本發(fā)明涉及一種含有葉黃素的藥物組合物及其制備方法和制劑，屬于藥物制劑和食品科學(xué)
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：葉黃素是自然界廣泛存在的類胡蘿卜素，是一種具有很強著色能力和抗氧化能力的天然色素?？茖W(xué)研究報道葉黃素與降低由氧化損害視網(wǎng)膜黃斑區(qū)引起的年齡相關(guān)黃斑變性(amd)的危險性有關(guān)，有效服用葉黃素能夠防治和延緩老年性視網(wǎng)膜黃斑退化引起的視力下降與失明癥或白內(nèi)障等眼部疾病。同時葉黃素還可以預(yù)防因機體衰老而引發(fā)的心血管硬化、腫瘤和冠心病等，以及預(yù)防機體的衰老，提高身體的免疫功能，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于藥品、保健食品等領(lǐng)域。但是由于葉黃素具有獨特的共軛多烯結(jié)構(gòu)，使其化學(xué)穩(wěn)定性差，在光照和氧氣的環(huán)境下容易氧化降解而失去原有的生物活性，同時水中或脂肪中的溶解度極低，導(dǎo)致葉黃素生物利用度很低，這些特性極大地限制了葉黃素的生產(chǎn)應(yīng)用。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種含有葉黃素的藥物組合物及其制備方法和制劑，以期解決上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的至少部分技術(shù)問題。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案。本發(fā)明的一方面提供一種含有葉黃素的藥物組合物，其包括如下重量百分比的各組分：0.1％-10％的葉黃素晶體、30％-70％的環(huán)糊精、10％-30％的表面活性劑和10％-30％親水性載體材料。本發(fā)明的另一方面還提供前述含有葉黃素的藥物組合物的制備方法，其包括：將葉黃素晶體、親水性載體材料、表面活性劑和環(huán)糊精溶解于溶劑中，使各組分混合均勻并充分反應(yīng)，再通過溶劑去除法，得到干燥的成品。本發(fā)明的再一方面還提供一種含有葉黃素的藥物制劑，其包括前述含有葉黃素的藥物組合物以及藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明的又一方面還提供一種膳食補充劑，其包括前述含有葉黃素的藥物組合物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的積極進步效果在于：與原料藥及以往專利文獻中的二、三元體系相比，本發(fā)明的含有葉黃素的藥物組合物四元體系溶解度高，且大量的體外表征試驗表明本發(fā)明的藥物組合物提高了葉黃素的體內(nèi)外生物利用度，從而能夠提高臨床療效。附圖說明圖1顯示實施例1中葉黃素-環(huán)糊精體系的相溶解度曲線。圖2顯示實施例2中葉黃素-γ-環(huán)糊精-載體材料三元體系的溶解度圖。圖3顯示實施例3中葉黃素-hp-β-環(huán)糊精-載體材料三元體系的溶解度圖。圖4顯示實施例4中葉黃素-γ-環(huán)糊精-吐溫80三元體系的溶解度圖。圖5顯示實施例5中葉黃素-hp-β-環(huán)糊精-吐溫80三元體系的溶解度圖。圖6顯示實施例6中葉黃素-環(huán)糊精-吐溫-親水性載體材料四元體系的溶解度圖。圖7顯示實施例7中葉黃素-環(huán)糊精-吐溫-泊洛薩姆四元體系的溶解度圖。圖8顯示實施例8中本發(fā)明的高溶解性葉黃素處方體外累積釋放百分數(shù)-時間曲線。圖9顯示實施例8中高溶解性葉黃素處方dsc檢測圖。圖10顯示實施例8中高溶解性葉黃素處方傅里葉變換紅外光譜檢測圖。圖11顯示實施例8中高溶解性葉黃素處方分子動力學(xué)模擬示意圖，其中，圖11a為初始結(jié)構(gòu)，圖11b為含水盒子初始結(jié)構(gòu)，圖11c為最終結(jié)構(gòu)。圖12顯示實施例8中高溶解性葉黃素處方caco-2細胞吸收的結(jié)果，其中，葉黃素原料藥為0.197ug/ml，葉黃素處方為25ug/ml，葉黃素處方為50ug/ml。圖13顯示實施例8中高溶解性葉黃素處方大鼠體內(nèi)血漿藥物濃度-時間曲線，其中，(api)葉黃素原料藥，(lutein-sds)葉黃素高溶解性處方。具體實施方式近年來有關(guān)葉黃素的報道很多，公開號為cn101507704的專利描述了一種葉黃素固體分散體及其制備方法，其主要組成是葉黃素晶體、載體材料的二元體系，及其它附加劑。處方組成相對單一，未見其溶解度試驗結(jié)果，溶解度改善結(jié)果不明確。雖采用多種方法制備葉黃素固體分散體，但未進行溶出度比較、以及體內(nèi)外生物利用度的研究實驗。