本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種用于治療惡性腫瘤的納米藥物緩釋制劑及其制備方法

背景技術(shù)：

近年來，我國惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率居高不下，形式越來越嚴(yán)峻，特別是肺癌發(fā)病率及死亡率逐年攀升，已居于惡性腫瘤的首位，嚴(yán)重威脅著人類的健康。對于肺癌的治療，主要有手術(shù)治療、化療、放療、靶向治療等，在各種治療方法中，靶向治療是治療肺腺癌的重要手段。近年來，基于對腫瘤病灶部位的分子水平的研究，發(fā)現(xiàn)了許多新的治療靶點(diǎn)，為開發(fā)新型的高效低毒的新藥提供了可能。表皮生長因子受體(egfr)是一種膜受體，在多種惡性腫瘤如肺癌、肝癌、胃癌、腸癌、食管癌、乳腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、卵巢癌、前列腺癌等中都有過度表達(dá)，激活egfr會加快腫瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)腫瘤血管生成，加速腫瘤轉(zhuǎn)移。因此，針對egfr的酪氨酸激酶抑制劑，可選擇性阻斷egfr信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，顯示出良好的抗腫瘤活性。吉非替尼就是表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑的代表之一，它可以抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，加速凋亡，減少腫瘤血管生成和抑制轉(zhuǎn)移。但是隨著吉非替尼的廣泛應(yīng)用和越來越多的研究表明，吉非替尼口服制劑存在著以下一些缺陷：水溶性差，溶解度受ph的影響較大；最大生物利用度僅為59％；口服吸收慢，tmax約為3-7小時(shí)；患者需長期用藥，依耐性差；口服分布廣泛，不良反應(yīng)多，這樣很難使藥物在腫瘤局部發(fā)揮更好的治療作用。因此，研究者們開始探索新的給藥途徑。在這個(gè)過程中，得益于化學(xué)和納米技術(shù)的發(fā)展，各種抗腫瘤藥物傳輸體系被開發(fā)出來，特別是能夠通過靜脈輸注的具有靶向能力的納米載藥體系在腫瘤治療中展現(xiàn)出廣闊的運(yùn)用前景。這種體系的優(yōu)點(diǎn)在于藥物能靶向富集到腫瘤部位，并且能克服口服藥物的生物利用度低的弊端，增加藥物在腫瘤部位的集聚，因而能夠盡量減少藥物的毒副作用，從而達(dá)到更好的療效。

作為可生物降解的聚酯類聚合物是通過化學(xué)合成的高分子聚合物大家族中的重要一員，其中聚乳酸、聚己內(nèi)酯、聚乳酸-羥基乙酸均聚合物，包括它們與聚乙二醇，或與泊洛沙姆形成的嵌段共聚物，其負(fù)載藥物的高效性、優(yōu)良的藥物緩釋特性、良好的生物相容性使它們都是具有廣泛應(yīng)用前景的藥物載體。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于惡性實(shí)體腫瘤靶向治療的納米藥物緩釋制劑及其制備方法，以及該藥物制劑在惡性實(shí)體腫瘤治療中的應(yīng)用。該藥物制劑采用高分子聚合物負(fù)載表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑納米藥物，通過靜脈注射到體內(nèi)，產(chǎn)生緩釋、抗癌的作用；加之該制劑相對較小的全身毒副作用，從而達(dá)到更好的持續(xù)治療效果。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種用于治療惡性腫瘤的納米藥物緩釋制劑，該制劑由具有腫瘤生長抑制效應(yīng)的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑、高分子聚合物和凍干保護(hù)劑組成，其各組成成分的重量百分比為：

(1)表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑占1％-30％；

(2)高分子聚合物占70％-99％；

(3)凍干保護(hù)劑占0-15％。

所述的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(egfr-tki)選自吉非替尼、埃克替尼、厄洛替尼中的一種或幾種。

所述的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(egfr-tki)選自吉非替尼鹽酸鹽、?？颂婺猁}酸鹽、厄洛替尼鹽酸鹽中的一種或幾種。

所述的高分子聚合物為聚酯類高分子均聚物時(shí)，選自聚乳酸(pla)、聚己內(nèi)酯(pcl)、聚乳酸-羥基乙酸(plga)中的一種或幾種。

所述的高分子聚合物為聚醚-聚酯類高分子聚合物時(shí)，選自聚乙二醇與聚己內(nèi)酯的聚合物(peg-pcl)、聚乙二醇與聚乳酸的聚合物(peg-pla)、聚乙二醇與-聚乳酸-羥基乙酸的聚合物(peg-plga)、泊洛沙姆與聚己內(nèi)酯的聚合物(pluronic-pcl)、泊洛沙姆與聚乳酸的聚合物(pluronic-pla)、泊洛沙姆與聚乳酸-羥基乙酸聚合物(pluronic-plga)中的一種或幾種。

