本發(fā)明涉及一種含有地龍?zhí)崛∥锏墨F用緩釋制劑，屬獸藥領域。
背景技術：
：地龍是我國重要的中藥材之一。最早的中藥學專著《神農本草經(jīng)》中收載的67種動物藥中就有蚯蚓，被《神農本草經(jīng)》列為下品，具有清熱定驚、通絡、平喘、利尿的功效。常炒制后用于高熱、神昏、驚癇抽搐、關節(jié)痹痛、肺熱喘咳、尿少水腫、高血壓等病癥。傳統(tǒng)用地龍，制法很多，主要有藥制、醋制、熬制、酒制、油制、蛤粉炒制、鹽制等方法，使其質地松泡酥脆、矯正臭味及便于煎制服用。《中國獸藥典》2010年版二部中收載了地龍藥材，但是應用較少。地龍在現(xiàn)代醫(yī)學中主要用于治療呼吸道感染、循環(huán)系統(tǒng)感染和泌尿系統(tǒng)感染等疾病及開發(fā)人用保健品，在獸醫(yī)臨床上將地龍用于解熱的報道不多。如陳斌艷，等，《地龍粉劑對小鼠、大鼠與兔的鎮(zhèn)痛解熱作用》，上海醫(yī)科大學學報，1996-05-15，以撲熱息痛為陽性對照藥，用小鼠扭體法、大鼠甩尾法為鎮(zhèn)痛模型，以內毒素致熱兔為發(fā)熱模型，研究中藥地龍粉劑是否具有解熱鎮(zhèn)痛作用及其與撲熱息痛合用是否有協(xié)同作用。申請?zhí)枺?01510872617.7，發(fā)明名稱：一種鮮地龍?zhí)崛∥锏闹苽浞椒?，該方法涉及一種鮮地龍?zhí)崛∥锏闹苽浞椒?，所述方法，步驟如下：步驟1，將鮮地龍投入破骨機打碎，再將經(jīng)破骨機打碎的鮮地龍投入骨泥磨打漿；步驟2，將打漿后的鮮地龍加入堿溶液，攪拌后靜置；步驟3，步驟2靜置后的提取液過濾或離心，得到清液；步驟4，清液濃縮，加入含醇的有機溶液，使藥液的含醇量到40-80％(v/v)，攪拌后靜置；步驟5，過濾或離心，得到沉淀物，干燥后即得。通過前期的試驗發(fā)現(xiàn)，地龍?zhí)崛∥?水煎液)對注射內毒素(lps)致熱家兔的解熱作用時間只能維持1-2小時，即需要2小時給藥一次，臨床使用不便，因此，將其制備為一種長效制劑十分必要，目前尚無將地龍制備成緩釋制劑的相關報道。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種含有地龍?zhí)崛∥锏墨F用緩釋制劑，本發(fā)明還提供了該獸用緩釋制劑的制備方法。本發(fā)明提供了一種含有地龍?zhí)崛∥锏墨F用緩釋制劑，它是由下述重量配比的原輔料制備而成：地龍100份、緩釋材料25－50份、包合材料25－50份、粘合劑20份。其中，所述的緩釋材料為羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、大分子聚乙二醇中的一種或兩種以上的混合；包合材料為β-環(huán)糊精、羥丙基β-環(huán)糊精、α-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精中的一種或兩種以上的混合；粘合劑為聚乙烯吡咯烷酮、膠化淀粉、糊精、海藻酸鈉、明膠、蔗糖、黃原膠中的一種或兩種以上的混合。其中，所述的緩釋材料為羥丙基纖維素；所述的包合材料為β-環(huán)糊精；所述的粘合劑為聚乙烯吡咯烷酮k30，重量配比為：地龍100份、β-環(huán)糊精25-50份、羥丙基纖維素25-50份、聚乙烯吡咯烷酮k3020份。進一步優(yōu)選地，所述的原輔料的重量配比為：地龍100份、β-環(huán)糊精25份、羥丙基纖維素50份、聚乙烯吡咯烷酮k3020份。其中，所述的制劑為顆粒劑、片劑、膠囊劑。本發(fā)明還提供了一種制備所述的獸用緩釋制劑的方法，它包括如下步驟：a、稱取各重量配比的原料及輔料；b、制備地龍?zhí)崛∥铮喝〉佚埶幉?，采用水提醇沉法制備得地龍?zhí)崛∥?；c、加入β-環(huán)糊精、粘合劑、助懸劑混合制粒，再加入藥學上常用的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。進一步優(yōu)選地，b步驟所述的地龍?zhí)崛∥锏闹苽浞椒椋喝〉佚埶幉?00g，加水2.5－40倍煎煮1－3次，每次1－3小時，加乙醇到煎煮液中沉淀，乙醇終濃度為50％－90％，濾過，取濾液濃縮至相對密度為1.2-1.3(60℃)。進一步優(yōu)選地，b步驟所述的地龍?zhí)崛∥锏闹苽浞椒椋喝〉佚埶幉?00g，加水20倍煎煮3次，每次3小時，加乙醇到煎煮液中沉淀(乙醇終濃度為70％)，濾過，取濾液濃縮至相對密度為1.2-1.3(60℃)。進一步優(yōu)選地，c步驟所述的制粒方法為：取地龍?zhí)崛∥锛尤毽?環(huán)糊精，加熱至溶液澄明，冷卻至常溫25℃，濾過，濾渣于60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮k30，濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥得顆粒。本發(fā)明通過對地龍藥材的提取，得到具有解熱作用的地龍?zhí)崛∥铮缓笸ㄟ^緩釋技術制備地龍緩釋顆粒，該緩釋顆粒可有效的延長地龍解熱作用的持續(xù)時間，尤其是最優(yōu)配方組的解熱作用可以延長到6小時，與其它組比較差異明顯；且副作用和不良反應均未被發(fā)現(xiàn)，比西藥解熱類藥物的安全性高，為臨床提供了一種新的用藥選擇。