本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物以及化合物在制備治療心肌缺血再灌注損傷的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：再灌注治療能快速打開(kāi)堵塞血管、恢復(fù)冠脈血供，是治療冠心病急性心肌梗死的重要手段。但再灌注治療只是一種局部治療，并不能終止冠心病的病理發(fā)展進(jìn)程，加之治療后出現(xiàn)的一系列心肌缺血再灌注損傷(miri)，嚴(yán)重制約了冠心病的治療效果。有研究證實(shí)，急性心肌梗死患者即使接受最佳的再灌注治療，仍有10％～30％出現(xiàn)miri，miri被認(rèn)為是導(dǎo)致心梗后心力衰竭發(fā)生率高達(dá)25％及年死亡率達(dá)10％的主要原因，因此防治miri是臨床急需解決的問(wèn)題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種治療心肌缺血再灌注損傷的藥物組合物，所述藥物組合物含有具有下列結(jié)構(gòu)的化合物：優(yōu)選地，r1可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c12)烷基、環(huán)(c3-c6)烷基、烷氧基、氫、羥基、鹵素等。優(yōu)選地，r2可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c6)烷基、直鏈或支鏈(c2-c6)烯基、直鏈或支鏈(c2-c6)炔基、(c3-c7)環(huán)烷基、(c3-c7)環(huán)烯基、苯基等。更優(yōu)選地，r1獨(dú)立地表示br。更優(yōu)選地，r2獨(dú)立地表示苯環(huán)。本發(fā)明還提供化合物在制備治療心肌缺血再灌注損傷的藥物中的用途，所述化合物其結(jié)構(gòu)為：優(yōu)選地，r1可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c12)烷基、環(huán)(c3-c6)烷基、烷氧基、氫、羥基、鹵素等。優(yōu)選地，r2可以任意選自：直鏈或支鏈(c1-c6)烷基、直鏈或支鏈(c2-c6)烯基、直鏈或支鏈(c2-c6)炔基、(c3-c7)環(huán)烷基、(c3-c7)環(huán)烯基、苯基等。更優(yōu)選地，r1獨(dú)立地表示br。更優(yōu)選地，r2獨(dú)立地表示苯環(huán)。本發(fā)明藥物組合物在miri早期可以保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制氧化及炎癥浸潤(rùn)，在miri晚期可能通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡，縮小心肌梗死面積，改善心功能來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)心臟的保護(hù)作用。附圖說(shuō)明圖1是對(duì)大鼠心臟心肌梗死的影響(伊文思藍(lán)-ttc雙染)。圖2是各組心肌細(xì)胞凋亡情況(tunel，×200)。圖3是各組caspase-3、bax及bcl-2的蛋白表達(dá)情況。圖4是各組caspase-3、bax及bcl-2蛋白電泳結(jié)果。a.假手術(shù)組；b.模型組；c.本發(fā)明藥物組。具體實(shí)施方式下面通過(guò)實(shí)施例來(lái)具體說(shuō)明本發(fā)明藥物的效果。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明藥物的表征lc-ms:m/z(esi):481(m+h)+。1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.57(d,j＝4.0hz,1h),7.69(m,1h),7.57(m,1h),7.39-7.41(m,4h),7.25-7.28(m,2h),7.13(m,2h),4.30(dd,j＝8.0,12hz,2h),2.47(m,1h),1.20(m,2h),0.91(m,2h)。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明藥物治療心肌缺血再灌注損傷的效果分組及給藥大鼠按體重隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、本發(fā)明藥物組，每組20只，預(yù)防性給藥7d，然后進(jìn)行造模手術(shù)。其中假手術(shù)組及模型組均以0.5重量％的羧甲基纖維素鈉水溶液灌胃1ml，本發(fā)明藥物組灌胃實(shí)施例1藥物1mg/kg。模型建立以10％水合氯醛腹腔注射麻醉，經(jīng)口腔行氣管插管，連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，呼吸頻率約70次/min，潮氣量7～8ml，呼吸比1：3，連接多通道生理信號(hào)采集系統(tǒng)，描記術(shù)前ⅱ導(dǎo)聯(lián)心電圖。