對(duì)相關(guān)申請(qǐng)的交叉援引

本申請(qǐng)要求2014年7月16日提交的流水號(hào)62/025,394的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)優(yōu)先權(quán)，通過(guò)援引將其內(nèi)容完整收入本文。

ascii文本文件的序列表的提交

通過(guò)援引將ascii文本文件上的下述提交的內(nèi)容完整收入本文：計(jì)算機(jī)可讀形式(crf)的序列表(文件名：146392027240seqlisting.txt，記錄日期：2015年7月9日，大?。?1kb)。

發(fā)明領(lǐng)域

本公開(kāi)文本涉及通過(guò)施用降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法來(lái)治療癌癥和/或腫瘤免疫的方法。

發(fā)明背景

許多免疫相關(guān)疾病是已知的，而且已經(jīng)被廣泛地研究。此類(lèi)疾病包括免疫介導(dǎo)的炎性疾病，非免疫介導(dǎo)的炎性疾病，感染性疾病，和免疫缺陷病。然而，許多癌癥還與免疫系統(tǒng)互連，如多種免疫細(xì)胞能夠發(fā)起抗癌細(xì)胞應(yīng)答，但是癌細(xì)胞也擁有阻抑或逃避這些應(yīng)答的機(jī)制。雖然這些疾病的發(fā)生通常牽涉多步途徑且通常牽涉多種不同生物學(xué)系統(tǒng)/途徑，但是這些途徑的一種或多種中的關(guān)鍵點(diǎn)干涉可具有改善或治療的效應(yīng)。治療性干涉可以通過(guò)拮抗有害過(guò)程/途徑或刺激有益過(guò)程/途徑而發(fā)生。

t淋巴細(xì)胞(t細(xì)胞)是哺乳動(dòng)物免疫應(yīng)答的重要成分。t細(xì)胞識(shí)別與主要組織相容性復(fù)合體(mhc)內(nèi)的基因編碼的自身分子(self-molecule)結(jié)合(associated)的抗原。該抗原可以與mhc分子一起展示在抗原呈遞細(xì)胞，受病毒感染的細(xì)胞，和還有癌細(xì)胞的表面上。t細(xì)胞系統(tǒng)清除這些對(duì)宿主哺乳動(dòng)物造成健康威脅的改變的細(xì)胞。t細(xì)胞包括輔助性t細(xì)胞和細(xì)胞毒性t細(xì)胞。輔助性t細(xì)胞在識(shí)別抗原呈遞細(xì)胞上的抗原-mhc復(fù)合物后大量增殖。輔助性t細(xì)胞還分泌多種細(xì)胞因子，即淋巴因子，其在b細(xì)胞，細(xì)胞毒性t細(xì)胞及多種參與免疫應(yīng)答的其它細(xì)胞的活化中發(fā)揮中心作用。另一個(gè)子范疇的輔助性t細(xì)胞是濾泡輔助性t細(xì)胞(tfh)(綜述參見(jiàn)vineusa等，nat.rev.immunol.5：853-865(2005))。通過(guò)它們的cxc-趨化因子受體5特征性表達(dá)可檢測(cè)(schaerli等，j.exp.med.192：1553-62(2000))，發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞生成il-10和可能的il-21。tfh細(xì)胞給生發(fā)中心b細(xì)胞提供輔助，特別是在與b細(xì)胞共培養(yǎng)期間幫助b細(xì)胞存活和繁殖及有力地誘導(dǎo)抗體生成。已經(jīng)將它們與耐受性形成聯(lián)系起來(lái)。

調(diào)節(jié)性t細(xì)胞(treg)是在抑制自身反應(yīng)性免疫應(yīng)答中發(fā)揮至關(guān)重要作用的輔助性t細(xì)胞子集，而且常常見(jiàn)于慢性炎癥部位，諸如在腫瘤組織中(wang，h.y.和wang，r.f.，curropinimmunol19：217-23(2007))。treg經(jīng)由接觸依賴(lài)性機(jī)制和細(xì)胞因子生成對(duì)活化的t細(xì)胞實(shí)施它們的遏制功能(fehervari，z.和sakaguchi，curropinimmunol16：203-8(2004))。treg還通過(guò)與樹(shù)突細(xì)胞(dc)上配體的直接相互作用調(diào)控免疫應(yīng)答。dc是能夠針對(duì)自身或非自身抗原誘導(dǎo)免疫或耐受的專(zhuān)職抗原呈遞細(xì)胞。dc擴(kuò)增的treg在體外遏制同種異體反應(yīng)性應(yīng)答(yamazaki，s.等，procnatlacadsciusa103：2758-63(2006)；ahn，j.s.，krishnadas，d.k.和agrawal，intimmunol19：227-37(2007))，而且當(dāng)過(guò)繼性轉(zhuǎn)移時(shí)，適宜的treg抑制nod.scid小鼠中的糖尿病(tarbell，k.v.等，jexpmed199：1467-77(2004))或?qū)嶒?yàn)誘發(fā)的哮喘(lewkowich，i.p.等,jexpmed202：1549-61(2005))。

為了尋找新的在treg細(xì)胞中表達(dá)的共刺激分子，實(shí)施了搜索來(lái)鑒定具有ig結(jié)構(gòu)域和免疫受體基于酪氨酸的活化或抑制(itam/itim)基序二者的在t細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因(abbas，a.r.等，genesimmun6：319-31(2005))。經(jīng)由這兩種基因組范圍生物信息學(xué)搜索策略的交集，鑒定到一種新的細(xì)胞表面結(jié)合的蛋白質(zhì)，編碼igv結(jié)構(gòu)域，跨膜結(jié)構(gòu)域，和兩個(gè)假定的免疫受體酪氨酸抑制性基序的蛋白質(zhì)(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)us20040121370，通過(guò)援引收入本文)。稱(chēng)作tigit(因?yàn)閠細(xì)胞-ig和itim結(jié)構(gòu)域)的蛋白質(zhì)顯示出在t細(xì)胞(特別是treg和記憶細(xì)胞子集)以及nk細(xì)胞上表達(dá)。

需要新的調(diào)控免疫系統(tǒng)的細(xì)胞來(lái)發(fā)起抗癌癥應(yīng)答的治療劑和治療方法。特別地，促進(jìn)能根除癌細(xì)胞的nk細(xì)胞和/或能維持持久抗癌癥應(yīng)答的記憶t細(xì)胞的抗癌癥功能的藥劑是高度有利的。

通過(guò)援引將本文中引用的所有參考文獻(xiàn)(包括專(zhuān)利申請(qǐng)，專(zhuān)利公開(kāi)文本，和uniprotkb/swiss-prot登錄號(hào))完整收入本文，就像具體且單獨(dú)指出通過(guò)援引來(lái)收錄每一篇個(gè)別參考文獻(xiàn)。

發(fā)明概述

本公開(kāi)文本描述包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法的組合治療。

在某些方面，本公開(kāi)文本提供一種用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在制造用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑與抗癌劑或抗癌療法組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的抗癌劑在制造用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述抗癌劑與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑的藥物組合物，其用于與抗癌劑或抗癌療法組合治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含抗癌劑的藥物組合物，其用于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種用于在個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在制造用于在個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑與抗癌劑或抗癌療法組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的抗癌劑在制造用于在個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述抗癌劑與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑的藥物組合物，其用于與抗癌劑或抗癌療法組合降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含抗癌劑的藥物組合物，其用于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種用于在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在制造用于在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑與抗癌劑或抗癌療法組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的抗癌劑在制造用于在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的藥物中的用途，其中所述抗癌劑與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑的藥物組合物，其用于與抗癌劑或抗癌療法組合治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含抗癌劑的藥物組合物，其用于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在制造用于在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能的藥物中的用途，其中所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑與抗癌劑或抗癌療法組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供有效量的抗癌劑在制造用于在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能的藥物中的用途，其中所述抗癌劑與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑的藥物組合物，其用于與抗癌劑或抗癌療法組合提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種包含抗癌劑的藥物組合物，其用于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種組合，其包含有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑。

在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有t細(xì)胞功能障礙性病癥。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞功能障礙性病癥特征在于t細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性或降低的分泌細(xì)胞因子，增殖或執(zhí)行細(xì)胞溶解活性的能力。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞功能障礙性病癥特征在于t細(xì)胞耗盡。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞為cd4+和cd8+t細(xì)胞。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑選自下組：tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑，pvr表達(dá)和/或活性的拮抗劑，抑制和/或阻斷tigit與pvr的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl2的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl3的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvr的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl2的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl3的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述pvr表達(dá)和/或活性的拮抗劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvr的相互作用的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvrl2的相互作用的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvrl3的相互作用的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvr的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl2的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl3的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑選自下組：小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制性核酸選自下組：反義多核苷酸，干擾性rna，催化性rna，和rna-dna嵌合物。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段為抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段選自下組：人源化抗體，嵌合抗體，雙特異性抗體，異源綴合抗體，和免疫毒素。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其包含選自下述氨基酸序列的氨基酸序列：(1)kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)；或(2)rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈，該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體重鏈，該抗體重鏈包含evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈和抗體重鏈，該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列，且該抗體重鏈包含evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其與下述任一所示hvr至少90％相同：(1)kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)；或(2)rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其片段包含輕鏈和/或重鏈，該輕鏈包含與divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列，該重鏈包含與evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述方法包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，抗癌劑，和抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是一種或多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是兩種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是三種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是四種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是五種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是一種或多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是兩種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是三種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是四種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是五種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌療法選自下組：放射療法，手術(shù)，化學(xué)療法，基因療法，dna療法，病毒療法，rna療法，免疫療法，骨髓移植，納米療法(nanotherapy)，單克隆抗體療法，輔助療法，新輔助療法，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法選自下組：放射療法，手術(shù)，化學(xué)療法，基因療法，dna療法，病毒療法，rna療法，免疫療法，骨髓移植，納米療法，單克隆抗體療法，輔助療法，新輔助療法，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑選自下組：化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，佐劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑選自下組：化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，佐劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述方法包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，抗癌劑，和抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述化療或生長(zhǎng)抑制劑選自下組：烷化劑，蒽環(huán)類(lèi)抗生素，抗激素劑，芳香酶抑制劑，抗雄激素，蛋白質(zhì)激酶抑制劑，脂質(zhì)激酶抑制劑，反義寡核苷酸，核酶，抗代謝物，拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，細(xì)胞毒劑或抗腫瘤抗生素，蛋白酶體抑制劑，抗微管劑，egfr拮抗劑，類(lèi)視黃醇，酪氨酸激酶抑制劑，組蛋白脫乙酰酶抑制劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述靶向治療劑選自下組：b-raf抑制劑，mek抑制劑，k-ras抑制劑，c-met抑制劑，alk抑制劑，磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑，akt抑制劑，mtor抑制劑，雙重磷脂酰肌醇3-激酶/mtor抑制劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞包含顯性-負(fù)tgfβ受體。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段選自下組：alemtuzumab，bevacizumab，cetuximab，panitumumab，rituximab，pertuzumab，trastuzumab，tositumomab，apolizumab，aselizumab，atlizumab，bapineuzumab，cedelizumab，certolizumabpegol，cidfusituzumab，cidtuzumab，clivatuzumab，daclizumab，eculizumab，efalizumab，epratuzumab，erlizumab，felvizumab，fontolizumab，labetuzumab，lintuzumab，matuzumab，mepolizumab，motavizumab，motovizumab，natalizumab，nimotuzumab，nolovizumab，numavizumab，ocrelizumab，omalizumab，palivizumab，pascolizumab，pecfusituzumab，pertuzumab，pexelizumab，ralivizumab，ranibizumab，reslivizumab，reslizumab，resyvizumab，ruplizumab，sibrotuzumab，siplizumab，sontuzumab，tacatuzumabtetraxetan，tadocizumab，talizumab，tefibazumab，tocilizumab，toralizumab，tucotuzumabcelmoleukin，tucusituzumab，umavizumab，urtoxazumab，ustekinumab，visilizumab，抗il-12，和抗il-17。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合選自下組的靶物：cd52，vegf-a，egfr，cd20，her2，hla-drb，cd62l，il-6r，淀粉樣蛋白β，cd44，canag，cd4，tnfα，il-2，cd25，補(bǔ)體c5，cd11a，cd22，cd18，呼吸道合胞病毒f，干擾素γ，cd33，ceacam5，il-5，整聯(lián)蛋白α4，ige，il-4，il-5，cd154，fap，cd2，muc-1，afp，整聯(lián)蛋白αiibβ3，clfa，il6r，cd40l，epcam，志賀樣毒素ii，il-12，il-23，il-17，和cd3。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體-藥物綴合物包含選自下組的藥物：mertansine，單甲基奧瑞司他汀(auristatin)e，加利車(chē)霉素(calicheamicin)，埃斯波霉素(esperamicin)，和放射性同位素螯合劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述血管發(fā)生抑制劑選自下組：vegf拮抗劑和血管生成素2拮抗劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗瘤劑選自下組：靶向csf-1r的藥劑，干擾素，gm-csf，il-2，il-12，和靶向cd20的抗體。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述癌癥疫苗選自下組：肽癌癥疫苗，個(gè)性化肽疫苗，多價(jià)長(zhǎng)肽疫苗，多重肽疫苗，肽雞尾酒疫苗，雜合肽疫苗，和肽脈沖樹(shù)突細(xì)胞疫苗。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑選自下組：tlr激動(dòng)劑，腫瘤壞死因子α，il-1，hmgb1，il-10拮抗劑，il-4拮抗劑，il-13拮抗劑，靶向cx3cl1的治療，靶向cxcl9的治療，靶向cxcl10的治療，靶向ccl5的治療，lfa-1激動(dòng)劑，icam1激動(dòng)劑，和選擇蛋白激動(dòng)劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑選自下組：tlr激動(dòng)劑，腫瘤壞死因子α，il-1，hmgb1，il-10拮抗劑，il-4拮抗劑，il-13拮抗劑，靶向cx3cl1的治療，靶向cxcl9的治療，靶向cxcl10的治療，靶向ccl5的治療，lfa-1激動(dòng)劑，icam1激動(dòng)劑，選擇蛋白激動(dòng)劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑是連續(xù)施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑是間歇施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑或抗癌療法是連續(xù)施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑或抗癌療法是間歇施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑是在所述抗癌劑或抗癌療法之前施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑是與所述抗癌劑或抗癌療法同時(shí)施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑是在所述抗癌劑或抗癌療法之后施用的。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述癌癥選自下組：非小細(xì)胞肺癌，小細(xì)胞肺癌，腎細(xì)胞癌，結(jié)直腸癌，卵巢癌，乳腺癌，胰腺癌，胃癌，膀胱癌，食道癌，間皮瘤，黑素瘤，頭和頸癌，甲狀腺癌，肉瘤，前列腺癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，宮頸癌，胸腺癌，白血病，淋巴瘤，骨髓瘤，蕈樣霉菌病，梅克爾(merkel)細(xì)胞癌，和其它血液學(xué)惡性。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述癌癥具有上升水平的t細(xì)胞浸潤(rùn)。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述個(gè)體中活化的cd4和/或cd8t細(xì)胞特征在于γ-ifn⁺生成性cd4和/或cd8t細(xì)胞和/或相對(duì)于施用所述組合之前增強(qiáng)的細(xì)胞溶解活性。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述cd4和/或cd8t細(xì)胞展現(xiàn)升高的選自下組的細(xì)胞因子的釋放：ifn-γ，tnf-α和白介素。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述cd4和/或cd8t細(xì)胞為效應(yīng)記憶t細(xì)胞。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述cd4和/或cd8效應(yīng)記憶t細(xì)胞特征在于具有cd44^高cd62l^低的表達(dá)。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。

在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。在其它方面，本公開(kāi)文本提供一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。

在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是兩種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是三種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是四種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑是五種或更多種抗癌劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是一種或多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是兩種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是三種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是四種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法是五種或更多種抗癌療法。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌療法選自下組：放射療法，手術(shù)，化學(xué)療法，基因療法，dna療法，病毒療法，rna療法，免疫療法，骨髓移植，納米療法，單克隆抗體療法，輔助療法，新輔助療法，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌療法選自下組：放射療法，手術(shù)，化學(xué)療法，基因療法，dna療法，病毒療法，rna療法，免疫療法，骨髓移植，納米療法，單克隆抗體療法，輔助療法，新輔助療法，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑選自下組：tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑，pvr表達(dá)和/或活性的拮抗劑，抑制和/或阻斷tigit與pvr的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl2的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl3的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvr的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl2的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，和抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl3的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑是抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其包含選自下述氨基酸序列的氨基酸序列：(1)kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)；或(2)rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈，其中該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體重鏈，其中該抗體重鏈evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)包含所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈和抗體重鏈，其中該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列，且該抗體重鏈包含evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其與下述任一所示hvr至少90％相同：(1)kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)；或(2)rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其片段包含輕鏈和/或重鏈，該輕鏈包含與divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列，該重鏈包含與evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑選自下組：化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，佐劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑選自下組：化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，佐劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述化療或生長(zhǎng)抑制劑選自下組：烷化劑，蒽環(huán)類(lèi)抗生素，抗激素劑，芳香酶抑制劑，抗雄激素，蛋白質(zhì)激酶抑制劑，脂質(zhì)激酶抑制劑，反義寡核苷酸，核酶，抗代謝物，拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，細(xì)胞毒劑或抗腫瘤抗生素，蛋白酶體抑制劑，抗微管劑，egfr拮抗劑，類(lèi)視黃醇，酪氨酸激酶抑制劑，組蛋白脫乙酰酶抑制劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述靶向治療劑選自下組：b-raf抑制劑，mek抑制劑，k-ras抑制劑，c-met抑制劑，alk抑制劑，磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑，akt抑制劑，mtor抑制劑，雙重磷脂酰肌醇3-激酶/mtor抑制劑，及其組合。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞包含顯性-負(fù)tgfβ受體。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段選自下組：alemtuzumab，bevacizumab，cetuximab，panitumumab，rituximab，pertuzumab，trastuzumab，tositumomab，apolizumab，aselizumab，atlizumab，bapineuzumab，cedelizumab，certolizumabpegol，cidfusituzumab，cidtuzumab，clivatuzumab，daclizumab，eculizumab，efalizumab，epratuzumab，erlizumab，felvizumab，fontolizumab，labetuzumab，lintuzumab，matuzumab，mepolizumab，motavizumab，motovizumab，natalizumab，nimotuzumab，nolovizumab，numavizumab，ocrelizumab，omalizumab，palivizumab，pascolizumab，pecfusituzumab，pertuzumab，pexelizumab，ralivizumab，ranibizumab，reslivizumab，reslizumab，resyvizumab，ruplizumab，sibrotuzumab，siplizumab，sontuzumab，tacatuzumabtetraxetan，tadocizumab，talizumab，tefibazumab，tocilizumab，toralizumab，tucotuzumabcelmoleukin，tucusituzumab，umavizumab，urtoxazumab，ustekinumab，visilizumab，抗il-12，和抗il-17。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段特異性結(jié)合選自下組的靶物：cd52，vegf-a，egfr，cd20，her2，hla-drb，cd62l，il-6r，淀粉樣蛋白β，cd44，canag，cd4，tnfα，il-2，cd25，補(bǔ)體c5，cd11a，cd22，cd18，呼吸道合胞病毒f，干擾素γ，cd33，ceacam5，il-5，整聯(lián)蛋白α4，ige，il-4，il-5，cd154，fap，cd2，muc-1，afp，整聯(lián)蛋白αiibβ3，clfa，il6r，cd40l，epcam，志賀樣毒素ii，il-12，il-23，il-17，和cd3。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗體-藥物綴合物包含選自下組的藥物：mertansine，單甲基奧瑞司他汀e，加利車(chē)霉素，埃斯波霉素，和放射性同位素螯合劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述血管發(fā)生抑制劑選自下組：vegf拮抗劑和血管生成素2拮抗劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗瘤劑選自下組：靶向csf-1r的藥劑，干擾素，gm-csf，il-2，il-12，和靶向cd20的抗體。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述癌癥疫苗選自下組：肽癌癥疫苗，個(gè)性化肽疫苗，多價(jià)長(zhǎng)肽疫苗，多重肽疫苗，肽雞尾酒疫苗，雜合肽疫苗，和肽脈沖樹(shù)突細(xì)胞疫苗。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑選自下組：tlr激動(dòng)劑，腫瘤壞死因子α，il-1，hmgb1，il-10拮抗劑，il-4拮抗劑，il-13拮抗劑，靶向cx3cl1的治療，靶向cxcl9的治療，靶向cxcl10的治療，靶向ccl5的治療，lfa-1激動(dòng)劑，icam1激動(dòng)劑，和選擇蛋白激動(dòng)劑。在可以與任何前述實(shí)施方案組合的某些實(shí)施方案中，所述一種或多種抗癌劑選自下組：tlr激動(dòng)劑，腫瘤壞死因子α，il-1，hmgb1，il-10拮抗劑，il-4拮抗劑，il-13拮抗劑，靶向cx3cl1的治療，靶向cxcl9的治療，靶向cxcl10的治療，靶向ccl5的治療，lfa-1激動(dòng)劑，icam1激動(dòng)劑，選擇蛋白激動(dòng)劑，及其組合。

發(fā)明詳述

i.通用技術(shù)

