本發(fā)明涉及用于預(yù)測對基于EGFR抑制劑的癌癥療法的抗性的發(fā)展的方法。本發(fā)明進(jìn)一步涉及用于為患者選擇適合的癌癥治療方案的方法，并且涉及用于治療某些耐藥的癌癥的方法，連同用于在此類方法中使用的產(chǎn)品。具體而言，本發(fā)明涉及用于預(yù)測對EGFR抑制劑介導(dǎo)的癌癥療法的抗性的發(fā)展的方法和產(chǎn)品，并且涉及用于使用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療此類抗性的癌癥的方法和產(chǎn)品。發(fā)明背景表皮生長因子受體(EGFR)已被鑒定為用于治療多種癌癥(特別是實(shí)體瘤)的靶標(biāo)，因?yàn)樗鼌⑴c調(diào)節(jié)在癌細(xì)胞的增殖和存活中重要的細(xì)胞功能。已經(jīng)在膀胱癌、乳腺癌、惡性膠質(zhì)瘤、頭頸癌、肺癌以及胃癌中觀察到EGFR的表達(dá)增加。癌癥的發(fā)展可例如與EGFR中的激活突變相關(guān)聯(lián)，并且EGFR的高表達(dá)經(jīng)常與預(yù)后不良相關(guān)。EGFR中的激活癌性突變經(jīng)常是外顯子中的體細(xì)胞功能獲得性突變，這些外顯子編碼所述受體的酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者的肺腺癌中確定的此類突變的實(shí)例包括多核苷酸在19號外顯子中的框內(nèi)缺失(涉及Leu-Arg-Glu-Ala四個(gè)氨基酸的消除)，和在21號外顯子中在核苷酸2573處的單核苷酸取代(T→G)，導(dǎo)致在位置858處精氨酸取代亮氨酸(L858R)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些突變能提高對EGFR酪氨酸激酶抑制劑(TKI)的敏感性。因此，靶向EGFR的一線療法通常基于對突變體受體的酪氨酸激酶活性的抑制。針對具有EGFR中的激活突變的患者而建立的一線療法包括EGFRTKI的使用，如吉非替尼(吉非替尼)(IressaTM)、埃羅替尼(埃羅替尼)(TarcevaTM)和阿法替尼(afatinib)(GilotrifTM)。然而，盡管對這些EGFRTKI有初始響應(yīng)，但由于獲得性抗性，顯著比例的患者最終顯示疾病進(jìn)展，這在許多情況下已顯示出與EGFR的額外突變(稱為T790M)相關(guān)聯(lián)。獲得性抗性已經(jīng)導(dǎo)致另外的TKI的發(fā)展，如AZD9291、CO-1686和WZ4002，它們抑制在酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域中具有激活突變的EGFR受體，這些激活突變?nèi)缤怙@子19del和L858R突變、連同臨床前模型中的T790M突變。然而，令人擔(dān)憂的是腫瘤可能最終發(fā)展出對這些藥物的抗性，還限制了它們在患者中的長期有效性。鑒于此，需要確定在癌癥療法中對EGFR抑制劑的獲得性抗性的基本機(jī)制，并嘗試提供可以克服這些另外的抗性機(jī)制的新的治療方法。發(fā)明概述基于具有癌癥細(xì)胞群的實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在一些患者中對EGFR抑制劑介導(dǎo)的癌癥療法的抗性可與神經(jīng)母細(xì)胞瘤RAS病毒癌基因同源基因(NRAS)(該NRAS編碼神經(jīng)母細(xì)胞瘤RAS病毒癌基因同源(NRAS)蛋白質(zhì))中的遺傳異常相關(guān)聯(lián)，通過在所編碼的蛋白質(zhì)中產(chǎn)生密碼子取代的某些突變或通過該NRAS基因的拷貝數(shù)增加顯現(xiàn)出來。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，對EGFR抑制劑介導(dǎo)的癌癥療法的抗性可與E63KNRAS突變和/或G12VNRAS突變相關(guān)聯(lián)。該NRAS蛋白激活細(xì)胞內(nèi)的Ras、Raf、MAP蛋白激酶/胞外信號調(diào)節(jié)的激酶(MEK)、胞外信號調(diào)節(jié)的激酶(ERK)途徑(Ras/Raf/MEK/ERK途徑)。該途徑是EGFR受體的下游，并在調(diào)節(jié)取決于細(xì)胞環(huán)境的各種細(xì)胞功能中起到中心作用，這些細(xì)胞功能包括細(xì)胞增殖、分化、存活、永生化、侵襲和血管發(fā)生(在Peyssonnaux和Eychene，細(xì)胞生物學(xué)(BiologyoftheCell)，2001，93:3-62中綜述)。實(shí)際上，該Ras-依賴的Raf-MEK-MAPK級聯(lián)是關(guān)鍵信號傳導(dǎo)途徑中的一個(gè)，其負(fù)責(zé)將促有絲分裂的信號和侵襲信號從細(xì)胞表面輸送至細(xì)胞核，導(dǎo)致基因表達(dá)和細(xì)胞命運(yùn)的變化。先前許多NRAS突變已被鑒定為在一些癌癥中發(fā)生。然而，先前沒有描述E63K突變，并且先前沒有將本發(fā)明的E63K/G12V突變與肺癌治療中對EGFR抑制的抗性相關(guān)聯(lián)。不希望受到理論的束縛，據(jù)信在嗜EGFR途徑的細(xì)胞中，此途徑的抑制也抑制(下游)Ras/Raf/MEK/ERK途徑。