公開號為cn103860476a的專利，描述了一種葉黃素水溶性粉末及其制備方法，其主要組成成分是葉黃素、水溶性載體材料、表面活性劑三元體系，及其它附加劑，采用噴霧干燥法制備而成。處方組成為三元體系，進行了體外溶出度試驗，結(jié)果有一定的改善，但是未見其溶解度及相關(guān)的體內(nèi)試驗研究，不能充分證明其處方的有效性。且制備過程中使用的溶劑含有毒性較多的乙酸乙酯、二氯甲烷等，存在安全隱患。公開號為cn104434814的專利描述了一種水溶性葉黃素顆粒及其制備工藝和應(yīng)用，其主要組成成分是葉黃素和水溶性高分子輔料的二元體系，采用co2超臨界流體重結(jié)晶法制備。該法制得的水溶性顆粒長期保存可能會使葉黃素形成結(jié)晶，且生產(chǎn)設(shè)備昂貴，工業(yè)化生產(chǎn)成本較大。公開號為cn104095816的專利描述了一種葉黃素微囊及其制備方法，其主要組成成分是葉黃素、芯材、壁材，采用噴霧干燥法制備得到成品。但是制備過程中溫度控制較高，葉黃素性質(zhì)不穩(wěn)定，高溫可能使其發(fā)生變質(zhì)，且該制劑為微囊，制備工藝復(fù)雜。本發(fā)明的發(fā)明人針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，經(jīng)過大量的探究試驗，通過對二元和三元體系的處方進一步加以改進，創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)葉黃素-環(huán)糊精-表面活性劑-親水性載體材料四元體系同二元和三元體系相比較，溶解度有非常大的提升(具體數(shù)據(jù)見本發(fā)明各實施例)，并且極大地提高了葉黃素的體外溶出速率。本發(fā)明的高溶解性葉黃素處方與傳統(tǒng)的水溶性葉黃素顆粒或者粉末相比，不僅具有較高的溶解度和體外溶出速率，而且能夠提高葉黃素的膜滲透性，從而極大地提高了葉黃素在caco-2細胞中的吸收和大鼠體內(nèi)的生物利用度。并且本發(fā)明汲取了傳統(tǒng)水溶性顆粒或者粉末的優(yōu)點，對傳統(tǒng)的制備工藝進行了簡化。為此，本發(fā)明的一方面提供一種含有葉黃素的藥物組合物，其包括如下重量百分比的各組分：0.1％-10％的葉黃素晶體、30％-70％的環(huán)糊精、10％-30％的表面活性劑和10％-30％親水性載體材料。優(yōu)選地，本發(fā)明的含有葉黃素的藥物組合物，其包括如下重量百分比的各組分：1％-3％的葉黃素晶體、50％-70％的環(huán)糊精、10％-25％的表面活性劑和10％-25％親水性載體材料。其中，所述的環(huán)糊精優(yōu)選包括α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、甲基-β-環(huán)糊精和磺丁基-β-環(huán)糊精中的一種或幾種的組合。其中，所述的表面活性劑優(yōu)選包括十二烷基硫酸鈉、十六烷基硫酸鈉、吐溫40、吐溫60、吐溫80、司盤60、司盤80和司盤85中的一種或幾種的組合。其中，所述的親水性載體材料優(yōu)選包括聚乙二醇、聚維酮、羧甲基纖維素鈉、泊洛薩姆和海藻酸鈉中的一種或幾種的組合。本發(fā)明的一較佳實施方式提供一種含有葉黃素的藥物組合物，其包括如下重量百分比的各組分：1％-3％的葉黃素晶體、50％-70％的環(huán)糊精、10％-25％的吐溫和10％-25％泊洛沙姆。本發(fā)明的另一方面還提供前述含有葉黃素的藥物組合物的制備方法，其包括：將葉黃素晶體、親水性載體材料、表面活性劑和環(huán)糊精溶解于溶劑中，使各組分混合均勻并充分反應(yīng)，再通過溶劑去除法，得到干燥的成品。其中，所述的溶劑可以是本領(lǐng)域常規(guī)，優(yōu)選包括水、乙醇、乙二醇和丙酮中的一種或幾種的組合。其中，所述的溶劑去除法可以是本領(lǐng)域常規(guī)，優(yōu)選包括噴霧干燥法、冷凍干燥法、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法和流化床干燥法中的一種或幾種的組合。本發(fā)明的一較佳實施方式提供一種前述含有葉黃素的藥物組合物的制備方法，其包括步驟：a)將親水性載體材料溶解于溶劑中，加入表面活性劑，超聲或者磁力攪拌成均一混合溶液，再加入環(huán)糊精，超聲或者磁力攪拌成均一混合溶液；b)最后加入葉黃素晶體，超聲或者磁力攪拌充分反應(yīng)，制得均勻的葉黃素混合液；c)通過溶劑去除法，得到干燥的成品。