，例如20秒或20秒以上，以便最初分散溶劑。
本文所用術(shù)語“纖維蛋白”系指纖維蛋白I、纖維蛋白II或命名符為ββ的纖維蛋白。
如上所述，本發(fā)明裝置包括至少一條能將流體從本文定義的裝置中的第二室的底部轉(zhuǎn)移到第一室的通道。這一特征所具有的明顯優(yōu)點(diǎn)在于它有助于本發(fā)明的優(yōu)選方法。先前介紹的裝置和方法要求在形成非交聯(lián)血纖維蛋白聚合物凝膠物質(zhì)時(shí)降低活塞位置，以便將剩余的血漿流體經(jīng)由通過活塞盤延伸的管道向上壓入第一室。在先前的方法中活塞必須與液體接觸。在本方法中，由于凝膠沉積在第二室的壁上，因此不會(huì)使活塞降低到足以接觸剩余的血漿流體。通過設(shè)置從第二室底部一直延伸到第一室的通道，以及設(shè)置通入第二室的大氣入口，只是稍微降低活塞位置即可使第二室加壓到足以將血漿流體沿上述通道向上壓入第一室。如上所述，可設(shè)置一條或許多條穿過上述室或穿過其外壁延伸的通道。在外壁中設(shè)置通道的優(yōu)選方法是，將設(shè)備制成兩個(gè)圓筒體，以密封方式將一個(gè)圓筒體裝在另一個(gè)圓筒體內(nèi)。通過在外圓筒體內(nèi)部或內(nèi)圓筒體外部設(shè)置一條或一條以上狹槽而形成一條或一條以上的通道。
本設(shè)備為單一、密閉且可自動(dòng)化的設(shè)備，它能將全血轉(zhuǎn)變?yōu)槔缈晒┳骼w維蛋白密封膠之用的所需血液成分，優(yōu)選自體(autogous)成分。
本設(shè)置可在驅(qū)動(dòng)單元中方便地使用，該驅(qū)動(dòng)單元可固定和調(diào)節(jié)本裝置，使本裝置圍繞其軸任意旋轉(zhuǎn)，并驅(qū)動(dòng)活塞和推動(dòng)推桿等，從本文所述將能理解，推桿可使活塞更容易移動(dòng)。
附圖簡述現(xiàn)將參照附圖介紹本裝置和方法的優(yōu)選實(shí)施方案，圖中圖1為按照本發(fā)明裝置的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案的軸向剖面圖，和圖2說明按照本發(fā)明裝置的第二實(shí)施方案。
圖3說明按照本發(fā)明裝置的第三實(shí)施方案。
本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案描述根據(jù)本發(fā)明，圖1的裝置由基本上產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)對(duì)稱的部件構(gòu)成，這意味著該裝置本身可用已知的簡便方式安裝在離心分離設(shè)備中，因此可圍繞中心軸1旋轉(zhuǎn)。在圖1中，裝置的優(yōu)選實(shí)施方案包括外容器2和內(nèi)容器3，它們相互完全吻合地裝配在一起，除了設(shè)有軸向延伸的中間通道4的部分以外，它們?cè)谔幪幭嗷ゾo密貼合。通道4由在內(nèi)容器3中加工成的狹槽構(gòu)成。兩個(gè)容器2和3分別包含它們各自的頂部5和6，頂部5和6限定使活塞桿8通過的中心孔7。圍繞中心孔7，上述兩個(gè)容器各包含軸向延伸的部分9和10，部分9和10沿離開容器內(nèi)部的方向延伸到空心的活塞桿8旁邊。外容器2沿徑向延伸的短凸緣11與空心的活塞桿貼合，該凸緣帶有可安裝密封圈13的凹槽12。
如圖1說明，通道4在內(nèi)容器和外容器之間從內(nèi)容器和外容器的圓筒形外壁沿著頂部5和6以及軸向部分9和10一直延伸到緊靠開孔7中密封環(huán)13下面的開孔。將內(nèi)容器3緊靠開孔7的軸向部分10加工成所需尺寸，以便環(huán)繞空心活塞桿8形成通向容器2和3內(nèi)部的狹窄而暢通的孔道。
外容器2包括直徑不變的圓筒形部分(參見圖1)。參見附圖的有關(guān)部分，該圓筒形部分穿過構(gòu)成截頭錐體內(nèi)表面16的短的過渡部分15向下延伸到直徑稍大的圓筒形部分14。內(nèi)容器3終止于外容器2的過渡部分15延伸到直徑稍大的圓筒形部分14中的部位。內(nèi)容器3的下端包括與外容器2內(nèi)側(cè)的截頭錐體表面16的形狀相吻合的截頭錐體形狀的外表面17。外圓盤19和內(nèi)圓盤20分別緊靠內(nèi)容器3下端的下面，內(nèi)容器3的端部是徑向面18。除了在這兩個(gè)圓盤之間限定的通道21之外，它們相互緊密貼合，通道21在軸面內(nèi)從中心孔22一直延伸到外容器2的內(nèi)側(cè)，然后經(jīng)由軸向延伸部分23與外容器2和內(nèi)容器3之間的通道4連通。通道21和軸向通道部分23通過內(nèi)圓盤20中朝向外圓盤19一側(cè)的狹槽恰當(dāng)?shù)貥?gòu)成。兩個(gè)圓盤19和20設(shè)計(jì)成傾斜方向，以使它們基本上包容內(nèi)外截頭圓錐形表面(參見圖1)，因此它們朝著中心孔22向下傾斜。圖1還表明內(nèi)圓盤20包括緊靠內(nèi)容器3上鄰近的徑向面18的徑向面24。內(nèi)圓盤20的徑向面24設(shè)有安裝密封圈26的凹槽25。