于左側(cè)第3或第3肋間切口，鈍性分離皮下組織及肌肉，打開(kāi)心包膜，在左心耳下緣距肺動(dòng)脈弓根部2mm處結(jié)扎(3/8圓針)，進(jìn)針深度約1mm，寬度約2mm，在冠脈前降支面置硅膠管連同冠脈用4號(hào)醫(yī)用縫合線一起結(jié)扎。50min后，剪去結(jié)扎線，連同硅膠管一同取出，進(jìn)行再灌注。假手術(shù)組只在相應(yīng)部位穿線不結(jié)扎。關(guān)閉胸腔，逐層縫合肌肉、皮膚，術(shù)后腹腔注射青霉素10萬(wàn)單位預(yù)防感染。結(jié)扎成功標(biāo)志：結(jié)扎下方心肌顏色變灰白，同時(shí)心電圖st段進(jìn)行性抬高甚至弓背向上(較正常至少抬高2mm)。復(fù)灌成功標(biāo)志：心臟顏色由灰白逐漸恢復(fù)正常，或30min內(nèi)心電圖st下降至少50％。造模前心率<350次/min者，未到規(guī)定時(shí)間死亡者及造模不成功者予以剔除。標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)再灌注2h心肌酶、內(nèi)皮功能檢測(cè)每組取造模成功大鼠5只，采集血清，以全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)乳酸脫氫酶(ldh)及肌酸激酶同工酶(ck-mb)，以放射免疫法檢測(cè)血清內(nèi)皮素(et-1)，紫外分光光度計(jì)檢測(cè)血清no水平，紫外分光光度計(jì)檢測(cè)心肌丙二醛(mda)、髓過(guò)氧化物酶(mpo)水平。心肌梗死面積測(cè)定每組另取造模成功未取血大鼠5只于再灌注48h時(shí)處死，術(shù)前與取材前b超檢測(cè)心臟射血分?jǐn)?shù)，從大鼠左肺靜脈注射0.5％依文思藍(lán)約1.5ml，待大鼠口唇爪甲變藍(lán)后摘取心臟，以冰鹽水沖洗，擦干，置于-20℃凍存20min后，沿結(jié)扎線以下切成等厚的4～5片，放入1％ttc溶液中，37℃孵育15～20min，流水沖洗。非缺血區(qū)呈藍(lán)色，缺血未梗死區(qū)呈磚紅色，缺血區(qū)(aar)為灰白區(qū)與磚紅色區(qū)域之和，梗死區(qū)(an)呈灰白色，放置于10％甲醛中室溫固定24h。然后用l2035awpioneer數(shù)碼照相機(jī)進(jìn)行圖像采集，以version6.0mediacyberneticsimage-proplus圖像分析軟件分別計(jì)算出梗死區(qū)、占缺血區(qū)面積的比例，缺血區(qū)占左室面積的比例。westernblot法檢測(cè)心肌天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-3)、b細(xì)胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bcl-2相關(guān)x蛋白(bax)蛋白表達(dá)。每組取5只大鼠分別檢測(cè)心肌caspase-3、bax及bcl-2蛋白表達(dá)。根據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)提取蛋白，bca法檢測(cè)組織蛋白濃度，調(diào)整蛋白濃度，上樣，根據(jù)蛋白目的分子量設(shè)定電泳條件，轉(zhuǎn)膜，封閉，經(jīng)一抗(1：1000)，二抗孵育，顯色曝光，將顯色后的圖片掃描后，使用gelimagesystemver.4.00軟件(上海天能科技有限公司)對(duì)圖像進(jìn)行灰度分析。以目的蛋白灰度值/β-actin灰度值表示目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。tunel法檢測(cè)細(xì)胞凋亡每組取5只大鼠做心臟石蠟切片，脫水，蛋白酶k中孵育后避光條件下加稀釋液，tunel反應(yīng)液，37℃放置1h轉(zhuǎn)化pod，37℃烤箱中放置30min，取出沖洗后加dab，經(jīng)蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯溶液透明，封片。于光學(xué)顯微鏡下觀察，其中正常心肌細(xì)胞核呈藍(lán)色，凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)出深淺不一的棕褐色。