一種奧拉西坦光降解產(chǎn)物及其制備方法和分析檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種奧拉西坦光降解產(chǎn)物，W及該光降解產(chǎn) 物的制備方法和分析檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 促智藥是一類能促進學(xué)習記憶能力的新型中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物，與精神抑制藥、抗 抑郁藥、抗焦慮藥、精神興奮藥和致幻劑等精神藥物均不同，它是通過對腦細胞中生物能量 代謝(如葡萄糖、ATP、蛋白質(zhì)、RNA、類脂等）的同化作用，選擇性作用于大腦皮層和海馬，保 護、激活或促進神經(jīng)細胞功能的恢復(fù)，改善與精神行為有關(guān)的腦整合機制(如記憶、學(xué)習、回 答問題及分析問題、解決問題的能力）。目前最引人注目的促智藥是化咯燒酬類，其代表性 藥物奧拉西坦是一種合成的徑基氨基下酸環(huán)狀衍生物，又稱奧拉酷胺、徑氧化醋胺，商品名 有neuromet和健朗星等，由意大利史克比切姆公司于1974年首次合成，是美國抑A批準的用 于治療老年癡呆的藥物之一。其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]
[0004] 奧拉西坦臨床上用于治療各種理化因素引起的腦損傷，各種腦缺氧和慢性腦功能 不全等。對癡呆、休克、老年精神衰退綜合癥(如記憶力衰退、適應(yīng)性降低、老年虛弱和精神 性活動障礙等）、促進兒童大腦與智力的發(fā)育，對正常人的記憶力、工作效率的提高均有一 定療效。可用于治療一氧化碳和慢性酒精中毒，對己比妥和農(nóng)藥中毒的解救也有一定的作 用。
[0005] 國際上公認的藥品注冊要符合人用藥品注冊技術(shù)國際協(xié)調(diào)會（ICH)及EP歐洲藥典 中的要求，其對藥物中的雜質(zhì)進行了嚴格的規(guī)定。ICH要求申報者應(yīng)對原料藥在合成、精制 和儲存過程中最可能產(chǎn)生的那些實際存在的和潛在的雜質(zhì)進行概述，該描述應(yīng)對合成中的 化學(xué)反應(yīng)、由原料引起的雜質(zhì)及可能的降解產(chǎn)物進行合理的、科學(xué)地評估;并且申報資料中 還應(yīng)對那些在原料藥中實際存在的表觀量大于或等于0.05% (每日最大劑量大于2g)的雜 質(zhì)結(jié)構(gòu)特征進行描述。
[0006] 可能的降解產(chǎn)物可通過破壞性試驗和穩(wěn)定性試驗進行評估。但是，現(xiàn)有的奧拉西 坦質(zhì)量標準中，有關(guān)物質(zhì)的液相分析方法洗脫強度較弱，可能并不能將降解產(chǎn)物都分離檢 測出來。運些漏檢出的降解產(chǎn)物無疑降低了奧拉西坦的質(zhì)量，如不對運些降解產(chǎn)物加 W嚴 格控制，可能會對人體產(chǎn)生嚴重的毒副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了克服上述缺陷，本發(fā)明采用洗脫強度高的洗脫劑對奧拉西坦的破壞性試驗樣 品和穩(wěn)定性試驗樣品進行分析，在光破壞樣品中發(fā)現(xiàn)了一種新的降解產(chǎn)物，該降解產(chǎn)物在 穩(wěn)定性試驗長期6個月未避光樣品中開始檢測到，且含量隨時間增高，長期18月時達 0.05%。因此：
[0008] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種新的奧拉西坦光降解產(chǎn)物；
[0009] 本發(fā)明的第二目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的制備方法；
[0010] 本發(fā)明的第=目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的分析檢測方法；
[0011] 本發(fā)明的第四目的在于提供所述光降解產(chǎn)物在奧拉西坦及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢 查項中作為雜質(zhì)對照品的用途。
[0012] 上述目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0013] -種奧拉西坦光降解產(chǎn)物，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下，
[0014]
[0015] -種所述光降解產(chǎn)物的制備方法，包括如下步驟：
[0016] (1)光照破壞樣品制備:將奧拉西坦原料藥光照破壞，先經(jīng)冷白巧光燈照射，再經(jīng) 紫外巧光燈照射；
[0017] (2)降解產(chǎn)物富集:將上述光照破壞樣品溶于甲醇體積百分濃度為70%~85%的 甲醇溶液中，攬拌，抽濾，收集濾液，減壓濃縮得濃縮物；
[0018] (3)降解產(chǎn)物粗品：將上述濃縮物用正相硅膠柱色譜分離，用體積比為8:1~10:1 的二氯甲燒-甲醇混合溶劑等度洗脫，收集5~10個柱體積洗脫液，濃縮得降解產(chǎn)物粗品；
[0019] (4)反相硅膠柱制備:將上述降解產(chǎn)物粗品用反相硅膠柱純化，固定相為十八烷基 硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇體積百分濃度為80 %~90 %的甲醇-水，等度洗脫，收集5~9 個柱體積洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得所述光降解產(chǎn)物。