然而，長期用EGFR抑制劑處理的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了可替代性機(jī)制以規(guī)避EGFR抑制(例如，通過在NRAS中激活突變)，這種機(jī)制能夠使細(xì)胞在EGFR信號傳導(dǎo)缺失的情況下生存，并因此允許患者中的疾病進(jìn)展。通過檢測患者中呈現(xiàn)的NRAS突變的一個(gè)或多個(gè)(或者更具體地說，檢測取自患者的適合組織或血樣中的相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)突變)，有可能確定已經(jīng)發(fā)展或預(yù)測要發(fā)展癌癥形式(該癌癥形式對EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法具有抗性)的患者。發(fā)明人已進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，與兩個(gè)親本細(xì)胞系(對EGFR抑制劑和NRAS野生型敏感)相比，并與NRAS野生型的抗EGFR抑制劑細(xì)胞系相比，已經(jīng)發(fā)展對基于本文所描述NRAS突變的EGFR抑制劑具有抗性的細(xì)胞驚人地顯示出對MEK抑制劑(其抑制Ras/Raf/MEK/ERK途徑)的增加的敏感性。出人意料的是，似乎這一增加的敏感性取決于保持EGFR抑制與MEK抑制兩者的組合。不希望受到理論的束縛，據(jù)信在由EGFR抑制劑造成的持續(xù)抑制缺失的情況下，EGFR突變體細(xì)胞可以返回EGFR信號傳導(dǎo)，使得這些細(xì)胞不再對MEK抑制敏感。如在本文所描述的在其癌癥中攜帶NRAS突變的抗EGFR抑制劑癌癥患者可以因此受益于使用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合進(jìn)行的治療。以這種方式，EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合在已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制療法的癌癥患者中提供了有效的后續(xù)(例如二+線)療法。即使在還沒有用EGFR抑制劑治療的患者中，EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合也可以提供針對EGFR相關(guān)癌癥的有效的一線療法。在此類患者中，聯(lián)合治療可以起延遲或防止基于NRAS(和RAS/RAF/MEK/ERK途徑)的激活的抗性的發(fā)展。更具體地是，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)確定，包括NRASE63K、G12V以及G12R突變的抗EGFR-抑制劑的細(xì)胞種群均顯示出對用MEK抑制劑和EGFR抑制劑的組合進(jìn)行的治療的敏感性。如技術(shù)人員所理解并在下文更詳細(xì)地解釋的，G12V和G12R的參與表明在NRAS基因的位置288或289處的任何單個(gè)突變都可以導(dǎo)致對MEK抑制劑與EGFR抑制劑的組合的敏感性。總體而言，技術(shù)人員將理解的是，除了已經(jīng)通過下文實(shí)驗(yàn)性地描述的G12V和G12RNRAS蛋白突變，在NRAS基因(例如，來自cDNA)的位置288或289處可檢測的單突變還對應(yīng)于NRAS蛋白突變G12A、G12D、G12S以及G12C。因此，在本發(fā)明的一方面中，提供了治療包含上述任何突變的存在/檢測的抗EGFR抑制劑的癌癥的方法，其中該治療包括用MEK抑制劑與EGFR抑制劑的組合進(jìn)行的治療。因此，在一方面中，本發(fā)明提供了用于選擇適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療的癌癥患者的方法，該方法包括；(a)測試癌癥患者以確定NRAS突變的存在；并且(b)如果NRAS突變存在，那么將患者選擇為適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療；其中該NRAS突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自E63K、G12V以及G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V和G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼(selumetinib)或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一方面中，本發(fā)明提供了用于選擇適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療的癌癥患者的方法，該方法包括；(a)測試癌癥患者以確定NRAS激活突變的存在；并且(b)如果NRAS激活突變存在，那么將患者選擇為適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療；其中該NRAS激活突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于選擇適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療的癌癥患者的方法，該方法包括；(a)測試癌癥患者以確定NRAS拷貝數(shù)增加的存在；并且(b)如果NRAS拷貝數(shù)增加