本發(fā)明涉及抗氧化活性提取物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法及其產(chǎn)品與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：白刺是蒺藜科(Zygophyllaceae)白刺屬(Nitraria)的多種落葉小灌木的統(tǒng)稱，主要品種有西伯利亞白刺(N.sibiricaPall.)和唐古特白刺(N.tangutorumBobr.)等，在我國主要生長在內(nèi)蒙古、青海、新疆、甘肅等地的荒漠或者半荒漠地區(qū)，不僅有防風(fēng)固沙的作用，而且其藥用價值和食用價值也很高，果實味甘、酸，性溫，有健脾胃，滋補(bǔ)強(qiáng)壯，調(diào)經(jīng)活血，催乳之功效，常用于治療脾胃虛弱，消化不良，神經(jīng)衰弱，高血壓頭暈，感冒等病癥。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，白刺富含黃酮和花色苷類成分，西伯利亞白刺的乙醚提取物及唐古特白刺的乙酸乙酯成分或乙醇提取物都有明顯的抗氧化活性。越來越多的研究顯示抗氧化是預(yù)防衰老的重要步驟，常見的癌癥、動脈硬化、糖尿病、白內(nèi)障、心血管病、老年癡呆、關(guān)節(jié)炎等多種老化相關(guān)疾病都被認(rèn)為與自由基有關(guān)。白刺作為一種天然抗氧化劑，在防治這些老化相關(guān)疾病方面具有很好的開發(fā)前景。現(xiàn)有技術(shù)中的抗氧化白刺提取物的制備方法，采用高壓均質(zhì)技術(shù)、膜分離技術(shù)和大孔樹脂分離技術(shù)相結(jié)合的方法，雖然可以提取得到抗氧化白刺提取物，但提取物得率低，只有0.1％～0.5％，制備得到的提取物抗氧化活性效果也不夠理想。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明目的在于提供一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法及其產(chǎn)品與應(yīng)用，以增加提取物的得率，提高白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：第一方面，本發(fā)明提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：將白刺干果與體積分?jǐn)?shù)為30％～95％的乙醇水溶液以1g:(5～30)mL的料液比混合，冷浸1h～4h，再將所述白刺干果和所述乙醇水溶液的混合物進(jìn)行提取；將所述提取得到的溶液過濾，將所述過濾得到的濾液濃縮；將所述濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，所述產(chǎn)物與所述大孔樹脂的質(zhì)量比為1:60～1:100；將所述色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用10～15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％～80％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；將所述乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述混合使用的所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為50％～70％，所述料液比為1g:30mL。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述提取的提取方法為加熱回流、超聲提取、微波提取和閃式提取中的一種或幾種。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述提取方法為閃式提取，所述閃式提取的提取次數(shù)為3～5次，所述閃式提取的每次提取時間為1min～2min。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述提取方法為超聲提取，所述超聲提取的超聲溫度為40℃，超聲時間為60min。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述吸附分離的時間為10h～14h。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述洗脫使用的所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)20％～40％。在本發(fā)明的進(jìn)一步實施方式中，所述白刺干果為唐古特白刺干果或西伯利亞白刺干果。本發(fā)明提供的白刺抗氧化活性提取物的制備方法，將白刺干果與體積分?jǐn)?shù)為30％～95％的乙醇水溶液進(jìn)行混合，其中白刺干果原料與乙醇水溶液的料液比為1g:(5～30)mL，料液比可以根據(jù)實際需要進(jìn)行調(diào)節(jié)；然后冷浸1h～4h，冷浸是增強(qiáng)溶劑的滲透性，同時還有利于浸出更多的產(chǎn)物，冷浸的時間可以根據(jù)實際需要進(jìn)行調(diào)控；將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行提取；將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到的濃縮液位浸膏；將濃縮后的產(chǎn)物，即浸膏，用水溶解，得到的含有白刺抗氧化活性成分的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:60～1:100，此處的質(zhì)量比是指未用水溶解的產(chǎn)物(浸膏)與大孔樹脂的比值，吸附分離的目的是將白刺抗氧化活性成分與其他雜質(zhì)成分進(jìn)行分離，大孔樹脂的質(zhì)量和產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比可以根據(jù)實際需要進(jìn)行調(diào)節(jié)；將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用10～15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％～80％的乙醇水溶液洗脫，乙醇水溶液的用量可以根據(jù)實際需要調(diào)節(jié)，收集乙醇洗脫液；將乙醇洗脫液濃縮干燥，即可得到白刺抗氧化活性提取物。