本發(fā)明涉及護(hù)理用品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
益生菌是一類對(duì)宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。生殖系統(tǒng)，包括男性生殖器系統(tǒng)和女性生殖器系統(tǒng)。準(zhǔn)確的說，是指在復(fù)雜生物體上任何與有性繁殖及組成生殖系統(tǒng)有關(guān)的組織，由于免疫力下降等各種因素，可能導(dǎo)致生殖系統(tǒng)感染，尤其是女性。女性陰道因正常的微生態(tài)(有益菌群、完整的生理結(jié)構(gòu)、有效的分泌調(diào)節(jié)功能)而保持其強(qiáng)大的抑制外來病菌入侵的能力，使陰道免于病菌感染，然而，因?yàn)樯?、性活?dòng)、分娩和衛(wèi)生習(xí)慣等多種因素影響，破壞了微生態(tài)的平衡，導(dǎo)致陰道非常容易發(fā)生多種感染。在維持陰道微生態(tài)平衡的因素中，雌激素、乳酸桿菌及陰道酸堿度起著至關(guān)重要的作用。
目前市場(chǎng)上針對(duì)男女生殖系統(tǒng)的護(hù)理產(chǎn)品多種多樣，其中包括在護(hù)理產(chǎn)品中添加功能性益生菌的技術(shù)方案，例如申請(qǐng)公布號(hào)為CN 105663172 A的發(fā)明專利，提供一種生態(tài)婦科外用藥物組合物及其制備方法，該組合物由葡萄糖、吐溫80、磷酸氫二鉀、乙酸鈉、7分子結(jié)晶水硫酸鎂、硫酸錳、檸檬酸三銨、可溶性淀粉、酵母膏經(jīng)滅菌，接種益生菌菌液，經(jīng)發(fā)酵后，得乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)物；在培養(yǎng)物中加入一種或多種醫(yī)藥上可接受的添加劑，即得到所述的生態(tài)婦科外用藥物組合物。所述的生態(tài)婦科外用藥物組合物可用于調(diào)節(jié)婦女外生殖道生態(tài)平衡、預(yù)防和治療婦女陰道炎。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明的藥物組合物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌均具有抑殺作用，對(duì)皮膚無刺激性，未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。但該配方的藥物組合物，其原料成分中還需添加防腐劑、賦形劑等添加劑，其長(zhǎng)期直接作用于人的生殖系統(tǒng)，會(huì)產(chǎn)生刺激性，不利于人體健康。同時(shí)該配方的藥物組合物針對(duì)人體生殖系統(tǒng)的保健效果仍不足，不能有效增強(qiáng)生殖系統(tǒng)的免疫力，提高其修復(fù)能力。
由此可見，能否基于現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種含有益生菌的且用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌及其制備方法，使其原料成分取自純天然產(chǎn)物，針對(duì)人體不具有任何刺激性作用，且有效針對(duì)該原料成分提供相應(yīng)的制備工藝，得到含有益生菌的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，使其含菌量適宜，使用效果最佳，有效針對(duì)人體生殖系統(tǒng)起到護(hù)理和保健的作用，成為本領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的技術(shù)難題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為了解決上述技術(shù)問題，提供一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌及其制備方法和用途，其針對(duì)生殖系統(tǒng)的保健效果佳，有效抵抗細(xì)菌病毒的感染以及預(yù)防治療某些疾病的功能，增強(qiáng)生殖系統(tǒng)免疫力，且其原料成分安全無副作用。
為了達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明包括以下技術(shù)方案：
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：5～50份的植物乳桿菌粉、1～10份的酵素粉、1～20份的大豆纖維和0.5～5份的蔗糖。
進(jìn)一步優(yōu)選地，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌包括以下重量份數(shù)的原料組分：10～18份的植物乳桿菌粉、2～3份的酵素粉、2～5份的大豆纖維和2～3份的蔗糖。
本發(fā)明各原料成分配伍合理，有效調(diào)節(jié)男女生殖系統(tǒng)內(nèi)微生態(tài)平衡，同時(shí)還能在發(fā)酵過程中產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，抵抗細(xì)菌病毒的感染以及預(yù)防治療某些疾病的功能，提高生殖系統(tǒng)的免疫功能，本發(fā)明配方屬天然原料組成，可長(zhǎng)期使用、無毒副作用和耐藥性產(chǎn)生。其中植物乳桿菌具有很多的保健作用，如下：1、有一定的免疫調(diào)節(jié)作用；2、對(duì)致病菌有抑制作用；3、降低血清膽固醇含量和預(yù)防心血管疾?。?、維持腸道內(nèi)菌群平衡；5、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收；6、緩解乳糖不耐癥；7、抑制腫瘤細(xì)胞的形成等。