其中，溶劑去除法若采用噴霧干燥法，是將均勻的葉黃素混合液進行噴霧干燥，除去溶劑，獲得最終成品；溶劑去除法若采用冷凍干燥法，則是將均勻的葉黃素混合液進行冷凍干燥，除去溶劑，獲得最終成品；溶劑去除法若采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法，則是將均勻的葉黃素混合液在40℃下?lián)]發(fā)除去溶劑，獲得最終成品；溶劑去除法若采用流化床干燥法，則是將均勻的葉黃素混合液置于流化床內(nèi)，在物化壓力為15000-20000pa、物料和進風(fēng)溫度為40-50℃的條件下干燥，獲得最終成品。所制得的高溶解性葉黃素成品可以和藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的各種載體混合，制成膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸、水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑和酏劑等，或者加入各類營養(yǎng)元素，制成膳食補充劑。本發(fā)明的再一方面還提供一種含有葉黃素的藥物制劑，其包括前述含有葉黃素的藥物組合物以及藥學(xué)上可接受的載體。其中，所述藥學(xué)上可接受的載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的各種稀釋劑、賦形劑、填充劑、乳化劑、粘合劑、潤滑劑、吸收促進劑、崩解劑或抗氧化劑等。所述藥物制劑的劑型可以是各類常規(guī)的口服固體制劑或口服液體制劑，優(yōu)選膠囊劑、片劑、滴丸、顆粒劑、濃縮丸、水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑和酏劑中的任一種。本發(fā)明的又一方面還提供一種膳食補充劑，其包括前述含有葉黃素的藥物組合物。如本領(lǐng)域常規(guī)，所述膳食補充劑還可以包括本領(lǐng)域一些常規(guī)的膳食補充元素。在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實例。本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。下面列舉一些具體實施例，并結(jié)合附圖，以對本發(fā)明的實施和技術(shù)效果作更進一步的說明。實施例1葉黃素與四種不同環(huán)糊精(α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精)的相溶解度試驗一系列不同摩爾濃度：0mmol/ml、0.0025mmol/ml、0.005mmol/ml、0.01mmol/ml、0.02mmol/ml、0.03mmol/ml的α-環(huán)糊精在一定條件下，對葉黃素進行相溶解度試驗，待反應(yīng)完成后測定溶液中溶解的葉黃素濃度，以α-環(huán)糊精的摩爾濃度為橫坐標，葉黃素的水中溶解度為縱坐標，繪制相溶解度曲線。一系列不同摩爾濃度：0mmol/ml、0.0025mmol/ml、0.005mmol/ml、0.01mmol/ml、0.02mmol/ml、0.03mmol/ml的β-環(huán)糊精在一定條件下，對葉黃素進行相溶解度試驗，待反應(yīng)完成后測定溶液中溶解的葉黃素濃度，以β-環(huán)糊精的摩爾濃度為橫坐標，葉黃素的水中溶解度為縱坐標，繪制相溶解度曲線。一系列不同摩爾濃度：0mmol/ml、0.0025mmol/ml、0.005mmol/ml、0.01mmol/ml、0.02mmol/ml、0.03mmol/ml的γ-環(huán)糊精在一定條件下，對葉黃素進行相溶解度試驗，待反應(yīng)完成后測定溶液中溶解的葉黃素濃度，以γ-環(huán)糊精的摩爾濃度為橫坐標，葉黃素的水中溶解度為縱坐標，繪制相溶解度曲線。一系列不同摩爾濃度：0mmol/ml、0.0025mmol/ml、0.005mmol/ml、0.01mmol/ml、0.02mmol/ml、0.03mmol/ml的羥丙基-β-環(huán)糊精在一定條件下，對葉黃素進行相溶解度試驗，待反應(yīng)完成后測定溶液中溶解的葉黃素濃度，以hp-β-環(huán)糊精的摩爾濃度為橫坐標，葉黃素的水中溶解度為縱坐標，繪制相溶解度曲線。檢測方法：采用高效液相色譜法進行檢測，色譜條件：eclipsexdbc18柱(250mm×4.6mm，5μm)；保護柱：eclipsexdbc18柱(12.5mm×4.6mm，5μm)；流動相：乙腈-甲醇(1:9)；柱溫：30℃；檢測波長：445nm；流速：1.0ml·min-1；進樣量：20μl。檢測結(jié)果如圖1所示，其中cd即環(huán)糊精(cyclodextrin)。