專利名稱：交聯(lián)聚合銨鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的交聯(lián)聚合銨鹽和它們的制備方法。這些組合物用作吸收劑、吸附劑、導(dǎo)電劑、電荷轉(zhuǎn)移劑、螯合劑和離子交換樹脂。這些鹽還可以用作膽汁酸螯合劑，即當(dāng)被口服時，該聚合物降低哺乳動物體內(nèi)的血液膽甾醇水平。
背景技術(shù)：
US專利4,071,478描述了在聚合物骨架中含有被三亞甲基隔開的季銨基團的交聯(lián)聚合物的應(yīng)用。但沒有提到含有不是季銨鹽的銨鹽的聚合物的應(yīng)用。
US專利4,775,384描述了含有兩個鹵素基團的多種有機化合物與多種二胺形成聚合銨鹽的反應(yīng)。這些鹽據(jù)說都是水溶性的，因而沒有交聯(lián)。在進一步反應(yīng)之后，據(jù)說它們可以用作纖維處理劑。
US專利4,147,586描述了某些二鹵代鏈烷與亞烷基二胺的反應(yīng)形成水溶性的“加合物”。這一加合物在與表鹵醇反應(yīng)之后可用于提高紙張的濕強度。
幾種不同類型的膽汁酸螯合劑是已知的。一些這類螯合劑含有與聚合物分子結(jié)合或為聚合物分子的一部分的銨鹽(鹽形式的胺基團)。此類聚合物在結(jié)合膽汁酸的能力、毒性和施用難易方面各不相同。因此，仍然需求改進的膽汁酸螯合劑。
US專利3,383,281描述了作為膽汁酸螯合劑的一種含胺基的交聯(lián)聚合物的應(yīng)用，具體地描述了含季銨基團的交聯(lián)聚苯乙烯的應(yīng)用。此類樹脂(也可用作離子交換樹脂)據(jù)信是商品消膽胺中的活性成分，它被用來降低血液膽甾醇水平。
US專利4,027,009描述了作為膽汁酸螯合劑的一種在聚合物骨架上含季銨基團的線性(非交聯(lián))聚合物的應(yīng)用。聚合物的氮原子由規(guī)定尺寸的亞甲基鏈或其它規(guī)定的基團連接。在該專利中沒有提到交聯(lián)聚合物(除去背景資料)的使用，亦未提及含有非季銨鹽銨鹽聚合物的使用。
US專利5,236,701描述了用作膽汁酸螯合劑的交聯(lián)聚合物，其支鏈上具有胺端基。胺基不是交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分。
R.De Simone等，Journal of Pharmaceutical Sciences，vol.67，p.1695-1698(1978)描述了“消膽胺”(它是“微孔性的”)類似物的制備和應(yīng)用。
發(fā)明概述本發(fā)明包括可用作膽汁酸螯合劑、用作吸收劑或用作電荷轉(zhuǎn)移劑的一種交聯(lián)聚合銨鹽，該鹽包括由鏈段連接于其它銨氮原子的銨氮原子，其中約25％或25％以上的連接銨氮原子的鏈段是基團Y，其中每一Y獨立地是-(CR1R2)b-其中b是7-約20中的整數(shù)，每一R1和每一R2獨立地是烷基，該烷基優(yōu)選具有1-20個碳原子，更優(yōu)選1-10個碳原子或是氫；剩下的氮原子被鏈段Z連接，其中每一Z獨立地是獨立地是含有2-50個碳原子的亞烴基，該亞烴基任意性地含有一個或多個獨立地選自羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基或甲硅烷基的基團和雜環(huán)；其中約25％或25％以上的銨氮原子是仲銨氮原子；其中該交聯(lián)聚合銨鹽不溶于水；其前提條件是至少一些所述銨氮原子是交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分。
本發(fā)明包括螯合膽汁酸的方法，包括在含水介質(zhì)中讓膽汁酸和交聯(lián)聚合銨鹽進行接觸，其中在該鹽中約25％或25％以上的連接銨氮原子的基團是基團Y，其中Y是正亞烷基或烷基取代的正亞烷基，該正亞烷基具有7-約15碳原子；0-約75％的連接銨氮原子的基團是基團Z，其中Z是含有2個或2個以上碳原子，優(yōu)選2-50個碳原子的亞烴基，該亞烴基任意性地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基、甲硅烷基和雜環(huán)基；和約25％或25％以上的銨氮原子是仲銨氮原子。
在以上定義的實施方案中，在亞烷基上的取代基，例如羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基或甲硅烷基含有優(yōu)選1-50個碳原子，更優(yōu)選1-30個碳原子。
也優(yōu)選交聯(lián)聚合銨鹽對膽汁酸鹽的Bmax/Kd值大于0.75。
上述交聯(lián)聚合物鹽的藥物上可接受的鹽和藥物前體均包括在本發(fā)明中。
本發(fā)明還包括制備本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽和其藥物上可接受的鹽的優(yōu)選方法。
本發(fā)明還包括制備具有改進的膽汁酸螯合性能的本發(fā)明交聯(lián)聚合銨鹽的改良制備方法，其中該改進方法包括在樣板存在下進行一種用來制備本發(fā)明交聯(lián)聚合銨鹽的聚合反應(yīng)步驟，該樣板定義如下文。
本發(fā)明還包括治療高膽甾醇血和/或降低哺乳動物體內(nèi)血漿膽甾醇水平的方法，包括對哺乳動物施用降低膽甾醇的治療有效量的如上所述的交聯(lián)聚合銨鹽。
本發(fā)明還包括含治療有效量的如上所述的交聯(lián)聚合銨鹽和其藥理上可接受載體的藥物組合物。
還包括在本發(fā)明中的是藥盒，該藥盒包括一個或多個含有藥用劑量單位的容器，劑量單位包括如上所述的用來治療高膽甾醇血、螯合膽汁酸和/或降低血液膽甾醇水平的交聯(lián)聚合銨鹽。
本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物還可以與一種或多種附加的治療劑結(jié)合施用。本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽與此類附加的治療劑的結(jié)合施用能夠獲得比單種化合物和試劑更好的效果，并能使每一種以較低的劑量施用時如此。較低的劑量最大程度減少了潛在的副作用，從而提供了更高的安全性。本發(fā)明還包括通過結(jié)合施用如上所述的交聯(lián)聚合銨鹽和一種或多種附加的治療劑來治療哺乳動物體內(nèi)高膽甾醇血的方法，附加治療劑選自而不限于酰基輔酶A的抑制劑如膽甾醇O-?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)；3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A(HMG-CoA)還原酶的抑制劑，如lovastatin(MEVACOR)；脂質(zhì)調(diào)節(jié)劑如二甲苯氧庚酸(LOPID)，祛脂乙酯(ATROMID-S)，或丙丁酚(LORELCO)。
發(fā)明詳述所使用的和所描述的原料是交聯(lián)聚合銨鹽。交聯(lián)是指具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的聚合物。測定聚合物是否是已交聯(lián)的普通試驗是嘗試著將該聚合物溶于一般是該聚合物的溶劑的液體中。線性或支鏈而非交聯(lián)的聚合物會溶于溶劑中。交聯(lián)聚合物不會溶解，盡管可以溶脹至某種程度。這里描述的聚合銨鹽，當(dāng)沒有交聯(lián)時，一般可溶于水或其它極性溶劑。當(dāng)被交聯(lián)時，聚合銨鹽溶脹在水中，通常形成凝膠狀物質(zhì)。
用作膽汁酸螯合劑或用于降低血漿膽甾醇水平，本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽能以干燥的或幾乎干燥的形式或以溶脹在水中的形式使用。如果所使用的聚合銨鹽具有至少約4，優(yōu)選約5-30和更優(yōu)選約10-30的溶脹系數(shù)，則是優(yōu)選的。溶脹系數(shù)被取為由聚合物中吸收的水的重量除以所使用的聚合物的重量之比值。據(jù)信，已溶脹至優(yōu)選的水平的交聯(lián)聚合銨鹽在作為血漿膽甾醇水平降低劑時具有某些優(yōu)點，如提高的螯合膽汁酸和軟化凝膠織構(gòu)(導(dǎo)致較低的刺激作用)的能力。
銨鹽或銨離子是指連接于四個其它原子的氮原子，例如在銨離子本身中連接于四個氫原子。在伯銨離子中氮原子鍵接于三個氫原子和一個碳原子，在仲銨離子中它鍵接于兩個碳原子和兩個氫原子，在叔銨離子中它鍵接于三個碳原子和一個氫原子，和在季銨離子它鍵接于四個碳原子。在本發(fā)明的聚合銨鹽中，至少約25％優(yōu)選至少40％的銨氮原子是仲銨氮原子，。在一個優(yōu)選實施方案的全部銨氮原子中，伯銨氮原子占15-30％，仲銨氮原子占40-60％，叔銨氮原子占15-30％和季銨氮原子占低于5％。使用在實施例53中描述的方法可以測定每一類型的銨氮原子的相對含量。
銨鹽的每一氮原子具有一個正電荷且每一銨離子的正電荷都有反離子靠近它。反離子可以是任何負離子，它們的共軛酸(Bronsted)能夠使銨鹽的共軛堿質(zhì)子化。當(dāng)被用作膽甾醇降低劑時，負離子應(yīng)具有生物相容性，不會引起太大的不需要的生理上的變化。合適的生物相容性負離子包括氯離子，溴離子，碘離子，硫酸根，磷酸根，乙酸根，抗壞血酸根，碳酸根，碳酸氫根，煙酸根，水楊酸根，酒石酸根和檸檬酸根。氯離子是尤其優(yōu)選的負離子。
聚合物的銨鹽(離子)的氮原子是位于聚合物鏈段之間，除非它們是端基。至少約25％的連接這些氮原子的此類基團，這里規(guī)定為Y，獨立地是選自具有7至約20個碳原子的正亞烷基。這里“正亞烷基”是指基團-(CH2)b-，其中b是規(guī)定的整數(shù)，在這種情況下為7至約20。因此，Y能夠由結(jié)構(gòu)式-(CR1R2)b-表示，這里b是7-20中的整數(shù)，每一R1和R2獨立地，優(yōu)選具有1-20個碳原子和更優(yōu)選具有1-10個碳原子的是烷基或氫。這一正亞烷基Y也可以被烷基取代，并且實際上是支化的亞烷基。正亞烷基優(yōu)選具有7-14個碳原子，更優(yōu)選具有9-12個碳原子。應(yīng)該補充的是其它亞烴基，如氮原子之間的距離等于至少7個亞甲基的亞烴基也可以。
銨鹽的其它氮原子被亞烴基連接，這里亞烴基被規(guī)定為Z，含有2個或2個以上的碳原子，優(yōu)選2-50個碳原子，也就是說在氮原子之間必須有至少兩個碳原子。這里“亞烴基”是指僅含有碳和氫的二價基團。亞烴基Z可以被各種取代基取代或帶有含雜原子的鏈上基團。優(yōu)選的亞烴基是飽和的。取代基或鏈上基團可以是羥基，烷氧基，醚基，酯基，氨基，硫醚基，酮基，甲硅烷基或雜環(huán)。優(yōu)選的取代基是醚基和氨基。如果亞烴基Z是含有2-14個碳原子的正亞烷基，則是優(yōu)選的。如果取代基含有1-50個碳原子，更優(yōu)選1-30個碳原子，最優(yōu)選1-20個碳原子，則也是優(yōu)選的。
許多位于聚合物鏈段Y和Z之間的(另外由鏈段Y和Z連接的)氮原子(假設(shè)存在Z)是聚合物的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分。聚合物網(wǎng)絡(luò)可以認為是三維點陣結(jié)構(gòu)，點陣的一些片段在一端沒有連接于點陣。這些未連接的點陣通常認為是聚合物的端基。“交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分”是指所述特殊片段或基團(它可含有一個或多個氮原子)在該片段或基團的兩端連接于三維點陣結(jié)構(gòu)的交聯(lián)位(或交聯(lián)支鏈位點)。因此，在兩端(最終)連接于點陣(和它所含有的任何氮原子)的片段是“交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分”。據(jù)信在這些交聯(lián)聚合銨鹽中，氮原子通常是實際的交聯(lián)支點，并且當(dāng)然，這些氮原子是交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分。
這里使用的“烷基”意在包括具有特定數(shù)目的碳原子(碳原子數(shù)目可以加以規(guī)定，例如“C1-C10”表示具有1-10個碳原子的烷基)的支化或直鏈飽和脂族烴基?！版溝┗币庠诎ň哂兄辨溁蛑Щ湗?gòu)型的且具有一個或多個不飽和碳-碳鍵(它可以存在于鏈上任何穩(wěn)定的點)的烴鏈，如乙烯基和丙烯基等基團；“炔基”意在包括具有直鏈或支化鏈構(gòu)型的且具有一個或多個碳-碳叁鍵(它可以存在于鏈上任何穩(wěn)定的點)的烴鏈，如乙炔基，丙炔基等基團。
術(shù)語“亞烷基”，“亞鏈烯基”，“亞苯基”，“亞環(huán)烷基”等基團分別是指烷基、鏈烯基、苯基和環(huán)烷基，它們由兩個鍵連接于本發(fā)明交聯(lián)聚合物的結(jié)構(gòu)的剩余部分。此類基團可以另外和同樣地分別表示為-(烷基)-，-(鏈烯基)-，-(苯基)-，-(環(huán)烷基)-等[即-(alkyl)-，-(alkyenyl)-，-(phenyl)-，-(cycloalkyl)-等]。
這里所使用的術(shù)語“亞烴基”包括任何烴基，例如(例舉而非限制性地)烷基，鏈烯基，炔基，碳環(huán)，環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，烷基碳環(huán)或碳環(huán)烷基，它們由兩個鍵連接于本發(fā)明交聯(lián)聚合物的結(jié)構(gòu)的剩余部分。對于“鏈上(in-chain)”醚基，酯基，氨基，硫醚基，酮基，甲硅烷基，或雜環(huán)，是指含有一個或多個(優(yōu)選1-5個，獨立地選擇)鏈上-O-，-OC(＝O)-，-C(＝O)O-，-OC(＝O)O-，-NH-，-N(C1-C10烷基)-，-S-，-C(＝O)-，-SiH(C1-C10烷基)-，-Si(C1-C10烷基)2-，或-(雜環(huán))-基團的亞烴基。對于“取代基”羥基，醚基，氨基，硫醚基，酮基，甲硅烷基，或雜環(huán)，是指被一個或多個(優(yōu)選1-5個，獨立地選擇)-OH，-O(C1-C10烷基)-，-(C1-C10烷基)O(C1-C10烷基)，-NH2，-NH(C1-C10烷基)，-NH(C1-C10烷基)2，-SH，-S(C1-C10烷基)，-(C1-C10烷基)S(C1-C10烷基)，＝O，(C1-C10烷基)，-Si(C1-C10烷基)2-，或-(雜環(huán))-基團取代的亞烴基。
