本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及雷公藤紅素作為交感神經(jīng)活性刺激劑和線粒體活化刺激劑的用途。

背景技術(shù)：

機(jī)體需要維持能量獲取和消耗的穩(wěn)態(tài)，其中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)在代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。下丘腦是機(jī)體能量和代謝平衡的調(diào)節(jié)中樞，下丘腦弓狀核、腹內(nèi)側(cè)核以及背內(nèi)側(cè)核感受胃腸道牽引張力和體內(nèi)激素水平變化，將信息整合至自主神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控神經(jīng)活性。交感神經(jīng)是自主神經(jīng)系統(tǒng)中的重要組成部分，由中樞部、交感干、神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)和神經(jīng)叢組成，發(fā)揮對機(jī)體多種器官生理功能的調(diào)控作用，包括胰腺，肝臟，褐色脂肪組織以及白色脂肪組織等。交感神經(jīng)調(diào)節(jié)瘦素誘導(dǎo)的白色脂肪組織的分解作用，并激活腎上腺素β3受體，促進(jìn)線粒體活化，促進(jìn)脂肪分解，能夠有效降低體重，且不影響食物攝取。

此外，刺激交感神經(jīng)引發(fā)線粒體活化，是機(jī)體進(jìn)行氧化代謝的重要步驟，線粒體也是糖類、脂肪和氨基酸氧化釋放能量的場所?，F(xiàn)階段針對交感神經(jīng)調(diào)控線粒體代謝的研究，主要是通過篩選合適的藥物促進(jìn)神經(jīng)活化、線粒體激活，以實(shí)現(xiàn)促進(jìn)能量代謝，預(yù)防與治療肥胖等目的。因此，現(xiàn)階段尋找針對預(yù)防、治療肥胖和代謝相關(guān)性疾病的藥物及相關(guān)靶點(diǎn)是急需解決的問題。

雷公藤紅素(celastrol)是從衛(wèi)矛科植物雷公藤根部提取的天然三萜類化合物，易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水。臨床上主要用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病，此外也有報(bào)道表明，雷公藤紅素對部分腫瘤細(xì)胞具有顯著的抑制作用。而近年來，雷公藤紅素在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用也逐漸被發(fā)現(xiàn)，其中，雷公藤紅素能夠緩解神經(jīng)細(xì)胞凋亡。2015年，一篇發(fā)表在《cell》的文章闡釋了雷公藤紅素的體重降低作用，而雷公藤紅素如何作用于神經(jīng)系統(tǒng)，尤其是作為交感神經(jīng)活性刺激劑，發(fā)揮代謝調(diào)節(jié)的應(yīng)用是現(xiàn)階段仍需要不斷探索的。

因此，探究雷公藤紅素對神經(jīng)系統(tǒng)的刺激作用，是研究雷公藤紅素代謝調(diào)節(jié)作用的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，也是尋找預(yù)防、治療肥胖及代謝相關(guān)性疾病藥物的關(guān)鍵。本發(fā)明旨在研究雷公藤紅素作為交感神經(jīng)活性刺激劑導(dǎo)致線粒體活化的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種雷公藤紅素作為神經(jīng)刺激劑的用途，本發(fā)明的另一目的在于提供一種雷公藤紅素作為線粒體刺激劑的用途。

本發(fā)明所使用的技術(shù)方案如下。

雷公藤紅素作為神經(jīng)刺激劑的用途。

雷公藤紅素作為線粒體活化刺激劑的用途。

神經(jīng)刺激劑在制備藥物中的用途，所述神經(jīng)刺激劑是雷公藤紅素。

線粒體活化刺激劑在制備藥物中的用途，所述線粒體活化刺激劑是雷公藤紅素。

優(yōu)選地，所述雷公藤紅素每次給藥的劑量為0.1-10μg/kg。

優(yōu)選地，所述雷公藤紅素每次給藥的劑量為0.1μg/kg。

優(yōu)選地，所述雷公藤紅素每次給藥的劑量為1.0μg/kg。

優(yōu)選地，所述雷公藤紅素每次給藥的劑量為10μg/kg。

優(yōu)選地，所述神經(jīng)刺激劑是交感神經(jīng)刺激劑。

優(yōu)選地，所述藥物包括雷公藤紅素，以及藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或輔助性成分。

優(yōu)選地，所述藥物形式選自片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、緩釋劑、注射液、輸液、注射用無菌粉末中的一種。

本發(fā)明還提供了一種用于刺激交感神經(jīng)活性的藥物，其中，所述藥物包括雷公藤紅素，以及藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或輔助性成分。

優(yōu)選地，所述藥物是以雷公藤紅素每次給藥的劑量為0.1-10μg/kg的形式存在。

優(yōu)選地，所述藥物的給藥形式為腹膜內(nèi)給藥。

優(yōu)選地，所述藥物的給藥形式為口服或靜脈給藥。

優(yōu)選地，所述藥物是以每天給藥一次的形式存在。

本發(fā)明將實(shí)驗(yàn)小鼠分成0.1μg/kg、1.0μg/kg、10μg/kg雷公藤紅素注射組和對照溶劑(dmso)注射組，通過westernblot技術(shù)，q-pcr技術(shù)以及免疫熒光技術(shù)檢測脂肪組織中交感神經(jīng)活化標(biāo)志分子(酪氨酸羥化酶，tyrosinehydroxylase,th；腎上腺素β受體3，β3-adrenergicreceptor3,adrβ3)、線粒體活化標(biāo)志分子(過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α，peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγco-activator1α，pgc-1α；過氧化物酶體增殖物激活受體γ，peroxisomeproliferatoractivatedreceptorγ，pparγ；細(xì)胞色素c氧化酶8β，cytochromecoxidasesubunit8β，cox8β；解偶聯(lián)蛋白1，uncouplingprotein1，ucp-1)蛋白及mrna水平變化。結(jié)果證明，雷公藤紅素能夠有效刺激交感神經(jīng)活性，并由此活化線粒體。此外，雷公藤紅素可通過上調(diào)交感神經(jīng)活性，促進(jìn)線粒體活化，促進(jìn)腎上腺素β3受體活性，調(diào)節(jié)糖類和脂質(zhì)代謝。本發(fā)明提供了雷公藤紅素作為交感神經(jīng)活性和線粒體活化刺激劑的作用和應(yīng)用，以及一種有效的交感神經(jīng)和線粒體活化激活劑。

