本發(fā)明屬于獸用藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液及其制備方法。

背景技術(shù)：

穿心蓮內(nèi)酯，天然植物穿心蓮的主要有效成份，具有祛熱解毒，消炎止痛之功效，對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染有特殊療效，被譽(yù)為天然抗生素藥物。本品為二萜類內(nèi)酯化合物，均難溶于水?，F(xiàn)有《獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》第一冊(cè)具有穿心蓮注射液的文號(hào)，但工藝采用的是水醇法提取制備而成的滅菌水溶液，因?yàn)榇┬纳徶写┬纳弮?nèi)酯成分不溶于水，因此采用現(xiàn)有工藝制備而成的穿心蓮注射液穿心蓮內(nèi)酯含量極低，臨床應(yīng)用時(shí)達(dá)不到預(yù)期的效果。

公告號(hào)為CN103720929A公開了一種穿心蓮注射液的制備方法，依然采用的是傳統(tǒng)水醇法提取制備的一個(gè)含有多種中藥材的中藥注射液，穿心蓮只是其中一味藥材，含量只占20%左右，嚴(yán)格意義上講不能叫穿心蓮注射液。況且這種大復(fù)方中藥注射液有很大的臨床應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)，也不符合國(guó)家獸藥典規(guī)定。公告號(hào)為CN102058638B公開了一種治療仔豬黃白痢的復(fù)方穿心蓮注射液的制備方法，其

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
包括了中藥與一系列化藥的復(fù)方，這種中藥里面添加化藥的行為是目前國(guó)家明令禁止的，處方中痢菌凈、諾氟沙星為食品動(dòng)物禁用藥物。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有穿心蓮注射液中存在的不足之處，本發(fā)明的目的旨在提供一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液及其制備方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：

一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液，每100mL注射液的組成為：穿心蓮乙醇提取物5～10g、丙二醇2～5g、穿心蓮內(nèi)酯2～10g、羥丙基-β-環(huán)糊精5～15g、琥珀酸鈉7～12g、泊洛沙姆188 1～5g、苯甲醇0.5～2g及適量的pH調(diào)節(jié)劑，余量為水；其中，pH調(diào)節(jié)劑的用量以調(diào)節(jié)注射液的pH在7.2±0.2為準(zhǔn)。

較好地，每100mL注射液的組成為：穿心蓮乙醇提取物6g、丙二醇2g、穿心蓮內(nèi)酯6g、羥丙基-β-環(huán)糊精8g、琥珀酸鈉10g、泊洛沙姆188 2g、苯甲醇0.6g及適量的pH調(diào)節(jié)劑，余量為水；其中，pH調(diào)節(jié)劑的用量以調(diào)節(jié)注射液的pH在7.2為準(zhǔn)。

本發(fā)明中涉及的穿心蓮乙醇提取物，既可以采用常規(guī)乙醇提取方法（例如1、張建強(qiáng)，張玲，王歡，孫英法. 穿心蓮提取工藝研究[J]. 食品與藥品，2005，7(1)；2、中藥成方制劑第十九冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：WS3-B-3635-98，書頁號(hào)Z19-129）提取獲得，也可以市購獲得。

制備方法，步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物5～10g、丙二醇2～5g、穿心蓮內(nèi)酯2～10g、羥丙基-β-環(huán)糊精5～15g、琥珀酸鈉7～12g、泊洛沙姆188 1～5g、苯甲醇0.5～2g及適量的pH調(diào)節(jié)劑；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入溶解當(dāng)量的水，40～60℃保溫20~30min，降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取溶解當(dāng)量的水，加熱至80～90℃，加入琥珀酸鈉，攪拌溶解，然后加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，保溫30～60min，降至室溫，依次加入羥丙基-β-環(huán)糊精、泊洛沙姆188、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加水定容至100ml，然后用7～8v%的三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2±0.2，即得穿心蓮注射液。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明克服了穿心蓮內(nèi)酯成分不溶于水而不能制備高含量注射液的弊端，制備出了含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液，具有與現(xiàn)有穿心蓮注射液相同的用途。