存在，那么將患者選擇為適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于為癌癥患者選擇適合的癌癥治療方案的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS突變的存在；并且(b)如果NRAS突變存在，那么為患者選擇癌癥治療方案，該方案包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合的提供；其中該NRAS突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自E63K、G12V以及G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V和G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于為癌癥患者選擇適合的癌癥治療方案的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS突變的存在；并且(b)如果NRAS突變存在，那么為患者選擇癌癥治療方案，該方案包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合的提供；其中該NRAS激活突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自E63K、G12V以及G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V、G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S以及G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12V和G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于為癌癥患者選擇適合的癌癥治療方案的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS激活突變的存在；并且(b)如果NRAS激活突變存在，那么為患者選擇癌癥治療方案，該方案包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合的提供；其中該NRAS激活突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于為癌癥患者選擇適合的癌癥治療方案的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS拷貝數(shù)增加的存在；并且(b)如果NRAS拷貝數(shù)增加存在，那么為患者選擇癌癥治療方案，該方案包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合的提供；在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在癌癥患者中預(yù)測對EGFR抑制劑的治療效果的獲得性抗性的發(fā)展的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS激活突變的存在；并且(b)如果NRAS激活突變存在，那么鑒定該癌癥為已經(jīng)具有或?qū)⒁哂锌剐缘陌┌Y；其中該NRAS激活突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在癌癥患者中預(yù)測對EGFR抑制劑的治療效果的獲得性抗性的發(fā)展的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS拷貝數(shù)增加的存在；并且(b)如果NRAS拷貝數(shù)增加存在，那么鑒定該癌癥為已經(jīng)具有或?qū)⒁哂锌剐缘陌┌Y。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在患者中治療癌癥的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS激活突變的存在；并且(b)如果NRAS激活突變存在，那么用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療該患者；其中該NRAS激活突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在患者中治療癌癥的方法，該方法包括：(a)在患者中確定NRAS拷貝數(shù)增加的存在；并且(b)如果NRAS拷貝數(shù)增加存在，那么用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療該患者。在本發(fā)明的任何方面的具體實(shí)施例中，該患者已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制劑的治療。在其他實(shí)施例中，在從患者獲得的適合的生物樣本上進(jìn)行患者體內(nèi)的NRAS基因/NRAS蛋白異常的測定。這個(gè)樣本可以先前被處理或作為治療方法的一部分被處理。這個(gè)樣本將典型地包含腫瘤細(xì)胞、腫瘤核酸或由此衍生的核酸。