這里使用的術(shù)語“烴基”包括任何烴基，例如(例舉而非限制性地)，烷基，鏈烯基，炔基，碳環(huán)，環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，烷基碳環(huán)或碳環(huán)烷基，它們由一個鍵連接于本發(fā)明交聯(lián)聚合物的結(jié)構(gòu)的剩余部分。此類烴基可以含有鏈上或取代的基團，如以上關(guān)于亞烴基所描述的那些。
“烷氧基”表示具有指定數(shù)目的、通過氧橋連接的碳原子的烷基；“烷硫基”表示具有指定數(shù)目的、通過硫橋連接的碳原子的烷基；“單烷基胺基”和“二烷基胺基”表示N原子分別被1或2個具有指定數(shù)目碳原子的烷基取代；“環(huán)烷基”意在包括飽和環(huán)狀基，包括單-，雙-或多-環(huán)環(huán)體系，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基和金剛烷基；“雙環(huán)烷基”意在包括飽和雙環(huán)基團，如[3.3.0]雙環(huán)辛烷，[4.3.0]雙環(huán)壬烷，[4.4.0]雙環(huán)癸烷(萘烷)，[2.2.2]雙環(huán)辛烷，等等。
這里使用的“碳環(huán)”或“碳環(huán)殘基”意指任何穩(wěn)定的3-至7-元單環(huán)或雙環(huán)或者7-至14-元雙環(huán)或三環(huán)或者至多26元多環(huán)碳環(huán)，它們中的任何一個可以是飽和的，部分不飽和的或芳族的。此類碳環(huán)的例子包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)戊基，環(huán)己基，苯基，聯(lián)苯基，萘基，2，3-二氫化茚基，金剛烷基或四氫化萘基(tetralin)。
這里使用的術(shù)語“雜環(huán)”或“雜芳基”或“雜環(huán)族環(huán)”意指穩(wěn)定的5至7元單環(huán)或雙環(huán)或者7至10元雙環(huán)族雜環(huán)，它們可以是飽和的、部份不飽和的或是芳族的，并由一些碳原子和1-4個獨立地選自N，O和S的雜原子組成，其中氮和硫雜原子可被任意性地氧化，氮可以被任意性地四取代，以及包括任何雙環(huán)基團，其中以上定義的雜環(huán)族環(huán)中任何一個被稠合到苯環(huán)上。雜環(huán)族環(huán)可以在任何雜原子或碳原子上連接于它們的側(cè)基，得到穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。如果所得到的化合物是穩(wěn)定的，上述雜環(huán)族環(huán)可以在碳原子或氮原子上被取代。此類雜環(huán)的例子包括但不限于吡啶基，嘧啶基，呋喃基，噻唑基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，四唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，吲哚基，假吲哚基(indo lenyl)，喹啉基，異喹啉基，苯并咪唑基，哌啶基，4-哌啶酮基，吡咯烷基，2-吡咯烷酮基，吡咯啉基，四氫呋喃基，四氫喹啉基，四氫異喹啉基，十氫喹啉基或八氫異喹啉基，丫辛因基，三嗪基，6H-1，2，5-噻二嗪基，2H，6H-1，5，2-二噻嗪基，苯硫基，噻蒽基，吡喃基，異苯并呋喃基，色烯基，不噸基，氧硫雜蒽基，2H-吡咯基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，異噻唑基，異惡唑基，惡唑基，哌啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，吲嗪基，異吲哚基，3H-吲哚基，吲哚基，1H-吲唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，異喹啉基，喹啉基，2，3-二氮雜萘基，1，5-二氮雜萘基，喹喔啉基，喹唑啉基，1，2-二氮雜萘基，喋啶基，4aH-咔唑基，咔唑基，β-咔啉基，菲啶基，丫啶基，萘嵌二氮雜苯基，菲咯啉基，吩嗪基，砷氮雜蒽基，吩噻嗪基，-1，2，5氧二氮雜環(huán)戊二烯，吩卓嗪基，異苯并二氫吡喃基，苯并二氫吡喃基，吡咯烷基，吡咯啉基，咪唑烷基，咪唑啉基，吡唑烷基，吡唑啉基，哌啶基，哌嗪基，二氫吲哚基，異二氫吲哚基，奎寧環(huán)基，嗎啉基或卓唑烷基。還包括在內(nèi)的是例如含有上述雜環(huán)的稠合環(huán)和螺環(huán)化合物。
這里使用的術(shù)語“取代的”是指在指定原子或基團上的一個或多個氫被選自上述基團的基團取代，前提是不超過指定原子的正常價態(tài)，且取代導(dǎo)致穩(wěn)定的化合物。當(dāng)取代基是酮基(＝O)時，原子上的2個氫被取代。
制備本發(fā)明的聚合銨鹽的一種方法包括雙官能團有機化合物與二胺化合物進行反應(yīng)，該二胺化合物具有兩個伯氨基。這里使用的雙官能團有機化合物指由結(jié)構(gòu)式X-Y-X和/或X-Z-X表示的化合物，其中Y和Z如上所定義，X是用于胺烷基化反應(yīng)的合適離去基團。X獨立地選自，但不限于鹵化物，環(huán)氧化物，衍生醇類，磺酸酯類，氮丙啶，環(huán)硫化物，硫酸酯，重氮基。胺烷基化反應(yīng)的其它的合適離去基團將由本有機合成領(lǐng)域中的熟練人員認識到。此類合適的離去基團的例子在“Advanced Organic Chemistry”(第三版，J.March.ed.，1985)，這一公開物被引入本申請供參考。該雙官能團有機化合物也可以稱作“烷基化劑”。如上所定義的Y和Z是有合適的離去基團官能基與之連接的基團。
該二胺化合物可由結(jié)構(gòu)式H2N-Y-NH2和/或H2N-Z-NH2表示其中Y和Z如上所定義，是兩個氨基與之連接的基團。為了獲得所需要的聚合物，至少一些雙官能團有機化合物(例如二鹵化物)和/或一些二胺必須含有如上所述的Y。為了以最佳的方式獲得所需要的聚合物，已發(fā)現(xiàn)Y或Z基團應(yīng)具有這樣的尺寸，即要求合適的離去基團(例如鹵素原子)是被相當(dāng)于7個或7個以上的亞甲基隔開，即被7個亞甲基，或如果不被亞甲基分開的話，被與7個亞甲基相當(dāng)?shù)木嚯x分開。據(jù)信，如果雙官能團有機化合物離去基團的這一最小間隔不存在，在第一離去基團與胺反應(yīng)之后雙官能團有機化合物趨向于“尾咬(back bite)”，得到不需要的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。因此，通常希望(但不是必須)雙官能團有機化合物是X-Y-X?；鶊FY和Z可以獨立地選擇在特殊聚合物上的每一部位。
有用的雙官能團有機化合物優(yōu)選是二鹵化物并包括，但不限于1，10-二溴癸烷，1，12-二溴十二烷，1，8-二溴辛烷，1，18-二溴十八烷，1，9-二溴壬烷，1，7-二溴庚烷，1，8-二碘辛烷，1，8-二溴-3-乙基辛烷，和1，9-二溴癸烷。有用的二胺包括，但不限于乙二胺，1，6-二氨基己烷，1，12-二氨基十二烷，2-甲基-1，5-二氨基戊烷，1，4-雙(氨基甲基)環(huán)己烷，1，3-二氨基戊烷，二亞乙基三胺，1，4-雙(3-氨基丙基)哌嗪，1，4-環(huán)己烷二胺，5-氨基-1-氨基甲基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，1，3-丙烷二胺，1，4-丁烷二胺，1，5-戊烷二胺，1，7-庚烷二胺，1，8-二胺基辛烷，1，9-二氨基-壬烷，1，10-二氨基癸烷，1，11-二氨基十一烷，2-羥基-1，3-丙二胺和4，4’-亞甲基-雙(環(huán)己基胺)?？梢允褂靡环N以上的二胺和/或雙官能團有機化合物，只要符合對聚合物結(jié)構(gòu)的限定，例如，至少約25％的全部基團Y和Z應(yīng)是Y。
聚合銨鹽也可以由二胺和二環(huán)氧化物進行反應(yīng)獲得。在這種情況下，二胺的氮原子由含有7-約20個碳原子的正亞烷基(它可以被烷基取代)連接。參見制備此類螯合劑的實施例57-63。在這些聚合物合成之后，通過用酸類中和胺類形成銨鹽。
這里所述的聚胺(和它們的鹽)的氮原子可以被進一步取代(一般通過與(取代)烷基鹵反應(yīng))，例如，從伯胺形成仲胺(鹽)和從仲胺形成叔胺。然而，在所得到的聚胺(鹽)中，25％或25％以上的胺(銨)氮原子應(yīng)是仲氮。在氮原子上可以被進一步取代的基團Q是含有1-50個碳原子的烴基，并含有1個或多個，優(yōu)選1-5個，鏈上或取代基羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基、甲硅烷基或雜環(huán)。如果Q含有1-30個碳原子則是優(yōu)選的。此類聚胺鹽描述在實施例39-50，69和70中。
本發(fā)明還包括制備本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽(包括基團Y和任選的基團Z，如上所述)的改進方法。制備本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽的方法包括聚合步驟(包括凝膠化)和優(yōu)選包括一個或多個下述步驟(下面將進一步詳細描述)提純步驟；離子交換步驟；尺寸減少步驟；和干燥步驟。這些附加的步驟可以按任何順序連續(xù)進行或同時進行或一個步驟與另一個步驟合并進行(即，作為單一步驟)。尺寸減少步驟在聚合反應(yīng)，提純，干燥，或離子交換步驟之后進行?？梢栽黾痈郊硬襟E，一些步驟可以合并和/.或在同一設(shè)備中進行，和/或可以改變一些步驟的順序，為的是改進整體工藝方法。僅作為舉例而沒有限制性地，提純和離子交換步驟可以在單一的合并步驟中同時進行；聚合反應(yīng)和尺寸減少步驟可以合并；可以有多個尺寸減少步驟；聚合反應(yīng)，尺寸減少，提純和離子交換可以在同一步驟中進行；提純，離子交換和尺寸減少步驟可以合并進行和/或在同一設(shè)備中進行；亦可進行其它有利于改進整體工藝方法的合并和/或互換。制備交聯(lián)聚合銨鹽的方法和條件包括，但不限于，下面詳細描述的那些方法和條件。
聚合反應(yīng)一般來說，聚合反應(yīng)步驟(包括凝膠化)通過控制反應(yīng)物摩爾比，溫度，時間，溶劑組成，試劑進料速度，試劑添加順序和模式，單體濃度，混合和其它反應(yīng)因素進行。聚合銨鹽能夠通過將反應(yīng)單體(單獨或一起)溶于合適的溶劑(一般是下文所述的極性溶劑)中從上述二胺和雙官能團有機化合物(例如二鹵化物或二環(huán)氧化物)獲得。然后，反應(yīng)物通過使用合適的反應(yīng)器在控制條件下進行混合。在加熱和攪拌下，反應(yīng)混合物形成凝膠或顆粒碎屑狀固體，即進行如上所述的凝膠化。在此時，如果需要，粗聚合銨鹽隨時進行提純，離子交換，尺寸減少，和/或干燥。
“凝膠化”是指聚合物因交聯(lián)而變得不溶的點(時間)。交聯(lián)聚合物的特征之一是，在聚合溶劑中，在聚合物不溶的時間點形成一溶脹凝膠。凝膠通過在反應(yīng)器中攪拌破碎或高剪切輥煉(下面將要描述)變成碎屑狀固體。
在聚合反應(yīng)步驟中使用的合適溶劑是單一化合物和化合物的混合物。所有反應(yīng)生成交聯(lián)聚合物的起始原料均應(yīng)可溶于該溶劑。有用的溶劑包括極性化合物，如N，N-二甲基酰胺，N，N-二甲基乙酰胺，二甲基亞砜，六甲基磷酰胺(HMPA)，n-甲基吡咯烷酮(NMP)，異丙醇，甲醇，乙醇和其它低級醇類和低級醚類。這些溶劑可以結(jié)合使用或單獨使用。尤其優(yōu)選的溶劑是N，N-二甲基甲酰胺和甲醇或N，N-二甲基乙酰胺和甲醇的混合物。
在聚合物反應(yīng)中，反應(yīng)溶液中的反應(yīng)單體濃度，當(dāng)各自計算時，占總反應(yīng)溶液重量的5-60wt％。在反應(yīng)溶液混合之后，反應(yīng)器中總單體濃度是5-60wt％，而優(yōu)選的操作范圍是35-45wt％。如果將反應(yīng)劑與溶劑一起溶解，則反應(yīng)器中總固體負載量，或單體濃度為5-60wt％，優(yōu)選操作范圍35-45wt％。在反應(yīng)溶液中單體濃度影響產(chǎn)物聚合物的交聯(lián)密度。
在聚合反應(yīng)過程中同樣要控制反應(yīng)物的摩爾比。大約等摩爾量的二胺和烷基化試劑進行反應(yīng)。雙官能團有機化合物與二胺化合物的摩爾比的合適范圍是約0.9-1.4，其中優(yōu)選的范圍是約1.0-1.20。選擇優(yōu)選的范圍生產(chǎn)具有所需交聯(lián)密度的聚合物產(chǎn)物，下面將要討論。
聚合反應(yīng)在寬的溫度范圍內(nèi)進行，即在約-5℃至溶劑(或低沸點成分)的沸點范圍內(nèi)。一般來說，實際操作溫度，在初始反應(yīng)物混合過程中是-5℃至45℃，在初始反應(yīng)物混合之后是60℃至120℃。優(yōu)選的范圍分別是0℃至40℃和75℃至85℃。較低的初始反應(yīng)物混合溫度足以控制放熱反應(yīng)。
如果聚合反應(yīng)產(chǎn)生酸性副產(chǎn)物的話，可在有或沒有用來中和聚合反應(yīng)的酸性副產(chǎn)物的合適堿存在下進行聚合步驟。合適的堿包括，但不限于，碳酸鈉或碳酸鉀。這一合適的堿優(yōu)選以相對于雙官能團有機化合物的1-50摩爾％、更優(yōu)選以10-25摩爾％的量存在。
聚合反應(yīng)步驟的反應(yīng)時間可根據(jù)所使用的二胺和雙官能團有機化合物(也稱作烷基化劑)結(jié)合物的不同作大范圍的變化。一般來說，在本發(fā)明的凝膠化交聯(lián)聚合銨鹽形成之前反應(yīng)進行幾分鐘至幾天。凝膠形成之前最典型的時間范圍是0.5-24小時(0.5-8小時是優(yōu)選的)，還需要另外1-16小時確保反應(yīng)的完成。
