專利名稱：8-氨基-10-(氨雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物，其制備方法，以及含有這些化合物的抗菌組合物。
已經(jīng)知道這種類型的吡啶并苯并噁二嗪羧酸化合物具有抗菌活性。這些化合物的實例參見EP-O259804、EP-O343524和EuropeanJournalofMedicinalChemistry26，889(1991)。
本發(fā)明涉及1.通式(Ⅰ)新的8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物， 其中R1代表氫或者可被羥基或鹵素任選取代的C1-C4烷基，
R2獨立于R1，代表氫或甲基，R3代表氫或C1-C4烷基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫或鹵素，Z代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基、-CH2-NR10R11、羧基、甲氧羰基或乙氧羰基，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C3烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；琑11代表氫或甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或甲基，R6代表氫或甲基，
R5代表氫、甲基、或者結(jié)構(gòu)為-CH＝CH-CO2R5′、-CH2-CH2-CO2R5′、-CH2-CO-CH3、-CH2-CH2-CN的基團(tuán)，R5′代表甲基或乙基，B 代表-CH2-、O或者直連鍵。
式(Ⅰ)化合物可以以外消旋體形式或者作為對映體純的化合物存在，并且可以以其可藥用的水合物和酸加成鹽的形式以及其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽和鈲鹽的形式存在。
2.制備式(Ⅰ)新的8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物的方法， 其中R1代表氫或者可被羥基或鹵素任選取代的C1-C4烷基，R2獨立于R1，代表氫或甲基，R3代表氫或C1-C4烷基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫或鹵素，
Z代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基、-CH2-NR10R11、羧基、甲氧羰基或乙氧羰基，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C3烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或甲基，R6代表氫或甲基，R5代表氫、甲基、或者結(jié)構(gòu)為-CH＝CH-CO2R5′、-CH2-CH2-CO2R5′、-CH2-CO-CH3、-CH2-CH2-CN的基團(tuán)，R5′代表甲基或乙基，B 代表-CH2-、O或者直連鍵，該方法的特征在于將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，如果合適，在酸結(jié)合劑存在下進(jìn)行該反應(yīng)，
其中R1、R2、R3、R4和X1如上定義，并且X2代表鹵素，尤其是氟或氯，Z-H(Ⅲ)其中Z如上定義。
3.式(Ⅱ)化合物 其中R1、R2、R3、R4和X1具有第1部分中所述定義，并且X2代表鹵素。
4.制備式(Ⅱ)化合物的方法，該方法的特征在于將式(Ⅳ)化合物與硝化劑反應(yīng)，然后將所得硝基化合物還原， 其中R1、R2、R3、R4、X1和X2具有第3部分中所述定義。
與上述結(jié)構(gòu)類型的已知代表性化合物相比較，本發(fā)明化合物具有更強的抗菌作用，尤其是革蘭氏陽性菌抗菌譜。因此本發(fā)明化合物適于人和獸醫(yī)藥中作為活性化合物。
優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物是下述式(Ⅰ)化合物以及其可藥用的水合物和酸加成鹽，及其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽和鈲鹽，其中R1代表氫或者可被羥基任選取代的C1-C3烷基，R2獨立于R1，代表氫或者甲基，R3代表氫、甲基或者乙基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫、氟或者氯，Z代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基或者-CH2-NR10R11，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C2烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或者甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或者甲基，R5代表氫或者甲基，R6代表氫，B 代表-CH2-、O或者直連鍵。
尤其優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物是下述式(Ⅰ)化合物及其可藥用的水合物和酸加成鹽，及其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽和鈲鹽，其中R1代表氫或甲基，R2代表氫，R3代表甲基或乙基，R4代表氫、甲基或乙基，X1代表氟，
Z代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基或者-CH2-NR10R11，其中R10代表氫、甲基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或者甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R6代表氫，R9代表氫或者甲基，R5代表氫或者甲基，B 代表-CH2-、O或者直連鍵。
具體提到的有下列式(Ⅰ)化合物
續(xù)
續(xù)
續(xù)
續(xù)
續(xù)
例如，如果用8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸和2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷來制備式(Ⅰ)化合物，則可用下列方程式表示反應(yīng)過程 用作原料化合物的式(Ⅱ)化合物是新的，可按下法制備在溶劑例如水、硫酸、乙酸、乙酸酐或其混合液中于-50～200℃，優(yōu)選-20～100℃下將式(Ⅳ)化合物與硝化劑例如硝酸和硝酸鹽(酯)反應(yīng)，然后還原所得的硝基化合物， 其中R1、R2、R3、R4、X1和X2如上定義。
金屬氫化物、過渡金屬和過渡金屬鹽可用于硝基的還原;優(yōu)選在催化劑例如鈀/炭、阮內(nèi)鎳和鉑存在下使用氫?？梢允褂玫娜軇├缬兴?、鹽酸、醇、乙酸或其混合液。
式(Ⅱ)化合物也可按下列反應(yīng)路線制備，其中R1、R2、R3、R4、X1和X2如上定義
上述化合物可以作為外消旋體，對映體或純的非對映體應(yīng)用。
可提及的實例有8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸8-氨基-9，10-二氟-2，3-二甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸8-氨基-9，10-二氟-2-(羥甲基)-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e]-[1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸8-氨基-9，10-二氟-3-乙基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3，-d，e]-[1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e]-[1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸乙酯用作原料化合物的式(Ⅲ)的胺是已知的。手性胺既可作為外消旋體應(yīng)用，也可作為對映體或非對映體純的化合物應(yīng)用。
可提及的實例有2，7-二氮雜雙環(huán)[3.3.0]辛烷2-甲基-2，7-二氮雜雙環(huán)[3.3.0]辛烷2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷2-甲基-2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷2-氧雜-5，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷5-甲基-2-氧雜-5，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯4-甲基-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯5-甲基-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯
2-二甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-乙氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-甲氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-羥基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯5-異丙基-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-氨基-5-異丙基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-氨基-5-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯2-氨基-5-環(huán)丙基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-乙氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-叔丁氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-芐氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-烯丙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-叔丁氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-乙氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-環(huán)丙氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-二甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
2-[(2-羥乙基)-氨基]-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-1-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-2-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-乙氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-叔丁氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-芐氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-烯丙氧羰基氨基甲基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-4-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-5-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-6-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-7-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯2-氨基-9-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯取代的8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯和8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯類化合物是本申請人德國專利申請DE-P4230804.6的主題，先有技術(shù)部分還沒有該主題。
通式(Ⅳ)化合物可按下法制得，
其中R7、R8和R9如上定義將合適的二烯化合物與合適的親二烯體進(jìn)行狄爾斯-阿德爾反應(yīng)，該反應(yīng)可在分子間或分子內(nèi)進(jìn)行;然后如果合適，進(jìn)行另外的化學(xué)反應(yīng)，以合成吡咯烷環(huán)并且引入生物作用所需的取代基;作為最后步驟，除去吡咯烷氮上的保護(hù)基。
當(dāng)分子內(nèi)進(jìn)行狄爾斯-阿德爾反應(yīng)時，使式(1)或(2)化合物反應(yīng)，以式(1)化合物為原料制得式(3)化合物，或者以式(2)化合物為原料制得式(4)化合物， 式(1)和(2)中R8和R9如上定義，并且P代表保護(hù)基，例如烯丙基、?；?、氨基甲?；蛉郊谆琙代表氫、羧基、羧酸酯或羧酰胺(carboxamide)基團(tuán)、CN或NO2，
式(3)和式(4)中R8、R9、P和Z如上定義。