本文中描述或提及的技術(shù)和規(guī)程是本領(lǐng)域技術(shù)人員一般充分了解且通常采用的，其使用常規(guī)方法，諸如例如廣泛利用的方法進(jìn)行，該方法記載于sambrook等,molecularcloning:alaboratorymanual3dedition(2001)coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,n.y.；currentprotocolsinmolecularbiology(f.m.ausubel等編,(2003))；叢刊methodsinenzymology(academicpress,inc.):pcr2:apracticalapproach(m.j.macpherson,b.d.hames和g.r.taylor編,(1995)),harlow和lane編(1988)antibodies,alaboratorymanual,andanimalcellculture(r.i.freshney編,(1987))；oligonucleotidesynthesis(m.j.gait編,1984)；methodsinmolecularbiology,humanapress；cellbiology:alaboratorynotebook(j.e.cellis編,1998)academicpress；animalcellculture(r.i.freshney)編,1987)；introductiontocellandtissueculture(j.p.mather和p.e.roberts,1998)plenumpress；cellandtissueculture:laboratoryprocedures(a.doyle,j.b.griffiths,和d.g.newell編,1993-8)j.wileyandsons；handbookofexperimentalimmunology(d.m.weir和c.c.blackwell編)；genetransfervectorsformammaliancells(j.m.miller和m.p.calos編,1987)；pcr:thepolymerasechainreaction,(mullis等編,1994)；currentprotocolsinimmunology(j.e.coligan等編,1991)；shortprotocolsinmolecularbiology(wiley和sons,1999)；immunobiology(c.a.janeway和p.travers,1997)；antibodies(p.finch,1997)；antibodies:apracticalapproach(d.catty.編,irlpress,1988-1989)；monoclonalantibodies:apracticalapproach(p.shepherd和c.dean編,oxforduniversitypress,2000)；usingantibodies:alaboratorymanual(e.harlow和d.lane(coldspringharborlaboratorypress,1999)；theantibodies(m.zanetti和j.d.capra編,harwoodacademicpublishers,1995)；及cancer:principlesandpracticeofoncology(v.t.devita等編,j.b.lippincottcompany,1993)。

ii.定義

術(shù)語(yǔ)“拮抗劑”以最廣義使用，包括部分或完全阻斷，抑制，或中和本文中所公開(kāi)的天然多肽的生物學(xué)活性的任何分子。類(lèi)似的，術(shù)語(yǔ)“激動(dòng)劑”以最廣義使用，包括模擬本文中所公開(kāi)的天然多肽的生物學(xué)活性的任何分子。合適的激動(dòng)劑或拮抗劑分子明確包括激動(dòng)性或拮抗性抗體或抗體片段，天然多肽的片段或氨基酸序列變體，肽，反義寡核苷酸，有機(jī)小分子等。用于鑒定多肽的激動(dòng)劑或拮抗劑的方法可包括使多肽接觸候選激動(dòng)劑或拮抗劑分子并測(cè)量通常與所述多肽有關(guān)的一種或多種生物學(xué)活性的可檢測(cè)變化。

術(shù)語(yǔ)“適體”指能夠結(jié)合靶分子(諸如多肽)的核酸分子。例如，本發(fā)明的適體能特異性結(jié)合tigit多肽，或調(diào)控tigit表達(dá)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的分子。適體的生成和治療用途是本領(lǐng)域已完善建立的。參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利no.5,475,096，及(eyetech,newyork)用于治療年齡相關(guān)黃斑變性的治療功效。

術(shù)語(yǔ)“tigit”拮抗劑和“tigit活性或tigit表達(dá)的拮抗劑”可互換使用，指通過(guò)降低tigit編碼核酸的轉(zhuǎn)錄或翻譯，或通過(guò)抑制或阻斷tigit多肽活性，或二者來(lái)干擾tigit正常發(fā)揮功能的化合物。tigit拮抗劑的例子包括但不限于反義多核苷酸，干擾性rna，催化性rna，rna-dna嵌合物，tigit特異性適體，抗tigit抗體，抗tigit抗體的tigit結(jié)合片段，tigit結(jié)合小分子，tigit結(jié)合肽，和其它特異性結(jié)合tigit的多肽(包括但不限于一種或多種tigit配體的tigit結(jié)合片段，任選融合至一個(gè)或多個(gè)別的結(jié)構(gòu)域)，使得tigit拮抗劑與tigit之間的相互作用導(dǎo)致tigit活性或表達(dá)降低或停止。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)理解，在有些情況中，tigit拮抗劑可拮抗一種tigit活性但不影響另一種tigit活性。例如，供本文中某些方法中使用的想要的tigit拮抗劑是響應(yīng)例如pvr相互作用，pvrl3相互作用，或pvrl2相互作用之一而拮抗tigit活性但不影響或最低限度影響任何其它tigit相互作用的tigit拮抗劑。

術(shù)語(yǔ)“pvr拮抗劑”和“pvr活性或pvr表達(dá)的拮抗劑”可互換使用，指通過(guò)降低pvr編碼核酸的轉(zhuǎn)錄或翻譯，或通過(guò)抑制或阻斷pvr多肽活性，或二者來(lái)干擾pvr正常發(fā)揮功能的化合物。pvr拮抗劑的例子包括但不限于反義多核苷酸，干擾性rna，催化性rna，rna-dna嵌合物，pvr特異性適體，抗pvr抗體，抗pvr抗體的pvr結(jié)合片段，pvr結(jié)合小分子，pvr結(jié)合肽，和其它特異性結(jié)合pvr的多肽(包括但不限于一種或多種pvr配體的pvr結(jié)合片段，任選融合至一個(gè)或多個(gè)別的結(jié)構(gòu)域)，使得pvr拮抗劑與pvr之間的相互作用導(dǎo)致pvr活性或表達(dá)降低或停止。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)理解，在有些情況中，pvr拮抗劑可拮抗一種pvr活性但不影響另一種pvr活性，例如拮抗pvr和tigit之間相互作用但不拮抗pvr和除tigit以外的分子之間相互作用的pvr拮抗劑或拮抗響應(yīng)tigit相互作用的pvr活性但不拮抗響應(yīng)與除tigit以外的分子的相互作用的pvr活性的pvr拮抗劑。

術(shù)語(yǔ)“功能障礙”在免疫功能障礙的背景中指降低的對(duì)抗原性刺激的免疫響應(yīng)性的狀態(tài)。該術(shù)語(yǔ)包括可以發(fā)生抗原識(shí)別，但是隨后的免疫應(yīng)答對(duì)于控制感染或腫瘤生長(zhǎng)無(wú)效的耗竭和/或無(wú)反應(yīng)性?xún)烧叩墓餐亍?/p>

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“功能障礙”還包括對(duì)抗原識(shí)別的不感受或不響應(yīng)，特別地，將抗原識(shí)別轉(zhuǎn)化成下游t細(xì)胞效應(yīng)器功能，諸如增殖，細(xì)胞因子生成(例如il-2)和/或靶細(xì)胞殺傷的能力受損。

術(shù)語(yǔ)“無(wú)反應(yīng)性”指源自經(jīng)由t細(xì)胞受體投遞的不完全或不充分信號(hào)(例如在缺乏ras活化的情況中胞內(nèi)ca⁺²增加)的對(duì)抗原刺激的無(wú)響應(yīng)性狀態(tài)。t細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性也可以在缺乏共刺激的情況中在用抗原刺激后發(fā)生，生成即使在共刺激的背景中對(duì)抗原的隨后活化變得不感受的細(xì)胞。無(wú)響應(yīng)性狀態(tài)經(jīng)?？梢员话捉樗?2的存在超越。無(wú)反應(yīng)性t細(xì)胞不經(jīng)歷克隆擴(kuò)充和/或獲得效應(yīng)器功能。

術(shù)語(yǔ)“耗竭”指作為源自在許多慢性感染和癌癥期間發(fā)生的持續(xù)tcr信號(hào)傳導(dǎo)的t細(xì)胞功能障礙狀態(tài)的t細(xì)胞耗竭。它與無(wú)反應(yīng)性的區(qū)別在于它不經(jīng)由不完全或缺乏的信號(hào)傳導(dǎo)，而是由于持續(xù)信號(hào)傳導(dǎo)而發(fā)生。它以較差的效應(yīng)器功能，持續(xù)的抑制性受體表達(dá)和與功能性效應(yīng)或記憶t細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)不同的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)限定。耗竭阻止感染和腫瘤的最佳控制。耗竭可以源自外在負(fù)調(diào)節(jié)途徑(例如免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子)及細(xì)胞固有負(fù)調(diào)節(jié)(共刺激)途徑兩者。

“增強(qiáng)t細(xì)胞功能”意指誘導(dǎo)，引起或刺激t細(xì)胞具有持續(xù)或放大的生物學(xué)功能，或者恢復(fù)或再活化耗竭的或無(wú)活性的t細(xì)胞。增強(qiáng)t細(xì)胞功能的例子包括：相對(duì)于干預(yù)前的此類(lèi)水平，升高的來(lái)自cd8⁺t細(xì)胞的γ-干擾素分泌，升高的增殖，升高的抗原響應(yīng)性(例如病毒，病原體，或腫瘤清除)。在一個(gè)實(shí)施方案中，增強(qiáng)的水平是至少50％，或者60％，70％，80％，90％，100％，120％，150％，200％。測(cè)量此增強(qiáng)的方式是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。

“t細(xì)胞功能障礙性病癥”是以降低的對(duì)抗原性刺激(例如針對(duì)表達(dá)免疫原的腫瘤)的響應(yīng)性為特征的t細(xì)胞病癥或狀況。在一些實(shí)施方案中，t細(xì)胞功能障礙性病癥是如下的病癥，其中t細(xì)胞是無(wú)反應(yīng)性的或者具有降低的分泌細(xì)胞因子，增殖，或者執(zhí)行細(xì)胞裂解活性的能力。在一個(gè)具體的方面，降低的響應(yīng)性導(dǎo)致對(duì)表達(dá)免疫原的腫瘤的無(wú)效控制。以t細(xì)胞功能障礙為特征的t細(xì)胞功能障礙性病癥的例子包括腫瘤免疫和癌癥。

“腫瘤免疫”指腫瘤逃避免疫識(shí)別和清除的過(guò)程。如此，作為治療概念，腫瘤免疫在此類(lèi)逃避減弱時(shí)得到“治療”，并且腫瘤被免疫系統(tǒng)識(shí)別并攻擊。腫瘤識(shí)別的例子包括腫瘤結(jié)合，腫瘤收縮和腫瘤清除。

“免疫原性”指特定物質(zhì)引發(fā)免疫應(yīng)答的能力。腫瘤是免疫原性的，并且增強(qiáng)腫瘤免疫原性有助于通過(guò)免疫應(yīng)答清除腫瘤細(xì)胞。增強(qiáng)腫瘤免疫原性的例子包括但不限于用tigit抑制劑(例如抗tigit抗體)處理。

“持續(xù)應(yīng)答”指在停止處理后對(duì)降低腫瘤生長(zhǎng)的持續(xù)影響。例如，與施用階段開(kāi)始時(shí)的大小相比，腫瘤大小可以保持為相同或更小。在一些實(shí)施方案中，持續(xù)應(yīng)答具有與處理持續(xù)時(shí)間至少相同的持續(xù)時(shí)間，處理持續(xù)時(shí)間的至少1.5倍，2.0倍，2.5倍，或3.0倍長(zhǎng)度。

術(shù)語(yǔ)“抗體”包括單克隆抗體(包括具有免疫球蛋白fc區(qū)的全長(zhǎng)抗體)，具有多表位特異性的抗體組合物，多特異性抗體(例如雙特異性抗體)，雙抗體，和單鏈分子，及抗體片段(例如fab，f(ab’)2，和fv)。術(shù)語(yǔ)“免疫球蛋白”(ig)在本文中與“抗體”可互換使用。

基本的4鏈抗體單元是由兩條相同的輕鏈(l)和兩條相同的重鏈(h)構(gòu)成的異四聚體糖蛋白。igm抗體由5個(gè)基本的異四聚體單元及稱(chēng)作j鏈的另外多肽組成，而且包含10個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)，而iga抗體包含與j鏈組合的2-5個(gè)能聚合而形成多價(jià)裝配物的基本4鏈單元。在igg的情況中，4鏈單元通常是約150,000道爾頓。每條輕鏈通過(guò)一個(gè)共價(jià)二硫鍵與重鏈相連，而兩條重鏈通過(guò)一個(gè)或多個(gè)二硫鍵彼此相連，二硫鍵的數(shù)目取決于重鏈的同種型。每條重鏈和輕鏈還具有間隔規(guī)律的鏈內(nèi)二硫橋。每條重鏈在n-末端具有一個(gè)可變域(vh)，接著是三個(gè)(對(duì)于α和γ鏈)或四個(gè)(對(duì)于μ和ε同種型)恒定域(ch)。每條輕鏈在n-末端具有一個(gè)可變域(vl)，接著是其另一端的一個(gè)恒定域(cl)。vl與vh排列在一起，而cl與重鏈第一恒定域(ch1)排列在一起。認(rèn)為特定的氨基酸殘基在輕鏈和重鏈可變域之間形成界面。一個(gè)vh和一個(gè)vl一起配對(duì)而形成一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。關(guān)于不同類(lèi)別抗體的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，參見(jiàn)例如basicandclinicalimmunology,第8版,danielp.sties,abbai.terr和tristramg.parsolw(編),appleton&lange,norwalk,ct,1994,第71頁(yè)和第6章。根據(jù)其恒定域氨基酸序列，來(lái)自任何脊椎動(dòng)物物種的l鏈可歸入兩種截然不同類(lèi)型中的一種，稱(chēng)作卡帕(κ)和拉姆達(dá)(λ)。根據(jù)其重鏈恒定域(ch)氨基酸序列，免疫球蛋白可歸入不同的類(lèi)別或同種型。有五類(lèi)免疫球蛋白：iga，igd，ige，igg和igm，分別具有稱(chēng)作α，δ，ε，γ和μ的重鏈。根據(jù)ch序列和功能的較小差異，γ和α類(lèi)可進(jìn)一步分為亞類(lèi)，例如人類(lèi)表達(dá)下列亞類(lèi)：igg1，igg2a，igg2b，igg3，igg4，iga1和iga2。

抗體的“可變區(qū)”或“可變域”指抗體重鏈或輕鏈的氨基末端結(jié)構(gòu)域。重鏈可變域和輕鏈可變域分別可以稱(chēng)為“vh”和“vl”。這些結(jié)構(gòu)域一般是抗體的最易變部分(相對(duì)于同一類(lèi)的其它抗體而言)且包含抗原結(jié)合位點(diǎn)。

術(shù)語(yǔ)“可變的”指可變域中的某些區(qū)段在抗體間序列差異廣泛的實(shí)情。v結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)抗原結(jié)合且限定特定抗體對(duì)其特定抗原的特異性。然而，變異性并非均勻分布于可變域的整個(gè)跨度。而是，它集中于輕鏈和重鏈可變域二者中稱(chēng)作高變區(qū)(hvr)的三個(gè)區(qū)段?？勺冇蛑懈痈叨缺Ｊ氐牟糠址Q(chēng)作框架區(qū)(fr)。天然重鏈和輕鏈的可變域各自包含四個(gè)fr區(qū)，它們大多采取β-折疊片構(gòu)象，通過(guò)形成環(huán)狀連接且在有些情況中形成β-折疊片結(jié)構(gòu)一部分的三個(gè)hvr連接。每條鏈中的hvr通過(guò)fr區(qū)非常接近的保持在一起，并與另一條鏈的hvr一起促成抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)的形成(參見(jiàn)kabat等,sequencesofimmunologicalinterest,第5版,nationalinstituteofhealth,bethesda,md.(1991))。恒定域不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但展現(xiàn)出多種效應(yīng)器功能，諸如抗體在抗體依賴(lài)性細(xì)胞的細(xì)胞毒性中的參與。

術(shù)語(yǔ)“單克隆抗體”在用于本文時(shí)指從一群基本上同質(zhì)的抗體獲得的抗體，即構(gòu)成群體的各個(gè)抗體相同，除了可能以極小量存在的可能的天然存在突變和/或翻譯后修飾(例如異構(gòu)化，酰胺化)外。單克隆抗體是高度特異性的，針對(duì)單一抗原性位點(diǎn)。與典型的包含針對(duì)不同決定簇(表位)的不同抗體的多克隆抗體制備物不同，每種單克隆抗體針對(duì)抗原上的單一決定簇。在它們的特異性以外，單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)在于它們是由雜交瘤培養(yǎng)物合成的，未受到其它免疫球蛋白的污染。修飾語(yǔ)“單克隆”指示抗體從基本上同質(zhì)的抗體群獲得的特征，不應(yīng)解釋為要求通過(guò)任何特定方法來(lái)生成抗體。例如，有待依照本發(fā)明使用的單克隆抗體可通過(guò)多種技術(shù)來(lái)生成，包括例如雜交瘤法(例如kohler和milstein.,nature,256:495-97(1975)；hongo等,hybridoma,14(3):253-260(1995),harlow等,antibodies:alaboratorymanual,(coldspringharborlaboratorypress,2nded.1988)；hammerling等,in:monoclonalantibodiesandt-cellhybridomas563-681(elsevier,n.y.,1981))，重組dna法(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利no.4,816,567)，噬菌體展示技術(shù)(參見(jiàn)例如clackson等,nature352:624-628(1991)；marks等,j.mol.biol.222:581-597(1992)；sidhu等,j.mol.biol.338(2):299-310(2004)；lee等,j.mol.biol.340(5):1073-1093(2004)；fellouse,proc.nat.acad.sci.usa101(34):12467-12472(2004)；lee等,j.immunol.methods284(1-2):119-132(2004))，及用于在具有部分或整個(gè)人免疫球蛋白基因座或編碼人免疫球蛋白序列的基因的動(dòng)物中生成人或人樣抗體的技術(shù)(參見(jiàn)例如wo1998/24893；wo1996/34096；wo1996/33735；wo1991/10741；jakobovits等,proc.natl.acad.sci.usa90:2551(1993)；jakobovits等,nature362:255-258(1993)；bruggemann等,yearinimmunol.7:33(1993)；美國(guó)專(zhuān)利no.5,545,807；5,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；5,661,016；marks等,bio/technology10:779-783(1992)；lonberg等,nature368:856-859(1994)；morrison,nature368:812-813(1994)；fishwild等,naturebiotechnol.14:845-851(1996)；neuberger,naturebiotechnol.14:826(1996)；lonberg和huszar,intern.rev.immunol.13:65-93(1995))。

術(shù)語(yǔ)“裸抗體(裸露的抗體)”指未綴合細(xì)胞毒性模塊或放射性標(biāo)記物的抗體。

術(shù)語(yǔ)“全長(zhǎng)抗體”，“完整抗體”和“全抗體”可互換使用，指基本上完整形式的抗體，與抗體片段不同。具體而言，完整抗體包括那些具有重鏈和輕鏈(包括fc區(qū))的。恒定域可以是天然序列恒定域(例如人天然序列恒定域)或其氨基酸序列變體。在有些情況中，完整抗體可具有一項(xiàng)或多項(xiàng)效應(yīng)器功能。

“抗體片段”包含完整抗體的一部分，優(yōu)選完整抗體的抗原結(jié)合和/或可變區(qū)?？贵w片段的例子包括fab，fab’，f(ab’)2和fv片段；雙抗體；線(xiàn)性抗體(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利5,641,870,實(shí)施例2；zapata等,proteineng.8(10):1057-1062(1995))；單鏈抗體分子；及由抗體片段形成的多特異性抗體。用木瓜蛋白酶消化抗體產(chǎn)生兩個(gè)相同的抗原結(jié)合片段，稱(chēng)作“fab”片段，和一個(gè)殘余“fc”片段，其名稱(chēng)反映了它易于結(jié)晶的能力。fab片段由完整l鏈及h鏈可變區(qū)域(vh)和重鏈第一恒定域(ch1)組成。每個(gè)fab片段對(duì)于抗原結(jié)合是單價(jià)的，即它具有一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。胃蛋白酶處理抗體產(chǎn)生一個(gè)較大f(ab’)2片段，它大體相當(dāng)于兩個(gè)通過(guò)二硫鍵相連的fab片段，具有不同抗原結(jié)合活性且仍能夠交聯(lián)抗原。fab’片段因在ch1結(jié)構(gòu)域的羧基末端增加了少數(shù)殘基而與fab片段有所不同，包括來(lái)自抗體鉸鏈區(qū)的一個(gè)或多個(gè)半胱氨酸。fab’-sh是本文中對(duì)其中恒定域半胱氨酸殘基攜帶游離硫醇基的fab’的稱(chēng)謂。f(ab’)2抗體片段最初是作為成對(duì)fab’片段生成的，在fab’片段之間具有鉸鏈半胱氨酸。還知道抗體片段的其它化學(xué)偶聯(lián)。

fc片段包含通過(guò)二硫鍵保持在一起的兩條h鏈的羧基末端部分?？贵w的效應(yīng)器功能由fc區(qū)中的序列來(lái)決定，該區(qū)域也受到在某些類(lèi)型的細(xì)胞上找到的fc受體(fcr)識(shí)別。

“fv”是包含完整抗原識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)的最小抗體片段。此片段由緊密，非共價(jià)結(jié)合的一個(gè)重鏈可變區(qū)和一個(gè)輕鏈可變區(qū)的二聚體組成。從這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域的折疊中生發(fā)出六個(gè)高變環(huán)(重鏈和輕鏈各3個(gè)環(huán))，貢獻(xiàn)出抗原結(jié)合的氨基酸殘基并賦予抗體以抗原結(jié)合特異性。然而，即使是單個(gè)可變域(或只包含對(duì)抗原特異的三個(gè)hvr的半個(gè)fv)也具有識(shí)別和結(jié)合抗原的能力，盡管親和力低于完整結(jié)合位點(diǎn)。

“單鏈fv”，也縮寫(xiě)成“sfv”或“scfv”，是包含連接成一條多肽鏈的vh和vl抗體結(jié)構(gòu)域的抗體片段。優(yōu)選的是，sfv多肽在vh與vl結(jié)構(gòu)域之間進(jìn)一步包含多肽接頭，其使得sfv能夠形成結(jié)合抗原的期望結(jié)構(gòu)。關(guān)于sfv的綜述參見(jiàn)pluckthun，于《thepharmacologyofmonoclonalantibodies》，第113卷，rosenburg和moore編，springer-verlag，newyork，第269-315頁(yè)，1994。

