本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)/多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種包含fgf20的藥物組合物，其用于治療腦創(chuàng)傷，尤其是修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。另外，本發(fā)明還涉及包括該藥物組合物的治療應(yīng)用等。

背景技術(shù)：

腦創(chuàng)傷，又稱創(chuàng)傷性腦損傷(tbi)，是指由外部機械力對頭部的沖擊或撞擊，急速的加速或減速，外物穿入腦內(nèi)等造成腦組織損傷，由此導(dǎo)致暫時或永久性認知、身體和心理功能障礙等。腦創(chuàng)傷不是單一的病理生理機制，而是復(fù)雜的疾病過程，目前尚無有效的治療手段。

而血腦屏障(bloodbrainbarrier)是由腦微血管內(nèi)皮細胞、星形膠質(zhì)細胞終足、周細胞和基底膜組成，其不是簡單的物理屏障，其肩負著維持腦內(nèi)微環(huán)境穩(wěn)態(tài)的重要作用。其中，第一道防線是內(nèi)皮細胞，它在血液和中樞神經(jīng)系統(tǒng)之間呈現(xiàn)出一個動態(tài)的、高調(diào)節(jié)的接口。血腦屏障的內(nèi)皮細胞區(qū)別于外周內(nèi)皮細胞，主要表現(xiàn)在它們?nèi)狈Υ翱捉Y(jié)構(gòu)，有最低的胞飲水平和存在內(nèi)皮細胞間的緊密連接。血腦屏障的主要作用是嚴格調(diào)節(jié)細胞通透率。這主要是由毛細血管內(nèi)皮細胞之間的緊密連接介導(dǎo)，限制細胞溶質(zhì)、離子和水的運動。

現(xiàn)有技術(shù)中的蛋白質(zhì)類藥物(也稱活性生長因子群及營養(yǎng)成份)不但成分復(fù)雜，而且用量大，非常不容易穩(wěn)定生產(chǎn)，難以在實踐中推廣應(yīng)用。尤其是，現(xiàn)有的成纖維細胞生長因子(fibroblastgrowthfactor，fgf)家族不同成員的功能和結(jié)構(gòu)各不相同，目前有23種，能確認選擇其中之一已屬不易。

綜上所述，盡管目前對腦創(chuàng)傷還沒有有效的治療手段，但是本發(fā)明人沒有在現(xiàn)有技術(shù)的困難面前退縮，經(jīng)過長期的艱苦研究，尤其是結(jié)合本發(fā)明人的經(jīng)驗，發(fā)現(xiàn)了一種fgf(即fgf20)，能夠有效治療腦創(chuàng)傷，尤其是能夠修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療腦創(chuàng)傷的藥物組合物，尤其用于修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。另外，本發(fā)明還提供了包括該藥物組合物的藥物制劑和應(yīng)用等。

具體而言，在第一方面，本發(fā)明提供了用于治療腦創(chuàng)傷的藥物組合物，其包括成纖維細胞生長因子20(fgf20)。

fgf20是現(xiàn)有已知的，而且現(xiàn)有技術(shù)熱衷于研究fgf20的非天然突變體，而本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，使用人天然fgf20(即未經(jīng)突變的fgf20)的效果更好，因此在本發(fā)明的具體實施方式中，fgf20是人天然fgf20，其制備方法可以參見中國專利申請cn104293821a。

優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的藥物組合物中，藥物活性成分僅包括fgf20。即，除了fgf20，本發(fā)明第一方面的藥物組合物不包含其他用于治療腦創(chuàng)傷的藥物活性成分。

優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的藥物組合物中，治療腦創(chuàng)傷是修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。

也優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的藥物組合物中，創(chuàng)傷是液壓性創(chuàng)傷。

在第二方面，本發(fā)明提供了用于治療腦創(chuàng)傷的藥物制劑，其包括本發(fā)明第一方面的藥物組合物和藥學(xué)上可接受的輔料。在本文中，藥學(xué)上可接受的輔料指無毒的填充劑、穩(wěn)定劑、稀釋劑、載體、溶劑或其他制劑輔料。例如，稀釋劑、賦形劑，如微晶纖維素、甘露醇等；填充劑，如淀粉、蔗糖等；粘合劑，如淀粉、纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和/或聚乙烯吡咯烷酮；崩解劑，如碳酸鈣和/或碳酸氫鈉；吸收促進劑，如季銨化合物；表面活性劑，如十六烷醇；載體、溶劑，如水、生理鹽水、高嶺土、皂粘土等；潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸鈣/鎂、聚乙二醇等。

優(yōu)選在本發(fā)明第二方面的藥物制劑中，藥學(xué)上可接受的輔料是注射藥物制劑輔料。即，本發(fā)明第二方面的藥物制劑是注射(藥物)制劑。例如，本發(fā)明第一方面的藥物組合物可以用生理鹽水溶解或稀釋，配置成注射水劑；也可以與甘露醇和人血清白蛋白混溶后冷凍干燥，配置成注射(凍)干粉劑。

優(yōu)選在本發(fā)明第二方面的藥物制劑中，藥物活性成分僅通過本發(fā)明第一方面的藥物組合物帶來。即，本發(fā)明第二方面的藥物制劑由本發(fā)明第一方面的藥物組合物和藥學(xué)上可接受的輔料組成。