[0020] 進一步地，步驟（1)所述光照破壞方法為:先經(jīng)一百二十萬勒克斯冷白巧光燈照射 36~48小時，再經(jīng)200瓦小時/平方米的紫外巧光燈照射24~36小時。
[0021 ]更進一步地，步驟(1)所述光照破壞方法為:先經(jīng)一百二十萬勒克斯冷白巧光燈照 射42小時，再經(jīng)200瓦小時/平方米的紫外巧光燈照射30小時。
[0022] 進一步地，步驟(3)為:將步驟(2)濃縮物用正相硅膠柱色譜分離，用體積比為9:1 的二氯甲燒-甲醇混合溶劑等度洗脫，收集7~8個柱體積洗脫液，濃縮得降解產(chǎn)物粗品。
[0023] 更進一步地，步驟(3)所述正相硅膠粒徑大小為200~300目。
[0024] 進一步地，步驟(4)為:將步驟(3)降解產(chǎn)物粗品用反相硅膠柱純化，固定相為十八 烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇體積百分濃度為85 %的甲醇-水，等度洗脫，收集7~8個 柱體積洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得所述光降解產(chǎn)物。
[0025] 一種所述光降解產(chǎn)物的液相分析方法，HPLC色譜條件包括：
[0026] 色譜柱:Agilent ZORBAX XDB-C18(4.6mmX250mm，5皿）；
[0027] 流動相:4為乙臘，8為0.05111〇1/1正辛胺溶液(憐酸調(diào)節(jié)抑值至6.8);
[0028] 梯度洗脫程序：0~6min，A20%;6~15min，A20%一75%;15~40min，A75%;40 ~50min，A 75%一20%;50~60min，A 20%;
[0029] 流動相流速:1.〇1111.111111-1;
[0030] 檢測波長:260nm;
[0031] 柱溫：30。。
[0032] 進樣量：10化。
[0033] 上述色譜條件下，所述光降解產(chǎn)物能與極性相近的雜質(zhì)完全分離開，分離度大于 1.5。流動相在260nm檢測波長下紫外本底吸收低，且260nm為所述光降解產(chǎn)物的最大吸收波 長，保證了所述光降解產(chǎn)物的響應(yīng)靈敏度，提高檢出量。
[0034] 所述的奧拉西坦光降解產(chǎn)物在奧拉西坦及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查項中作為雜質(zhì) 對照品的用途。該光降解產(chǎn)物容易獲得，且純度高(大于98%)，可W使用該化合物作為對照 品利用外標法對其進行質(zhì)量控制。
[0035] 本發(fā)明的有益效果：
[0036] (1)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種新的奧拉西坦光降解產(chǎn)物，該降解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)首次報道；
[0037] (2)本發(fā)明提供的所述光降解產(chǎn)物的制備方法簡單易行，可大量制備該降解產(chǎn)物；
[0038] (3)本發(fā)明提供的液相分析方法能快速檢測出所述降解產(chǎn)物，選擇該降解產(chǎn)物的 最大吸收波長作為檢測波長，提高了該降解產(chǎn)物的檢出率，結(jié)果準確可靠；
[0039] (4)本發(fā)明提供的光降解產(chǎn)物可W用于奧拉西坦及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查，進一 步提高奧拉西坦及其制劑的質(zhì)量標準，提高其安全性和可控性。
【具體實施方式】
[0040] 下面結(jié)合具體實施例詳細說明本發(fā)明的技術(shù)方案。
[0041] 實施例1:奧拉西坦光降解產(chǎn)物的制備
[0042] 取50g奧拉西坦原料均勻攤在培養(yǎng)皿中，置于冷白巧光燈下光照42小時，光照強度 為一百二十萬勒克斯;取出表面皿，再置于紫外巧光燈下照射30小時，紫外巧光燈照射強度 為200瓦小時/平方米，照射結(jié)束后取出。然后將光照破壞樣品溶于甲醇體積百分濃度為 75 %的甲醇-水溶液中，攬拌20分鐘，用抽濾漏斗抽濾，收集濾液，減壓濃縮得濃縮物3.5g; 然后將濃縮物用5ml甲醇溶解，用4g粒度為100~200目的正相硅膠拌樣，揮干溶劑，用80g粒 度為200~300目的正相硅膠作為分離硅膠進行柱色譜分離，用體積比為9:1的二氯甲燒-甲 醇混合溶劑等度洗脫，收集7~8個柱體積洗脫液，減壓濃縮得降解產(chǎn)物粗品1.2g;然后將降 解產(chǎn)物粗品用甲醇體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液溶解，用反相硅膠柱純化，固定相為 十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇體積百分濃度為85 %的甲醇-水，等度洗脫，收集7~ 8個柱體積的洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥得淡黃色粉末750mg(光降解產(chǎn)物）eHPLC歸一化純 度大于98%。
[0043] 光降解產(chǎn)物化學(xué)結(jié)構(gòu)確證：
[0044] 皿-ESIMS顯示[M+H]+為m/z 141.0708, [M+化]+為m/z 163.0512。結(jié)合核磁特征可 得分子式為0抽8化02，不飽和度為4。核磁共振氨