聚合反應(yīng)優(yōu)選在反應(yīng)過程中加以混合和攪拌。在不同反應(yīng)階段中改變反應(yīng)攪拌的強度。優(yōu)選地，反應(yīng)混合物在凝膠點或凝膠化之前很好地混合。在凝膠過程中和之后的混合對于小反應(yīng)規(guī)模來說不是關(guān)鍵的，然而，對于大的公斤級反應(yīng)規(guī)模來說，在凝膠過程中和之后的混合是重要的。在聚合反應(yīng)過程中的混合也因防止聚合物在反應(yīng)器中形成一整塊的固體物質(zhì)而有利于產(chǎn)物的轉(zhuǎn)移，并且凝膠顆粒尺寸能夠由混合速度的適宜選擇來控制。一般來說，在凝膠化過程中和之后混合越快，存在于反應(yīng)器中的聚合銨鹽的凝膠顆粒尺寸越小。
反應(yīng)物加入到反應(yīng)器中的速度和順序可以加以控制。一般來說，反應(yīng)物可以同時或按任何順序加入到反應(yīng)器中，優(yōu)選的是雙官能團有機化合物在二胺之后加入。當(dāng)順序添加時，優(yōu)選的是第二反應(yīng)物添加到反應(yīng)器中的第一反應(yīng)物的速度應(yīng)足夠地快，以便在反應(yīng)混合物的凝膠化之后最大程度地減少第二單體的添加。當(dāng)反應(yīng)物單體同時添加到反應(yīng)器時反應(yīng)物添加速度并非關(guān)鍵。反應(yīng)物能以同樣的速度(基于當(dāng)量，體積，和/或重量)添加，其中兩反應(yīng)物的加料是同時完成的(“共進料”(cofeeding))，或者反應(yīng)物能以不同的速度進給，以使在一種反應(yīng)物進料結(jié)束后接著完成另一反應(yīng)物的進料，但優(yōu)選在凝膠化之前。
用于聚合反應(yīng)的合適反應(yīng)器設(shè)備將取決于反應(yīng)的規(guī)模。聚合反應(yīng)優(yōu)選在反應(yīng)器中進行，該反應(yīng)器適合于混合液體和固體物質(zhì)，同時保持了反應(yīng)器中的成分的溫度控制。對于小規(guī)模的反應(yīng)，普通的燒瓶，任意性地裝有槳式攪拌器，就足夠了。然而，對于大規(guī)模的反應(yīng)，高效的高剪切紊流式大容量混合是優(yōu)選的。優(yōu)選使用混合機/反應(yīng)器，它適合于在反應(yīng)從極低粘度(溶液)轉(zhuǎn)變到稠厚溶液和然后轉(zhuǎn)變到凝膠碎屑而同時保持溫度控制的過程中混合聚合反應(yīng)。合適設(shè)計的連續(xù)流反應(yīng)器，并非限制地例舉如擠出機，熱交換機，在線混合機和/可混和式反應(yīng)器與連續(xù)流反應(yīng)器的組合都可以使用。
本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽的交聯(lián)密度(由在水中的溶脹系數(shù)測定)通過在聚合步驟中適宜地使用溶劑，溫度和反應(yīng)時間來控制。影響交聯(lián)密度的其它因素在反應(yīng)中所使用的單體摩爾比和濃度。一些合適的溶劑(例如水，乙腈，醚類，甲醇，乙醇)，當(dāng)單獨使用時，所產(chǎn)生的聚合物在水中幾乎不溶脹。一些合適溶劑的混合物能夠生產(chǎn)高度可溶脹性的聚合物。短的反應(yīng)時間和/或較低的溫度產(chǎn)生低交聯(lián)和高度的溶脹。
交聯(lián)也可通過使用少量三-或更高官能度的胺類，環(huán)氧化物類或鹵化物類(參見實施例67)來完成。交聯(lián)也可通過將未交聯(lián)的聚合銨鹽暴露于電離輻射。
在上述實施方案中，當(dāng)用于膽汁酸螯合時，聚合銨鹽在水中應(yīng)具有至少約4的溶脹系數(shù)。聚合物溶脹度由幾個主要的因素決定。一個是聚合物中的成鹽的程度，即氨基氮原子以它們的鹽形式存在的百分數(shù)。這一百分數(shù)越高，聚合物溶脹越大。如果至少80％的氨基以它們的鹽形式存在則是優(yōu)選的，如果至少約90％的以鹽形式存在則更優(yōu)選。定義“聚合銨鹽”涵蓋的是聚合物中至少約50％的氨基屬于它們的鹽形式的聚合物?？刂迫苊浶缘牧硪灰蛩厥堑又g基團的親水性。一般，這些基團含有越多的碳原子，親水性越差，聚合物在水中溶脹性越差。溶脹性受反離子的選擇的影響。最終控制因素是交聯(lián)密度。一般，交聯(lián)密度越高，聚合物溶脹程度越低。
在聚合物合成和加工過程中的條件影響這些因素。因此，隨著反應(yīng)溶液中單體濃度的下降，溶脹性提高，在高稀釋度下急劇升高。反應(yīng)時間是重要的。反應(yīng)物進行反應(yīng)，在較長的熟化期下形成較高分子量的聚合物。反應(yīng)溫度對Mw增長有影響，升高反應(yīng)溫度在較短時間內(nèi)產(chǎn)生較高的分子量(更多的交聯(lián))。后處理(workup)操作程序也除去低分子量的聚合物并減少溶脹。用堿的水溶液洗滌產(chǎn)物，然后用酸，使聚合物收縮和再溶脹，擠出可溶性組分。在后面的提純和離子交換步驟中利用這一效果。在Soxhlet裝置中連續(xù)用有機溶劑，然后用水抽提聚合物之后，觀察到溶脹的進一步下降。
聚合反應(yīng)的溶劑的選擇對最終產(chǎn)物的溶脹性有很大的影響。在不溶解反應(yīng)物的介質(zhì)中獲得基本上為0的溶脹。溶脹度在界面體系中極低，在該體系中二溴癸烷溶于有機相和六亞甲基二胺溶于水。溶脹還能通過添加堿如碳酸鈉、碳酸鉀或有機胺，中和所產(chǎn)生的酸性副產(chǎn)物來控制。其它非親核性堿也可以使用。較高溶脹性聚合物的形成可由可溶解兩種反應(yīng)物的溶劑尤其是雙極性、非質(zhì)子傳遞溶劑促進。
產(chǎn)物聚合物的提純和反離子交換在制備本發(fā)明的聚合物的方法中，通常有一定量的雜質(zhì)，如溶劑，未反應(yīng)的反應(yīng)物，一些低聚物，和/或聚合的但非交聯(lián)的產(chǎn)物。也存在的是聚合銨鹽反離子。同樣，如果樣板(template)(下面將要討論)包括在聚合步驟中，由這樣一種提純步驟從所需要的產(chǎn)物聚合銨鹽聚合物除去樣板。如果希望除去這一未交聯(lián)的(因而是可溶的)級分，這可通過用合適的萃取(抽提)溶劑(未交聯(lián)的聚合物溶解在溶劑中)萃取交聯(lián)的(不溶性的)聚合銨鹽來實現(xiàn)，溶劑如水、醇類或其它適合于這一萃取的溶劑(聚合銨鹽聚合物產(chǎn)物不溶于這一萃取溶劑)。參見實施例1A和1B。如果需要，提純步驟(除去雜質(zhì))和離子交換步驟(改變聚合銨鹽反離子)能夠通過如下同時進行和結(jié)束添加合適的溶劑形成凝膠，添加堿如氫氧化銨或氫氧化鈉與最初的反離子形成鹽，通過洗滌聚合物除去鹽，然后用所需反離子的共軛酸再中和。這一類型的操作程序在現(xiàn)有技術(shù)中是眾所周知的。用于萃取提純和離子交換步驟的合適堿包括無機堿，如氨，金屬氫氧化物，金屬醇鹽，金屬碳酸鹽，和有機堿類如有機胺。用于萃取提純和離子交換步驟的合適酸包括無機酸，如HCl，和有機酸，如烷基和芳基酸。
用于提純和/或離子交換步驟的溶劑是離子交換所需要的物質(zhì)至少部分可溶于其中的那些溶劑，優(yōu)選可溶脹聚合物的那些溶劑，例如(僅作為舉例但非限制性地)以下的溶劑(或溶劑的混合物)水，醇類，極性質(zhì)子溶劑，極性非質(zhì)子傳遞溶劑，含有所需反離子的共軛酸的溶劑，含有為除去不需要的原始反離子所需堿的溶劑，和含有所需要的反離子的鹽的溶劑。優(yōu)選使用水和一種或多種以上所列舉的堿或酸用于本方法的離子交換步驟。優(yōu)選的溶劑具有足夠的揮發(fā)性，以便在干燥過程中較易除去。
在提純和反離子交換步驟之后產(chǎn)物聚合物的pH優(yōu)選應(yīng)在約pH2-8，更優(yōu)選pH3-7范圍內(nèi)。
用來在聚合銨鹽產(chǎn)物的萃取提純中分離固體和液體的方法包括，但不限于，索氏(Soxhlet)提取，過濾，離心，和/或用來分離固體和液體的其它此類方法。在提純步驟中可以使用逆流萃取方法。在使用此類分離固體和液體的物理方法時，可以使用多種設(shè)備。這些包括但不限于金屬或聚合物篩網(wǎng)，濾布，熔結(jié)或燒結(jié)玻璃或金屬，深濾介質(zhì)(depth filtrationmedium)，和/或膜。分離用的最佳裝置將根據(jù)特定的聚合銨鹽，所使用的溶劑和/或溶劑混合物，聚合物的電離的狀態(tài)來變化。
產(chǎn)物聚合物的凝膠顆粒的減少在聚合反應(yīng)、提純、離子交換和/或干燥之后或過程中獲得的聚合銨鹽凝膠顆粒的尺寸減少(這里也稱作研磨(milling))可以通過幾個方式實現(xiàn)。
正如以上所討論的，產(chǎn)物聚合物的凝膠顆粒尺寸的減少典型地和優(yōu)選地是在聚合反應(yīng)步驟中通過混合和攪拌反應(yīng)器中的反應(yīng)液來實現(xiàn)的。
顆粒尺寸減少可以在交聯(lián)聚合銨鹽產(chǎn)物的濕潤、潮濕、冷凍或干燥狀態(tài)下進行。用于顆粒尺寸減少的輥類型包括，但不限于，銷磨(pin mill)，錘磨，切削碎機(autting mill)，轉(zhuǎn)子-定子磨機(rotor-stator)，介質(zhì)磨(midia mill)，磨耗機(attritor)，射流機(jet mill)，空氣分選磨，反向空氣噴氣磨(opposing air jet mill)，和/或聲處理機(sonicator)。輥煉可以按間歇、半間歇、或連續(xù)流過方式進行，任何一種的優(yōu)先都取決于輥煉步驟在本發(fā)明方法中的位置，聚合銨鹽的狀態(tài)，聚合物的溶劑含量，聚合物被溶脹的程度，整個方法的效率的改進程度。取決于在本發(fā)明方法中的特定步驟(在該步驟之后完成尺寸減少步驟)，合適輥煉方法的審慎選擇和使用得以產(chǎn)生具有所需顆粒尺寸范圍的聚合銨鹽顆粒。
當(dāng)在濕潤條件下進行尺寸減少步驟時，用來將聚合物制成淤漿的溶劑可以是溶脹性或非溶脹性溶劑，這取決于所考慮的輥煉的類型。當(dāng)尺寸減少步驟在潮濕或干燥狀態(tài)下進行時，有可能結(jié)合進行干燥-輥煉或提純-輥煉操作。當(dāng)尺寸減少步驟在干燥狀態(tài)下進行時，聚合物可以在幾個溫度范圍內(nèi)進行輥煉低溫，如液氮或二氧化碳；室溫；和提高的溫度，至多150℃(低于引起聚合物顯著降解的溫度)。
聚合物產(chǎn)物的干燥本發(fā)明的聚合銨鹽產(chǎn)物最好加以干燥，以便除去溶劑。干燥是指從聚合物基質(zhì)中除去溶劑?？梢允褂迷诟稍锛夹g(shù)領(lǐng)域中的熟練人員常用方法。干燥方法包括，但不限于，盤式干燥，噴霧干燥，急驟干燥，轉(zhuǎn)筒式干燥，旋槳式干燥(rotary paddle drying)(垂直或水平)，和/.或攪拌干燥，其中聚合物暴露于熱、真空和/或干空氣對流以除去溶劑。
當(dāng)聚合銨鹽用較高沸點的溶劑潤濕時，干燥時間長于當(dāng)它們用較低沸點的溶劑時的干燥時間，并且理想地是進行溶劑置換。例如，當(dāng)使用同樣的干燥方法時，用水潤濕的聚合銨鹽需比用甲醇潤濕的同樣聚合物多花費五倍的干燥時間。溶劑置換可由幾種方式完成，包括但不限于，共沸蒸餾，直接置換，或鹽析。
在共沸蒸餾中，用不需要的溶劑潤濕的聚合銨鹽在所需要的溶劑中加熱并進行共沸蒸餾。只有當(dāng)所考慮的兩種溶劑形成共沸物時才能進行共沸蒸餾。例如，水潤濕的聚合銨鹽可以在甲苯中共沸蒸餾以除去溶劑。
在直接置換中，用不需要的溶劑潤濕的聚合銨鹽在如上所述的、能夠物理分離固體和液體的裝置中被置換。將第二溶劑加入到早已潤濕的聚合物中和在合適的平衡時間之后，除去溶劑。被潤濕聚合物反復(fù)暴露于所需要的溶劑中，最終置換不需要的溶劑。例如，放入過濾裝置中的水潤濕的聚合銨鹽將用醇處理并讓其平衡。過濾之后，母液將同時含有不需要的和所需要的溶劑。在過濾設(shè)備中反復(fù)用醇處理聚合物最終實現(xiàn)醇置換水。
在鹽析中，用水潤濕的聚合銨鹽或其它鹽溶解溶劑用無機鹽(或者以固體形式或者溶于溶液中)處理，使聚合物母體皺縮并伴隨去溶劑化，即溶劑介電常數(shù)的變化，通過添加鹽，引起聚合物皺縮并擠出不需要的溶劑。聚合銨鹽母體的皺縮程度與鹽在溶液中的濃度有關(guān)。用于鹽析的鹽包括，但不限于，金屬鹵化物，金屬碳酸鹽，金屬磷酸鹽，金屬硫酸鹽，和金屬羧酸鹽。例如，當(dāng)水潤濕聚合銨鹽用氯化鈉(或固體或以溶液形式)處理時，聚合物母體皺縮和最初的聚合物結(jié)合水然易被過濾掉。
按照所要生產(chǎn)的聚合銨鹽之不同，選擇合適的干燥方法。所述這些干燥方法中任何一種的審慎使用將導(dǎo)致制得含有所需量的溶劑的聚合銨鹽。
在干燥操作過程中，希望控制最終的凝膠顆粒尺寸。這可在一臺裝有合適的高剪切攪拌器的設(shè)備中進行干燥操作。
放樣(templating)聚合物交聯(lián)膽汁酸螯合劑的體內(nèi)效果可以通過在“螯合劑增強劑”(此處也稱作“樣板(template)”)存在下進行聚合物的凝膠化(在上述聚合步驟中)改進。這里使用的術(shù)語“樣板”、“樣板材料”、“放樣劑”或“螯合劑增強劑”是指對反應(yīng)、反應(yīng)起始原料和產(chǎn)物基本上呈惰性的并提高聚合物產(chǎn)物降低血清膽甾醇性能的化學(xué)物質(zhì)。
本發(fā)明包括本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽聚合物(包括如上所定義的Y和Z基團)的改進制備方法，其中改進之處包括在樣板存在下進行一種用來合成此類交聯(lián)聚合銨鹽聚合物的聚合反應(yīng)和/或凝膠化步驟，從而增強這一交聯(lián)聚合銨鹽聚合物的膽汁酸螯合性能。
這里描述的樣板可用于合成除了如上所述的包括Y和Z基團的本發(fā)明交聯(lián)聚合銨鹽以外的其它膽汁酸螯合聚合物的聚合反應(yīng)和/或凝膠化方法中。因此，本發(fā)明還包括其它膽汁酸螯合聚合物的改進制備方法，其中改進之處包括在樣板存在下進行一種用來合成其它膽汁酸螯合聚合物的聚合反應(yīng)和/或凝膠化步驟，從而增強這類其它膽汁酸螯合聚合物降低血清膽甾醇性能。這一“其它膽汁酸螯合聚合物”包括但不限于，祛膽靈鹽酸鹽和消膽胺。
在樣板存在下制備的本發(fā)明的交聯(lián)聚合物的掃描電子顯微照片一般性地顯示孔狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，孔尺寸在約1-300微米范圍內(nèi)，這取決于交聯(lián)聚合物的整體顆粒尺寸。這與在沒有樣板存在下制備的、基本上顯示無孔結(jié)構(gòu)的同樣的交聯(lián)聚合物材料的外觀相反。
為方便起見，優(yōu)選的是，樣板應(yīng)在交聯(lián)和/或聚合反應(yīng)開始時加進去。通常情況下樣板保留在凝膠中直到取出，如通過溶劑萃取(如上所討論并在下面進一步討論)。