類似類型的分子內(nèi)狄爾斯-阿德爾反應(yīng)是公知的，參見J.M.Mellor，A.M.Wagland;J.Chem.Soc.PerkinI，997-1005(1989);W.R.Roush，S.E.Hall;J.Am.Chem.Soc.103，5200(1980);E.Ciganek;OrganicReactions.32，1-374(1984)。但是，在這些出版物中，沒有保護(hù)基的參考資料，所述保護(hù)基既適用于該反應(yīng)，同時又能沒有困難地脫去。
當(dāng)進(jìn)行分子間狄爾斯-阿德爾反應(yīng)時，式(5)二烯化合物與式(6)親二烯體反應(yīng)，得到式(7)化合物，然后經(jīng)基團(tuán)Z1和Z2的修飾，例如將環(huán)烯羧酸酐轉(zhuǎn)化成二酯同時除去保護(hù)基P1或者P1和P2后，任選進(jìn)行環(huán)合反應(yīng)得到式(8)內(nèi)酰胺。
在式(5)、(6)、(7)和(8)中，R8和R9如上定義，P1代表?；虬被柞；Ｗo(hù)基，如果P2代表氫，或者P1和P2一起形成酰亞胺，Z1和Z2代表氫、羧基、羧酸酯或羧酰胺基、CN或NO2，其中Z1或Z2兩個基團(tuán)中至少一個必須是羧酸酯基或羧酰胺基或者CN，或者Z1和Z2一起形成橋以致形成環(huán)狀羧酸酐。
優(yōu)選的保護(hù)基P、P1、P2是下述保護(hù)基，其中在脫去保護(hù)基所采用的條件下，環(huán)合生成內(nèi)酰胺的反應(yīng)以及與用作為溶劑的醇進(jìn)行的任選酯化第二個仍然游離的羧基官能團(tuán)的反應(yīng)以這樣的方式進(jìn)行，即全部的反應(yīng)步驟能夠以一鍋法進(jìn)行，并且不會發(fā)生非對映體純和對映體純的原料不受控制地轉(zhuǎn)化成不能分離或者難以分離的異構(gòu)體混合物。
可提及的實例是1.叔丁氧羰基保護(hù)基(用含水酸或醇酸脫去)2.鄰苯二甲酰亞氨基保護(hù)基(在作為溶劑的含水醇或無水醇中用伯胺氨解)
所有的惰性有機(jī)溶劑均適合用作狄爾斯-阿德爾反應(yīng)的稀釋劑。所述惰性有機(jī)溶劑包括醚類例如二異丙基醚、二正丁基醚、二甲氧基乙烷、四氫呋喃和茴香醚，烴類例如己烷、甲基環(huán)己烷、甲苯、二甲苯和 以及鹵代烴類例如氯仿、1，2-二氯乙烷和氯苯。但是，狄爾斯-阿德爾反應(yīng)也可不用溶劑進(jìn)行。
反應(yīng)溫度能在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變化。一般而言，反應(yīng)在約-20℃～+200℃之間，優(yōu)選在-20℃～+150℃之間進(jìn)行。該狄爾斯-阿德爾反應(yīng)通常在常壓下進(jìn)行。但為加速反應(yīng)，也可采用最高至1.5GPa的壓力。
按實施例所述方法或者按有機(jī)化學(xué)的公知方法，將式(7)化合物進(jìn)一步反應(yīng)以生成式(8)化合物。
為了以式(3)、(4)或(8)化合物為原料制得式(Ⅲ)化合物，需要進(jìn)一步的反應(yīng)。
可以提及的實例是水解酯生成羧酸;還原羰基(例如酯的羰基)生成醛或醇，或者還原內(nèi)酰胺基團(tuán)生成吡咯烷化合物;將羥基官能團(tuán)轉(zhuǎn)化成氨基官能團(tuán);轉(zhuǎn)化羧基官能團(tuán)或其一種衍生物同時降解一個碳原子生成氨基官能團(tuán);將在分子中存在氨基官能團(tuán)的醛進(jìn)行還原性胺化作用;用胺將分子中存在的醛官能團(tuán)進(jìn)行還原性胺化作用;引入保護(hù)基;脫去吡咯烷氮上的保護(hù)基以致保留分子中可能存在的另外的保護(hù)基。
按實施例中所述方法或者按有機(jī)化學(xué)中的常規(guī)方法進(jìn)行上述反應(yīng)。
由式(3)、(4)或(8)化合物生成式(Ⅲ)化合物的進(jìn)一步的反應(yīng)可以例如通過下列反應(yīng)式說明
原料物質(zhì)式(1)、(2)、(5)和(6)是已知或者可按有機(jī)化學(xué)的已知方法制備。
優(yōu)選在稀釋劑例如二甲亞砜、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、六甲基磷酰胺、四氫噻吩砜、乙腈、水、醇例如甲醇、乙醇、正丙醇或異丙醇、乙二醇單甲基醚或吡啶中進(jìn)行式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物的反應(yīng)，其中式(Ⅲ)化合物還可采用其鹽例如鹽酸鹽的形式。還可以使用上述稀釋劑的混合液。
所用的酸結(jié)合劑可以是所有常用的無機(jī)和有機(jī)酸結(jié)合劑。所述酸結(jié)合劑包括堿金屬氫氧化物、堿金屬碳酸鹽、有機(jī)胺和脒。具體可提及的特別合適的酸結(jié)合劑有三乙胺、1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷(DABCO)、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或過量的胺(Ⅲ)。
反應(yīng)溫度可以在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變化。一般而言，反應(yīng)在約20～200℃，優(yōu)選80～180℃之間進(jìn)行。
反應(yīng)可在常壓下進(jìn)行，但也可在升高的壓力下進(jìn)行。一般而言，反應(yīng)在1～100巴，優(yōu)選1～10巴的壓力下進(jìn)行。
當(dāng)進(jìn)行本發(fā)明的方法時，相對于1mol化合物(Ⅱ)，使用1～15mol，優(yōu)選1～6mol的化合物(Ⅲ)。
在反應(yīng)中可以用合適的氨基保護(hù)基例如用叔丁氧羰基保護(hù)游離的氨基，并且在反應(yīng)完成以后再通過用合適的酸例如鹽酸或三氟乙酸處理脫去保護(hù)基(參見Houben-Weyl，MethodenderOrganischenChemie[有機(jī)化學(xué)方法]，Vol.E4，P144(1983);J.F.W.McOmie，ProtectiveGroupsinOrganicChemistry(1973)，P43)。
本發(fā)明的酯可按下法制得在溶劑例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜或四甲基脲中，在約0～100℃(優(yōu)選0～50℃)的溫度下，使羧酸(所述酯以該羧酸為基礎(chǔ)制備)的堿金屬鹽與合適的鹵代烷基衍生物反應(yīng)，其中可用保護(hù)基例如叔丁氧羰基任選保護(hù)所述羧酸的氮原子。
按常規(guī)方法制備本發(fā)明化合物的酸加成鹽，例如將內(nèi)銨鹽(betaine)溶解在適量的稀酸中并用與水混溶的有機(jī)溶劑例如甲醇、乙醇、丙酮或乙腈使鹽析出。還可以在水或醇例如乙二醇單乙基醚中加熱等當(dāng)量的內(nèi)銨鹽和酸，然后蒸發(fā)至干或者抽濾出沉析的鹽?？伤幱玫柠}意義上可理解為例如鹽酸鹽、硫酸鹽、乙酸鹽、乙醇酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、4-甲苯磺酸鹽、半乳糖醛酸鹽、葡糖酸鹽、雙羥萘酸鹽、谷氨酸鹽或天冬氨酸鹽。本發(fā)明化合物還可與酸性或堿性離子交換劑結(jié)合。
本發(fā)明羧酸的堿金屬鹽或堿土金屬鹽可按下法制得例如將內(nèi)銨鹽溶解在過量的堿金屬或堿土金屬氫氧化物溶液中，過濾不溶解的內(nèi)銨鹽并將濾液蒸發(fā)至干。藥學(xué)上適用的鹽是其鈉鹽、鉀鹽或鈣鹽。通過將堿金屬鹽或堿土金屬鹽與合適的銀鹽例如硝酸銀反應(yīng)，可以制得相應(yīng)的銀鹽。
本發(fā)明化合物具有強的抗生素作用并且毒性低、抗革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物的抗菌譜廣，尤其是可以對抗對各種抗生素(例如青霉素、頭孢霉素、氨基糖甙、磺胺和四環(huán)素)具有抗性的微生物。
這些有用的性質(zhì)使得本發(fā)明化合物可用作醫(yī)藥或獸醫(yī)藥領(lǐng)域的化學(xué)治療劑，并且可作為無機(jī)或有機(jī)物質(zhì)(尤其是所有類型的有機(jī)物質(zhì)例如聚合物、潤滑劑、染料、纖維、皮革、紙件、木材以及食品和水)的防腐物質(zhì)。
本發(fā)明化合物對相當(dāng)廣譜的微生物具有活性。用本發(fā)明化合物可以防治革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌以及類細(xì)菌的微生物，并可預(yù)防、改善和/或治療由所述病原體引起的疾病。
本發(fā)明化合物的特征在于其對潛伏期微生物和抗性微生物具有增強的作用。對于潛伏期細(xì)菌，即未顯示其生長的細(xì)菌，本發(fā)明化合物在低于類似物質(zhì)的濃度下起作用。這不僅涉及使用的數(shù)量，而且還涉及其破壞速率。在革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌中，尤其是在金黃色葡萄球菌、不動桿菌屬菌株、藤黃微球菌和糞鏈球菌中，可以觀察到上文所述的結(jié)果。
本發(fā)明化合物在抗細(xì)菌活性方面還顯示出驚人的提高，所述細(xì)菌尤其是具有抗性的金黃色菌葡球菌和糞鏈球菌，對類似物質(zhì)較不敏感。
本發(fā)明化合物對細(xì)菌和類細(xì)菌微生物尤其具有活性。因此本發(fā)明化合物尤其非常適合在人和獸醫(yī)藥中用于預(yù)防和化學(xué)治療由所述致病菌引起的局部和全身感染。
本發(fā)明化合物還適合用于防治原蟲病和蠕蟲病。
本發(fā)明活性化合物對溫血動物無毒性，并且優(yōu)選適用于防治在生長和養(yǎng)育的動物、動物園、實驗室和實驗用動物以及動物保管和養(yǎng)育的寵物中發(fā)生的細(xì)菌疾病。本發(fā)明活性化合物對正常敏感菌株和抗性菌株以及對其全部和各個發(fā)育階段均有活性。通過防治細(xì)菌疾病，降低了疾病、死亡發(fā)生率，并減少了產(chǎn)量降低的情況(例如指肉、奶、羊毛、獸皮、蛋、蜜等的生產(chǎn))。因此利用本發(fā)明活性化合物，可更經(jīng)濟(jì)和更簡便地飼育動物。
生產(chǎn)和養(yǎng)育的動物包括哺乳動物例如牛、馬、綿羊、豬、山羊、駱駝、水牛、驢、兔、黇鹿、馴鹿，毛皮動物例如水貂、灰鼠、浣熊，鳥類例如雞、鵝、火雞、鴨、鴿和各種家養(yǎng)和動物園飼育的鳥類。所述動物還包括生產(chǎn)和觀賞用的魚類。
實驗室和實驗用動物包括小鼠、大鼠、豚鼠、金蒼鼠、狗和貓。
寵物包括狗和貓。
魚包括在淡水和咸水中生長的各種令期的生產(chǎn)、養(yǎng)育、水族館和觀賞用的魚。生產(chǎn)和養(yǎng)育的魚包括例如鯉魚、鰻魚、白鮭、鮭、烏魴、斜齒鳊、紅眼魚、鰨科魚、鰈、庸鰈、日本黃條 (Seriola quinqueradiata)、日本鰻鱺(Anguilla japonica)、紅鯛(Pagurus major)、海鱸(Dicentrarchus labrax)、灰羊魚(Mugilus cephalus)、北鯧鲹、鯛科食用魚(Sparus auratus)、羅非魚屬、Chichlidae species例如Plagioscion、斑點叉尾鯛。本發(fā)明藥劑尤其適用于處理2～4cm體長的魚苗(例如鯉魚苗)。在鰻的鉰育中本發(fā)明藥劑也非常適用。
可以預(yù)防給藥，也可以治療給藥。
以合適的制劑形式將本發(fā)明活性化合物直接或者經(jīng)腸、非經(jīng)胃腸、經(jīng)皮或經(jīng)鼻進(jìn)行給藥。
本發(fā)明活性化合物的經(jīng)腸給藥例如可以粉劑、栓劑、片劑、膠囊劑、糊劑、飲劑、顆粒劑、獸用頓服劑、大丸劑、含藥飼料、含藥飲用水的形式口服進(jìn)行。經(jīng)皮給藥例如可以浸、噴、浴、洗、澆、點和撒的形式進(jìn)行。非經(jīng)胃腸給藥例如可以注射(肌內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)注射)的形式或者通過植入進(jìn)行。
合適的制劑是溶液劑例如注射溶液、口服溶液、稀釋后用于口服給藥的濃縮液、皮膚上或體腔內(nèi)使用的溶液、澆注用制劑、凝膠劑;
用于口服或經(jīng)皮給藥以及用于注射的乳劑和懸浮液劑;
其中將活性化合物置于軟膏基質(zhì)或者水包油或油包水的乳液基質(zhì)中加工的制劑;
固體制劑例如粉劑、預(yù)混合料或濃縮物、顆粒劑、丸劑、片劑、大丸劑、膠囊劑;氣霧劑和吸入劑，含活性化合物的成型物品。
靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和皮下施用的注射溶液劑。
注射溶液劑的配制方法是將活性化合物溶解在合適的溶劑中，并可能加入添加劑例如穩(wěn)定劑、酸、堿、緩沖鹽、抗氧化劑或防腐劑。將溶液劑無菌過濾并裝入瓶內(nèi)。
可提及的溶劑是生理上耐受的溶劑例如水、醇例如乙醇、丁醇、芐醇、甘油、烴類、丙二醇、聚乙二醇、N-甲基吡咯烷酮及其混合液。
活性化合物還可任選溶解在適于注射用的生理上耐受的植物油或合成油中。
可提及的穩(wěn)定劑是促進(jìn)活性化合物溶于主溶劑中或者防止溶液沉淀的溶劑。實施有聚乙烯吡咯烷酮、聚乙氧基化的蓖麻油、聚乙氧基化的脫水山梨糖醇酯。
防腐劑是芐醇、三氯丁醇、對羥基苯甲酸酯、正丁醇。
直接施用口服溶液劑。在將濃縮物稀釋至給藥濃度之后口服施用。按上文注射溶液劑所述配制方法配制口服溶液劑和濃縮物，可以免去無菌操作。
通過滴、涂、擦、噴、潑或者通過浸、浴、洗在皮膚上應(yīng)用溶液劑。按上文注射溶液劑所述的配制方法配制這些溶液劑。
在配制過程中，加入增稠劑可能是有利的。增稠劑是無機(jī)增稠劑例如膨潤土、膠態(tài)二氧化硅、單硬脂酸鋁，有機(jī)增稠劑例如纖維素衍生物、聚乙烯醇及其共聚物、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯。
凝膠劑是用于或涂在皮膚上或者引入到體腔內(nèi)。凝膠劑的制備方法是將按上文注射溶液劑所述的配制方法配制好的溶液用一定量的增稠劑處理，以致產(chǎn)生具有軟膏樣稠度的透明物質(zhì)。所用的增稠劑是進(jìn)一步在上文給出的增稠劑。
將澆注制劑(pouring-onformulation)澆在或噴在皮膚的限定部位，活性化合物或者透過皮膚并全身起作用，或者分布在體表。
澆注制劑的配制方法是將活性化合物溶解、懸浮或乳化在合適的皮膚相容的溶劑或溶劑混合液中。可任選加入其它助劑例如著色劑、促進(jìn)吸收的物質(zhì)、抗氧化劑、遮光劑或粘結(jié)劑。