其中大豆纖維主要包括纖維素、果膠質(zhì)、木聚糖、甘露糖等提供足夠蛋白質(zhì)以有效增加活菌量；酵素粉和蔗糖均用于發(fā)酵，酵素粉有增強(qiáng)免疫力，提高抵抗力，消炎殺菌，提供蛋白質(zhì)催化活菌量。
進(jìn)一步的，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌還包括以下重量份數(shù)的原料組分：2～30份麥芽粉、10～50份的丁香和0.5～10份的金銀花。
其中麥芽粉為膳食纖維的補(bǔ)充劑，富含豐富的蛋白質(zhì)、維他命，作為植物乳桿菌粉發(fā)酵原料能夠產(chǎn)生更多的活菌數(shù)量，提升發(fā)酵效率。
進(jìn)一步優(yōu)選地，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌還包括以下重量份數(shù)的原料組分：8～15份麥芽粉、15～30份的丁香和3～5份的金銀花。
丁香醇浸出物對(duì)鼠疫桿菌、霍亂弧菌、炭疽桿菌、枯草桿菌及金黃色葡萄球菌等有抑制作用。丁香的水、醇、乙醚浸出液及揮發(fā)油對(duì)致病性真菌均呈非常明顯的抗菌作用。金銀花自古以來就以它的藥用價(jià)值廣泛而著名。其功效主要是清熱解毒，主治溫病發(fā)熱、熱毒血痢、癰疽疔毒等?，F(xiàn)代研究證明，金銀花含有綠原酸、木犀草素苷等藥理活性成分，對(duì)溶血性鏈球菌、金黃葡萄球菌等多種致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有較強(qiáng)的抑制力，另外還可增強(qiáng)免疫力、抗早孕、護(hù)肝、抗腫瘤、消炎、解熱、止血(凝血)、抑制腸道吸收膽固醇等，其臨床用途非常廣泛，其與本發(fā)明成分相配伍用于治療急性泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)感染等病癥，同時(shí)能夠提高生殖系統(tǒng)的免疫力。
進(jìn)一步的，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌還包括重量份數(shù)為0.1～2份的川椒殼。
川椒殼，即川椒，去除川椒目(川椒種)，川椒(花椒)外殼，其具有溫中止痛、殺蟲止癢的作用。
進(jìn)一步優(yōu)選地，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌還包括重量份數(shù)為0.5～0.8份的川椒殼。
進(jìn)一步的，所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌還包括以下重量份數(shù)的原料組分：1～20份的穿心蓮、1～20份的黃柏、1～20份的五味子、1～20份的山楂、1～20份的白頭翁、1～20份的小麥纖維和0.1～5份的葡萄糖中的一種以上。
進(jìn)一步的，所述的植物乳桿菌保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏日期為2015年11月30日，保藏號(hào)為CGMCC No.11763；
所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為7×1011～9×1011cfu/g。
一種上述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：取大豆纖維粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌、靜放再攪拌，加入酵素粉，攪拌、靜放再次攪拌，升溫經(jīng)有氧發(fā)酵處理后得到有氧發(fā)酵處理液，向所述有氧發(fā)酵處理液中加入植物乳桿菌，攪拌后密封發(fā)酵得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。
進(jìn)一步的，所述的原液儲(chǔ)備液中還包括麥芽粉、丁香和金銀花，取麥芽粉、丁香和金銀花粉碎成顆粒，與大豆纖維的粉碎顆粒一同加入水中，經(jīng)浸泡處理后制成原料儲(chǔ)備液。
進(jìn)一步的，在加入蔗糖時(shí)還向原料儲(chǔ)備液中添加葡萄糖；
所述的原液儲(chǔ)備液中還包括穿心蓮、黃柏、五味子、山楂、白頭翁和小麥纖維中的一種以上；取穿心蓮、黃柏、五味子、山楂、白頭翁和小麥纖維中的一種以上粉碎成顆粒，與大豆纖維的粉碎顆粒一同加入水中，經(jīng)浸泡處理后制成原料儲(chǔ)備液；
所述麥芽粉、大豆纖維和小麥纖維的粉碎方法為經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；所述金銀花、丁香、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁的粉碎方法為于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm。
進(jìn)一步的，經(jīng)有氧發(fā)酵處理后，先向所述有氧發(fā)酵處理液加入經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌、發(fā)酵處理后加入植物乳桿菌，攪拌、密封發(fā)酵得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌；所述川椒殼的粉碎方法為于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm。
本發(fā)明提供的制備方法基于各原料成分的特點(diǎn)設(shè)計(jì)出的，其具有制備工藝步驟合理，制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌保健、殺菌效果好，且制備成本低的優(yōu)點(diǎn)。有氧發(fā)酵后加入川椒殼進(jìn)行發(fā)酵可使川椒殼的配伍后產(chǎn)生最大的功效，功效保留完善，其外治濕疹、陰癢，殺蟲，止痛等功效，能夠完全溶于培養(yǎng)菌中，后加入植物乳桿菌密封發(fā)酵，以最大程度培養(yǎng)出活菌量。
一種上述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌在制備潤(rùn)滑劑、生殖系統(tǒng)清洗液、生殖系統(tǒng)護(hù)理凝膠、生殖系統(tǒng)護(hù)理噴劑或洗衣液中的應(yīng)用。
采用上述技術(shù)方案，包括以下有益效果：本發(fā)明提供的一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌及其制備方法和用途，本發(fā)明的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌其各原料成分配伍合理，有效調(diào)節(jié)男女生殖系統(tǒng)內(nèi)微生態(tài)平衡，除此之外，還可以產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，抵抗細(xì)菌病毒的感染以及預(yù)防治療某些疾病的功能，有助于生殖系統(tǒng)內(nèi)的自我修復(fù)、活化、養(yǎng)護(hù)、清理、排減沉積物和增強(qiáng)生殖系統(tǒng)免疫力等。本發(fā)明的制備方法結(jié)合各原料配伍成分來確定，同時(shí)合理設(shè)計(jì)發(fā)酵步驟，使制備的成品針對(duì)生殖系統(tǒng)護(hù)理、保健效果更明顯。本發(fā)明用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌可以用于或添加在避孕套，人體潤(rùn)滑劑，私密洗液、凝膠、噴劑，洗衣液，以及部分治療和護(hù)理男性或女性生殖器的產(chǎn)品。
具體實(shí)施方式
下面通過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
實(shí)施例一：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：5份的植物乳桿菌粉、10份的酵素粉、1份的大豆纖維和5份的蔗糖。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
實(shí)施例二：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：10份的植物乳桿菌粉、8份的酵素粉、2份的大豆纖維和3份的蔗糖。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：取大豆纖維粉碎成顆粒后加入水，使水沒過待浸泡原料組分即可，經(jīng)浸泡處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌、靜放再攪拌，加入酵素粉，攪拌、靜放再次攪拌，升溫經(jīng)有氧發(fā)酵處理后得到有氧發(fā)酵處理液，向所述有氧發(fā)酵處理液中加入植物乳桿菌，攪拌后密封發(fā)酵得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。
由于水為制備本發(fā)明復(fù)合益生菌常規(guī)使用的溶劑，其使用劑量基于有限次實(shí)驗(yàn)均可得到。
所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為7×1011cfu/g。
實(shí)施例三：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：12份的植物乳桿菌粉、5份的酵素粉、4份的大豆纖維、2份的蔗糖、2份麥芽粉、50份的丁香和0.5份的金銀花。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：取大豆纖維、麥芽粉、丁香和金銀花粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡處理后制備成原料儲(chǔ)備液，所述原料儲(chǔ)備液內(nèi)固體原料與水的體積比為0.05～2∶1攪拌，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌、靜放再攪拌，加入酵素粉，攪拌、靜放再次攪拌，升溫經(jīng)有氧發(fā)酵處理后得到有氧發(fā)酵處理液，向所述有氧發(fā)酵處理液中加入植物乳桿菌，攪拌后密封發(fā)酵得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。
實(shí)施例四：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：50份的植物乳桿菌粉、1份的酵素粉、20份的大豆纖維、0.5份的蔗糖、30份麥芽粉、10份的丁香、10份的金銀花、0.1份的川椒殼。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉和大豆纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香和川椒殼于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、丁香和金銀花粉碎成顆粒后加入水，使水沒過各顆粒原料組分經(jīng)浸泡處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌、靜放再攪拌，加入酵素粉，攪拌、靜放再次攪拌，升溫經(jīng)有氧發(fā)酵處理后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌、發(fā)酵處理后加入植物乳桿菌，攪拌、密封發(fā)酵得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。
所述用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為9×1011cfu/g。
實(shí)施例五：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：18份的植物乳桿菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纖維、3份的蔗糖、15份麥芽粉、30份的丁香、5份的金銀花和0.8份的川椒殼。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉和大豆纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香和川椒殼于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、丁香和金銀花粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。
其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為8.75×1011cfu/g。
實(shí)施例六：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：10份的植物乳桿菌粉、2份的酵素粉、2份的大豆纖維、2份的蔗糖、8份麥芽粉、15份的丁香、3份的金銀花和0.5份的川椒殼。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉和大豆纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香和川椒殼于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、丁香和金銀花粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為7.12×1011cfu/g。
實(shí)施例七：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：10份的植物乳桿菌粉、2份的酵素粉、2份的大豆纖維、2份的蔗糖、4份的穿心蓮、20份的黃柏、1份的五味子、15份的山楂和5份的白頭翁。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉和大豆纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香、川椒殼、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、丁香、金銀花、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為7.01×1011cfu/g。
實(shí)施例八：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：18份的植物乳桿菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纖維、3份的蔗糖、15份麥芽粉、30份的丁香、5份的金銀花、0.8份的川椒殼、10份的穿心蓮、8份的黃柏、6份的五味子、10份的山楂、10份的白頭翁、10份的小麥纖維和1份的葡萄糖。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉、大豆纖維和小麥纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香、川椒殼、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、小麥纖維、丁香、金銀花、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖和葡萄糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為9×1011cfu/g。
實(shí)施例九：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：18份的植物乳桿菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纖維、3份的蔗糖、15份麥芽粉、30份的丁香、5份的金銀花、0.8份的川椒殼、1份的穿心蓮、20份的山楂、1份的白頭翁、20份的小麥纖維和0.1份的葡萄糖。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉、大豆纖維和小麥纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香、川椒殼、穿心蓮、山楂和白頭翁于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、小麥纖維、丁香、金銀花、穿心蓮、山楂和白頭翁粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖和葡萄糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為8.95×1011cfu/g。
實(shí)施例十：一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌，包括以下重量份數(shù)的原料組分：18份的植物乳桿菌粉、3份的酵素粉、5份的大豆纖維、3份的蔗糖、15份麥芽粉、30份的丁香、5份的金銀花、0.8份的川椒殼、20份的穿心蓮、1份的黃柏、20份的五味子、1份的山楂、20份的白頭翁、1份的小麥纖維和5份的葡萄糖。
本發(fā)明的復(fù)合益生菌還包括常規(guī)使用的溶劑，所述溶劑優(yōu)選的為水，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于有限次實(shí)驗(yàn)確定本發(fā)明溶劑種類和含量值。
一種用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：原料粉碎處理：取麥芽粉、大豆纖維和小麥纖維，經(jīng)焙干后粉碎至粒徑為1～2μm；取金銀花、丁香、川椒殼、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁于零下20～25℃冰凍40～60min后立即粉碎至粒徑為1～2μm；
步驟二：制備有氧發(fā)酵處理液：取步驟一經(jīng)粉碎處理的大豆纖維、麥芽粉、小麥纖維、丁香、金銀花、穿心蓮、黃柏、五味子、山楂和白頭翁粉碎成顆粒后加入水，經(jīng)浸泡6h處理后制備成原料儲(chǔ)備液，攪拌8～10min，加入蔗糖和葡萄糖，繼續(xù)攪拌5min、靜放6h再攪拌5min，加入酵素粉，攪拌5min、靜放6h再次攪拌5min，升溫至30℃，每6h攪拌5min，經(jīng)有氧發(fā)酵處理10天后得到有氧發(fā)酵處理液；
步驟三：制備用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌：向所述有氧發(fā)酵處理液中加入步驟一經(jīng)粉碎成顆粒的川椒殼，攪拌5min、發(fā)酵處理24h后加入植物乳桿菌，攪拌5min、密封發(fā)酵15天得到用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌。其中植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC No.11763按常規(guī)方法制備得到的。
上述制備的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌中的活菌含量為8.59×1011cfu/g。
本發(fā)明用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌體外抗菌試驗(yàn)：
試驗(yàn)菌種：
挑選金黃色葡萄球菌，白色念珠菌、大腸桿菌、表皮葡萄球菌和陰道滴蟲。
菌種培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。
儀器與試劑：
生化培養(yǎng)箱，型號(hào)為SPH-150，上海森信試驗(yàn)儀器有限公司
菌落計(jì)數(shù)器，型號(hào)為BOT-50A，北京中儀博騰科技有限公司
AE-240電子分析天平，梅特勒-托利儀器有限公司
UV-2401型分光光度計(jì)，日本島津
試驗(yàn)分組：
抑菌試驗(yàn)分試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)1組至8組分別選用實(shí)施例1至實(shí)施例8所述的復(fù)合益生菌，對(duì)照1組選用中國(guó)專利申請(qǐng)公布號(hào)為CN 105663 172 A中公開的生態(tài)婦科外用藥物組合物，對(duì)照2組選用次氯酸消毒液。
試驗(yàn)內(nèi)容：將上述四種菌種和陰道滴蟲分別劃線接種于五個(gè)瓊脂培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24h后，分離出單個(gè)菌落，轉(zhuǎn)接與肉湯培養(yǎng)基中，置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。取1ml培養(yǎng)液，使用生理鹽水以10倍稀釋法依次進(jìn)行稀釋，選取適當(dāng)濃度的0.1ml菌液置于平皿瓊脂培養(yǎng)基上，涂勻，37℃恒溫培養(yǎng)48h，計(jì)算菌落數(shù)。根據(jù)菌液稀釋濃度計(jì)算每毫升菌液的活菌數(shù)，將菌液稀釋為106個(gè)/ml，作為試驗(yàn)菌種。
取本發(fā)明實(shí)施例1至實(shí)施例8所述組合物各10g；加入20ml融化冷卻至50-60℃的瓊脂培養(yǎng)基，混勻，吸出10ml于另一平皿，余下10ml含藥平皿中再加入10ml瓊脂培養(yǎng)基，混勻、再吸出10ml于另一平皿中，重復(fù)上述步驟，使含藥基質(zhì)濃度為500、250、125、62.5、31.25、15.6、7.8、3.9mg/ml；并取中國(guó)專利申請(qǐng)公布為CN 105663 172 A中公開的生態(tài)婦科外用藥物組合物，按照上述步驟，使含藥基質(zhì)濃度為500、250、125、62.5、31.25、15.6、7.8、3.9mg/ml；次氯酸消毒液6mL，加入34ml融化后冷卻至45-50℃的瓊脂培養(yǎng)基，混勻，按上述本發(fā)明藥物平皿的稀釋方法，是含有次氯酸消毒液的平皿最終濃度為450、225、112、56、28、14、7、2、1、0.5ug/ml，備用。
取前述備用菌液，每接種點(diǎn)接種2ul菌液于對(duì)應(yīng)含藥平皿上，同時(shí)接種相對(duì)應(yīng)的次氯酸消毒液培養(yǎng)基，作為對(duì)照組1，接種不含藥培養(yǎng)基中作為對(duì)照組2，于37℃下培養(yǎng)48小時(shí)觀察結(jié)果。
采用平皿倍半摻入法測(cè)定組合物的體外對(duì)細(xì)菌半數(shù)抑菌濃度(MIC50)，數(shù)據(jù)處理采用Bliss分析軟件，結(jié)果見表1。
表1組合物在體外對(duì)細(xì)菌半數(shù)抑菌濃度(生藥mg/ml)
“+”表示有菌生長(zhǎng)，實(shí)施例與對(duì)照1組相比較具有顯著性差異(Pa＜0.01)
結(jié)論：由上述試驗(yàn)可知，本發(fā)明所提供的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌對(duì)金黃色葡萄球菌，白色念珠菌、大腸桿菌、表皮葡萄球菌和陰道滴蟲均有顯著的抑制作用，除表皮葡萄球菌外，實(shí)施例五和實(shí)施例八的抗菌作用較其他實(shí)施例稍優(yōu)異，兩實(shí)施例的抗菌活性相對(duì)于對(duì)照組均具有顯著性差異。
組合物對(duì)小鼠陰道粘膜刺激試驗(yàn)：
受試動(dòng)物：
成年健康雌性SD大鼠40只，180-220g。
試驗(yàn)分組：
將65只雌性SD大鼠隨機(jī)分配為13組，每組5只，試驗(yàn)1組至試驗(yàn)10組分別選用實(shí)施例1至實(shí)施例10所述的組合物，對(duì)照1組選用中國(guó)專利申請(qǐng)公布號(hào)為CN 105663172 A中公開的生態(tài)婦科外用藥物組合物，科洗液，對(duì)照2組為生理鹽水組；對(duì)照3組為空白組。
試驗(yàn)內(nèi)容：
將試驗(yàn)組和對(duì)照1組的SD大鼠用適當(dāng)大小的滅菌藥棉浸以中藥組合物水溶液，置于SD大鼠陰道內(nèi)，對(duì)照2組以同樣大小棉條浸滅菌生理鹽水置于受試SD大鼠陰道內(nèi)，均與動(dòng)物陰道粘膜接觸24小時(shí)，空白對(duì)照3組則不給予任何處理，24小時(shí)后處死動(dòng)物，取出整個(gè)陰道，觀察局部陰道組織的充血、水腫反應(yīng)現(xiàn)象，進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)價(jià)。
試驗(yàn)結(jié)果：
試驗(yàn)組與對(duì)照組SD大鼠局部陰道組織均未發(fā)現(xiàn)充血、水腫等異常反應(yīng)，也未發(fā)現(xiàn)其他癥狀，陰道粘膜刺激指數(shù)+0.0；結(jié)果表明，本發(fā)明所述的用于生殖系統(tǒng)的復(fù)合益生菌對(duì)雌性SD大鼠的陰道粘膜刺激屬于無刺激性。
臨床試驗(yàn)：
診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)《中西醫(yī)學(xué)診斷學(xué)》所記載的外陰炎、陰道炎癥、宮頸炎、皮包炎和龜頭炎的癥狀，及臨床檢測(cè)結(jié)果。
試驗(yàn)病例：
1、皮包炎患者195例，年齡均在20-55之間，分配治療1組66例、治療2組65例、對(duì)照組64例。
2、龜頭炎患者160例，年齡均在20-55之間，分配治療1組54例、治療2組53例、對(duì)照組52例。
3、霉菌性陰道炎患者108例，均在年齡18-60歲之間，分配治療1組、治療2組、對(duì)照組各36例。
4、細(xì)菌性陰道炎患者83例，均在年齡18-62歲之間，分配治療1組28例、治療2組28例、對(duì)照組27例。
5、滴蟲性陰道炎患者97例，年齡均在20-55之間，分配治療1組33例、治療2組32例、對(duì)照組32例。
6、宮頸炎患者100例，均在年齡22-65歲之間，分配治療1組33例、治療2組34例、對(duì)照組33例。
療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
以臨床癥狀與局部體征為判斷標(biāo)準(zhǔn)
痊愈：臨床癥狀與局部體征消失，達(dá)到臨床治愈標(biāo)準(zhǔn)；
顯效：治療后病情體征明顯改善；
有效：治療后病情體征有所改善；
無效：治療前后無變化。
分組及給藥：
以上治療1組均給予本發(fā)明實(shí)施例5所述的組合物制成的外用制劑，治療2組均給予本發(fā)明實(shí)施例8所述的組合物制成的外用制劑，對(duì)照組給予市售的常規(guī)生殖系統(tǒng)護(hù)理藥物外用制劑，每天使用1.0g(生藥量)，連續(xù)使用20天。治療效果見表2。
表2臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果
由表2數(shù)據(jù)可知，針對(duì)最優(yōu)選的實(shí)施例五和實(shí)施例八其治療效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于對(duì)照組，本發(fā)明實(shí)施例針對(duì)皮包炎、龜頭炎、霉菌性陰道炎、細(xì)菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎和宮頸炎均有較好的治療和護(hù)理作用。以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。