采用本發(fā)明提供的白刺抗氧化活性提取物的制備方法，可以增加提取物的得率，提高白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性。第二方面，本發(fā)明提供了根據(jù)上述白刺抗氧化活性提取物的制備方法制備得到的白刺抗氧化活性提取物。第三方面，本發(fā)明提供了白刺抗氧化活性提取物在抗氧化產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。附圖說明圖1為本發(fā)明實施例中的白刺抗氧化活性提取物的制備方法的流程圖。具體實施方式下面將結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。如圖1所示，本發(fā)明提供一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將白刺干果與體積分?jǐn)?shù)為30％～95％的乙醇水溶液以1g:(5～30)mL的料液比混合，冷浸1h～4h，將所述白刺干果和所述乙醇水溶液的混合物進(jìn)行提取，所述提取的提取方法為加熱回流、超聲提取、微波提取和閃式提取中的一種或幾種，所述閃式提取的提取次數(shù)為3～5次，所述閃式提取的每次提取時間為1min～2min，所述超聲提取的超聲溫度為40℃，超聲時間為60min，料液比的范圍優(yōu)選為1g:(5～30)mL，這是考慮到比例大于1g/mL，不利于提取物的提出，比例小于1g/30mL，會造成過多的提取液，延長過濾和濃縮的時間，加大工作量；冷浸時間優(yōu)選為1h～4h，這是考慮到小于1h不利于提取物的浸出，大于4h可能會使浸取液發(fā)生復(fù)雜的反應(yīng)，不利于得到提取物；S2：將所述提取得到的溶液過濾，將所述過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將所述濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，所述產(chǎn)物與所述大孔樹脂的質(zhì)量比為1:60～1:100，所述吸附分離的時間為10h～14h，用10～15倍柱體積的乙醇水溶液洗脫，是根據(jù)洗脫得到的提取物的活性、洗脫效率和提取率等多方面的因素確定的優(yōu)選范圍；吸附時間優(yōu)選為10h～14h，是考慮吸附分離是否充分，從而影響提取物得率和提取物活性；S4：將所述色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用10～15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％～80％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將所述乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明提供的白刺抗氧化活性提取物的制備方法作進(jìn)一步說明。實施例一本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為30％的乙醇水溶液混合，冷浸4小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行超聲提取，超聲溫度為40℃，超聲時間為60min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例二本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為50％的乙醇水溶液混合，冷浸4小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行超聲提取，超聲溫度為40℃，超聲時間為60min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例三本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸4小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行超聲提取，超聲溫度為40℃，超聲時間為60min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例四本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液混合，冷浸4小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行超聲提取，超聲溫度為40℃，超聲時間為60min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。根據(jù)上述實施例一至實施例四制備得到的白刺抗氧化活性提取物的進(jìn)行性能測定，采用抗氧化測定方法(DPPH法)，具體測定方法如下：(1)DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)無水乙醇溶液的配制精密稱取4mgDPPH粉末，置于50ml的容量瓶中，再加入無水乙醇至刻度，配制成質(zhì)量濃度為80μg/ml的溶液，搖勻，4℃冷藏避光，備用。(2)待測樣品及對照物溶液的配制精密稱取適量待測樣品及對照品，用水或無水乙醇溶解并稀釋配成5個不同濃度的溶液(IC50在此濃度范圍之內(nèi))，4℃冷藏避光，備用。維生素C為水溶性樣品的對照物，維生素E為脂溶性樣品的對照物。(3)抗氧化測定方法將不同濃度待測樣品及對照品溶液，各取100μL加入80μg/mL的DPPH無水乙醇溶液100μL，加蓋，振搖，避光放置30min后于517nm下測定吸光度值。100μL樣品溶液和100μLDPPH無水乙醇溶液的混合液，作為測定組；100μL樣品溶液和100μL無水乙醇的混合液，作為空白組；100μL樣品溶劑和100μLDPPH溶液的混合液，作為對照組。DPPH清除率(％)＝{1-(Asample-Ablamk)/Acontrol}×100％Asample：樣品溶液(100μL)+DPPH溶液的混合液的吸光度值(100μL)Ablank：樣品溶液(100μL)+無水乙醇的混合液的吸光度值(100μL)Acontrol：樣品溶劑(100μL)+DPPH溶液的混合液的吸光度值(100μL)以DPPH清除率(％)Y對樣品溶液質(zhì)量濃度X，繪制清除率曲線，得到清除率與濃度的線性方程，再計算求得IC50。