兩個(gè)圓盤19和20借助在下方封閉外容器的蓋27固定在緊靠內(nèi)容器3的徑向面18的位置。蓋27帶有適合于緊貼外容器2內(nèi)側(cè)的圓環(huán)套筒形部分28，套筒28以適當(dāng)?shù)姆绞?例如通過套筒28外側(cè)的周邊凸緣29和外容器2內(nèi)側(cè)相應(yīng)的周邊凹槽30之間的銜接形成的壓緊作用-固定在外容器2上。通過外圓盤19外緣上周邊凹槽31a中的密封環(huán)31確保密封連接。此外，蓋27在圖1所示適當(dāng)位置帶有適合于構(gòu)成較低的設(shè)備底部的較薄的壁32。壁32基本上沿著與外圓盤19和內(nèi)圓盤20平行的方向如此延伸，使壁32從鄰近圓盤19和20的套筒28部分的內(nèi)側(cè)向下一直延伸到與外容器2的下緣33基本上水平的部分。為增強(qiáng)這一較薄的壁32，每隔一定距離設(shè)置輻射狀加強(qiáng)肋條34，圖1只顯示一根這種肋條。該肋條34做成一部分置于壁32外面，一部分置于壁32里面(參見圖1)，置于壁32里面的部分表示為參考號(hào)數(shù)35，它做成緊靠外圓盤19的底側(cè)，因而它可有助于將圓盤19和20固定在安全的位置。
隔板設(shè)置36夾在外圓盤19和蓋27之間。該隔板裝置36包括中心管段37。該管段安裝在沿軸向向內(nèi)突出和短軸38上，與該短軸27的壁32加工成形為一體。管段37以這種方式與從管段37向外延伸的圓盤壁39加工成形為一體，該圓盤壁39最初向著蓋27的壁32稍向下傾斜，然后沿著短軸方向延伸，由此繼續(xù)延伸到基本上與蓋27的壁32平行的方向。圓盤39的端部為在蓋27的加強(qiáng)肋35上的臺(tái)肩41上形成的徑向伸展的短周緣40。環(huán)形過濾單元42夾在圓盤壁39的外周緣40和外圓盤19的底側(cè)之間。該環(huán)形過濾單元42緊靠鄰近外圓盤19外側(cè)的基本上成徑向的表面43。采用這種環(huán)形過濾器的裝置和方法在此同時(shí)作為共同未決申請(qǐng)中的主題。
為保證隔板裝置36的穩(wěn)固性，在優(yōu)選的設(shè)備中，在管段37和圓盤壁39之間另設(shè)表示為參考號(hào)數(shù)44的徑向加強(qiáng)肋條。
表示為總參考號(hào)數(shù)45的密封室固定在隔板裝置36的管段37上與蓋27相對(duì)的一端。該密封室適用于定時(shí)地將試劑排入第二室75，亦是與本發(fā)明一同提交的共同未決申請(qǐng)的主題。該密封室包括與徑向環(huán)47加工成形為一體，并帶有另兩個(gè)徑向環(huán)48和49的細(xì)長管段46。上述徑向環(huán)48和49通過壓配合固定于它們?cè)诠潭ōh(huán)47的各側(cè)。松動(dòng)環(huán)48和49與固定環(huán)47相隔其各自的距離，分別通過圓形臺(tái)肩50和51安裝在管段46上。三個(gè)圓盤47、48和49外徑相同，沿著它們的各個(gè)外緣裝有圓形可移動(dòng)組裝的套筒52。
如


，下圓盤49緊靠隔板裝置36的管段37的上端，由此確定密封室45的軸向位置。此外，可如此確定該軸向位置，使密封室的可移動(dòng)套筒52在沿軸的方向移動(dòng)時(shí)通過它的下端(參見附圖)與中心孔22內(nèi)外圓盤19的最內(nèi)緣53密封銜接。在套筒52的這個(gè)位置，圍繞套筒52的內(nèi)圓盤20內(nèi)的空間與通向外圓盤19和內(nèi)圓盤20之間的通道21的入口之間仍然相通?？梢苿?dòng)套筒52的軸向長度適合于使套筒52在軸向下移時(shí)，在套筒52的上端(參見附圖)脫離固定環(huán)47之前與外圓盤20銜接。套筒52的內(nèi)徑還如此適應(yīng)于隔板裝置36的圓盤壁39的軸向延伸部分的外徑，使套筒52一旦脫離外圓盤19繼續(xù)向蓋27下移，即可穩(wěn)固地與隔板裝置36銜接。隔板裝置36的軸向部分的長度還如此適應(yīng)于套筒52的軸向長度，使套筒52在最低位置上基本上完全被隔板裝置36所包容。
如

，空心活塞桿8帶有在外容器2和內(nèi)容器3內(nèi)的圓形活塞55，該活塞55通過密封環(huán)56與內(nèi)容器3的內(nèi)側(cè)銜接。
路爾(Luer)聯(lián)軸器57或其他適宜的聯(lián)接裝置設(shè)計(jì)成在含有常規(guī)注射器58的空心活塞桿內(nèi)，注射器58具有作用在該注射器內(nèi)含物上的起活塞作用的活塞59。聯(lián)軸器57的形狀基本上象通過截頭圓錐形部分60與活塞55內(nèi)的中心孔61連通的管段。管段57設(shè)有在徑向上朝內(nèi)伸出的縮頸62，用于把注射器58中流出的流體引離軸向通道，從而繞過管段57下面密封室45內(nèi)的管段46。管段46具有這樣的長度和直徑，使得在活塞55處于它在蓋27附近的最低位置時(shí)，管段46可與空心活塞桿8內(nèi)的管段57密封銜接。為增進(jìn)上述密封銜接，管段57內(nèi)側(cè)制成在鄰近活塞55的一端直徑遞減。