本發(fā)明的未交聯(lián)聚合物的合成方法是在溶液中進行的(一直到凝膠化發(fā)生，在此時所形成的膽汁酸螯合劑變成交聯(lián)和不溶)，故稱起始原料(它進行反應(yīng)形成交聯(lián)聚合物)在溶液中。如果使用樣板，它可以是可溶于，部分可溶于或不溶于反應(yīng)介質(zhì)(用于交聯(lián)聚合物的溶劑和起始原料)中。
樣板應(yīng)可溶于溶劑(不必是在交聯(lián)方法中使用的溶劑)，以便它能夠從本方法生產(chǎn)的交聯(lián)聚合物膽汁酸螯合劑中分離出來。這一分離在本發(fā)明的提純步驟中進行。例如，通過用樣板可溶在其中的溶劑萃取交聯(lián)聚合物，從交聯(lián)聚合物分離出樣板。這能夠是與本方法中使用溶劑相同的溶劑，如果可溶性聚合物用作樣板的話。溶劑萃取還包括溶劑用作萃取劑，它以化學(xué)方式將增強劑轉(zhuǎn)化成可溶性物質(zhì)，而基本上不影響交聯(lián)聚合物的聚合物結(jié)構(gòu)。例如，含水酸如鹽酸溶液，可用來將樣板轉(zhuǎn)化成可溶性物質(zhì)。HCl也可以將聚合銨鹽轉(zhuǎn)化成氯化物。因此，用來從本發(fā)明交聯(lián)聚合物中除去樣板的溶劑可以改變交聯(lián)聚合物的鹽形式。在萃取樣板之后，如果需要，交聯(lián)聚合物膽汁酸螯合劑通過除去萃取溶劑，例如通過過濾和/或在空氣或在真空下蒸發(fā)，以純凈形式被分離出來。
不溶于反應(yīng)介質(zhì)的樣板優(yōu)選具有低于約1000微米(按照能夠通過這一尺寸的網(wǎng)篩來測定)，更優(yōu)選低于約600微米的粒度。這一粒度，例如通過研磨固體物質(zhì)或通過預(yù)先使用高剪切將液體物質(zhì)(包括聚合物)分散在溶劑中來達到。在本方法中不溶性樣板的分散能夠由簡單的方式如攪拌來保持。
樣板不應(yīng)干擾如上所述的形成本發(fā)明的交聯(lián)聚合物的反應(yīng)，并且本身不應(yīng)變成交聯(lián)聚合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分。增強劑也不應(yīng)強烈地與用于該交聯(lián)聚合膽汁酸螯合劑的任何起始原料結(jié)合，或與交聯(lián)聚合物本身結(jié)合。
用作樣板的聚合物包括天然和合成聚合物，包括熱塑性塑料和彈性體。有用的聚合物包括但不限于聚丙烯酸酯，聚甲基丙烯酸酯，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙酸乙酯，各種淀粉，玉米產(chǎn)物如amaizo、直鏈淀粉和玉米蛋白，果膠，烷氧基化纖維素，聚酯和聚醚。
代表性有機聚合物樣板物質(zhì)也包括纖維素聚合物(如乙基纖維素，羥丙基纖維素，甲基纖維素，和羥丙基甲基纖維素)，聚乙二醇，蛋白質(zhì)，核酸，白蛋白，明膠，淀粉，膠原，葡聚糖和改性葡聚糖，聚糖，聚交酯/聚乙交酯，聚烷基氰基丙烯酸烷基酯，聚丙烯酰胺，聚山梨酸酯，聚亞乙基醚和聚亞乙基酯，和聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物。
合適的樣板也包括天然和合成膠(如阿拉伯膠，黃蓍膠或藻酸鈉)，油酸鈉，硬脂酸鈉，硬脂酸鎂，苯甲酸鈉，乙酸鈉，瓊脂，膨潤土，黃原膠，膽甾醇，硬脂基胺，磷脂(如磷脂酰膽堿)，和可溶性聚合物如聚乙烯基吡咯烷酮，吡喃共聚物，聚羥丙基甲基丙烯酰胺-苯酚，聚羥乙基天門冬酰胺-苯酚，或被棕櫚酰殘基取代的聚氧化乙烯-聚賴氨酸。其它可用作樣板的聚合物包括聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物，聚ε-己內(nèi)酯，聚羥基丁酸，聚原酸酯類，聚縮醛類，聚二氫吡喃，聚氰基丙烯酸酯，和水凝膠的兩親性嵌段共聚物。優(yōu)選的聚合物包括聚甲基丙烯酸(2-羥乙基)酯，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙酸乙烯酯，馬鈴薯淀粉，小麥淀粉，豌豆淀粉，gellan gum，welan gum，rhamsam膠，黃原(xanthan)膠，amaizo，直鏈淀粉和玉米蛋白，果膠，羥丙基纖維素，羧甲基纖維素，聚酯二醇和聚醚二醇。非聚合物樣板包括但不限于單-或二-糖，如半乳糖、乳糖、海藻糖和蔗糖；類固醇衍生物，膽甾醇衍生物，如膽甾醇酯和膽甾醇氯化物；膽汁酸衍生物，如膽酸鈉和膽酸甲酯；和無機原料和鹽類，如鹵化鈉和鉀(例如氯化鉀和氯化鈉)，金屬碳酸鹽(優(yōu)選Li，K，Na碳酸鹽)，硼酸鹽和磷酸鹽(它們的鹽類)。也可作為樣板的是金屬羧酸鹽，如乙酸鹽，丙酸鹽，丁酸鹽，水楊酸鹽，葡糖酸鹽，抗壞血酸鹽，檸檬酸鹽，和它們的鹽類?？稍诒景l(fā)明中用作樣板的無機原料包括以單體鹽形式或作為聚合物形式，或作為單體和聚合物形式的混合物的硼酸鹽和磷酸鹽(和它們的鹽)。無機原料可以是晶體和無定形形式，或它們的混合物形式。優(yōu)選的低分子量樣板是海藻糖，氯化鈉，膽酸甲酯和膽甾醇氯化物。
上述樣板的一種或多種結(jié)合可用于合成本發(fā)明的交聯(lián)聚合物的具體聚合反應(yīng)和/或凝膠化步驟。
在樣板存在下用于聚合反應(yīng)/凝膠化的各種反應(yīng)成分(反應(yīng)物起始原料，樣板，溶劑)的比例能夠如上選擇以用于聚合反應(yīng)步驟(與沒有樣板存在下一樣)?；瘜W(xué)計量的、將形成交聯(lián)聚合物的原料(即單體和/或聚合物)對于獲得優(yōu)選的所需交聯(lián)聚合物來說是重要的，與在沒有樣板存在下一樣，如上所述。樣板的有用比例范圍是5-500wt％的樣板(按整個反應(yīng)物質(zhì)量計算)，5-500wt％的溶劑和5-500wt％的可形成交聯(lián)聚合物的原料。
使用樣板制備的具有提高的膽汁酸結(jié)合性能的改進聚合銨鹽可以如上所述通過提純、離子交換、尺寸減少和/或干燥進一步加工。
本發(fā)明的聚合銨鹽可用作膽汁酸螯合劑(它降低血漿膽甾醇水平)，水汽或溶劑吸附劑，導(dǎo)電劑，電荷轉(zhuǎn)移劑，螯合劑和離子交換樹脂。
可用作膽汁酸螯合劑的聚合銨鹽的優(yōu)選組成對于膽汁酸鹽具有高于0.75的，優(yōu)選高于1.0或更高的Bmax/Kd。Bmax是對于每單位本發(fā)明交聯(lián)聚合物來說被結(jié)合的膽汁酸(在此情況下膽酸鹽)的最大量，其中Bmax表示每mg的本發(fā)明的干燥交聯(lián)聚合物結(jié)合的膽汁酸(此情況下是膽汁酸鹽)(單位μmol)。kd(或Kd)是游離膽汁酸(在此情況下膽汁酸鹽)的濃度，在該濃度下膽汁酸以半最大值結(jié)合于本發(fā)明的交聯(lián)聚合物。Kd以單位mM表示。通過使用如下所述的操作程序測量膽汁酸對交聯(lián)聚合物的結(jié)合作用。Bmax值和Kd值，通過使用下面的等式1或2，由最佳擬合回歸擬合法測定[結(jié)合]＝(Bmax×[游離]n)/((Kd)n＋[游離]n)等式1其中[結(jié)合]和[游離]分別是被聚合物結(jié)合的和游離的膽汁酸(在此情況下膽汁酸鹽)的濃度，n是曲線擬合參數(shù)。
所使用的配位體-配位體相互作用模型等溫線是由等式2表示B＝(Bmax/2){1＋((F/Kd)－1)/Sqrt[((F/Kd)－1)2＋4F/W×Kd)]}等式2
其中F是游離膽汁酸濃度；W是配位體-配位體相互作用參數(shù)或合作參數(shù)；和Sqrt是括號內(nèi)數(shù)值的平方根。(參見McGhee和Von Hippel，J.Mol.Biol.，86469-489(1974)；Chemistry，Part III，C.Cantor和P.Schimmel(1980)，PP878-885和PP1242-1251.)。
正如以上所指出的，本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽的用途是用作膽汁酸螯合劑，用于降低哺乳動物體內(nèi)的血漿膽甾醇。冠狀動脈或末梢血管疾病是西方社會的主要問題，而升高的血液膽甾醇水平則是動物和人體內(nèi)形成動脈粥樣硬化的主要危險因素之一。使用降脂試劑的幾個研究已表明，在防止冠心病時降低膽甾醇和低密度脂蛋白(LDL)膽甾醇是有益的。
唯一定量性的主要方式(由該方式機體能夠消除膽甾醇)是借助于膽汁，或者通過排泄未變化形式的甾醇或者在它轉(zhuǎn)化成膽汁酸之后排泄掉。膽甾醇在肝中被分解代謝成膽汁酸，它通過膽管被轉(zhuǎn)移至腸中，促進營養(yǎng)脂質(zhì)的吸收。
分泌到腸內(nèi)的約95％的膽汁酸被重新吸收。少量膽汁酸被損失和隨糞便排出。該損失由新的合成來補償。在動物和人體內(nèi)，用膽汁酸結(jié)合樹脂如消膽胺處理，它在腸內(nèi)結(jié)合膽汁酸和防止它們的重新吸收，增加糞便膽汁酸排泄量。膽汁酸的增大的(隨)糞便(排泄)損失通過刺激在肝內(nèi)從膽甾醇到膽汁酸的合成來平衡，結(jié)果導(dǎo)致血漿膽甾醇水平的下降?，F(xiàn)已證明，膽汁酸螯合劑處理之后的血漿膽甾醇下降歸因于通過增強的LDL受體活性而提高的肝的膽甾醇吸收。
正如下面的實施例所描述的，本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽高效的結(jié)合膽汁酸和當(dāng)施用于動物時能有效降低血漿膽甾醇水平。
也包括在本發(fā)明內(nèi)的是藥理上可接受的鹽和上述交聯(lián)聚合銨鹽的藥物前體。這里使用的“藥物前體”指所公開的化合物的衍生物，它們是通過改性在該化合物中存在的官能基制得的，改性的方式應(yīng)使得改性物或者按常規(guī)操作或者在體內(nèi)被分解成原化合物。藥物前體衍生物的例子包括但不限于乙酸鹽，甲酸鹽和苯甲酸鹽衍生物等。
本發(fā)明的化合物的“藥理上可接受的鹽”能夠通過讓游離堿形式的這些化合物與化學(xué)計量的適宜酸在水中或在有機溶劑中，或者在水和有機溶劑的混合物中進行反應(yīng)來制備。合適鹽的舉例見Remington’sPharmaceutical Sciences，17版，Mack出版公司，Easton，PA，1985，P.1418，它的公開內(nèi)容被引入供參考。
劑量和配方本發(fā)明的膽汁酸螯合聚合物作為膽甾醇降低劑能夠使活性試劑與哺乳動物腸內(nèi)的膽汁酸產(chǎn)生接觸的任何方式給藥。本發(fā)明的膽汁酸螯合聚合物優(yōu)選口服，并作為單獨的治療劑或與其它的治療劑，如與其它的血膽甾醇下降劑和其它用來治療心血管病的藥劑一起施用。它們能夠單獨施用，但一般與根據(jù)基本標準藥物實踐來選擇的藥物載體一起施用。
“結(jié)合施用”或“綜合治療”是指交聯(lián)聚合銨鹽化合物和一種或多種附加的治療劑同時被施用于待治療的哺乳動物。當(dāng)結(jié)合施用時，每一組分可以在同一時間或者按任何順序在不同時間施用。因此，各組分可以單獨施用或時間相隔不久施用，以獲得所需要的治療效果。
“治療有效量”是指在哺乳動物腸道內(nèi)結(jié)合膽汁酸，從而提高膽汁酸的糞便損失和防止膽汁酸的吸收的本發(fā)明交聯(lián)聚合銨鹽(當(dāng)施用于哺乳動物時)的量。當(dāng)單獨施用或與附加的治療劑一起施用時，本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽有效降低血漿膽甾醇水平，以預(yù)防或改善高膽甾醇血疾病癥狀或疾病的發(fā)展。
當(dāng)然，施用劑量將根據(jù)已知的因素來變化，如具體藥劑的藥效學(xué)特性和它的施用模式和途徑；接受者的年齡、健康狀況和體重；癥狀的性質(zhì)和程度；同時治療的類型；治療的頻繁程度；和所需要的效果。借助于一般性的指南，活性成分的日劑量例如可以是每天施用四次的約0.1-10g的口服劑量。本發(fā)明的膽汁酸螯合聚合物在被施用一個月或一個月以上的連續(xù)治療時間，以足以獲得所需的降低血清膽甾醇水平的效果。
劑量形式(適合于施用的組合物)含有約0.1g-約10g的活性成分/每單位。在這些藥物組合物中，活性成分的存在量一般是約20-95wt％，按組合物的總重計。
活性成分能夠以固體劑量形式口服，如膠囊劑、片劑和粉末劑形式，或以液體劑量形式口服，如酏劑，糖漿或懸浮劑。本發(fā)明聚合物的劑量形式的配方必須考慮此特殊聚合物在水或其它溶劑中的溶脹。
本發(fā)明的聚合物也能以各種可食用的固體或液體形式引入食物中，如棒、面包、糕點、餅干、谷類食品、甜食等。
本發(fā)明的聚合物能以片劑或以含有固體膽汁酸螯合聚合物的膠囊劑施用，或者以含有合適的懸浮劑的固體聚合物的含水或半含水懸浮劑施用。膠囊劑含有活性成分和粉末狀載體如乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸等。類似的稀釋劑能用于制造壓縮片劑。片劑和膠囊劑能夠制造成緩釋產(chǎn)品，得以在幾個小時內(nèi)連續(xù)釋放藥劑。壓縮片劑能夠涂覆糖或涂膜掩蓋任何難聞的氣味和保護片劑不與空氣接觸，或者腸溶涂覆以便在胃腸內(nèi)選擇性崩解。
口服的液體劑量形式能夠含有色料和香料，以使之更能為病人接受。
一般，水，合適的油，鹽水，含水葡萄糖，和相關(guān)的糖溶液以及二醇類如丙二醇或聚乙二醇都是合適的載體?？寡趸瘎┤鐏喠蛩釟溻c，亞硫酸鈉，或抗壞血酸，單獨或結(jié)合使用，是合適的穩(wěn)定劑。也可使用的是檸檬酸及其鹽和EDTA鈉鹽。還有，溶液可含有保存劑，如對羥苯甲酯甲酸和對羥苯甲酸丙酯，和氯丁醇。
本發(fā)明的藥物組合物能夠由配藥學(xué)領(lǐng)域中那些熟練人員已知的技術(shù)制備。合適的藥物載體和描述在Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack公司出版的這一領(lǐng)域的標準參考測試書中。
用于施用本發(fā)明聚合物的有用藥物劑量形式在下面進行描述。
膠囊劑通過每片用0.5g粉末狀活性成分，150mg乳糖，50mg纖維素和6mg硬脂酸鎂填充標準兩片式硬膠囊，制備大量的單位膠囊劑。
軟膠囊劑制備活性成分在食用油如大豆油、棉籽油或橄欖油中的混合物，并借助于正排量式泵注入膠囊中，形成含有0.5g活性成分的軟膠囊劑。膠囊被洗滌和干燥。
片劑由普通的操作程序制備大量的片劑，以使得劑量單位是0.5g活性成分，0.2mg膠體二氧化硅，0.5g硬脂酸鎂，275mg微晶纖維素，11mg淀粉和98.8mg乳糖?？刹捎煤线m的涂層，提高可口性或延遲吸收。