實施例2葉黃素-γ-環(huán)糊精-親水性載體材料(吐溫80、peg1000、泊洛沙姆188、pvp)三元體系的溶解度試驗處方1葉黃素1mg/ml吐溫801％ml/ml處方2葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫801％ml/ml處方3葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/mlpeg10001％ml/ml處方4葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/mlpoloxamer1881％mg/ml處方5葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/mlpvp1％mg/ml操作方法：各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，處方1為僅含葉黃素和吐溫80的二元體系，處方2，處方3，處方4，處方5均含有定摩爾濃度0.03mmol/ml的γ-環(huán)糊精，考察不同載體材料吐溫80、peg1000、poloxamer188、pvp對葉黃素溶解度的影響，結(jié)果如圖2所示。實施例3葉黃素-hp-β-環(huán)糊精-親水性載體材料(吐溫80、peg1000、泊洛沙姆188、pvp)三元體系的溶解度試驗處方1葉黃素1mg/ml吐溫801％ml/ml處方2葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫801％ml/ml處方3葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/mlpeg10001％ml/ml處方4葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/mlpoloxamer1881％mg/ml處方5葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/mlpvp1％mg/ml操作方法：各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，處方1為僅含葉黃素和吐溫80的二元體系，處方2，處方3，處方4，處方5均含有一定摩爾濃度0.03mmol/ml的hp-β-環(huán)糊精，考察不同載體材料吐溫80、peg1000、poloxamer188、pvp對葉黃素溶解度的影響，結(jié)果如圖3所示。實施例4葉黃素-γ-環(huán)糊精-吐溫80三元體系中濃度對葉黃素溶解度的影響處方1葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫801％ml/ml處方2葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫802％ml/ml處方3葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫803％ml/ml處方4葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫801％ml/ml處方5葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫802％ml/ml處方6葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫803％ml/ml處方7葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫801％ml/ml處方8葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫802％ml/ml處方9葉黃素1mg/mlγ-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫803％ml/ml操作方法：各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，平行進行九組試驗：當溶液中γ-環(huán)糊精的濃度為0.01mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度；當溶液中γ-環(huán)糊精的濃度為0.02mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度；當溶液中γ-環(huán)糊精的濃度為0.03mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度，考察γ-環(huán)糊精濃度及吐溫80體積百分數(shù)對葉黃素溶解度的影響，結(jié)果請參見圖4。