圍繞活塞55的中心孔61的軸向伸出的裙板63與活塞55形成整體。該裙板63制成具有這樣的長度和直徑，使得通過適當(dāng)移動(dòng)活塞55，裙板63即可使密封室45的可移動(dòng)套筒52穿過兩圓盤19和20移到該套筒52與中心孔22的內(nèi)緣53銜接的位置，然后使該套筒與隔板裝置36銜接。
彈性的帶唇環(huán)形密封裝置64如圖所示圍繞空心活塞固定在容器2和3內(nèi)的頂部(參見圖1)。該帶唇密封裝置64適合防止流體從容器2和3內(nèi)不按要求地流向通道4，但在通過活塞55施力時(shí)，它允許流體通過。
圖1上部表明，在外容器2和內(nèi)容器3的相應(yīng)開孔66上有一個(gè)撓性管65的接頭。該接頭為人們熟知，因此不再詳細(xì)表示，但在需要時(shí)它會(huì)使與撓性管的連接阻斷。此外，帶有適宜的過濾器的排氣孔以常規(guī)方式設(shè)置，因此不再詳細(xì)表示或說明。
通道69從隔板裝置36與蓋27之間的區(qū)域一直向上穿過隔板裝置36的管段37內(nèi)部，再穿過密封室45的管段46內(nèi)部。當(dāng)管段46與活塞桿8內(nèi)的管段57連接時(shí)，通道69使流體從上述區(qū)域轉(zhuǎn)入注射器58。通道66通過帶有軸向平面形狀的短軸38安裝在蓋27內(nèi)的桿38的最低處，該桿的截面基本上為圓形。結(jié)果在該桿和管段37內(nèi)側(cè)的鄰近部分之間形成空間。區(qū)域67緊靠桿38上方，在此處隔板裝置36的內(nèi)徑略有減小。用這種方式可以緊靠區(qū)域67上方(參見圖1)安裝小型過濾器68，由此使流體在流入密封室45的管段46之前必經(jīng)該過濾器。
所述裝置包括第一環(huán)形室70，該室也可稱為分離室，它向內(nèi)由構(gòu)成圓筒形內(nèi)壁71的空心活塞8限定，向外由外容器2和內(nèi)容器3構(gòu)成的圓筒形外壁72限定。按常規(guī)使用活塞時(shí)(參見圖1)，環(huán)形室70向上由分別以外容器2的底部5和內(nèi)容器3的底部6構(gòu)成的上壁73限定。環(huán)形室70向下由活塞55構(gòu)成的下壁74限定。第二室75可稱為反應(yīng)室，它被限定在活塞55下面，向外由與第一室70相同的圓筒形外壁72限定。第二室75向下由外圓盤19和內(nèi)圓盤20構(gòu)成的第二下壁76限定。密封室45設(shè)在第二室75內(nèi)中央。第三室77設(shè)在第二下壁76的下面，由隔板裝置36和環(huán)形過濾單元42限定。此外，第三室77也可稱為過濾室，它通過由外圓盤19和內(nèi)圓盤20內(nèi)的中心孔22形成的通道與第二室75連通。最后，第四室78設(shè)在隔板裝置36下面，該室也可稱為收集室，該室向下由蓋27的壁32加之蓋27的套筒28的部分以及外圓盤19的底側(cè)限定。
如上所述，所述裝置主要適用于分離血液成分，例如從血液中分離纖維蛋白單體，為此目的，第二室75，或優(yōu)選密封室46上面的小室80預(yù)先裝入適宜的酶，例如類凝血酶。正如從EP-PS No.592,242所了解，可以采用任何凝血酶類的酶。這類酶包括凝血酶本身或具有相似活性的任何其他物質(zhì)，例如蛇毒蛋白制劑(Ancrod)、Acutin、Venyyme、Asperase、Botropase、Crotabase、Flavorxobin、Gabonase和優(yōu)選的類凝血酶。類凝血酶可用化學(xué)方法結(jié)合到生物素上，生物素是合成物質(zhì)，它允許用常規(guī)的已知方式通過抗生物素蛋白-瓊脂糖組合物中的抗生物素蛋白捕獲類凝血酶。因此，抗生物素蛋白-瓊脂糖存在于密封室的最下面的小室81中。在將密封室放入裝置中之前，可相當(dāng)順利地把生物素-類凝血酶組合物和抗生物素蛋白-瓊脂糖組合物二者分別裝入密封室45內(nèi)各小室80和81中。
最后安裝注射器58，該注射器含有再溶解溶液，例如由醋酸稀釋的醋酸鹽制備的pH-4的緩沖液。注射器58隨后用于接收所需的纖維蛋白單體溶液。
也可以采用從現(xiàn)有技術(shù)中了解的另外的緩沖液。再溶解緩沖劑可以是任何酸性緩沖液，優(yōu)選緩沖液的pH為1-5。適宜的實(shí)例包括醋酸、琥珀酸、葡糖醛酸、磺基丙氨酸、巴豆酸、衣康酸、戊炔二酸(glutonic)酸、甲酸、天冬氨酸、己二酸、以及上述任一種酸的鹽。琥珀酸、天冬氨酸、己二酸、以及醋酸鹽(例如醋酸鈉)為優(yōu)選。此外，也可通過離液序列高的試劑在中性pH下進(jìn)行溶解。適宜的這種試劑包括尿素、溴化鈉、鹽酸胍、KCNS、碘化鉀和溴化鉀。上述酸性緩沖液或離液序列高的試劑的濃度和體積如EP-PS No.592,242所述。
在輸入血液期間，或緊接在輸入血液之后，將活塞桿8推入該裝置內(nèi)部，致使密封室45的可移動(dòng)套筒52穿過下壁76下移至與通道密封銜接，然后下移到第二室77。結(jié)果，通向密封室內(nèi)最上面小室80中的生物素-類凝血酶組合物的入口同時(shí)被打開。另一個(gè)方法是，最上面的小室80可以在血漿部分轉(zhuǎn)移到第二室后再打開。
當(dāng)設(shè)備準(zhǔn)備使用時(shí)，用常規(guī)方式通過未顯示的注射針和撓性管65向第一室輸入血樣，該血樣優(yōu)選也用常規(guī)方式與抗凝血?jiǎng)┗旌?。在通過撓性管65和開孔66向第一室70內(nèi)輸送血液時(shí)，用常規(guī)方式從該室中排出空氣。輸入血液后拆去撓性管65，封閉孔口66。然后，將含有血液的裝置置于特別有助于密封壓縮各部分的離心機(jī)內(nèi)。該離心機(jī)使設(shè)備圍繞旋轉(zhuǎn)軸1旋轉(zhuǎn)。由于離心作用的結(jié)果，血液在第一室70中分離為徑向沉積在剩余血液部分里的血漿部分，該剩余血液部分含紅血球和白血球。如EP-PS No.592,242所述，通過改變離心速度和時(shí)間，可隨意使血小板存在于上述任一部分。采用本設(shè)備時(shí)，離心速度通常為2,000-10,000轉(zhuǎn)/分鐘，如本文和EP 654669所述，離心速度可在上述過程內(nèi)的不同時(shí)刻任意改變。
當(dāng)血漿和剩余血液部分之間的界面穩(wěn)定后，即當(dāng)分離完成后，可通過在連續(xù)旋轉(zhuǎn)中拉出活塞桿8，從而拉出活塞55而使第一室70容積減小。結(jié)果，可能存在的內(nèi)部空氣層首先穿過通道4和21轉(zhuǎn)入第二室75，進(jìn)一步移動(dòng)活塞55意味著血漿也轉(zhuǎn)入第二室75。當(dāng)把整個(gè)血漿層壓入第二室75后，即當(dāng)血漿部分和剩余的血液部分之間的界面到達(dá)第一室70的內(nèi)壁71后，，停止移動(dòng)活塞55。如果最上面的小室80尚未打開，這時(shí)應(yīng)把它打開，以排出類凝血酶。
在第二室75中，血漿部分與類凝血酶接觸，從而使纖維蛋白單體從血漿部分中分出，該纖維蛋白單體立即聚合成非交聯(lián)纖維蛋白聚合物。上述過程在設(shè)備連續(xù)離心的同時(shí)進(jìn)行，從而可有效地使纖維蛋白聚合物與血漿部分的剩余部分分離，該纖維蛋白聚合物通過生物素-類凝血酶組合物的作用而形成，它作為粘稠的凝膠層沿圓柱形外壁72沉積。完成上述分離后停止離心，通過先提升活塞55，使空氣從第一室70轉(zhuǎn)入第二室75，然后向下壓活塞55，可順利地把剩余的血漿部分中比較流動(dòng)的部分壓回第一室70。纖維蛋白聚合物可能保留在外壁上，或可能開始滑落，但在這種情況下，聚合物的滑落比剩余液體的流動(dòng)慢得多。因此，在含纖維蛋白聚合物的粘稠層到達(dá)通道21的入口之前，上述流體可相當(dāng)順利而迅速地進(jìn)行轉(zhuǎn)移?？扇芜x采取另外的措施，例如通過設(shè)置由底76的虛線表示的一圈向上凸出的齒形環(huán)82，來防止粘稠層過快地到達(dá)通道21的入口。上述離心/排液步驟可任意進(jìn)行兩次或兩次以上，以便從纖維蛋白聚合物中分離出盡可能多的血漿流體。
一旦血漿部分的剩余部分從第二室75中排出，進(jìn)一步下移密封室45的可移動(dòng)套筒52，以打開最低小室81的通路。同時(shí)，或緊接在該套筒進(jìn)一步移動(dòng)之后，通過由外部對(duì)主軸的作用充分下壓注射器58的柱塞59，將pH-4的緩沖液轉(zhuǎn)移到第二室75，與此同時(shí)可開始離心攪動(dòng)。添加pH-4的緩沖液使纖維蛋白聚合物溶解于其中，在密封室45內(nèi)下面的小室81中存在的抗生物素蛋白-瓊脂糖組合物使生物素-類凝血酶組合物被抗生物素蛋白以常規(guī)方式結(jié)合。繼續(xù)移動(dòng)活塞55，使密封室45的可移動(dòng)套筒52與隔板裝置36銜接，然后脫離下壁76，從而形成自由地通到第三室77。結(jié)果，第二室75的內(nèi)含物可自由地向下流入第三室77。優(yōu)選在離心攪動(dòng)過程中進(jìn)行再溶解，離心攪動(dòng)包括離心作用和如上定義的一系列停止和開始正轉(zhuǎn)/反轉(zhuǎn)攪動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)。
繼續(xù)離心使得可通過環(huán)形過濾單元42在第三室中分離出纖維蛋白單體溶液，從而截留較大顆粒的抗生物素蛋白和通過生物素-抗生物素蛋白浮獲體系結(jié)合在抗生物素蛋白上的類凝血酶。在纖維蛋白單體溶液因以上離心作用而流入最低的第四室78后停止離心，通過重新拉回柱塞59，使密封室45的管段46的最上端與管段47銜接，形成與注射器58接通，從而將纖維蛋白單體溶液順利地轉(zhuǎn)移到注射器58中。
由于在繼續(xù)離心過程中在第二室75中使纖維蛋白聚合物與血漿部分分離，又由于通過離心作用在第三室77中分離出纖維蛋白單體溶液，因此可以從上述血樣中獲得較高產(chǎn)率的纖維蛋白單體。