本發(fā)明抗體的“功能性片段”包含完整抗體的一部分，一般包括完整抗體的抗原結(jié)合或可變區(qū)或抗體的保留或具有改良fcr結(jié)合能力的fc區(qū)?？贵w片段的例子包括線(xiàn)性抗體，單鏈抗體分子和自抗體片段形成的多特異性抗體。

術(shù)語(yǔ)“雙抗體”指通過(guò)在vh和vl結(jié)構(gòu)域之間使用短接頭(約5-10個(gè)殘基)構(gòu)建sfv片段(見(jiàn)上一段)而制備的小型抗體片段，由于接頭短，使得v結(jié)構(gòu)域?qū)嵭墟滈g而非鏈內(nèi)配對(duì)，由此導(dǎo)致二價(jià)片段，即具有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)的片段。雙特異性雙抗體是兩個(gè)“交叉”sfv片段的異二聚體，其中兩種抗體的vh和vl結(jié)構(gòu)域存在于不同多肽鏈上。雙抗體更詳細(xì)的描述于例如ep404,097；wo93/11161；hollinger等,proc.natl.acad.sci.usa,90:6444-6448(1993)。

單克隆抗體在本文中明確包括“嵌合”抗體(免疫球蛋白)，其中重鏈和/或輕鏈的一部分與衍生自特定物種或?qū)儆谔囟贵w類(lèi)別或亞類(lèi)的抗體中的相應(yīng)序列相同或同源，而鏈的剩余部分與衍生自另一物種或?qū)儆诹硪豢贵w類(lèi)別或亞類(lèi)的抗體中的相應(yīng)序列相同或同源，以及此類(lèi)抗體的片段，只要它們展現(xiàn)出期望的生物學(xué)活性(美國(guó)專(zhuān)利no.4,816,567；morrison等,proc.natl.acad.sci.usa81:6851-6855(1984))。本文中感興趣的嵌合抗體包括“靈長(zhǎng)類(lèi)化”抗體，其中抗體的抗原結(jié)合區(qū)衍生自通過(guò)用例如感興趣抗原免疫短尾猴(macaquemonkey)而生成的抗體。如本文中所使用的，“人源化抗體”是“嵌合抗體”的一個(gè)子集。

非人(例如鼠)抗體的“人源化”形式指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，人源化抗體指人免疫球蛋白(受體抗體)中的hvr殘基(下文限定)用具有期望特異性，親和力和/或能力的非人物種(供體抗體)(諸如小鼠，大鼠，家兔或非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物)的hvr殘基替換的免疫球蛋白。在有些情況中，將人免疫球蛋白的框架(“fr”)殘基用相應(yīng)的非人殘基替換。此外，人源化抗體可包含在受體抗體中或在供體抗體中沒(méi)有找到的殘基。進(jìn)行這些修飾可以是為了進(jìn)一步改進(jìn)抗體的性能，諸如結(jié)合親和力。一般而言，人源化抗體將包含至少一個(gè)，通常兩個(gè)基本上整個(gè)如下的可變域，其中所有或基本上所有高變環(huán)對(duì)應(yīng)于非人免疫球蛋白序列的高變環(huán)，且所有或基本上所有fr區(qū)是人免疫球蛋白序列的fr區(qū)，盡管fr區(qū)可包含一處或多處改進(jìn)抗體性能(諸如結(jié)合親和力，異構(gòu)化，免疫原性等)的個(gè)別fr殘基替代。fr中這些氨基酸替代的數(shù)目，h鏈中通常不超過(guò)6處，l鏈通常不超過(guò)3處。人源化抗體任選還將包含至少部分免疫球蛋白恒定區(qū)(fc)，通常是人免疫球蛋白的恒定區(qū)。更多細(xì)節(jié)參見(jiàn)例如jones等,nature321:522-525(1986)；riechmann等,nature332:323-329(1988)；及presta,curr.op.struct.biol.2:593-596(1992)。還可參見(jiàn)例如vaswani和hamilton,ann.allergy,asthma&immunol.1:105-115(1998)；harris,biochem.soc.transactions23:1035-1038(1995)；hurle和gross,curr.op.biotech.5:428-433(1994)；及美國(guó)專(zhuān)利no.6,982,321和7,087,409。

“人抗體”指擁有與由人生成的抗體的氨基酸序列對(duì)應(yīng)的氨基酸序列和/或使用本文所公開(kāi)的用于生成人抗體的任何技術(shù)生成的抗體。人抗體的這種定義明確排除包含非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體。人抗體可使用本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)來(lái)生成，包括噬菌體展示文庫(kù)(hoogenboom和winter,j.mol.biol.227:381(1991)；marks等,j.mol.biol.222:581(1991))。還可用于制備人單克隆抗體的是以下文獻(xiàn)中記載的方法：cole等,monoclonalantibodiesandcancertherapy,alanr.liss,p.77(1985)；boerner等,j.immunol.147(1):86-95(1991)。還可參見(jiàn)vandijk和vandewinkel,curr.opin.pharmacol.,5:368-74(2001)?？赏ㄟ^(guò)給已經(jīng)修飾以應(yīng)答抗原性刺激而生成人抗體但其內(nèi)源基因座已經(jīng)失去能力的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物例如經(jīng)過(guò)免疫的異種小鼠(xenomice)施用抗原來(lái)制備人抗體(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利no.6,075,181和6,150,584，關(guān)于xenomouse^tm技術(shù))。還可參見(jiàn)例如li等,proc.natl.ascad.sci.usa,103:3557-3562(2006)，關(guān)于經(jīng)人b-細(xì)胞雜交瘤技術(shù)生成的人抗體。

術(shù)語(yǔ)“高變區(qū)”，“hvr”或“hv”在用于本文時(shí)指抗體可變域中序列上高度可變和/或形成結(jié)構(gòu)上定義的環(huán)的區(qū)域。通常，抗體包含六個(gè)hvr：三個(gè)在vh中(h1，h2，h3)，三個(gè)在vl中(l1，l2，l3)。在天然抗體中，h3和l3展示這六個(gè)hvr的最大多樣性，而且認(rèn)為特別是h3在賦予抗體以精密特異性中發(fā)揮獨(dú)特作用。參見(jiàn)例如xu等，immunity13:37-45(2000)；johnson和wu,于:methodsinmolecularbiology248:1-25(lo編,humanpress,totowa,nj,2003)。事實(shí)上，僅由重鏈組成的天然存在camelid抗體在缺乏輕鏈時(shí)是有功能的且穩(wěn)定的。參見(jiàn)例如hamers-casterman等,nature363:446-448(1993)；sheriff等,naturestruct.biol.3:733-736(1996)。

本文中使用且涵蓋許多hvr的敘述。kabat互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)是以序列變異性為基礎(chǔ)的，而且是最常用的(kabat等,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,5thed.publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md.(1991))。chothia改為指結(jié)構(gòu)環(huán)的位置(chothia和leskj.mol.biol.196:901-917(1987))。abmhvr代表kabathvr與chothia結(jié)構(gòu)環(huán)之間的折衷，而且得到oxfordmolecular的abm抗體建模軟件的使用?！敖佑|”hvr是以對(duì)可獲得的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)的分析為基礎(chǔ)的。下文記錄了這些hvr中每一個(gè)的殘基。

hvr可包括如下“延伸的hvr”：vl中的24-36或24-34(l1)，46-56或50-56(l2)和89-97或89-96(l3)及vh中的26-35(h1)，50-65或49-65(h2)和93-102，94-102，或95-102(h3)。對(duì)于這些定義中的每一個(gè)，可變域殘基是依照kabat等,見(jiàn)上文編號(hào)的。

表述“依照kabat的可變域殘基編號(hào)方式”或“依照kabat的氨基酸位置編號(hào)方式”及其變體指kabat等,見(jiàn)上文中用于抗體重鏈可變域或輕鏈可變域編輯的編號(hào)系統(tǒng)。使用此編號(hào)系統(tǒng)，實(shí)際的線(xiàn)性氨基酸序列可包含較少或另外的氨基酸，對(duì)應(yīng)于可變域fr或hvr的縮短或插入。例如，重鏈可變域可包含h2殘基52后的單一氨基酸插入(依照kabat為殘基52a)及重鏈fr殘基82后的插入殘基(例如依照kabat為殘基82a，82b和82c等)。給定抗體的kabat殘基編號(hào)方式可通過(guò)將抗體序列與“標(biāo)準(zhǔn)”kabat編號(hào)序列對(duì)比同源區(qū)來(lái)確定。

“框架”或“fr”殘基指可變域中除本文中所定義的hvr殘基外的那些殘基。

“人共有框架”或“受體人框架”指代表人免疫球蛋白vl或vh框架序列選集中最常見(jiàn)的氨基酸殘基的框架。通常，人免疫球蛋白vl或vh序列選集來(lái)自可變域序列亞組。通常，序列亞組是如kabat等,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版,publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md(1991)中的亞組。例子包括對(duì)于vl，亞組可以是亞組κi，κii，κiii或κiv，如在kabat等,見(jiàn)上文中的。另外，對(duì)于vh，亞組可以是亞組i，亞組ii，或亞組iii，如在kabat等,見(jiàn)上文中的。或者，人共有框架可以自上述框架衍生，其中特定殘基，諸如人框架殘基通過(guò)比對(duì)供體框架序列與各種人框架序列的集合基于其與供體框架的同源性選擇。自人免疫球蛋白框架“衍生”的受體人框架或人共有框架可以包含其相同的氨基酸序列，或者它可以含有先前存在的氨基酸序列變化。在一些實(shí)施方案中，先前存在的氨基酸變化的數(shù)目是10或更少，9或更少，8或更少，7或更少，6或更少，5或更少，4或更少，3或更少，或2或更少。

“vh亞組iii共有框架”包含從kabat等，見(jiàn)上文的可變重鏈亞組iii中的氨基酸序列獲得的共有序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，vh亞組iii共有框架氨基酸序列包含下列各序列中每一項(xiàng)的至少一部分或整個(gè)全部：evqlvesggglvqpggslrlscaas(hc-fr1)(seqidno:19)，wvrqapgkglewv(hc-fr2)(seqidno:20)，rftisadtskntaylqmnslraedtavyycar(hc-fr3)(seqidno:21)，wgqgtlvtvsa(hc-fr4)(seqidno:22)。

“vlκi共有框架”包含從kabat等，見(jiàn)上文的可變輕鏈κ亞組i中的氨基酸序列獲得的共有序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，vl亞組i共有框架氨基酸序列包含下列各序列中每一項(xiàng)的至少一部分或整個(gè)：diqmtqspsslsasvgdrvtitc(lc-fr1)(seqidno:23)，wyqqkpgkapklliy(lc-fr2)(seqidno:24)，gvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyyc(lc-fr3)(seqidno:25)，fgqgtkveikr(lc-fr4)(seqidno:26)。

指定位置(例如fc區(qū)的)處的“氨基酸修飾”指指定殘基的替代或刪除，或指定殘基附近至少一個(gè)氨基酸殘基的插入。指定殘基“附近”的插入意味著其一個(gè)至兩個(gè)殘基內(nèi)的插入。插入可以在指定殘基的n端或c端。本文中優(yōu)選的氨基酸修飾是替代。

“親和力成熟的”抗體指在抗體的一個(gè)或多個(gè)hvr中具有一處或多處改變，導(dǎo)致該抗體對(duì)抗原的親和力與沒(méi)有這些改變的親本抗體相比有所改進(jìn)的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案，親和力成熟的抗體具有納摩爾或甚至皮摩爾量級(jí)的對(duì)靶抗原的親和力。親和力成熟的抗體可通過(guò)本領(lǐng)域已知規(guī)程來(lái)生成。例如，marks等,bio/technology10:779-783(1992)記載了通過(guò)vh和vl結(jié)構(gòu)域改組進(jìn)行的親和力成熟。以下文獻(xiàn)記載了hvr和/或框架殘基的隨機(jī)誘變：例如，barbas等,proc.nat.acad.sci.usa91:3809-3813(1994)；schier等,gene169:147-155(1995)；yelton等,j.immunol.155:1994-2004(1995)；jackson等,j.immunol.154(7):3310-9(1995)；hawkins等,j.mol.biol.226:889-896(1992)。

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“特異性結(jié)合”或“對(duì)…特異性的”指可測(cè)量且可再現(xiàn)的相互作用，諸如靶物和抗體之間的結(jié)合，其確定在存在分子(包括生物學(xué)分子)的異質(zhì)群體的情況中靶物的存在。例如，特異性結(jié)合靶物(其可以是表位)的抗體是以比其結(jié)合其它靶物更大的親和力，親合力，更容易，和/或以更大的持續(xù)時(shí)間結(jié)合此靶物的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體結(jié)合無(wú)關(guān)靶物的程度小于抗體結(jié)合靶物的約10％，如例如通過(guò)放射性免疫測(cè)定法(ria)測(cè)量的。在某些實(shí)施方案中，特異性結(jié)合靶物的抗體具有≤1μm，≤100nm，≤10nm，≤1nm，或≤0.1nm的解離常數(shù)(kd)。在某些實(shí)施方案中，抗體特異性結(jié)合蛋白質(zhì)上在來(lái)自不同物種的蛋白質(zhì)間保守的表位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，特異性結(jié)合可以包括但不需要排他結(jié)合。

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“免疫粘附素”指組合異源蛋白質(zhì)(“粘附素”)的結(jié)合特異性與免疫球蛋白恒定域的效應(yīng)器功能的抗體樣分子。在結(jié)構(gòu)上，免疫粘附素包含具有與抗體的抗原識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)不同的期望結(jié)合特異性的氨基酸序列(即，是“異源的”)和免疫球蛋白恒定域序列的融合物。免疫粘附素分子的粘附素部分通常是至少包含受體或配體的結(jié)合位點(diǎn)的連續(xù)氨基酸序列。免疫粘附素中的免疫球蛋白恒定域序列可以獲自任何免疫球蛋白，諸如igg-1，igg-2(包括igg2a和igg2b)，igg-3，或igg-4亞型，iga(包括iga-1和iga-2)，ige，igd或igm。優(yōu)選地，ig融合物包含用本文中描述的多肽或抗體的域替換ig分子內(nèi)的至少一個(gè)可變區(qū)的取代。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，免疫球蛋白融合物包括igg1分子的鉸鏈，ch2和ch3，或鉸鏈，ch1，ch2和ch3區(qū)。為了生成免疫球蛋白融合物，還可見(jiàn)1995年6月27日公告的美國(guó)專(zhuān)利no.5,428,130。igfc和細(xì)胞表面受體ecd的免疫粘附素組合有時(shí)稱(chēng)作可溶性受體。

“融合蛋白”和“融合多肽”指具有兩個(gè)共價(jià)連接在一起的部分的多肽，其中每個(gè)部分是具有不同特性的多肽。特性可以是生物學(xué)特性，諸如體外或體內(nèi)活性。特性也可以是簡(jiǎn)單的化學(xué)或物理特性，諸如對(duì)靶分子的結(jié)合，反應(yīng)的催化，等等。兩個(gè)部分可以通過(guò)單一肽鍵直接連接，或者經(jīng)由肽接頭連接，但是為彼此以符合讀碼框的方式。

“阻斷性”抗體或“拮抗劑”抗體是抑制或降低其結(jié)合的抗原的生物學(xué)活性的抗體。在一些實(shí)施方案中，阻斷性抗體或拮抗劑抗體實(shí)質(zhì)性或完全抑制抗原的表達(dá)或生物學(xué)活性。例如，本公開(kāi)文本的抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段可抑制tigit表達(dá)，阻斷tigit與pvr的相互作用，阻斷tigit與pvrl2的相互作用，阻斷tigit與pvrl3的相互作用，抑制和/或阻斷由tigit結(jié)合pvr介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，抑制和/或阻斷由tigit結(jié)合pvrl2介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，和/或抑制和/或阻斷由tigit結(jié)合pvrl3介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)。

“激動(dòng)劑”或活化性抗體是通過(guò)與其結(jié)合的抗原增強(qiáng)或啟動(dòng)信號(hào)傳導(dǎo)的抗體。在一些實(shí)施方案中，激動(dòng)劑抗體在不存在天然配體的情況中引起或激活信號(hào)傳導(dǎo)。

術(shù)語(yǔ)“fc區(qū)”在本文中用于定義免疫球蛋白重鏈的c端區(qū)，包括天然序列fc區(qū)和變異fc區(qū)。雖然免疫球蛋白重鏈fc區(qū)的邊界可以變化，但是人igg重鏈fc區(qū)通常定義為自其cys226或pro230位置的氨基酸殘基至羧基末端的區(qū)段。fc區(qū)的c-末端賴(lài)氨酸(殘基447，依照eu編號(hào)系統(tǒng))可以消除，例如在生產(chǎn)或純化抗體的過(guò)程中，或者通過(guò)對(duì)編碼抗體重鏈的核酸進(jìn)行重組工程改造。因而，完整抗體的組合物可包括所有k447殘基都被消除的抗體群，無(wú)一k447殘基被消除的抗體群，或者混合了有和無(wú)k447殘基的抗體的抗體群。對(duì)于在本發(fā)明的抗體中使用而言合適的天然序列fc區(qū)包括人igg1，igg2(igg2a，igg2b)，igg3和igg4。

“fc受體”或“fcr”描述結(jié)合抗體fc區(qū)的受體。優(yōu)選的fcr是天然序列人fcr。此外，優(yōu)選的fcr是結(jié)合igg抗體的fcr(γ受體)，包括fcγri，fcγrii和fcγriii亞類(lèi)的受體，包括這些受體的等位變體和可變剪接形式。fcγrii受體包括fcγriia(“活化受體”)和fcγriib(“抑制受體”)，它們具有相似的氨基酸序列，區(qū)別主要在其胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域中?；罨荏wfcγriia在其胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域中包含免疫受體基于酪氨酸的活化基序(itam)。抑制受體fcγriib在其胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域中包含免疫受體基于酪氨酸的抑制基序(itim)(參見(jiàn)m.annu.rev.immunol.15:203-234(1997))。fcr的綜述參見(jiàn)ravetch和kinet,annu.rev.immunol.9:457-492(1991)；capel等,immunomethods4:25-34(1994)；dehaas等,j.lab.clin.med.126:330-41(1995)。術(shù)語(yǔ)“fcr”在本文中涵蓋其它fcr，包括那些未來(lái)將會(huì)鑒定的。

術(shù)語(yǔ)“fc受體”或“fcr”還包括新生兒受體，fcrn，它負(fù)責(zé)將母體igg轉(zhuǎn)移給胎兒(guyer等,j.immunol.117:587(1976)和kim等,j.immunol.24:249(1994))。測(cè)量對(duì)fcrn的結(jié)合的方法是已知的(參見(jiàn)例如ghetie和ward,immunoltoday18(12):592-8(1997)；ghetie等,naturebiotechnology,15(7):637-40(1997)；hinton等,j.biol.chem279(8):6213-6(2004)；wo2004/92219(hinton等))?？蓽y(cè)定人fcrn高親和力結(jié)合多肽與fcrn的體內(nèi)結(jié)合和血清半衰期，例如在表達(dá)人fcrn的轉(zhuǎn)基因小鼠或經(jīng)轉(zhuǎn)染的人細(xì)胞系中，或者在施用了具有變異fc區(qū)的多肽的靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物中。wo2004/42072(presta)記載了對(duì)fcr的結(jié)合得到改良或消除的抗體變體。還可參見(jiàn)例如shields等,j.biol.chem.9(2):6591-6604(2001)。

短語(yǔ)“實(shí)質(zhì)性降低”或“實(shí)質(zhì)性不同”在用于本文時(shí)表示兩個(gè)數(shù)值(通常一個(gè)與某分子有關(guān)而另一個(gè)與參照/比較分子有關(guān))之間足夠高的差異程度，以致本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)為在用所述數(shù)值(例如kd值)所測(cè)量的生物學(xué)特性背景內(nèi)兩個(gè)數(shù)值之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。作為參照/比較分子該數(shù)值的函數(shù)，所述兩個(gè)數(shù)值之間的差異例如大于約10％，大于約20％，大于約30％，大于約40％，和/或大于約50％。

短語(yǔ)“基本上相似”或“基本上相同”在用于本文時(shí)表示兩個(gè)數(shù)值(例如，一個(gè)涉及本發(fā)明的抗體而另一個(gè)涉及參照/比較抗體)之間足夠高的相似程度，以致本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)為在用所述數(shù)值(例如kd值)所測(cè)量的生物學(xué)特性背景內(nèi)兩個(gè)數(shù)值之間的差異具有很小的或沒(méi)有生物學(xué)和/或統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。作為參照/比較值的函數(shù)，所述兩個(gè)數(shù)值之間的差異例如小于約50％，小于約40％，小于約30％，小于約20％，和/或小于約10％。

“載體”在用于本文時(shí)包括藥劑學(xué)可接受的載體，賦形劑或穩(wěn)定劑，它們?cè)谒捎玫膭┝亢蜐舛葘?duì)暴露于其的細(xì)胞或哺乳動(dòng)物是無(wú)毒的。通常，生理學(xué)可接受的載體是ph緩沖水溶液。生理學(xué)可接受載體的例子包括緩沖劑，諸如磷酸鹽，檸檬酸鹽和其它有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸；低分子量(少于約10個(gè)殘基)多肽；蛋白質(zhì)，諸如血清清蛋白，明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，諸如甘氨酸，谷氨酰胺，天冬酰胺，精氨酸或賴(lài)氨酸；單糖，二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖，甘露糖或糊精；螯合劑，諸如edta；糖醇，諸如甘露醇或山梨醇；成鹽反荷離子，諸如鈉；和/或非離子表面活性劑，諸如tween^tm，聚乙二醇(peg)和pluronics^tm。

