本發(fā)明涉及獸藥制劑領(lǐng)域，特別涉及一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：近年來隨著人民生活水平的提高、畜牧業(yè)的發(fā)展，畜禽的存欄量逐年增加，隨之而來的各種呼吸道、消化道等畜禽疾病隨之發(fā)生，對(duì)畜牧業(yè)造成巨大的損失。目前市場(chǎng)上還沒有較為理想的具有廣譜治療作用的藥物用于該類疾病的治療。臨床上一般選用硫酸慶大霉素、鹽酸恩諾沙星注射液等藥物治療，但是易產(chǎn)生耐藥性，效果不明顯。氟苯尼考屬于酰胺醇類廣譜抗菌藥，對(duì)多種革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌及支原體等有較強(qiáng)的抗菌活性。用于敏感細(xì)菌所致的豬和雞的細(xì)菌性疾病，如豬傳染性胸膜肺炎、沙門氏菌引起的傷寒和副傷寒等。氟苯尼考主要是一種抑菌劑，通過與核糖體50S亞基結(jié)合，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。體外氟苯尼考對(duì)許多微生物的抗菌活性與氯霉素、甲砜霉素相似或更強(qiáng)，一些因乙酰化作用對(duì)氯霉素耐藥的細(xì)菌如大腸桿菌、克雷伯氏肺炎桿菌等仍可能對(duì)氟苯尼考敏感。溶血性巴氏桿菌、多殺巴氏桿菌和豬胸膜肺炎放線桿菌對(duì)氟苯尼考高度敏感。氟尼辛葡甲胺是一種強(qiáng)效環(huán)氧化酶抑制劑，具有鎮(zhèn)痛、解熱、抗炎和抗風(fēng)濕作用。鎮(zhèn)痛作用是通過抑制外周的前列腺素或其痛覺增敏物質(zhì)的合成或它們的共同作用，從而阻斷痛覺沖動(dòng)傳導(dǎo)所致。外周組織的抗炎作用可能是通過抑制環(huán)氧化酶、減少前列腺素前體物質(zhì)形成，以及抑制其他介質(zhì)引起局部炎癥反應(yīng)所致。氟尼辛葡甲胺不影響馬的胃腸道蠕動(dòng)，但可能能改善敗血性休克動(dòng)物的血液動(dòng)力學(xué)。近幾年市場(chǎng)上的氟苯尼考類注射液多為單方制劑，效果差、用量大、殘留高、生物利用率很低，而且?guī)缀跛械姆侥峥碱愖⑸湟喝苊饺繛橛袡C(jī)溶媒，皮下注射刺激性大，通針性不好，使用時(shí)還需配合局部鎮(zhèn)痛藥物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液及其制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液，其中，每1L復(fù)方氟苯尼考注射液中包括氟苯尼考50～300g，氟尼辛葡甲胺5～30g，肉豆蔻酸異丙酯300～600ml，聚乙二醇硬脂酸酯-15為150～450ml，無水亞硫酸鈉0.5～3g，注射用水50～200ml。優(yōu)選的，所述復(fù)方氟苯尼考注射液為每1L中包括200g氟苯尼考，20g氟尼辛葡甲胺，450ml肉豆蔻酸異丙酯，300ml聚乙二醇硬脂酸酯-15，1g無水亞硫酸鈉，100ml注射用水。其中，所述聚乙二醇為聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇600中的一種。優(yōu)選的，所述聚乙二醇為聚乙二醇400。其中，所述吡咯烷酮為N-甲基-2-吡咯烷酮。為了上述目的，本發(fā)明還提供了所述的獸用復(fù)方氟苯尼考注射液的制備方法，包括：第一步、將氟苯尼考加入肉豆蔻酸異丙酯中，45-50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；第二步、將氟尼辛葡甲胺、無水亞硫酸鈉加入注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；第三步、將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；第四步、半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?00-105℃溫度下滅菌25-30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明制得的復(fù)方氟苯尼考注射液主要成分為氟苯尼考及氟尼辛葡甲胺，其中氟苯尼考用于敏感細(xì)菌所致的細(xì)菌性疾病，如豬傳染性胸膜肺炎、沙門氏菌引起的傷寒和副傷寒等；氟尼辛葡甲胺是一種強(qiáng)效環(huán)氧化酶抑制劑，具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎和抗風(fēng)濕的作用；兩者聯(lián)用較常規(guī)的氟苯尼考注射液?jiǎn)畏街苿┬Ч?