本發(fā)明涉及一種藥物新用途，具體地涉及更昔洛韋在制備治療或預防糖尿病原性中風的藥物中的應用。
背景技術：
：中風是嚴重危害人類健康的重大疾病之一，全世界六分之一的人在其生命過程會至少遭遇一次中風，是成人死亡和致殘的一個重要原因。糖尿病是是第一次發(fā)生中風的患者一種特別高的危險因素，尤其對于2型糖尿病患者發(fā)生中風的可能性比非2型糖尿病患者高2-5倍【zafara，shahidsk，siddiquim，khanfs.patternofstrokeintype2diabeticsubjectsversusnondiabeticsubjects.jayubmedcollabbottabad.2007；19(4):64-67.】，而其中最近一次發(fā)生中風的70％患者有明顯的糖尿病或糖尿病前期，包括空腹血糖受損(ifg)和葡萄糖耐量減退(igt)[kernanwn，inzucchise.type2diabetesmellitusandinsulinresistance:strokepreventionandmanagement.currtreatoptionsneurol2004；6:443-450]，所以2型糖尿病合并中風造成的危害比單純非糖尿病原性中風要大得多，尤其最近隨著人民生活水平和生活方式的改變，我國2型糖尿病患者呈爆炸式增長，接診的急性糖尿病并發(fā)癥住院率比美國高出三倍?！啊綼lcornt，ouyangy.diabetessapshealthandwealthfromchina'srise.lancet.2012；379(9833):2227-2278.】，所以對2型糖尿病原性中風的治療顯得尤為重要。更昔洛韋為抗病毒藥物，在臨床上的劑型有片劑和注射液，適應癥為：免疫功能缺陷者(包括艾滋病患者)發(fā)生的巨細胞病毒性視網膜炎；預防可能發(fā)生于接受器官移植者的巨細胞病毒感染，更昔洛韋可通過血腦屏障，但更昔洛韋在制備治療或預防糖尿病原性中風的藥理作用未見報道，本發(fā)明人通過大量的實驗研究，發(fā)現(xiàn)了更昔洛韋在制備治療或預防糖尿病原性中風的藥物中的應用。技術實現(xiàn)要素：：本發(fā)明提供了更昔洛韋在制備治療或預防糖尿病原性中風的藥物中的應用。本發(fā)明提供了更昔洛韋制備治療或預防糖尿病原性中風急性發(fā)作期的藥物中的應用。本發(fā)明提供了更昔洛韋在制備治療或預防糖尿病原性中風恢復期的藥物中的應用。本發(fā)明提供的藥物組合物在用于糖尿病原性中風時，口服使用劑量范圍是500mg～5000mg，口注射使用劑量范圍是300mg～3000mg。本發(fā)明人進行了下列試驗來證實治療或預防糖尿病原性中風的藥物中的應用。(下面的實施例用來更詳細的說明本發(fā)明，但并不意味著本發(fā)明僅限于此)。具體實施實例：試驗例1更昔洛韋對2型糖尿病模型小鼠急性腦缺血的影響1.1材料實驗動物：jacksonlab實驗室db/db糖尿病小鼠(購于南京模式動物研究所，種屬：db/db小鼠；品系：bks.cg-dock7m+/+leprdb/j；動物等級：spf)。藥物：更昔洛韋，山東省天然藥物工程技術研究中心，含量99％，批號：160210；紅四氮唑：美國sigma公司產品，臨用前用生理鹽水配成4％溶液。1.2試驗方法與結果80只db/db糖尿病小鼠隨機分為模型對照組(生理鹽水)、依達拉奉靜脈給藥組(ed，5mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組1(100mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組2(300mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組3(1000mg/kg)、更昔洛韋靜脈注射給藥組1(60mg/kg)、更昔洛韋靜脈注射給藥組1(200mg/kg)，更昔洛韋靜脈注射給藥組1(600mg/kg)，每組10只。另外，10只db/db糖尿病小鼠作為假手術組。更昔洛韋灌胃給藥連續(xù)給藥3天，第2次給藥后8小時禁食，禁食16小時后，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉分離右側頸總動脈，夾閉頸內、頸總動脈，頸外動脈近心端及遠心端結扎，中間剪斷。將頸外動脈游離端拉至與頸內動脈成一條直線，將栓線(選用直徑0.24mm尼龍線，長度5.0cm)由頸外動脈插入至顱內，遇輕微阻力時停止，插入深度約為2cm。結扎頸外動脈開口，并打開頸總動脈動脈夾，消毒縫合傷口，造成右側大腦中動脈缺血模型；對照組僅進行右側頸總動脈、頸內動脈、頸外動脈的分離(以上實驗均在23℃～25℃進行)。更昔洛韋靜脈給藥組和依達拉奉靜脈給藥組造模后2小時靜脈給藥，其余操作同上述各組。