對上述實施例一至實施例四和對比例采用相同的西伯利亞白刺干果原料通過高壓均質(zhì)技術(shù)、膜分離技術(shù)和大孔樹脂分離技術(shù)相結(jié)合的方法制備得到的白刺抗氧化活性提取物進(jìn)行性能測定，計算得到的提取物得率和IC50結(jié)果如下表1所示：表1采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液得到的提取物的結(jié)果(n＝3)實施例樣品提取物得率IC50(mg/mL)實施例一30％乙醇提取物1.233％0.1931實施例二50％乙醇提取物1.875％0.0625實施例三70％乙醇提取物2.129％0.0427實施例四95％乙醇提取物1.476％0.1784對比例-0.327％0.8289實施例五本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將5g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與150mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為5次，閃式提取的每次提取時間為1min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例六本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將5g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與150mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行超聲提取，超聲溫度為40℃，超聲時間為60min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例七本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將5g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與150mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行加熱回流提取，加熱回流時間為1小時；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。實施例八本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將5g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2014)與150mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行微波提取，微波提取的時間為30min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。采用上述同樣的性能測定方法，對上述實施例五至實施例八制備得到的白刺抗氧化活性提取物進(jìn)行性能測定，計算得到的提取物得率和IC50結(jié)果如下表2所示：表2采用不同提取方式提取得到的提取物的結(jié)果(n＝3)實施例提取工藝提取物得率IC50(mg/mL)實施例五閃提1.347％0.2630實施例六超聲1.579％0.2572實施例七回流1.032％0.3775實施例八微波0.968％0.4653實施例九本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2015)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為5次，閃式提取每次提取時間為1min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％、20％、40％、80％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。采用上述同樣的性能測定方法，對上述實施例九采用不同體積的乙醇水溶液洗脫得到的白刺抗氧化活性提取物的性能進(jìn)行測定，計算得到的IC50結(jié)果如下表3所示：表3采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液洗脫得到的提取物的結(jié)果(n＝3)洗脫液體積分?jǐn)?shù)提取物得率IC50(mg/mL)10％的乙醇水溶液2.455％0.159120％的乙醇水溶液0.912％0.068940％的乙醇水溶液1.597％0.053380％的乙醇水溶液0.523％0.1898實施例十本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將15g西伯利亞白刺干果(內(nèi)蒙古產(chǎn)，批號NMG-2015)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為5次，閃式提取的每次提取時間為1min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％、20％、40％、80％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。采用上述同樣的性能測定方法，對上述實施例十采用不同體積的乙醇水溶液洗脫得到的白刺抗氧化活性提取物的性能進(jìn)行測定，計算得到的IC50結(jié)果如下表4所示：表4采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液洗脫得到的提取物的結(jié)果(n＝3)洗脫液體積分?jǐn)?shù)提取物得率IC50(mg/mL)10％的乙醇水溶液3.838％0.220820％的乙醇水溶液1.601％0.101440％的乙醇水溶液8.971％0.486080％的乙醇水溶液2.528％0.7050實施例十一本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將385g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2015)與11550mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為3次，閃式提取的每次提取時間為2min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為10％、40％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。