懸浮劑制備口服的含水懸浮劑，要求每一劑量含有500mg極細散的凝膠化活性成分，200mg羧甲基纖維素鈉，5mg苯甲酸鈉，1.0g山梨糖醇溶液，U.S.P，和0.025ml香蘭素。
本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物能與一種或多種附加的或第二治療劑結(jié)合施用，后者選自但不限于?；?輔酶A的抑制劑膽甾醇O-?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)；3-羥基-3-甲基戊二?；?輔酶A(HMG-CoA)還原酶的抑制劑，如lovastatin；脂調(diào)節(jié)劑，如二甲苯氧庚酸、祛脂乙酯或丙丁酚。本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物和此類附加的治療劑能夠單獨施用或作為單個口服劑量單位的物理結(jié)合物形式施用。本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物能夠與第二治療劑一起以單個劑量單位配制(即，一起結(jié)合在一種膠囊，一種片劑，一種粉末劑或一種液體劑等中)。當(dāng)本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物和第二治療劑沒有一起配制成單個劑量單位時，交聯(lián)聚合銨鹽化合物和第二治療劑基本上在同一時間施用，或者按任何順序施用。
當(dāng)單獨施用或與第二話療劑結(jié)合施用時，交聯(lián)聚合銨鹽化合物的劑量可根據(jù)各種因素變化，如特殊藥劑的藥效學(xué)特性和它的施用模式，接受者的年齡、健康狀況和體重，癥狀的性質(zhì)和程度，同時治療的類型，治療的頻繁程度，和所需的效果，如上所述。當(dāng)與第二治療劑結(jié)合施用時，在本公開的啟發(fā)下交聯(lián)聚合銨鹽化合物的合適劑量很容易由本技術(shù)中的藥劑師確定。當(dāng)一種或多種第二治療劑與交聯(lián)聚合銨鹽化合物一起施用時，一般來說，根據(jù)當(dāng)結(jié)合施用時治療劑的附加作用或協(xié)同效果在典型的每日劑量和典型的劑量形式中每一組分的量可以相對于當(dāng)該藥劑單獨施用時的常規(guī)劑量有所減少。
發(fā)明還包括用于治療高膽甾醇血的藥盒，它包括一個或多個含有藥物劑量單位的容器，該劑量單位含有藥物組合物，該組合物包括治療有效量的本發(fā)明的交聯(lián)聚合銨鹽化合物。在該藥包中還包括使用說明，它作為插入紙件或作為標簽，指出了施用劑量單位的量及施用劑量單位的方法，等等。
應(yīng)該理解的是在本公開物中，在實施本發(fā)明時所規(guī)定的物質(zhì)和條件是重要的，但不排除未規(guī)定的物質(zhì)或條件，只要它們不損害本發(fā)明實現(xiàn)的益處。
在下面的實施例中，MeOH是甲醇，EtOH是乙醇，DMAC是N，N-二甲基乙酰胺，DMF是N，N-二甲基甲酰胺，DBD是1，10-二溴癸烷，HMD是1，6-六亞甲基二胺。
聚合物溶脹系數(shù)的測定向一預(yù)干燥的、已稱過重量的150ml粗多孔過濾漏斗添加約1g聚合物。漏斗頸部用橡膠塞子密封。將漏斗放在過濾燒瓶上，將約25℃的約100ml的蒸餾水加入到漏斗中。如果需要的話攪拌內(nèi)容物，完全分散水和聚合物。內(nèi)容物然后靜置15分鐘。從漏斗的頸部取下橡膠塞子，對漏斗抽吸5分鐘。漏斗的頸部和下側(cè)用乙醇漂洗，除去任何保留的水滴，和然后繼續(xù)抽吸5分鐘。用紙巾從漏斗上擦掉任何剩余的水滴。然后對漏斗和內(nèi)容物稱重，測定由聚合物保留的水的重量。
溶脹系數(shù)＝(濕聚合物＋漏斗的總重)－(干燥聚合物＋漏斗的總重)/干燥聚合物的重量＝濕重－干重/干重＝克保留水/克聚合物實施例1A下面的實施例說明了用來制備本發(fā)明聚合物的一個小規(guī)模的方法。向一個裝有加熱套、回流冷凝器、頂置攪拌器和氮氣導(dǎo)入管的1升三頸燒瓶中加入約130mlDMF，130mlMeOH，46.4g(0.40摩爾)六亞甲基二胺，和120.0g(0.40摩爾)1，10-二溴癸烷。所得到的均勻溶液迅速攪拌并加熱回流。在回流0.5-3小時之后，整個燒瓶的內(nèi)容物變成溶脹的凝膠化物質(zhì)。停止攪拌，燒瓶另外再溫和地加熱18-21小時。在加熱之后，讓凝膠冷卻至室溫，并從反應(yīng)器中舀出。然后將凝膠與同樣體積的四氫呋喃一起裝入Waring摻合器中，并在Waring摻合器研磨。這一操作程序重復(fù)至少三次，在每一粉碎之間過濾。所得到的已洗滌聚合物然后放入設(shè)定溫度在50-120℃的真空烘箱中烘烤1-3天，進行干燥。干重為160g(96％)。為了確保純度，聚合物然后用甲醇進行索氏提取3.5天，并用水萃取另外3.5天。在這一方法中，大約30％的產(chǎn)物的重量被萃取到溶劑中。所得到的聚合物在真空下干燥，獲得顆粒乳油狀帶色產(chǎn)物。聚合物具有弱的“堅果味”氣味。
溴反離子或任何其它反離子能夠通過將溶脹的濕(H2O)聚合物暴露于10％氫氧化銨溶液中較容易地被交換。中和的聚合物收縮(去溶脹)并過濾，然后用水洗滌，直到所得到的濾液對pH試紙表現(xiàn)中性。聚合物然后用合適的酸再酸化，得到所需要的反離子(例如，HCl得到Cl離子，HOAc得到乙酸根離子；等)。經(jīng)過再酸化，聚合物再次溶脹。溶脹的聚合物然后用水洗滌直到濾液對pH試紙表現(xiàn)中性，并在真空下干燥獲得具有不同反離子的顆粒狀聚合物。
按與實施例1A的方式進行實施例2-38，見表1?；亓骱图訜釙r間與實施例1A中一樣。
實施例1B在高剪切半敞開反應(yīng)器中小規(guī)模制備放樣的聚合銨鹽配制180g甲醇和212g的N，N-二甲基乙酰胺(DMAC)的溶液。將149.5g二溴癸烷(DBD)溶于85g溶劑混合物。十毫升的溶劑混合物專供進料漂洗之用。
剩下的溶劑混合物加入到1夸脫行星式拌和機，隨后加入52.5g羥丙基纖維素(HPC)(85,000Mw)。攪拌器的速度設(shè)定在90rpm。物料用外循環(huán)加熱器在60℃下加熱1小時，溶解HPC。溶液被冷卻至40℃，并添加54g六亞甲基二胺和26.8g碳酸鈉。
DBD在溶劑混合物中的溶液通過使用活塞泵在恒定的速度下經(jīng)30分鐘時間加進去，保持溫度在40℃下，隨后節(jié)約下來的十毫升溶劑混合物用來漂洗。
反應(yīng)混合物的溫度由每15分鐘10℃來提高，直到溫度是80℃。
溶液的粘度提高，3小時后攪拌速度降低至7rpm。聚合反應(yīng)在80℃下繼續(xù)進行另外16小時。
聚合物凝膠(碎屑狀固體)被冷卻至25℃并加入2000ml水和65.8g的50％氫氧化鈉溶液，得到最終的pH12.2。在攪拌1小時后，將淤漿分成三等份。將另外的500ml水加入到淤漿的三分之一，并使用真空過濾。濾餅用400ml水洗滌。
濾餅在1000ml水中制成淤漿，添加足夠的35％HCl，將pH調(diào)節(jié)至2.5以下。淤漿被攪拌1小時，過濾。提純周期重復(fù)四次(調(diào)節(jié)至pH＞12，過濾，洗滌，調(diào)節(jié)至pH＜2.5，過濾)。最后一次酸化后pH＜1.5。濾餅用900ml水洗滌3次，最終的pH為4.8。
濕的濾餅在小的玻璃旋轉(zhuǎn)干燥器中干燥，獲得118.5g或74％理論收率，按所投入的單體的重量計。干燥聚合物的溶脹系數(shù)是16。
表1聚胺鹽的制備
表1(續(xù))
表1(續(xù))
表1(續(xù))
a提純的聚合物b粗聚合物c膠狀固體d二聚體二胺是 @反離子從Br變成Cl實施例39-50取代聚合物的制備按與下面的敘述類似的方式制備所有的取代聚合物。首先合成聚胺，然后用于所有后面的反應(yīng)。按照實施例1A或1B合成聚合物，在3升水中攪拌直到它完全溶脹(約1小時)。在此時，向溶脹聚合物淤漿中添加400ml的濃氫氧化銨，混合物至少攪拌15分鐘。然后過濾產(chǎn)物，用水洗滌直到濾液為中性。在60℃的真空烘箱中干燥之后，回收54.6g(88.7％)的聚胺。
實施例39向100ml三頸圓底燒瓶中加入20mlDMF，20ml蒸餾水，3.0g以上所制得的聚胺和2.32gl-溴辛烷?；旌衔镏辽倩亓?8小時，在此之后，將燒瓶內(nèi)的內(nèi)容物傾入100mlTHF并攪拌30分鐘。在此時，產(chǎn)物加以干燥和稱重，測定聚合物的取代程度。產(chǎn)物然后被加入到100ml的10％HBr/水溶液，攪拌至少30分鐘，過濾，和用水洗滌一直到濾液對PH試紙表現(xiàn)中性。所得到的聚合物在真空烘箱中干燥。取代聚合物的最終收率是5.65g(88.％)。
使用下面的成分和量按相同的方式制備以下聚合物。見表2。
表2實施 成分 成分重量 中間體 聚合物最終例 (g) 重量(g) 重量(g)402-(2-溴乙基)-1，3-二噁烷 3.81--3.1聚胺 5.0412-(2-溴乙基)-1，3-二氧戊環(huán)3.53--8.24聚胺 5.042BrCH2CH2OCH2CH2OCH2CH21.62 3.04OCH31.832.79聚胺431-溴十六烷2.38 3.9聚胺 2.0 3.69442-溴十三烷1.98 3.65聚胺 2.0 3.3452-(溴乙基)四氫-2H-吡喃1.40 2.88聚胺 2.0 2.4461-溴十一烷1.84 3.73聚胺 2.0 3.37472-溴二十烷2.82 4.08聚胺 2.0 3.82481-溴十八烷2.60 4.25g聚胺 2.0 3.91g492-溴乙基甲基酯1.08 2.80聚胺 2.0 2.41502-溴乙基乙基醚1.20 2.94聚胺 2.0 2.46
實施例51A較大量聚合物的制備向一個裝有冰浴、頂置攪拌器、回流冷凝器、溫度計和氮氣導(dǎo)入管的5升三頸圓底燒瓶中加入1升DMF，1升甲醇，386.7g(3.33mol)六亞甲基二胺，和1000.0g(3.33mol)1，10-二溴癸烷。所得到的均勻溶液在沒有加熱的情況下劇烈攪拌。在10分鐘內(nèi)，溶液達到82℃的溫度，并開始回流。在此時，將冰加到冰浴中保持恒定的回流速度。在20分鐘后散去最初的反應(yīng)生熱和回流停止。在此時，取下冰浴，將加熱套放在燒瓶上。加熱燒瓶保持溶劑恒定的回流。當(dāng)反應(yīng)溶液被加熱和劇烈攪拌時，反應(yīng)液的粘度開始上升。在開始加熱反應(yīng)液之后30分鐘內(nèi)，混合物達到的粘度已無法進行攪拌。在此時，停止攪拌。所得到的溶脹的凝膠化物質(zhì)然后被溫和地在30-50℃下另外加熱18-21小時。凝膠冷卻至室溫，并從反應(yīng)器中舀出。凝膠然后被裝入拌和機與同樣體積的10％氫氧化銨水溶液混合，并在拌和機中研磨。過濾所得到的聚合物，然后在10％氫氧化銨水溶液中與1小時攪成淤漿。然后過濾聚合物，用蒸餾水洗滌一直到濾液呈中性。聚合物然后用10升HCl水溶液(4升濃HCl＋6升水)處理。過濾聚合物，用蒸餾水洗滌一直到濾液呈中性。聚合物然后用甲醇洗滌并在甲醇中制成淤漿。制成淤漿的聚合物然后被裝入5升索氏提取套管中，并用甲醇萃取3-4天和用水另外萃取3-4天。從萃取套管中取出聚合物，在真空烘箱中與60℃下干燥2-3天，獲得最終的含有氯反離子的聚銨產(chǎn)物。理論收率是1089g。萃取前的收率是823g。萃取后的收率是800g。聚合物在拌和機或咖啡磨機中研磨，得到30-500微米的粒度。高速錘磨機研磨，通過100目網(wǎng)篩，得到在30-150微米范圍內(nèi)的粒度?？諝鈬娚涫轿⒛?，得到在30-150微米范圍內(nèi)的粒度。在液氮存在下，在超微磨碎機中研磨得到低至1微米的粒度。在大多數(shù)情況下，物料在使用前用咖啡磨機研磨。
實施例51B聚合銨鹽的中間工廠規(guī)模的制備聚合反應(yīng)向一臺由變速驅(qū)動機的帶夾套的水平混合機/反應(yīng)器中投入6.9kg 1，6-己二胺，3.1kg碳酸鈉，4.1kg DMAC和3.4kg的甲醇。在單獨的玻璃襯里的、帶攪拌的容器中投入19.6kg的DBD，12.2kg的DMAC和10.3kg甲醇。混合物然后被加熱至30℃并保持1.5小時，溶解DBD。DBD溶液從玻璃襯里的容器經(jīng)30分鐘加入到水平混合機/反應(yīng)器中。在加料過程中，水平混合機/反應(yīng)器的犁(plow)被開動，速度設(shè)定在155rpm。水平混合機/反應(yīng)器中的溫度在轉(zhuǎn)移過程中保持在35±5℃。轉(zhuǎn)移管用另外的0.4kg的DMAC和0.4kg的甲醇沖洗。在轉(zhuǎn)移后，混合機/反應(yīng)器保持在35±5℃達15分鐘。然后，夾套出口溫度經(jīng)4小時升高至80℃。當(dāng)出口溫度達到80℃時將犁速降低至40rpm。水平混合機/反應(yīng)器夾套出口在80℃下保持另外16小時。在16小時保持之后，水平混合機/反應(yīng)器的內(nèi)容物被冷卻至31℃，并加入到聚乙烯襯里的纖維桶中。從水平混合機/反應(yīng)器總共排除50.5kg的物質(zhì)。
初始的尺寸減少來自水平混合機/反應(yīng)器的物質(zhì)被加入到196升USP水中，并在串聯(lián)的連續(xù)流過式磨機中連續(xù)進行濕磨。研磨循環(huán)(loop)在50加侖的納爾根(Nalgene)保持罐中開始，進入泵，然后到達串聯(lián)的連續(xù)流過式磨機，然后通過熱交換器并返回納爾根罐。中等、細小和超細小的銑頭在串聯(lián)的連續(xù)流過式磨機中用來將98％的顆粒(的粒度)降低至850微米以下。研磨耗時1小時以下。
提純和離子交換濕磨的物質(zhì)被轉(zhuǎn)移到玻璃襯里的攪拌罐中。向含有淤漿的罐添加27.6kg的27％氫氧化銨?；旌衔锉患訜嶂?0℃。在它達到50℃時，它在攪拌過濾器上過濾。過濾介質(zhì)由三片不銹鋼網(wǎng)篩組成。38微米的網(wǎng)篩是主要的過濾層。兩個其它的網(wǎng)篩(150微米或更大)提供支持作用。過濾器中的濕濾餅連續(xù)用36升的USP水，44.5kg的USP水和5.4kg的27％氫氧化銨的混合物，36升USP水，44.5kg的USP水和5.4kg的27％氫氧化銨的混合物，和36升USP水重新制成淤漿并過濾。所有的重新制成淤漿和過濾操作都是在50℃下進行的。