、用量小、殘留低，藥效顯著增強(qiáng)，能達(dá)到更高的生物利用度；制備工藝簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性好，成本低，適合規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)，對(duì)畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重大意義；用注射用水代替了部分有機(jī)溶媒，所選有機(jī)溶媒為目前市場(chǎng)上新穎的、安全的、刺激性小的有機(jī)溶媒，無需加入局部鎮(zhèn)痛劑，流動(dòng)性好，具有更好的通針性，注射時(shí)減少刺激性。具體實(shí)施方式為了進(jìn)一步說明，列舉具體實(shí)施例進(jìn)行說明。實(shí)施例一將50g氟苯尼考加入300ml肉豆蔻酸異丙酯中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將5g氟尼辛葡甲胺、0.5g無水亞硫酸鈉加入50ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例二將100g氟苯尼考加入350ml肉豆蔻酸異丙酯中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將10g氟尼辛葡甲胺、1g無水亞硫酸鈉加入75ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例三將150g氟苯尼考加入400ml肉豆蔻酸異丙酯中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將15g氟尼辛葡甲胺、1.5g無水亞硫酸鈉加入100ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例四將200g氟苯尼考加入450ml肉豆蔻酸異丙酯中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將20g氟尼辛葡甲胺、1g無水亞硫酸鈉加入100ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾猓?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例五將300g氟苯尼考加入500ml肉豆蔻酸異丙酯中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將30g氟尼辛葡甲胺、2g無水亞硫酸鈉加入150ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的聚乙二醇硬脂酸酯-15，攪拌均勻，最后用聚乙二醇硬脂酸酯-15定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例六將100g氟苯尼考加入350ml聚乙二醇400中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將10g氟尼辛葡甲胺、1g無水亞硫酸鈉加入50ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的N-甲基-2-吡咯烷酮，攪拌均勻，最后用N-甲基-2-吡咯烷酮定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例七將200g氟苯尼考加入450ml聚乙二醇400中，50℃加熱，攪拌溶解，放冷備用，得到溶液①；將20g氟尼辛葡甲胺、1.5g無水亞硫酸鈉加入100ml注射用水中，攪拌溶解，得到溶液②；將上述兩種溶液①和②混合，攪拌均勻，然后向其中加入處方量的N-甲基-2-吡咯烷酮，攪拌均勻，最后用N-甲基-2-吡咯烷酮定容至1L，過濾，備用；半成品請(qǐng)驗(yàn)，檢驗(yàn)合格后，充氮?dú)夤喾?，?05℃溫度下滅菌30min，即得復(fù)方氟苯尼考注射液。實(shí)施例一至實(shí)施例七之一所述各組分用量按照相同比例增加或減少，所得各組分的重量份數(shù)關(guān)系均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例八穩(wěn)定性試驗(yàn)試驗(yàn)樣品為實(shí)施例一、實(shí)施例二、實(shí)施例三制得的一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液；檢測(cè)項(xiàng)目包括性狀、pH值、有關(guān)物質(zhì)、含量。加速試驗(yàn)將實(shí)施例一、實(shí)施例二、實(shí)施例三制得的三批樣品在40±2℃、相對(duì)濕度65±5％條件下放置六個(gè)月，于第0、1、2、3、6月末取樣，考察性狀、pH值、水分、有關(guān)物質(zhì)、含量等項(xiàng)目，與0天的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，結(jié)果見下表1。