附圖說明

圖1為分別給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠1.0μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)7天后，腹股溝白色脂肪組織中adrβ3，pgc-1α，pparγ，cox8β的mrna水平的變化。

圖2為分別給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠1.0μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)7天后，腹股溝白色脂肪組織中th的蛋白表達(dá)情況。

圖3為分別給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠1.0μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)7天后，褐色脂肪組織中th的蛋白表達(dá)情況。

圖4為利用免疫熒光技術(shù)對給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠1.0μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)后，腹股溝白色脂肪組織和褐色脂肪組織中th表達(dá)情況的檢測結(jié)果。

圖5為分別給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠10μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)7天后對腹股溝白色脂肪組織中adrβ3，tbx1，pgc-1α，pparγ，cox8β的mrna水平的影響。

圖6分別給予60％高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠0.1μg/kg雷公藤紅素與對照溶劑(dmso)7天后，腹股溝白色脂肪組織中交感神經(jīng)活性相關(guān)標(biāo)志分子ucp-1的mrna水平的影響。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的介紹，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。

所使用的小鼠為：7-8周齡雄性spf級c57bl/6小鼠，購買于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部。c57bl/6小鼠飼養(yǎng)條件：環(huán)境溫度22±0.5℃，12小時(shí)/12小時(shí)明暗交替。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001，n＝10。

實(shí)施例1：檢測1.0μg/kg雷公藤紅素對高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠交感神經(jīng)活性及線粒體活化標(biāo)志分子的影響。

1.0μg/kg的雷公藤紅素注射7天后，取腹股溝白色脂肪組織，提取組織rna，利用q-pcr技術(shù)檢測雷公藤紅素對腹股溝白色脂肪組織中交感神經(jīng)活性標(biāo)志分子adrβ3，以及線粒體活化標(biāo)志分子pgc1-α，cox8β的mrna水平的影響。結(jié)果顯示，1.0μg/kg能夠顯著提升腹股溝白色脂肪組織中adrβ3，pgc1-α，cox8β的mrna水平。結(jié)果見圖1。證實(shí)了1.0μg/kg的雷公藤紅素對交感神經(jīng)的刺激作用和線粒體的活化作用。

1.0μg/kg的雷公藤紅素注射7天后，取腹股溝白色脂肪和褐色脂肪組織，提取組織蛋白后通過westernblot技術(shù)檢測腹股溝白色脂肪和褐色脂肪組織中酪氨酸羥化酶(th)的蛋白水平變化。th是交感神經(jīng)活性標(biāo)志分子，其表達(dá)量越高，證明交感神經(jīng)活性越強(qiáng)。與對照溶劑組相比，1.0μg/kg雷公藤紅素可使腹股溝白色脂肪和褐色脂肪組織中th蛋白水平顯著提高，證實(shí)了雷公藤紅素能夠顯著刺激與提升腹股溝白色脂肪組織和褐色脂肪組織的交感神經(jīng)活性。結(jié)果見圖2-3。

1.0μg/kg的雷公藤紅素注射7天后，取腹股溝白色脂肪組織和褐色脂肪組織，4％多聚甲醛溶液固定，20％和30％蔗糖溶液梯度脫水后冰凍切片，通過免疫熒光技術(shù)檢測雷公藤紅素對腹股溝白色脂肪組織和褐色脂肪組織中th表達(dá)水平的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.0μg/kg雷公藤紅素顯著提升脂肪組織中th的表達(dá)量，證實(shí)了雷公藤紅素對交感神經(jīng)的刺激和活化作用，結(jié)果見圖4。

實(shí)施例2：檢測10μg/kg雷公藤紅素對高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠交感神經(jīng)活性及線粒體活化標(biāo)志分子的影響。

10μg/kg的雷公藤紅素注射7天后，取腹股溝白色脂肪組織，提取組織rna，利用q-pcr技術(shù)發(fā)現(xiàn)脂肪組織中交感神經(jīng)活性標(biāo)志分子adrβ3以及線粒體活化標(biāo)志分子txb1，pgc1α，pparγ，cox8β的mrna水平均無顯著變化。結(jié)果見圖5。

實(shí)施例3：檢測0.1μg/kg雷公藤紅素對高脂飲食喂養(yǎng)的c57bl/6小鼠交感神經(jīng)活性及線粒體活化標(biāo)志分子的影響。

0.1μg/kg的雷公藤紅素注射7天后，取腹股溝白色脂肪組織，提取組織rna，利用q-pcr技術(shù)發(fā)現(xiàn)脂肪組織中交感神經(jīng)活性相關(guān)標(biāo)志分子ucp-1的mrna水平無顯著變化。結(jié)果見圖6。

綜上所述，本發(fā)明提供了一種雷公藤紅素作為線粒體活化和交感神經(jīng)活性刺激劑的作用。以上是對本發(fā)明具體實(shí)施例的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不局限于上述實(shí)施例的特定實(shí)施方式，其他任何未背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)與原理下所做的改變、修飾、簡化等均為等效置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。