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于測定包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療治療患有癌癥的患者體內(nèi)的癌癥的有效性的可能性的方法，該方法包括：測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因是否包括至少一種核酸變異，該核酸變異選自：a)一種突變，該突變導(dǎo)致賴氨酸在NRAS的位置63處代替谷氨酸的存在；b)一種突變，該突變導(dǎo)致纈氨酸、精氨酸、丙氨酸、門冬氨酸、絲氨酸、或半胱氨酸在NRAS的位置12處代替谷氨酸的存在；或c)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本，并且其中該至少一種核酸變異的存在表明包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療可能是有效的。因此，本發(fā)明提供了用于測定包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療治療患有癌癥的患者體內(nèi)的癌癥的有效性的可能性的方法，該方法包括：測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因是否包括至少一種核酸變異，該核酸變異選自：a)腺嘌呤在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基441的位置處替換鳥嘌呤的存在；b)在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基288的位置處核酸的存在而不是鳥嘌呤的存在；c)在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基289的位置處核酸的存在而不是鳥嘌呤的存在；或d)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本，并且其中該至少一種核酸變異的存在表明包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療可能是有效的。在一個(gè)實(shí)施例中，該至少一種核酸變異選自：a)腺嘌呤在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基441的位置處替換鳥嘌呤的存在；b)胸腺嘧啶在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基289的位置處替換鳥嘌呤的存在；或c)NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在一個(gè)實(shí)施例中，該至少一種核酸變異選自：a)腺嘌呤在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基441的位置處替換鳥嘌呤的存在；b)胸腺嘧啶在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基289的位置處替換鳥嘌呤的存在；c)胞嘧啶在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基288的位置處替換鳥嘌呤的存在；或d)NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于測定包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療治療患有癌癥的患者體內(nèi)的癌癥的有效性的可能性的方法，該方法包括：測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因是否包括至少一種核酸變異，該核酸變異選自：a)一種突變，該突變導(dǎo)致在NRAS的位置63處賴氨酸取代谷氨酸或在NRAS的位置12處纈氨酸取代甘氨酸；或b)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本，并且其中該至少一種核酸變異的存在表明包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療可能是有效的。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在患有癌癥的患者體內(nèi)治療癌癥的方法，該方法包括：(1)測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因是否包括至少一種核酸變異，該核酸變異選自：a)一種突變，該突變導(dǎo)致在NRAS的位置63處賴氨酸取代谷氨酸或在NRAS的位置12處纈氨酸取代甘氨酸；或b)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；并且(2)如果核酸變異存在，那么用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療該患者；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于測定包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療治療患有癌癥的患者體內(nèi)的癌癥的有效性的可能性的方法，該方法包括：測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因或蛋白質(zhì)是否包括至少一種變異，該變異選自：a)一種突變，該突變導(dǎo)致在NRAS的位置63處賴氨酸取代谷氨酸或在NRAS的位置12處纈氨酸取代甘氨酸；或b)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本，并且其中該至少一種核酸變異的存在表明包括EGFR酪氨酸激酶抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療可能是有效的。