可提及的溶劑是水、鏈烷醇、二醇類、聚乙二醇、聚丙二醇、甘油，芳族醇例如芐醇、苯乙醇、苯氧乙醇，酯例如乙酸乙酯、乙酸丁酯、苯甲酸芐酯，醚例如亞烷基二醇烷基醚例如一縮丙二醇單甲醚、二甘醇單丁醚，酮例如丙酮、甲乙酮，芳族和/或脂肪族烴，植物油或合成油，DMF，二甲基乙酰胺，N-甲基吡咯烷酮或2-二甲基-4-氧亞甲基-1，3-二氧戊環(huán)。
著色劑是全部的可用于動物并且能夠溶解或懸浮的色素。
促進(jìn)吸收的物質(zhì)是例如DMSO，涂布油例如肉豆蔻酸異丙基酯、一縮丙二醇壬酸酯、聚硅氧烷油、脂肪酸酯、甘油三酯或脂肪醇。
抗氧化劑是亞硫酸鹽或焦亞硫酸氫鹽例如焦亞硫酸氫鉀，抗壞血酸，丁基羥基甲苯，丁基羥基茴香醚和生育酚。
遮光劑是例如二苯甲酮類物質(zhì)或novantisolicacid。
粘結(jié)劑是例如纖維素衍生物、淀粉衍生物、聚丙烯酸酯、天然聚合物(例如藻酸鹽)以及明膠。
乳劑可以口服給藥、經(jīng)皮給藥，或者作為注射劑。
乳劑是油包水類型的，或者是水包油類型的。
乳劑的配制方法是將活性化合物溶解在疏水或親水相中，并借助合適的乳化劑使該相與其它相的溶劑均相，任選加入其它助劑例如著色劑、促進(jìn)吸收的物質(zhì)、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑和增加粘稠度的物質(zhì)。
可提及的疏水相(油)是石蠟油、聚硅氧烷油、天然植物油例如芝麻油、杏仁油、蓖麻油，合成的甘油三酸酯例如辛酸/癸酸的甘油二酸酯、甘油三酸酯與鏈長C8-12的植物脂肪酸或其它特定的天然脂肪酸的混合物，可能還含有羥基的飽和或不飽和脂肪酸的部分甘油酯混合物，C8/C10脂肪酸的甘油單酸酯和甘油二酸酯。
脂肪酸酯例如是硬脂酸乙酯、己二酸二正丁酰酯、月桂酸己酯、一縮丙二醇壬酸酯、含有鏈長C15-C18的飽和脂肪醇的中鏈長的支鏈脂肪酸酯、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、鏈長C12-C18的飽和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、硬脂酸異丙酯、油酸油酯、油酸癸酯、油酸乙酯、乳酸乙酯、蠟狀脂肪酸酯例如鄰苯二甲酸二丁酯、己二酸二異丙酯、涉及后者的酯混合物，特別是脂肪醇例如異十三烷醇、2-辛基十二烷醇、鯨蠟基硬脂醇和油醇。
脂肪酸是例如油酸和其混合物。
可提及的親水相是水、醇例如丙二醇、甘油、山梨糖醇及其混合液。
可提及的乳化劑是非離子型表面活性劑例如聚乙氧基化的蓖麻油、聚乙氧基化的脫水山梨糖醇單油酸酯、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、甘油單硬脂酸酯、聚氧乙基硬脂酸酯、烷基苯酚聚乙二醇醚;
兩性表面活性劑是例如N-月桂基-β-亞氨基-二丙酸二鈉或卵磷脂;
陰離子型表面活性劑是例如月桂基硫酸鈉、脂肪醇醚硫酸鹽、單/二烷基聚二醇醚正磷酸酯單乙醇胺鹽;陽離子型表面活性劑例如氯化鯨蠟基三甲基銨。
可提及的其它助劑是增加粘稠度的物質(zhì)和穩(wěn)定乳劑的物質(zhì)例如羧甲基纖維素、甲基纖維素和其它的纖維以及淀粉衍生物、聚丙烯酸酯、藻酸酯、阿拉伯凝膠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、甲基乙烯基醚與馬來酐的共聚物、聚乙二醇、蠟、膠態(tài)二氧化硅或所述物質(zhì)的混合物。
懸浮劑可口服、經(jīng)皮或者作為注射劑給藥。懸浮劑的配制方法是將活性物質(zhì)懸浮在載體中，任選加入其它助劑例如潤濕劑、著色劑，促進(jìn)吸收的物質(zhì)、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑。
可提及的載體是所有均相的溶劑和溶劑混合物。
可提及的潤濕劑(分散劑)是上文進(jìn)一步給出的表面活性劑。
可提及的另外的助劑是上文中進(jìn)一步給出的助劑。
半固體制劑可口服或經(jīng)皮給藥。半固體制劑與上述懸浮液劑和乳劑的區(qū)別僅在于半固體制劑有更高的粘稠度。
為制備固體制劑，將活性化合物與合適的賦形劑混合，任選加入助劑，并制成所需形式。
可提及的賦形劑是所有的生理上耐受的固體惰性物質(zhì)。所有這些惰性物質(zhì)包括無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)。無機(jī)物質(zhì)是例如氯化鈉，碳酸鹽例如碳酸鈣、碳酸氫鹽，礬土，硅酸，粘土，沉淀硅膠或膠態(tài)硅膠，磷酸鹽。
有機(jī)物質(zhì)是例如糖，纖維素，食品和飼料例如奶粉、動物粉、豆面和谷粉、淀粉。
助劑是防腐劑、抗氧化劑和著色劑，這些已在上文中提及。
其它合適的助劑是潤滑劑和滑動劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、膨潤土，促進(jìn)崩解的物質(zhì)例如淀粉或交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮，粘結(jié)劑例如淀粉、明膠或直鏈的聚乙烯吡咯烷酮，以及無水粘結(jié)劑例如微晶纖維素。
本發(fā)明活性化合物還可與增效劑或與其它活性化合物以混合物存在于制劑中。
備用的制劑含有10ppm～20%(重量)，優(yōu)選0.1～10%(重量)濃度的活性化合物。
在用前稀釋的制劑含有0.5～90%(重量)，優(yōu)選1～50%(重量)濃度的活性化合物。
一般而言，已經(jīng)證明，為獲得有效結(jié)果，每天每公斤體重施用約0.5～約50mg，優(yōu)選1～20mg活性化合物是有利的。
也可將活性化合物與動物的飼料或飲用水一起施用。
與合適的可食用物質(zhì)并用，飼料和食品中含有0.01～100ppm，優(yōu)選0.5～50ppm活性化合物。
上述飼料和食品既可用于治療目的，亦可用于預(yù)防目的。
這種飼料和食品的配制方法是將含有0.5～30%(優(yōu)選1～20%)(重量)活性化合物并混有可食用有機(jī)或無機(jī)載體的濃縮物或預(yù)混物與常規(guī)飼料混合?？墒秤幂d體是例如玉米面或玉米和大豆面或無機(jī)鹽，其中優(yōu)選含有少量可食用的防塵油例如玉米油或大豆油。以這種方法得到的預(yù)混物然后在喂飼給動物之前加到全部的飼料中。
在Iso-Sensitest瓊脂(Oxoid)上通過系列稀釋法測定本發(fā)明化合物的最小抑制濃度(MIC)。對于每一試驗物質(zhì)，制備一系列瓊脂板，在每板中含有雙倍稀釋逐漸降低濃度的活性化合物。用多點接種器(Denly)接種各瓊脂板。為了接種，使用已預(yù)先稀釋的培養(yǎng)過夜的病原菌，使得每一接種點含有約能形成104菌落的顆粒。將接種過的瓊脂板在37℃培養(yǎng)，并在約20小時后計數(shù)微生物的生長情況。MIC值(μg/ml)是指裸眼檢測不到微生物生長情況的最低的活性化合物濃度。
在下表中列出了一些本發(fā)明化合物的MIC值。
活性化合物的制備實施例1 8-氨基-9-氟-3-甲基-10-(2-氧雜-5，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-8-基)-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在110℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與86mg(0.671mmol)2-氧雜-5，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷一起在3ml吡啶中加熱6小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量102mg(理論值的72%)，熔點295～296℃。
實施例2 8-氨基-10-(2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在120℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與127mg(1.01mmol)2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷一起在3ml二甲亞砜(DMSO)中加熱2小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量99mg(理論值的72%)，熔點284℃(分解)。
實施例3 8-氨基-10-((1S，6S)-2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在130℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與85mg(0.674mmol)(1S，6S)-2，8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷一起在3ml二甲亞砜(DMSO)中加熱2小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量101mg(理論值的74%)，熔點＞300℃(分解)。
實施例4 8-氨基-9-氟-3-甲基-10-(2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在130℃和氬氣氛下將200mg(0.673mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與200mg(1.31mmol)2-甲氨基-8-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷-3-烯一起在6mlDMSO中加熱3小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量274mg(理論值的95%)，熔點256℃。
實施例5 8-氨基-10-(2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在120℃和氬氣氛下將200mg(0.673mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與186mg(1.35mmol)2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在6mlDMSO中加熱2小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量193mg(理論值的69%)，熔點274～275℃。
實施例6 8-氨基-10-(2-氨基-5-異丙基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在130℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與121mg(0.671mmol)2-氨基-5-異丙基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在3mlDMSO中加熱2小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量69mg(理論值的45%)，熔點227℃。
實施例7 8-氨基-10-(2-氨基-5-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在100℃和氬氣氛下將200mg(0.673mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與205mg(1.35mmol)2-氨基-5-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在6ml吡啶中加熱5小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量233mg(理論值的81%)，熔點225℃。
實施例8 8-氨基-10-(2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在130℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與103mg(0.672mmol)2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在3mlDMSO中加熱3小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量105mg(理論值的73%)，熔點278～280℃。
實施例9 8-氨基-10-(2-甲氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在110℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與112mg(0.673mmol)2-甲氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在3ml吡啶中加熱14小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量136mg(理論值的91%)，熔點250℃。
實施例10 8-氨基-10-(2-羥基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在120℃和氬氣氛下將100mg(0.336mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與94mg(0.675mmol)2-羥基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯一起在3mlDMSO中加熱4小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量83mg(理論值的59%)，熔點＞300℃(分解)。
實施例11 8-氨基-10-(1SR，2RS，6RS)-2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸在60℃和氮氣氛下將90mg(0.303mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與54mg(0.391mmol)(1SR，2RS，6RS)-2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯一起在10ml吡啶中加熱7小時。在高真空下濃縮混合物，殘余物在乙醇中重結(jié)晶，干燥。
產(chǎn)量120mg(理論值的96%)，熔點＞300℃。