24小時后按文獻【劉小光，徐理納，一種能評價溶栓和抗溶栓的小鼠腦中動脈模型，藥學學報，1995，30：662】所述方法及標準觀察并記錄小鼠的行為障礙：(a)提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱伸向地面，計為0分，如手術對側前肢出現(xiàn)腕屈曲計為1分，肘屈曲計為2分，肩內旋計為3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩內旋者，計為4分。(b)將動物置于平地面上，分別推雙肩向對側移動，檢查阻力。如雙側阻力對等且有力，計為0分，如向手術對側推動時阻力下降者，根據下降程度不同分為輕、中、重三度，分別計為1，2和3分。(c)將動物雙前肢置一金屬網上，觀察雙前肢的肌張力。雙前肢肌張力對等且有力者計為0分。同樣根據手術對側肌張力下降程度不同計為1，2和3分。(d)動物有不停地向一側轉圈者，計為1分。根據標準評分，滿分為11分，分數越高，表示動物行為障礙越嚴重。行為評分后處死小鼠，取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干，冠狀切成5片，腦片用紅四氮唑(ttc)染色，正常組織經染色后呈紅色，梗塞組織呈白色，染色后照相，用中國航空航天大學病理圖像分析軟件求梗塞面積比。數據以表示，缺血面以組間比較采用sas9.0進行單因素方差分析，神經行為缺陷組間比較采用非參數檢驗，p<0.05表示差異具有顯著性意義。結果如表1所示，缺血24小時后，db/db糖尿病模型組小鼠表現(xiàn)出明顯的行為障礙，腦組織也出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，達到全腦30％左右。依達拉奉靜脈給藥組(ed，5mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組1(100mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組2(300mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組3(1000mg/kg)、更昔洛韋靜脈注射給藥組1(60mg/kg)、更昔洛韋靜脈注射給藥組1(200mg/kg)，更昔洛韋靜脈注射給藥組1(600mg/kg)顯著改善小鼠行為障礙、減少缺血面積(與模型組比較，p<0.05或p<0.01)。表1更昔洛韋對小鼠腦缺血損傷的影響(n＝10)組別劑量(mg/kg)行為障礙缺血面積(％)對照組---------模型組--9.2±1.428.5±5.8依達拉奉靜脈給藥組57.6±1.2*21.6±5.3*更昔洛韋靜脈注射組1607.6±1.1*21.8±4.7*更昔洛韋靜脈注射組22006.9±1.4**16.1±3.9**更昔洛韋靜脈注射組36005.2±1.2**11.0±4.5**更昔洛韋灌胃組11007.4±1.3*21.5±5.20*更昔洛韋灌胃組23006.2±0.8**17.3±4.8**更昔洛韋灌胃組310005.3±1.2**13.1±3.5***，p<0.05，**，p<0.01，與模型組比較試驗2更昔洛韋對2型糖尿病模型小鼠腦缺血長期功能恢復的影響2.1材料實驗動物：jacksonlab實驗室db/db糖尿病鼠(購于南京模式動物研究所，種屬：db/db小鼠；品系：bks.cg-dock7m+/+leprdb/j；動物等級：spf)。藥物：更昔洛韋，山東省天然藥物工程技術研究中心，含量99％，批號：110210；生物素抗小鼠的igg(二抗，福州邁新生物技術中國公司)；抗neun血清(北京博奧森生物技術公司)2.2試驗方法與結果50只db/db糖尿病小鼠，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉，分離右側頸總動脈，夾閉頸內、頸總動脈，頸外動脈近心端及遠心端結扎，中間剪斷。將頸外動脈游離端拉至與頸內動脈成一條直線，將栓線(選用直徑0.24mm尼龍線，長度5.0cm)由頸外動脈插入至顱內，遇輕微阻力時停止，插入深度約為2cm。結扎頸外動脈開口，并打開頸總動脈動脈夾，消毒縫合傷口，造成右側大腦中動脈缺血模型；對照組10只動物僅進行右側頸總動脈、頸內動脈、頸外動脈的分離(以上實驗均在23℃～25℃進行)。動物腦缺血24小時后40只模型動物分為模型對照組(生理鹽水)、更昔洛韋灌胃給藥組1(100mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組2(300mg/kg)、更昔洛韋灌胃給藥組3(1000mg/kg)。再灌14天后，動物評價給藥7和14天神經行為缺陷，末次給藥處死小鼠，取腦，免疫組化測定微血管密度(mvd)和進行neun染色，評價2型糖尿病模型小鼠給藥14天對腦缺血長期功能的恢復情況。評價神經行為缺陷包括前爪功能缺損測定實驗、橫木行走實驗和膠布粘貼實驗。