“包裝插頁(yè)”指通常包括在藥物的商業(yè)包裝中的說(shuō)明書(shū)，它們包含有關(guān)涉及此類(lèi)藥物應(yīng)用的適應(yīng)征，用法，劑量，施用，禁忌癥，與該包裝產(chǎn)品聯(lián)合的其它藥物和/或警告等的信息。

如本文中使用的，“治療”或“處理”指設(shè)計(jì)用于改變臨床病理學(xué)(例如癌癥或腫瘤免疫)過(guò)程期間所治療個(gè)體或細(xì)胞的自然進(jìn)程的臨床干預(yù)。治療的期望效果包括降低疾病進(jìn)展速率，改善或減輕疾病狀態(tài)，和消退或改善的預(yù)后。例如，若一種或多種與癌癥有關(guān)的癥狀是減輕或消除的，包括但不限于對(duì)癌性細(xì)胞的降低增殖(或破壞)，減少源自疾病的癥狀，提高那些患有疾病的個(gè)體的生命質(zhì)量，降低治療疾病需要的其它藥物的劑量，延遲疾病的進(jìn)展，和/或延長(zhǎng)個(gè)體存活，則個(gè)體得到成功“治療”。

如本文中使用的，“延遲疾病的進(jìn)展”意指推遲，阻礙，減緩，延遲，穩(wěn)定，和/或延緩疾病(諸如癌癥或腫瘤免疫)的形成。根據(jù)疾病史和/或治療的個(gè)體，此延遲可以是不同時(shí)間長(zhǎng)度的。如對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的是，充分或顯著的延遲實(shí)質(zhì)上可以涵蓋預(yù)防，因?yàn)閭€(gè)體不形成疾病。例如，可以延遲晚期階段癌癥，諸如轉(zhuǎn)移的形成。

如本文中使用的，“降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)”意指降低或抑制腫瘤或癌癥復(fù)發(fā)或腫瘤或癌癥進(jìn)展。如本文中公開(kāi)的，癌癥復(fù)發(fā)和/或癌癥進(jìn)展包括但不限于癌癥轉(zhuǎn)移。

如本文中使用的，“癌癥”和“癌性”指或描述哺乳動(dòng)物中特征通常為細(xì)胞生長(zhǎng)不受調(diào)控的生理疾患。此定義中包括良性和惡性癌癥以及休眠腫瘤或微轉(zhuǎn)移。癌癥的例子包括但不限于癌，淋巴瘤，母細(xì)胞瘤，肉瘤，和白血病。此類(lèi)癌癥的更具體例子包括鱗狀細(xì)胞癌，肺癌(包括小細(xì)胞肺癌，非小細(xì)胞肺癌，肺的腺癌，和肺的鱗癌)，腹膜癌，肝細(xì)胞癌，胃的癌或胃癌(包括胃腸癌)，胰腺癌，成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，宮頸癌，卵巢癌，肝癌，膀胱癌，肝瘤(hepatoma)，乳腺癌，結(jié)腸癌，結(jié)腸直腸癌，子宮內(nèi)膜癌或子宮癌，唾液腺癌，腎癌或腎的癌，肝癌，前列腺癌，外陰癌，甲狀腺癌，肝的癌，及各種類(lèi)型的頭和頸癌，以及b細(xì)胞淋巴瘤(包括低級(jí)/濾泡性非何杰金氏淋巴瘤(nhl)，小淋巴細(xì)胞性(sl)nhl，中級(jí)/濾泡性nhl，中級(jí)彌漫性nhl，高級(jí)成免疫細(xì)胞性nhl，高級(jí)成淋巴細(xì)胞性nhl，高級(jí)小無(wú)核裂細(xì)胞性nhl，貯積病(bulkydisease)nhl，套細(xì)胞淋巴瘤，aids相關(guān)淋巴瘤，和瓦爾登斯特倫氏(waldenstrom)巨球蛋白血癥)，慢性淋巴細(xì)胞性白血病(cll)，急性成淋巴細(xì)胞性白血病(all)，毛細(xì)胞性白血病，慢性成髓細(xì)胞性白血病，和移植后淋巴增殖性病癥(ptld)，以及與瘢痣病(phakomatoses)，水腫(諸如與腦瘤有關(guān)的)和梅格斯氏(meigs)綜合征有關(guān)的異常血管增殖。

如本文中使用的，“轉(zhuǎn)移”指癌自其原發(fā)部位傳播至身體中的其它位置。癌細(xì)胞能脫離原發(fā)性腫瘤，滲透入淋巴和血管，經(jīng)由血流而循環(huán)，和在身體中其它地方的正常組織中的遠(yuǎn)端病灶(轉(zhuǎn)移)中生長(zhǎng)。轉(zhuǎn)移可以是當(dāng)?shù)氐幕蜻h(yuǎn)端的。轉(zhuǎn)移是一個(gè)連續(xù)過(guò)程，視腫瘤細(xì)胞自原發(fā)性腫瘤脫落，經(jīng)由血流而傳播，并在遠(yuǎn)端部位停止而定。在新的部位，該細(xì)胞建立血供且能生長(zhǎng)至形成危及生命的團(tuán)塊。腫瘤細(xì)胞內(nèi)的刺激性和抑制性分子途徑均調(diào)節(jié)這種行為，而且腫瘤細(xì)胞與遠(yuǎn)端部位中的宿主細(xì)胞之間的相互作用也是重要的。

“有效量”至少是實(shí)現(xiàn)特定病癥的可測(cè)量改善或預(yù)防需要的最小濃度。本文中的有效量可以隨諸如患者的疾病狀態(tài)，年齡，性別，和重量，和抗體引發(fā)個(gè)體中期望的應(yīng)答的能力等因素而變化。有效量也是治療有益效果超過(guò)治療的任何毒性或不利效果的量。為了預(yù)防性使用，有益或期望的結(jié)果包括如下的結(jié)果，諸如消除或降低風(fēng)險(xiǎn)，減輕嚴(yán)重性，或者延遲疾病的發(fā)作，包括疾病的生物化學(xué)，組織學(xué)和/或行為癥狀，其并發(fā)癥和疾病形成期間呈現(xiàn)的中間病理學(xué)表型。為了治療性使用，有益或期望的結(jié)果包括臨床結(jié)果，諸如減少源自疾病的一種或多種癥狀，提高那些患有疾病的對(duì)象的生命質(zhì)量，降低治療疾病需要的其它藥物的劑量，增強(qiáng)另一種藥物的效果(諸如經(jīng)由靶向)，延遲疾病的進(jìn)展，和/或延長(zhǎng)存活。在癌癥或腫瘤的情況中，藥物的有效量在減少癌細(xì)胞的數(shù)目；降低腫瘤大??；抑制(即在一定程度上減緩或者期望地停止)癌細(xì)胞浸潤(rùn)入外周器官中；抑制(即在一定程度上減緩且期望地停止)腫瘤轉(zhuǎn)移；在一定程度上抑制腫瘤生長(zhǎng)；和/或在一定程度上減輕一種或多種與病癥有關(guān)的癥狀中可以具有效果?？梢栽谝淮位蚨啻问┯弥惺┯糜行Я?。出于本發(fā)明的目的，藥物，化合物，或藥物組合物的有效量是足以直接或間接實(shí)現(xiàn)預(yù)防或治療性處理的量。如在臨床背景中理解的，藥物，化合物，或藥物組合物的有效量可以與或不與另一種藥物，化合物，或藥物組合物一起實(shí)現(xiàn)。如此，可以在施用一種或多種治療劑的背景中考慮“有效量”，并且若與一種或多種其它藥劑一起，可以實(shí)現(xiàn)或者實(shí)現(xiàn)期望的結(jié)果，則可以認(rèn)為單一藥劑以有效量給予。

如本文中使用的，“與……聯(lián)合”指在一種治療形態(tài)外施用另一種治療形態(tài)。因而，“與……聯(lián)合”指在對(duì)個(gè)體施用一種治療形態(tài)之前，期間，或者之后施用另一種治療形態(tài)。術(shù)語(yǔ)“與……組合”在本文中可互換使用。

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“個(gè)體”和“受試者”可互換使用且指哺乳動(dòng)物，包括但不限于人或非人哺乳動(dòng)物，諸如牛，馬，犬，綿羊，或貓。優(yōu)選地，個(gè)體或受試者指人。在本文中，患者也是個(gè)體或受試者。

如本文中使用的，“完全響應(yīng)”或“cr”指所有靶損傷的消失；“部分響應(yīng)”或“pr”指將基線(xiàn)sld視為參照，靶損傷的最長(zhǎng)直徑和(sld)的至少30％降低；且“穩(wěn)定疾病”或“sd”指將治療開(kāi)始起的最小sld視為參照，既沒(méi)有足夠的靶損傷收縮以符合pr，也沒(méi)有足夠的增加以符合pd。

如本文中使用的，“進(jìn)行性疾病”或“pd”指將從治療開(kāi)始起記錄的最小sld視為參照，靶損傷的sld的至少20％增加或一種或多種新?lián)p傷的存在。

如本文中使用的，“無(wú)進(jìn)展存活”(pfs)指治療期間和治療后，所治療疾病(例如癌癥)不變壞的時(shí)間長(zhǎng)度。無(wú)進(jìn)展存活可以包括患者已經(jīng)經(jīng)歷完全響應(yīng)或部分響應(yīng)的時(shí)間量，及患者已經(jīng)經(jīng)歷穩(wěn)定疾病的時(shí)間量。

如本文中使用的，“總體響應(yīng)率”(orr)指完全響應(yīng)(cr)率和部分響應(yīng)(pr)率的總和。

如本文中使用的，“總體存活”指組中在特定持續(xù)時(shí)間后有可能存活的個(gè)體的百分比。

術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞增殖性病癥”和“增殖性病癥”指與一定程度的異常細(xì)胞增殖有關(guān)的病癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞增殖性病癥指癌癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞增殖性病癥是腫瘤。

“腫瘤”在用于本文時(shí)指所有贅生性(neoplastic)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，無(wú)論是惡性的還是良性的，及所有癌前(pre-cancerous)和癌性細(xì)胞和組織。術(shù)語(yǔ)“癌癥”，“癌性”，“細(xì)胞增殖性病癥”，“增殖性病癥”和“腫瘤”在本文中提到時(shí)并不互相排斥。

“化療劑”指可用于治療癌癥的化學(xué)化合物?；焺┑姆窍拗菩詫?shí)例包括烷化劑類(lèi)(alkylatingagents)，諸如塞替派(thiotepa)和環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)磺酸烷基酯類(lèi)(alkylsulfonates)，諸如白消安(busulfan)，英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶類(lèi)(aziridines)，諸如苯佐替派(benzodopa)，卡波醌(carboquone)，美妥替派(meturedopa)和烏瑞替派(uredopa)；乙撐亞胺類(lèi)(ethylenimines)和甲基蜜胺類(lèi)(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)，三乙撐蜜胺(triethylenemelamine)，三乙撐磷酰胺(trietylenephosphoramide)，三乙撐硫代磷酰胺(triethiylenethiophosphoramide)和三羥甲蜜胺(trimethylolomelamine)；番荔枝內(nèi)酯類(lèi)(acetogenin)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氫大麻酚(tetrahydrocannabinol)(屈大麻酚(dronabinol)，)；β-拉帕醌(lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素類(lèi)(colchicines)；白樺脂酸(betulinicacid)；喜樹(shù)堿(camptothecin)(包括合成類(lèi)似物托泊替康(topotecan)cpt-11(伊立替康(irinotecan)，)，乙酰喜樹(shù)堿，東莨菪亭(scopoletin)和9-氨基喜樹(shù)堿)；苔蘚抑素(bryostatin)；培美曲塞(pemetrexed)；callystatin；cc-1065(包括其阿多來(lái)新(adozelesin)，卡折來(lái)新(carzelesin)和比折來(lái)新(bizelesin)合成類(lèi)似物)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；替尼泊苷(teniposide)；隱藻素類(lèi)(cryptophycins)(特別是隱藻素1和隱藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括合成類(lèi)似物，kw-2189和cb1-tm1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；tlk-286；cdp323，一種口服α-4整聯(lián)蛋白抑制劑；sarcodictyin；海綿抑素(spongistatin)；氮芥類(lèi)(nitrogenmustards)，諸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)，萘氮芥(chlornaphazine)，膽磷酰胺(cholophosphamide)，雌莫司汀(estramustine)，異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)，雙氯乙基甲胺(mechlorethamine)，鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)，美法侖(melphalan)，新氮芥(novembichin)，苯芥膽甾醇(phenesterine)，潑尼莫司汀(prednimustine)，曲磷胺(trofosfamide)，尿嘧啶氮芥(uracilmustard)；亞硝脲類(lèi)(nitrosureas)，諸如卡莫司汀(carmustine)，氯脲菌素(chlorozotocin)，福莫司汀(fotemustine)，洛莫司汀(lomustine)，尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素類(lèi)，諸如烯二炔類(lèi)抗生素(enediyne)(如加利車(chē)霉素(calicheamicin)，尤其是加利車(chē)霉素γ1i和加利車(chē)霉素ωi1(參見(jiàn)例如nicolaou等,angew,chem.intl.ed.engl.33:183-186(1994))；蒽環(huán)類(lèi)抗生素(dynemicin)，包括dynemicina；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔類(lèi)抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素(aclacinomysin)，放線(xiàn)菌素(actinomycin)，氨茴霉素(anthramycin)，偶氮絲氨酸(azaserine)，博來(lái)霉素(bleomycin)，放線(xiàn)菌素c(cactinomycin)，carabicin，洋紅霉素(carminomycin)，嗜癌霉素(carzinophilin)，色霉素(chromomycinis)，放線(xiàn)菌素d(dactinomycin)，柔紅霉素(daunorubicin)，地托比星(detorubicin)，6-二氮-5-氧-l-正亮氨酸，多柔比星(doxorubicin)(包括嗎啉代多柔比星，氰基嗎啉代多柔比星，2-吡咯代多柔比星，多柔比星鹽酸脂質(zhì)體注射液(和脫氧多柔比星)，表柔比星(epirubicin)，依索比星(esorubicin)，伊達(dá)比星(idarubicin)，麻西羅霉素(marcellomycin)，絲裂霉素類(lèi)(mitomycins)諸如絲裂霉素c，霉酚酸(mycophenolicacid)，諾拉霉素(nogalamycin)，橄欖霉素(olivomycin)，培洛霉素(peplomycin)，泊非霉素(potfiromycin)，嘌呤霉素(puromycin)，三鐵阿霉素(quelamycin)，羅多比星(rodorubicin)，鏈黑菌素(streptonigrin)，鏈佐星(streptozocin)，殺結(jié)核菌素(tubercidin)，烏苯美司(ubenimex)，凈司他丁(zinostatin)，佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物類(lèi)，諸如甲氨蝶呤，吉西他濱(gemcitabine)替加氟(tegafur)卡培他濱(capecitabine)埃坡霉素(epothilone)；和5-氟尿嘧啶(5-fu)；葉酸類(lèi)似物，諸如二甲葉酸(denopterin)，甲氨蝶呤，蝶酰三谷氨酸(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類(lèi)似物，諸如氟達(dá)拉濱(fludarabine)，6-巰基嘌呤(mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鳥(niǎo)嘌呤(thioguanine)；嘧啶類(lèi)似物，諸如安西他濱(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6-氮尿苷，卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，依諾他濱(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)，和imatinib(一種2-苯基氨基嘧啶衍生物)，以及其它c(diǎn)-kit抑制劑；抗腎上腺類(lèi)，諸如氨魯米特(aminoglutethimide)，米托坦(mitotane)，曲洛司坦(trilostane)；葉酸補(bǔ)充劑，諸如亞葉酸(frolinicacid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋銨(elliptiniumacetate)；依托格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼達(dá)明(lonidainine)；美登木素生物堿類(lèi)(maytansinoids)，諸如美登素(maytansine)和安絲菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達(dá)醇(mopidanmol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；噴司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼(ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖復(fù)合物(jhsnaturalproducts,eugene,or)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西索菲蘭(sizofiran)；螺旋鍺(spirogermanium)；細(xì)交鏈孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2′,2″-三氯三乙胺；單端孢菌素類(lèi)(trichothecenes)(尤其是t-2毒素，疣孢菌素(verracurin)a，桿孢菌素(roridin)a和蛇行菌素(anguidine))；烏拉坦(urethan)；長(zhǎng)春地辛(vindesine)()；達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛(wèi)矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“ara-c”)；塞替派(thiotepa)；類(lèi)紫杉醇(taxoids)，例如帕利他塞(paclitaxel)清蛋白改造的納米顆粒劑型帕利他塞(abraxane^tm)，和多西他塞(doxetaxel)苯丁酸氮芥(chloranbucil)；6-硫鳥(niǎo)嘌呤(thioguanine)；巰基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；鉑類(lèi)似物，諸如順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)；長(zhǎng)春堿(vinblastine)鉑；依托泊苷(etoposide)(vp-16)；異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；長(zhǎng)春新堿(vincristine)奧沙利鉑(oxaliplatin)；亞葉酸(leucovovin)；長(zhǎng)春瑞濱(vinorelbine)能滅瘤(novantrone)；依達(dá)曲沙(edatrexate)；道諾霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；伊本膦酸鹽(ibandronate)；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑rfs2000；二氟甲基鳥(niǎo)氨酸(dmfo)；類(lèi)視黃醇，諸如視黃酸；任何上述物質(zhì)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物；以及兩種或更多種上述物質(zhì)的組合，諸如chop(環(huán)磷酰胺，多柔比星，長(zhǎng)春新堿和潑尼松龍聯(lián)合療法的縮寫(xiě))和folfox(奧沙利鉑(eloxatin^tm)聯(lián)合5-fu和亞葉酸的治療方案的縮寫(xiě))。

“化療劑”還包括但不限于作用為調(diào)節(jié)，降低，阻斷，或抑制可促進(jìn)癌生長(zhǎng)的激素效果的抗激素劑，且常常是系統(tǒng)或全身治療的形式。它們自身可以是激素。非限制性實(shí)例包括抗雌激素類(lèi)和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑類(lèi)(serm)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括他莫昔芬)，雷洛昔芬(raloxifene)屈洛昔芬(droloxifene)，4-羥基他莫昔芬，曲沃昔芬(trioxifene)，那洛昔芬(keoxifene)，ly117018，奧那司酮(onapristone)和托瑞米芬(toremifene)抗孕酮類(lèi)；雌激素受體下調(diào)劑類(lèi)(erd)；雌激素受體拮抗劑，諸如氟維司群(fulvestrant)功能為抑制或關(guān)閉卵巢的藥劑，例如促黃體生成激素釋放激素(lhrh)激動(dòng)劑，諸如醋酸亮丙瑞林(leuprolideacetate)(和)，醋酸戈舍瑞林(goserelinacetate)，醋酸布舍瑞林(buserelinacetate)和曲普瑞林(tripterelin)；抗雄激素類(lèi)，諸如氟他米特(flutamide)，尼魯米特(nilutamide)和比卡米特(bicalutamide)；及抑制在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素生成的芳香酶的芳香酶抑制劑，諸如例如4(5)-咪唑，氨魯米特(aminoglutethimide)，醋酸甲地孕酮(megestrolacetate)依西美坦(exemestane)福美坦(formestanie)，法倔唑(fadrozole)，伏羅唑(vorozole)來(lái)曲唑(letrozole)和阿那曲唑(anastrozole)另外，化療劑的這種定義包括二膦酸鹽類(lèi)(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)(例如或)，依替膦酸鈉(etidronate)ne-58095，唑來(lái)膦酸/唑來(lái)膦酸鹽(zoledronicacid/zoledronate)阿倫膦酸鹽(alendronate)帕米膦酸鹽(pamidronate)替魯膦酸鹽(tiludronate)或利塞膦酸鹽(risedronate)以及曲沙他濱(troxacitabine)(1,3-二氧戊環(huán)核苷胞嘧啶類(lèi)似物)；反義寡核苷酸，特別是抑制涉及異常(abherant)細(xì)胞增殖的信號(hào)途經(jīng)中的基因表達(dá)的反義寡核苷酸，諸如例如pkc-α，raf，h-ras和表皮生長(zhǎng)因子受體(egf-r)；疫苗，諸如疫苗和基因療法疫苗，例如疫苗，疫苗和疫苗；拓?fù)洚悩?gòu)酶1抑制劑(例如)；抗雌激素，諸如氟維司群(fulvestrant)；kit抑制劑，諸如伊馬替尼(imatinib)或exel-0862(一種酪氨酸激酶抑制劑)；egfr抑制劑，諸如厄洛替尼(erlotinib)或西妥昔單抗(cetuximab)；抗vegf抑制劑，諸如貝伐單抗(bevacizumab)；arinotecan；rmrh(例如)；拉帕替尼(lapatinib)和二甲苯磺酸拉帕替尼(lapatinibditosylate)(一種erbb-2和egfr雙重酪氨酸激酶小分子抑制劑，也稱(chēng)作gw572016)；17aag(格爾德霉素(geldanamycin)衍生物，其是熱休克蛋白(hsp)90毒物)；及任何上述物質(zhì)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物。

“放射療法”或“放療”指使用定向伽馬射線(xiàn)或貝塔射線(xiàn)來(lái)誘發(fā)對(duì)細(xì)胞的足夠損傷，以限制細(xì)胞正常發(fā)揮功能的能力或全然破壞細(xì)胞。應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會(huì)，本領(lǐng)域知道許多方式來(lái)確定治療的劑量和持續(xù)時(shí)間。典型的治療作為一次施用來(lái)給予，而典型的劑量范圍為每天10-200個(gè)單位(戈瑞(gray))。