本發(fā)明已參照優(yōu)選的實(shí)施方案進(jìn)行了說明。但是，在不偏離本發(fā)明范圍的情況下可進(jìn)行許多改進(jìn)。
圖2說明這樣一些改進(jìn)的例子，其中表示本發(fā)明的第二個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，它多少有些和圖1所示本發(fā)明的實(shí)施方案相一致。圖2的實(shí)施方案包括由活塞92隔開的第一室90和第二室91，活塞92帶有向內(nèi)限定第一室的空心活塞桿93。上述兩室90和91向外由基本上為圓筒形的構(gòu)件94的一部分限定，該圓筒形構(gòu)件的一部分構(gòu)成上述兩室90和91的圓柱形外壁95。第一室90向上由上壁85限定，該上壁本身由借助擰入圓筒形構(gòu)件94的卡環(huán)96固定在圓筒形構(gòu)件94上的頂蓋構(gòu)成。上壁85固定供空心活塞桿93通過的穿孔。第二室91向下由圓筒形構(gòu)件94中的圓環(huán)形內(nèi)凸緣構(gòu)成的下壁96限定。在靠近第二室91這邊，圓筒形構(gòu)件94包含從活塞92向第二室91中央傾斜的截頭圓錐形表面97。下壁96限定通向第三室99的中心通道98。第三室99由隔板裝置100和夾在下壁96和隔板裝置100之間的通向環(huán)形第四室102的環(huán)形過濾單元101限定。第四室102限定在由螺絲固定在圓筒形構(gòu)件94上的杯形蓋103中間。當(dāng)壓住環(huán)形過濾單元101時(shí)，杯形蓋103通過中間肋條125把隔板裝置100固定在圓筒形構(gòu)件94內(nèi)中心位置。
密封室105固定在隔板裝置100中由中心向上突出的短軸104上。密封室105包括帶有盤形環(huán)107和108的管狀部分106，盤形墊107和108松動(dòng)地連接在管狀部分106上，并借助可移動(dòng)調(diào)整的套筒限定分別由字母BB和AA表示的酶的小室。借助自下而上直徑縮小的管狀部件106的外緣在該部件上形成的臺(tái)肩形突出部分，上述盤形環(huán)相隔所需距離固定在管段106上。
通道115和116由第一室90頂部直通第二室91底部。這些通道分別由它們各自的固定的管段117和118構(gòu)成，這些管段與設(shè)備的旋轉(zhuǎn)軸平行延伸，并固定在上壁95和下壁96中的連接孔口末端。上述管段與各室之間的通道連接分別由適宜的孔和安裝在其中的柱塞形成。管段117和118穿過它們?cè)诨钊?2中的各自孔口延伸。各處設(shè)有密封環(huán)，以防泄漏。
聯(lián)接器120固定在活塞92內(nèi)側(cè)中央，以便與空心活塞桿93內(nèi)的注射器121連接，以及與密封室105的管段106的上端連接。聯(lián)接器120帶有伸入第二室91并作用于密封室105的可移動(dòng)套筒110的裙板122。如上所述，該套筒110的外徑與下通第三室99的通道98的直徑如此適應(yīng)，以致套筒110可進(jìn)入通道98中，并由下壁96固定在任何位置，因此必然也會(huì)固定在最低位置，在該位置上，套筒105與密封室中最低的盤形環(huán)109不銜接，因此允許流體從第二室91向下流入第三室99。通道123從第四室102伸出，由中心向上穿過隔板裝置100中的短軸104，再向上穿過密封室105的管狀部件106，由此使流體從第四室流入注射器121。
圖2的裝置采用與圖1裝置完全相同的方式使用，因此當(dāng)然也設(shè)置把輸送血液的撓性管與裝置相連接的裝置。
圖3說明另一個(gè)實(shí)施方案，它包括與圖1和圖2相同的許多基本部件。流體轉(zhuǎn)移通道4優(yōu)選由在相互貼合的內(nèi)容器3和外容器2中形成的狹槽構(gòu)成。如圖3所示，通道4向上伸入各頂部5和6之間，并通臺(tái)肩區(qū)300，但它不繼續(xù)伸入軸向延伸的部分9和10之間(與圖1相同)。彈性帶唇密封裝置64緊靠臺(tái)肩區(qū)300，從而保證經(jīng)過帶唇密封裝置64轉(zhuǎn)移的所需流體(例如血漿)直接流入頂部5和6之間的通道4的開口，而不必在軸8和內(nèi)部的軸向延伸部分10之間穿行。
在圖3描述的另一種改進(jìn)中，圖1所示齒狀物82由“纖維蛋白過濾器”310所取代，該纖維蛋白過濾器是以環(huán)形方式(例如在框上或圓環(huán)上)在第二室70底部附近圍繞密封室45安裝的一組齒狀物或尖齒狀物。過濾器310在一處或多處與下壁76連通，但基本上靠近下壁76打通，以便可更有效地排出剩余液體。該配置有助于緩和采用圖1裝置時(shí)纖維蛋白聚合物通過齒狀物82任意保留，但剩余液體也會(huì)截留在纖維蛋白聚合物后面的狀況。
圖3說明特別關(guān)于注射器50的進(jìn)一步改進(jìn)，其中可看出，護(hù)套320基本上環(huán)繞著注射器58。護(hù)套320優(yōu)選為圓筒形或大體上與注射器58的形狀相適應(yīng)。注射器58的套帽322與護(hù)套320頂部可松脫地連接，并裝有手柄，以便在向注射器提供所需產(chǎn)物(例如纖維蛋白單體溶液)的過程完成之后可方便地從設(shè)備上拆下注射器58和護(hù)套320，護(hù)套320可由塑料或剛性的聚合物材料制成，以便在使用中保護(hù)注射器58。此外，由于操作任意不直接接觸注射器，因此可將注射器轉(zhuǎn)移到供無污染使用的場所。也可使用護(hù)套320的可拆卸底帽(未顯示)，特別在設(shè)置帶有護(hù)套320，并含有所需酸性緩沖液的預(yù)消毒注射器58作為本裝置的成套部件時(shí)，圖3也表示了注射器聯(lián)接器324，它可在例如上下移動(dòng)的桿(未顯示)的作用下在帽322內(nèi)軸向滑動(dòng)，該桿可以是設(shè)備驅(qū)動(dòng)器的一部分。柱塞59適合于以鎖緊和未鎖緊兩種方式安裝聯(lián)接器324。例如，這種安裝可以通過設(shè)置在柱塞59內(nèi)水平接受部分328以外的凹槽326和在聯(lián)接器324的桿上的相應(yīng)的凸出部分330而完成。選擇上述部分的尺寸和形狀，以便在不使凸出部分330超過水平部分320的情況下，借助使柱塞59下移的最小的力即可把聯(lián)接器324向下推動(dòng)。這樣，不用改變柱塞59的位置即可使聯(lián)接器324向上移回原處。如果在聯(lián)接器324與柱塞59銜接時(shí)對(duì)聯(lián)接器324施加稍大的向下的力，則凸出部分330將會(huì)固定在凹槽326中，從而使柱塞在當(dāng)時(shí)將轉(zhuǎn)入帶有聯(lián)接器324的狀態(tài)。
同樣在圖3中，軸向伸出的裙板63表示為在活塞55的底部緊密貼合的特殊部件。
所示構(gòu)成各種裝置的組成部分的部件可很容易地通過注塑模具由適宜的塑料制造，因此上述裝置也比較廉價(jià)，并適合于隨意使用。
因此，可采用任何需要的材料。優(yōu)選采用醫(yī)藥設(shè)備工業(yè)中已知的對(duì)γ射線的輻照穩(wěn)定的聚合物。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，外容器和活塞由聚碳酸酯制成，注射器的護(hù)套和帽以及柱塞由聚丙烯制成，過濾器由聚乙烯制成，注射器由玻璃制成，O形環(huán)由硅樹脂制成，其他部件由苯乙烯丙烯腈制成。
本發(fā)明已參照設(shè)備的優(yōu)選的實(shí)施方案進(jìn)行了描述。但是，在無菌條件下的實(shí)驗(yàn)室中，本發(fā)明的方法可借助能用加蓋密封的杯子容易地實(shí)施。將血漿和酶放入杯中，然后通過混合和隨后的離心使非交聯(lián)纖維蛋白聚合物在杯底或杯壁上析出。取出剩余的血漿部分后，也如上所述通過添加溶劑以及離心攪動(dòng)使非交聯(lián)纖維蛋白聚合物再溶解。
實(shí)施例將140ml全血和20ml硝酸鈉抗凝血?jiǎng)?美國藥典)輸入上述設(shè)備的第一室70。將該混合物以約6000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，使血漿和血細(xì)胞分離。在連續(xù)離心分離的同時(shí)提升活塞，從而將最內(nèi)相，即血漿，轉(zhuǎn)移到第二室75。約轉(zhuǎn)移60ml血漿。采用經(jīng)由前述密封室45中最上面的小室80導(dǎo)入第二室75的30單位的生物素化的類凝血酶處理這些血漿。這些血漿和類凝血酶以較低速度(例如約2,000-3,000轉(zhuǎn)/分鐘)混合，然后以9,000轉(zhuǎn)/分鐘離心9分鐘。
非交聯(lián)纖維蛋白聚合物凝膠作為凝膠薄層沉積在圓筒體的壁上，于是停止旋轉(zhuǎn)。然后將剩余的血漿流體(血清)返回轉(zhuǎn)移到第一室70。此后，以9,000轉(zhuǎn)/分鐘再離心兩次一分鐘，以便除去盡可能多的凝膠內(nèi)的血清。每如此離心一分鐘后即把剩余血清轉(zhuǎn)移到第一室70。
此后，通過注射器58將包括含有24mM氯化鈣的3.5ml 0.2M醋酸鈉(pH 4.0)的緩沖液注入第二室75。這時(shí)離心攪動(dòng)2分鐘，包括在反復(fù)的正轉(zhuǎn)/反轉(zhuǎn)循環(huán)中以約3,000轉(zhuǎn)/分鐘正轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)各5-10秒，以溶解纖維蛋白聚合物凝膠，形成含有纖維蛋白單體的溶液。抗生物素蛋白瓊脂糖經(jīng)由密封室45中較低的小室71加入如此制備的溶液中。此后再離心攪動(dòng)5分鐘，包括在反復(fù)的正轉(zhuǎn)/反轉(zhuǎn)循環(huán)中以約3,000轉(zhuǎn)/分鐘正轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)各5-10秒。所得溶液含有纖維蛋白單體外加抗生物素蛋白-瓊脂糖生物素-類凝血酶的配合物。