實施例12 8-氨基-9-氟-3-甲基-10-(1SR，2RS，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸按實施例11所述方法，使445mg(1.5mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與295mg(1.95mmol)(1SR，2RS，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(實施例N的產(chǎn)物)反應(yīng)。
產(chǎn)量540mg(理論值的84%)，熔點292℃(分解)。
實施例13 8-氨基-10-(1SR，2SR，6RS)-2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸按實施例11所述方法，使445mg(1.5mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與270mg(1.95mmol)(1SR，2SR，6RS)-2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯反應(yīng)。
產(chǎn)量490mg(理論值的79%)，熔點246℃(分解)。
實施例14 8-氨基-9-氟-3-甲基-7-氧代-10-(1SR，2SR，6SR)-2-(叔丁氧羰基)氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸按實施例11所述方法，使370mg(1.25mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與410mg(1.6mmol)(1SR，2SR，6RS)-2-(叔丁氧羰基)氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷-4-烯反應(yīng)。
產(chǎn)量470mg(理論值的71%)，熔點227℃(分解)。
實施例15 8-氨基-10-((1SR，2SR，6SR)-2-氨甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸的三氟乙酸鹽將400mg(0.75mmol)實施例14的產(chǎn)物懸浮在10ml冰冷卻的三氟乙酸中。在1小時內(nèi)將混合物熱至室溫。加入甲醇后抽濾出沉淀的產(chǎn)物并在干燥箱中于50℃干燥。
產(chǎn)量400mg(定量的)，熔點235℃(分解)。
實施例16
8-氨基-2-(叔丁氧羰基)氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-10-((1SR，2SR，6SR)-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸按實施例11所述的方法，使595mg(2.0mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與620mg(2.6mmol)(1SR，2SR，6RS)-2-(叔丁氧羰基)氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬烷-4-烯反應(yīng)。
產(chǎn)量850mg(理論值的82%)，熔點259℃(分解)。
實施例17 8-氨基-10-((1SR，2SR，6SR)-2-氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸的三氟乙酸鹽按實施例16所述方法，使實施例16的產(chǎn)物(700mg;1.3mmol)與三氟乙酸反應(yīng)。
產(chǎn)量600mg(理論值的90%)，熔點258℃(分解)。
實施例18 8-氨基-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基)氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-9-氟-3-甲基-7-氧代-10-((1SR，2SR，6SR)-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸按實施例11所述方法，使595mg(2.3mmol)8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸與755mg(3.0mmol)(1SR，2SR，6RS)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基)氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯反應(yīng)。
產(chǎn)量1.05mg(理論值的66%)，熔點255℃(分解)。
實施例19 8-氨基-9-氟-3-甲基-10-(1SR，2SR，6SR)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-8-基)-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸的三氟乙酸鹽按實施例15所述方法，使實施例18的產(chǎn)物(1.0g;1.9mmol)與三氟乙酸反應(yīng)。
產(chǎn)量1.0g(理論值的97%)，熔點290℃(分解)。
中間體的制備實施例A8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯A.1.(E)-1-溴-2，4-戊二烯
首先在0℃加入84g(1.0mol)1，4-戊二烯-3-醇。在攪拌下滴加150ml(約1.3mol)48%濃度的氫溴酸水溶液，使得內(nèi)溫不超過5℃。加畢，室溫攪拌1小時。分離有機(jī)相，無需純化而進(jìn)一步反應(yīng)。
產(chǎn)量107～129g(理論值的73～88%)。
A.2.(E)-1-(2-丙烯基氨基)-2，4-戊二烯 首先加入228g(4.0mol)1-氨基-2-丙烯。在攪拌下滴加58.8g(0.4mol)(E)-1-溴-2，4-戊二烯(實施例A.1的標(biāo)題化合物)。通過冷卻，使內(nèi)溫保持在20～30℃范圍內(nèi)。室溫攪拌5小時，在150毫巴的壓力下濃縮混合物。加入溶解在200ml水中的20g(0.5mol)氫氧化鈉，用二氯甲烷(100ml×2)萃取，用硫酸鈉干燥，加入0.1g4-羥基茴香醚，濃縮并在40毫巴壓力下蒸餾。為了穩(wěn)定，向餾出液中加入10～20ppm的4-羥基茴香醚。
產(chǎn)量33-35g(理論值的67-72%)，沸點77～82℃/40毫巴。
1H-NMR(CDCl3)δ＝6.07-6.48(m，2H);5.64-6.07(m，2H);5.00-5.27(m，4H);3.19-3.36ppm(m，4H).
A.3.N-[(E)-2，4-戊二烯基]-N-(2-丙烯基)-乙酰胺 首先加入24.6g(0.2mol)(E)-1-(2-丙烯基氨基)-2，4-戊二烯(實施例A.2的標(biāo)題化合物)，再滴加22.4g乙酸酐并室溫攪拌過液。濃縮并作為產(chǎn)物粗品進(jìn)一步反應(yīng)。
A.4.8-乙?；?8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯 將33.1g(0.2mol)N-[(E)-2，4-戊二烯基]-N-(2-丙烯基)-乙酰胺(實施例A.3的標(biāo)題化合物)溶解在200ml二甲苯中，導(dǎo)入氮氣激流達(dá)15分鐘，加入0.1g4-羥基茴香醚，然后加熱回流過夜并在高真空下蒸餾。
產(chǎn)量23.1g(基于實施例A.2的標(biāo)題化合物計算理論值的70%)，沸點88-93℃/0.05毫巴。
A.5.8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯 在100ml45%濃度的氫氧化鈉溶液、50ml水和100ml1，2-乙二醇的混合物中將16.5g(0.1mol)8-乙?；?8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-2-烯(實施例A.4的標(biāo)題化合物)加熱回流3小時。冷卻后，用乙醚(50ml×4)萃取。合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并在高真空下蒸餾。
產(chǎn)量6.6g(理論值的54%)，沸點36-44℃/0.35毫巴。
1H-NMR(CDCl3)δ＝5.79(m，1H);5.74(m，1H);3.03-3.17(m，2H);2.47-2.72(m，2H);2.06-2.30(m，2H);1.91-2.06(m，2H);1.68(m，1H);1.45ppm(m，1H).
實施例B(1RS，2RS，6SR)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體B)
B.1.N-[(E)-2，4-戊二烯基]-鄰苯二甲酰亞胺 首先加入在800mlDMF中的185g(1.0mol)鄰苯二甲酰亞胺鉀。在攪拌下滴加147g(1.0mol)(E)-1-溴-2，4-戊二烯(實施例A.1的標(biāo)題化合物)，同時通過冷卻使內(nèi)溫保持在30℃以下。室溫攪拌過夜。然后在攪拌下將該批料加至1.6L冰-水中，過濾出沉淀，用水洗滌并在室溫下干燥直至恒重。
產(chǎn)量177-200g(理論值的83～94%)，熔點118-121℃(乙醇中重結(jié)晶的樣品)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝7.85和7.72(m，4H，芳基-H);6.2-6.4(m，2H，C-3和C-4上的H);5.75(dt，1H，C-2上的H，J＝14和6Hz);5.20(d，1H，C-5上的Ha，J＝15Hz);5.10(d，1H，C-5上的Hb，J＝8Hz);4.33ppm(d，2H，C-1上的H，J＝6Hz).
B.2.(E)-1-氨基-2，4-戊二烯 首先將400g二(2-氨基乙基)胺和213g(1.0mol)N-[(E)-2，4-戊二烯基]鄰苯二甲酰亞胺(實施例B.1的標(biāo)題化合物)加至2L裝有10cmVigreux柱的蒸餾儀中并將混合物在60毫巴的壓力下加熱至沸騰。產(chǎn)物在60毫巴的壓力下在45～60℃的范圍內(nèi)蒸餾。為了穩(wěn)定，向餾出液中加入10～20ppm的4-羥基茴香醚。
產(chǎn)量71～80g(理論值的86～96%)。
B.3.(E)-4-[(E)-2，4-戊二烯基氨基]-2-丁烯酸乙酯 在0℃下首先加入41.6g(0.5mol)(E)-1-氨基-2，4-戊二烯(實施例B.2的標(biāo)題化合物)和在250mlTHF中的50.6g(0.5mol)三乙胺并滴加溶解在250mlTHF中的96.5g(0.5mol)(E)-4-溴-2-丁烯酸乙酯。通過冰冷卻使內(nèi)溫保持在5℃以下。在0℃攪拌5小時然后室溫攪拌過夜。加入500mlMTBE，然后加入500ml1M氫氧化鈉溶液，振搖，分離相，用MTBE(100ml×1)萃取水相，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，加入100ml甲苯和0.1g4-羥基茴香醚并濃縮(在該過程中要避免溫度高于40℃)。在1Kg硅膠(63～200μm)上通過柱色譜法純化殘余物，用環(huán)己烷/丙酮(2∶1)洗脫。在濃縮前再次加入0.1g4-羥基茴香醚并且在濃縮過程中避免溫度高于40℃。
產(chǎn)量52.7-58.6g(理論值的54-60%)黃色油狀物，Rf＝0.24。
1H-NMR(CDCl3)δ＝6.99(dt，1H，J＝15和5.5Hz);6.1-6.45(m，2H);5.98(d，1H，J＝15Hz);5.75(dt，1H，J＝15和6.5Hz)，5.18(d，1H，J＝15Hz);5.06(d，1H，J＝10Hz);4.19(q，2H);3.42(dd，2H);3.31(d，2H);1.29ppm(t，3H).
B.4.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體B) 首先加入溶解在250ml甲苯中的97.5g(0.5mol)(E)-4-[(E)-2，4-戊二烯基氨基]-2-丁烯酸乙酯(實施例B.3的標(biāo)題化合物)，再滴加溶解在250ml甲苯中的114.5g(0.525mol)二碳酸二叔丁酯并且室溫攪拌過夜。隨后導(dǎo)入氮氣激流達(dá)15分鐘，加入0.1g4-羥基茴香醚，然后加熱回流6小時。濃縮，在1Kg硅膠(63-200μm)上通過柱色譜法純化殘余物，用環(huán)己烷/丙酮(8∶1)洗脫。
產(chǎn)量109-134g(理論值的74-91%)淡黃色油狀物;兩種非對映體A和B的混合物，比率為A∶B＝4∶1。
Rf＝0.25。
1H-NMR(Cl2DC-CDCl2;80℃)δ＝5.77(m，1H(A)和1H(B));5.68(m，1H(A)和1H(B));4.14(m，2H(A)和2H(B));3.65(m，2H(A)和1H(B));3.48(dd，1H(B));3.27(dd，1H(B));3.00(m，1H(A)和1H(B));2.85(dd，1H(A));2.76(m，1H(B));2.60(m，1H(A));2.25-2.55(m，3H(A)和4H(B));1.93(m，1H(A));1.51(s，9H(B));1.44(s，9H(A));1.25ppm(t，3H(A)和3H(B)).
B.5.(1RS，2RS，6SR)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體B) 首先加入在20ml二噁烷中的6.0g(20mmol)實施例B.4的標(biāo)題化合物，再在冷卻下滴加20ml濃鹽酸，以致使得內(nèi)溫不超過30℃。加完后攪拌10分鐘。加入40ml二氯甲烷并滴加入40ml20%濃度的冰冷卻的氫氧化鈉溶液，同時用冰冷卻。分離有機(jī)相，用二氯甲烷萃取水相一次，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥并濃縮。在100g硅膠(63-200μm)上通過柱色譜法純化3.0g產(chǎn)物粗品，用環(huán)己烷/乙醇/17%氨水(1∶2∶0.1)洗脫。
產(chǎn)量0.8g非對映體A和0.8g非對映體B，Rf＝0.79實施例B.4的標(biāo)題化合物，0.21非對映體B，0.11非對映體A，
1H-NMR(CDCl3)非對映體Aδ＝5.83(d，1H);5.69(m，1H);4.15(q，2H);3.21-3.38(m，2H);2.52-2.89(m，3H);2.21-2.52(m，3H);1.95(m，1H);1.28ppm(t，3H).
非對映體Bδ＝5.64-5.87(m，2H);4.16(q，2H);3.14-3.33(m，2H);2.82(dd，1H);2.15-2.74(m，6H);1.28ppm(t，3H).
實施例C(1SR，2RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯C.1.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸 首先加入溶解在500ml水中的30.8g(0.55mol)氫氧化鉀。加入溶解在500ml甲醇中的147.7g(0.5mol)實施例B.4的標(biāo)題化合物，并且在60℃和氮氣氛下攪拌8小時。冷卻后，用500ml水稀釋反應(yīng)溶液，在攪拌下慢慢傾入125ml乙酸中。加畢，在冰浴中靜置30分鐘，抽濾出沉淀，用水洗并且在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量84-98g(理論值的63-73%)，熔點174-176℃(在異丙醇/水(1∶1)中重結(jié)晶的樣品)。
1H-NMR(Cl2DC-CDCl2;80℃)δ＝5.83(m，1H，C-5上的H);5.74(m，1H，C-4上的H);3.65-3.80(m，2H，C-7上的Ha和C-9上的Ha);3.09(dd，1H，C-9上的Hb);2.92(dd，1H，C-7上的Hb);2.70(m，1H，C-2上的H);2.35-2.60(m，3H，C-3上的Ha和Hb，C-6上的H);2.01(m，1H，C-1上的H);1.5ppm(s，9H).
C.2.(1SR，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-乙氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先加入53.3g(0.2mol)實施例C.1的標(biāo)題化合物和溶解在200ml無水THF中的22.2g(0.22mol)三乙胺。滴加溶解在40mlTHF中的22.8g(0.21mol)氯甲酸乙酯，同時用冰/氯化鈉混合物冷卻，以使得內(nèi)溫不超過-10℃。加畢，在低溫下攪拌1小時，隨后在激烈攪拌下滴加冰冷卻的在50ml水中的15.6g(0.24mol)疊氮化鈉，以使得內(nèi)溫不超過-10℃。加畢，在低溫下攪拌30分鐘，隨后依次加入300ml水和400ml甲苯。
分離有機(jī)相，用硫酸鈉干燥并在15毫巴壓力下濃縮至原始體積的一半(浴溫低于25℃)。加入100ml乙酸，在攪拌下慢慢加熱(其速率為可使氮氣冒出)，在氮氣完全冒出后回流4小時。濃縮并在甲醇/水(85∶15)中重結(jié)晶產(chǎn)物粗品，在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量24.2-28.5g(理論值的39.46%)標(biāo)題化合物，
熔點120-122℃。
1H-NMR(CDCl3)δ＝5.78和5.73(2d，1H，C-5上的H);5.64(m，1H，C-4上的H);4.59(br.s，1H，NH);4.12(m，2H，乙氧基-CH2);3.90(m，1H，C-2上的H);3.74和3.67(2m，1H，C-7上的Ha);3.67和3.56(2m，1H，C-9上的Ha);3.12(m，1H，C-9上的Hb);2.92(m，1H，C-7上的Hb);2.67(m，1H，C-3上的Ha);2.49(m，1H，C-6上的H);1.95(m，1H，C-3上的Hb);1.83(m，1H，C-1上的H);1.46(s，9H);1.24ppm(m，3H，乙氧基-CH3).
通過加入10%濃度的鹽酸，將水相調(diào)至pH2-3，在冰浴中靜置30分鐘，抽濾出沉淀，用水洗并在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量16.0-19.2g(實施例C.1標(biāo)題化合物的30-36%)(回收原料化合物)。
C.3.(1SR，2RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先加入31.0g(0.1mol)實施例C.2的標(biāo)題化合物在100ml甲醇/水(1∶1)混合物中的懸浮液。快速加入100ml濃鹽酸(稍微放熱，最高至約40℃，得到均相溶液)并攪拌直至氣體放出完畢(約10分鐘)。在攪拌和冰冷卻的同時加入200ml冰水并滴加70ml45%濃度的氫氧化鈉溶液。用二氯甲烷(50ml×4)萃取，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，濃縮并在高真空下蒸發(fā)溶劑殘余物。該物質(zhì)在濃縮時固化。
產(chǎn)量13.7～16.6g(理論值的65-79%)粉棕色無定形固體。
Rf＝0.81實施例C.2的標(biāo)題化合物0.11標(biāo)題化合物二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(15∶4∶0.5)1H-NMR(CDCl3)δ＝5.78(d，1H，C-5上的H);5.63(m，1H，C-4上的H);4.94(br.d，1H，NH);4.10(m，2H，乙氧基-CH2);3.88(m，1H，C-2上的H);3.28(m，1H，C-7上的Ha);3.19(m，1H，C-9上的Ha);2.84(m，1H，C-9上的Hb);2.57-2.62(m，2H，C-3上的Ha和C-7上的Hb);2.43(m，1H，C-6上的H);1.95(m，1H，C-3上的Hb);1.79(m，1H，C-3上的H);1.23ppm(m，3H，乙氧基-CH3).
實施例D(1SR，2RS，6SR)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
在氮氣氛下首先加入在25ml無水乙醚中的1.9g(50mmol)氫化鋰鋁。滴加在50ml無水四氫呋喃中的5.25g(25mmol)實施例C.3的標(biāo)題化合物并加熱回流3小時。進(jìn)一步加入0.95g(25mmol)氫化鋰鋁并再次加熱回流3小時。在冰冷卻下慢慢滴加水直至形成了白色沉淀。抽濾出沉淀，用乙醇(100ml×2)煮沸。將乙醇萃取液與反應(yīng)母液合并，加入50ml甲苯，濃縮并在高真空下蒸發(fā)溶劑殘余物。
產(chǎn)量1.95g(理論值的77%)無定形固體。
Rf＝0.11，二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(2∶4∶1)1H-NMR(CDCl3)δ＝5.77(d，1H，C-5上的H);5.67(m，1H，C-4上的H);3.33(dd，1H，C-7上的Ha);3.26(dd，1H，C-9上的Ha);2.73-2.82和2.54-2.63(2m，4H，C-2上的H，C-3上的Ha，C-7上的Hb和C-9上的Hb);2.41(s，3H，CH3N);2.34(m，1H，C-6上的H);1.90(m，1H，C-3上的Hb);1.70ppm(m，1H，C-1上的H).
實施例E(1RS，2RS，6SR)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯E.1.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體B)
在氮氣氛下首先加入在200ml無水1，2-二甲氧基乙烷中的29.5g(0.1mol)實施例B.4的標(biāo)題化合物。在內(nèi)溫低于-65℃的情況下滴加150ml1.5MDIBAH的甲苯溶液(0.225mol)。加畢，移去冷卻浴并使反應(yīng)升至室溫。在室溫下攪拌2小時。
在激烈攪拌下滴加60ml甲醇(放熱反應(yīng));通過用冷水浴冷卻，使內(nèi)溫保持在35～45℃之間。隨后滴加20ml5%濃度的氫氧化鈉溶液。加畢攪拌10分鐘。抽濾出沉淀，在攪拌下用乙醇(150ml×2)煮沸，將乙醇萃取液與反應(yīng)溶液合并，濃縮，在高真空下蒸發(fā)溶劑殘余物并且在250g硅膠(63-200μm)上通過柱色譜法純化殘余物，用環(huán)己烷/丙酮(4∶1)洗脫。
產(chǎn)量12.9-17.7g(理論值的51-70%)淡黃色油狀物;非對映體A和B的混合物，比率為4∶1。
Rf＝0.36實施例B.4的標(biāo)題化合物，0.12標(biāo)題化合物A和B，經(jīng)較長時間放置后產(chǎn)物粗品固化。通過在乙醚/石油醚中重結(jié)晶，可以得到主要是非對映體A的非對映體純的樣品。
1H-NMR(CDCl3)(非對映體A)δ＝5.67-5.82(m，2H，C-4和C-5上的H);3.50-3.77(m，4H，C-7上的Ha，C-9上的Ha和羥甲基-CH2);3.02(dt，1H，C-9上的Hb);2.85(m，1H，C-7上的Hb);2.2-2.4(m，3H);1.87-2.00(m，3H);1.62(m，1H，C-1上的H);1.46ppm(s，9H).
E.2.(1RS，2RS，6SR)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先加入在10ml甲醇中的2.5g(10mmol)實施例E.1的標(biāo)題化合物A?？焖偌尤?0ml濃鹽酸并攪拌30分鐘。用水稀釋至2倍體積然后在攪拌和冰冷卻下滴加45%濃度的氫氧化鈉溶液至pH≥12。濃縮，在攪拌下用乙醇將殘余物煮沸兩次，濃縮乙醇萃取液并在高真空下蒸發(fā)溶劑殘余物。
產(chǎn)量2.1g(產(chǎn)物含有NaCl殘余物)Rf＝0.20二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(2∶4∶1)1H-NMR(d6-DMSO)δ＝5.76(d，1H);5.62(d，1H);3.47-3.56(m，2H，C-7上的Ha和C-9上的Ha);3.32-3.47(m，1H，羥甲基-CH2的Ha);3.23-3.32(m，1H，羥甲基-CH2的Hb);2.77(t，1H，C-9上的Hb);2.64(t，1H，C-7上的Hb);2.10-2.24(m，2H，C-3上的Ha和C-6上的H);1.77-1.88(m，1H，C-3上的Hb);1.69(m，1H，C-2上的H);1.40ppm(m，1H，C-1上的H).
實施例F(1RS，2RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯F.1.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體B) 首先加入在25ml無水吡啶中的12.7g(0.05mol)實施例E.1的標(biāo)題化合物(非對映體A和B的混合物粗品)并冷卻至-15℃。分批加入11.0g(0.0575mol)4-甲苯磺酰氯，使得內(nèi)溫不超過-5℃。加畢，在-5～-15℃的溫度下攪拌2小時，然后在室溫攪拌3小時。加入5g冰，攪拌5分鐘，加至50ml水中，抽濾出沉淀，用水洗滌并在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量14.4-16.3g(理論值的71-80%)粉白色固體，非對映體A和B的混合物。
經(jīng)在甲醇中重結(jié)晶，制得主要是非對映體A的非對映體純的樣品。
熔點111-113℃1H-NMR(CDCl3)(非對映體A)δ＝7.79(m，2H，芳基-H);7.36(d，2H，芳基-H);5.74和5.78(2d，1H，C-5上的H);5.64(m，1H，C-4上的H);3.87-3.97(m，2H，甲苯磺酰-OCH2-);3.59和3.67(2dd，1H，C-7上的Ha);3.48(dd，1H，C-9上的Ha);2.78-2.96(m，2H，C-7上的Hb和C-9上的Hb);2.47(s，3H，芳基-CH3);2.22-2.36(m，2H，C-3上的Ha和C-6上的H);2.06(m，1H，C-2上的H);1.80-1.98(m，1H，C-3上的Hb);1.59(m，1H，C-1上的H);1.45和1.47ppm(2s，9H).
