技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及包含抑制糖吸收的物質(zhì)的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑。
背景技術(shù)：
根據(jù)近期研究，已發(fā)現(xiàn)在人類(lèi)中，肥胖者處于其中擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)細(xì)菌構(gòu)成比例低而厚壁菌門(mén)(Firmicutes)細(xì)菌構(gòu)成比例高的狀態(tài)，隨著體重下降，擬桿菌門(mén)構(gòu)成比例提高，而相反地，厚壁菌門(mén)的構(gòu)成比例下降。此外，已發(fā)現(xiàn)相對(duì)于肥胖者，消瘦者具有高的擬桿菌門(mén)構(gòu)成比例和低的厚壁菌門(mén)構(gòu)成比例(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)1)。
此外，當(dāng)肥胖小鼠的腸道細(xì)菌群落和正常體重小鼠的腸道細(xì)菌群落分別移植至兩組不具有腸道細(xì)菌的小鼠中時(shí)，已發(fā)現(xiàn)移植有肥胖小鼠的腸道細(xì)菌的該組小鼠的體重比移植有正常體重的小鼠的腸道細(xì)菌的該組小鼠的體重顯著更大(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)2)。
也就是說(shuō)，通過(guò)改變腸道細(xì)菌的構(gòu)成比例，從而改變了體質(zhì)，并且具有改善身體狀況的效果。
厚壁菌門(mén)和擬桿菌門(mén)的總量接近達(dá)到總腸道細(xì)菌群落的90％。通過(guò)口服物質(zhì)難以對(duì)細(xì)菌實(shí)現(xiàn)這樣大的影響。
對(duì)于增殖擬桿菌的方法，已報(bào)道有關(guān)于攝取低聚果糖(fractooligo saccharide，F(xiàn)OS)的方法，并且可預(yù)期一定的效果(參見(jiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)3)。
但是，為了達(dá)到攝入低聚果糖的效果，需要大量攝入，并且通過(guò)飲食或功能性食品將其攝入給身體造成負(fù)擔(dān)。此外，還未發(fā)現(xiàn)具有增殖擬桿菌門(mén)所屬的細(xì)菌，并且還減少厚壁菌門(mén)所屬的細(xì)菌作用的口服物質(zhì)。
背景技術(shù)文獻(xiàn)
非專(zhuān)利文獻(xiàn)
非專(zhuān)利文獻(xiàn)1：Ley,RE.,Turnbaugh,PJ.,Klein,S.和Gordon,JI.,Microbial ecology:human gut microbes associated with obesity.Nature,444,1022-3(2006)
非專(zhuān)利文獻(xiàn)2：Turnbaugh,PJ.,Ley,RE.,Mahowald,MA.,Magrini,V.,Mardis,ER.和Gordon,JI.,An obesity-associated gut microbiome with increased capacity for energy harvest.Nature,444,1027-31(2006)
非專(zhuān)利文獻(xiàn)3：Nakanishi,Y.,Murashima,K.,Ohara,H.,Suzuki,T.,Hayashi,H.,Sakamoto,M.,Fukasawa,T.,Kubota,H.,Hosono,A.,Kono,T.,Kaminogawa,S.,Benno,Y.,Increase in terminal restriction fragments of Bacteroidetes-derived 16S rRNA genes after administration of short-chain fructooligosaccharides.Appl.Environ.Microbiol.,72,6271-6(2006)
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明所解決的問(wèn)題
本發(fā)明所解決的問(wèn)題是提供能夠調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例的食品或藥物，所述食品或藥物是安全的，并且?guī)缀鯖](méi)有副作用。
解決所述問(wèn)題的手段
本發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)一類(lèi)具有增殖擬桿菌門(mén)細(xì)菌并減少厚壁菌門(mén)細(xì)菌作用的口服物質(zhì)。
本發(fā)明具體包含以下部分。
(1)腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其包含至少一種抑制糖吸收的物質(zhì)。
(2)根據(jù)以上(1)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其中所述抑制糖吸收的物質(zhì)是抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)。
(3)根據(jù)以上(1)或(2)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其中所述抑制糖吸收的物質(zhì)包含選自五層龍屬(genus Salacia)的植物、桑葉、匙羹藤(Gymnema sylvestre)、以及包含在它們的提取物中的成分中的至少一種或多種。
(4)根據(jù)以上(1)-(3)中任一項(xiàng)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其中所述抑制糖吸收的物質(zhì)顯示出10μg/ml-10000μg/ml的蔗糖酶50％抑制濃度。
(5)根據(jù)以上(1)-(4)中任一項(xiàng)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其中所述抑制糖吸收的物質(zhì)是選自網(wǎng)狀五層龍(Salacia reticulate)、長(zhǎng)圓果五層龍(Salacia oblonga)和中國(guó)五層龍(Salacia chinensis)的五層龍屬的植物及包含在它們的提取物中的成分中的至少一種。
(6)根據(jù)以上(1)-(5)中任一項(xiàng)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，其中所述腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑提高腸道細(xì)菌群落中擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)比例，并降低厚壁菌門(mén)(Firmicutes)比例。
(7)食品或藥品，其包含根據(jù)以上(1)-(6)中任一項(xiàng)所述的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明的有益效果
根據(jù)本發(fā)明，提供了即使當(dāng)長(zhǎng)期服用時(shí)是安全且?guī)缀鯖](méi)有副作用的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑、以及食品或藥物。通過(guò)將其服用，調(diào)節(jié)了腸道細(xì)菌群落平衡，并由此可以瘦身、改善體質(zhì)、減輕過(guò)敏癥狀、改善免疫指數(shù)等。
本發(fā)明的實(shí)施方式
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑包含至少一種抑制糖吸收的物質(zhì)。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑具有改變腸道中生存的細(xì)菌比例的作用。特別地，它是具有增加擬桿菌門(mén)細(xì)菌，并減少厚壁菌門(mén)細(xì)菌作用的試劑。
<抑制糖吸收的物質(zhì)>
所述抑制糖吸收的物質(zhì)優(yōu)選是抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)。
所述抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)是通過(guò)抑制α-葡萄糖苷酶的活性而抑制糖代謝的物質(zhì)，并且蔗糖酶50％抑制濃度(IC50值)優(yōu)選為0.01μg/ml-10000μg/ml，更優(yōu)選0.1μg/ml-800μg/ml，進(jìn)一步優(yōu)選0.5μg/ml-600μg/ml，并且特別優(yōu)選10μg/ml-450μg/ml。當(dāng)抑制活性落入所述范圍中時(shí)，可抑制消化道的葡萄糖吸收的作用，并可抑制腹脹感和氣體產(chǎn)生。α-葡萄糖苷酶的蔗糖酶50％抑制濃度更優(yōu)選為10μg/ml-5000μg/ml，并且進(jìn)一步優(yōu)選10μg/ml-2000μg/ml。
通過(guò)以下方法測(cè)定蔗糖酶50％抑制濃度(IC50值)。
[試驗(yàn)方法1]
蔗糖酶IC50值的測(cè)定
樣品溶液的制備：將2mg樣品(抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì))稱(chēng)量入試管中，并向其中加入2mL水，然后使樣品完全懸浮以形成濃度為1mg/mL的樣品溶液。用水將其稀釋以分別形成0、50、100、250和500μg/mL的溶液。
底物溶液的制備：將蔗糖溶于0.2M馬來(lái)酸鹽緩沖液(pH 6.0)中以使蔗糖濃度為100mM，并且將所述溶液用作底物溶液。
粗酶溶液的制備：在將1g大鼠腸道丙酮粉末(intestinal acetone powder rat)(SIGMA制備)懸浮在10mL生理鹽水之后，將混懸液進(jìn)行離心(3000rpm,4℃,5min)。將所得上清液分離出并用作粗酶溶液。
向500μL具有各濃度的上述樣品溶液加入400μL所述底物溶液中，并在37℃下將溶液總體在水浴中預(yù)熱5分鐘。向其中加入100μL所述粗酶溶液，并在37℃下進(jìn)行反應(yīng)60分鐘。在反應(yīng)完成后，在95℃下通過(guò)加熱2分鐘使所述酶失活以終止反應(yīng)。使用市售試劑盒/變旋酶-葡萄糖氧化酶方法(Glucose CII Test Wako,Wako Pure Chemical Industries,Ltd.)定量測(cè)定所生成的葡萄糖濃度。
空白樣的制備：向250μl具有各濃度的上述樣品溶液加入200μL所述底物溶液和50μL所述粗酶溶液，并通過(guò)在95℃下加熱2分鐘立即將酶進(jìn)行加熱-失活而得到空白數(shù)據(jù)。
基于所得值形成校正曲線，并測(cè)定酶活性被抑制50％時(shí)的濃度(IC50值)。
在設(shè)置包含于腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)的每日攝入量或標(biāo)準(zhǔn)攝入量的情況中，當(dāng)使用IC50值為50μg/ml的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)時(shí)，腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日攝入量中的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)的量?jī)?yōu)選為10-600mg，更優(yōu)選為40-450mg，并且特別優(yōu)選為50-350mg。
根據(jù)以上的每日優(yōu)選量可合理計(jì)算腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中包含的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)量。例如，在制備每日攝入量為3片的片劑的情況中，優(yōu)選每片包含每日攝入量的三分之一。也就是說(shuō)，所述片劑包含的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)的量?jī)?yōu)選為3-200mg，更優(yōu)選13-150mg，特別優(yōu)選17-117mg。
此外，由下式1測(cè)定的值優(yōu)選為0.5或更大，更優(yōu)選0.8或更大，并且特別優(yōu)選1.7或更大。
作為由式2所確定的值，腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的總IC50值優(yōu)選為0.1-7.5，更優(yōu)選0.15-4.50，并且特別優(yōu)選0.3-3.75。
[式1]
腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日攝入量中的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質(zhì)(mg)/IC50值(μg/ml)
[式2]
腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑(mg)/IC50值(μg/ml)
所述抑制糖吸收的物質(zhì)優(yōu)選是五層龍屬的植物、桑葉、匙羹藤、杜仲葉、番石榴、羅布麻纖維、發(fā)酵黑豆提取物、茶葉、厚樸、茵陳蒿(Artemisiae capillaris herba)、陳皮(Ctrus unshiu peel)、吳茱萸(evodia fruit)、薄荷(Japanese mint)、桔梗(Chinese bellflower)、枸杞(Chinese wolfberry fruit)、五味子等及它們的提取物，并且優(yōu)選是五層龍屬的植物、桑葉、匙羹藤及它們的提取物。更優(yōu)選地，五層龍屬的植物提取物、桑葉提取物、或在匙羹藤中包含的組分。
<五層龍屬的植物的粉碎物或提取物>
所述抑制糖吸收的物質(zhì)優(yōu)選是五層龍屬的植物。五層龍屬的植物通常包括其粉碎物或提取物。
五層龍屬的植物是主要在斯里蘭卡、印度和東南亞區(qū)域野生的衛(wèi)矛科植物。更具體地，使用選自網(wǎng)狀五層龍(Salacia reticulate)、長(zhǎng)圓果五層龍(Salacia oblonga)、五層龍(Salacia prinoides)、中國(guó)五層龍(Salacia chinensis)、闊葉五層龍(Salacia latifolia)、河口五層龍(Salacia burunoniana)、粉葉五層龍(Salacia grandiflora)和多籽五層龍(Salacia macrosperma)中的一種或多種植物，并且優(yōu)選選自網(wǎng)狀五層龍、長(zhǎng)圓果五層龍和中國(guó)五層龍中的至少一種植物。
五層龍屬的植物的粉碎物或提取物是指可食用部分如根、莖、葉、花和果的粉碎物、干燥物、提取物、其干燥粉末(提取物粉末)等?；旌喜⑹褂靡环N或多種所述部分也是合適的。更優(yōu)選地，使用從根和莖中提取的提取物粉末。
提取物粉末是從上述可食用部分等通過(guò)溶劑提取得到的干燥物。提取溶劑可選自水和醇如甲醇和乙醇、或水和醇或酮(如丙酮)的混合溶劑。優(yōu)選使用水、醇或含水醇。更優(yōu)選地，使用熱水或乙醇或含水乙醇作為提取溶劑。對(duì)于以上含水醇的醇濃度，可使用30-90質(zhì)量％，優(yōu)選40-70質(zhì)量％濃度的含水醇。
對(duì)于所述干燥方法，可提及噴霧干燥、冷凍干燥等，但不限于此。
<其它成分>
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑還可包含其它成分，并可包含如乳酸菌、無(wú)芽孢酵母、類(lèi)黃酮、多酚等、以及具有免疫活性作用的口服物質(zhì)。
在腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑包含這些成分的情況中，當(dāng)腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑是固體時(shí)，基于腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑整體，其含量?jī)?yōu)選為0.1質(zhì)量％-30質(zhì)量％，并且更優(yōu)選為5質(zhì)量％-20質(zhì)量％。當(dāng)腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑是液體時(shí)，基于腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑整體，其含量?jī)?yōu)選為0.001質(zhì)量％-10質(zhì)量％，并且更優(yōu)選為0.01質(zhì)量％-5質(zhì)量％。
乳酸菌如雙歧桿菌優(yōu)選是可向包括人類(lèi)在內(nèi)的哺乳動(dòng)物口服給藥，并在生命體消化道中表現(xiàn)出有效作用的那些乳酸菌。
更具體地，優(yōu)選的是那些對(duì)宿主無(wú)害、對(duì)胃酸和膽汁酸相對(duì)耐受、固定在生命體腸道內(nèi)、產(chǎn)生乳酸并具有調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例作用的乳酸菌。這樣的有效乳酸菌實(shí)例包括嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacteria(Bifidobacterium longum等))、糞鏈球菌(Streptococcus faecalis)、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillus reuteri)、干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、能動(dòng)乳桿菌(Lactobacillus agilis)、戈氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri)、馬鈴薯乳桿菌(Bacillus mesentericus)、酪酸梭菌(Clostridium butyricum)或它們的亞種。優(yōu)選嗜酸乳桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacterium longum等)和糞鏈球菌?？蓡为?dú)使用這些乳酸菌或可合理地組合使用它們中的兩種或更多種。
對(duì)于這些乳酸菌，對(duì)得到它們的來(lái)源沒(méi)有特別限制，只要它們是活菌，并且是可廣泛使用的市售乳酸菌。
在設(shè)置本發(fā)明中所使用的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日攝入量或標(biāo)準(zhǔn)攝入量的情況中，腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日量中乳酸菌的活菌數(shù)優(yōu)選為10,000,000-100,000,000,000，更優(yōu)選為50,000,000-50,000,000,000，并且特別優(yōu)選為100,000,000-10,000,000,000。
所述無(wú)芽孢酵母是指包含礦物的酵母。對(duì)于礦物，可提及被稱(chēng)為微量元素的16種金屬元素：鈉(Na)、鉀(K)、氯(Cl)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、磷(P)和硫(S)、鐵(Fe)、鋅(Zn)、銅(Cu)、錳(Mn)、鈷(Co)、鉻(Cr)、碘(I)、鉬(Mo)和硒(Se)。對(duì)于本發(fā)明所使用的無(wú)芽孢酵母，優(yōu)選包含鉻的鉻酵母。對(duì)酵母的種類(lèi)沒(méi)有特別限制，但優(yōu)選釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或其相關(guān)種類(lèi)，首選面包酵母和啤酒酵母。
鉻酵母的鉻含量?jī)?yōu)選為0.01-5質(zhì)量份，更優(yōu)選0.05-1質(zhì)量份，并且特別優(yōu)選0.1-0.3質(zhì)量份，其基于100質(zhì)量份的鉻酵母。
在腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中的鉻酵母含量?jī)?yōu)選為0.5-50質(zhì)量份，更優(yōu)選1-10質(zhì)量份，并且特別優(yōu)選3-5質(zhì)量份，其基于腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的質(zhì)量份。
在設(shè)置每日攝入量或標(biāo)準(zhǔn)攝入量時(shí)，在腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日量中的鉻酵母量?jī)?yōu)選為5-500mg，更優(yōu)選10-100mg，并且特別優(yōu)選30-50mg。在腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的每日量中的鉻量?jī)?yōu)選為20-200μg，更優(yōu)選40-150μg，并且特別優(yōu)選60-100μg。
類(lèi)黃酮是廣泛存在于植物的所有器官中的有色物質(zhì)成分的統(tǒng)稱(chēng)，其主要包含在蔬果中，并且在綠葉和白色蔬菜和柑橘皮中特別地以糖苷形式存在。
在本發(fā)明中，類(lèi)黃酮是廣泛包含在植物中的有色物質(zhì)成分的統(tǒng)稱(chēng)，并且特別是指在蔬果中富含的黃烷衍生物。
對(duì)于類(lèi)黃酮，優(yōu)選黃酮醇、異黃酮和兒茶素。黃酮醇也被稱(chēng)為多酚。
類(lèi)黃酮是攝入體內(nèi)的物質(zhì)，但其通常難以吸收。但是，由于即使少量的類(lèi)黃酮也是有效的，并且其是強(qiáng)抗氧劑，所以已知它們有抑制致癌物質(zhì)活性，并具有促進(jìn)血液流動(dòng)的作用和抗血栓形成的作用。
在本發(fā)明中，類(lèi)黃酮可得自各來(lái)源物如茶、葡萄和洋蔥。在此，所述來(lái)源物是指從生命體的至少一部分所提取的產(chǎn)物。對(duì)于提取，例如采用制備以上五層龍屬的植物提取物的方法。提取物的形式可以和以上相同，并且例如其可以是任意形式，如提取后的過(guò)濾物本身，或經(jīng)濃縮或稀釋的形式，或是其干燥粉末的形式或其混合物。
從常青的山茶科樹(shù)的茶樹(shù)中制備包含兒茶素的茶葉提取物。對(duì)于茶樹(shù)，使用在印度、斯里蘭卡和東南亞種植的Camellia sinensis var.assamica和在中國(guó)和日本種植的Camellia sinensis。對(duì)于提取，優(yōu)選使用水、醇或含水醇。更優(yōu)選地，可將熱水或乙醇或含水乙醇用作提取溶劑。對(duì)于以上含水醇的醇濃度，可使用濃度為30質(zhì)量％-90質(zhì)量％，優(yōu)選40質(zhì)量％-70質(zhì)量％的含水醇。
對(duì)于所述干燥方法，可提及噴霧干燥、冷凍干燥等，但并不限于此。
茶提取物包含抗氧化劑物質(zhì)如多酚類(lèi)和兒茶素類(lèi)。優(yōu)選包含兒茶素、表兒茶素、沒(méi)食子兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素、兒茶素沒(méi)食子酸酯、表兒茶素沒(méi)食子酸酯、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯或表兒茶素沒(méi)食子酸酯，并且特別優(yōu)選表沒(méi)食子兒茶素。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑所包含的茶葉提取物的量?jī)?yōu)選為0.1-40質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選0.5-35質(zhì)量％，并且特別優(yōu)選1.0-30質(zhì)量％。
此外，類(lèi)黃酮之一的黃酮醇去除活性氧，并顯示出抗氧化作用，如抑制動(dòng)脈硬化和改善血液流動(dòng)。在黃酮醇中，多酚之一的白藜蘆醇作為抗氧化物質(zhì)而引人注目。白藜蘆醇由芪骨架構(gòu)成，并且富含在葡萄果皮中，所以它也包含在由葡萄制成的紅酒中。
在本發(fā)明中，優(yōu)選包含葡萄提取物或酒濃縮物，其包含黃酮醇作為成分。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑優(yōu)選包含的葡萄提取物的量為0.1-30質(zhì)量％，并且進(jìn)一步優(yōu)選包含的量為0.1-10質(zhì)量％。
白藜蘆醇具有燃燒脂肪的作用，防止動(dòng)脈硬化的血管疾病，顯示出抗癌作用，還防止DNA因細(xì)胞分裂而縮短，并具有與熱量限制的情況中相同的延長(zhǎng)細(xì)胞壽命的作用，所以已認(rèn)為該化合物作為防止生活習(xí)慣相關(guān)的疾病的材料具有極佳效果。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中的白藜蘆醇的含量?jī)?yōu)選為0.0001-5.00質(zhì)量％，并且進(jìn)一步優(yōu)選為0.001-2.00質(zhì)量％。
此外，在黃酮醇中，多酚之一的槲皮素作為抗氧化物質(zhì)而引人注目。槲皮素具有黃烷機(jī)構(gòu)，并且富含在洋蔥皮中。
對(duì)于槲皮素，已報(bào)到了其生理作用，如作為吸收維生素C的載體、抗氧化作用、免疫作用等。此外，已發(fā)現(xiàn)槲皮素對(duì)于抑制脂肪吸收是有效的，所以已認(rèn)為該化合物作為防止生活習(xí)慣相關(guān)的疾病的材料具有極佳效果。
腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中的槲皮素含量?jī)?yōu)選為0.001-15質(zhì)量％，更優(yōu)選為0.05-10質(zhì)量％，并且進(jìn)一步優(yōu)選0.1-5.0質(zhì)量％。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑優(yōu)選特別包含的兒茶素量為1-50質(zhì)量％。對(duì)于兒茶素，特別優(yōu)選源自綠茶的兒茶素。
此外，本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑優(yōu)選包含具有抑制酯酶活性作用的多酚，其量為2-80質(zhì)量％。對(duì)于具有抑制酯酶活性作用的多酚，特別優(yōu)選來(lái)源于烏龍茶，來(lái)源于葡萄、來(lái)源于蘋(píng)果、來(lái)源于荔枝、來(lái)源于松樹(shù)皮、來(lái)源于柑果等的多酚。
具有免疫活性作用的口服物質(zhì)是指被認(rèn)為增強(qiáng)免疫功能的物質(zhì)，如玫瑰花提取物和來(lái)源于蓮花根的物質(zhì)。所述來(lái)源物是指從生命體中的至少一部分提取的產(chǎn)物。對(duì)于提取，例如采用制備以上的五層龍屬的植物提取物的方法。提取物的形式可以和以上相同，并且例如其可以是任意形式，如提取后的過(guò)濾物本身，或經(jīng)濃縮或稀釋的形式，或是其干燥粉末的形式或其混合物。
<使用/配制方法>
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑針對(duì)的是包括人類(lèi)在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，并且向哺乳動(dòng)物口服給藥。在此，“腸道的”是指“在消化道中的”，其中，擬桿菌門(mén)、厚壁菌門(mén)、雙歧桿菌目等細(xì)菌總是存在，并進(jìn)行消化/吸收，如人類(lèi)小腸和大腸。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑可以是食品(包括飲料)、食品材料、準(zhǔn)藥物、藥物、藥物材料或用于準(zhǔn)藥物的材料。對(duì)于其它成分，可列舉各種藥學(xué)或食品衛(wèi)生可接受的載體作為口服給藥劑，例如賦型劑、潤(rùn)滑劑、穩(wěn)定劑、分散劑、粘結(jié)劑、稀釋劑、增味劑、甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑的形式不受特別限制，只要它發(fā)揮本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)，并且其實(shí)例包括片劑、丸劑、顆粒劑、細(xì)顆粒劑、咀嚼藥物、膠囊劑(充入硬膠囊或軟膠囊中的那些)、液體、可咀嚼藥物、飲料等。
其形式可以是其它食品形式。
使用通常在本領(lǐng)域中已知的常規(guī)方法可制備這些給藥形式。
在片劑、丸劑和顆粒劑的情況中，它們可按需制成常規(guī)包覆的劑量形式，如糖衣包覆的、明膠包覆的、腸衣包覆的、薄膜包覆的等。此外，片劑可以是多層片劑如雙層片劑。
在本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑中，除了以上之外，可適當(dāng)?shù)丶尤肽軌蚩诜z入的成分如維生素、維生素樣物質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸、油和脂肪、有機(jī)酸、碳水化合物、植物來(lái)源材料、動(dòng)物來(lái)源材料、微生物、食品添加劑和醫(yī)用添加劑。
通過(guò)攝入本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑，預(yù)期通過(guò)增多在腸道中的擬桿菌門(mén)細(xì)菌并減少厚壁菌門(mén)細(xì)菌而減輕體重。此外，通過(guò)增多腸道擬桿菌門(mén)細(xì)菌，通過(guò)在集合淋巴小結(jié)中捕集擬桿菌門(mén)腸道細(xì)菌，使得預(yù)期減輕過(guò)敏癥狀如花粉過(guò)敏和特異性，預(yù)防普通感冒，并預(yù)防腫瘤(Tsuda,M.,Hosono,A.,Yanagibashi,T.,Hachimura,S.,Hirayama,K.,Itoh,K.,Takahashi,K.,和Kaminogawa,S.,Prior stimulation of antigen-presenting cells with Lactobacillus regulates excessive antigen-specific cytokine responses in vitro when compared with Bacteroides.Cytotechnology,55,89-101(2007))。
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑即使當(dāng)長(zhǎng)期服用下也是安全的，并且?guī)缀鯖](méi)有副作用。
實(shí)施例
以下將參照實(shí)施例描述本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于以下的實(shí)施例。
在將網(wǎng)狀五層龍和長(zhǎng)圓果五層龍的根和莖部分粉碎之后，將它們等重量混合，并將通過(guò)在98℃下的熱水提取步驟得到的液體噴霧干燥，得到五層龍?zhí)崛》勰?。五層龍?zhí)崛》勰?的蔗糖酶IC50值為41(μg/ml)。
此外，對(duì)于匙羹藤和桑葉提取物，可使用購(gòu)自K.K.Cross的那些。
此外，對(duì)于對(duì)比例，使用葡萄糖、豬油和烏龍茶聚合多酚(其通過(guò)將Suntory Ltd.生產(chǎn)的黑烏龍茶冷凍干燥，并提取烏龍茶聚合多酚而得到)。此外，對(duì)于匙羹藤、桑葉提取物、葡萄糖、豬油和烏龍茶聚合多酚，在所有情況中它們的蔗糖酶50％抑制濃度(IC50值)為800μg/mL或更大。
將這些成分各自溶解在水中用于注射，并以10mg/ml的水溶液進(jìn)行給藥。
(實(shí)驗(yàn)例1)
將8周齡的雄性SD大鼠分為7個(gè)大鼠組。將以下的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑各自溶于水中用于注射，并使用胃飼管(stomach sonde)以相當(dāng)于20mg/kg/天的量經(jīng)過(guò)1周攝取。通過(guò)T-RFLP方法(Nagashima法)分別在攝入前即刻和攝入后即刻測(cè)定擬桿菌門(mén)和厚壁菌門(mén)細(xì)菌相對(duì)于腸道細(xì)菌群落的比例。但是，在實(shí)施例1中使用半量(10mg/kg/天)的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑。
表1中顯示了擬桿菌門(mén)和厚壁菌門(mén)細(xì)菌相對(duì)于腸道細(xì)菌群落的比例(當(dāng)將細(xì)菌總數(shù)作為100％時(shí)所得的比例)。
對(duì)于該實(shí)驗(yàn)例的結(jié)果，其表明了所述抑制糖吸收的物質(zhì)相比于其它食品顯著提高了腸道菌群中的擬桿菌門(mén)/厚壁菌門(mén)比例。
根據(jù)上述的非專(zhuān)利文獻(xiàn)3，通過(guò)低聚果糖得到擬桿菌門(mén)細(xì)菌增多的增殖效果，但其給藥量相對(duì)于本發(fā)明的情況約為90倍。另一方面，在本發(fā)明中，即使以少量也得到擬桿菌門(mén)細(xì)菌增多的效果，并由此可便于攝取。此外，至今還未發(fā)現(xiàn)任何減少厚壁菌門(mén)所屬的細(xì)菌比例的食品，但是最近發(fā)現(xiàn)了該食品。
在測(cè)試期間，對(duì)于所有實(shí)施例和對(duì)比例的大鼠組，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)化學(xué)檢查值如肝功能和腎功能、以及尸體解剖報(bào)告和免疫組織化學(xué)檢查結(jié)果出現(xiàn)異常。
(實(shí)驗(yàn)例2)
將使用高脂肪飲食飼育的8周齡雄性SD大鼠(HFD32,CLEA Japan,Inc.)分為7個(gè)大鼠組。將以下抑制糖吸收的物質(zhì)等以40mg/kg/天(實(shí)施例5中僅為20mg/kg/天)的量溶于水中用于注射，并使用胃飼管進(jìn)食30天。檢查體重、脂肪重量和血清中的甘油三酯水平的變化。對(duì)于對(duì)照組，僅給予用水注射。對(duì)于抑制糖吸收的物質(zhì)等，使用與實(shí)驗(yàn)例1中相同的那些。
表2大鼠的體重、脂肪重量和血清中的甘油三酯水平的變化
(相對(duì)于未進(jìn)食的情況*P<0.05**P<0.01)
對(duì)于所述實(shí)驗(yàn)例的結(jié)果，所述抑制糖吸收的物質(zhì)抑制了體重的增加，并顯著減輕了脂肪重量和血清中的甘油三酯水平，由此得到瘦身的效果。
此外，對(duì)于對(duì)比例6中的低聚果糖，盡管發(fā)現(xiàn)它對(duì)于擬桿菌的增殖是有效的，但是沒(méi)有得到抑制體重、脂肪重量和血清中的甘油三酯水平增加的瘦身效果。
在測(cè)試期間，對(duì)于所有實(shí)施例和對(duì)比例的大鼠組，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)化學(xué)檢查值如肝功能和腎功能、以及尸體解剖報(bào)告和免疫組織化學(xué)檢查結(jié)果出現(xiàn)異常。
工業(yè)實(shí)用性
本發(fā)明的腸道細(xì)菌群落構(gòu)成比例調(diào)節(jié)劑可改變腸道細(xì)菌群落的構(gòu)成比例，特別是可增多擬桿菌門(mén)細(xì)菌并減少厚壁菌門(mén)細(xì)菌。由此，可期待瘦身、改善體質(zhì)、減輕過(guò)敏癥狀、改善免疫指數(shù)等。此外，所述調(diào)節(jié)劑即使當(dāng)長(zhǎng)期服用時(shí)也是安全的，并且?guī)缀鯚o(wú)副作用，并可用作包括飲料在內(nèi)的食品和藥物。
盡管已詳細(xì)并參照其特定實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述，但對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可進(jìn)行各種變化和修改。
本申請(qǐng)基于2009年4月22日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)2009-104316和2009年5月12日提交的日本專(zhuān)利申請(qǐng)2009-115563，并將它們的內(nèi)容援引并入本文。