將上述溶液轉(zhuǎn)移到第三室77，然后以9,000轉(zhuǎn)/分鐘通過20μm環(huán)形Porex過濾器離心過濾1分鐘。如前所述所得纖維蛋白單體溶液收集在注射器58中，該溶液含有約25mg/ml纖維蛋白單體。
如此形成的纖維蛋白單體溶液(在這種情況下為纖維蛋白I)以纖維蛋白I∶緩沖液為5∶1的比例與0.75M碳酸鈉/碳酸氫鈉緩沖液共同引入需要這種血纖維蛋白密封膠的部位，由此聚合纖維蛋白密封膠。
權(quán)利要求
1.一種從血液中分離纖維蛋白單體溶液的方法，它包括如下步驟將血液輸入由外壁、上壁和作為下壁的可移動(dòng)活塞限定的圓筒形分離室；使分離室圍繞其縱軸旋轉(zhuǎn)，以便形成足以使血漿部分和細(xì)胞部分同軸分離的離心力；在連續(xù)旋轉(zhuǎn)的同時(shí)，將如此分離出的血漿通過轉(zhuǎn)移通道輸入沿分離室的同一軸成同軸排列的圓筒形反應(yīng)室，該反應(yīng)室另由下壁、與分離室共有的外壁以及作為上壁的活塞限定，所述轉(zhuǎn)移通道從反應(yīng)室底部延伸到分離室中，通過上移活塞減小分離室的容積，由此使血漿穿過轉(zhuǎn)移通道，輸入反應(yīng)室；使上述血漿與能夠?qū)⒀獫{內(nèi)的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)榉墙宦?lián)纖維蛋白聚合物的試劑接觸，該接觸在連續(xù)旋轉(zhuǎn)中進(jìn)行，從而使非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在反應(yīng)室外壁上；停止旋轉(zhuǎn)，以使剩余的血漿流體滴落到反應(yīng)室底部；將反應(yīng)室內(nèi)的空氣加壓至足以使活塞稍微下移，以便將剩余的血漿流體返回壓入轉(zhuǎn)移通道，并壓入分離室，由此使非交聯(lián)纖維蛋白聚合物基本上不被活塞微小的移動(dòng)所破壞；將溶劑注入反應(yīng)室中；和攪動(dòng)反應(yīng)室，以使上述溶劑溶解非交聯(lián)纖維蛋白聚合物，形成包含纖維蛋白單體和溶劑的溶液。
2.一種從血液中分離纖維蛋白的裝置，它包括向分離室加入血液的血液加入裝置；由上壁、外壁和作為下壁的可移動(dòng)活塞限定的圓筒形分離室；在分離室下面，與分離室具有公共軸和公共外壁的圓筒形反應(yīng)室，其中所述可移動(dòng)活塞為反應(yīng)室的上壁；向反應(yīng)室注入能夠?qū)⒗w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)榉墙宦?lián)纖維蛋白聚合物的試劑的裝置；轉(zhuǎn)移通道裝置，它從反應(yīng)室底部延伸到分離室中，從而通過活塞的作用在上述兩室間轉(zhuǎn)移液體；和使上述設(shè)備繞軸旋轉(zhuǎn)的裝置，該旋轉(zhuǎn)足以使分離室內(nèi)的血漿和血液同軸離心分離，且足以使反應(yīng)室中的非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在反應(yīng)室的外壁上。
3.權(quán)利要求2的裝置，它還包括向反應(yīng)室注入溶劑的裝置。
4.權(quán)利要求2的裝置，其中所述轉(zhuǎn)移通道一直延伸到分離室上壁。
5.權(quán)利要求2的裝置，其中所述轉(zhuǎn)移裝置包括一條或一條以上穿過所述兩室的外壁延伸的通道。
6.權(quán)利要求2的裝置，其中所述轉(zhuǎn)移裝置包括一條或一條以上穿過所述兩室延伸的直管通道。
7.權(quán)利要求5的裝置，其中所述裝置包括在圓筒形外容器內(nèi)緊密貼合的圓筒形內(nèi)容器，在上述一個(gè)容器或兩個(gè)容器中的狹槽構(gòu)成外壁中的轉(zhuǎn)移通道。
8.權(quán)利要求7的裝置，其中外容器內(nèi)的圓盤緊靠內(nèi)容器的下壁，該圓盤帶有狹槽，構(gòu)成從反應(yīng)室外壁向反應(yīng)室下壁中心或靠近該中心的位置延伸的轉(zhuǎn)移通道。
9.權(quán)利要求2的裝置，其中所述活塞還包括與活塞形成整體的活塞桿，它穿過分離室中心，然后穿過分離室上壁中的開口向上延伸，因此分離室的形狀為環(huán)形。
10.權(quán)利要求9的裝置，其中活塞桿是空心的，它包含加注溶劑的裝置，而且其中活塞桿和加注裝置適合于向反應(yīng)室加注所述溶劑。
11.權(quán)利要求10的裝置，其中所述加注裝置是與活塞中的第二流體轉(zhuǎn)移裝置有流體連通的注射筒。
12.權(quán)利要求11的裝置，其中所述加注裝置還適合于容納和收集由溶劑溶解非交聯(lián)纖維蛋白聚合物所得的纖維蛋白單體溶液。
13.一種從血漿中分離例如纖維蛋白單體之類成分的方法，該方法包括將血漿加入由器壁限定的室中，然后在加入適宜的酶時(shí)分離出非交聯(lián)纖維蛋白聚合物部分，該方法的特征在于，在離心過程中進(jìn)行非交聯(lián)纖維蛋白聚合物與血漿部分的分離，從而使非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在上述室的外壁上，然后從室中排出聚集在室內(nèi)的剩余流體部分，室內(nèi)所剩的基本上沉積在外壁上的非交聯(lián)纖維蛋白聚合物部分通過添加溶劑以及離心攪動(dòng)而溶解。