來自初始驟冷的濕濾餅被分成四份，每一份按如下所述單獨進行處理。在攪拌過濾器中，每一份連續(xù)用酸、堿、酸、堿和酸處理。在每一次酸處理中，濕濾餅在攪拌過濾器中在84升USP水中重新制成淤漿。添加足夠的32％HCl水溶液，將PH降低至2.5以下。對于堿處理，濕濾餅在攪拌過濾器中在45升USP水中被重新制成淤漿。添加足夠的27％氫氧化銨水溶液，將PH提高至9.5以上。在每一次堿處理之后，濕濾餅用36升USP水洗滌。對于最終的酸處理，與典型的2.5不同的是PH被降低至1.5。來自最終的酸處理的濕濾餅被洗滌至PH高于3.5。從提純步驟回收到總共148.8kg的濕濾餅。
最終的尺寸減少在初始研磨中使用的同樣的研磨裝置用于最終的研磨，不同的是改變串聯(lián)的連續(xù)流過式磨機的銑頭。安裝一個細小的和兩個超細小的銑頭。合并從提純操作回收的四批濕濾餅，并分兩批研磨。每一批在研磨之前在USP水中制成淤漿。對于每kg的濕濾餅，添加0.5kg的USP水。淤漿被研磨大約4小時，使粒度達到60-70微米(50百分位數(shù))。
干燥兩批濕研磨過的淤漿在具有1.1立方英尺的工作容量的旋轉(zhuǎn)真空干燥器中進行干燥。熱水(80-90℃)被供入干燥器夾套。對干燥室施加真空(22-26英寸的Hg)。干燥約花費5天的時間才結(jié)束?；厥盏?1.3kg的干燥聚合物產(chǎn)物。產(chǎn)物聚合物的溶脹度是13.0-13.6。
實施例52在實施例1A生產(chǎn)的聚合物的溶脹(Br-離子)向0.5g在實施例1A中制備的聚銨溴化物添加13ml的蒸餾水。在幾分鐘內(nèi)聚合物溶脹，完全吸收那一體積的水。當(dāng)容器倒置時，沒有液體傾出。這一操作表明這一聚合物的至少26∶1(2600％)的溶脹系數(shù)。
實施例53實施例1A生產(chǎn)的聚合物的支化/交聯(lián)程度的測定(Br-離子)在實施例1A中制備的聚銨氯化物(0.5g)裝入10mmNMR管中。向它添加重水(D2O，1.0g)以溶脹聚合物。然后添加二噁烷(1.8g)將聚合物制成淤漿，使用Varian VXR-400 S譜儀和下面的設(shè)定參數(shù)在樣品上獲取13CNMR譜100.577 MHz sfrq，80度翻轉(zhuǎn)角(flip angle)，2.300秒探測(aquisition)時間，18.622秒延遲，31948.9Hz掃描寬度，2800瞬變(transient)，20℃探針溫度，5Hz譜線變寬，Waltz去耦，和在延遲過程中耦合器關(guān)閘。對與聚合物結(jié)構(gòu)中不同氮類原子緊靠的碳原子觀察到以下的信號。40.10ppm(-C-NH3+)(10.24積分單位iu)；48.27ppm(-C-NH2+-C-)(52.22iu)；53.48ppm (35.07iu)；58.75ppm (2.57iu)。
相對氮含量計算如下伯N(40.10ppm)＝10.24/1＝10.24 21.0％仲N(48.27ppm)＝52.22/2＝26.11 53.6％叔N(53.48ppm)＝35.07/3＝11.69 24.0％季N(58.75ppm)＝2.57/4＝0.64 1.3％。
因此，這一聚合物含有53.6％仲(直鏈)胺，24.0％的作為支鏈點或交聯(lián)點的叔胺，21.0％作為端基的伯胺，和1.3％的季胺作為交聯(lián)或支鏈點。
上述方法的重現(xiàn)性是給定值的約±5％，即53.6±2.5％，24.0±1.2％和21.0±1.0％。上述方法可用來測定本發(fā)明的聚合物的氮含量。
膽汁酸對膽汁酸螯合劑的體外結(jié)合通過使用下面所述的操作程序，測量膽汁酸與本發(fā)明的膽汁酸螯合劑交聯(lián)聚合銨鹽的結(jié)合作用。
下面的方法用來測量各種膽汁酸結(jié)合本發(fā)明的膽汁酸螯合劑的平衡結(jié)合參數(shù)。使用等滲離子條件在37℃下測量膽汁酸與膽汁酸螯合劑的平衡結(jié)合，以便大致接近于生理條件。以0.454，0.555，0.713，1.000，1.667，5.000，6.667，10.0，20.0和30.0mM(45nCi14C/ml)濃度，制備溶于PH為7的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中的碳-14(14C)標記膽汁酸。選擇這一系列的相應(yīng)濃度水平，獲得經(jīng)驗數(shù)據(jù)沿半對數(shù)飽和結(jié)合曲線的較均勻的分布。
膽汁酸購自Sigma(St.Louis，MO)，具有比活性約50mCi/mmol的14C標記膽汁酸鹽是從E.I.du Pont de Nemours and Company，New EnglandNuclear(Billerica，MA)購得。
2ml所制得的一定濃度的膽汁酸的溶液被加入到選擇量(例如5.0mg)的待測試的膽汁酸螯合劑中，在10,000mW截斷超濾杯(NihonMillipore，Yonezawa，Japan)內(nèi)并在37℃下(16小時)熟化過夜。
用于參照試驗的消膽胺是從Sigma，St.Louis，MO.獲得的。
為了測定該非特異性結(jié)合作用，10個膽汁酸鹽的貯液被加入到空的超濾杯中并與全部的結(jié)合樣品一起熟化。
為了分離鍵接的和游離的膽汁酸，超濾杯在Du Pont RT6000離心機在3,500rpm下于37℃進行離心處理，讓游離膽汁酸的溶液通過并進入外管。200μL的分離的結(jié)合管和對應(yīng)組的全部膽汁酸的貯液在β閃爍計數(shù)器(Beckman，Palo Alto，CA)中計數(shù)2分鐘，在7mL的Formula 989閃爍液(scintillation cocktail)(E.I.du Pont de Nemours and Company，NewEngland Nuclear，Billerica，MA)中檢測14C DPMs。
從計數(shù)的總附加的14C DPMs和導(dǎo)出的總結(jié)合和非-特異性結(jié)合DPMs測定各自的特異性結(jié)合DPMs。特異性結(jié)合DPMs被轉(zhuǎn)化成在每一劑量水平下的膽汁酸鹽的特異性結(jié)合μmol數(shù)。
特異性結(jié)合數(shù)據(jù)被描繪在飽和結(jié)合曲線(膽汁酸鹽的特異性結(jié)合μmol/mg的螯合劑--游離膽汁酸鹽的μmol/mL溶液的log值)，并使用以下等式1的關(guān)系測定最佳擬合回歸曲線[結(jié)合]＝(Bmax×[游離]n)/((Kd)n＋[游離]n)等式1其中Bmax是結(jié)合于螯合劑的膽汁酸鹽的最大量，kd是游離膽汁酸鹽的濃度，在該濃度下有半最大值結(jié)合(即平衡解離常數(shù))和n是曲線擬合參數(shù)。所使用的另一模型是配位體-配位體相互作用模型等溫線，它由等式2表示B＝(Bmax/2){1＋((F/Kd)-1)/Sqrt[((F/Kd)－1)2＋4F/W×Kd)]}等式2
其中F是游離膽汁酸濃度；W是配位體-配位體相互作用參數(shù)或合作參數(shù)；和Sqrt是括號內(nèi)數(shù)值的平方根。(參見McGhee和Von Hippel，J.Mol.Biol.，86469-489(1974)；Chemistry，Part III，C.Cantor和P.Schimmel(1980)，PP878-885和PP1242-1251.)。
各種膽汁酸與本發(fā)明的代表性的膽汁酸螯合聚合物的結(jié)合數(shù)據(jù)在表3和4中給出。在表3和4中，Bmax是以μmol為單位表示的每mg的膽汁酸螯合劑所結(jié)合的膽汁酸鹽，kd的單位是mM。
Bmax/kd值是膽汁酸螯合劑對膽汁酸的結(jié)合效率的量度，并反映了了膽汁酸的膽汁酸螯合劑的結(jié)合位置的總數(shù)或其對膽汁酸的結(jié)合能力和結(jié)合親和性。這一數(shù)值越高，預(yù)計膽汁酸螯合劑更有效。
如表3和表4所示，本發(fā)明的膽汁酸螯合聚合物在結(jié)合膽汁酸方面基本上更有效，與消膽胺相比，同時提高了親和性和提高了結(jié)合能力。
在表4中使用等式1繪出消膽胺的結(jié)果，其它實施例使用等式2來繪圖。
使用以上等式分析同樣的數(shù)據(jù)時所獲得的Bmax/kd結(jié)果與使用等式1分析時的結(jié)果相同。
表3膽汁酸與膽汁酸螯合劑的體外平衡結(jié)合作用實施例編膽汁酸BmaxKdBmax/Kd號對應(yīng)的聚合物消膽胺 膽汁酸鹽 3.387.350.46牛磺膽酸鹽 2.842.151.32甘氨膽酸鹽 2.937.380.40鵝脫氧膽酸鹽1A 膽汁酸鹽 4.372.251.94?；悄懰猁} 4.621.782.60甘氨膽酸鹽 3.891.842.11鵝脫氧膽酸鹽3.250.163 19.937 膽汁酸鹽 5.131.473.49
?；悄懰猁}4.821.273.80甘氨膽酸鹽5.111.842.78鵝脫氧膽酸鹽 4.490.201 22.38 膽汁酸鹽 4.701.164.05牛磺膽酸鹽4.181.383.03甘氨膽酸鹽3.831.602.39鵝脫氧膽酸鹽 4.770.380 12.69 膽汁酸鹽 4.162.811.48?；悄懰猁}4.063.401.19甘氨膽酸鹽4.223.761.12鵝脫氧膽酸鹽 3.810.193 19.711 膽汁酸鹽 3.851.802.14?；悄懰猁}3.233.450.94甘氨膽酸鹽3.393.940.86鵝脫氧膽酸鹽 3.200.125 25.640 膽汁酸鹽 3.421.921.78?；悄懰猁}2.971.491.99甘氨膽酸鹽2.962.191.35鵝脫氧膽酸鹽 3.190.170 18.841 膽汁酸鹽 3.111.881.65?；悄懰猁}2.802.801.00甘氨膽酸鹽2.932.201.33鵝脫氧膽酸鹽 3.170.227 14.048 膽汁酸鹽 4.652.252.07牛磺膽酸鹽3.831.921.99甘氨膽酸鹽3.652.381.53鵝脫氧膽酸鹽 4.170.16525.3
表4膽汁酸鹽與膽汁酸螯合劑的體外結(jié)合作用實施例的聚合物 溶脹系數(shù) BmaxKdBmax/Kd消膽胺*3.38 7.350.4624**14.4 4.33 1.433.0325 4.51 1.333.3926 21.6 4.45 1.193.7427 2.61.70 1.451.1728 4.94.98 1.114.4929 1.32.33 1.132.0630 14.6 5.20 1.294.0332 12.1 5.34 1.025.2433 0.12.68 0.614.3934 11.9 4.05 0.964.2235 21.5 5.88 1.254.7038 135.6 5.26 0.905.8445 1.31 1.021.2846 2.96 2.211.3447 3.78 1.532.4750 3.70 1.562.37*結(jié)合數(shù)據(jù)根據(jù)式1繪成曲線**根據(jù)等式2的配位體-配位體相互作用等溫線圖將實施例24，24，25，26，27，28，29，30，32，33，34，35，38，45，46，47和50的結(jié)合數(shù)據(jù)繪成曲線。
膽汁酸螯合劑的體內(nèi)降低血漿膽甾醇的活性在如下所描述的動物模型中評價本發(fā)明的膽汁酸螯合聚合物的體內(nèi)降低膽甾醇的活性。
施用了膽汁酸螯合劑的倉鼠血漿膽甾醇降低作用在下表5中給出本發(fā)明的代表性膽汁酸螯合聚合物的血漿膽甾醇降低效果。雄倉鼠用所選擇的待測試的膽汁酸螯合劑喂養(yǎng)2星期，并測定血漿中總的膽甾醇濃度。在Dimension臨床分析儀上使用膽甾醇氧化酶分析法測量總血清膽甾醇水平。螯合劑通過與動物食物一起混合以口服的方式施用。倉鼠在2星期內(nèi)每天被喂11g的含有不同重量的螯合劑的Agway rodent chow。對于0.25或0.3wt％螯合劑(例如0.3wt％時0.033g螯合劑/每11g食物)給出了結(jié)果。聚合物被研磨并與食物混合。
在每一項研究中，對7只動物用螯合劑按劑量施用。膽甾醇水平的百分提高是通過從治療前(0星期)的動物體內(nèi)的平均總膽甾醇水平減去螯合劑治療2星期時的平均膽甾醇水平來計算的。
在表5中，其中進行單組7只動物研究，在所測量的膽甾醇降低作用中的不確定性對于特定的研究(即對于7只動物)被表示為SEM(或標準偏差(SD))。在表5中，給出了在星期0和星期2時的研究的SEM(或SD)，和SEM(或SD)也表達為總膽甾醇的平均值的百分數(shù)。在表5中還給出的是在星期0和星期2時的總膽甾醇水平的百分數(shù)下降和平均％SEM(或SD)百分數(shù)。
表5a膽汁酸螯合劑在倉鼠體內(nèi)降低血漿膽甾醇的作用總膽甾醇(mg/dl)(±SEM或SD)實施例 劑量星期0誤差 星期2 誤差 總膽甾醇的 平均誤的聚合 (wt％) ％ ％ 下降 差物％ ％消膽胺 0.3171±11*±6.4150±13*±8.712±7.6*1A 0.25 178±4 ±2.2129±3±2.328±2.31A 0.3167±16*±9.6127±8*±6.324±8.0*37 0.25 178±7 ±3.9122±2±1.631±2.8a總膽甾醇水平是7只動物的平均值。在±之后的值是平均值(SEM)的標準偏差，除了標有星號(*)的是標準偏差(SD)以外。
膽汁酸螯合劑治療過的兔體內(nèi)膽甾醇降低在雄性新西蘭兔體內(nèi)試驗實施例25的聚合物的膽甾醇降低效果。如下表6中所示，在用這一聚合物以250mg/kg的總體重/天的劑量治療兔1星期和2星期之后，在動物體內(nèi)的血漿總膽甾醇水平顯著降低。
表6給出了5只動物的總血漿膽甾醇水平的下降百分數(shù)(在±之后給出SEM)。膽汁酸螯合劑通過與食物混合來施用并喂給動物。在Dimension臨床分析儀上使用膽甾醇氧化酶分析法測量總血清膽甾醇。
表6在膽汁酸螯合劑治療1星期和2星期之后的兔血漿膽甾醇的下降總膽甾醇的下降百分數(shù)(±SEM)1星期2星期無膽汁酸螯合劑 7±1017±8消膽胺 14±11 17±13實施例25的聚合物 43±11 42±10在本公開物中應(yīng)該明白在實施本發(fā)明時所規(guī)定的物質(zhì)和條件是重要的，但未規(guī)定的物質(zhì)和條件沒有從本發(fā)明中排除，只要它們沒有影響所本發(fā)明實現(xiàn)的好處。
實施例54-73由與實施例1A中使用的相同的操作程序制備螯合劑聚合物。起始原料和合成條件在表7中給出。
實施例54-73的螯合劑的結(jié)合能力通過使用“螯合劑甘氨膽酸鹽結(jié)合作用分析法(SequestrantGlycocholate Binding Assay)”(它的操作程序在下面給出)測試這些螯合劑的效果。在表8中，對于實施例54-73的螯合劑給出了這一分析方法的結(jié)果。“結(jié)合甘氨膽酸鹽百分數(shù)”越高，螯合劑的效果越好。為了對比，也給出了消膽胺和根據(jù)實施例25的操作程序制備的螯合劑的結(jié)果。