前爪功能缺損測定根據【deryckm，vanreemptsj，borgersm，wauquiera，janssenpaj.photochemicalstrokemodel:flunarizinepreventssensorimotordeficitsafterneocorticalinfarctsinrats.stroke，1989，20(10):1383–1390.】檢測懸掛鼠尾時小鼠身體上部的姿勢；在爪功能缺損測試中，首先提起左前爪或右前爪，對側前爪或后爪伸向身體側，根據每一個爪重新伸直所需時間的不同記分為：0(<1s)，1(>2s)，2(不能伸直)。以缺血后7d和14d為觀察時間點分別進行檢測。橫木行走實驗根據參考文獻【feeneydm，gonzaleza，lawwa.amphetamine，haloperidolandexperienceinteracttoaffecttherateofrecoveryaftermotorcortexinjuries.science，1982，217(4562):855-857.】進行，橫木寬為2.0cm，長為120cm，厚度為1cm，橫木距離地面為80cm，橫木水平懸空放置，橫木一端連接一個暗盒(長40cm，寬22cm，高20cm)，用強光刺激促使小鼠通過橫木走進暗盒。評分標準:0分，小鼠不能停留在橫木上，直接掉下來；1分，小鼠可以停留在橫木上，但不能走動；2分，小鼠試圖通過橫木，但在走動過程中從橫木摔下；3分，小鼠可以走上橫木，但受損傷的后肢滑落的次數超過一半；4分，小鼠可以走過橫木，后肢滑落的次數超過1次但不到一半；5分，小鼠可以走過橫木，僅從橫木摔下1次；6分，小鼠可以順利走過橫木。動物在缺血前訓練2d，讓受訓小鼠學會可以順利走過橫木。以缺血后3d、7d、14d為時間觀察點分別對各組缺血小鼠進行橫木行走實驗。膠布粘貼實驗根據【schallertt，upchurchm，lobaughn，farrarsb，spirdusoww，gilliamp，vaughnd，wilcoxre.tactileextinction:distinguishingbetweensensorimotorandmotorasymmetriesinratswithunilateralnigrostriataldamage.pharmacolbiochembehav，1982，16(3):445–462.】，以0.7×0.7cm大小的醫(yī)用膠布貼在缺血小鼠的左前肢腕部腹側面作為觸覺刺激，小鼠不舒服想法揭除膠布，記錄缺血小鼠揭除膠布的潛伏期。術前訓練2d，1次/天，使受訓小鼠能夠在20s內完成揭除膠布的動作，20s內不能完成揭除膠布動作的小鼠剔除。以缺血后7d、14d為時間觀察點分別進行膠布粘貼實驗檢測。評分標準:1分，揭除膠布時間<10s；2分，揭除膠布時間為10–19s；3分，揭除膠布時間為20–29s；4分，揭除膠布時間為30–39s；5分，揭除膠布時間為40–49s；6分，揭除膠布時間為50–59s；7分，揭除膠布時間>60s。mvd的測定方法按weidner等【weidnern，semplejp，welchwr，folkmanj.tumorangiogenesisandmetastasis-correlationininvasivebreastcarcinomas.nengljmed，1991，324(1):1-8.】提供的方法進行測定，凡是被染成棕黃色的單個的內皮細胞或內皮細胞簇則作為一個血管計數，而不是以出現(xiàn)血管腔為唯一計數標準，統(tǒng)計出每個視野內微血管的數量，然后取3個視野的均值作為測定mvd的結果。neun染色方法按[jiangwl，zhangsp，fufh，zhuhb，houj.inhibitionofnuclearfactor-κbby6-o-acetylshanzhisidemethylesterprotectsbrainagainstinjuryinaratmodelofischemiaandreperfusion.jneuroinflammation.2010；7:55]：冠狀切片(5μm)通過孵化進行neun染色，具有抗neun染色血清和3，3-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽(dab)。首先，冠狀切片在室溫下tbs緩沖溶液(0.15m氯化鈉，0.1米的tris-hcl，ph值7.5)洗兩次，每次20分鐘。其次在tbs-bsa的培養(yǎng)液[tbs的含1％(w/v)bsa和3％正常山羊血清(ngs)]溫孵30分鐘阻止非特異性抗體結合。切片在1:500抗neun血清(北京博奧森生物技術公司)過夜，在4℃1％ngs稀釋，經過三次10分鐘1％ngs的tbs稀釋沖洗，切片與1:250生物素抗小鼠的igg(二抗，福州邁新生物技術中國公司)在1％ngs的tbs溶液溫孵，neun染色以計算腦梗死體積計算。表2更昔洛韋對2型糖尿病模型腦缺血后神經行為缺陷的影響注：與模型組比較*p<0.05，**p<0.01。表3更昔洛韋對2型糖尿病模型腦缺血后14天mvd和梗死面積的影響當前第1頁12