長(zhǎng)期試驗(yàn)將實(shí)施例一、實(shí)施例二、實(shí)施例三制得的三批樣品在25±2℃、相對(duì)濕度60±10％條件下放置，于第0、3、6、9、12、18、24月取樣，考察性狀、pH值、水分、有關(guān)物質(zhì)、含量等項(xiàng)目，與0天的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，結(jié)果見下表2。表1三批樣品加速試驗(yàn)結(jié)果表2三批樣品長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果由加速試驗(yàn)及長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果可知，由實(shí)施例一、實(shí)施例二、實(shí)施例三制得的三批樣品在40±2℃、RH65±5％條件下放置6個(gè)月以及在25±2℃、RH60±10％條件下放置18個(gè)月，樣品的外觀色澤變化不明顯，pH、有關(guān)物質(zhì)均符合規(guī)定，含量變化不顯著，表明該發(fā)明制得的一種復(fù)方氟苯尼考注射液質(zhì)量穩(wěn)定。實(shí)施例九刺激性試驗(yàn)皮膚刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)樣品為實(shí)施例一制得的一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液；陽性對(duì)照為市售復(fù)方氟苯尼考注射液；試驗(yàn)動(dòng)物為雌雄各半的健康家兔8只，體重2～2.5kg。取健康家兔8只，平均分成兩組，每組雌雄各2只，采用同體左右對(duì)比法，設(shè)溶劑對(duì)照。試驗(yàn)前24h對(duì)背部進(jìn)行剪毛處理，剪毛范圍左右各3cm×3cm，左側(cè)涂抹本發(fā)明藥物及陽性對(duì)照藥物，右側(cè)涂抹空白溶劑，均為0.5mL；然后用2層紗布(2.5cm×2.5cm)和1層玻璃紙覆蓋，再用無刺激性膠布加以固定；貼敷4h時(shí)，用溫?zé)嶂?8℃的溫水清潔給藥部位，在去除藥物后0.5、1、24、48、72h，分別肉眼觀察并記錄涂敷部位有無紅斑和水腫情況，按照皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(表3)進(jìn)行評(píng)分，然后再按皮膚刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(表4)進(jìn)行評(píng)價(jià)。表3皮膚刺激反應(yīng)與評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)表4皮膚刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分值評(píng)價(jià)0～0.49無刺激0.5～2.99輕度刺激3～5.99中度刺激6～8強(qiáng)度刺激試驗(yàn)結(jié)果按照皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)皮膚刺激的各時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行評(píng)分，本發(fā)明制劑所有時(shí)間點(diǎn)反應(yīng)積分的平均值為0.32，陽性對(duì)照制劑所有時(shí)間點(diǎn)反應(yīng)積分的平均值為1.37，溶劑對(duì)照為0.23，這表明本發(fā)明的一種復(fù)方氟苯尼考注射液對(duì)皮膚有輕度刺激性，但與市售復(fù)方氟苯尼考注射液相比對(duì)皮膚的刺激性更小。肌肉刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)樣品為實(shí)施例一制得的一種獸用復(fù)方氟苯尼考注射液；陽性對(duì)照為市售復(fù)方氟苯尼考注射液；試驗(yàn)動(dòng)物為雌雄各半的健康家兔8只，體重2～2.5kg。方法及標(biāo)準(zhǔn)8只兔子隨機(jī)分成四組，每組雌雄各1只。刺激性反應(yīng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見表5。第一組、第二組的1、2、5、6號(hào)健康家兔，以無菌操作的方法，分別在其左右兩腿股四頭肌內(nèi)各注射實(shí)施例一樣品及陽性對(duì)照樣品各1mL，并對(duì)注射部位進(jìn)行標(biāo)記。