所述的凍干保護(hù)劑選自于聚乙二醇、甘露醇、山梨醇、泊洛沙姆、葡萄糖、果糖、低聚糖、氨基酸、血清蛋白、膠原蛋白、明膠、鉀鹽、鈉鹽、磷酸鹽緩沖液中的一種或幾種。

所述高分子聚合物為均聚物、共聚物或嵌段聚合物，當(dāng)高分子聚合物含有聚乙二醇嵌段時(shí)，聚乙二醇嵌段的分子量為500-20000，當(dāng)高分子聚合物含有泊洛沙姆嵌段時(shí)，該泊洛沙姆嵌段分子量為1000-10000，高分子聚合物含有的聚己內(nèi)酯，聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸嵌段分子量為1000-100000，各嵌段之間分子摩爾比為1-100:100-1，當(dāng)高分子聚合物為均聚物時(shí)，聚己內(nèi)酯、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸的分子量為1000-100000。

一種根據(jù)上述用于治療惡性腫瘤的納米藥物緩釋制劑的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)采用復(fù)乳法、透析法、薄膜乳化法、沉淀法、乳化揮發(fā)法或自組裝法制得由高分子聚合物作為載體材料包裹抗腫瘤活性物質(zhì)的納米粒溶液；

(2)向納米粒溶液中加入凍干保護(hù)劑凍干中，再復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得納米藥物緩釋制劑。

該緩釋制劑可用于靜脈注射、或口服、或瘤內(nèi)注射，用于治療除各類淋巴細(xì)胞白血病之外的各種惡性實(shí)體腫瘤。

有益效果

本發(fā)明所述的納米藥物緩釋制劑是以高分子聚合物為載體負(fù)載一種或幾種表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑制作而成，表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑以緩釋納米藥物的形式存在，即將有抗癌作用的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑包裹在聚合物為基質(zhì)的納米粒中，再加入凍干保護(hù)劑后制成納米凍干粉劑，加入凍干保護(hù)劑使納米藥物溶液在凍干成粉末的過程中有效保護(hù)納米藥物顆粒的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性，防止凍干過程中各種應(yīng)力變化導(dǎo)致的藥物穩(wěn)定性下降或活性降低，有效阻止納米藥物顆粒團(tuán)聚析出，有利于形成質(zhì)量均一穩(wěn)定的藥物凍干粉，形成具有藥物緩釋特性的藥物制劑。

本發(fā)明的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑納米藥物緩釋制劑通過靜脈注射到鼠肺癌模型中，通過研究其體內(nèi)外抗腫瘤作用，并觀察動物的生存時(shí)間，研究結(jié)果表明該制劑通過靜脈注射到動物模型后，起到持續(xù)抗腫瘤的作用，并且顯著的延長了動物的生存時(shí)間，同時(shí)減少了口服給藥途徑引起的全身毒副作用，因此，該藥物制劑是一種具有臨床應(yīng)用前景的，可用于肺癌靶向治療的新制劑，其在臨床運(yùn)用中具有重要意義。

本發(fā)明制備方法簡單，適宜于規(guī)?；a(chǎn)，特別適應(yīng)于制備可用于具有血液循環(huán)時(shí)間長、可體內(nèi)生物降解、藥物緩慢釋放、被動靶向特征的抗腫瘤藥物納米制劑。采用本發(fā)明的方法制備的抗腫瘤納米藥物緩釋制劑適合于采用靜脈注射、肌肉注射、瘤內(nèi)注射、瘤旁注射等方式管理，可應(yīng)用于肺癌、肝癌、胃癌、腸癌、食道癌、鼻咽癌、子宮癌、乳腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、卵巢癌、前列腺癌等惡性實(shí)體腫瘤的治療，具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1：吉非替尼納米粒的粒徑分析結(jié)果及電鏡分析結(jié)果；

圖2：吉非替尼納米粒子和吉非替尼的體外藥物釋放。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明，應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1：

制備和應(yīng)用負(fù)載吉非替尼的pla(聚乳酸)納米緩釋制劑：

采用乳化揮發(fā)法制備：稱取10毫克吉非替尼和90毫克pla(聚乳酸)聚合物溶于5毫升二氯甲烷，再加入50毫升1％的泊洛沙姆f68水溶液中，在高速均質(zhì)機(jī)于6000-15000轉(zhuǎn)/分速度下剪切5-20分鐘，然后在室溫下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時(shí)除去有機(jī)溶劑，即得納米粒混懸液，上述制得的納米粒過濾及離心洗滌數(shù)次后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將凍干后的上述吉非替尼納米藥物粉劑復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得吉非替尼納米藥物緩釋注射劑，建立鼠肺癌模型，將制備的吉非替尼納米藥物注射劑通過尾靜脈注射于荷瘤小鼠體內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。