具體實施方式實施例1本發(fā)明地龍?zhí)崛∥锞忈岊w粒的制備取地龍藥材100g，加水20倍煎煮3次，每次3小時，加乙醇到煎煮液中沉淀(乙醇終濃度為70％)，濾過，取濾液濃縮至相對密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精25g并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，濾過，濾渣于60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素50g和聚乙烯吡咯烷酮k3020g，濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥得顆粒約100g，其中1g顆粒即相當于原生藥1g。實施例2本發(fā)明地龍?zhí)崛∥锾崛」に嚭Y選試驗1材料地龍藥材，四川科倫藥業(yè)有限公司；乙醇，成都科龍化學試劑有限公司；大耳白兔，體重2kg，四川省人民醫(yī)學科學院；旋轉蒸發(fā)儀，上海亞榮實驗儀器有限公司；內毒素(lps)，sigma公司。羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮k30、β-環(huán)糊精，成都科立隆試劑有限公司。2方法2.1家兔解熱試驗預試驗：用滅菌生理鹽水將lps稀釋至100μg/ml，按5μg/kg體重劑量于兔耳靜脈注射lps，選擇2小時內體溫升高1℃以上的家兔作為試驗用動物，繼續(xù)飼養(yǎng)一周后進行正試試驗。正式試驗：首先測定家兔初始體溫(t0)，將地龍?zhí)崛∥锘蚓忈岊w粒(相當于原生藥1g/1ml或相當于原生藥1g/g)以0.5g原生藥/kg體重灌胃給藥，30min后按5μg/kg體重劑量于兔耳靜脈注射lps，分別于注射lps后1小時、2小時、3小時、4小時測定試驗兔肛溫(tδ)，用tδ-t0即得家兔體溫上升值。2.2加水量考察取地龍藥材5份，每份100g，分別加水4000ml(40倍)、2000ml(20倍)、1000ml(10倍)、500ml(5倍)、250ml(2.5倍)煎煮1小時，濃縮至100ml備用。取36只家兔，分為6組，每組6只，按照“2.1”中方法進行解熱試驗，選擇家兔體溫上升最少的試驗組作為加水量考察的優(yōu)選結果，見表1。表1加水量考察由上表可以得出，4000ml(40倍)組和2000ml(20倍)組解熱作用明顯，2小時達到峰值，4小時體溫與對照組差異變小。因此，當加水量為地龍藥材的20倍以上時，地龍?zhí)崛∥锝鉄嶙饔米顝姡c對照組比較差異顯著。2.3煎煮時間考察分別取地龍藥材3份，每份100g，加水2000ml(20倍)，分別煎煮1小時、2小時、3小時，然后濃縮至100ml，照“2.1”進行試驗，分為4組，每組6只家兔，選擇家兔體溫上升最少的試驗組作為加水量考察的優(yōu)選結果，見表2。表2煎煮時間考察由上表可以得出，各組體溫均在2小時上升到峰值，但3小時組在1小時、3小時和4小時體溫上升值均低于其他兩個試驗組。因此，地龍?zhí)崛∥锏淖罴鸭逯髸r間3小時。2.4煎煮次數(shù)考察分別取地龍藥材3份，每份100g，加水2000ml(20倍)，分別煎煮1次、2次、3次，每次3小時，然后濃縮至100ml，照“2.1”進行試驗，分為4組，每組6只家兔，選擇家兔體溫上升最少的試驗組作為加水量考察的優(yōu)選結果，見表3。表3煎煮次數(shù)考察由上表可以得出，各組體溫均在2小時上升到峰值，但煎煮3次組體溫上升值均低于其他兩個實驗組。因此，地龍?zhí)崛r應煎煮3次。2.5乙醇濃度的選擇因為地龍為動物性藥材，含有大量的大分子蛋白和脂類，因此，為了提高制劑的穩(wěn)定性，考慮用乙醇沉淀一部分蛋白，方法如下：取地龍藥材500g，加水10000ml(20倍)，煎煮3次，每次3小時，然后濃縮至500ml，分為5份，每份100ml，分別加乙醇至終濃度為50％、60％、70％、80％、90％，然后回收乙醇并濃縮至100ml，照“2.1”進行試驗，分為4組，每組6只家兔，選擇家兔體溫上升最少的試驗組作為加水量考察的優(yōu)選結果，見表4。表4乙醇濃度考察由上表可以得出，70％乙醇沉淀組解熱效果最好，醇沉時乙醇濃度應為70％。實施例3本發(fā)明緩釋顆粒的制備工藝1緩釋顆粒的制備工藝通過預試選取緩釋材料羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮k30、β-環(huán)糊精制備不同的地龍?zhí)崛∥锞忈岊w粒，制備方法如下：(1)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入料羥丙基纖維素50g、聚乙烯吡咯烷酮k3020g、β-環(huán)糊精25g，攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(2)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