注射后48h處死該動(dòng)物，解剖取出股四頭肌，縱向切開，觀察注射部位局部刺激反應(yīng)。第三組、第四組3、4、7、8號(hào)的健康家兔，以無菌操作的方法，分別在其左右兩腿股四頭肌內(nèi)各注射實(shí)施例一樣品及陽性對(duì)照樣品各1mL，并對(duì)注射部位進(jìn)行標(biāo)記。注射后7d處死該動(dòng)物，解剖取出股四頭肌，縱向切開，觀察注射部位局部刺激反應(yīng)病變的消退情況。表5肌肉刺激性反應(yīng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果評(píng)定方法每組計(jì)算出4塊肌肉反應(yīng)級(jí)的總和。如果各股四頭肌反應(yīng)的最高與最低組之差大于2時(shí)，則應(yīng)另取兩只家兔重新試驗(yàn)。在初試或重試的2只家兔的4塊股四頭肌反應(yīng)級(jí)之和小于10時(shí)，則認(rèn)為供試品的局部刺激試驗(yàn)符合規(guī)定。試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果見下表6～9。表6第一組肌肉刺激反應(yīng)結(jié)果(48h后)表7第二組肌肉刺激反應(yīng)結(jié)果(48h后)表8第三組肌肉刺激反應(yīng)病變的消退情況的結(jié)果(7d)類別刺激病變情況反應(yīng)級(jí)別3號(hào)兔右腿基本無出血，無肌肉壞死、變性現(xiàn)象，恢復(fù)較好。03號(hào)兔左腿輕度出血，范圍在0.3cm左右，無肌肉變性、壞死現(xiàn)象。14號(hào)兔右腿基本無出血，無肌肉壞死、變性現(xiàn)象，恢復(fù)較好。04號(hào)兔左腿基本無出血，無肌肉壞死、變性現(xiàn)象，恢復(fù)較好。0反應(yīng)總和1表9第四組肌肉刺激反應(yīng)病變的消退情況的結(jié)果(7d)類別刺激病變情況反應(yīng)級(jí)別7號(hào)兔右腿基本無出血，無肌肉壞死、變性現(xiàn)象，恢復(fù)較好。07號(hào)兔左腿輕度出血，范圍在0.3cm左右，無肌肉變性、壞死現(xiàn)象。18號(hào)兔右腿輕度出血，范圍在0.2cm左右，無肌肉變性、壞死現(xiàn)象。18號(hào)兔左腿輕度出血，范圍在0.4cm左右，無肌肉變性、壞死現(xiàn)象。1反應(yīng)總和3第一組2只家兔肌肉注射實(shí)施例一樣品48h后解剖結(jié)果顯示，一塊股四頭肌注射部位無出血現(xiàn)象，無肌肉壞死及變性現(xiàn)象，另三塊股四頭肌注射部位有輕度出血，范圍在0.5cm以下，但無肌肉變性、壞死現(xiàn)象。反應(yīng)級(jí)別在0～1級(jí)，總和為3。四塊股四頭肌反應(yīng)級(jí)別之和小于10，且最高與最低組級(jí)別之差小于2，表明本發(fā)明的復(fù)方氟苯尼考注射液局部肌內(nèi)注射試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物肌肉的刺激性較弱，符合安全性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。第三組2只家兔肌內(nèi)注射實(shí)施例一樣品7d后解剖結(jié)果顯示，三塊股四頭肌基本無出血現(xiàn)象，無肌肉壞死、變性現(xiàn)象，恢復(fù)較好，另一塊股四頭肌有輕度出血，大約在0.3cm左右，但無肌肉變性、壞死現(xiàn)象，反應(yīng)級(jí)別為0～1級(jí)，總和為1，小于10級(jí)，并且最高與最低組的級(jí)別差小于2，表明本發(fā)明的復(fù)方氟苯尼考注射液局部試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物肌肉的刺激性基本完全恢復(fù)，可逆性良好，符合安全性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。通過第一組與第二組以及第三組與第四組之間的比較可以看出，本發(fā)明制備的復(fù)方氟苯尼考注射液比市售復(fù)方氟苯尼考注射液產(chǎn)品的肌肉刺激性更小，恢復(fù)更迅速，可安全用于臨床。通過刺激性試驗(yàn)表明，該發(fā)明制備的一種復(fù)方氟苯尼考注射液臨床刺激性小、安全性高。實(shí)施例一至實(shí)施例七之一以及實(shí)施例一至實(shí)施例七之一所述各組分用量按照相同比例增加或減少所得到的組合，所做的肌內(nèi)刺激性試驗(yàn)以及結(jié)果均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3