實(shí)施例2：

制備和應(yīng)用負(fù)載吉非替尼的peg-pcl(聚乙二醇與聚己內(nèi)酯的聚合物)納米緩釋制劑：

采用薄膜乳化法制備：稱取10毫克吉非替尼和90毫克peg-pcl聚合物溶于5毫升無水乙醇，然后在室溫下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時(shí)除去有機(jī)溶劑，加入溫度為10-65℃的去離子水振蕩、復(fù)溶即得納米粒懸液，上述制得的納米粒過濾后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將上述制備的吉非替尼納米藥物凍干粉復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得吉非替尼納米藥物緩釋注射劑，建立鼠肝癌模型，將制備的吉非替尼納米藥物注射劑通過尾靜脈注射于荷瘤小鼠體內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。

實(shí)施例3：

制備和應(yīng)用負(fù)載?？颂婺岬膒luronic-plga(泊洛沙姆與聚乳酸-羥基乙酸的聚合物)納米緩釋制劑：

采用自組裝法制備：稱取20毫克?？颂婺岷?0毫克pluronic-plga聚合物溶于5毫升丙酮，再緩慢滴加入50毫升1％的泊洛沙姆f68水溶液中，然后在室溫下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時(shí)除去有機(jī)溶劑，即得納米?；鞈乙?，上述制得的納米粒過濾及離心洗滌數(shù)次后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將凍干后的上述埃克替尼納米藥物粉劑復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得吉非替尼納米藥物緩釋注射劑，建立鼠胃癌模型，將制備的?？颂婺峒{米藥物注射劑通過尾靜脈注射于荷瘤小鼠體內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。

實(shí)施例4：

制備和應(yīng)用負(fù)載鹽酸厄洛替尼的plga(聚乳酸-羥基乙酸)納米緩釋制劑：

采用復(fù)乳法制備：稱取15毫克鹽酸厄洛替尼溶于1毫升去離子水中，稱取85毫克plga聚合物溶于3毫升二氯甲烷，將鹽酸厄洛替尼溶液加入plga的溶液中，攪拌并超聲乳化，再在高速均質(zhì)機(jī)的剪切下將乳化后的乳液滴加入50毫升1％的泊洛沙姆f68水溶液中，于6000-15000轉(zhuǎn)/分速度下剪切5-20分鐘，然后在室溫下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時(shí)除去有機(jī)溶劑，即得納米?；鞈乙海鲜鲋频玫募{米粒粒徑控制待過濾及離心洗滌數(shù)次后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將凍干后的上述鹽酸厄洛替尼納米藥物粉劑復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得鹽酸厄洛替尼納米藥物緩釋注射劑，建立鼠胰腺癌模型，將制備的鹽酸厄洛替尼納米藥物注射劑通過尾靜脈注射于荷瘤小鼠體內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。

實(shí)施例5：

制備和應(yīng)用?？颂婺岬膒luronic-pcl(泊洛沙姆與聚己內(nèi)酯的聚合物)納米緩釋制劑：

采用透析法制備：稱取10毫克埃克替尼和90毫克pluronic-pcl聚合物溶于5毫升dmso中，將該混合溶液裝入透析袋(截留分子量為2000-20000)，將透析袋放入含有1％的泊洛沙姆f68的水溶液中，于100轉(zhuǎn)/分速度下攪拌透析，然后將上述經(jīng)透析后的懸液取出，經(jīng)過濾及離心洗滌數(shù)次后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將凍干后的上述?？颂婺峒{米藥物粉劑復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得?？颂婺峒{米藥物緩釋注射劑，建立鼠肺癌模型，將制備的埃克替尼納米藥物注射劑射于荷瘤小鼠腫瘤組織內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。

實(shí)施例6：

制備和應(yīng)用厄洛替尼的peg-pla(聚乙二醇與聚乳酸的聚合物)納米緩釋制劑：

采用沉淀法制備：稱取15毫克厄洛替尼和85毫克peg-pla聚合物溶于1毫升dmso中，待藥物和高分子聚合物完全溶解后，迅速滴加到含有10毫升去離子水中。待溶液中溶劑完全揮發(fā)后，將所得溶液過濾，并離心洗滌數(shù)次后，加入凍干保護(hù)劑凍干保存，上述制得的納米粒子粒徑控制在10-1000納米范圍內(nèi)。

將凍干后的上述厄洛替尼納米藥物粉劑復(fù)溶于生理鹽水或葡萄糖注射液中，即制得厄洛替尼納米藥物緩釋注射劑，建立鼠乳腺癌模型，將制備的厄洛替尼納米藥物注射劑通過尾靜脈注射于荷瘤小鼠體內(nèi)，檢測腫瘤生長變化趨勢及小鼠一般狀況反應(yīng)。