F.2.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體A)和(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(非對映體B) 在70℃下將20.5g(0.05mol)實施例F.1的標(biāo)題化合物(非對映體A和B的混合物粗品)和6.5g(0.1mol)疊氮化鈉在100mlDMF中加熱4小時。將反應(yīng)溶液加至200ml水中，用石油醚(200ml×1)萃取，石油醚相用50ml水洗滌一次，用硫酸鈉干燥并在室溫下濃縮。
將殘余物溶解在80mlTHF中并滴加至溶于80mlTHF的13.1g(0.05mol)三苯膦中。加畢，在室溫下攪拌20小時，然后慢慢滴加150ml水并且在加完后攪拌15分鐘。在冷卻下滴加鹽酸(濃HCl/水1∶3)直至pH為3-4。在室溫和真空下蒸發(fā)THF，冷卻反應(yīng)溶液至0℃并抽濾出沉淀的氧化三苯膦(或者如果是油狀物，用MTBE溶解)。
通過加入10%濃度的氫氧化鈉溶液，將水相調(diào)至pH為≥12，用二氯甲烷(100ml×2)萃取，合并的萃取液用硫酸鈉干燥，隨后加入6.0g(0.06mol)三乙胺，在攪拌下滴加溶解在20ml二氯甲烷中的6.0g(0.055mol)氯甲酸乙酯，在室溫下攪拌過夜，用100ml水將反應(yīng)溶液洗滌一次，用硫酸鈉干燥并濃縮。
在100g硅膠(63-200μm)上通過柱色譜法純化23g產(chǎn)物粗品，用環(huán)己烷/丙酮(4∶1)洗脫。
產(chǎn)量12.4g(理論值的7.6%)粘稠油狀物，非對映體A和B的混合物。
Rf值(環(huán)己烷/丙酮2∶1)0.32非對映體A0.29非對映體B在250g硅膠(35-70μm)上通過柱色譜法分離非對映體A和B，用環(huán)己烷/丙酮(8∶1)洗脫。
產(chǎn)量4.3g(理論值的26%)非對映體A(粘稠油狀物)，2.4g(理論值的15%)混合級份，0.6g(理論值的4%)非對映體B。
1H-NMR(Cl2DC-CDCl2;80℃)非對映體Aδ＝5.75(d，1H，C-5上的H);5.66(m，1H，C-4上的H);4.67(br，1H，NH);4.08(q，2H，乙氧基-CH2);3.62(br，2H，C-7上的Ha和C-9上的Ha);3.19(br，1H，CH2-NH上的Ha);3.05(br，CH2-NH上的Hb);2.96(dd，1H，C-9上的Hb);2.81(dd，1H，C-7上的Hb);2.24-2.34(m，2H，C-3上的Ha和C-6上的H);1.78-1.94(m，2H，C-2上的H和C-3上的Hb);1.54(m，1H，C-1上的H);1.43(s，9H);1.22ppm(t，3H，乙氧基-CH3).
非對映體Bδ＝5.69(m，1H，C-4上的H);5.57(m，1H，C-5上的H);4.65(br，1H，NH);4.08(q，2H，乙氧基-CH2);3.52(dd，1H，C-7上的Ha);3.41(dd，1H，C-9上的Ha);3.29(dd，1H，C-9上的Hb);3.24(dd，1H，CH2-NH上的Ha);3.03-3.12(m，2H，C-7上的Hb和CH2-NH上的Hb);2.68(m，1H，C-6上的H);2.12-2.22(m，2H，C-1上的H和C-3上的Ha);1.74-1.87(m，2H，C-2上的H和C-3上的Hb);1.43(s，9H);1.22ppm(t，3H，乙氧基-CH3).
F.3.(1RS，2RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先加入在10ml甲醇中的1.6g(5.7mmol)實施例F.2的標(biāo)題化合物?？焖偌尤?ml濃鹽酸并攪拌30分鐘。用水稀釋至兩倍體積然后在攪拌和冰冷卻下滴加45%濃度的氫氧化鈉溶液至pH≥12。用二氯甲烷萃取4次，合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，濃縮并在高真空下蒸發(fā)溶劑殘余物。
產(chǎn)量0.8g(理論值的63%)粘稠油狀物，Rf＝0.16二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(15∶4∶0.5)1H-NMR(CDCl3)δ＝5.81(d，1H，C-5上的H);5.67(m，1H，C-4上的H);5.00(br，1H，NH);4.10(q，2H，乙氧基-CH2);3.18-3.28和3.08(m，3H和m，1HC-7上的Ha，C-9上的Ha，CH2-NH-CO上的Ha和Hb);2.67(dd，1H，C-9上的Hb);2.53(dd，1H，C-7上的Hb);2.34(m，1H，C-3上的Ha);2.25(m，1H，C-6上的H);1.79-1.96(m，2H，C-2上的H和C-3上的Hb);1.50(m，1H，C-1上的H);1.24ppm(t，3H，乙氧基-CH3).
實施例G(1RS，2SR，6RS)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯G.1.(E)-1-叔丁氧羰基氨基-2，4-戊二烯 首先加入在50mlMTBE中的8.3g(0.1mol)(E)-1-氨基-2，4-戊二烯(實施例B.2的標(biāo)題化合物)并加入20mg4-羥基茴香醚。隨后在內(nèi)溫20～30℃下滴加溶解在50mlMTBE中的22.9g(0.105mol)二碳酸二叔丁酯。加畢，在室溫下攪拌20小時。濃縮并在40℃和高真空下蒸發(fā)二碳酸二叔丁酯的殘余物。
產(chǎn)量18.9g(產(chǎn)物粗品)無色油狀物，Rf＝0.25，環(huán)己烷/丙酮(4∶1)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝6.05-6.43(m，2H，C-3和C-4上的H);5.68(dd，1H，C-2上的H，J＝14和6Hz);5.17(dd，1H，C-5上的Ha，J＝16Hz);5.07(dd，1H，C-5上的Hb，J＝10Hz);4.75(br，1H，NH);3.77(t，2H，C-1上的H);1.45ppm(s，9H).
G.2.(1RS，2RS，6RS)-2-叔丁氧羰基氨基甲基-7，9-二氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-3-烯 首先加入在250mlMTBE中的83.2g(1.0mol)(E)-1-氨基-2，4-戊二烯(實施例B.2的標(biāo)題化合物)并加入0.1g4-羥基茴香醚。隨后在20-30℃的內(nèi)溫下滴加溶解在250mlMTBE中的229.2g(1.05mol)二碳酸二叔丁酯。加畢，于室溫攪拌20小時。濃縮反應(yīng)混合物并溶解在1L甲苯中。加入103.0g(1.05mol)馬來酐并在60℃的內(nèi)溫下攪拌24小時。抽濾出沉淀，用甲苯洗滌并在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量208.2g(理論值的74%)白色晶體，熔點157～159℃。
1H-NMR(d6-DMSO)δ＝5.81(m，1H，C-4上的H);5.59(d，1H，C-3上的H);3.77(dd，1H，CH2-NH上的Ha);3.44(m，2H，C-1上的H和CH2-NH上的Hb);2.94(m，1H，C-2上的H);2.66(m，1H，C-6上的H);2.16(m，1H，C-5上的Ha);2.06(m，1H，C-5上的Hb);1.43ppm(s，9H).
G.3.(1RS，2SR，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸甲酯 首先加入在250mlTHF中的83.2g(1.0mol)(E)-1-氨基-2，4-戊二烯(實施例B.2的標(biāo)題化合物)并加入0.1g4-羥基茴香醚。隨后在20-30℃的內(nèi)溫下滴加溶解在250mlTHF中的229.2g(1.05mol)二碳酸二叔丁酯。加畢，于室溫攪拌20小時。加入103.0g(1.05mol)馬來酐并加熱回流5小時。濃縮并將殘余物溶解在500ml甲醇中，加入30ml對甲苯磺酸，然后再次加熱回流5小時。冷卻后，快速滴加溶解在500ml水中的20g碳酸鈉的溶液，同時用冰冷卻和攪拌，并將混合物在冰浴中靜置另外的30分鐘。抽濾出沉淀，用少量水洗滌，在50℃下干燥至恒重。
產(chǎn)量125-148g(理論值的64-76%)白色晶體，熔點190-193℃。
1H-NMR(d6-DMSO)δ＝7.50(s，1H，NH);5.77(m，1H，C-4上的H);5.56(m，1H，C-5上的H);3.60(s，3H，CH3O);3.42(dd，1H，C-7上的Ha);3.16(dd，1H，C-1上的H);3.00(m，1H，C-6上的H);2.88(dd，1H，C-7上的Hb);2.67(m，1H，C-2上的H);2.02-2.18ppm(m，2H，C-3上的Ha和Hb).
G.4.(1RS，2SR，6RS)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先在惰性氣氛下加入19.6g(0.1mol)實施例G.3的標(biāo)題化合物在100mlTHF中的懸浮液。在10-20℃的內(nèi)溫下滴加100ml(0.15mol)1.5MDIBAH的甲苯溶液。將如此得到的透明均相溶液滴加到1.9g氫化鋰鋁在50mlTHF的懸浮液中。加畢，于室溫攪拌15分鐘，然后在回流溫度下攪拌30分鐘。冷卻后，分批加入3.8g(0.1mol)氫化鋰鋁，然后加熱回流24小時。冷卻后，依次滴加50ml水和10ml1M氫氧化鈉溶液，抽濾出沉淀并用乙醇(150ml×3)煮沸。合并濾液和萃取液并濃縮。
產(chǎn)量16.4g(產(chǎn)物含有氫氧化鋰和氫氧化鋁)，Rf＝0.3二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(2∶4∶1)。
實施例H(1RS，2SR，6RS)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯H.1.(1RS，2SR，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 將16.4g實施例G.4的產(chǎn)物粗品(相當(dāng)于0.1mol實施例G.4的標(biāo)題化合物)溶解在100mlTHF中。在0-5℃的內(nèi)溫下滴加溶解在100mlTHF中的22.9g(0.105mol)二碳酸二叔丁酯，在0℃下攪拌24小時，然后于室溫攪拌另外的24小時。濃縮并在250g硅膠(63-200μm)上通過色譜法純化產(chǎn)物粗品，用環(huán)己烷/丙酮(2∶1)洗脫。
產(chǎn)量13.7g(兩步理論值的54%);粘稠油狀物。
Rf＝0.21標(biāo)題化合物，0.08實施例G.4的標(biāo)題化合物。
H.2.(1RS，2SR，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例F.1的方法，由實施例H.1的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的81-83%，熔點160-162℃，1H-NMR(CDCl3)δ＝7.79(m，2H，芳基-H);7.37(d，2H，芳基-H);5.67(m，1H，C-4上的H);5.47(m，1H，C-5上的H);3.78-3.97(m，2H，甲苯磺酰-OCH2-);3.13-3.42(m，3H，CH2-N);2.95(t，1H，CH2-N);2.74(m，1H);2.54(m，1H);2.47(s，3H，芳基-CH3);2.32(m，1H，C-2上的H);2.06(m，1H，C-3上的Ha);1.66-1.83(m，1H，C-3上的Hb);1.44ppm(s，9H).