實施例5葉黃素-hp-β-環(huán)糊精-吐溫80三元體系中濃度對葉黃素溶解度的影響處方1葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫801％ml/ml處方2葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫802％ml/ml處方3葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.01mmol/ml吐溫803％ml/ml處方4葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫801％ml/ml處方5葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫802％ml/ml處方6葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.02mmol/ml吐溫803％ml/ml處方7葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫801％ml/ml處方8葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫802％ml/ml處方9葉黃素1mg/mlhp-β-環(huán)糊精0.03mmol/ml吐溫803％ml/ml操作方法：各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，平行進行九組試驗：當溶液中hp-β-環(huán)糊精的濃度為0.01mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度；當溶液中hp-β-環(huán)糊精的濃度為0.02mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度；當溶液中hp-β-環(huán)糊精的濃度為0.03mmol/ml時，分別加入1％、2％、3％的吐溫80，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度，考察hp-β-環(huán)糊精濃度及吐溫80體積百分數(shù)對葉黃素溶解度的影響，結(jié)果請參見圖5。實施例6葉黃素-環(huán)糊精-吐溫-親水性載體材料(poloxamer188、peg1000、pvp、sds、cmc)四元體系的溶解度試驗處方1處方2處方3處方4處方5處方6處方7處方8處方9處方10操作方法：1)各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，吐溫80的體積百分數(shù)為1％，當環(huán)糊精為γ-環(huán)糊精，濃度為0.03mmol/ml時，分別加入質(zhì)量百分數(shù)為1％的親水性載體材料poloxamer188、pvp、peg1000、sds、cmc-na，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度，結(jié)果請參見圖6所示。2)各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，吐溫80的體積百分數(shù)為1％，當環(huán)糊精為hp-β-環(huán)糊精，濃度為0.03mmol/ml時，分別加入質(zhì)量百分數(shù)為1％的親水性載體材料poloxamer188、pvp、peg1000、sds、cmc-na，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度，結(jié)果請參見圖6所示。實施例7葉黃素-環(huán)糊精-吐溫-泊洛薩姆四元體系中環(huán)糊精種類對葉黃素溶解度的影響處方1處方2處方3各處方中葉黃素固定為10mg，溶液體積為10ml，吐溫80的體積百分數(shù)為1％，poloxamer188的質(zhì)量百分數(shù)為1％，分別加入摩爾濃度為0.03mmol/ml的γ-環(huán)糊精、hp-β-環(huán)糊精和β-環(huán)糊精，充分反應(yīng)后，測不同處方中葉黃素的溶解度，結(jié)果請參見圖7所示。制備方法：將泊洛薩姆溶解于適量的乙醇溶液中，加入吐溫80，超聲成均一混合溶液，再加入環(huán)糊精，超聲成均一混合溶液，最后加入葉黃素晶體，超聲30min充分反應(yīng)，制得葉黃素混合液。將所制得的葉黃素混合液在40℃下?lián)]去有機溶劑、干燥，獲得最終成品。將制得的葉黃素成品粉末溶解于10ml去離子水中，超聲10min，待溶解完全后，離心取上清液，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，然后將樣品溶液，用高效液相色譜法，在波長445nm處進行檢測，采用外標法計算葉黃素溶解度，結(jié)果請參見圖7所示。