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)只需要有效量的fgf20一次注射即可起效，因此優(yōu)選本發(fā)明第二方面的藥物制劑包含有效量的fgf20。對于大鼠，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)劑量為0.6～2.4mg/kg，優(yōu)選為1.2～1.8mg/kg，最優(yōu)選為1.5mg/kg，根據(jù)大鼠體重，即可換算大鼠的有效量。在本文中，根據(jù)上下文，如無特別說明，有效量指的是成人的有效量。根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所公知的實驗動物與人的等效劑量換算關(guān)系(通常可參見fda、sfda等藥品管理機構(gòu)的指導(dǎo)意見，也可參見：黃繼漢等.藥理試驗中動物間和動物與人體間的等效劑量換算.中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2004，9(9)：1069-1072)可從實驗動物的劑量推導(dǎo)出成人的劑量。具體而言，對于本發(fā)明具體實施方式中所用的實驗動物——大鼠而言，根據(jù)上述文獻，其與成人的換算關(guān)系一般為6：1，因此對于成人，換算出的成人的劑量0.1～0.4mg/kg，優(yōu)選為0.2～0.3mg/kg，最優(yōu)選為0.25mg/kg。根據(jù)通常成人體重60kg，可以推導(dǎo)出優(yōu)選本發(fā)明第二方面的藥物制劑包含6～24mgfgf20，優(yōu)選12～18mgfgf20，最優(yōu)選為15mgfgf20。

優(yōu)選在本發(fā)明第二方面的藥物制劑中，治療腦創(chuàng)傷是修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。

也優(yōu)選在本發(fā)明第二方面的藥物制劑中，創(chuàng)傷是液壓性創(chuàng)傷。

在第三方面，本發(fā)明提供了fgf20在制備用于治療腦創(chuàng)傷的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選在本發(fā)明第三方面的應(yīng)用中，fgf20單獨作為藥物活性成分。即，本發(fā)明第三方面優(yōu)選提供了fgf20單獨作為藥物活性成分在制備用于治療腦創(chuàng)傷的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選在本發(fā)明第三方面的應(yīng)用中，藥物包含6～24mgfgf20，優(yōu)選12～18mgfgf20，最優(yōu)選為15mgfgf20。

優(yōu)選在本發(fā)明第三方面的應(yīng)用中，治療腦創(chuàng)傷是修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障。

也優(yōu)選在本發(fā)明第三方面的應(yīng)用中，創(chuàng)傷是液壓性創(chuàng)傷。

優(yōu)選在本發(fā)明第三方面的應(yīng)用中，藥物是注射藥物，如是本發(fā)明第二方面的藥物制劑。

本發(fā)明取得的有益效果在于：本發(fā)明的藥物能用于治療腦創(chuàng)傷，尤其是修復(fù)創(chuàng)傷腦的血腦屏障；該藥物僅需常規(guī)注射，無需進行腦部注射，而且僅需一次注射即可起效，有利于其實際推廣和應(yīng)用；該藥物治療效果顯著，尤其是能夠改善腦創(chuàng)傷導(dǎo)致的行為功能下降。

以下將通過具體的實施例和附圖對本發(fā)明進行詳細地描述。需要特別指出的是，這些描述僅僅是示例性的描述，并不構(gòu)成對本發(fā)明范圍的限制。依據(jù)本說明書的論述，本發(fā)明的許多變化、改變對所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來說都是顯而易見了。

附圖說明

圖1顯示了通過伊文思藍(evansblue)染色檢測的血腦屏障通透性變化的染色照片。

圖2顯示了伊文思藍染色檢測的血腦屏障通透性變化的定量結(jié)果，其中縱坐標表示每mg腦組織提取的伊文思藍的量(ng)，其中差異顯著性符號：**p<0.01，與假手術(shù)組(sham)相比；#p<0.05，與模型組(tbi)相比。

圖3顯示了cylinder行為評分結(jié)果，其中差異顯著性符號：**p<0.01，與假手術(shù)組(sham)相比；#p<0.05，與模型組(tbi)相比。

具體實施方式

下文將詳細描述本發(fā)明具體實施例。應(yīng)當(dāng)注意的是,下述實施例中描述的技術(shù)特征或者技術(shù)特征的組合不應(yīng)當(dāng)被認為是孤立的,它們可以被相互組合從而達到更好的技術(shù)效果。

實施例1液壓性腦創(chuàng)傷大鼠模型的建立

實施例2fgf20對液壓性腦創(chuàng)傷大鼠的治療

對大鼠隨機分成三組：1，假手術(shù)組(sham)：除不進行液壓沖擊損傷外，其余處理與模型組相同；2，模型組(tbi)：如實施例1建立大鼠右側(cè)大腦創(chuàng)傷模型；3，fgf20給藥組(tbi+fgf20)：如實施例1建立大鼠右側(cè)大腦創(chuàng)傷模型0.5h后，腹腔注射fgf20，大鼠劑量為1.5mg/kg。

各組大鼠在立大鼠右側(cè)大腦創(chuàng)傷模型24h后，通過尾靜脈注射伊文思藍(4％,3ml/kg)，注射后3h取全腦，拍攝其損傷區(qū)伊文思藍的染色情況(圖1)。然后將腦浸泡在等體積的三氯乙酰中過夜，離心取上清620nm下測伊文思藍含量(圖2)。結(jié)果如圖1和圖2所示，表明fgf20能顯著減少伊文思藍通過血腦屏障量，說明了fgf20具有對于血腦屏障完整性的修復(fù)作用。

其余大鼠進行cylinder神經(jīng)評分，從行為學(xué)檢測大鼠腦損傷情況(圖3)。行為評分發(fā)現(xiàn)模型組評分為32±2.2，fgf20給藥組為18.7±2.1，表明fgf20能顯著改善液壓性腦創(chuàng)傷導(dǎo)致的行為功能下降。