每張切片于凋亡細(xì)胞分布相同區(qū)域隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野，計(jì)算平均每個(gè)視野中的凋亡細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比，即為凋亡指數(shù)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料結(jié)果以表示，多組間比較采用單因素方差分析，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注2h心肌酶的影響組別ldh/u·l-1ck-mb/mmol·l-1假手術(shù)1340.27±330.428055.25±3460.83模型4115.50±800.942)27903.16±8082.152)本發(fā)明藥物3200.00±720.402，3)19025.15±4652.302，3)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組ldh及ck-mb均顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組ldh及ck-mb均明顯降低(p<0.05)。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注2h內(nèi)皮功能的影響與假手術(shù)比較，模型組血清e(cuò)t-1顯著上升(p<0.01)，no明顯下降(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組et-1明顯下降(p<0.05)，而no明顯上升(p<0.05)。見(jiàn)下表。組別et-1/ng·l-1no/μmol·l-1假手術(shù)39.00±4.308.17±1.65模型48.35±2.532)4.30±2.161)本發(fā)明藥物40.62±6.153)7.81±3.421，3)注：與假于術(shù)比較1)p<0.05，2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注2h心肌組織氧化損傷的影響與假手術(shù)組比較，模型組mda及mpo均顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組mda及mpo明顯降低(p<0.05)。見(jiàn)下表。組別mda/g·μmol-1mpo/u·g-1假手術(shù)1.58±0.200.94±0.05模型2.80±0.382)1.35±0.072)本發(fā)明藥物2.12±0.303)1.03±0.203)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注48h心臟射血分?jǐn)?shù)及心肌梗死面積的影響與假手術(shù)組比較，模型組及本發(fā)明藥物組大鼠ef值顯著下降(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組大鼠ef值明顯上升(p<0.05)。假手術(shù)組無(wú)心肌梗死；與模型組比較，本發(fā)明藥物組心梗/缺血面積比率顯著下降(p<0.01)。見(jiàn)表4和圖1。組別ef缺血/左室面積心梗/缺血面積假手術(shù)92.09±6.8800模型69.00±12.602)52.55±10.9051.01±5.57本發(fā)明藥物78.43±9.922，3)47.75±11.5443.10±4.052)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較3)p<0.01。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注48h心肌細(xì)胞調(diào)亡指數(shù)影響與假手術(shù)比較，各組心肌凋亡指數(shù)均有顯著升高(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物能顯著降低心肌凋亡指數(shù)(p<0.01)。見(jiàn)下表和圖2。組別凋亡指數(shù)/％假手術(shù)9.45±0.36模型49.63±0.352)本發(fā)明藥物27.36±0.712，4)注：與假于術(shù)比較2)p<0.01；與模型組比較4)p<0.01。本發(fā)明藥物對(duì)再灌注48h心肌caspase-3、bax及bcl-2的蛋白表達(dá)的影響與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組caspase-3表達(dá)明顯升高(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組caspase-3表達(dá)顯著降低(p<0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組bax表達(dá)明顯升高(p<0.05)；與模型比較，本發(fā)明藥物組bax表達(dá)顯著降低(p<0.01)。與假手術(shù)比較，模型組及本發(fā)明藥物組bcl-2表達(dá)顯著降低(p<0.01)；與模型組比較，本發(fā)明藥物組bcl-2表達(dá)明顯升高(p<0.05)。見(jiàn)圖3、4。當(dāng)前第1頁(yè)12