螯合劑甘氨膽酸鹽結(jié)合作用分析A.初始結(jié)合作用分析每一種聚合物直接稱重，放入MilliporeR超濾杯(10,000NML低結(jié)合纖維素)。加入到每一杯中的重量是5mg./杯左右，記錄實際重量，每一種聚合物稱重后裝入3只杯子中。用pH7下的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)配制10mM的甘氨膽酸溶液，并保持在37℃。向每一只杯子中添加2ml的上述溶液。這一操作在不超過15只杯子的組中進行。一旦膽汁酸被加入到杯子中，杯子(內(nèi)容物)用渦旋混合機混勻，并放在離心機中。杯子在SorvallRRT6000離心機中在3500rpm(狀態(tài)設(shè)置#10)下于37℃下旋轉(zhuǎn)10分鐘。
B. 18小時分析每一種聚合物直接稱重，放入Millipore超濾杯(10,000NML低結(jié)合纖維素)。加入到每一杯中的重量是5mg./杯左右，記錄實際重量，每一種聚合物稱重后裝入3只杯子中。用pH7下的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)配制10mM的甘氨膽酸GC溶液。向每一只杯子中添加2ml的上述溶液。這些杯子在37℃的軌道干空氣振動器中培養(yǎng)18-20小時。培養(yǎng)過后，杯子在SorvallRRT6000離心機中在3500rpm(#10檔)下于37℃下旋轉(zhuǎn)1小時，或者一直到流出至少200μL的溶液。
試劑從Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO 63178作為藥盒購得，BileAcid Diagnostic Kit#450-A。試劑用水溫和地加以配制，對于試劑A用10ml和對于試劑B用5ml。它們通過倒轉(zhuǎn)而不是振蕩來混合。試驗試劑通過按體積比4∶1混合試劑A和試劑B制得。對于每一樣品，需要0.5ml的試驗試劑。在使用之前將試驗試劑放在37℃的水浴中約15分鐘，升溫至37℃。在6ml聚丙烯試驗管中進行分析。稀釋每一樣品，以便處在分析的線性范圍內(nèi)。膽汁酸鹽濾液樣品和10mMGC首先被稀釋10倍，100μL加900μL的PBS。每一樣品重復(fù)進行操作，以使得對于每一種樣品有6個樣品。PBS用作零對照，并從所有的其它樣品減去6PBS樣品的平均吸收值。10mM的GC被稀釋了總共50倍以仍在該分析法的最大范圍內(nèi)，它是200μM，并測試6個樣品。樣品被稀釋總系數(shù)40。需200μL的樣品用于分析。由于樣品首先被稀釋10倍，然后被稀釋4倍，共分析50μL的稀釋樣品加上150μL的PBS。對于10mM GC樣品，它們首先被稀釋10倍，然后被稀釋5倍，從而40μL的稀釋樣品和160μL的PBS被分析。對于膽汁酸零對照，200μL的PBS被分析。在此時，所有的樣品同樣進行處理。在不超過70根管的情況下分批進行分析。樣品放在37℃的水浴中。使用重復(fù)吸量管(repeated pipetter)，以恒定的步驟將0.5ml試驗試劑加入到每一試管中。在試驗試劑加入到第一試管的同時開動計時器。5分鐘后，通過以添加試驗試劑的同樣步伐添加100μL的1.33M磷酸來停止反應(yīng)。將樣品傾入1.5ml塑料比色池中，并在光譜儀上在530nm處讀取。樣品只穩(wěn)定1小時。
使用從標準GC溶液獲得的吸光度數(shù)據(jù)，計算每5mg螯合劑結(jié)合膽汁酸的百分數(shù)。在每一分析中消膽胺作為對比進行試驗。如果三個樣品相互比較的標準偏差不在約5％-10％范圍內(nèi)的話，重復(fù)進行聚合物的結(jié)合作用分析。
表8各種螯合劑的結(jié)合甘氨膽酸鹽百分數(shù)實施例的聚合物溶脹系數(shù) 結(jié)合甘氨膽酸鹽百分數(shù)消膽胺c - 44-52a37-44b方法25d的聚合物 - 80.5a81.7b54 13.676.9a55 11.963.2a56 19.952.2a57 11.173.8a58 13.272.4a59 11.469.9a60 16.267.2a61 9.1 75.8a62 18.171.9a
6312.973.9a6411.274.0a658.9 73.8a6612.071.0a6729.858.7a684.4 66.2b6924.075.1b7022.582.6b7150.879.9a7239.180.2b73- 60.2aa在10分鐘后b在18小時后cBmax(μmol/mg)＝3.13；Kd(mM)＝7.72dBmax(μmol/mg)＝5.83；Kd(mM)＝1.58實施例74-97在所有的這些實施例中，在樣板存在下制備膽汁酸螯合劑。Bmax和Kd由等式2的配位體-配位體方法測定，如表4中所示。與表8中同樣的方式測定(甘氨膽酸鹽的)體外結(jié)合百分數(shù)。
使用下面的縮寫DMAC-N，N-二甲基乙酰胺DMF-N，N-二甲基甲酰胺實施例74向一只裝有加熱套、回流冷凝器、氮氣導(dǎo)入管和頂置攪拌器的1升圓底燒瓶中加入240mL甲醇，240mLDMF，和100g氯化鈉。攪拌混合物形成淤漿，在此之后，添加77.2g(0.6667mol)六亞甲基二胺和200g(0.667mol)的1，10-二溴癸烷?；旌衔镌跀嚢柘录訜峄亓鳌?5分鐘，一直到形成變硬的凝膠。在凝膠形成之后停止攪拌，凝膠在室溫下放置過夜。凝膠然后用氫氧化銨溶液劈裂/洗滌，用水(洗滌至)中性，用HCl(60％濃HCl/40％水)酸化，并用水洗滌至中性。產(chǎn)物然后用甲醇進行索氏提取4天，和用水萃取3天。所得到的產(chǎn)物然后在真空烘箱中在60℃的氮氣氣氛下干燥，并在咖啡磨機研磨獲得126g(57.8％)的白色聚合物。在水中測得溶脹系數(shù)為16.6。Bmax5.24；kd1.13；Bmax/kd＝4.64。
實施例75向2升三頸圓底燒瓶中加入300ml甲醇，300mLDMAC，和66.7g羥丙基纖維素(HPC)(Klucel JF)?；旌衔镌诘獨鈿夥障聰嚢柚罤PC溶解。在此之后，添加71.2g(0.613mol)六亞甲基二胺和32.5g(0.307mol)碳酸鈉，混合物被攪拌約5分鐘。在攪拌后，加入1，10-二溴癸烷(184.0g，0.613mol)，混合物被加熱至80℃并在該溫度下保持到發(fā)生凝膠化(～55分鐘)。停止攪拌器和聚合物在35℃下放置過夜。從燒瓶中倒出聚合物，并在拌和機中與等同體積的10％氫氧化銨一起研磨。在過濾和洗滌之后，花費1小時將聚合物在10％氫氧化銨中制成淤漿。然后過濾和洗滌至中性，然后需大約30分鐘在100mL的4N HCl制成淤漿。聚合物被過濾并再次洗滌至中性，得到溶脹的凝膠。通過用甲醇在索氏(Soxhlet索格利特)提取裝置上提取來提純凝膠。凝膠在60℃的真空烘箱中干燥3天，得到145.1g(72.6％)淺黃色固體形式的聚合物。在水中的溶脹系數(shù)是12.5。Bmax4.74；Kd 1.22；Bmax/Kd＝3.88。
殘余HPC能夠在最終聚合物中由IR(對于HPC，譜帶在～1080cm- 1)和C-13 NMR(寬峰～75-80ppm)。如果完全洗滌透，由這些方法基本上檢測不到任何殘余的HPC。
表7實施例組成 重量溶劑總體積 溫度 最終反聚合物編號 (g)(體積比) (mL) 離子 收率(g)54 1，9-二溴壬烷 11.08 DMAC/Me26回流 Cl-6.191，4-二氨基丁烷3.41OH1∶155 1，11-二溴十一烷 11.07 DMAC/Me21回流 Cl-7.121，4-二氨基丁烷3.10OH1∶156 1，12-二溴十二烷 11.07 DMAC/Me21 回流 Cl-4.791，4-二氨基丁烷 2.97OH1∶157 1，3-丁二烯二環(huán)氧 3.98MeOH 11 回流 Cl-10.34化物 6.681，8-二氨基辛烷58 1，3-丁二烯二環(huán)氧 3.81MeOH 11 回流 Cl-10.14化物 7.001，9-二氨基壬烷59 1，3-丁二烯二環(huán)氧 3.44MeOH 10 回流 Cl-9.81化物 6.881，10-二氨基癸烷60 1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷 4.37MeOH 13 回流 Cl-8.501，8-二氨基辛烷 4.4261 1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷 3.70MeOH 10 回流 Cl-7.631，10-二氨基癸烷 4.4762 1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷 1.17DMAC/Me19 回流 Cl-8.201，8-二溴辛烷 6.72OH1，8-二氨基辛烷 4.741∶163 1，2，7，8-二環(huán)氧辛烷 2.29DMAC/Me17 回流 Cl-8.211，8-二溴辛烷 4.37OH1，8-二氨基辛烷 4.631∶164 反式-1，4-二氯-2- 4.86DMAC/Me16 回流 Cl-6.48丁烯 5.64OH1，8-二氨基辛烷 1∶165 反式-1，4-二氯-2- 4.84DMAC/Me16 回流 Cl-7.03丁烯 6.16OH1，9-二氨基壬烷 1∶166 反式-1，4-二氯-2- 4.61DMAC/Me16 回流 Cl-6.55丁烯 6.39OH1，10-二氨基癸烷 1∶167 1，10-二溴癸烷7.94 DMAC/Me 18 回流 Cl-7.66三(2-氨基乙基)胺 3.84 OH1∶168 1，3-二氨基-2-羥基3.0DMF/MeO 16 回流 Cl-4.9丙烷 9.1H1，8-二氨基辛烷 1∶169 六亞甲基二胺 2.9DMF/MeO 24 回流 Cl-6.7己基胺0.84 H1，10-二溴癸烷10.0 1∶1碳酸鈉3.570 六亞甲基二胺 1.93 DMF/MeO 24 回流 Cl-7.74-(氨基甲基)哌啶 1.90 H1，10-二溴癸烷10.0 1∶1碳酸鈉3.571 1，4-丁二胺 1.47 DMF/MeO 24 回流 Cl-6.32-甲基五亞甲基二 1.93 H胺10.0 1∶11，10-二溴癸烷72 二乙烯基苯5.0THF 20 回流 Cl-2己烷二胺 4.461，10-二溴癸烷3.41正丁基鋰1.6M(在2.26mL己烷中)73 JeffamineREDR- DMF/MeO 24 回流 Cl-192 H(H2NCH2CH2OCH23.21∶1CH2OCH2CH2OCH 10.02CH2NH2)1.71，10-二溴癸烷二亞乙基三胺實施例76向一只裝有加熱套、頂置攪拌器、冷凝器和氮氣導(dǎo)入管的3升三頸圓底燒瓶中加入120g聚甲基丙烯酸2-羥乙基酯(聚HEMA)，360gDMF和360g甲醇。這一混合物在40℃下攪拌1小時。一旦聚HEMA完全溶解，向燒瓶中加入120g(1.03mol)1，6-己二胺，310.2g(1.03mol)1，10-二溴癸烷和120g(1.13mol)碳酸鈉。燒瓶內(nèi)的內(nèi)容物急劇攪拌并加熱至80℃。在～30分鐘后反應(yīng)混合物形成淤漿狀的凝膠。降低攪拌速度，加熱燒瓶另外6小時。燒瓶的內(nèi)容物然后與氫氧化銨水溶液混合，并在室溫下攪拌1小時。然后過濾聚合物并用水反復(fù)洗滌。聚合物被轉(zhuǎn)移至較大的燒杯中，并與鹽酸水溶液一起攪拌約30分鐘。然后過濾聚合物并用水反復(fù)洗滌。溶脹的聚合物與甲醇一起制成淤漿并轉(zhuǎn)移至3L用于索氏提取的套管。聚合物首先用甲醇萃取，然后用水萃取，都是3天。萃取過的聚合物在～60℃的真空烘箱中干燥。干燥聚合物被研磨得到243g(72％)的所需產(chǎn)物。在水中聚合物的溶脹系數(shù)是18.7。Bmax4.86；Kd 1.29；Bmax/Kd＝3.77。
實施例77向一只裝有加熱套、回流冷凝器、氮氣導(dǎo)入管和頂置攪拌器的100毫升燒瓶中加入12mlDMF，12ml甲醇和20.0g膽甾醇氯化物。在此之后，加入3.86g(0.0333mol)1，6-己二胺和10.0g(0.0333mol)1，10-二溴癸烷?；旌衔锛訜峄亓鞑嚢?。在大約1小時后，形成凝膠。凝膠被加熱攪拌另外3小時，然后在室溫下放置過夜。所得到的聚合物與二氯甲烷在拌和機中被劈裂，過濾，用附加的二氯甲烷漂洗，用甲醇洗滌，然后用水洗滌。然后聚合物與50％氫氧化銨水溶液一起被攪拌，用水洗滌并用鹽酸溶液重新酸化。物質(zhì)然后用水洗滌至濾液呈中性。這一洗滌處理重復(fù)進行4次，聚合物在60℃清洗過的氮氣真空烘箱中干燥，獲得7.33g(67.3％)的所需聚合物。在水中溶脹系數(shù)測得是21.5。
實施例78向一只2升三頸燒瓶中加入157mL甲醇，157mLDMAC，和40.0g羥丙基纖維素(HPC)(Klucel LF)。攪拌混合物至HPC完全溶解。向這一溶液添加47.25g(0.537mol)1，4-二氨基丁烷和56.91g(0.537mol)碳酸鈉，混合物攪拌約5分鐘。在此時，加入161.07g(0.537mol)1，10-二溴癸烷，混合物加熱回流，并保持在該溫度下到發(fā)生凝膠化(～34分鐘)。所得到的凝膠在30℃下加熱過夜。然后從燒瓶倒出聚合物，并在摻混機中與等體積的10％氫氧化銨一起研磨。在過濾和洗滌之后，聚合物經(jīng)1小時在10％氫氧化銨中制成淤漿。然后過濾并洗滌至中性，然后經(jīng)過約30分鐘在1升4NHCl中制成淤漿。聚合物被過濾和再次洗滌至中性，得到溶脹的凝膠。凝膠在甲醇中制成淤漿，過濾，和然后在水中制成淤漿并過濾。這一周期，從氫氧化氨步驟開始，重復(fù)4次。凝膠在60℃的真空烘箱中干燥3天，得到109.16g(68.2％)的淺黃色固體形式的聚合物。在水中的溶脹系數(shù)是14.8。Bmax6.55；Kd 2.09；Bmax/Kd＝3.13。
實施例79向一只100mL的圓底燒瓶中加入11.5mL的甲醇，11.5mL的DMAC，和3.0g的聚乙烯基吡咯烷酮(24,000MW)(PVP)。混合物被攪拌至PVP完全溶解。在此時，4.27g(0.0368mol)六亞甲基二胺和11.04g(0.0368mol)1，10-二溴癸烷。混合物被加熱回流，并攪拌至形成硬的凝膠(～39分鐘)。在形成凝膠后，停止攪拌，凝膠在室溫下放置過夜。凝膠然后用氫氧化氨劈裂/洗滌，用水中和，用HCl酸化，用水洗滌至中性。產(chǎn)物然后用甲醇進行索氏萃取3天和用水萃取3天。所得到的產(chǎn)物然后在60℃的氮氣清洗過的真空烘箱中干燥，并在咖啡磨中研磨獲得8.12g(67.7％)的所需聚合物。在水中的溶脹系數(shù)測得是9.1；對甘氨膽酸鹽的體外結(jié)合率是71.6％。