精25g并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，濾過，60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素50g和聚乙烯吡咯烷酮k3020g及濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(3)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入聚乙烯吡咯烷酮k3020g并解熱至溶液澄明，加入羥丙基纖維素50g和β-環(huán)糊精25g，攪拌至顆粒狀過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(4)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入料羥丙基纖維素25g、聚乙烯吡咯烷酮k3020g、β-環(huán)糊精50g，攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(5)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精50g，并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，加入羥丙基纖維素25g和聚乙烯吡咯烷酮k3020g，攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(6)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入聚乙烯吡咯烷酮k3020g并解熱至溶液澄明，加入羥丙基纖維素25g和β-環(huán)糊精50g，攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(7)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精25g并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，濾過，60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素50g和聚乙烯吡咯烷酮k3010g及濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(8)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精25g并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，濾過，60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素50g和聚乙烯吡咯烷酮k3030g及濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。(9)取地龍?zhí)崛∥?相當于原生藥1g/1ml)100ml，濃縮至密度為1.2-1.3(60℃)，加入β-環(huán)糊精25g并加熱至溶液澄明，冷卻至常溫(25℃)，濾過，60℃干燥研磨至完全通過4號篩，加入羥丙基纖維素50g和聚乙烯吡咯烷酮k3040g及濾液攪拌至顆粒狀，過1號篩，60℃干燥可得顆粒約100g，即相當于原生藥1g/1g顆粒。2緩釋顆粒的表觀質量檢測將按上述方法制備的9種顆粒，按照《中國獸藥典》2010年版2部中顆粒劑項下的要求檢測，9號樣品溶化不完全，屬不合格品，不進行后面的試驗。結果見表5。表5緩釋顆粒的表觀質量檢測樣品編號粒度(％)水分(％)溶化性13.6％1.2％完全溶化，無焦屑、異物23.8％1.0％完全溶化，無焦屑、異物33.0％1.0％完全溶化，無焦屑、異物43.5％1.3％完全溶化，無焦屑、異物54.2％1.3％完全溶化，無焦屑、異物63.2％1.1％完全溶化，無焦屑、異物73.0％1.3％完全溶化，無焦屑、異物84.5％1.2％完全溶化，無焦屑、異物94.9％1.3％溶化不完全3緩釋顆粒的臨床效果測試將8種不同的緩釋顆粒用溫水溶化后，攪拌至均勻的混懸狀，稀釋至相當于原生藥材1g/ml的溶液，照實施例2“2.1”進行試驗，分為6組，每組6只家兔，選擇家兔體溫上升最少的試驗組作為加水量考察的優(yōu)選結果，見表6。表6緩釋顆粒的臨床效果測試由表5和表6的結果可以得出，8種方法制備的地龍緩釋顆粒均有延長地龍解熱時間的作用，所有緩釋顆粒組的體溫上升總和均＜提取物對照組＜陰性對照組，說明緩釋顆粒對lps導致的體溫升高均有抑制作用。其中，2號樣品的維持正常體溫的時間為6小時，5號樣品為4小時，其它樣品的為2-3小時，提取物對照組為1小時，因此2號樣品維持正常體溫的時間與其它樣品差異明顯，其表觀質量也符合《中國獸藥典》對顆粒劑的各項規(guī)定，地龍緩釋顆粒的解熱作用時間延長；此外，由于包被的不完全，又使顆粒具備了速效的作用，在lps使家兔體溫升高的整個過程中，起到了很好的解熱作用。當前第1頁12