專利名稱：同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同時分離制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，特別是涉及一種利 用大孔樹脂同時分離制備穿心蓮中這兩種主要有效成分的方法。
穿心蓮主要有效成分為二萜內(nèi)酯類成分，具有消炎抗菌、抗病毒感染等作用。其中以穿 心蓮內(nèi)酯及脫水穿心蓮內(nèi)酯含量最高，而脫水穿心蓮內(nèi)酯是穿心蓮內(nèi)酯化合物中作用最強(qiáng)的 一個。以穿心蓮內(nèi)酯或脫水穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物制成的藥物，如穿心蓮內(nèi)酯片、穿琥寧注 射液、炎琥寧注射液等己在臨床上廣泛應(yīng)用。
目前對穿心蓮中二萜內(nèi)酯類成分進(jìn)行提取的傳統(tǒng)工藝有水提、堿水提、酸水提、醇提等。 張玲等人根據(jù)提取物中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯成分含量，得出浸漬工藝〉滲漉工藝>溫 浸工藝>回流提取工藝，加熱溫度在55'C時內(nèi)酯類成分變化不大，但長時間加熱也會導(dǎo)致內(nèi) 酯環(huán)的結(jié)構(gòu)破壞。因穿心蓮內(nèi)酯類成分難溶于水，水提法的提取效率及含量較低；而堿水提 取法(CN1042077)對pH值的要求較嚴(yán)格，若pH值控制不當(dāng)，有可能造成內(nèi)酯的水解，而 且這些方法提取的浸膏中有效成分含量均較低。葛發(fā)歡等人利用超臨界C02萃取法直接提取 穿心蓮藥材，所得浸膏中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量分別為13.03%和23.75%。此 外，范云鴿等人比較了 4種聚苯乙烯型的非極性大孔樹脂吸附穿心蓮總內(nèi)酯的工藝，將穿心 蓮總內(nèi)酯的含量提高到25.3%。中國專利申請CN1695702公開了對穿心蓮乙醇提取物采用 包合以及脫包合的超分子提取有效成分的方法，其超分子提取物中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮 內(nèi)酯含量分別達(dá)到40.41 %和10.20%，與常規(guī)技術(shù)相比，含量大大提高。
上述技術(shù)雖然使得穿心蓮內(nèi)酯類成分在提取物中的含量得到不同程度的提高，但仍未制 備獲得穿心蓮內(nèi)酯或脫水穿心蓮內(nèi)酯單體化合物或者這兩種成分的高純度的結(jié)晶。中國專利 申請CN1935798A公開了一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法，通過此方法制備獲得了高純度的穿心 蓮內(nèi)酯，但是沒有同時制備得到脫水穿心連內(nèi)酯。而本發(fā)明釆用不同濃度的醇溶劑對吸附在
背景技術(shù)：
穿心蓮內(nèi)酯
脫水穿心蓮內(nèi)酯
大孔樹脂上的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心連內(nèi)酯分別進(jìn)行解吸，再結(jié)合重結(jié)晶技術(shù)，可以同時制 備得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心連內(nèi)酯兩種結(jié)晶，不僅提高了藥材利用率和產(chǎn)品得率，減少了 浪費(fèi)，同時還具有工藝簡單、易操作、成本低、可以工業(yè)化生產(chǎn)等突出優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，通過此方法 得到的這兩種晶體的純度均可達(dá)97%以上，并且此方法具有工藝簡單、易操作、成本低、可 以工業(yè)化生產(chǎn)等突出優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的目的可通過實施下述技術(shù)方案來實現(xiàn)
本發(fā)明提供的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，按以下步驟進(jìn)行
1. 溶劑提取將穿心蓮粉碎后中加入一定濃度的醇溶劑進(jìn)行提取 所述的溶劑包括水、乙醇、甲醇；其中溶劑與穿心蓮草混合，按重量比計為1 : 3 30;
聽述的溶劑可以是一種溶劑，或是任意比例的混合溶劑，其中優(yōu)選的醇濃度為40 60%;所 述的提取方法是冷浸或超聲提取。
2. 將步驟1得到的提取液過濾后，回收溶劑，使濾液中醇溶劑濃度低于20%;再過濾后， 取濾液流經(jīng)大孔樹脂柱進(jìn)行交換、吸附，其流速為0.8 3BV/h;
3. 經(jīng)步驟2交換、吸附完畢，分別用水和由低至高的不同濃度的醇溶劑作為洗脫液進(jìn)行 梯度洗脫。先用水或低于35%的醇溶劑將大部分高極性的雜質(zhì)洗脫去除，然后用35~50%的 醇溶劑將穿心蓮內(nèi)酯洗脫下來并收集，再用55~100%的醇溶劑將脫水穿心蓮內(nèi)酯洗脫下來并 收集，通過硅膠板薄層層析與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對照決定收集洗脫液 的起始點(diǎn)，從而獲得分別富集了穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的洗脫液。
4. 將經(jīng)步驟3得到的富集了穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的洗脫液分別濃縮后，運(yùn)用重 結(jié)晶技術(shù)精制得到純度可達(dá)97%以上的穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯結(jié)晶。