實施例80向一只100mL的圓底燒瓶中加入15gDMF，7.5g甲醇，和6.0g聚乙酸乙烯酯(PVAc)。攪拌這些成分至PVAc完全溶解，在此之后，向燒瓶中加入2g的DMF，3g甲醇，15.5g的1，10-二溴癸烷(0.0517mol)，和6.0g六亞甲基二胺(0.0517mol)?；旌衔锉患訜嶂?0℃，并攪拌30分鐘。在這一時間之后，將2g碳酸鈉加入到這一反應(yīng)混合物中。在另外30分鐘的加熱和攪拌之后，形成凝膠化產(chǎn)物。在凝膠保留在反應(yīng)燒瓶中過夜之后，倒出凝膠并用氫氧化氨劈裂和洗滌。聚合物然后用用水洗滌，并用HCl溶液重新酸化。凝膠再次用水洗滌，接著，在索氏提取器中首先用甲醇萃取3天和然后用水萃取3天。所得到的產(chǎn)物然后在60℃的氮氣清洗過的真空烘箱中干燥，并在咖啡磨中研磨獲得14.6g所需聚合物。在水中的溶脹系數(shù)測得是14.9，和甘氨膽酸鹽的體外結(jié)合率是79.4％。
實施例81-97實施例81-97的聚合物基本上按照與實施例74相同的方式制備，不同的是用量是原實施例的用量的二十分之一(例如，12mL甲醇，12mL的DMF，3.86g六亞甲基二胺和10g的1，10-二溴癸烷)。樣板和樣板的用量連同溶脹結(jié)果和體外甘氨膽酸鹽結(jié)合數(shù)據(jù)(10分鐘試驗)在表9中給出。
表9實施例樣板(g)水溶脹系數(shù) 甘氨膽酸鹽結(jié)編號 合百分數(shù)81 NaCl(2) 26.9 73.982 NaCl(10)21.2 70.283 NaCl(20)26.0 70.484 NaCl(30)26.6 71.485 NaCl(40)30.6 75.786 NaCl(50)20.2 71.787檸檬酸鈉(20) 14.4 72.488膽汁酸甲酯(13.8) 23.6 82.689聚四亞甲基二醇(10)19.4 80.390rhamsan膠(10) 8.5 75.691米蛋白(2.7) 20.2 74.992小麥淀粉(10) 15.8 69.193amaizo(10)20.0 77.294玉米直鏈淀粉(10) 19.6 67.095蘋果膠(10)4.0 60.496海藻糖(12.6) 14.8 76.597碳酸鈉(10)20.6 72.4
體 內(nèi) 試 驗在2星期內(nèi)，一組5只雄性Golden Syrian倉鼠以100mg和250mg的螯合劑/每kg體重/天的劑量施用螯合劑。螯合劑與標準的倉鼠食物(chow)混合。在按劑量施用得到每一動物的基線之前，由Dimension方法測量總血清膽甾醇水平。在2星期按劑量施用之后，對于每一動物再次測量總血清膽甾醇水平，計算總血清膽甾醇與基線之間的變化百分數(shù)。結(jié)果在表10中給出。
表10實施例的與基線相比的變化百分比±SEM螯合劑100mg/kg/天 250mg/kg/天74 -16.5±2.6-24.7±1.3對照*-4.2±1.8 -12.5±3.675 -11.3±2.1-12.0±3.9**對照 -5.1±3.2 -8.4±5.9**76 -10.0±4.3-23 3±3.3對照*-5.8±3.1 -11.6±2.577 -17.1±2 4-25.9±0.6對照*-13.6±3.4-18.9±1.078 -12.6±5.1-18.1±2.2對照*-8.1±2.1 -15.1±2.3*“對照”是按照與實施例74-78同樣的方式但沒有樣板存在下制備的聚合物。正如所給出的結(jié)果，血清膽甾醇百分比變化對于每一組試驗動物是可變的。
**在200mg/kg/天下的試驗。
權(quán)利要求
1.一種制備交聯(lián)聚合銨鹽凝膠或聚胺凝膠的方法，包括在合適的溶劑中形成交聯(lián)聚合銨鹽或聚合胺，其中當(dāng)交聯(lián)聚合銨鹽或聚合胺鹽發(fā)生凝膠化時存在樣板。
2.權(quán)利要求1的方法，其中交聯(lián)聚合銨鹽或聚胺是膽汁酸螯合劑。
3.權(quán)利要求1的方法，其中樣板選自聚甲基丙烯酸(2-羥乙基)酯，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙酸乙烯酯，馬鈴薯淀粉，小麥淀粉，豌豆淀粉，gellan gum，welan gum，rhamsam膠，黃原膠，amaizo，直鏈淀粉，玉米蛋白，果膠，纖維素聚合物，聚酯二醇，聚醚二醇，單糖或二糖，類固醇衍生物，膽甾醇衍生物，膽汁酸衍生物，鹵化鈉或鹵化鉀，檸檬酸鈉或檸檬酸鉀，碳酸鋰、碳酸鈉或碳酸鉀。
4.權(quán)利要求3的方法，其中樣板選自玉米直鏈淀粉，蘋果膠，乙基纖維素，甲基纖維素，羥丙基纖維素，羧甲基纖維素，聚四亞甲基二醇，海藻糖，膽甾醇氯化物，或膽汁酸甲酯。
5.權(quán)利要求1-4的方法，其中交聯(lián)聚合銨鹽是包含由鏈段連接于其它銨氮原子的銨氮原子的交聯(lián)聚合銨鹽，其中約25％或以上的連接銨氮原子的鏈段是基團Y，其中每一Y獨立地是-(CR1R2)b-其中b是7至約20的一個整數(shù)，且各R1和各R2獨立地是具有1-20個碳原子的烷基或是氫；剩下的氮原子被鏈段Z連接，其中每一Z獨立地是含有2-50個碳原子的亞烴基，該亞烴基任選地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基或甲硅烷基或雜環(huán)；其中約25％或更多的銨氮原子是仲銨氮原子；其中該交聯(lián)聚合銨鹽不溶于水。
6.權(quán)利要求1-4的方法，其中交聯(lián)聚合胺是包含由鏈段連接于其它胺氮原子的胺氮原子的交聯(lián)聚合胺，其中約25％或更多的連接胺氮原子的鏈段是基團Y，其中各Y獨立地是-(CR1R2)b-其中b是7至約20的一個整數(shù)，且各R1和各R2獨立地是具有1-20個碳原子的烷基或氫；剩下的氮原子被鏈段Z連接，其中每一Z獨立地是含有2-50個碳原子的亞烴基，該亞烴基任選性地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基或甲硅烷基或雜環(huán)；其中約25％或更多的胺氮原子是仲胺氮原子；其中該交聯(lián)聚合胺不溶于水。
7.一種制備交聯(lián)聚合銨鹽或它們的藥理上可接受的鹽形式的方法，該交聯(lián)聚合銨鹽包含由鏈段連接于其它銨氮原子的銨氮原子，其中約25％或更多的連接銨氮原子的鏈段是基團Y，其中各Y獨立地是-(CR1R2)b-其中b是7至約20的一個整數(shù)，且各R1和各R2獨立地是具有1-20個碳原子的烷基或氫；剩下的氮原子被鏈段Z連接，其中每一Z獨立地是含有2-50個碳原子的亞烴基，該亞烴基任選地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基或甲硅烷基或雜環(huán)；其中約25％或更多的銨氮原子是仲銨氮原子；其中該交聯(lián)聚合物銨鹽不溶于水；該方法包括在合適的溶劑中讓結(jié)構(gòu)式X-Y-X或X-Z-X的雙官能團有機化合物，其中X是適合于胺烷基化反應(yīng)的離去基團，與結(jié)構(gòu)式H2N-Y-NH2或H2N-Z-NH2的二胺化合物進行反應(yīng)，形成凝膠，其中凝膠是在樣板存在下形成的。
8.權(quán)利要求7的方法，其中雙官能團有機化合物和二胺在反應(yīng)中以雙官能團有機化合物對二胺的摩爾比0.9-1.4存在。
9.權(quán)利要求7的方法，其中樣板選自聚甲基丙烯酸(2-羥乙基)酯，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙酸乙烯酯，馬鈴薯淀粉，小麥淀粉，豌豆淀粉，gellan gum，welan gum，rhamsam膠，黃原膠，amaizo，直鏈淀粉，玉米蛋白，果膠，乙基纖維素，甲基纖維素，羥丙基纖維素，羧甲基纖維素，聚酯二醇，聚醚二醇，聚四亞甲基二醇，單糖或二糖，膽甾醇氯化物，膽汁酸衍生物，氯化鈉，氯化鉀，檸檬酸鈉，聚四亞甲基二醇，或碳酸鈉；且該樣板以相對于沒有樣板時的總反應(yīng)液重量的5-500wt％的量存在。
10.權(quán)利要求7的方法，其中雙官能團有機化合物選自1，10-二溴癸烷，1，12-二溴十二烷，1，8-二溴辛烷，1，18-二溴十八烷，1，9-二溴壬烷，1，7-二溴庚烷，1，8-二溴-3-乙基辛烷，1，9-二溴癸烷，1，10-二氯癸烷，1，12-二氯十二烷，1，8-二氯辛烷，1，18-二氯十八烷，1，9-二氯壬烷，1，7-二氯庚烷，1，8-二氯-3-乙基辛烷，1，9-二氯癸烷，1，10-二碘癸烷，1，12-二碘十二烷，1，8-二碘辛烷，1，18-二碘十八烷，1，9-二碘壬烷，1，7-二碘庚烷，1，8-二碘-3-乙基辛烷，1，9-二碘癸烷，1，9-二環(huán)氧基癸烷，1，11-二環(huán)氧基十二烷，1，7-二環(huán)氧基辛烷，1，17-二環(huán)氧基十八烷，1，8-二環(huán)氧基壬烷，1，6-二環(huán)氧基庚烷，1，7-二環(huán)氧基辛烷，和1，7-二環(huán)氧基-3-乙基辛烷，1，9-二吖丙啶(diaziridino)癸烷，1，11-二吖丙啶十二烷，1，7-二吖丙啶辛烷，1，17-二吖丙啶十八烷，1，8-二吖丙啶壬烷，1，6-二吖丙啶庚烷，1，7-二吖丙啶辛烷和1，7-二吖丙啶基-3-乙基辛烷。
11.權(quán)利要求7的方法，其中二胺選自乙二胺，1，6-二氨基己烷，1，12-二氨基十二烷，2-甲基-1，5-二氨基戊烷，1，4-雙(氨基甲基)環(huán)己烷，1，3-二氨基戊烷，二亞乙基三胺，1，4-雙(3-氨基丙基)哌嗪，1，4-環(huán)己烷二胺，5-氨基-1-氨基甲基-1，3，3-三甲基環(huán)己烷，1，3-丙二胺，1，4-丁二胺，1，5-戊二胺，1，7-庚二胺，1，8-二氨基辛烷，1，9-二氨基壬烷，1，10-二氨基癸烷，1，11-二氨基十一烷，2-羥基-1，3-丙二胺和4，4’-亞甲基-雙(環(huán)己基胺)。
12.權(quán)利要求1-11的方法，其中交聯(lián)聚合銨鹽對于膽汁酸鹽具有高于0.75的Bmax/Kd值。
13.權(quán)利要求5-12的方法，其中Z是含有2-20個碳原子的亞烴基。
14.權(quán)利要求5-13的方法，其中Z是飽和的。
15.權(quán)利要求5-14的方法，其中Z是含有2-14個碳原子的正亞烷基。
16.權(quán)利要求5-15的方法，其中Y是含有7-20個碳原子的正亞烷基。
17.權(quán)利要求5-16的方法，其中Y含有7-14個碳原子。
18.權(quán)利要求5-16的方法，其中Y含有9-12個碳原子。
19.權(quán)利要求1-5和6-18的方法，其中在聚合銨鹽凝膠中至少約40％的銨氮原子是仲銨氮原子。
20.權(quán)利要求1-5和6-19的方法，其中在聚合銨鹽凝膠中15-30％的銨氮原子是伯銨氮原子，40-60％的銨氮原子是仲銨氮原子，15-30％的銨氮原子是叔銨氮原子，和低于5％的銨氮原子是季銨氮原子。
21.權(quán)利要求1-5和6-20的方法，其中聚合銨鹽在水中具有至少約4的溶脹系數(shù)。
22.權(quán)利要求1-5和6-21的方法，其中聚合銨鹽在水中具有約5-約30的溶脹系數(shù)。
23.權(quán)利要求1-5和6-21的方法，其中聚合銨鹽在水中具有約10-約30的溶脹系數(shù)。
24.權(quán)利要求1-5和6-23的方法，其中在聚合銨鹽中的銨氮原子進一步被含有1-50個碳原子的烴基Q取代，該烴基任選地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基、甲硅烷基或雜環(huán)。
25.權(quán)利要求24的方法，其中Q含有1-30個碳原子。
26.一種降低哺乳動物體內(nèi)的血漿膽甾醇水平的方法，包括口服治療有效量的權(quán)利要求1-5和6-25的交聯(lián)聚合銨鹽產(chǎn)物。
27.螯合膽汁酸的方法，包括在含水介質(zhì)中讓膽汁酸與權(quán)利要求1-5和6-25的交聯(lián)聚合銨鹽接觸。
28.權(quán)利要求1-5和7-25的方法，其中在聚合銨鹽凝膠中的至少一些銨氮原子是交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的一部分。
29.權(quán)利要求5-9，12，和19-23的方法，其中Y是十亞甲基；且Z是六亞甲基，四亞甲基，2-羥基-1，3-亞丙基，或2，7-二羥基-八亞甲基。
30.權(quán)利要求5-9，12，和19-23的方法，其中Y是八亞甲基和十亞甲基且不存在Z。
31.權(quán)利要求5-9，12，和16-23的方法，其中Z是含有2-10個碳原子的正亞烷基，它任選地被1-2個羥基取代。
32.權(quán)利要求29-30的方法，其中樣板是纖維素聚合物。
33.權(quán)利要求32的方法，其中樣板選自甲基纖維素，羥丙基纖維素或羧甲基纖維素。
34.權(quán)利要求1-5，6-25和28-33方法的聚合銨鹽凝膠產(chǎn)物。
35.權(quán)利要求1-5，6-25和28-33方法的聚合銨鹽凝膠產(chǎn)物，它們具有選自如下的反離子氯離子，溴離子，碘離子，硫酸根離子，磷酸根離子，乙酸根離子，抗壞血酸根離子，碳酸根離子，碳酸氫根離子，煙酸根離子，水楊酸根離子，酒石酸根離子，或檸檬酸根離子。
36.一種藥物組合物，它包括藥理上可接受的載體和降低膽甾醇的治療有效量的權(quán)利要求1-5，6-25和28-33的交聯(lián)聚合銨鹽凝膠產(chǎn)物。
全文摘要
這里公開的是新型的聚合物銨鹽，其中在該聚合物鹽中約25％或以上的連接銨氮原子的鏈段是基團Y，其中Y是正亞烷基或烷基取代的正亞烷基，該正亞烷基具有7至約20個碳原子；0至約75％的連接銨氮原子的鏈段是基團Z，其中Z是含有2個或2個以上碳原子的亞烴基，該亞烴基任選地含有一個或多個羥基、醚基、氨基、硫醚基、酮基、甲硅烷基或雜環(huán)、且約25％或25％以上的銨氮原子是仲銨氮原子。
文檔編號A61K31/787GK1143379SQ95191992
公開日1997年2月19日 申請日期1995年1月18日 優(yōu)先權(quán)日1994年1月18日
發(fā)明者S·D·萊斯, G·D·菲古利, N·P·卡沙特, J·R·馬托斯 申請人:納幕爾杜邦公司, 杜邦麥克制藥有限公司