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞因子”一般指由一種細(xì)胞群體釋放的，作為細(xì)胞間介質(zhì)對(duì)另一細(xì)胞起作用或者對(duì)生成該蛋白質(zhì)的細(xì)胞具有自分泌影響的蛋白質(zhì)。此類(lèi)細(xì)胞因子的例子包括淋巴因子，單核因子；白介素(“il”)，諸如il-1，il-1α，il-2，il-3，il-4，il-5，il-6，il-7，il-8，il-9，il-10，il-11，il-12，il-13，il-15，il-17a-f，il-18至il-29(諸如il-23)，il-31，包括ril-2；腫瘤壞死因子，諸如tnf-α或tnf-β，tgf-β1-3；和其它多肽因子，包括白血病抑制因子(“l(fā)if”)，睫狀節(jié)神經(jīng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)因子(“cntf”)，cntf樣細(xì)胞因子(“clc”)，心肌營(yíng)養(yǎng)蛋白(“ct”)，和kit配體(“kl”)。

如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“趨化因子”指具有選擇性誘導(dǎo)白細(xì)胞的趨化性和活化的能力的可溶性因子(例如細(xì)胞因子)。它們還觸發(fā)血管發(fā)生，炎癥，傷口愈合，和腫瘤發(fā)生的過(guò)程。趨化因子例子包括il-8，即鼠角質(zhì)形成細(xì)胞化學(xué)引誘物(kc)的人同系物。

如本文中使用的，短語(yǔ)“藥學(xué)可接受鹽”指本發(fā)明化合物的藥學(xué)可接受的有機(jī)或無(wú)機(jī)鹽。例示性的鹽包括但不限于硫酸鹽，檸檬酸鹽，乙酸鹽，草酸鹽，氯化物，溴化物，碘化物，硝酸鹽，硫酸氫鹽，磷酸鹽，酸式磷酸鹽，異煙酸鹽，乳酸鹽，水楊酸鹽，酸式檸檬酸鹽，酒石酸鹽，油酸鹽，丹寧酸鹽，泛酸鹽，酒石酸氫鹽，抗壞血酸鹽，琥珀酸鹽，馬來(lái)酸鹽，龍膽酸鹽，富馬酸鹽，葡糖酸鹽，葡糖醛酸鹽，糖酸鹽，甲酸鹽，苯甲酸鹽，谷氨酸鹽，甲基磺酸鹽(甲磺酸鹽)，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對(duì)甲苯磺酸鹽和撲酸鹽(即1,1’-亞甲基-雙(2-羥基-3-萘甲酸))鹽，堿金屬(例如鈉和鉀)鹽，堿土金屬(例如鎂)鹽，和銨鹽。藥學(xué)可接受鹽可能牽涉包含另一種分子，諸如乙酸鹽離子，琥珀酸鹽離子或其它抗衡離子?？购怆x子可以是穩(wěn)定母體化合物電荷的任何有機(jī)或無(wú)機(jī)模塊。另外，藥學(xué)可接受鹽可以在其結(jié)構(gòu)中具有超過(guò)一種帶電荷原子。在多種帶電荷原子作為藥學(xué)可接受鹽的組成部分的情況中可以具有多種抗衡離子。因此，藥學(xué)可接受鹽可具有一種或多種帶電荷原子和/或一種或多種抗衡離子。

如果本發(fā)明的化合物是堿，那么期望的藥學(xué)可接受的鹽可以通過(guò)本領(lǐng)域可得的任何合適方法來(lái)制備，例如用無(wú)機(jī)酸(諸如氫氯酸，氫溴酸，硫酸，硝酸，甲磺酸，磷酸等等)或用有機(jī)酸(諸如乙酸，馬來(lái)酸，琥珀酸，扁桃酸，富馬酸/延胡索酸，丙二酸，丙酮酸，草酸，乙醇酸，水楊酸，吡喃糖苷酸(pyranosidylacid)(諸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸)，α羥酸(諸如檸檬酸或酒石酸)，氨基酸(諸如天冬氨酸或谷氨酸)，芳香酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)，磺酸(諸如對(duì)甲苯磺酸或乙磺酸)，等等)處理游離堿。

如果本發(fā)明的化合物是酸，那么期望的藥學(xué)可接受的鹽可以通過(guò)任何合適方法來(lái)制備，例如用無(wú)機(jī)或有機(jī)堿(諸如胺(伯，仲或叔))，堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物，等等處理游離酸。合適的鹽的例示性例子包括但不限于自氨基酸(諸如甘氨酸和精氨酸)，銨，伯/仲/叔胺，和環(huán)胺(諸如哌啶，嗎啉和哌嗪)衍生的有機(jī)鹽，和自鈉，鈣，鉀，鎂，錳，鐵，銅，鋅，鋁和鋰衍生的無(wú)機(jī)鹽。

短語(yǔ)“藥學(xué)可接受的”指明該物質(zhì)或組合物必須是在化學(xué)和/或毒理學(xué)方面與構(gòu)成配制劑的其它成分和/或用它治療的哺乳動(dòng)物相容的。

如本文及所附權(quán)利要求書(shū)中使用的，單數(shù)形式“一個(gè)”，“一種”，和“該/所述”包括復(fù)數(shù)提及物，除非上下文明確另有規(guī)定。

本文中提及“約”某個(gè)數(shù)值或參數(shù)包括(并描述)涉及所述數(shù)值或參數(shù)本身的變化。例如，提及“約x”的描述包括“x”的描述。

應(yīng)當(dāng)理解，本文中描述的本發(fā)明的方面和變型包括由和/或基本上由方面和變型“組成”。

iii.方法

在一個(gè)方面，本文中提供的是用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。

在另一個(gè)方面，本文中提供的是用于在個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。

在另一個(gè)方面，本文中提供的是用于在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。

在另一個(gè)方面，本文中提供的是用于在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。

在某些實(shí)施方案中，所述抗癌劑可以是一種或多種本公開(kāi)文本的抗癌劑。例如，所述一種或多種抗癌劑可以是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種本公開(kāi)文本的抗癌劑。要理解的是，所述一種或多種抗癌劑可以指來(lái)自本公開(kāi)文本的相同組的抗癌劑的一種或多種抗癌劑(例如本公開(kāi)文本的一種或多種化療或生長(zhǎng)抑制劑，一種或多種靶向治療劑，一種或多種表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，一種或多種抗體或其抗原結(jié)合片段，一種或多種抗體-藥物綴合物，一種或多種血管發(fā)生抑制劑，一種或多種抗瘤劑，一種或多種癌癥疫苗，和一種或多種佐劑)?；蛘撸鲆环N或多種抗癌劑可以指如下的一種或多種抗癌劑，其中所述一種或多種抗癌劑中的每一種來(lái)自本公開(kāi)文本的不同組的抗癌劑(例如化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，和佐劑)。在某些實(shí)施方案中，所述抗癌療法可以是一種或多種本公開(kāi)文本的抗癌療法。例如，所述一種或多種抗癌療法可以是兩種或更多種，三種或更多種，四種或更多種，五種或更多種，六種或更多種，七種或更多種，八種或更多種，九種或更多種，或十種或更多種本公開(kāi)文本的抗癌療法。

本發(fā)明的方法可以在治療期望增強(qiáng)的免疫原性(諸如提高腫瘤免疫原性以治療癌癥或t細(xì)胞功能障礙性病癥)的狀況中找到應(yīng)用。通過(guò)這些方法，可以治療多種癌癥，或者可以延遲其進(jìn)展。

在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有非小細(xì)胞肺癌。所述非小細(xì)胞肺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有小細(xì)胞肺癌。所述小細(xì)胞肺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有腎細(xì)胞癌。所述腎細(xì)胞癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有結(jié)直腸癌。所述結(jié)直腸癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有卵巢癌。所述卵巢癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有乳腺癌。所述乳腺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有胰腺癌。所述胰腺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有胃癌。所述胃癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有膀胱癌。所述膀胱癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有食道癌。所述食道癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有間皮瘤。所述間皮瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有黑素瘤。所述黑素瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有頭和頸癌。所述頭和頸癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有甲狀腺癌。所述甲狀腺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有肉瘤。所述肉瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有前列腺癌。所述前列腺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有成膠質(zhì)細(xì)胞瘤。所述成膠質(zhì)細(xì)胞瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有宮頸癌。所述宮頸癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有胸腺癌。所述胸腺癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有白血病。所述白血病可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有淋巴瘤。所述淋巴瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有骨髓瘤。所述骨髓瘤可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有蕈樣霉菌病。所述蕈樣霉菌病可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有梅克爾(merkel)細(xì)胞癌。所述梅克爾細(xì)胞癌可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有血液學(xué)惡性。所述血液學(xué)惡性可以處于早期階段或處于晚期階段。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體為人。

在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述癌癥具有上升水平的t細(xì)胞浸潤(rùn)。如本文中使用的，癌癥的t細(xì)胞浸潤(rùn)可以指癌癥組織內(nèi)或其它相關(guān)部位存在t細(xì)胞，諸如腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞(til)。本領(lǐng)域已知，t細(xì)胞浸潤(rùn)可能與某些癌癥中改善的臨床結(jié)局有關(guān)(參見(jiàn)例如zhang等,n.engl.j.med.348(3):203-213(2003))。

然而，t細(xì)胞耗盡也是癌癥的一項(xiàng)主要免疫學(xué)特征，其中許多腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞(til)表達(dá)高水平的抑制性共受體且缺乏生成效應(yīng)器細(xì)胞因子的能力(wherry,e.j.,natureimmunology12:492-499(2011)；rabinovich,g.a.等,annualreviewofimmunology25:267-296(2007))。在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有t細(xì)胞功能障礙性病癥。在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞功能障礙性病癥特征在于t細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性或降低的分泌細(xì)胞因子，增殖或執(zhí)行細(xì)胞溶解活性的能力。在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞功能障礙性病癥特征在于t細(xì)胞耗盡。在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述t細(xì)胞為cd4+和cd8+t細(xì)胞。

在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體中活化的cd4和/或cd8t細(xì)胞特征在于γ-ifn⁺生成性cd4和/或cd8t細(xì)胞和/或相對(duì)于施用所述組合之前增強(qiáng)的細(xì)胞溶解活性?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的任何手段來(lái)測(cè)量γ-ifn⁺，包括例如細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色(ics)，其牽涉細(xì)胞固定，透化，和用針對(duì)γ-ifn的抗體染色?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的任何手段來(lái)測(cè)量細(xì)胞溶解活性，例如使用用混合效應(yīng)和靶細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞殺傷測(cè)定法。

在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，cd4和/或cd8t細(xì)胞展現(xiàn)升高的選自下組的細(xì)胞因子的釋放：ifn-γ，tnf-α和白介素。可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何手段來(lái)測(cè)量細(xì)胞因子釋放，例如使用western印跡，elisa，或免疫組織化學(xué)測(cè)定法檢測(cè)含有cd4和/或cd8t細(xì)胞的樣品中釋放的細(xì)胞因子的存在。

在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述cd4和/或cd8t細(xì)胞為效應(yīng)記憶t細(xì)胞。在本公開(kāi)文本的方法的一些實(shí)施方案中，所述cd4和/或cd8效應(yīng)記憶t細(xì)胞特征在于具有cd44^高cd62l^低的表達(dá)。可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何手段來(lái)檢測(cè)cd44^高cd62l^低的表達(dá)，例如通過(guò)制備組織(例如癌癥組織)的單細(xì)胞懸浮液并使用針對(duì)cd44和cd62l的商品化抗體實(shí)施表面染色和流式細(xì)胞術(shù)。

降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑

本公開(kāi)文本的某些方面涉及降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑。如本文中使用的，“tigit”可以指表征為具有ig和itim域多肽的t細(xì)胞免疫受體或預(yù)測(cè)發(fā)揮具有ig和itim域多肽的t細(xì)胞免疫受體的功能的任何多肽或其同系物。tigit多肽的一個(gè)非限制性例子是任何由ncbi基因idno.201633所代表的人基因編碼的多肽，諸如具有由ncbirefseqno.np_776160描述的序列的多肽。tigit多肽及其生物學(xué)活性的別的描述可以見(jiàn)yu等,nat.immunol.10:48-57(2009)，美國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)文本no.us20040121370，和美國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)文本no.us20130251720。

本文中提供的是用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。本文中還提供的是用于在個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。本文中還提供的是用于在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。本文中還提供的是用于在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑和/或抗癌療法。

在一些實(shí)施方案中，降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑包括tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑，pvr表達(dá)和/或活性的拮抗劑，抑制和/或阻斷tigit與pvr的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl2的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷tigit與pvrl3的相互作用的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvr的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl2的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl3的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑，及其組合。

在一些實(shí)施方案中，所述tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述pvr表達(dá)和/或活性的拮抗劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvr的相互作用的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvrl2的相互作用的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷tigit與pvrl3的相互作用的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvr的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl2的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述抑制和/或阻斷由結(jié)合pvrl3的tigit介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的藥劑包括小分子抑制劑，抑制性抗體或其抗原結(jié)合片段，適體，抑制性核酸，和抑制性多肽。

在一些實(shí)施方案中，所述tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑為選自反義多核苷酸，干擾性rna，催化性rna，和rna-dna嵌合物的抑制性核酸。

在一些實(shí)施方案中，所述tigit表達(dá)和/或活性的拮抗劑為抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段。

在本發(fā)明中有用的抗tigit抗體(包括含有此類(lèi)抗體的組合物)，諸如那些記載于wo2009/126688的抗tigit抗體可以與抗癌劑組合使用。

抗tigit抗體

本發(fā)明提供了抗tigit抗體。例示性的抗體包括多克隆的，單克隆的，人源化的，雙特異性的，和異源綴合的抗體。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)理解，本發(fā)明還提供針對(duì)其它多肽的抗體(即抗pvr抗體)，而且本文中具體關(guān)于抗tigit抗體的創(chuàng)建，生成，變化，使用的方法或其它方面的任何描述也會(huì)適用于對(duì)其它非tigit多肽特異性的抗體。

多克隆抗體

抗tigit抗體可包括多克隆抗體。用于制備多克隆抗體的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。多克隆抗體可在哺乳動(dòng)物中生成，例如通過(guò)一次或多次注射免疫劑和根據(jù)需要的佐劑。通常，免疫劑和/或佐劑將通過(guò)多次皮下或腹膜內(nèi)注射而注射到哺乳動(dòng)物中。免疫劑可包括tigit多肽或其融合蛋白。將免疫劑與已知在所免疫哺乳動(dòng)物中有免疫原性的蛋白質(zhì)綴合可能是有用的。此類(lèi)免疫原性蛋白質(zhì)的例子包括但不限于匙孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白，血清清蛋白，牛甲狀腺球蛋白和大豆胰蛋白酶抑制劑?？刹捎玫淖魟┑睦影ǜナ贤耆魟┖蚼pl-tdm佐劑(單磷?；|(zhì)a，合成的海藻糖dicorynomycolate)。免疫方案可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員無(wú)需過(guò)多實(shí)驗(yàn)做出選擇。

單克隆抗體

或者，抗tigit抗體可以是單克隆抗體。單克隆抗體可使用雜交瘤法制備，諸如kohler和milstein,nature256：495(1975)所述。在雜交瘤法中，小鼠，倉(cāng)鼠或其它適宜的宿主動(dòng)物通常用免疫劑免疫以引發(fā)生成或能夠生成將特異性結(jié)合免疫劑的抗體的淋巴細(xì)胞?；蛘?，可以在體外免疫淋巴細(xì)胞。

免疫劑將通常包括tigit多肽或其融合蛋白。通常，或是使用外周血淋巴細(xì)胞(“pbl”)，若希望人起源的細(xì)胞，或是使用脾細(xì)胞或淋巴結(jié)細(xì)胞，若希望非人哺乳動(dòng)物來(lái)源。然后，使用合適的融合劑，諸如聚乙二醇，將淋巴細(xì)胞與永生化細(xì)胞系融合以形成雜交瘤細(xì)胞(goding,monoclonalantibodies：principlesandpractice,academicpress(1986),pp.59-103)。永生化細(xì)胞系通常是轉(zhuǎn)化的哺乳動(dòng)物細(xì)胞，特別是嚙齒類(lèi)，牛和人起源的骨髓瘤細(xì)胞。通常，采用大鼠或小鼠骨髓瘤細(xì)胞系。雜交瘤細(xì)胞可在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基優(yōu)選含有抑制未融合的永生化細(xì)胞生長(zhǎng)或存活的一種或多種物質(zhì)。例如，如果親本細(xì)胞缺乏次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(hgprt或hprt)，那么用于雜交瘤的培養(yǎng)基通常將含有次黃嘌呤，氨基喋呤和胸苷(“hat培養(yǎng)基”)，這些物質(zhì)阻止hgprt缺陷細(xì)胞生長(zhǎng)。

優(yōu)選的永生化細(xì)胞系是那些高效融合，支持選定的抗體生成性細(xì)胞穩(wěn)定的高水平的表達(dá)抗體，并對(duì)諸如hat培養(yǎng)基等培養(yǎng)基敏感的細(xì)胞系。更優(yōu)選的永生化細(xì)胞系是鼠源骨髓瘤系，可從例如索爾克研究所細(xì)胞分配中心(salkinstitutecelldistributioncenter,sandiege,california,usa)和美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(americantypeculturecollection,manassas,virginia,usa)獲得。用于生成人單克隆抗體的人骨髓瘤和小鼠-人異源骨髓瘤細(xì)胞系也已有描述(kozbor,j.immunol.133：3001(1984)；brodeur等,monoclonalantibodyproductiontechniquesandapplications,marceldekker,inc.,newyork(1987)pp.51-63)。

然后可對(duì)雜交瘤細(xì)胞在其中培養(yǎng)的培養(yǎng)基測(cè)定針對(duì)多肽的單克隆抗體的存在。優(yōu)選的是，通過(guò)免疫沉淀或通過(guò)體外結(jié)合測(cè)定法，諸如放射免疫測(cè)定法(ria)或酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(elisa)，測(cè)定由雜交瘤細(xì)胞生成的單克隆抗體的結(jié)合特異性。此類(lèi)技術(shù)和測(cè)定法是本領(lǐng)域已知的。單克隆抗體的結(jié)合親和力可通過(guò)例如munson和pollard,anal.biochem.107：220(1980)的scatchard分析來(lái)測(cè)定。

在鑒定得到期望的雜交瘤細(xì)胞后，該克隆可通過(guò)有限稀釋流程進(jìn)行亞克隆，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行培養(yǎng)(goding,見(jiàn)上文)。適于這一目的的培養(yǎng)基包括例如dulbecco氏改良的eagle氏培養(yǎng)基或rpmi-1640培養(yǎng)基。或者，雜交瘤細(xì)胞可在哺乳動(dòng)物中作為腹水進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)。

可通過(guò)常規(guī)免疫球蛋白純化流程，諸如例如蛋白a-sepharose，羥磷灰石層析，凝膠電泳，透析或親和層析，將亞克隆分泌的單克隆抗體與培養(yǎng)基或腹水分開(kāi)或純化。

單克隆抗體還可通過(guò)重組dna技術(shù)來(lái)生成，諸如美國(guó)專(zhuān)利4,816,567中所述。編碼本發(fā)明單克隆抗體的dna易于使用常規(guī)流程分離和測(cè)序(例如使用能夠特異性結(jié)合編碼鼠源抗體重鏈和輕鏈的基因的寡核苷酸探針)。本發(fā)明的雜交瘤細(xì)胞是此類(lèi)dna的優(yōu)選來(lái)源。一旦分離，可將dna置于表達(dá)載體中，然后將該表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到不另外產(chǎn)生免疫球蛋白蛋白質(zhì)的宿主細(xì)胞中，諸如猿猴cos細(xì)胞，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(cho)細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞，以在重組宿主細(xì)胞中獲得單克隆抗體的合成。還可以修飾dna，例如通過(guò)替代，即用人重鏈和輕鏈恒定域的編碼序列代替同源鼠源序列(美國(guó)專(zhuān)利4,816,567；morrison等,見(jiàn)上文)，或者通過(guò)共價(jià)接合免疫球蛋白編碼序列和非免疫球蛋白多肽的整個(gè)或部分編碼序列?？捎么祟?lèi)非免疫球蛋白多肽替代本發(fā)明抗體的恒定域，或者可用它替代本發(fā)明抗體的一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)的可變域以產(chǎn)生嵌合二價(jià)抗體。

抗體可以是單價(jià)抗體。用于制備單價(jià)抗體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。例如，一種方法牽涉免疫球蛋白輕鏈和經(jīng)修飾重鏈的重組表達(dá)。重鏈通常在fc區(qū)中的任何點(diǎn)截短，從而防止重鏈交聯(lián)?；蛘?，相關(guān)半胱氨酸殘基用另一種氨基酸殘基替代或者刪除，從而防止交聯(lián)。

體外方法也適于制備單價(jià)抗體。消化抗體以生成其片段，特別是fab片段，可使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)來(lái)完成。

人抗體和人源化抗體

本發(fā)明的抗tigit抗體還可包括人源化抗體或人抗體。非人(例如鼠源)抗體的人源化形式指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合免疫球蛋白，免疫球蛋白鏈或其片段(諸如fv，fab，fab′，f(ab′)2或抗體的其它抗原結(jié)合子序列)。人源化抗體包括人免疫球蛋白(受體抗體)中的互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)殘基用具有期望特異性，親和力和能力的非人物種(供體抗體)諸如小鼠，大鼠或兔的cdr殘基替換的抗體。在有些情況中，將人免疫球蛋白的fv框架殘基用相應(yīng)的非人殘基替換。人源化抗體還可包含在受體抗體和輸入cdr或框架序列中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)的殘基。通常，人源化抗體將包含至少一個(gè)，通常兩個(gè)基本上整個(gè)如下可變域，其中所有或基本上所有cdr區(qū)對(duì)應(yīng)于非人免疫球蛋白的cdr，且所有或基本上所有fr區(qū)是人免疫球蛋白共有序列的fr。人源化抗體最佳還將包含至少部分免疫球蛋白恒定區(qū)(fc)，通常是人免疫球蛋白的恒定區(qū)(jones等,nature321:522-525(1986)；riechmann等,nature332:323-329(1988)；presta,curr.op.struct.biol.2:593-596(1992)。

用于人源化非人抗體的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。通常，人源化抗體中引入了一個(gè)或多個(gè)來(lái)自非人來(lái)源的氨基酸殘基。這些非人氨基酸殘基常常稱(chēng)作“輸入”殘基，它們通常取自“輸入”可變域。人源化可基本上遵循winter及其同事的方法進(jìn)行(jones等,nature321:522-525(1986)；riechmann等,nature332:323-327(1988)；verhoeyen等,science239:1534-1536(1988))，即用嚙齒類(lèi)cdr或cdr序列替代人抗體的相應(yīng)序列。因此，此類(lèi)“人源化”抗體是嵌合抗體(美國(guó)專(zhuān)利4,816,567)，其中基本上少于整個(gè)人可變域用來(lái)自非人物種的相應(yīng)序列替代。在實(shí)踐中，人源化抗體通常是其中一些cdr殘基和可能的一些fr殘基用來(lái)自嚙齒類(lèi)抗體中類(lèi)似位點(diǎn)的殘基替代的人抗體。

還可使用本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)生成人抗體，包括噬菌體展示庫(kù)(hoogenboom和winter,j.mol.biol.227：381(1991)；marks等,j.mol.biol.222：581(1991))。cole等人和boerner等人的技術(shù)也可用于制備人單克隆抗體(cole等,monoclonalantibodiesandcancertherapy,alanr.liss,p.77(1985)；boerner等,j.immunol.147(1)：86-95(1991))。類(lèi)似的，人抗體可通過(guò)將人免疫球蛋白基因座導(dǎo)入內(nèi)源免疫球蛋白基因已經(jīng)部分或完全滅活的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，例如小鼠來(lái)生成。在攻擊時(shí)，觀察到人抗體生成，在所有方面與在人體中看到的非常相像，包括基因重排，裝配和抗體全集。此方法記載于例如美國(guó)專(zhuān)利5,545,807；5,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；5,661,016，及下列科學(xué)出版物：marks等,bio/technology10：779-783(1992)；lonberg等,nature368：856-859(1994)；morrison,nature368：812-13(1994)；fishwild等,naturebiotechnology14：845-51(1996)；neuberger,naturebiotechnology14：826(1996)；lonberg和huszar,intern.rev.immunol.13：65-93(1995)。

抗體還可以如上所述使用已知的選擇和/或誘變方法進(jìn)行親和力成熟。優(yōu)選的親和力成熟的抗體具有比用于制備該成熟抗體的起始抗體(通常是鼠的，人源化的或人的)高5倍，更優(yōu)選10倍，甚至更優(yōu)選20或30倍的親和力。

雙特異性抗體

雙特異性抗體指對(duì)至少兩種不同抗原具有結(jié)合特異性的單克隆，優(yōu)選人或人源化抗體。在這種情況中，一種結(jié)合特異性是對(duì)tigit，另一種是對(duì)任何其它抗原，優(yōu)選對(duì)細(xì)胞表面蛋白或者受體或受體亞基。

用于生成雙特異性抗體的方法是本領(lǐng)域已知的。傳統(tǒng)上，雙特異性抗體的重組生成基于兩對(duì)免疫球蛋白重鏈-輕鏈的共表達(dá)，其中兩種重鏈具有不同的特異性(millstein和cuello,nature305：537-539(1983))。由于免疫球蛋白重鏈和輕鏈的隨機(jī)分配，這些雜交瘤(四源雜交瘤(quadroma))生成十種不同抗體分子的潛在混合物，其中只有一種具有正確的雙特異性結(jié)構(gòu)。正確分子的純化通常通過(guò)親和層析步驟來(lái)完成。1993年5月13日公開(kāi)的wo93/08829及traunecker等,emboj.10：3655-3659(1991)中披露了類(lèi)似的流程。

可將具有期望結(jié)合特異性(抗體-抗原結(jié)合位點(diǎn))的抗體可變域與免疫球蛋白恒定域序列融合。融合優(yōu)選使用包含至少部分鉸鏈，ch2和ch3區(qū)的免疫球蛋白重鏈恒定域。優(yōu)選在至少一種融合物中存在包含輕鏈結(jié)合所必需的位點(diǎn)的第一重鏈恒定區(qū)(ch1)。將編碼免疫球蛋白重鏈融合物及，如果需要，免疫球蛋白輕鏈的dna插入分開(kāi)的表達(dá)載體，并共轉(zhuǎn)染到合適的宿主生物體中。關(guān)于生成雙特異性抗體的更多詳情參見(jiàn)例如suresh等,methodsinenzymology121：210(1986)。

根據(jù)wo96/27011中描述的另一種方法，可改造一對(duì)抗體分子之間的界面，將從重組細(xì)胞培養(yǎng)物中回收的異二聚體的百分比最大化。優(yōu)選的界面包含抗體恒定域的至少部分ch3區(qū)。在該方法中，將第一抗體分子界面的一個(gè)或多個(gè)小氨基酸側(cè)鏈用較大側(cè)鏈(例如酪氨酸或色氨酸)替換。通過(guò)用較小氨基酸側(cè)鏈(例如丙氨酸或蘇氨酸)替換大氨基酸側(cè)鏈，在第二抗體分子的界面上產(chǎn)生針對(duì)大側(cè)鏈的相同或相似大小的補(bǔ)償性“空腔”。這提供了較之其它不想要的終產(chǎn)物諸如同二聚體提高異二聚體產(chǎn)量的機(jī)制。

雙特異性抗體可制備成全長(zhǎng)抗體或抗體片段(例如f(ab’)2雙特異性抗體)。文獻(xiàn)中描述了由抗體片段生成雙特異性抗體的技術(shù)。例如，可使用化學(xué)連接來(lái)制備雙特異性抗體。brennan等,science229：81(1985)描述了通過(guò)蛋白水解切割完整抗體以生成f(ab′)2片段的流程。將這些片段在存在二硫醇絡(luò)合劑亞砷酸鈉以穩(wěn)定鄰近的二硫醇并防止分子間二硫鍵的形成的情況下還原。然后將產(chǎn)生的fab’片段轉(zhuǎn)變?yōu)榱虼趸郊姿狨?tnb)衍生物。然后將fab′-tnb衍生物之一通過(guò)巰基乙胺的還原重新恢復(fù)成fab′-硫醇，并與等摩爾量的另一種fab′-tnb衍生物混合，以形成雙特異性抗體。產(chǎn)生的雙特異性抗體可用作酶的選擇性固定化試劑。

fab’片段可直接從大腸桿菌中回收，并化學(xué)偶聯(lián)以形成雙特異性抗體。shalaby等,j.exp.med.175：217-225(1992)描述了生成完全人源化的雙特異性抗體f(ab′)2分子。每個(gè)fab′片段由大腸桿菌分開(kāi)分泌，并在體外進(jìn)行定向化學(xué)偶聯(lián)以形成雙特異性抗體。如此形成的雙特異性抗體能夠結(jié)合過(guò)表達(dá)erbb2受體的細(xì)胞和正常人t細(xì)胞，以及觸發(fā)人細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞針對(duì)人乳腺腫瘤靶的溶解活性。

還描述了從重組細(xì)胞培養(yǎng)物直接制備和分離雙特異性抗體片段的多種技術(shù)。例如，已使用亮氨酸拉鏈生成雙特異性抗體。kostelny等,j.immunol.148(5)：1547-1553(1992)。將來(lái)自fos和jun蛋白的亮氨酸拉鏈肽通過(guò)基因融合與兩種不同抗體的fab′部分連接?？贵w同二聚體在鉸鏈區(qū)還原而形成單體，然后重新氧化而形成抗體異二聚體。這種方法也可用于生成抗體同二聚體。由hollinger等,proc.natl.acad.sci.usa90：6444-6448(1993)描述的“雙抗體”技術(shù)提供了制備雙特異性抗體片段的替代機(jī)制。該片段包含通過(guò)接頭相連的重鏈可變域(vh)和輕鏈可變域(vl)，所述接頭太短使得同一條鏈上的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域之間不能配對(duì)。因此，迫使一個(gè)片段上的vh和vl結(jié)構(gòu)域與另一個(gè)片段上的互補(bǔ)vl和vh結(jié)構(gòu)域配對(duì)，由此形成兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。還報(bào)道了通過(guò)使用單鏈fv(sfv)二聚體制備雙特異性抗體片段的另一種策略。參見(jiàn)gruber等,j.immunol.152：5368(1994)。

涵蓋具有超過(guò)兩個(gè)效價(jià)的抗體。作為一個(gè)非限制性例子，可制備三特異性抗體。參見(jiàn)例如tutt等,j.immunol.147：60(1991)。

例示性的雙特異性抗體可結(jié)合本文中給定tigit多肽上的兩種不同表位?；蛘撸梢詫⒖箃igit多肽臂與結(jié)合白細(xì)胞上觸發(fā)分子諸如t細(xì)胞受體分子(例如cd3)或igg的fc受體(fcγr)諸如fcγri(cd64)，fcγrii(cd32)和fcγriii(cd16)的臂聯(lián)合起來(lái)，從而將細(xì)胞防御機(jī)制聚焦于表達(dá)特定tigit多肽的細(xì)胞。雙特異性抗體還可用于將細(xì)胞毒劑定位于表達(dá)特定tigit多肽的細(xì)胞。這些抗體擁有tigit結(jié)合臂及結(jié)合細(xì)胞毒劑或放射性核素螯合劑諸如eotube，dpta，dota或teta的臂。另一種感興趣的雙特異性抗體結(jié)合tigit多肽，還結(jié)合組織因子(tf)。

異源綴合抗體

異源綴合抗體也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。異源綴合抗體由兩種共價(jià)連接的抗體構(gòu)成。此類(lèi)抗體建議例如用于將免疫系統(tǒng)細(xì)胞靶向不想要的細(xì)胞(美國(guó)專(zhuān)利4,676,980)及用于治療hiv感染(wo91/00360；wo92/200373；ep03089)。設(shè)想了可在體外使用合成蛋白質(zhì)化學(xué)的已知方法制備抗體，包括那些涉及交聯(lián)劑的方法。例如，可使用二硫化物交換反應(yīng)或通過(guò)形成硫醚鍵來(lái)構(gòu)建免疫毒素。適于此目的的試劑的例子包括亞氨基硫醇酯/鹽(iminothiolate)和4-巰基丁亞氨酸甲酯(methyl-4-mercaptobutyrimidate)及例如美國(guó)專(zhuān)利4,676,980中所公開(kāi)的。

效應(yīng)器功能工程改造

可能希望在效應(yīng)器功能方面修飾本發(fā)明的抗體，從而增強(qiáng)例如抗體在治療癌癥中的效力。例如，可向fc區(qū)中引入半胱氨酸殘基，從而使得在該區(qū)中形成鏈間二硫鍵。如此生成的同二聚體抗體可具有改善的內(nèi)在化能力和/或升高的補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞殺傷和抗體依賴(lài)性細(xì)胞細(xì)胞毒性(adcc)。參見(jiàn)caron等,j.exp.med.176：1191-1195(1992)和shopes,j.immunol.148：2918-2922(1992)。具有增強(qiáng)的抗腫瘤活性的同二聚體抗體還可使用如wolff等,cancerresearch53：2560-2565(1993)中描述的異雙功能交聯(lián)劑來(lái)制備?；蛘撸贵w可改造成具有雙重fc區(qū)，由此可具有增強(qiáng)的補(bǔ)體溶解和adcc能力。參見(jiàn)stevenson等,anti-cancerdrugdesign3：219-230(1989)。

在一些實(shí)施方案中，生成了抗tigit抗體，它們是倉(cāng)鼠抗小鼠抗體。兩種抗體，10a7和1f4，也特異性結(jié)合人tigit。使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)測(cè)定了10a7抗體的輕和重鏈的氨基酸序列。此抗體的輕鏈序列為：divmtqspsslavspgekvtmtcwyqqkpgqspklliyygvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcfgdgtkleikr(seqidno:13)，且此抗體的重鏈序列為：evqlvesgggltqpgkslklsceawvrqspgkglewvrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarwgqgtlvtvss(seqidno:15)，其中每條鏈的高變區(qū)(hvr)以粗體正文呈現(xiàn)。如此，10a7輕鏈的hvr1具有序列kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，10a7輕鏈的hvr2具有序列asirft(seqidno:2)，且10a7輕鏈的hvr3具有序列qqginnplt(seqidno:3)。10a7重鏈的hvr1具有序列g(shù)ftfssftmh(seqidno:4)，10a7重鏈的hvr2具有序列firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，且10a7重鏈的hvr3具有序列rplghntfds(seqidno:6)。

測(cè)定了1f4抗體的輕和重鏈的氨基酸序列。此抗體的輕鏈序列為：dvvltqtplslsvsfgdqvsiswylhkpgqspqllifgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyycfgpgtklevk(seqidno:14)，且此抗體的重鏈序列為：evqlqqsgpelvkpgtsmkisckaswvkqshgknlewigkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrwgqgtsvtvss(seqidno:16)，其中每條鏈的高變區(qū)(hvr)以粗體正文呈現(xiàn)。如此，1f4輕鏈的hvr1具有序列rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，1f4輕鏈的hvr2具有序列g(shù)isnrfs(seqidno:8)，且1f4輕鏈的hvr3具有序列l(wèi)qgthqppt(seqidno:9)。1f4重鏈的hvr1具有序列g(shù)ysftghlmn(seqidno:10)，1f4重鏈的hvr2具有序列l(wèi)iipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，且1f4重鏈的hvr3具有序列g(shù)lrgfyamdy(seqidno:12)。

編碼1f4輕鏈的核苷酸序列測(cè)定為gatgttgtgttgactcaaactccactctccctgtctgtcagctttggagatcaagtttctatctcttgcaggtctagtcagagtcttgtaaacagttatgggaacacctttttgtcttggtacctgcacaagcctggccagtctccacagctcctcatctttgggatttccaacagattttctggggtgccagacaggttcagtggcagtggttcagggacagatttcacactcaagatcagcacaataaagcctgaggacttgggaatgtattactgcttacaaggtacgcatcagcctcccacgttcggtcctgggaccaagctggaggtgaaa(seqidno:17)，而編碼1f4重鏈的核苷酸序列測(cè)定為gaggtccagctgcaacagtctggacctgagctggtgaagcctggaacttcaatgaagatatcctgcaaggcttctggttactcattcactggccatcttatgaactgggtgaagcagagccatggaaagaaccttgagtggattggacttattattccttacaatggtggtacaagctataaccagaagttcaagggcaaggccacattgactgtagacaagtcatccagcacagcctacatggagctcctcagtctgacttctgatgactctgcagtctatttctgttcaagaggccttaggggcttctatgctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca(seqidno:18)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其包含選自下述氨基酸序列的氨基酸序列：kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)或rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈，該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體重鏈，該抗體重鏈包含evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含抗體輕鏈和抗體重鏈，該抗體輕鏈包含divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列，該抗體重鏈包含evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段選自人源化抗體，嵌合抗體，雙特異性抗體，異源綴合抗體，和免疫毒素。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其抗原結(jié)合片段包含至少一種hvr，其與下述任一所示hvr至少90％相同：kssqslyysgvkenlla(seqidno:1)，asirft(seqidno:2)，qqginnplt(seqidno:3)，gftfssftmh(seqidno:4)，firsgsgivfyadavrg(seqidno:5)，和rplghntfds(seqidno:6)或rssqslvnsygntfls(seqidno:7)，gisnrfs(seqidno:8)，lqgthqppt(seqidno:9)，gysftghlmn(seqidno:10)，liipynggtsynqkfkg(seqidno:11)，和glrgfyamdy(seqidno:12)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗tigit抗體或其片段包含輕鏈和/或重鏈，該輕鏈和重鏈分別包含與divmtqspsslavspgekvtmtckssqslyysgvkenllawyqqkpgqspklliyyasirftgvpdrftgsgsgtdytltitsvqaedmgqyfcqqginnpltfgdgtkleikr(seqidno:13)或dvvltqtplslsvsfgdqvsiscrssqslvnsygntflswylhkpgqspqllifgisnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkistikpedlgmyyclqgthqpptfgpgtklevk(seqidno:14)所示氨基酸序列或與evqlvesgggltqpgkslklsceasgftfssftmhwvrqspgkglewvafirsgsgivfyadavrgrftisrdnaknllflqmndlksedtamyycarrplghntfdswgqgtlvtvss(seqidno:15)或evqlqqsgpelvkpgtsmkisckasgysftghlmnwvkqshgknlewigliipynggtsynqkfkgkatltvdkssstaymellsltsddsavyfcsrglrgfyamdywgqgtsvtvss(seqidno:16)所示氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。

抗癌劑和抗癌療法

本公開(kāi)文本的某些方面涉及抗癌劑和抗癌療法。不希望受理論束縛，認(rèn)為，由于tigit的特性(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)文本no.us20040121370和美國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)文本no.us20130251720)，降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑可以增強(qiáng)抗癌劑和/或抗癌療法的抗癌癥效果，例如通過(guò)治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展；降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展；治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展；和/或在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)或刺激免疫應(yīng)答或功能。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到的，本文所述抗癌劑和抗癌療法可以單獨(dú)或聯(lián)合使用。如本文中公開(kāi)的，本公開(kāi)文本的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑可以與本公開(kāi)文本的抗癌劑一起，與本公開(kāi)文本的抗癌療法，或與本公開(kāi)文本的抗癌劑和本公開(kāi)文本的抗癌療法一起施用。

在一些實(shí)施方案中，降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑可以與抗癌療法聯(lián)合施用。本公開(kāi)文本的抗癌療法可包括放射療法，手術(shù)，化學(xué)療法，基因療法(例如基因療法疫苗，諸如和)，dna療法，病毒療法，rna療法，免疫療法，骨髓移植，納米療法，單克隆抗體療法，或其組合。所述抗癌療法可以是輔助或新輔助療法的形式。在一些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是施用副作用限制劑(例如旨在減少治療的副作用的發(fā)生和/或減輕治療的副作用的嚴(yán)重性的藥劑，諸如抗惡心劑，等)。在一些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是放射療法。在一些實(shí)施方案中，所述抗癌療法是手術(shù)。在一些實(shí)施方案中，所述抗癌療法可以是一種或多種本文所述化療劑。任何這些療法可以與本公開(kāi)文本的降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑聯(lián)合施用。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是化療或生長(zhǎng)抑制劑，靶向治療劑，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞，抗體或其抗原結(jié)合片段，抗體-藥物綴合物，血管發(fā)生抑制劑，抗瘤劑，癌癥疫苗，佐劑，及其組合。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是化療或生長(zhǎng)抑制劑。例如，化療或生長(zhǎng)抑制劑可以包括烷化劑，蒽環(huán)類(lèi)抗生素，抗激素劑，芳香酶抑制劑，抗雄激素，蛋白質(zhì)激酶抑制劑，脂質(zhì)激酶抑制劑，反義寡核苷酸，核酶，抗代謝物，拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，細(xì)胞毒劑或抗腫瘤抗生素，蛋白酶體抑制劑，抗微管劑，egfr拮抗劑，類(lèi)視黃醇，酪氨酸激酶抑制劑，組蛋白脫乙酰酶抑制劑，及其組合。