和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

采用新工藝提高了穿心蓮注射液中穿心蓮內(nèi)酯的含量，提高了祛熱解毒，消炎止痛及對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染的功效。本發(fā)明提供的注射液，按照國(guó)家獸藥典檢測(cè)，所有項(xiàng)目均符合國(guó)家獸藥典規(guī)定，且工藝簡(jiǎn)單，成本低廉，方便大生產(chǎn)推廣。與抗生素相比，綠色無殘留；與中藥復(fù)方相比，功效明確，副作用低。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。

本發(fā)明中所述的穿心蓮乙醇提取物和穿心蓮內(nèi)酯，為市售產(chǎn)品。下述實(shí)施例中使用的穿心蓮乙醇提取物和穿心蓮內(nèi)酯，購自四川恒瑞通達(dá)生物科技有限公司。

實(shí)施例1

一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液，制備步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物6g、丙二醇2g、穿心蓮內(nèi)酯6g、羥丙基-β-環(huán)糊精8g、琥珀酸鈉10g、泊洛沙姆188 2g、苯甲醇0.6g及適量的pH調(diào)節(jié)劑即7v%三乙醇胺溶液；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入10mL注射用水，40℃保溫30min（保溫期間不攪拌，下同），降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取20mL水，加熱至80℃，加入琥珀酸鈉，攪拌溶解，然后加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，保溫60min，降至室溫，依次加入羥丙基-β-環(huán)糊精、泊洛沙姆188、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加水定容至100ml，然后用7v%三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2，即得穿心蓮注射液。

實(shí)施例2

一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液，制備步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物10g、丙二醇5g、穿心蓮內(nèi)酯2g、羥丙基-β-環(huán)糊精5g、琥珀酸鈉7g、泊洛沙姆188 1g、苯甲醇0.5g及適量的pH調(diào)節(jié)劑即8v%三乙醇胺溶液；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入20mL注射用水，60℃保溫20min，降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取20mL水，加熱至90℃，加入琥珀酸鈉，攪拌溶解，然后加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，保溫30min，降至室溫，依次加入羥丙基-β-環(huán)糊精、泊洛沙姆188、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加注射用水定容至100ml，然后用8v%三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2，即得穿心蓮注射液。

實(shí)施例3

一種含有高含量穿心蓮內(nèi)酯的穿心蓮注射液，制備步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物6g、丙二醇2g、穿心蓮內(nèi)酯10g、羥丙基-β-環(huán)糊精15g、琥珀酸鈉12g、泊洛沙姆188 5g、苯甲醇2g及適量的pH調(diào)節(jié)劑即7v%三乙醇胺溶液；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入20mL注射用水，50℃保溫25min，降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取60mL水，加熱至85℃，加入琥珀酸鈉，攪拌溶解，然后加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，保溫45min，降至室溫，依次加入羥丙基-β-環(huán)糊精、泊洛沙姆188、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加注射用水定容至100ml，然后用7v%三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2，即得穿心蓮注射液。

對(duì)照實(shí)施例1

該對(duì)照實(shí)施例與實(shí)施例1相比，羥丙基-β-環(huán)糊精替換為β-環(huán)糊精，同時(shí)未加入琥珀酸鈉，具體步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物6g、丙二醇2g、穿心蓮內(nèi)酯6g、β-環(huán)糊精8g、泊洛沙姆188 2g、苯甲醇0.6g及適量的pH調(diào)節(jié)劑即7v%三乙醇胺溶液；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入10mL注射用水，40℃保溫30min，降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取20mL水，加熱至80℃，加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，保溫60min，降至室溫，依次加入β-環(huán)糊精、泊洛沙姆188、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加水定容至100ml，然后用7v%三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2，即得對(duì)照樣品1。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在步驟（c）中，穿心蓮內(nèi)酯不完全溶解，制備出的對(duì)照樣品1不是澄清狀態(tài)。