14.權(quán)利要求13的方法，它包括優(yōu)選在抗凝血?jiǎng)┐嬖谙聦⒀狠斎朐O(shè)備的第一環(huán)形室，該環(huán)形室由圓筒形外壁和圓筒形內(nèi)壁以及上壁和下壁確定，其中內(nèi)外二壁圍繞公共軸同軸延伸，上壁或下壁由可在第一室內(nèi)移動(dòng)的活塞體構(gòu)成，該方法還包括使設(shè)備圍繞公共軸離心，以將血液基本上分離成細(xì)胞部分和血漿部分，然后，在受到活塞體的作用時(shí)將所得血漿部分轉(zhuǎn)移到由與公共軸同軸延伸的圓筒形外壁限定的第二室，由此在加入適宜的酶時(shí)，在第二室中分離出含非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分，該方法的特征在于，含纖維蛋白原的血漿部分在離心過程中經(jīng)受酶的作用，從而使產(chǎn)生的非交聯(lián)纖維蛋白聚合物沉積在第二室的圓筒形外壁上，然后，在受到活塞體作用時(shí)將聚集在第二室底部的流體部分轉(zhuǎn)移到第一室，在第二室中所剩的基本上沉積在圓筒形外壁上的含非交聯(lián)纖維蛋白聚合物的部分通過添加溶劑以及離心攪動(dòng)而溶解。
15.一種通過圍繞中心旋轉(zhuǎn)軸的離心作用從液體中分離其成分的裝置，它包括由圓筒形外壁和圓筒形內(nèi)壁以及上壁和下壁限定的第一環(huán)形室，其中內(nèi)外二壁圍繞旋轉(zhuǎn)軸同軸設(shè)置，下壁由可在第一室內(nèi)移動(dòng)的活塞體構(gòu)成，該裝置還包括通過第一管道與第一室連通的第二室，第二室由圍繞旋轉(zhuǎn)軸同軸設(shè)置的圓筒形外壁、活塞體和下壁限定，在離心分離過程中，第二室配接位于第一室下面，該裝置還包括向第一室加入血液的血液加入裝置和為促進(jìn)分離而加入組合物的組合物加入裝置，以及連接至少一個(gè)液體接收器的接收裝置，該接收裝置通過第二管道與第二室連通，該裝置的特征在于，第一管道包括至少一條在第一室上壁的開口和第二室下壁的開口之間伸展的通道。
16.權(quán)利要求15的裝置，其特征在于，至少一條所述通道穿過第一和第二兩室的圓筒形外壁的內(nèi)部延伸。
17.權(quán)利要求16的裝置，其特征在于，至少一條第二室下壁中的通道的開口位于該室中心，與下壁形成的凹槽連接。
18.權(quán)利要求15的裝置，其特征在于，各通道由穿過活塞體延伸，并分別固定在第一室上壁和第二室下壁的末端的直道構(gòu)成，該管道與終止于各室中的通道部分相通。
19.權(quán)利要求16或17的裝置，其特征在于，第一室和第二室包括由外圓筒體和內(nèi)圓筒體組成的公共圓筒形外壁，外圓筒體和內(nèi)圓筒體相互緊密貼合，并限定它們之間的軸向延伸通道，上述圓筒體依次終止于端壁，該端壁帶有使連接在活塞體上的活塞桿通過的開口，活塞體構(gòu)成第一室的下壁，并將第一室與第二室隔開，通道在圓筒體的端壁之間一直延伸到緊靠活塞桿的開口。
20.權(quán)利要求18的裝置，其特征在于，第二室的下壁由兩個(gè)緊密貼合的器壁部分構(gòu)成，所述器壁部分限定它們之間的通道，該通道的一端與圓筒體外壁中的通道相通，其相對(duì)端通到第二室中緊靠下壁的中心部分。
21.權(quán)利要求1和13的從血液或血漿中分離任何可聚合或可沉積的成分的方法，其中所述試劑能夠?qū)⒀夯蜓獫{中的物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樯鲜龀煞帧?br> 22.權(quán)利要求1和13的方法，其中所述溶劑能夠溶解上述成分，形成其溶液。
全文摘要
通過圍繞中心軸的離心作用分離血液成分例如纖維蛋白單體的裝置,它包括由圍繞旋轉(zhuǎn)軸同心配置的圓筒外壁(72)和圓筒內(nèi)壁(71)以及上壁(73)和下壁(74)限定的第一環(huán)形室(70),其中下壁由可在第一室內(nèi)移動(dòng)的活塞(55)構(gòu)成。該裝置包括在第一室下面,通過第一通道(4)與第一室連通的第二室(75),它由第一室的圓筒外壁(72)和下壁(74)以及另一下壁(76)確定。該裝置還包括設(shè)在第二室內(nèi)的密封室(45),它包含許多隔室,用于容納有促進(jìn)上述分離作用的各組合物。
文檔編號(hào)B04B3/00GK1377890SQ0112520
公開日2002年11月6日 申請(qǐng)日期2001年8月8日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月2日
發(fā)明者N·E·霍爾姆, P·A·D·愛德華森 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司