采用上述同樣的性能測定方法，對上述實施例十一采用不同體積的乙醇水溶液洗脫得到的白刺抗氧化活性提取物的性能進(jìn)行測定，計算得到的IC50結(jié)果如下表5所示：表5采用不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇水溶液洗脫得到的提取物的結(jié)果(n＝3)洗脫液體積分?jǐn)?shù)提取物得率IC50(mg/mL)10％的乙醇水溶液7.267％0.24840％的乙醇水溶液3.301％0.0485實施例十二本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將385g西伯利亞白刺干果(青海產(chǎn)，批號QH2015)與11550mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為3次，閃式提取的每次提取時間為2min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。用如上的DPPH法測定制得的白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性IC50值為0.049mg/mL，提取物含量為19.97g。實施例十三本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將30g西伯利亞白刺干果(新疆產(chǎn)，批號XJ2015)與900mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為3次，閃式提取每次提取時間為2min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。用如上的DPPH法測定制得的白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性IC50值為0.052mg/mL，提取物含量為0.86g。實施例十四本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將30g唐古特白刺干果(內(nèi)蒙古產(chǎn)，批號NMG2015)與900mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸1小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為3次，閃式提取的每次提取時間為2min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:100，吸附分離的時間為12h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用15倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為20％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。用如上的DPPH法測定制得的白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性IC50值為0.10mg/mL，提取物含量為0.52g。實施例十五本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將30g唐古特白刺干果(內(nèi)蒙古產(chǎn)，批號NMG2015)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸2小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為4次，閃式提取的每次提取時間為1.5min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:60，吸附分離的時間為10h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用10倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。用如上的DPPH法測定制得的白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性IC50值為0.097mg/mL，提取物含量為0.53g。實施例十六本實施例提供了一種白刺抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟：S1：將30g唐古特白刺干果(內(nèi)蒙古產(chǎn)，批號NMG2015)與450mL的體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇水溶液混合，冷浸2小時，再將白刺干果和乙醇水溶液的混合物進(jìn)行閃式提取，閃式提取的提取次數(shù)為4次，閃式提取的每次提取時間為1.5min；S2：將提取得到的溶液過濾，將過濾得到的濾液濃縮，得到浸膏；S3：將濃縮后的產(chǎn)物用水溶解，得到的溶液用填裝有AB-8大孔樹脂的色譜柱吸附分離，產(chǎn)物與大孔樹脂的質(zhì)量比為1:80，吸附分離的時間為14h；S4：將色譜柱用水洗脫至流出液無色，然后分別用13倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％的乙醇水溶液洗脫，分別收集乙醇洗脫液；S5：將乙醇洗脫液分別濃縮干燥，得到白刺抗氧化活性提取物。用如上的DPPH法測定制得的白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性IC50值為0.078mg/mL，提取物含量為0.65g。需要說明的是，除了選用上述實施例一至實施例十六列舉的情況，其他料液比、冷浸時間、洗脫用乙醇水溶液用量、吸附時間、白刺干果種類和產(chǎn)地也是可行的，只是在實施例一至實施例十六列舉的情況下，提取物的活性和提取物得率的綜合效果更好。本發(fā)明提供的白刺抗氧化活性提取物的制備方法，可以增加提取物的得率，提高白刺抗氧化活性提取物的抗氧化活性。盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型，而并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實施例技術(shù)方案的范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求和說明書的范圍當(dāng)中。當(dāng)前第1頁1 2 3