化療劑的例子可以包括厄洛替尼(erlotinib)(genentech/osipharm.)，硼替佐米(bortezomib)(millenniumpharm.)，雙硫侖(disulfiram)，沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶精(epigallocatechingallate)，salinosporamidea，carfilzomib，17-aag(格爾德霉素(geldanamycin))，根赤殼菌素(radicicol)，乳酸脫氫酶a(ldh-a)，氟維司群(fulvestrant)(astrazeneca)，舒尼替尼(sunitib)(pfizer/sugen)，來(lái)曲唑(letrozole)(novartis)，甲磺酸伊馬替尼(imatinibmesylate)(novartis)，finasunate(novartis)，奧沙利鉑(oxaliplatin)(sanofi)，5-fu(5-氟尿嘧啶)，甲酰四氫葉酸(leucovorin)，雷帕霉素(rapamycin)(西羅莫司(sirolimus)，wyeth)，拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016，glaxosmithkline)，lonafamib(sch66336)，索拉非尼(sorafenib)(bayerlabs)，吉非替尼(gefitinib)(astrazeneca)，ag1478，磺酸烷基酯類(lèi)(alkylsulfonates)，諸如白消安(busulfan)，英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶類(lèi)(aziridines)，諸如苯佐替派(benzodopa)，卡波醌(carboquone)，美妥替派(meturedopa)，和烏瑞替派(uredopa)；乙撐亞胺類(lèi)(ethylenimines)和甲基蜜胺類(lèi)(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)，三乙撐蜜胺(triethylenemelamine)，三乙撐磷酰胺(triethylenephosphoramide)，三乙撐硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羥甲蜜胺(trimethylomelamine)；番荔枝內(nèi)酯類(lèi)(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；喜樹(shù)堿(camptothecin)(包括托泊替康(topotecan)和伊立替康(irinotecan))；苔蘚抑素(bryostatin)；callystatin；cc-1065(包括其阿多來(lái)新(adozelesin)，卡折來(lái)新(carzelesin)和比折來(lái)新(bizelesin)合成類(lèi)似物)；隱藻素類(lèi)(cryptophycins)(特別是隱藻素1和隱藻素8)；腎上腺皮質(zhì)類(lèi)固醇類(lèi)(adrenocorticosteroids)，包括潑尼松(prednisone)和潑尼松龍(prednisolone)；醋酸環(huán)丙孕酮(cyproteroneacetate)；5α-還原酶，包括非那雄胺(finasteride)和度他雄胺(dutasteride)；vorinostat,romidepsin,panobinostat,丙戊酸(valproicacid),mocetinostat多拉司他汀(dolastatin)；阿地白介素(aldesleukin),滑石(talc)duocarmycin(包括合成類(lèi)似物，kw-2189和cb1-tm1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑素(spongistatin)；抗生素類(lèi)，諸如烯二炔類(lèi)抗生素(例如加利車(chē)霉素(calicheamicin)，尤其是加利車(chē)霉素γ1i和加利車(chē)霉素ω1i(angewchem.intl.ed.engl.1994,33:183-186)；蒽環(huán)類(lèi)抗生素(dynemicin)，包括dynemicina；二膦酸鹽類(lèi)(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔類(lèi)抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素(aclacinomysins)，放線(xiàn)菌素(actinomycin)，氨茴霉素(authramycin)，偶氮絲氨酸(azaserine)，博來(lái)霉素(bleomycin)，放線(xiàn)菌素c(cactinomycin)，carabicin，洋紅霉素(caminomycin)，嗜癌霉素(carzinophilin)，色霉素(chromomycinis)，放線(xiàn)菌素d(dactinomycin)，柔紅霉素(daunorubicin)，地托比星(detorubicin)，6-二氮-5-氧-l-正亮氨酸，(多柔比星(doxorubicin))，嗎啉代多柔比星，氰基嗎啉代多柔比星，2-吡咯代多柔比星和脫氧多柔比星)，表柔比星(epirubicin)，依索比星(esorubicin)，伊達(dá)比星(idarubicin)，麻西羅霉素(marcellomycin)，絲裂霉素(mitomycin)諸如絲裂霉素c，霉酚酸(mycophenolicacid)，諾拉霉素(nogalamycin)，橄欖霉素(olivomycin)，培洛霉素(peplomycin)，泊非霉素(porfiromycin)，嘌呤霉素(puromycin)，三鐵阿霉素(quelamycin)，羅多比星(rodorubicin)，鏈黑菌素(streptonigrin)，鏈佐星(streptozocin)，殺結(jié)核菌素(tubercidin)，烏苯美司(ubenimex)，凈司他丁(zinostatin)，佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物類(lèi)，諸如甲氨蝶呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(fluorouracil)(5-fu)；葉酸類(lèi)似物，諸如二甲葉酸(denopterin)，甲氨蝶呤，蝶酰三谷氨酸(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類(lèi)似物，諸如氟達(dá)拉濱(fludarabine)，6-巰基嘌呤(mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鳥(niǎo)嘌呤(thioguanine)；嘧啶類(lèi)似物，諸如安西他濱(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6-氮尿苷，卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，依諾他濱(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)；雄激素類(lèi)，諸如卡魯睪酮(calusterone)，丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)，表硫雄醇(epitiostanol)，美雄烷(mepitiostane)，睪內(nèi)酯(testolactone)；抗腎上腺類(lèi)，諸如氨魯米特(aminoglutethimide)，米托坦(mitotane)，曲洛司坦(trilostane)；葉酸補(bǔ)充劑，諸如亞葉酸(frolinicacid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfomithine；依利醋銨(elliptiniumacetate)；epothilone；依托格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼達(dá)明(lonidainine)；美登木素生物堿類(lèi)(maytansinoids)，諸如美登素(maytansine)和安絲菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達(dá)醇(mopidamnol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；噴司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；2-乙基酰肼(ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖復(fù)合物(jhsnaturalproducts,eugene,oreg.)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西索菲蘭(sizofuran)；螺旋鍺(spirogermanium)；細(xì)交鏈孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2′,2″-三氯三乙胺；單端孢菌素類(lèi)(trichothecenes)(尤其是t-2毒素，疣孢菌素(verracurin)a，桿孢菌素(roridin)a和蛇行菌素(anguidine))；烏拉坦(urethan)；長(zhǎng)春地辛(vindesine)；達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛(wèi)矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“ara-c”)；環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)；塞替派(thiotepa)；類(lèi)紫杉醇(taxoids)，例如泰素(taxol)(帕利他塞(paclitaxel)；bristol-myerssquibboncology,princeton,n.j.)，(無(wú)克列莫佛(cremophor)的)，帕利他塞的清蛋白改造的納米顆粒劑型(americanpharmaceuticalpartners,schaumberg,ill.)和泰索帝(多西他塞(docetaxel，doxetaxel)；sanofi-aventis)；苯丁酸氮芥(chloranmbucil)；(吉西他濱(gemcitabine))；6-硫鳥(niǎo)嘌呤(thioguanine)；巰基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；鉑類(lèi)似物，諸如順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)；長(zhǎng)春堿(vinblastine)；依托泊苷(etoposide)(vp-16)；異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；長(zhǎng)春新堿(vincristine)；(長(zhǎng)春瑞濱(vinorelbine))；能滅瘤(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依達(dá)曲沙(edatrexate)；道諾霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；卡培他濱(capecitabine)伊本膦酸鹽(ibandronate)；cpt-11；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑rfs2000；二氟甲基鳥(niǎo)氨酸(dmfo)；類(lèi)視黃酸(retinoids)，諸如視黃酸(retinoicacid)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括烷化劑類(lèi)(alkylatingagents)(包括單功能和雙功能烷化劑)，諸如塞替派(thiotepa)，環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)，氮芥類(lèi)(nitrogenmustards)，諸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)，萘氮芥(chlomaphazine)，膽磷酰胺(chlorophosphamide)，雌莫司汀(estramustine)，異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)，雙氯乙基甲胺(mechlorethamine)，鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)，美法侖(melphalan)，新氮芥(novembichin)，苯芥膽甾醇(phenesterine)，潑尼莫司汀(prednimustine)，曲磷胺(trofosfamide)，尿嘧啶氮芥(uracilmustard)；亞硝脲類(lèi)(nitrosoureas)，諸如卡莫司汀(carmustine)，氯脲菌素(chlorozotocin)，福莫司汀(fotemustine)，洛莫司汀(lomustine)，尼莫司汀(nimustine)，和雷莫司汀(ranimnustine)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括蒽環(huán)類(lèi)抗生素諸如柔紅霉素(daunorubicin)，多柔比星(doxorubicin)，表柔比星(epirubicin)，伊達(dá)比星(idarubicin)，米托蒽醌(mitoxantrone)，戊柔比星(valrubicin)，及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括抗雌激素類(lèi)和選擇性雌激素受體調(diào)控物類(lèi)(serm)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括檸檬酸他莫昔芬)，雷洛昔芬(raloxifene)，屈洛昔芬(droloxifene)，艾多昔芬(iodoxyfene)，4-羥基他莫昔芬，曲沃昔芬(trioxifene)，那洛昔芬(keoxifene)，ly117018，奧那司酮(onapristone)，和(檸檬酸托瑞米芬(toremifinecitrate))；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括抑制在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素生成的酶芳香酶的芳香酶抑制劑類(lèi)，諸如例如4(5)-咪唑，氨魯米特(aminoglutethimide)，(醋酸甲地孕酮(megestrolacetate))，(依西美坦(exemestane)；pfizer)，福美坦(formestanie)，法倔唑(fadrozole)，(伏羅唑(vorozole))，(來(lái)曲唑(letrozole)；novartis)，和(阿那曲唑(anastrozole)；astrazeneca)；替莫唑胺(temozolomide)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括抗激素劑諸如抗雄激素類(lèi)，諸如氟他米特(flutamide)，尼魯米特(nilutamide)，比卡米特(bicalutamide)，亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；布舍瑞林(buserelin)，曲普瑞林(tripterelin)，醋酸甲羥孕酮(medroxyprogesteroneacetate)，己烯雌酚(diethylstilbestrol)，倍美力(premarin)，氟甲睪酮(fluoxymesterone)，全反式視黃酸，芬維a胺(fenretinide)，以及曲沙他濱(troxacitabine)(一種1,3-二氧戊環(huán)核苷胞嘧啶類(lèi)似物)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括蛋白質(zhì)激酶抑制劑類(lèi)，脂質(zhì)激酶抑制劑類(lèi)，或反義寡核苷酸，特別是那些抑制牽涉異常細(xì)胞增殖的信號(hào)傳導(dǎo)途經(jīng)中的基因表達(dá)的，諸如例如pkc-α，ralf和h-ras。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括核酶，諸如vegf表達(dá)抑制劑(例如)和her2表達(dá)抑制劑。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括細(xì)胞毒劑或抗腫瘤抗生素，諸如放線(xiàn)菌素d(dactinomycin)，放線(xiàn)菌素(actinomycin)，博來(lái)霉素(bleomycins)，普卡霉素(plicamycin)，絲裂霉素(mitomycins)諸如絲裂霉素c，及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括蛋白酶體抑制劑，諸如硼替佐米(bortezomib)(millenniumpharm.)，epoxomicins，諸如carfilzomib(onyxpharm.)，marizomib(npi-0052)，mln2238，cep-18770，oprozomib，及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括抗微管劑，諸如長(zhǎng)春花生物堿類(lèi)(vincaalkaloids)，包括長(zhǎng)春新堿(vincristine)，長(zhǎng)春堿(vinblastine)，長(zhǎng)春地辛(vindesine)，和長(zhǎng)春瑞濱(vinorelbine)；紫杉烷類(lèi)(taxanes)，包括帕利他塞(paclitaxel)和多西他塞(docetaxel)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括“egfr拮抗劑”，其指結(jié)合egfr或以其它方式直接與egfr相互作用并阻止或降低其信號(hào)傳導(dǎo)活性的化合物，其另外還稱(chēng)作“egfri.”。此類(lèi)藥劑的例子包括結(jié)合egfr的抗體和小分子。結(jié)合egfr的抗體的例子包括mab579(atcccrlhb8506)，mab455(atcccrlhb8507)，mab225(atcccrl8508)，mab528(atcccrl8509)(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利no.4,943,533，mendelsohn等人)及其變體，諸如嵌合化的225(c225或西妥昔單抗；)和重構(gòu)的人225(h225)(參見(jiàn)wo96/40210，imclonesystemsinc.)；imc-11f8，一種完全人的egfr靶向抗體(imclone)；結(jié)合ii型突變體egfr的抗體(美國(guó)專(zhuān)利no.5,212,290)；結(jié)合egfr的人源化和嵌合抗體，如美國(guó)專(zhuān)利no.5,891,996中所述；和結(jié)合egfr的人抗體，諸如abx-egf或帕尼單抗(panitumumab)(參見(jiàn)wo98/50433，abgenix/amgen)；emd55900(stragliottoetal.,eur.j.cancer32a:636-640(1996))；emd7200(matuzumab)，一種針對(duì)egfr且與egf和tgf-α二者競(jìng)爭(zhēng)egfr結(jié)合的人源化egfr抗體(emd/merck)；人egfr抗體，humax-egfr(genmab)；稱(chēng)作e1.1，e2.4，e2.5，e6.2，e6.4，e2.11，e6.3和e7.6.3且描述在us6,235,883中的完全人抗體；mdx-447(medarexinc)；和mab806或人源化mab806(johnsetal.,j.biol.chem.279(29):30375-30384(2004))?？筫gfr抗體可與細(xì)胞毒劑綴合，由此產(chǎn)生免疫綴合物(參見(jiàn)例如ep659,439a2，merckpatentgmbh)。egfr拮抗劑包括小分子，諸如美國(guó)專(zhuān)利no.5,616,582，5,457,105，5,475,001，5,654,307，5,679,683，6,084,095，6,265,410，6,455,534，6,521,620，6,596,726，6,713,484，5,770,599，6,140,332，5,866,572，6,399,602，6,344,459，6,602,863，6,391,874，6,344,455，5,760,041，6,002,008，和5,747,498，以及pct公開(kāi)文本wo98/14451，wo98/50038，wo99/09016，和wo99/24037中描述的化合物。具體的小分子egfr拮抗劑包括osi-774(cp-358774，厄洛替尼(erlotinib)，genentech/osipharmaceuticals)；pd183805(ci1033，2-丙烯酰胺，n-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-，二氫氯化物，pfizerinc.)；zd1839，吉非替尼(gefitinib)4-(3’-氯-4’-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉，astrazeneca)；zm105180((6-氨基-4-(3-甲基苯基-氨基)-喹唑啉，zeneca)；bibx-1382(n8-(3-氯-4-氟-苯基)-n2-(1-甲基-哌啶-4-基)-嘧啶并[5,4-d]嘧啶-2,8-二胺，boehringeringelheim)；pki-166((r)-4-[4-[(1-苯基乙基)氨基]-1h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚)；(r)-6-(4-羥基苯基)-4-[(1-苯基乙基)氨基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶)；cl-387785(n-[4-[(3-溴苯基)氨基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔酰胺)；ekb-569(n-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺)(wyeth)；ag1478(pfizer)；ag1571(su5271；pfizer)；雙重egfr/her2酪氨酸激酶抑制劑，諸如拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016或n-[3-氯4-[(3氟苯基)甲氧基]苯基]-6[5[[[2甲基磺?；?乙基]氨基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺)。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括酪氨酸激酶抑制劑，包括前一段中提到的egfr靶向藥物；小分子her2酪氨酸激酶抑制劑，諸如可從takeda獲得的tak165；cp-724,714，一種口服erbb2受體酪氨酸激酶選擇性抑制劑(pfizer和osi)；優(yōu)先結(jié)合egfr但抑制her2和egfr過(guò)表達(dá)細(xì)胞二者的雙重her抑制劑，諸如ekb-569(可從wyeth獲得)；拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016；可從glaxo-smithkline獲得)，一種口服her2和egfr酪氨酸激酶抑制劑；pki-166(可從novartis獲得)；泛her抑制劑，諸如卡奈替尼(canertinib)(ci-1033；pharmacia)；raf-1抑制劑，諸如可從isispharmaceutica1s獲得的，抑制raf-1信號(hào)傳導(dǎo)的反義藥劑isis-5132；非her靶向tk抑制劑，諸如甲磺酸伊馬替尼(可從glaxosmithkline獲得)；多靶向酪氨酸激酶抑制劑，諸如舒尼替尼(sunitinib)(可從pfizer獲得)；vegf受體酪氨酸激酶抑制劑，諸如瓦他拉尼(vatalanib)(ptk787/zk222584，可從novartis/scheringag獲得)；mapk胞外調(diào)控激酶i抑制劑ci-1040(可從pharmacia獲得)；喹唑啉類(lèi)，諸如pd153035，4-(3-氯苯胺基)喹唑啉；吡啶并嘧啶類(lèi)；嘧啶并嘧啶類(lèi)；吡咯并嘧啶類(lèi)，諸如cgp59326，cgp60261和cgp62706；吡唑并嘧啶類(lèi)，4-(苯基氨基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶類(lèi)；姜黃素(二阿魏酰甲烷，4,5-雙(4-氟苯胺基)-酞酰亞胺)；含有硝基噻吩模塊的tyrphostine；pd-0183805(warner-lamber)；反義分子(例如那些與編碼her的核酸結(jié)合的反義分子)；喹喔啉類(lèi)(美國(guó)專(zhuān)利no.5,804,396)；tryphostins(美國(guó)專(zhuān)利no.5,804,396)；zd6474(astrazeneca)；ptk-787(novartis/scheringag)；泛her抑制劑，諸如ci-1033(pfizer)；affinitac(isis3521；isis/lilly)；甲磺酸伊馬替尼pki166(novartis)；gw2016(glaxosmithkline)；ci-1033(pfizer)；ekb-569(wyeth)；semaxinib(pfizer)；zd6474(astrazeneca)；ptk-787(novartis/scheringag)；inc-1c11(imclone)，雷帕霉素(西羅莫司，)；或任何下列專(zhuān)利公開(kāi)文本中描述的：美國(guó)專(zhuān)利no.5,804,396；wo1999/09016(americancyanamid)；wo1998/43960(americancyanamid)；wo1997/38983(warnerlambert)；wo1999/06378(warnerlambert)；wo1999/06396(warnerlambert)；wo1996/30347(pfizer,inc)；wo1996/33978(zeneca)；wo1996/3397(zeneca)和wo1996/33980(zeneca)。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括類(lèi)視黃醇，諸如視黃酸，及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括抗代謝物。抗代謝物的例子可以包括葉酸類(lèi)似物和抗葉酸，諸如二甲葉酸(denopterin)，甲氨蝶呤(methotrexate)，蝶酰三谷氨酸(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類(lèi)似物，諸如氟達(dá)拉濱(fludarabine)，6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鳥(niǎo)嘌呤(thioguanine)；嘧啶類(lèi)似物，諸如5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)(5-fu)，安西他濱(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6-氮尿苷(6-azauridine)，卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，依諾他濱(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)；核苷類(lèi)似物；和核苷酸類(lèi)似物。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑。拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的例子可以包括拓?fù)洚悩?gòu)酶1抑制劑，諸如和rmrh；拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑，諸如多柔比星(doxorubicin)，表柔比星(epirubicin)，依托泊苷(etoposide)，和博來(lái)霉素(bleomycin)；和拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑rfs2000。

在一些實(shí)施方案中，化療劑可以包括組蛋白脫乙酰酶抑制劑，諸如vorinostat，romidepsin，belinostat，mocetinostat，丙戊酸，panobinostate，及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

化療劑還包括氫化可的松(hydrocortisone)，醋酸氫化可的松(hydrocortisoneacetate)，醋酸可的松(cortisoneacetate)，替可的松匹伐酯(tixocortolpivalate)，曲安奈德(triamcinoloneacetonide)，曲安西龍醇(triamcinolonealcohol)，莫米松(mometasone)，安西奈德(amcinonide)，布地奈德(budesonide)，地奈德(desonide)，fluocinonide，fluocinoloneacetonide，倍他米松(betamethasone)，倍他米松磷酸鈉(betamethasonesodiumphosphate)，地塞米松(dexamethasone)，地塞米松磷酸鈉(dexamethasonesodiumphosphate)，氟可龍(fluocortolone)，氫化可的松-17-丁酸鹽(hydrocortisone-17-butyrate)，氫化可的松-17-戊酸鹽(hydrocortisone-17-valerate)，aclometasonedipropionate，戊酸倍他米松(betamethasonevalerate)，二丙酸倍他米松(betamethasonedipropionate)，潑尼卡酯(prednicarbate)，氯倍他松-17-丁酸鹽(clobetasone-17-butyrate)，氯倍他松-17-丙酸鹽(clobetasol-17-propionate)，己酸氟考龍(fluocortolonecaproate)，特戊酸氟考龍(fluocortolonepivalate)和醋酸氟甲叉龍(fluprednideneacetate)；免疫選擇性抗炎肽(imsaid)，諸如苯丙氨酸-谷氨酰胺-甘氨酸(feg)及其d-異構(gòu)體形式(feg)(imulanbiotherapeutics,llc)；抗風(fēng)濕藥物，諸如硫唑嘌呤(azathioprine)，環(huán)孢素(ciclosporin)(環(huán)孢霉素(cyclosporine)a)，d-青霉胺，金鹽，羥氯喹，來(lái)氟米特(leflunomide)米諾環(huán)素(minocycline)，柳氮磺吡啶(sulfasalazine)，腫瘤壞死因子α(tnfα)阻斷劑，諸如依那西普(etanercept)(enbrel)，英夫利昔單抗(infliximab)(remicade)，阿達(dá)木單抗(adalimumab)(humira)，certolizumabpegol(cimzia)，golimumab(simponi)，白介素-1(il-1)阻斷劑，諸如阿那白滯素(anakinra)(kineret)，t細(xì)胞共刺激阻斷劑，諸如abatacept(orencia)，白介素-6(il-6)阻斷劑，諸如tocilizumab白介素-13(il-13)阻斷劑，諸如lebrikizumab；干擾素α(ifn)阻斷劑，諸如rontalizumab；β7-整聯(lián)蛋白阻斷劑，諸如rhumabbeta7；ige途徑阻斷劑，諸如抗m1prime；分泌型同三聚lta3和膜結(jié)合型異三聚lta1/β2阻斷劑，諸如抗淋巴毒素α(lta)；放射性同位素，例如at²¹¹，i¹³¹，i¹²⁵，y⁹⁰，re¹⁸⁶，re¹⁸⁸，sm¹⁵³，bi²¹²，p³²，pb²¹²和lu放射性同位素；混雜調(diào)查性藥劑，諸如thioplatin，ps-341，丁酸苯酯，et-18-och3，或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(l-739749，l-744832；多酚，諸如槲皮素(quercetin)，白藜蘆醇(resveratrol)，piceatannol，沒(méi)食子酸表沒(méi)食子兒茶精(epigallocatechinegallate)，茶黃素(theaflavin)，黃烷醇(flavanol)，原花青素(procyanidins)，白樺脂酸(betulinicacid)及其衍生物；自噬抑制劑，諸如氯喹；δ-9-四氫大麻酚(tetrahydrocannabinol)(屈大麻酚(dronabinol)，)；β-拉帕醌(lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素類(lèi)(colchicines)；白樺脂酸(betulinicacid)；乙酰喜樹(shù)堿，東莨菪亭(scopolectin)，和9-氨基喜樹(shù)堿)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；替加氟(tegafur)貝沙羅汀(bexarotene)二膦酸鹽類(lèi)(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)(例如或)，依替膦酸鈉(etidronate)ne-58095，唑來(lái)膦酸/唑來(lái)膦酸鹽(zoledronicacid/zoledronate)阿倫膦酸鹽(alendronate)帕米膦酸鹽(pamidronate)替魯膦酸鹽(tiludronate)或利塞膦酸鹽(risedronate)和表皮生長(zhǎng)因子受體(egf-r)；疫苗，諸如疫苗；哌立福辛(perifosine)，cox-2抑制劑(例如塞來(lái)考昔(celecoxib)或艾托考昔(etoricoxib))，蛋白體抑制劑(例如ps341)；cci-779；tipifarnib(r11577)；orafenib，abt510；bcl-2抑制劑，諸如oblimersensodiumpixantrone；法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，諸如lonafarnib(sch6636,sarasar^tm)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物；以及兩種或更多種上述各項(xiàng)的組合，諸如chop(環(huán)磷酰胺，多柔比星，長(zhǎng)春新堿，和潑尼松龍聯(lián)合療法的縮寫(xiě))和folfox(奧沙利鉑(eloxatin^tm)聯(lián)合5-fu和亞葉酸的治療方案的縮寫(xiě))。