H.3.(1RS，2SR，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例F.2的方法，由實施例H.2的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
在硅膠(63-200μm)上通過柱色譜法純化產(chǎn)物粗品，用環(huán)己烷/丙酮(2∶1)洗脫。
產(chǎn)量理論值的76%;透明的粘稠油狀物，Rf＝0.35(環(huán)己烷/丙酮2∶1)1H-NMR(Cl2DC-CDCl2;80℃)δ＝5.69(m，1H，C-4上的H);5.47(d，1H，C-5上的H);4.59(br，1H，NH);4.10(q，2H，乙氧基-CH2);3.38(dd，1H);3.32(m，1H);3.24(m，1H);3.01-3.08(m，3H);2.79(m，1H);2.47(m，1H);2.07(m，2H);1.78(m，1H);1.42(s，9H);1.22ppm(t，3H，乙氧基-CH3).
H.4.(1RS，2SR，6RS)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例C.3的方法，由實施例H.3的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的42%。
Rf＝0.93實施例H.3的標(biāo)題化合物，0.23標(biāo)題化合物，二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(15∶4∶0.5)實施例I(1SR，2RS，3RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯I.1.N-[(2E，4E)-2，4-己二烯基]-鄰苯二甲酰亞胺 按類似于實施例B.1的方法，由(2E，4E)-1-溴-2，4-己二烯制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的77-79%，熔點114-117℃(乙醇中重結(jié)晶的樣品)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝7.85(m，2H);7.72(m，2H);6.25(dd，1H);6.00(ddd，1H);5.5-5.8(m，2H);4.29(d，2H);1.74ppm(d，3H).
I.2.(2E，4E)-1-氨基-2，4-己二烯 類似于實施例B.2的方法，由實施例I.1的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物;
沸程40-70℃/16-18毫巴。
產(chǎn)量理論值的67-83%。
I.3.(E)-4-[(2E，4E)-2，4-己二烯基氨基]-2-丁烯酸乙酯 按類似于實施例B.3的方法，由實施例I.2的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的46%。
1H-NMR(CDCl3)δ＝6.98(dt，1H);5.9-6.25(m，3H);5.5-5.8(m，2H);4.19(q，2H);3.40(dd，2H);3.27(d，2H);1.76(d，3H);1.29ppm(t，3H).
I.4.(1RS，2RS，3RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體A)和(1RS，2RS，3SR，6RS)-8-叔丁氧羰基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(非對映體B) 按類似于實施例B.4的方法，由實施例I.3的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的70%;2種非對映體A和B的混合物，其比率為A∶B＝4∶1。
Rf＝0.49(環(huán)己烷/丙酮2∶1)。
I.5.(1RS，2RS，3RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸 首先加入溶解在20ml水中的1.17g(21mmol)氫氧化鉀。加入溶解在20ml甲醇中的5.9g(19mmol)實施例I.4的標(biāo)題化合物并在氮氣氛中加熱回流48小時。濃縮，溶解在水中，用二氯甲烷萃取一次，用乙酸調(diào)水相至pH3-4，抽濾出沉淀，用水洗，在室溫下干燥并在環(huán)己烷/丙酮(6∶1)中重結(jié)晶。
產(chǎn)量2.25g(理論值的42%)。
熔點189℃。
1H-NMR(d6-DMSO)δ＝5.77(d，1H);5.61(m，1H);3.67(m，1H);3.54(m，1H);2.61-2.95(m，4H);2.30(m，1H);1.82(m，1H);1.40(s，9H);0.90ppm(d，3H).
I.6.(1SR，2RS，3RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-乙氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例C.2的方法，由2.25g(8mmol)實施例I.5的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。與實施例C.2比較的變化在于在乙醇中回流8小時而不是4小時;在100g硅膠(63-200μm)上通過色譜法純化，用甲苯/乙酸乙酯(2∶1)洗脫。
產(chǎn)量1.6g(理論值的59%)透明油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ＝5.68 and 5.72(2d，1H);5.61(m，1H);4.81(m，1H);4.0-4.2(m，3H);3.53(m)，3.62(m) and 3.72(dd)[2H];3.08(t，1H);2.92(t，1H);2.75(m，1H);2.47(m，1H);1.83(m，1H);1.47(m，9H);1.25(m，3H);0.97ppm(d，3H).
I.7.(1SR，2RS，3RS，6SR)-2-乙氧羰基氨基-3-甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例C.3的方法，由1.6g(4.7mmol)實施例I.6的標(biāo)題化合物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量0.7g(理論值的70%)淡黃色油狀物;
Rf＝0.09二氯甲烷/甲醇/17%濃度的氨水(15∶4∶0.5)實施例K(1RS，2RS，6RS)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯K.1.3-鄰苯二甲酰亞氨基甲基-環(huán)己-4-烯-1，2-二羧酸二乙酯
將10.67g(50mmol)N-[(E)-2，4-戊二烯基]-鄰苯二甲酰亞胺(實施例B.1的標(biāo)題化合物)和8.61g富馬酸二乙酯在50ml甲苯中加熱回流2天。濃縮混合物，殘余物在硅膠上色譜法純化(洗脫劑∶環(huán)己烷/丙酮8∶1)。
產(chǎn)量14.8g(理論值的77%)熔點80-84℃K.2.(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(A)和(1RS，2RS，6SR)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(B) 首先將150.3g(0.39mol)實施例K.1的標(biāo)題化合物加到720ml乙醇中并在冰冷卻下滴加173.3g(2.9mol)乙二胺。在室溫下攪拌混合物20小時，真空中濃縮，用水(約700ml)稀釋，用濃鹽酸調(diào)至pH2-3并用二氯甲烷(500ml×3)萃取。干燥有機(jī)相(硫酸鈉)并真空中濃縮。經(jīng)色譜法分離非對映體(洗脫劑∶環(huán)己烷/丙酮1∶1)。
產(chǎn)量36.7g產(chǎn)物A(理論值的45%)
Rf＝0.47(環(huán)己烷/丙酮1∶1)27.0g產(chǎn)物B(理論值的45%)Rf＝0.22(環(huán)己烷/丙酮1∶1)。
K.3.(1RS，2RS，6RS)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 在氮氣氛下將5.2g(25mmol)(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(實施例K.2.的產(chǎn)物A)溶解在50ml四氫呋喃中，隨后滴加130ml1.5M氫化二(異丁基)鋁溶液(195mmol)。將溶液在回流下加熱16小時。反應(yīng)完全后，依次滴加60ml甲醇、30ml叔丁基甲基醚和10ml水，加入Tonsil，抽濾出固體。將抽濾漏斗上的殘余物與乙醇/濃氨水/水(10∶1∶1)的混合物一起攪拌兩次并再次抽濾。濃縮純化的濾液，產(chǎn)物粗品經(jīng)色譜法純化(洗脫劑∶二氯甲烷/甲醇/濃氨水2∶4∶1)產(chǎn)量2.7g(理論值的71%)
1H-NMR(DMSO-d6)5.69(m，1H，4-H);5.60(m，1H，5-H);3.39(dd，1H，10a-H);3.26(dd，1H，10b-H);2.97(m，2H，7a-H，9a-H)，2.63(m，1H，9b-H);2.38(bs，1H，6-H)M;2.32(dd，1H，7b-H);2.06(m，1H，3a-H);1.95(m，1H，1-H);1.77(m，1H，3b-H);1.44ppm(m，1H，2-H).
K.4.(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按實施例H.1所述方法使實施例K.3的產(chǎn)物(8.87g;58mmol)反應(yīng)。
產(chǎn)量11.0g(理論值的75%)Rf＝0.25(環(huán)己烷/丙酮2∶1)K.5.(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例F.1的方法，由實施例K.4的產(chǎn)物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的97%，Rf＝0.40(環(huán)己烷/丙酮2∶1)K.6.(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-疊氮基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 在70℃下將33g(0.08mol)(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(實施例K.5的標(biāo)題化合物)和15.8g(0.24mol)疊氮化鈉在200mlN，N-二甲基甲酰胺中的溶液攪拌40小時。用水(500ml)稀釋冷卻的溶液并用石油醚(250ml×3)萃取。合并的有機(jī)相用5%濃度的碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮。
產(chǎn)量21.6g(97%)。
1H-NMR(CDCl3)5.71(m，1H，C＝CH);5.58(m，1H，C＝CH);3.61-3.22(m，2H);3.10(m，1H);2.70(bs，1H);2.24(m，2H);1.91(m，2H)，1.47ppm(s，9H，叔丁基).
K.7.(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 冷卻下用硫化氫將實施例K.6的疊氮基化合物(21.6g，78mmol)在150ml吡啶/水(5∶1)中的溶液飽和，隨后在室溫靜置20小時。待轉(zhuǎn)化完全后，真空下濃縮，用甲苯反復(fù)蒸餾數(shù)次，殘余物進(jìn)行色譜法純化(洗脫劑∶環(huán)己烷/丙酮1∶1)。
產(chǎn)量11.0g(理論值的66%)Rf＝0.12(環(huán)己烷/丙酮1∶1)K.8.(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-(乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
首先將3.7g(15mmol)(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯加到40ml二噁烷和15ml水中，加入2.3g(16mmol)碳酸鉀并在室溫下滴加1.75g(16mmol)氯甲酸乙酯。攪拌2小時后，真空下濃縮混合物，將殘余物溶解在二氯甲烷(70ml)中，該溶液通過振搖用水(25ml×2)萃取，干燥(硫酸鈉)并濃縮。產(chǎn)物粗品用色譜法純化(環(huán)己烷/丙酮2∶1)。
產(chǎn)量2.8g(理論值的59%)Rf＝0.53(環(huán)己烷/丙酮1∶1)。
K.9.(1RS，2RS，6RS)-2-(乙氧羰基氨基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先將7.6g(23mmol)實施例K.8的產(chǎn)物加到100ml甲醇/水(1∶1)中并在室溫下加入30ml半濃的鹽酸溶液。待氣體放出完全后，將混合物攪拌30分鐘，用冰水(約100ml)稀釋并用濃氫氧化鈉調(diào)至pH12。水相用二氯甲烷(100ml×4)萃取。合并萃取液，用硫酸鈉干燥并在真空下濃縮。
產(chǎn)量3.9g(理論值的76%)，Rf＝0.45(二氯甲烷/甲醇/濃氨水(2∶4∶0.1)。
實施例L(1RS，2RS，6RS)-2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-二(三氟甲磺酸)鹽 將2.0g(8mmol)(1RS，2RS，6RS)-8-叔丁氧羰基-2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(實施例K.7的產(chǎn)物)在30ml二氯甲烷中的溶液用30ml三氟乙酸處理并在室溫靜置30分鐘。在甲苯存在下蒸除溶劑和酸，并將混合物用甲苯反復(fù)蒸餾數(shù)次。將產(chǎn)物用氫氧化鉀/五氧化二磷(1∶1)在干燥器中干燥。
產(chǎn)量1.5g棕色油狀物。
1H-NMR(DMSO-d6)5.78(m，1H，C＝CH);5.60(m，1H，C＝CH);3.34(M，2H);3.03(m，1H)，2.87(m，2H)，2.73(m，1H);2.45(m，1H);2.34(m，1H);2.22(M，1H);1.94ppm(m，2H).
FAB-MSM+1＝153.