實施例8葉黃素-環(huán)糊精-吐溫-泊洛薩姆四元體系的體外表征及體內(nèi)外生物利用度試驗處方制備方法：將泊洛薩姆188溶解于適量的乙醇溶液中，加入吐溫80，超聲成均一混合溶液，再加入環(huán)糊精，超聲成均一混合溶液，最后加入葉黃素晶體，超聲30min充分反應(yīng)，制得葉黃素混合液。將所制得的葉黃素混合液在40℃下?lián)]去有機溶劑、干燥，獲得最終成品(下稱高溶解性葉黃素處方)。操作1：高溶解性葉黃素處方體外溶出度試驗平行準備原料藥、物理混合物進行體外溶出度考察。按中國藥典2015版四部0931項下釋放度測定第二法，以900ml蒸餾水為釋放介質(zhì)，溫度控制在(37±0.5)℃，轉(zhuǎn)速為100r·min-1，分別于5、10、15、20、30、45min取溶液5ml，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液備用，并即時補充空白介質(zhì)溶液5ml；用高效液相色譜法，在波長445nm處進行檢測，按外標法分別計算不同時間點的溶出度，結(jié)果請參見圖8所示。操作2：高溶解性葉黃素處方差示掃描量熱法檢測試驗平行準備原料藥、單一輔料、處方物理混合物，采用dsc-60型差示掃描量熱儀對樣品進行分析測定，精密稱取樣品(約3mg)，dsc分析條件設(shè)定為：掃描范圍20～200℃，升溫速率10℃·min-1，掃描環(huán)境為n2氣氛，結(jié)果請參見圖9所示。操作3：高溶解性葉黃素處方傅里葉變換紅外光譜檢測試驗平行準備原料藥、單一輔料、處方物理混合物，采用傅里葉紅外光譜儀對樣品進行分析，樣品粉末與kbr共同研磨壓成薄片后進行紅外掃描分析。掃描范圍為400～4000cm-1，掃描速率為2cm-1，結(jié)果請參見圖10所示。操作4：高溶解性葉黃素處方分子動力學(xué)模擬試驗發(fā)明人還提供了葉黃素與各組分分子間相互作用的分子動力學(xué)模擬方法，其直觀地呈現(xiàn)了該高溶解性葉黃素處方在分子水平各組分分子存在的狀態(tài)及相互作用，結(jié)果請參見圖11所示。操作5：高溶解性葉黃素處方caco-2細胞吸收實驗將caco-2細胞混懸接種于12孔板中，接種密度為5×104/孔，置5％co2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，加入1ml提前配制好的無血清的葉黃素原料藥(0.197ug/ml)和高溶解性葉黃素處方(25ug/ml和50ug/ml)dmem培養(yǎng)液，孵育24小時。然后立即用pbs溶液清洗細胞三次，去除細胞表面的葉黃素，用胰蛋白酶溶解細胞，離心，去除上清液，加入500μldmso提取細胞內(nèi)的葉黃素。用高效液相色譜法分析細胞中葉黃素濃度，結(jié)果請參見圖12所示。操作6：高溶解性葉黃素處方大鼠體內(nèi)藥物代謝動力學(xué)試驗平行準備原料藥及市售制劑作為參比制劑。健康sd雄性大鼠12只，體重200-300mg左右，由澳門大學(xué)健康學(xué)院動物中心提供。實驗前一天禁食12h，自由飲水。將受試動物隨機分成2組，每組6只，分別給予葉黃素原料藥、受試制劑t(高溶解性葉黃素處方，也即本發(fā)明的葉黃素藥物組合物)，單劑量給藥，給藥量為10mg/kgbw。分別灌服葉黃素原料藥和受試制劑，給藥后0、0.16、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10h，眼眶取血300μl。將所取血漿移置于涂有肝素的試管中，3000rpm離心10min，分離血漿，置-80℃冰箱保存待用。血漿樣品經(jīng)處理后，采用高效液相色譜法測定各時間點血藥濃度，計算各藥動學(xué)參數(shù)，結(jié)果請參見表1和圖13所示。表1中顯示本發(fā)明的高溶解性葉黃素藥物組合物在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)參數(shù)，其中api為葉黃素原料藥，lutein-sds為高溶解性葉黃素處方，即本發(fā)明的葉黃素藥物組合物成品。表1藥物代謝動力學(xué)參數(shù)測定結(jié)果參數(shù)單位apilutein-sdscmaxng·ml-120.417135.812tmaxh22auc0-tng·h·ml-195.742633.042auc0-∞ng·h·ml-1173.559861.538以上所述的具體實施例，對本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進行了進一步詳細說明，應(yīng)理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的具體實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁12