相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求2014年8月15日提交的美國臨時申請no.62/037,628的優(yōu)先權(quán)，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

本文提供了用于在患有脊髓損傷的對象中抑制炎癥的組合物、方法和藥盒。

背景技術(shù)：

脊髓損傷(spinalcordinjury，sci)每年在全世界影響成千上萬人并且每年在美國影響超過12,000人。在原發(fā)性損傷后的幾天到幾周中，繼發(fā)性損傷過程發(fā)展增加了sci的嚴(yán)重程度，導(dǎo)致由于并發(fā)癥(例如炎癥和氧化應(yīng)激)引起的另外的結(jié)構(gòu)和功能喪失。醫(yī)學(xué)界尚未找到減少炎癥和神經(jīng)保護患者的脊髓組織的有效治療，致使患者遭受嚴(yán)重的長期失能。許多研究已發(fā)現(xiàn)，炎癥過程(特別是單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞募集并浸潤病變區(qū)域)在繼發(fā)性損傷的出現(xiàn)和發(fā)展中起關(guān)鍵作用[ren等，neuralplasticity.，2013，2013：945034；gensel等，brainresearch.，2015，1619：1-11]。在繼發(fā)性損傷發(fā)展期間，細(xì)胞因子和趨化因子環(huán)境決定了募集并活化的巨噬細(xì)胞的亞類[oyinbo，actaneurobiolexp.，2011，71：281-299；lee等，neurochemint.，2000，36：417-425]。例如，tnf-α調(diào)節(jié)的jnk誘導(dǎo)的趨化因子mcp-1的分泌表示引發(fā)將單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞募集到損傷部位的主要途徑[gao等，jneuroscience.，2009，29(13)：4096-4108；lee等，neurochemint.，2000，36：417-425；perrin等，brain.，2005，128：854-866]。促炎性或th1細(xì)胞因子(例如，tnf-α、il-1β)傾向于使巨噬細(xì)胞活化成典型的m1表型。m1表型是引發(fā)組織炎癥、脫髓鞘和退化的原因[ren等，neuralplasticity.，2013，2013：945034；gensel等，brainresearch.，2015，1619：1-11]。與此相反，抗炎性或th2細(xì)胞因子(例如，il-10、il-4、tgf-β)傾向于使巨噬細(xì)胞活化成m2表型。m2表型是引發(fā)創(chuàng)傷愈合和組織重塑的原因[ren等，neuralplasticity.，2013，2013：945034；gensel等，brainresearch.，2015，1619：1-11]。繼發(fā)性損傷的嚴(yán)重程度由于損傷部位處的m1巨噬細(xì)胞的持續(xù)而加強，因為這延長了炎癥應(yīng)答并抑制了重構(gòu)和再生的正確開始。

雖然免疫調(diào)節(jié)通常是“雙刃劍”，但在sci后的繼發(fā)性損傷的情況下，設(shè)計成使局部微環(huán)境遠離th1應(yīng)答并趨向th2應(yīng)答的免疫治療方法代表了減少炎癥和提高功能恢復(fù)的有吸引力的手段。近來，已經(jīng)證實了靶向抑制促炎性細(xì)胞因子和趨化因子(例如，分別為tnf-α和mcp-1)作為sci的治療策略的潛力[ren等，neuralplasticity.，2013，2013：945034；esposito等，trendspharmacolsci.，2011，32(2)107-115]。例如，已經(jīng)觀察到用tnf-α抑制抗體(例如，英夫利昔單抗(infliximab)、依那西普(etanercept))阻斷tnf-α提高sci后的功能恢復(fù)。雖然這些免疫治療方法顯示出作為sci的治療策略的前景，但tnf-α抑制劑的全身遞送具有相關(guān)風(fēng)險和不期望的多效性副作用。因此，醫(yī)師無法總是給予足夠的藥物以具有期望的抗炎效果而不引起成問題的多效性全身副作用。所公開的免疫治療劑的局部遞送將消除這些多效性全身副作用并使得它們的治療性干預(yù)能夠用于控制sci后的繼發(fā)性損傷。例如，局部注射tnf-α抑制劑的貯庫制劑(depotformulation)將允許使用較全身或經(jīng)口施用該藥劑所需的更低的初始劑量，因為貯庫將特別在期望的作用位點處建立藥劑的治療有效濃度。

近來，沿著這些思路，已經(jīng)探究了生物可降解的納米顆粒作為實現(xiàn)局部遞送以促進在sci治療中抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞生長的手段[ren等，biomaterials.，2014，35：6585-6594]。具體地，通過局部遞送并入細(xì)胞周期抑制劑(夫拉平度(flavopiridol))的plga納米顆粒抑制sci的半切嚙齒動物模型(hemi-sectionrodentmodel)中的星形膠質(zhì)細(xì)胞生長導(dǎo)致sci后功能恢復(fù)得到改善。

盡管關(guān)于這樣的治療仍存在許多未知，但是許多人希望設(shè)計成調(diào)節(jié)炎癥過程以實現(xiàn)神經(jīng)保護的免疫治療方法可以限制繼發(fā)性損傷的發(fā)展，從而降低脊髓損傷的嚴(yán)重程度。此外，設(shè)計成將這些免疫治療劑直接局部遞送至損傷部位的方法將能夠消除不期望的多效性副作用，從而延長其在sci治療中的效用。

所公開的組合物、方法和藥盒滿足了這些和其他重要需求。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本文提供了用于在患有脊髓損傷的對象中抑制炎癥的組合物，其包含能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體。

本文還提供了用于在患有脊髓損傷的對象中抑制炎癥的組合物，其包含能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體。

還提供了在患有脊髓損傷的對象中治療炎癥的方法(包括施用所公開的組合物)以及用于產(chǎn)生所公開的組合物的藥盒。

附圖說明

當(dāng)結(jié)合附圖閱讀時，將進一步理解發(fā)明內(nèi)容以及以下詳細(xì)說明。出于舉例說明本發(fā)明的目的，在附圖中示出了本發(fā)明的示例性實施方案；然而，本發(fā)明不限于所公開的具體組合物、方法和藥盒。在附圖中：

圖1(包括圖1a-1b)表示a)一種示例性組合物，其包含并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑，以及b)在載體降解時所述藥劑的釋放。

圖2(包括圖2a-2b)表示a)一種示例性組合物，其包含暴露在生物可降解載體的表面上的能夠特異性結(jié)合tnf-α或mcp-1的藥劑，以及b)使所述藥劑與tnf-α或mcp-1的結(jié)合。

圖3(包括圖3a-3b)表示a)一種示例性組合物，其包含暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑和并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑，以及b)使暴露在表面上的藥劑與tnf-α或mcp-1結(jié)合并釋放并入的藥劑。

具體實施方式

結(jié)合附圖(其形成本公開內(nèi)容的一部分)通過參考以下詳細(xì)說明可以更容易地理解所公開的組合物、方法和藥盒。應(yīng)當(dāng)理解，所公開的組合物、方法和藥盒不限于本文描述和/或示出的具體組合物、方法和藥盒，并且本文使用的術(shù)語僅用于通過舉例的方式描述特定實施方案的目的，并且不旨在限制所要求保護的組合物、方法和藥盒。此外，除非上下文另外明確指出，否則如說明書(包括所附權(quán)利要求書)中使用的沒有數(shù)量詞修飾的名詞包括單數(shù)和復(fù)數(shù)二者，并且提及具體數(shù)值至少包括該具體值。當(dāng)表示值的范圍時，另一個實施方案包括從一個具體值和/或到另一個具體值。此外，提及范圍中所述的值包括該范圍內(nèi)的各個和每個值。所有范圍包括端值并且可組合。類似地，當(dāng)通過使用先行詞“約”將值表示為近似值時，應(yīng)當(dāng)理解，該特定值形成了另一個實施方案。

應(yīng)當(dāng)理解，為了清楚起見，在本文中在單獨的實施方案的上下文中描述的所公開的組合物、方法和藥盒的某些特征也可以在單個實施方案中組合提供。相反，為了簡潔起見，在單個實施方案的上下文中描述的所公開的組合物、方法和藥盒的各種特征也可以單獨提供或以任意子組合提供。

當(dāng)關(guān)于數(shù)值范圍、截斷值或具體值使用時，術(shù)語“約”用于表示所述值可以由所列出的值變化至多25％。由于本文中使用的許多數(shù)值是通過實驗確定的，故本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，這樣的確定可以并且時常將在不同實驗之間變化。由于這種固有變異而不應(yīng)考慮對本文使用的值進行過度限制。術(shù)語“約”用于涵蓋距離給定值±25％或更小的變化、±20％或更小的變化、10％或更小的變化、±5％或更小的變化、±1％或更小的變化、±0.5％或更小的變化、或±0.1％或更小的變化。

如本文使用的“施用于所述對象”和類似術(shù)語表示通過其將一種或更多種所述藥劑或組合物一起或單獨地并入、植入、注入或施用于對象使得所述對象身體的靶細(xì)胞、組織或部分(segment)與藥劑接觸的過程。

“可藥用”是指從藥理學(xué)/毒理學(xué)角度考慮可被患者接受并且從物理/化學(xué)角度(關(guān)于組成、制劑、穩(wěn)定性、患者接受性和生物利用度)考慮可被制藥化學(xué)家接受的那些性質(zhì)和物質(zhì)。

“可藥用載體”是指不干擾活性成分的生物活性的效力并且對施用其的宿主無毒的介質(zhì)。

“治療有效劑量”是指如本文所述有效實現(xiàn)特定的生物學(xué)或治療結(jié)果(例如但不限于本文公開、描述或例示的生物學(xué)或治療結(jié)果)的組合物的量。治療有效劑量可根據(jù)諸如個體的疾病狀態(tài)、年齡、性別和重量以及組合物在對象中引起期望的響應(yīng)的能力等因素而變化。這樣的結(jié)果可以包括但不限于如通過本領(lǐng)域中任何合適的手段確定的脊髓損傷的治療。

術(shù)語“治療”是指減輕或改善損傷、病理或病癥中的任何成功或成功的標(biāo)志，包括任何客觀或主觀參數(shù)，例如消除、緩解、減輕癥狀或者使損傷、病理或病癥對患者更可忍耐；減緩炎癥毒素；使炎癥的終點較不衰弱；改善對象的身體或精神健康；或延長存活時間。治療可以通過客觀或主觀參數(shù)(包括身體檢查、神經(jīng)學(xué)檢查或精神病學(xué)評估的結(jié)果)進行評估。

如本文使用的術(shù)語“特異性地”是指蛋白質(zhì)以較其他蛋白質(zhì)更高的選擇性和親和力與tnf-α結(jié)合的能力。

如本文使用的“暴露在表面上”意指一種或更多種藥劑的至少一部分未被生物可降解載體覆蓋或包裹并且可從生物可降解載體的外部接近。暴露在表面上的一種或更多種藥劑可以完全暴露使得整個藥劑在生物可降解載體的表面上，或者可以部分暴露使得僅藥劑的一部分在生物可降解載體的表面上。暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以通過例如共價或非共價鍵與生物可降解載體的表面結(jié)合，或者可并入在生物可降解載體內(nèi)使得藥劑的一部分暴露在表面上。

如本文使用的“并入在...中”意指一種或更多種藥劑至少部分地被生物可降解載體覆蓋，包含在其中，包裹在其中或被其包埋。在這樣的情況下，一種或更多種藥劑可以或可以不暴露在生物可降解載體的表面上。根據(jù)組合物中存在的生物可降解載體的類型，一種或更多種藥劑可以位于生物可降解載體的空隙空間(如芯)中，或者以具有暴露在表面上的可能性分散在生物可降解載體內(nèi)，或其任意組合。在一些實施方案中，一種或更多種藥劑可以分散或分布在生物可降解載體內(nèi)，并且不部分地暴露在生物可降解載體的表面上。在另一些實施方案中，一種或更多種藥劑可以部分地暴露在生物可降解載體的表面上。在另一些實施方案中，一種或更多種藥劑可以既分散或分布在生物可降解載體內(nèi)又部分地暴露在生物可降解載體的表面上。在又一些實施方案中，一種或更多種藥劑可以位于生物可降解載體的空隙空間中。在又一些實施方案中，一種或更多種藥劑可以既位于生物可降解載體的空隙空間中又暴露在生物可降解載體的表面上。

如本文使用的“降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)”包括完全或部分抑制tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)可以是例如tnf-α螯合和/或降解的結(jié)果。

如本文使用的“調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)”意指完全或部分降低mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，并且包括直接和間接調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。例如，一種或更多種藥劑可以直接與mcp-1結(jié)合以防止mcp-1與其受體相互作用和/或激活其受體?；蛘?，一種或更多種藥劑可通過抑制起作用以產(chǎn)生或釋放mcp-1或參與mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的其他蛋白質(zhì)或因子間接地調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。此外，一種或更多種藥劑可以通過激活繼而使mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)失活的蛋白質(zhì)或因子間接地調(diào)節(jié)mpc-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。

包含能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑的組合物

本文公開了用于在患有脊髓損傷的對象中抑制炎癥的組合物，其包含能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體。

合適的生物可降解載體包括但不限于微粒(microparticle)、納米顆粒、水凝膠、或其任意組合。

生物可降解載體可包括合成得到的聚合物，包括生物可降解的聚合物。示例性聚合物包括但不限于：聚(丙交酯)(pla)、聚(乙交酯)(pga)、聚(丙交酯-乙交酯)(poly(lactide-co-glycolides)，plga)、聚(乙二醇)(peg)、或其任意組合。在一些實施方案中，合成得到的生物可降解聚合物可以是聚(乳酸-乙醇酸)(poly(lactic-co-glycolicacid)，plga)，對于每種單體，乳酸和乙醇酸含量為0％至100％。例如，在一些方面，生物可降解的聚合物可以是50∶50plga，其中50∶50是指乳酸與乙醇酸之比。在一些實施方案中，生物可降解載體包含共聚物或由共聚物組成。例如，在一些實施方案中，生物可降解的聚合物可以是聚(乙二醇)(peg)和聚(乳酸-乙醇酸)(plga)的共聚物，所述聚(乳酸-乙醇酸)中，對于每種單體，乳酸和乙醇酸含量為0％至100％。此外，在一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含50∶50plga的微粒和/或納米顆粒。在另一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含50∶50plga與peg的共聚物的微粒和/或納米顆粒。在又一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含peg與plga之共聚物和/或peg的水凝膠。

示例性生物可降解的微粒和/或納米顆?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的加工技術(shù)制造，包括但不限于乳化、沉淀或噴霧干燥。在一些實施方案中，微粒和/或納米顆?？梢酝ㄟ^乳化制造。在另一些實施方案中，微粒和/或納米顆?？煞謩e通過沉淀或納米沉淀制造。在又一些實施方案中，微粒和/或納米顆粒可以通過噴霧干燥制造。

示例性生物可降解的水凝膠可以被設(shè)計為可注射的并且能夠通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的包括但不限于以下的方法和交聯(lián)化學(xué)原位形成：通過無銅點擊化學(xué)(copper-freeclickchemistry)交聯(lián)、通過邁克爾型加成交聯(lián)、通過剪切稀化機理(shear-thinningmechanism)凝膠化、通過熱敏機理凝膠化、或其任意組合。在一些實施方案中，可注射水凝膠可通過無銅點擊化學(xué)交聯(lián)原位形成。在一些實施方案中，可注射水凝膠可通過邁克爾型加成交聯(lián)原位形成。在另一些實施方案中，可注射水凝膠可以通過剪切稀化凝膠化機理原位形成。在另一些實施方案中，可注射水凝膠可以通過熱敏凝膠化機理原位形成。

可注射的生物可降解的水凝膠可以通過無銅點擊化學(xué)原位形成，包括將包含至少兩個官能疊氮基團部分的第一主要親水性聚合物和包含至少兩個官能炔基部分的第二主要親水性聚合物以允許第一聚合物的官能團和第二聚合物的官能團經(jīng)由無銅疊氮化物炔烴環(huán)加成機理反應(yīng)形成原位交聯(lián)的水凝膠的方式置于對象內(nèi)，其中所得水凝膠在生理學(xué)相關(guān)條件下經(jīng)歷水解或酶裂解。

可注射的生物可降解的水凝膠可通過邁克爾型加成反應(yīng)原位形成，包括將包含至少兩個官能烯基部分的第一主要親水性聚合物和包含至少兩個官能還原型硫醇基部分的第二主要親水性聚合物以允許第一聚合物的官能團和第二聚合物的官能團經(jīng)由邁克爾型加成反應(yīng)機理反應(yīng)形成原位交聯(lián)的水凝膠的方式置于對象內(nèi)，其中所得水凝膠在生理學(xué)相關(guān)條件下經(jīng)歷水解或酶裂解。還原型硫醇基是必需的并且通過在原位反應(yīng)之前或期間與還原劑(例如，還原型谷胱甘肽)反應(yīng)產(chǎn)生。

當(dāng)用于形成本發(fā)明水凝膠的組分例如被引入人或動物對象中時，所得的水凝膠可以在期望的時間段內(nèi)提供結(jié)構(gòu)支撐、遞送活性劑或兩者。通過選擇形成本發(fā)明水凝膠的材料和條件，可以原位形成具有特定降解特性的水凝膠，這對于水凝膠的期望功能是最佳的。當(dāng)水凝膠含有活性劑時，水凝膠的降解速率和譜將影響活性劑遞送至水凝膠遞送到的部位的譜。當(dāng)水凝膠旨在向遞送部位提供結(jié)構(gòu)支撐時，降解譜將決定結(jié)構(gòu)支撐存在的時間。因此，設(shè)計成原位自組裝并且具有可調(diào)降解特性的這些生物可相容的生物可降解的可注射水凝膠具有在期望的時間段內(nèi)遞送活性劑、提供結(jié)構(gòu)支撐或兩者的能力。這些特性允許以針對脊髓損傷治療而言最優(yōu)的方式和時間段進行治療。

能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的合適的藥劑包括tnf-α抑制劑、特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)、抗炎細(xì)胞因子、或其任意組合。在一些實施方案中，能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑包括tnf-α抑制劑。在一些實施方案中，能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑包括特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。在一些方面，特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)是抗體。在一些實施方案中，能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑包括抗炎細(xì)胞因子。

合適的tnf-α抑制劑包括但不限于：依那西普英夫利昔單抗阿達木單抗(adalimumab)賽妥珠單抗(certolizumabpegol)己酮可可堿甲氨蝶呤、哌非尼酮、安非布他酮或其任意組合。

特異性結(jié)合tnf-α的合適的蛋白質(zhì)包括但不限于：依那西普英夫利昔單抗阿達木單抗賽妥珠單抗或其任意組合。

用于所公開的組合物的合適的藥劑包括不依賴于調(diào)節(jié)細(xì)胞周期而降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑。

一種或更多種藥劑可以暴露在生物可降解載體的表面上，并入在生物可降解載體內(nèi)，或者兩者皆有。在一些實施方案中，所述藥劑的一種或更多種暴露在生物可降解載體的表面上。暴露的藥劑可以與tnf-α結(jié)合并通過螯合和/或降解可溶性tnf-α而使其失活。例如，暴露的藥劑可結(jié)合tnf-α，并且生物可降解載體可隨后通過內(nèi)吞作用或本領(lǐng)域已知的其他方法被細(xì)胞內(nèi)化，由此可將tnf-α遞送至溶酶體以降解。在一些實施方案中，暴露在生物可降解載體的表面上的藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)，例如抗體。

在一些實施方案中，將一種或更多種藥劑并入在生物可降解載體內(nèi)。

在另一些實施方案中，一種或更多種所述藥劑暴露在生物可降解載體的表面上并且并入在生物可降解載體內(nèi)。在一些方面中，并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是抗炎細(xì)胞因子，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑包括特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。在一些方面中，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑和并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)、tnf-α抑制劑、或其任意組合。在一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)，并且并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。在一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑是tnf-α抑制劑，并且并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是tnf-α抑制劑。在一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)，而并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是tnf-α抑制劑。在一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑是tnf-α抑制劑，而并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。

在一些實施方案中，組合物還可以包含一種或更多種抗炎細(xì)胞因子。許多抗炎細(xì)胞因子是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，包括但不限于il-10、il-4或tgf-β。在一些方面，一種或更多種抗炎細(xì)胞因子是il-10。在另一些方面，一種或更多種抗炎細(xì)胞因子是il-4。

一種或更多種抗炎細(xì)胞因子可以暴露在生物可降解載體的表面上、并入在生物可降解載體內(nèi)或兩者皆有。在一些實施方案中，將一種或更多種抗炎細(xì)胞因子并入在生物可降解載體內(nèi)。

在一些方面，生物可降解載體可以為組織工程學(xué)目的提供三維(3-d)結(jié)構(gòu)，而暴露在生物可降解載體的表面上或并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑可以使得能夠清除tnf-α。

生物可降解載體可被設(shè)計成在將組合物施用于對象后的任何合適的時限(timeframe)內(nèi)開始降解。在一些實施方案中，生物可降解載體可以從施用時至將組合物施用于對象后約21天內(nèi)開始降解。

生物可降解載體可以在施用于對象的約21天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約14天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約10天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約7天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約5天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約3天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約1天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象時開始降解。

或者，生物可降解載體可以在短時間內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至48小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至36小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至24小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至12小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至6小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象后立即開始降解。

生物可降解載體的降解可導(dǎo)致釋放和/或遞送一種或更多種藥劑，從而向?qū)ο筇峁┲委熡行┝康囊环N或更多種藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約21天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約18天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約14天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約12天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約10天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約9天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約8天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約7天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約6天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約5天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約4天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約3天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約2天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約1天提供治療有效劑量的藥劑。

生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第7天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第3天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第7天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第10天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第14天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。

或者，生物可降解載體可在短時間內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至48小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至36小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至24小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至12小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種試劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至6小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至3小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的1小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象后立即遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。

治療有效劑量的一種或更多種藥劑可被遞送至損傷部位、可全身釋放、或者可被遞送至損傷部位且全身釋放。例如，在一些實施方案中，可將一種或更多種藥劑遞送至脊髓。

本文所述的組合物中還可以包含藥學(xué)試劑(pharmaceuticalagent)。在一些方面，藥學(xué)試劑可以使組合物穩(wěn)定、允許將其容易地施用于對象、提高其特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力或者使得組合物適合于對象中的治療用途。因此，如相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，所述組合物還可以包含可藥用載體或賦形劑。考慮到一些所述組合物中包含藥學(xué)試劑，本文還公開了如本文提供的具有能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體的藥物組合物?？梢詫⒂糜谶f送或注射所述組合物的所述藥物組合物施用于對象以在延長的時間段內(nèi)在對象中維持特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力。例如，可以改變組合物黏度和能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑的濃度以增加組合物的活性成分的半衰期。

所述藥物組合物可以配制為本領(lǐng)域已知和合適的任何各種制劑，包括本文描述和例示的那些制劑。在一些實施方案中，藥物組合物是水性制劑。水溶液可以通過以下來制備，將所述組合物在水或合適的生理緩沖液中混合，并任選地根據(jù)需要添加合適的著色劑、防腐劑、穩(wěn)定劑和增稠劑、離子如鈣或鎂等。水性混懸液也可以通過將所述組合物與粘性材料分散在水或生理緩沖液中來制備，所述粘性材料例如天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其他公知的助懸劑。還包括液體制劑和旨在于使用前不久轉(zhuǎn)化為液體制劑的固體形式制劑。這樣的液體包括溶液、混懸液、糖漿、漿液和乳液。液體制劑可以通過常規(guī)方法用可藥用添加劑制備，所述可藥用添加劑例如助懸劑(例如，山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂肪或油)；乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯膠)；非水性載體(例如，杏仁油、油性酯或分級的植物油)；和防腐劑(例如，對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。這些制劑除活性劑之外還可以包含穩(wěn)定劑、緩沖劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。組合物可以是粉末或凍干形式，用于在使用前用合適的載劑(例如無菌水、生理緩沖液或鹽溶液)構(gòu)建。組合物可以配制成用于注射到對象中。為了注射，所述組合物可以在水溶液如水中，或在生理上相容的緩沖液(例如hanks溶液、林格氏溶液、生理鹽水緩沖液)或人工腦脊液中進行配制。溶液可以包含一種或更多種配制劑，例如助懸劑、穩(wěn)定劑或分散劑。注射制劑也可制備成固體形式制劑，其旨在于使用前不久轉(zhuǎn)化為適合于注射的液體形式制劑，例如，通過在使用前用合適的載劑(例如無菌水、鹽溶液或人工腦脊液)進行構(gòu)建。

本文還提供了在患有脊髓損傷的對象中治療炎癥的方法，其包括向所述對象施用包含能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體的組合物。

在一些實施方案中，一種或更多種藥劑能夠通過直接降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。例如，在一些方面，一種或更多種藥劑可直接抑制tnf-α。在另一些方面，一種或更多種試劑可抑制tnf-α上游的蛋白質(zhì)和/或因子。在另一些方面，一種或更多種試劑可抑制tnf-α下游的蛋白質(zhì)和/或因子。

可通過多種途徑將所公開的組合物施用于對象，所述途徑包括但不限于鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、經(jīng)皮、皮下、局部或其任意組合。在一些實施方案中，可以將組合物施用于對象的脊髓。例如，可通過直接注射到對象的脊髓中來施用組合物。在一些方面，可通過將組合物手術(shù)植入到對象的脊髓中來施用組合物。

當(dāng)適合于治療的損傷包括影響脊髓的創(chuàng)傷性身體損傷時，所述方法可以在身體或脊柱區(qū)的溫度降低時進行。在一些實施方案中，當(dāng)對象的脊髓為約96°f至約85°f時，可施用所述組合物。在一些實施方案中，當(dāng)對象的脊髓為約96°f、約95°f、約94°f、約93°f、約92°f、約91°f、約90°f、約89°f、約88°f或約87°f時，可施用所述組合物。此外，由于脊髓損傷常常期望快速治療，故所述方法可以在對象脊髓損傷的約2小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約4小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約6小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約12小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約18小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約24小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約36小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約48小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約72小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約72小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約48小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約24小時進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約72小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約48小時進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約48小時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約48小時至對象脊髓損傷后約72小時進行。

在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約72小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約48小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約24小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約18小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約12小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約6小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約4小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約3小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約2小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約1小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始后不到1小時進行。

本文還提供了用于產(chǎn)生包含能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑和生物可降解載體的組合物的藥盒，所述藥盒包含：能夠特異性降低tnf-α信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑；生物可降解載體；和用于產(chǎn)生所述組合物的說明書。

包含一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)之藥劑的組合物

本文公開了用于在患有脊髓損傷的對象中抑制炎癥的組合物，其包含一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑和生物可降解載體。

合適的生物可降解載體包括但不限于微粒、納米顆粒、水凝膠、或其任意組合。

生物可降解載體可包含合成得到的聚合物，包括生物可降解的聚合物。示例性聚合物包括但不限于：聚(丙交酯)(pla)、聚(乙交酯)(pga)、聚(丙交酯乙交酯)(plga)、聚(乙二醇)(peg)、或其任意組合。在一些實施方案中，合成得到的生物可降解聚合物可以是聚(乳酸乙醇酸)(plga)，對于每種單體，乳酸和乙醇酸含量為0％至100％。例如，在一些方面，生物可降解的聚合物可以是50∶50plga，其中50∶50是指乳酸與乙醇酸之比。在一些實施方案中，生物可降解載體包含共聚物或由共聚物組成。例如，在一些實施方案中，生物可降解的聚合物可以是聚(乙二醇)(peg)和聚(乳酸乙醇酸)(plga)的共聚物，對于每種單體，乳酸和乙醇酸含量為0％至100％。此外，在一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含50∶50plga的微粒和/或納米顆粒。在另一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含50∶50plga與peg的共聚物的微粒和/或納米顆粒。在又一些實施方案中，生物可降解載體可以是包含peg和/或peg與plga的共聚物的水凝膠。

示例性生物可降解的微粒和/或納米顆?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的加工技術(shù)制造，包括但不限于乳化、沉淀或噴霧干燥。在一些實施方案中，微粒和/或納米顆?？梢酝ㄟ^乳化制造。在另一些實施方案中，微粒和/或納米顆?？煞謩e通過沉淀或納米沉淀制造。在又一些實施方案中，微粒和/或納米顆?？梢酝ㄟ^噴霧干燥制造。

可注射的生物可降解的水凝膠可以通過無銅點擊化學(xué)原位形成，包括將包含至少兩個官能疊氮基團部分的第一主要親水性聚合物和包含至少兩個官能炔基部分的第二主要親水性聚合物以允許第一聚合物的官能團和第二聚合物的官能團經(jīng)由無銅疊氮化物炔烴環(huán)加成機理反應(yīng)形成原位交聯(lián)的水凝膠的方式置于對象體內(nèi)，其中所得水凝膠在生理學(xué)相關(guān)條件下經(jīng)歷水解或酶裂解。

可注射的生物可降解的水凝膠可通過邁克爾型加成反應(yīng)原位形成，包括將包含至少兩個官能烯基部分的第一主要親水性聚合物和包含至少兩個官能還原型硫醇基部分的第二主要親水性聚合物以允許第一聚合物的官能團和第二聚合物的官能團經(jīng)由邁克爾型加成反應(yīng)機理反應(yīng)形成原位交聯(lián)的水凝膠的方式置于對象體內(nèi)，其中所得水凝膠在生理學(xué)相關(guān)條件下經(jīng)歷水解或酶裂解。還原型硫醇基是必需的并且通過在原位反應(yīng)之前或期間與還原劑(例如，還原型谷胱甘肽)反應(yīng)產(chǎn)生。

當(dāng)用于形成本發(fā)明水凝膠的組分例如被引入人或動物對象中時，所得的水凝膠可以在期望的時間段內(nèi)提供結(jié)構(gòu)支撐、遞送活性劑或兩者。通過選擇形成本發(fā)明水凝膠的材料和條件，可以原位形成具有特異性降解特性的水凝膠，這對于水凝膠的期望功能是最佳的。當(dāng)水凝膠含有活性劑時，水凝膠的降解速率和譜將影響活性劑遞送至水凝膠遞送部位的分布。當(dāng)水凝膠旨在向遞送位點提供結(jié)構(gòu)支撐時，降解譜將決定結(jié)構(gòu)支撐存在的時間。因此，被設(shè)計成原位自組裝并且具有可調(diào)降解特性的這些生物可相容的生物可降解的可注射水凝膠具有在期望的時間段內(nèi)遞送活性劑、提供結(jié)構(gòu)支撐或兩者的能力。這些特性允許以針對脊髓損傷的治療而言最優(yōu)的方式和時間段進行治療。

能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的合適藥劑包括但不限于：jnk抑制劑、tnf-α抑制劑、特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)、特異性結(jié)合mcp-i的蛋白質(zhì)、非選擇性cox抑制劑、選擇性cox抑制劑、cox-2抑制劑、非甾體抗炎藥(nsaid)、四環(huán)素、抗炎細(xì)胞因子、甲氨蝶呤、哌非尼酮或其任意組合。

jnk抑制劑包括但不限于以下中的一種或更多種：sp600125、bentamapimod、rwj67657、tcsjnk60、su3327、cc-401或bi78d3。在一些實施方案中、jnk抑制劑是sp600125。

特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)包括但不限于以下的一種或更多種：依那西普英夫利昔單抗阿達木單抗賽妥珠單抗或其任意組合。

tnf-α抑制劑包括但不限于：己酮可可堿甲氨蝶呤、哌非尼酮、安非布他酮或其任意組合。

特異性結(jié)合mcp-1的蛋白質(zhì)包括抗體。在一些實施方案中，特異性結(jié)合mcp-1的蛋白質(zhì)是abn912。

cox抑制劑包括但不限于以下的一種或更多種：塞來昔布姜黃素、魚藤素(deguelin)、尼氟滅酸(nifllumicacid)、布洛芬或萘普生在一些實施方案中，cox抑制劑是cox-2抑制劑。在一些實施方案中，cox-2抑制劑是塞來昔布在另一些實施方案中，cox-2抑制劑是姜黃素。在一些實施方案中，cox-2抑制劑是vioxx。

cox抑制劑可以是nsaid。例如，在一些方面，nsaid可以是布洛芬。在另一些方面，nsaid可以是萘普生。在又一些方面，nsaid可以是布洛芬和萘普生的組合。

合適的四環(huán)素包括米諾環(huán)素、多西環(huán)素或其任意組合。

用于所公開的組合物的合適的藥劑包括不依賴于調(diào)節(jié)細(xì)胞周期而調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑。

能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑可以暴露在生物可降解載體的表面上、并入在生物可降解載體內(nèi)或兩者皆有。在一些實施方案中，一種或更多種所述藥劑暴露在生物可降解載體的表面上。例如，在一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是tnf-α結(jié)合蛋白，例如抗體。在另一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是mcp-1結(jié)合蛋白。在另一些方面，暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是tnf-α結(jié)合蛋白和mcp-1結(jié)合蛋白。通過例如tnf-α結(jié)合和隨后的內(nèi)化以及將生物可降解載體運輸至溶酶體，暴露的tnf-α結(jié)合蛋白可通過循環(huán)tnf-α的螯合和/或降解結(jié)合tnf-α并使其失活。在一些方面，一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑包括tnf-α抑制劑。

在另一些實施方案中，可將一種或更多種藥劑并入在生物可降解載體內(nèi)。

在又一些實施方案中，一種或更多種藥劑可暴露在生物可降解載體的表面上以及并入在生物可降解載體內(nèi)。例如，在一些方面，并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑可以是抗炎細(xì)胞因子，而暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。例如，在一些方面，可將il-10并入在生物可降解載體內(nèi)，而可以使特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)(例如抗體)暴露在生物可降解載體的表面上。在另一些實施方案中，并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑可以是抗炎細(xì)胞因子，而暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是特異性結(jié)合mcp-1的蛋白質(zhì)。在又一些實施方案中，并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑可以是tnf-α抑制劑、cox抑制劑、cox-2抑制劑或四環(huán)素，而暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是特異性結(jié)合tnf-α的蛋白質(zhì)。在又一些實施方案中，并入在生物可降解載體內(nèi)的一種或更多種藥劑可以是tnf-α抑制劑、cox抑制劑、cox-2抑制劑或四環(huán)素，而暴露在生物可降解載體的表面上的一種或更多種藥劑可以是特異性結(jié)合mcp-1的蛋白質(zhì)。

在一些實施方案中，組合物還可以包含一種或更多種抗炎細(xì)胞因子。許多抗炎細(xì)胞因子是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，包括但不限于il-10、il-4或tgf-β。在一些方面，一種或更多種抗炎細(xì)胞因子是il-10。在另一些方面，一種或更多種抗炎細(xì)胞因子是il-4。

在一些方面，生物可降解載體可以為組織工程學(xué)目的提供三維結(jié)構(gòu)，而暴露在生物可降解載體的表面上或并入在其中的一種或更多種藥劑可以使得能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。

生物可降解載體可被設(shè)計成在將組合物施用于對象后的任何合適的時間段內(nèi)開始降解。在一些實施方案中，生物可降解載體可以從施用時至將組合物施用于對象后約21天開始降解。

生物可降解載體可以在施用于對象的約21天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約14天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約10天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約7天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約5天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約3天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可以在施用于對象的約1天內(nèi)開始降解。生物可降解載體可在施用于對象時開始降解。

或者，生物可降解載體可以在短時間內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至48小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至36小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至24小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至12小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至6小時內(nèi)開始降解。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象后立即開始降解。

生物可降解載體的降解可導(dǎo)致釋放和/或遞送一種或更多種藥劑，從而向?qū)ο筇峁┲委熡行┝康囊环N或更多種藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約21天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約18天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約14天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約12天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約10天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約9天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約8天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約7天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約6天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約5天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約4天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約3天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約2天提供治療有效劑量的藥劑。在一些實施方案中，生物可降解載體在多至約1天提供治療有效劑量的藥劑。

生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第7天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第1天至約第3天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第3天至約第7天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第14天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第7天至約第10天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。生物可降解載體可以從施用于對象的約第14天至約第21天遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。

或者，生物可降解載體可在短的時期內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至48小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至36小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至24小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至12小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至6小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的短至3小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象的1小時內(nèi)遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。在一些情況下，生物可降解載體可以在施用于對象后立即遞送治療有效劑量的一種或更多種藥劑。

治療有效劑量的一種或更多種藥劑可被遞送至損傷部位、可全身釋放、或者可被遞送至損傷部位且全身釋放。例如，在一些實施方案中，可將一種或更多種藥劑遞送至脊髓。

本文所述的組合物中還可以包含藥學(xué)試劑。在一些方面，藥學(xué)試劑可以使組合物穩(wěn)定、允許將其容易地施用于對象、提高其調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力或者使組合物適合于對象中的治療用途。因此，如相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，所述組合物還可以包含可藥用載體或賦形劑。考慮到一些所述組合物中包含藥學(xué)試劑，本文還公開了具有一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑和如本文提供的生物可降解載體的藥物組合物?？梢詫⒂糜谶f送或注射所述組合物的所述藥物組合物施用于對象以在延長的時間段內(nèi)在對象中維持調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力。例如，可以改變組合物黏度和能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的一種或更多種藥劑的濃度以增加組合物的活性成分的半衰期。

所述藥物組合物可以配制為本領(lǐng)域已知和合適的任何各種制劑，包括本文描述和例示的那些制劑。在一些實施方案中，藥物組合物是水性制劑。水溶液可以通過使所述組合物在水或合適的生理緩沖液中混合，并任選地根據(jù)需要添加合適的著色劑、防腐劑、穩(wěn)定劑和增稠劑、離子如鈣或鎂等來制備。水性混懸液也可以通過將所述組合物與粘性材料分散在水或生理緩沖液中來制備，所述粘性材料例如天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其他公知的助懸劑。還包括液體制劑和旨在于使用前不久轉(zhuǎn)化為液體制劑的固體形式制劑。這樣的液體包括溶液、混懸液、糖漿、漿液和乳液。液體制劑可以通過常規(guī)方法用可藥用添加劑制備，例如助懸劑(例如，山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂肪或油)；乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯膠)；非水性載體(例如，杏仁油、油性酯或分級的植物油)；和防腐劑(例如，對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。這些制劑除活性劑之外還可以包含穩(wěn)定劑、緩沖劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。組合物可以是粉末或凍干形式，用于在使用前用合適的載體(例如無菌水、生理緩沖液或鹽溶液)構(gòu)建。組合物可以配制成用于注射到對象中。為了注射，所述組合物可以在水溶液(如水)中，或生理上相容的緩沖液(例如hanks溶液、林格氏溶液、生理鹽水緩沖液或人工腦脊液)中進行配制。溶液可以包含一種或更多種配制劑，例如助懸劑、穩(wěn)定劑或分散劑。注射制劑也可制備成固體形式制劑，其旨在在使用前不久轉(zhuǎn)化為適合于注射的液體形式制劑，例如，在使用前通過用合適的載體(例如無菌水、鹽溶液或人工腦脊液)進行構(gòu)建。

本文還提供了在患有脊髓損傷的對象中治療炎癥的方法，包括向所述對象施用包含一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑和生物可降解載體的組合物。

可通過多種途徑將所公開的組合物施用于對象，包括但不限于鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、經(jīng)皮、皮下、局部或其任意組合。在一些實施方案中，可以將組合物施用于對象的脊髓。例如，可通過直接注射到對象的脊髓中來施用組合物。在一些方面，可通過將組合物手術(shù)植入到對象的脊髓中來施用組合物。

當(dāng)適合于治療的損傷包括影響脊髓的創(chuàng)傷性身體損傷時，所述方法可以在身體或脊柱區(qū)的溫度降低時進行。在一些實施方案中，當(dāng)對象的脊髓為約96°f至約85°f時，可施用所述組合物。在一些實施方案中，當(dāng)對象的脊髓為約96°f、約95°f、約94°f、約93°f、約92°f、約91°f、約90°f、約89°f、約88°f或約87°f時，可施用所述組合物。此外，由于脊髓損傷常常期望快速治療，故所述方法可以在對象脊髓損傷的約2小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約4小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約6小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約12小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約18小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約24小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約36小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約48小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的約72小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約72小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約48小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷時至對象脊髓損傷后約24小時進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約72小時進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約24小時至對象脊髓損傷后約48小時進行。在一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約48小時至對象脊髓損傷后約1周進行。在另一些實施方案中，所述方法可以從對象脊髓損傷后約48小時至對象脊髓損傷后約72小時進行。

在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約72小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約48小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約24小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約18小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約12小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約6小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約4小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約3小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約2小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始的約1小時內(nèi)進行。在一些實施方案中，所述方法可以在對象脊髓損傷的治療開始后不到1小時內(nèi)進行。

本文還提供了用于產(chǎn)生包含一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑和生物可降解載體的組合物的藥盒，所述藥盒包含：一種或更多種能夠調(diào)節(jié)mcp-1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥劑；生物可降解載體；和用于產(chǎn)生所述組合物的說明書。

實施例

通過溶劑萃取/蒸發(fā)單一水包油乳化微囊包封的tnf-α抑制劑。使用溶劑萃取/蒸發(fā)單一水包油(o/w)乳化方法制備生物可降解的聚合物微粒。將羧基封端的plga(0-20重量％)和哌非尼酮(0-20重量％)溶解在合適的揮發(fā)性有機溶劑(例如，二氯甲烷、乙酸乙酯)中。在恒定剪切速率混合下，將所得聚合物溶液分散體相添加到含有0.5％至5％(w/v)表面活性劑(pva)的水性連續(xù)相中，以產(chǎn)生單一水包油微乳液。隨后將所得的穩(wěn)定微乳液在350rpm攪拌下添加至包含200ml含有痕量濃度(0％至0.5％(w/v))表面活性劑(pva)的去離子水的蒸發(fā)浴中持續(xù)3小時以有效地提取并蒸發(fā)有機溶劑。然后收集硬化的微粒，用去離子水純化，并凍干。

plga-g-peg納米顆粒的制備和隨后通過無銅點擊化學(xué)的抗tnf-α抗體的表面生物綴合。將不同比率的plga-g-peg和plga-g-peg-疊氮化物二嵌段共聚物(0-1重量％)溶解在水混溶性溶劑(例如，乙腈、二甲基亞砜、n，n-二甲基甲酰胺、丙酮)中。使聚合物溶液沉淀到水(非溶劑)中，以產(chǎn)生包含具有不同百分比的peg-疊氮化物官能度的peg化表面的納米顆粒。將所得的納米顆粒懸浮液攪拌3至6小時，使得能夠進行充分的溶劑擴散。然后將納米顆粒懸浮液純化并通過超濾濃縮并凍干。使疊氮化物官能化的納米顆粒和二芐基環(huán)辛炔官能的抗tnf-α抗體(0.5-1摩爾當(dāng)量的末端疊氮化物)獨立地重懸于緩沖鹽水(ph7.4)混懸液中，隨后混合30分鐘以通過無銅點擊化學(xué)將抗體共價偶聯(lián)至納米顆粒表面。

本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可以對本發(fā)明的優(yōu)選實施方案作出許多改變和修改，并且可以在不脫離本發(fā)明的精神的情況下作出這樣的改變和修改。因此，目的在于所附權(quán)利要求書覆蓋落入本發(fā)明的真實精神和范圍內(nèi)的所有這樣的等同變化。