其他詳細(xì)細(xì)節(jié)在本領(lǐng)域常見。
具體實施方式
實施例1:
50g穿心蓮全草粉碎后，其粒徑達(dá)到4mm，加入150mL50%乙醇水溶液混合，浸漬提取 3次，分別提取3、 2、 1天。提取液過濾減壓回收溶劑至穿心蓮內(nèi)酯仍處于溶解狀態(tài)，加水 適量稀釋，過濾或離心棄去沉淀，將濾液通過南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的非極性DA201-A大孔樹 脂，濾液經(jīng)樹脂柱交換、吸附的流速為3mL/min;交換完畢后，分別用水、35%、 45%、 55 %、 60%乙醇洗脫，冼脫過程用硅膠板薄層層析與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行 對照決定收集洗脫液的起始點(diǎn)，高效液相色譜儀檢測洗脫液中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯
含量，45%乙醇洗脫液中主要含有穿心蓮內(nèi)酯，含量為46.99%,用80%乙醇水溶解過濾后 重結(jié)晶，得到穿心蓮內(nèi)酯晶體0.255g，純度達(dá)97.8%; 55%乙醇洗脫液中主要含有脫水穿心 蓮內(nèi)酯，含量為79.74%，用80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)晶，得到晶體0.039 g，純度達(dá)98.6%。
用過的樹脂柱則用10%乙醇沖洗后可反復(fù)使用，乙醇可減壓回收。采用本方法使穿心蓮 內(nèi)酯的含量從上樣前的3.6%提高到大孔樹脂富集后的46%,回收率為98%;脫水穿心蓮內(nèi) 酯的含量從0.6%提高到79%，回收率為97%。 實施例2:
50g穿心蓮全草粉碎后，其粒徑達(dá)到5mm，裝入提取器中，加入200mL 50%乙醇水溶液 混合，然后將混合溶液放在超聲波發(fā)生器容器內(nèi)，用超聲波對穿心蓮草粉進(jìn)行超聲提取。所' 用超聲頻率為20KHz，功率為50W 10000W，超聲提取時間為60分鐘，溫度為40度。提 取液過濾減壓回收溶劑至穿心蓮內(nèi)酯仍處于溶解狀態(tài)，加水適量稀釋，過濾或離心棄去沉淀， 將濾液通過南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的非極性DA201-B大孔樹脂，濾液經(jīng)樹脂柱交換、吸附的流 速為3mL/min;交換完畢后，分別用水、30%、 50%、 70%、 90%洗脫，洗脫過程用硅膠板 薄層層析與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對照決定收集洗脫液的起始點(diǎn)，高效液 相色譜儀檢測洗脫液中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量，50%乙醇洗脫液中主要含有穿心 蓮內(nèi)酯，含量為48.39%，用80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)晶，得到穿心蓮內(nèi)酯晶體0.245g， 純度達(dá)97.8%; 70%乙醇洗脫液中主要含有脫水穿心蓮內(nèi)酯，含量為80.23%，用80%乙醇 水溶解過濾后重結(jié)晶，得到晶體0.037g,純度達(dá)98.4%。
用過的樹脂柱則用10%乙醇沖洗后可反復(fù)使用，乙醇可減壓回收。采用本方法使穿心蓮 內(nèi)酯的含量從上樣前的4.2%提高到大孔樹脂富集后的48%以上，回收率為96%;脫水穿心 蓮內(nèi)酯的含量從0.57%提高到80%以上，回收率為95%。 實施例3:
50g穿心蓮全草粉碎后，其粒徑達(dá)到2mm，加入250mL 60%乙醇水溶液混合，浸漬提取 3次，分別提取3、 2、 1天。提取液過濾減壓回收溶劑至穿心蓮內(nèi)酯仍處于溶解狀態(tài)，加水 適量稀釋，過濾或離心棄去沉淀，將濾液通過南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的非極性DA201-B大孔樹 脂，濾液經(jīng)樹脂柱交換、吸附的流速為3mL/min;交換完畢后，分別用水、30%、 45%、 60 %、 70%乙醇洗脫，洗脫過程用硅膠板薄層層析與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行 對照決定收集洗脫液的起始點(diǎn)，高效液相色譜儀檢測洗脫液中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯 含量，45%乙醇洗脫液中主要含有穿心蓮內(nèi)酯，含量為48.57%， 80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)
晶，得到穿心蓮內(nèi)酯晶體0.252g，純度達(dá)98.8%; 60%乙醇洗脫液中主要含有脫水穿心蓮內(nèi)
酯，含量為78.48%， 80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)晶，得到晶體0.038g，純度達(dá)99.3%。
用過的樹脂柱則用10%乙醇沖洗后可反復(fù)使用，乙醇可減壓回收。采用本方法使穿心蓮 內(nèi)酯的含量從上樣前的4.1%提高到大孔樹脂富集后的48%以上，回收率為97%;脫水穿心 蓮內(nèi)酯的含量從0.63%提高到78%以上，回收率為97%。 實施例4:
50g穿心蓮全草粉碎后，其粒徑達(dá)到5mm,裝入提取器中，加入200mL 70%乙醇水溶液 混合，然后將混合溶液放在超聲波發(fā)生器容器內(nèi)，用超聲波對穿心蓮草粉進(jìn)行超聲提取。所 用超聲頻率為20KHz,功率為50W 10000W,超聲提取時間為60分鐘，溫度為45度。提 取液過濾減壓回收溶劑至穿心蓮內(nèi)酯仍處于溶解狀態(tài)，加水適量稀釋，過濾或離心棄去沉淀， 將濾液通過南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的非極性DA201-C大孔樹脂，濾液經(jīng)樹脂柱交換、吸附的流' 速為3mL/min;交換完畢后，分別用水、30%、 40%、 45%、 50%、 55%、 60%乙醇洗脫， 洗脫過程用硅膠板薄層層析與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對照決定收集洗脫液 的起始點(diǎn)，高效液相色譜儀檢測洗脫液中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量，45%乙醇洗脫 液中主要含有穿心蓮內(nèi)酯，含量為46.17%，用80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)晶，得到穿心蓮 內(nèi)酯晶體0.255g，純度達(dá)97.6%; 55%乙醇洗脫液中主要含有脫水穿心蓮內(nèi)酯，含量為81.62 %,用80%乙醇水溶解過濾后重結(jié)晶，得到晶體0.039g，純度達(dá)99.7%。
用過的樹脂柱則用10%乙醇沖洗后可反復(fù)使用，乙醇可減壓回收。采用本方法使穿心蓮 內(nèi)酯的含量從上樣前的4.8%提高到大孔樹脂富集的46%以上，回收率為98%;脫水穿心蓮 內(nèi)酯的含量從0.6%提高到81 %以上，回收率為96% 。
權(quán)利要求
1.一種同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行(1)溶劑提取將穿心蓮粉碎后中加入一定濃度的醇溶劑進(jìn)行提?。?2)將提取液過濾后，回收溶劑，使濾液中醇溶劑濃度低于20％；再過濾后，取濾液流經(jīng)大孔樹脂柱進(jìn)行交換、吸附，其流速為0.8～3BV/h；(3)經(jīng)樹脂交換、吸附完畢，用不同濃度的醇溶劑作為洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，使穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯分別解吸于不同濃度的洗脫液中；(4)將分別含有穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的洗脫液適當(dāng)濃縮后，進(jìn)行重結(jié)晶，精制得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯結(jié)晶。
2、 按照權(quán)利要求l所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于 聽述步驟1中使用的溶劑包括水、乙醇、甲醇；其中溶劑與穿心蓮藥材粗粉混合，按重量比 計為1 : 3 30。
3、 按照權(quán)利要求l所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于-聽述步驟1中使用的溶劑可以是一種溶劑，或是任意比例的混合溶劑，其中優(yōu)選的醇濃度為 40 60%。
4、 按照權(quán)利要求l所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于殲述步驟l中采用的提取方法可以是冷浸提取，或超聲提取，其中冷浸提取時間為1 15d， 迢聲提取時間為30min 120min。
5、 按照權(quán)利要求l所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于 沂述步驟3中使用的溶劑包括水、乙醇、甲醇。
6、 按照權(quán)利要求1所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于 訴述步驟3中用于解吸樹脂中的穿心蓮內(nèi)酯的洗脫液，其醇溶劑的濃度為35~50%;用于解 及樹脂中的脫水穿心蓮內(nèi)酯的洗脫液，其醇溶劑的濃度為55 100%。
7、 按照權(quán)利要求l所述的同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于 所述的大孔樹脂型號為DA201-A、 B、 C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種同時制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法。此方法是將穿心蓮全草適當(dāng)粉碎后加入一定濃度的醇溶劑進(jìn)行提取，將提取液過濾后，回收溶劑，使濾液中醇溶劑濃度低于20％；過濾后，取濾液經(jīng)大孔樹脂交換、吸附完畢，用不同濃度的醇溶劑進(jìn)行梯度洗脫，使穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯分別解吸于不同濃度的洗脫液中；將洗脫液濃縮后，分別重結(jié)晶精制得到穿心蓮內(nèi)酯結(jié)晶和脫水穿心蓮內(nèi)酯結(jié)晶。通過此方法得到的兩種晶體純度均可達(dá)97％以上，并且此方法具有工藝簡單、易操作、成本低、可以工業(yè)化生產(chǎn)等突出優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號C07D307/58GK101168537SQ200710142800
公開日2008年4月30日 申請日期2007年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月6日
發(fā)明者嬌 吳, 戴好富, 梅文莉 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所