實施例M(1RS，2RS，6RS)-2-乙氧羰基氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯(該產(chǎn)物與實施例F的標(biāo)題化合物相同)M.1.(1RS，2RS，6SR)-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例K.3的方法使(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(實施例K.2的產(chǎn)物)反應(yīng)。
產(chǎn)量理論值的75%，Rf＝0.22(二氯甲烷/甲醇/濃氨水(15∶4∶0.5)M.2.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-羥甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例K.4的方法使實施例M.1的產(chǎn)物反應(yīng)。
產(chǎn)量理論值的64%。
Rf＝0.23(環(huán)己烷/丙酮2∶1)M.3.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-(4-甲苯磺酰氧基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例F.1的方法由實施例M.2的產(chǎn)物制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的91-98%，Rf＝0.59(環(huán)己烷/丙酮2∶1)
M.4.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-疊氮基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 將13.0g(32mmol)實施例M.3的產(chǎn)物在80mlN，N-二甲基甲酰胺中的溶液用4.15g(64mmol)疊氮化鈉處理，并在70℃下攪拌4小時。然后再次加入相同數(shù)量的疊氮化鈉并將混合物在100℃下攪拌另外的6小時。然后按實施例K.6所述方法進(jìn)行處理。
產(chǎn)量7.0g(理論值的79%)Rf＝0.55(環(huán)己烷/丙酮2∶1)M.5.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-氨基甲基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按實施例K.7所述的方法使實施例M.4的疊氮基化合物反應(yīng)。
進(jìn)行色譜法純化，用甲醇/二氯甲烷/濃氨水(15∶2∶0.1)洗脫。
產(chǎn)量理論值的75%，Rf＝0.12(甲醇/二氯甲烷/濃氨水15∶2∶0.1)M.6.(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-(乙氧羰基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 首先將4.3g(17mmol)實施例M.5的氨基化合物和1.9g(19mmol)三乙胺加到50ml二氯甲烷中，在0℃下滴加溶解在10ml二氯甲烷中的2.2g(20mmol)氯甲酸乙酯并將混合物在室溫攪拌24小時。該溶液用水(50ml)處理并且分離各相。水相進(jìn)一步用二氯甲烷(40ml×3)萃取。合并有機(jī)相，干燥(硫酸鈉)并濃縮。
產(chǎn)量5.3g(理論值的96%)1H-NMR(CDCl2-CDCl2，80℃)5.79(ddd，1H，C＝CH);5.58(m，1H，C＝CH);4.61(bs，1H，氨基甲酸酯-NH);4.23(m，1H);4.12(q，2H，乙基-CH2);3.99(m，1H);3.20-3.08(m，2H);2.82(m，2H);2.25(m，2H);2.09(m，1H);1.84(m，2H);1.42(s，9H，叔丁基);1.37ppm(t，3H，乙基-CH3).
M.7.(1RS，2RS，6SR)-2-(乙氧羰基氨基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯按實施例K.9所述的方法使(1RS，2RS，6SR)-8-叔丁氧羰基-2-(乙氧羰基氨基甲基)-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯反應(yīng)。
產(chǎn)量定量的，Rf＝0.55(甲醇/二氯甲烷/濃氨水15∶4∶0.5)實施例N(1SR，2RS，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-烯N.1.(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸 在60℃下將8.36g(40mmol)(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸乙酯(實施例K.2的產(chǎn)物A)與30ml水和5ml濃硫酸一起攪拌40小時。冷卻過程中產(chǎn)物沉淀。用少量冷水洗滌沉淀并于50℃在真空干燥箱中干燥。
產(chǎn)量4.80g(理論值的66%)1H-NMR(DMSO-d6)12.35(s，1H，COOH);7.60(s，1H，內(nèi)酰胺-NH);5.74(m，1H，C＝CH);5.59(m，1H，C＝CH);3.45(dd，1H，7a-H);2.95-2.85(m，4H，1-H，2-H，6-H，7b-H);2.29(m，1H，3a-H);2.00ppm(m，1H，3b-H).
N.2.(1SR，2RS，6RS)-2-乙氧羰基氨基-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例C.2的方法使(1RS，2RS，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸(實施例N.1的標(biāo)題化合物)反應(yīng)。
產(chǎn)量理論值的68%，Rf＝0.06(環(huán)己烷/丙酮1∶1)。
N.3.(1SR，2RS，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯
按類似于實施例K.3的方法，使實施例N.2的產(chǎn)物與10當(dāng)量的氫化二(異丁基)鋁反應(yīng)并且進(jìn)行處理，制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的51%，1H-NMR(CDCl3)5.72(m，1H，C＝CH);5.68(m，1H，C＝CH);3.19-3.10(m，2H);2.88(dd，1H);2.60(dd，1H);2.50(m，1H);2.44(s，3H，N-CH3);2.33-2.28(m，2H);2.19(m，1H);1.89ppm(m，1H).
實施例O(1SR，2SR，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯O.1.(1RS，2SR，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸
首先在60℃下加入0.2g濃硫酸、25ml水和25ml乙酸。分次小量加入9.8g(50mmol)實施例G.3的產(chǎn)物。在60℃下將混合物攪拌5小時。為進(jìn)行處理，加入0.8g碳酸氫鈉在10ml水中的溶液并在真空下濃縮混合物。將殘余物懸浮在40ml水中并在冰冷卻下通過加入濃氫氧化鈉溶液使之成為溶液。抽濾掉不溶成分后，用半濃的鹽酸使混合物呈酸性并再次冷卻至0℃。沉淀的產(chǎn)物用少量冷水洗滌，隨后于50℃在真空干燥箱中干燥。
產(chǎn)量4.8g(理論值的53%)熔點192-193℃。
O.2.(1SR，2SR，6RS)-2-乙氧羰基氨基-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按實施例C.2所述方法使(1RS，2SR，6RS)-9-氧代-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯-2-羧酸(實施例O.1的標(biāo)題化合物)反應(yīng)。
產(chǎn)量理論值的68%熔點160-164℃。
O.3.(1SR，2SR，6RS)-2-甲氨基-8-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-4-烯 按類似于實施例K.3的方法，將實施例O.2的產(chǎn)物與10當(dāng)量的氫化二(異丁基)鋁反應(yīng)并進(jìn)行處理，制得標(biāo)題化合物。
產(chǎn)量理論值的81%。
1H-NMR(CDCl3)5.72(m，1H，C＝CH);5.50(m，1H，C＝CH);3.04-2.77(m，6H);2.60(m，1H);2.49(s，3H，N-CH3);2.31(bs，2H，2×NH);2.25(m，1H);1.89ppm(m，1H).
實施例P9，10-二氟-3-甲基-8-硝基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸將3.7g(36.6mmol)硝酸鉀分批加入溶解在90ml濃硫酸中的7.0g(24.8mmol)9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸中并室溫攪拌1小時。將反應(yīng)混合物加到270ml冰水中。抽濾形成的沉淀，用水洗滌并且干燥。
產(chǎn)量6.9g(理論值的85%)熔點＞300℃。
實施例Q8-氨基-9，10-二氟-3-甲基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸將4.0g(12.2mmol)9，10-二氟-3-甲基-8-硝基-7-氧代-2，3-二氫-7H-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪-6-羧酸和1.2g鈀/活性炭(10%鈀)懸浮在280ml乙醇中并在室溫和常壓下氫化2天。用280ml水處理反應(yīng)混合物，然后用2N氫氧化鈉溶液調(diào)至pH10-11。過濾掉氫化催化劑，濾液用2N鹽酸調(diào)至pH5-6。過濾所形成的沉淀，用甲醇洗滌并干燥(級份A)。
將過濾出的氫化催化劑在二甲基甲酰胺(DMF)(100ml×3)中回流加熱1小時，然后再次過濾。合并的DMF溶液在真空下濃縮并干燥(級份B)。
產(chǎn)量3.0g(理論值的83%)熔點＞300℃。
權(quán)利要求
1.通式(Ⅰ)8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物， 其中R1代表氫或者可被羥基或鹵素任選取代的C1-C4烷基，R2獨立于R1，代表氫或甲基，R3代表氫或C1-C4烷基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫或鹵素，Z代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基、-CH2-NR10R11、羧基、甲氧羰基或乙氧羰基，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C3烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或甲基，R6代表氫或甲基，R5代表氫、甲基、或者結(jié)構(gòu)為-CH=CH-CO2R5′、-CH2-CH2-CO2R5′、-CH2-CO-CH3、-CH2-CH2-CN的基團(tuán)，R5′代表甲基或乙基，B代表-CH2-、O或者直連鍵。
2.制備通式(Ⅰ)8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物的方法， 其中R1代表氫或者可被羥基或鹵素任選取代的C1-C4烷基，R2獨立于R1，代表氫或甲基，R3代表氫或C1-C4烷基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫或鹵素，Z 代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基、-CH2-NR10R11、羧基、甲氧羰基或乙氧羰基，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C3烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或甲基，R6代表氫或甲基，R5代表氫、甲基、或者結(jié)構(gòu)為-CH＝CH-CO2R5′、-CH2-CH2-CO2R5′、-CH2-CO-CH3、-CH2-CH2-CN的基團(tuán)，R5′代表甲基或乙基，B 代表-CH2-、O或者直連鍵，該方法的特征在于將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，如果合適，在酸結(jié)合劑存在下進(jìn)行該反應(yīng)， 其中R1、R2、R3、R4和X1如上定義，并且X2代表鹵素，尤其是氟或氯，Z-H(Ⅲ)其中Z如上定義。
3.式(Ⅱ)化合物 其中R1、R2、R3、R4和X1如權(quán)利要求1中定義，并且X2代表鹵素。
4.制備權(quán)利要求3所述式(Ⅱ)化合物的方法，該方法的特征在于將式(Ⅳ)化合物與硝化劑反應(yīng)，然后將所得硝基化合物還原， 其中R1、R2、R3、R4、X1和X2如權(quán)利要求3中定義。
5.權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物以及其可藥用的水合物和酸加成鹽，及其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽和鈲鹽，其中R1代表氫或者可被羥基任選取代的C1-C3烷基，R2獨立于R1，代表氫或者甲基，R3代表氫、甲基或者乙基，R4代表氫、有1～4個碳原子的烷基，所述烷基可被羥基、甲氧基、氨基、甲氨基或二甲氨基任選取代，或者代表(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基)-甲基，X1代表氫、氟或者氯，Z 代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基、或-CH2-NR10R11，其中R10代表氫、可被羥基任選取代的C1-C2烷基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；?，R11代表氫或甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R9代表氫或者甲基，R5代表氫或者甲基，R6代表氫，B 代表-CH2-、O或者直連鍵。
6.權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物以及其可藥用的水合物和酸加成鹽，及其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銀鹽和鈲鹽，其中R1代表氫或甲基，R2代表氫，R3代表甲基或乙基，R4代表氫、甲基或乙基，X1代表氟，Z 代表具有下述結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 其中R7代表氫、羥基、-NR10R11、羥甲基或者-CH2-NR10R11，其中R10代表氫、甲基、在烷氧基部分有1～4個碳原子的烷氧羰基，或者C1-C3?；琑11代表氫或者甲基，R8代表氫、直鏈或支鏈的C1-C3烷基或者環(huán)丙基，R6代表氫，R9代表氫或者甲基，R5代表氫或者甲基，B 代表-CH2-、O或者直連鍵。
7.含有權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物的藥物。
8.權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物在藥物制備中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物在抗菌組合物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)新的8-氨基-10-(氮雜雙環(huán)烷基)-吡啶并[1，2，3-d，e][1，3，4]苯并噁二嗪衍生物、其制備方法及其在抗菌組合物中的應(yīng)用。其中R
文檔編號A61K31/5395GK1113243SQ9510571
公開日1995年12月13日 申請日期1995年5月10日 優(yōu)先權(quán)日1994年5月11日
發(fā)明者T·耶什, B·米爾克, U·彼得森, T·申克, K·D·布倫姆, R·恩德曼, K·G·梅茨格, M·施爾, M·施蒂格曼, H·G·韋茨坦 申請人:拜爾公司