化療劑還可以包括具有止痛，退熱和消炎效果的非類(lèi)固醇消炎藥。nsaid包括酶環(huán)氧合酶的非選擇性抑制劑。nsaid的具體例子包括阿司匹林(aspirin)，丙酸衍生物諸如布洛芬(ibuprofen)，非諾洛芬(fenoprofen)，酮洛芬(ketoprofen)，氟比洛芬(flurbiprofen)，奧沙普秦(oxaprozin)和荼普生(naproxen)，乙酸衍生物諸如吲哚美辛(indomethacin)，舒林酸(sulindac)，依托度酸(etodolac)，雙氯芬酸(diclofenac)，烯醇酸衍生物諸如吡羅昔康(piroxicam)，美洛昔康(meloxicam)，替諾昔康(tenoxicam)，屈惡昔康(droxicam)，氯諾昔康(lornoxicam)和伊索昔康(isoxicam)，滅酸衍生物諸如甲滅酸(mefenamicacid)，甲氯芬那酸(meclofenamicacid)，氟芬那酸(flufenamicacid)，托芬那酸(tolfenamicacid)，和cox-2抑制劑諸如塞來(lái)考昔(celecoxib)，依托考昔(etoricoxib)，羅美考昔(lumiracoxib)，帕瑞考昔(parecoxib)，羅非考昔(rofecoxib)，羅非昔布(rofecoxib)，和伐地考昔(valdecoxib)。nsaid可被指示用于諸如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，炎性關(guān)節(jié)病，強(qiáng)直性脊柱炎，銀屑病關(guān)節(jié)炎，萊特爾氏綜合征，急性痛風(fēng)，痛經(jīng)，骨轉(zhuǎn)移疼痛，頭痛和偏頭痛，手術(shù)后疼痛，由于炎癥和組織損傷引起的輕至中度疼痛，發(fā)熱，腸梗阻，和腎絞痛等疾患的癥狀緩解。

“生長(zhǎng)抑制劑”在用于本文時(shí)指在體外或在體內(nèi)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物或組合物。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)領(lǐng)會(huì)，許多藥劑(諸如上文所述那些中的許多)可歸類(lèi)為化療劑和生長(zhǎng)抑制劑二者。在一個(gè)實(shí)施方案中，生長(zhǎng)抑制劑是阻止或降低表達(dá)抗體所結(jié)合的抗原的細(xì)胞增殖的生長(zhǎng)抑制性抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，生長(zhǎng)抑制劑可以是顯著降低處于s期的細(xì)胞百分比的藥劑。生長(zhǎng)抑制劑的例子可包括阻斷細(xì)胞周期行進(jìn)(處于s期以外的位置)的藥劑，諸如誘導(dǎo)g1停滯和m期停滯的藥劑。經(jīng)典的m期阻斷劑包括長(zhǎng)春花生物堿類(lèi)(vincaalkaloids)(長(zhǎng)春新堿(vincristine)和長(zhǎng)春堿(vinblastine))，紫杉烷類(lèi)(taxanes)，和拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑諸如多柔比星(doxorubicin)，表柔比星(epirubicin)，依托泊苷(etoposide)和博來(lái)霉素(bleomycin)。那些阻滯g1的藥劑也溢出進(jìn)入s期停滯，例如dna烷化劑類(lèi)諸如他莫昔芬(tamoxifen)，潑尼松(prednisone)，達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)，雙氯乙基甲胺(mechlorethamine)，順鉑(cisplatin)，甲氨蝶呤(methotrexate)，5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)和ara-c。更多信息可參見(jiàn)mendelsohn和israel編，《themolecularbasisofcancer》，第1章，題為“cellcycleregulation,oncogenes,andantineoplasticdrugs”，murakami等人，wbsaunders，philadelphia，1995，例如第13頁(yè)。紫杉烷類(lèi)(帕利他賽(paclitaxel)和多西他賽(docetaxel))是衍生自紫杉樹(shù)的抗癌藥。衍生自歐洲紫杉的多西他賽(rhone-poulencrorer)是帕利他賽(bristol-myerssquibb)的半合成類(lèi)似物。帕利他賽和多西他賽促進(jìn)由微管蛋白二聚體裝配成微管并通過(guò)防止解聚使微管穩(wěn)定，導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞中有絲分裂的抑制。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是靶向治療劑。例如，靶向治療劑可以包括b-raf抑制劑，mek抑制劑，k-ras抑制劑，c-met抑制劑，alk抑制劑，磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑，akt抑制劑，mtor抑制劑，雙重磷脂酰肌醇3-激酶/mtor抑制劑，及其組合。如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)“抑制劑”以最廣義使用，涵蓋干擾其靶物的生物學(xué)活性的任何小分子，蛋白質(zhì)，或其它大分子。

在一些實(shí)施方案中，靶向治療劑可以包括b-raf抑制劑，諸如vemurafenib(也稱(chēng)作)，dabrafenib(也稱(chēng)作)，和erlotinib(也稱(chēng)作)；mek抑制劑，諸如mek1(也稱(chēng)作map2k1)或mek2(也稱(chēng)作map2k2)的抑制劑，cobimetinib(也稱(chēng)作gdc-0973或xl-518)，和trametinib(也稱(chēng)作)；k-ras抑制劑；c-met抑制劑，諸如onartuzumab(也稱(chēng)作metmab)；alk抑制劑，諸如af802(也稱(chēng)作ch5424802或alectinib)；磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)抑制劑，諸如idelalisib(也稱(chēng)作gs-1101或cal-101)，bkm120，和perifosine(也稱(chēng)作krx-0401)；akt抑制劑，諸如gsk690693，mk2206，和gdc-0941；mtor抑制劑，諸如sirolimus(也稱(chēng)作雷帕霉素)，temsirolimus(也稱(chēng)作cci-779或)，everolimus(也稱(chēng)作rad001)，ridaforolimus(也稱(chēng)作ap-23573，mk-8669，或deforolimus)，osi-027，azd8055，和ink128；和雙重磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/mtor抑制劑，諸如xl765，gdc-0980，bez235(也稱(chēng)作nvp-bez235)，bgt226，gsk2126458，pf-04691502，和pf-05212384(也稱(chēng)作pki-587)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞。如本文中使用的，嵌合抗原受體(或car)可以指當(dāng)在t細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，對(duì)t細(xì)胞賦予car特異性的對(duì)感興趣抗原特異性的任何工程化改造的受體。一旦使用標(biāo)準(zhǔn)分子技術(shù)創(chuàng)建，可以將表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞導(dǎo)入患者中，如使用諸如過(guò)繼性細(xì)胞轉(zhuǎn)移等技術(shù)。例如，表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞可表達(dá)顯性-負(fù)tgfβ受體，例如顯性-負(fù)tgfβii型受體。使用表達(dá)嵌合抗原受體的t細(xì)胞和顯性-負(fù)tgfβ受體的治療的例子包括hercreem方案(參見(jiàn)例如clinicaltrials.govidentifiernct00889954)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是抗體或其抗原結(jié)合片段。例如，抗體或其抗原結(jié)合片段可以包括alemtuzumab(campath)，bevacizumab(genentech)；cetuximab(imclone)；panitumumab(amgen)，rituximab(genentech/biogenidec)，pertuzumab(2c4，genentech)，trastuzumab(genentech)，tositumomab(bexxar，corixia)，抗體-藥物綴合物，gemtuzumabozogamicin(wyeth)，及其組合。另外的與本發(fā)明的化合物組合的具有作為藥劑的治療潛力的人源化單克隆抗體包括：apolizumab，aselizumab，atlizumab，bapineuzumab，bivatuzumabmertansine，cantuzumabmertansine，cedelizumab，certolizumabpegol，cidfusituzumab，cidtuzumab，clivatuzumab，daclizumab，eculizumab，efalizumab，epratuzumab，erlizumab，felvizumab，fontolizumab，gemtuzumabozogamicin，inotuzumabozogamicin，labetuzumab，lintuzumab，matuzumab，mepolizumab，motavizumab，motovizumab，natalizumab，nimotuzumab，nolovizumab，numavizumab，ocrelizumab，omalizumab，palivizumab，pascolizumab，pecfusituzumab，pertuzumab，pexelizumab，ralivizumab，ranibizumab，reslivizumab，reslizumab，resyvizumab，ruplizumab，sibrotuzumab，siplizumab，sontuzumab，tacatuzumabtetraxetan，tadocizumab，talizumab，tefibazumab，tocilizumab，toralizumab，tucotuzumabcelmoleukin，tucusituzumab，umavizumab，urtoxazumab，ustekinumab，visilizumab，抗il-12(例如abt-874/j695，wyethresearch和abbottlaboratories，它是遺傳修飾成識(shí)別il-12p40蛋白的重組唯獨(dú)人序列，全長(zhǎng)igg1λ抗體)，抗il-17(例如，mcaf5352a或rg7624)，及其組合。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是特異性結(jié)合選自下述的靶物的抗體或其抗原結(jié)合片段：cd52，vegf-a，egfr，cd20，her2，hla-drb，cd62l，il-6r，淀粉樣蛋白β，cd44，canag，cd4，tnfα，il-2，cd25，補(bǔ)體c5，cd11a，cd22，cd18，呼吸道合胞病毒f，干擾素γ，cd33，ceacam5，il-5，整聯(lián)蛋白α4，ige，il-4，il-5，cd154，fap，cd2，muc-1，afp，整聯(lián)蛋白αiibβ3，clfa，il6r，cd40l，epcam，志賀樣毒素ii，il-12，il-23，il-17，和cd3。在一些實(shí)施方案中，特異性結(jié)合il-17的抗體或其抗原結(jié)合片段(諸如上文所述抗il-17)可以包括特異性結(jié)合il-17a，il-17b，il-17c，il-17d，il-17e，il-17f，及其組合的抗體或其抗原結(jié)合片段。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是抗體-藥物綴合物。例如，抗體-藥物綴合物可以包括mertansine或單甲基奧瑞司他汀e(mmae)，諸如抗napi2b抗體-mmae綴合物(也稱(chēng)作dnib0600a或rg7599)，trastuzumabemtansine(也稱(chēng)作t-dm1，ado-trastuzumabemtansine，或genentech)，dmuc5754a，bivatuzumabmertansine或cantuzumabmertansine，和靶向內(nèi)皮素b受體(ednbr)的抗體-藥物綴合物，例如與mmae綴合的針對(duì)ednbr的抗體。例如，抗體-藥物綴合物還可以包括加利車(chē)霉素或埃斯波霉素(例如加利車(chē)霉素k或埃斯波霉素a1)，諸如gemtuzumabozogamicin(wyeth)或inotuzumabozogamicin。例如，抗體-藥物綴合物還可以包括放射性同位素螯合劑，例如tetraxetan，諸如tacatuzumabtetraxetan或clivatuzumabtetraxetan的情況，或tiuxetan，如ibritumomabtiuxetan(spectrumpharma.)的情況。術(shù)語(yǔ)“抗體”在涉及本公開(kāi)文本的抗體-藥物綴合物時(shí)以最廣義使用且具體涵蓋單克隆抗體，多克隆抗體，自至少兩種完整抗體形成的多特異性抗體(例如雙特異性抗體)，和抗體片段(例如fab片段，scfv，微型抗體(minibody)，雙抗體，scfv多聚體，或雙特異性抗體片段)，只要它們展現(xiàn)期望的生物學(xué)活性，即特異性結(jié)合抗原和綴合至藥物的能力。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是血管發(fā)生抑制劑。例如，血管發(fā)生抑制劑可以包括vegf拮抗劑，例如vegf-a的拮抗劑，諸如貝伐珠單抗(bevacizumab)(也稱(chēng)作genentech)；和血管生成素2拮抗劑(也稱(chēng)作ang2)，諸如medi3617。在一些實(shí)施方案中，所述血管發(fā)生抑制劑可以包括抗體。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是抗瘤劑。例如，抗瘤劑可以包括靶向csf-1r(也稱(chēng)作m-csfr或cd115)的藥劑，諸如抗csf-1r(也稱(chēng)作imc-cs4)；干擾素，例如干擾素α或干擾素γ，諸如roferon-a(也稱(chēng)作重組干擾素α-2a)；gm-csf(也稱(chēng)作重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子，rhugm-csf，沙格司亭，或)；il-2(也稱(chēng)作阿地白介素或)；il-12；和靶向cd20的抗體，諸如奧奴珠單抗(obinutuzumab)(也稱(chēng)作ga101或)或利妥昔單抗(rituximab)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是癌癥疫苗。例如，癌癥疫苗可以包括肽癌癥疫苗，其在一些實(shí)施方案中是個(gè)性化肽疫苗。在一些實(shí)施方案中，所述肽癌癥疫苗是多價(jià)長(zhǎng)肽疫苗，多重肽疫苗，肽雞尾酒疫苗，雜合肽疫苗，或肽脈沖樹(shù)突細(xì)胞疫苗(參見(jiàn)例如yamadaetal.,cancersci,104:14-21,2013)。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是佐劑。任何增強(qiáng)抗癌癥免疫應(yīng)答(諸如針對(duì)癌癥相關(guān)抗原的)或幫助將癌癥抗原呈遞給免疫系統(tǒng)成分的物質(zhì)可以認(rèn)為是本公開(kāi)文本的抗癌佐劑。

在一些實(shí)施方案中，所述抗癌劑是選自下述的藥劑：tlr激動(dòng)劑，例如poly-iclc(也稱(chēng)作)，lps，mpl，或cpgodn；腫瘤壞死因子(tnf)α；il-1；hmgb1；il-10拮抗劑；il-4拮抗劑；il-13拮抗劑；靶向cx3cl1的治療；靶向cxcl9的治療；靶向cxcl10的治療；靶向ccl5的治療；lfa-1或icam1激動(dòng)劑；和選擇蛋白激動(dòng)劑。

iv.試劑盒

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑和/或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑和/或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中降低或抑制癌癥復(fù)發(fā)或癌癥進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑和/或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中治療腫瘤免疫或延遲腫瘤免疫進(jìn)展的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑組合使用所述抗癌劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含抗癌劑和降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑，和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于使用所述抗癌劑和所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和/或抗癌劑可以包括在所述試劑盒中。

在另一個(gè)方面，提供的是一種試劑盒，其包含降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和包裝插頁(yè)，該包裝插頁(yè)包含關(guān)于與抗癌劑和/或抗癌療法組合使用所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑在具有癌癥的個(gè)體中提高，增強(qiáng)，或刺激免疫應(yīng)答或功能的說(shuō)明書(shū)。任何本文所述降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑或抗癌療法可以包括在所述試劑盒中。

在一些實(shí)施方案中，試劑盒包含裝有本文中描述的一種或多種降低或抑制tigit表達(dá)和/或活性的藥劑和抗癌劑的容器。合適的容器包括例如瓶，管形瓶(例如雙室管形瓶)，注射器(諸如單或雙室注射器)和試管。容器可以自多種材料諸如玻璃或塑料形成。在一些實(shí)施方案中，試劑盒可以包含標(biāo)簽(例如在容器上或與容器聯(lián)合)或包裝插頁(yè)。標(biāo)簽或包裝插頁(yè)可以指示其中含有的化合物可用于或意圖用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展或增強(qiáng)具有癌癥的個(gè)體的免疫功能。試劑盒可以進(jìn)一步包含從商業(yè)和用戶(hù)觀點(diǎn)看期望的其它材料，包括其它緩沖劑，稀釋劑，濾器，針，和注射器。

通過(guò)援引將本文中引用的所有專(zhuān)利，專(zhuān)利申請(qǐng)，文件，和論文完整收入本文。

序列表

<110>基因泰克公司（genentech,inc.）

grogan,janel.

<120>使用tigit抑制劑和抗癌劑治療癌癥的方法

<130>146392027240

<150>us62/025,394

<151>2014-07-16

<160>26

<170>fastseqforwindowsversion4.0

<210>1

<211>17

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>1

lysserserglnserleutyrtyrserglyvallysgluasnleuleu

151015

ala

<210>2

<211>6

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>2

alaserileargphethr

15

<210>3

<211>9

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>3

glnglnglyileasnasnproleuthr

15

<210>4

<211>10

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>4

glyphethrpheserserphethrmethis

1510

<210>5

<211>17

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>5

pheileargserglyserglyilevalphetyralaaspalavalarg

151015

gly

<210>6

<211>10

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>6

argproleuglyhisasnthrpheaspser

1510

<210>7

<211>16

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>7

argserserglnserleuvalasnsertyrglyasnthrpheleuser

151015

<210>8

<211>7

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>8

glyileserasnargpheser

15

<210>9

<211>9

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>9

leuglnglythrhisglnproprothr

15

<210>10

<211>10

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>10

glytyrserphethrglyhisleumetasn

1510

<210>11

<211>17

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>11

leuileileprotyrasnglyglythrsertyrasnglnlysphelys

151015

gly

<210>12

<211>10

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>12

glyleuargglyphetyralametasptyr

1510

<210>13

<211>114

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>13

aspilevalmetthrglnserproserserleualavalserprogly

151015

glulysvalthrmetthrcyslysserserglnserleutyrtyrser

202530

glyvallysgluasnleuleualatrptyrglnglnlysproglygln

354045

serprolysleuleuiletyrtyralaserileargphethrglyval

505560

proaspargphethrglyserglyserglythrasptyrthrleuthr

65707580

ilethrservalglnalagluaspmetglyglntyrphecysglngln

859095

glyileasnasnproleuthrpheglyaspglythrlysleugluile

100105110

lysarg

<210>14

<211>112

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>14

aspvalvalleuthrglnthrproleuserleuservalserphegly

151015

aspglnvalserilesercysargserserglnserleuvalasnser

202530

tyrglyasnthrpheleusertrptyrleuhislysproglyglnser

354045

proglnleuleuilepheglyileserasnargpheserglyvalpro

505560

aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulysile

65707580

serthrilelysprogluaspleuglymettyrtyrcysleuglngly

859095

thrhisglnproprothrpheglyproglythrlysleugluvallys

100105110

<210>15

<211>119

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>15

gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuthrglnproglylys

151015

serleulysleusercysglualaserglyphethrpheserserphe

202530

thrmethistrpvalargglnserproglylysglyleuglutrpval

354045

alapheileargserglyserglyilevalphetyralaaspalaval

505560

argglyargphethrileserargaspasnalalysasnleuleuphe

65707580

leuglnmetasnaspleulyssergluaspthralamettyrtyrcys

859095

alaargargproleuglyhisasnthrpheaspsertrpglyglngly

100105110

thrleuvalthrvalserser

115

<210>16

<211>119

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>16

gluvalglnleuglnglnserglyprogluleuvallysproglythr

151015

sermetlysilesercyslysalaserglytyrserphethrglyhis

202530

leumetasntrpvallysglnserhisglylysasnleuglutrpile

354045

glyleuileileprotyrasnglyglythrsertyrasnglnlysphe

505560

lysglylysalathrleuthrvalasplysserserserthralatyr

65707580

metgluleuleuserleuthrseraspaspseralavaltyrphecys

859095

serargglyleuargglyphetyralametasptyrtrpglyglngly

100105110

thrservalthrvalserser

115

<210>17

<211>336

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>17

gatgttgtgttgactcaaactccactctccctgtctgtcagctttggagatcaagtttct60

atctcttgcaggtctagtcagagtcttgtaaacagttatgggaacacctttttgtcttgg120

tacctgcacaagcctggccagtctccacagctcctcatctttgggatttccaacagattt180

tctggggtgccagacaggttcagtggcagtggttcagggacagatttcacactcaagatc240

agcacaataaagcctgaggacttgggaatgtattactgcttacaaggtacgcatcagcct300

cccacgttcggtcctgggaccaagctggaggtgaaa336

<210>18

<211>357

<212>dna

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>18

gaggtccagctgcaacagtctggacctgagctggtgaagcctggaacttcaatgaagata60

tcctgcaaggcttctggttactcattcactggccatcttatgaactgggtgaagcagagc120

catggaaagaaccttgagtggattggacttattattccttacaatggtggtacaagctat180

aaccagaagttcaagggcaaggccacattgactgtagacaagtcatccagcacagcctac240

atggagctcctcagtctgacttctgatgactctgcagtctatttctgttcaagaggcctt300

aggggcttctatgctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca357

<210>19

<211>25

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>19

gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly

151015

serleuargleusercysalaalaser

2025

<210>20

<211>13

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>20

trpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval

1510

<210>21

<211>32

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>21

argphethrileseralaaspthrserlysasnthralatyrleugln

151015

metasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcysalaarg

202530

<210>22

<211>11

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>22

trpglyglnglythrleuvalthrvalserala

1510

<210>23

<211>23

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>23

aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly

151015

aspargvalthrilethrcys

20

<210>24

<211>15

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>24

trptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuiletyr

151015

<210>25

<211>32

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>25

glyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphethr

151015

leuthrileserserleuglnprogluaspphealathrtyrtyrcys

202530

<210>26

<211>11

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>合成構(gòu)建物

<400>26

pheglyglnglythrlysvalgluilelysarg

1510