對(duì)照實(shí)施例2

該對(duì)照實(shí)施例與實(shí)施例1相比，未加入泊洛沙姆188且步驟（c）未執(zhí)行保溫過程，具體步驟如下：

（a）稱取穿心蓮乙醇提取物6g、丙二醇2g、穿心蓮內(nèi)酯6g、羥丙基-β-環(huán)糊精8g、琥珀酸鈉10g、苯甲醇0.6g及適量的pH調(diào)節(jié)劑即7v%三乙醇胺溶液；

（b）取穿心蓮乙醇提取物和丙二醇混合攪拌均勻后，加入10mL注射用水，40℃保溫30min，降至室溫，獲得溶液I，備用；

（c）取20mL水，加熱至80℃，加入琥珀酸鈉，攪拌溶解，然后加入穿心蓮內(nèi)酯，攪拌分散均勻后，降至室溫，依次加入羥丙基-β-環(huán)糊精、苯甲醇，攪拌溶解，獲得溶液II，備用；

（d）合并溶液I、II，加水定容至100ml，然后用7v%三乙醇胺溶液調(diào)至pH至7.2，即得對(duì)照樣品2。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：制備出的對(duì)照樣品2在放置2小時(shí)后，出現(xiàn)沉淀析出。

藥效實(shí)驗(yàn)

以實(shí)施例1-3制得的穿心蓮注射液為實(shí)驗(yàn)藥物，以按《獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（化學(xué)藥品、中藥卷，2013年編制）第一冊(cè)第256頁工藝制備的穿心蓮注射液為對(duì)照藥物進(jìn)行以下藥效試驗(yàn)。

1、試驗(yàn)動(dòng)物分組：選用某養(yǎng)豬場(chǎng)自然發(fā)病并確診為仔豬白痢的病豬150頭，按體重隨機(jī)分成5組，平均體重30±0.5kg。隔離單獨(dú)飼養(yǎng)，飼喂全價(jià)飼料，自由飲水，保持組間飼養(yǎng)環(huán)境一致。

2、實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)組1單次肌肉注射5ml實(shí)施例1制得的產(chǎn)品，一日一次；實(shí)驗(yàn)組2單次肌肉注射5ml實(shí)施例2制得的產(chǎn)品，一日一次；實(shí)驗(yàn)組3單次肌肉注射5ml實(shí)施例3制得的產(chǎn)品，一日一次；藥物對(duì)照組單次注射10ml對(duì)照藥物，一日一次；空白對(duì)照組只食用上述全價(jià)飼料，不用藥物。

3、給藥后觀察：治療開始前1d和治療開始后3d，每日記錄各組飲食情況、體重情況和死亡情況。結(jié)果見表1，其中，無效是指，與治療前相比，3d后進(jìn)食量減少，畜禽體重減少或者出現(xiàn)死亡；有效是指，與治療前相比，畜禽進(jìn)食量有所增加，體重得以維持或增加；治愈是指，與治療前相比，3d后畜禽進(jìn)食量恢復(fù)正常，體重增長(zhǎng)速度恢復(fù)正常。

從表1實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，本發(fā)明制備的穿心蓮注射液見效快，效果顯著，給藥后3d治愈率達(dá)到90%，病畜腹瀉現(xiàn)象明顯好轉(zhuǎn)，采食量恢復(fù)正常。其中實(shí)施例1穿心蓮注射液治療效果與對(duì)照藥物相比無明顯差異。本發(fā)明制備的穿心蓮注射液含量高，用藥量為傳統(tǒng)產(chǎn)品的一半即能達(dá)到相當(dāng)?shù)闹委熜Ч?/p>

上述實(shí)施例為本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明所作的改變均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。