在另一方面中，本發(fā)明提供了用于在患有癌癥的患者體內(nèi)治療癌癥的方法，該方法包括：(1)測定獲得自所述患者的生物樣本的NRAS基因或NRAS蛋白是否包括至少一種變異，該變異選自：a)一種突變，該突變導(dǎo)致在NRAS的位置63處賴氨酸取代谷氨酸或在NRAS的位置12處纈氨酸取代甘氨酸；或b)NRAS基因拷貝數(shù)的增加；并且(2)如果該變異存在，那么用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療該患者；其中該生物樣本是分離自包含腫瘤細(xì)胞或來自腫瘤細(xì)胞的核酸的患者的組織或體液的樣本。在一個(gè)具體的實(shí)施例中，在測定來自患者的樣本是否包括至少一種核酸變異之前，將患者用EGFR抑制劑處理。附圖說明圖1：抗性時(shí)間-吉非替尼濃度對PC9細(xì)胞獲取的時(shí)間的散點(diǎn)圖，PC9細(xì)胞在吉非替尼存在下在該濃度下生長，以達(dá)到約80％融合(每次達(dá)到這一融合時(shí)吉非替尼濃度加倍)。圖2：實(shí)例劑量應(yīng)答曲線-針對用司美替尼滴定處理的PC9NRAS(WT)細(xì)胞的實(shí)例劑量應(yīng)答曲線。圖3：實(shí)例劑量應(yīng)答曲線-針對用司美替尼滴定處理的PC9抗AZD9291NRAS(E63K)細(xì)胞的實(shí)例劑量應(yīng)答曲線。圖4：實(shí)例劑量應(yīng)答曲線-針對用司美替尼滴定處理的PC9抗吉非替尼NRASE63K細(xì)胞的實(shí)例劑量應(yīng)答曲線。圖5：實(shí)例劑量應(yīng)答曲線-針對用司美替尼滴定處理的PC9抗阿法替尼NRAS(WT)增加細(xì)胞的實(shí)例劑量應(yīng)答曲線。圖6：實(shí)例劑量應(yīng)答曲線-針對用司美替尼滴定處理的PC9抗AZD9291NRAS(G12V)細(xì)胞的實(shí)例劑量應(yīng)答曲線。圖7：Ras激活測定-蛋白質(zhì)印跡分析顯示，在PC9和具有NRASE63K(PC9AZDR_5細(xì)胞)和G12V(PC9AZDR_2細(xì)胞)突變的PC9抗AZD9291細(xì)胞系中的活性NRAS水平，隨后用或不用160nMAZD929處理這些細(xì)胞系2小時(shí)。圖8：WTNRAS和E63KNRAS的siRNA敲低對下游信號傳導(dǎo)的影響-NRAS或KRAS表達(dá)的48小時(shí)的siRNA介導(dǎo)的敲低對以下項(xiàng)的影響：指示以下蛋白質(zhì)的活性的磷酸化：磷酸化的EGFR(PEGFR)；磷酸化的ERK(PERK)；NRAS；KRAS；以及GAPDH(加載對照)；在PC9細(xì)胞中，在具有NRASE63K突變的PC9抗AZD9291細(xì)胞(AKA.PC9AZDR_5)中；以及在具有NRASE63K突變的PC9抗吉非替尼細(xì)胞(AKA.PC9GR_2)中。圖9：WTNRAS和E63KNRAS的siRNA敲低對增殖的影響-NRAS或KRAS表達(dá)的96小時(shí)的siRNA介導(dǎo)的敲低對以下各項(xiàng)中的細(xì)胞生長的影響：在PC9細(xì)胞中，在具有NRASE63K突變的PC9抗AZD9291細(xì)胞(AKA.PC9AZDR_5)中；以及在具有NRASE63K突變的PC9抗吉非替尼細(xì)胞(AKA.PC9GR_2)中。圖10：PC9細(xì)胞中E63KNRAS的外源過度表達(dá)對由吉非替尼或AZD9291造成的生長抑制的抗性的影響-在100nMAZD9291或300nM吉非替尼不存在或存在下，E63K突變的NRAS的過度表達(dá)對PC9細(xì)胞生長的影響。序列說明在本說明書中提及多種序列。具體而言：SEQIDNO:1提供了EGFR的氨基酸序列；SEQIDNO:2提供了編碼EGFR的cDNA序列；SEQIDNO:3提供了NRAS的氨基酸序列；SEQIDNO:4提供了編碼NRAS的cDNA序列；SEQIDNO:5提供了MEK1的氨基酸序列；SEQIDNO:6提供了編碼MEK1的cDNA序列；SEQIDNO:7提供了MEK2的氨基酸序列；并且SEQIDNO:8提供了編碼MEK2的cDNA序列。發(fā)明詳述在本申請的整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中，單數(shù)包括復(fù)數(shù)，除非上下文另有要求。具體而言，使用不定冠詞的情況下，本說明書應(yīng)被理解為考慮復(fù)數(shù)以及單數(shù)，除非上下文另有要求。除非彼此不相容，否則，本發(fā)明特定方面、本發(fā)明的實(shí)施例或?qū)嵗枋龅奶卣?、整體、性質(zhì)、化合物、化學(xué)部分或基團(tuán)應(yīng)當(dāng)理解為也適用于本文中所述的任何其他方面、實(shí)施例或?qū)嵗Ｒ虼?，本文所述的所有?shí)施例、定義、方面和權(quán)利要求可以彼此以任意組合進(jìn)行組合(考慮到上下文，除非這種組合顯然是不合適的)，以提供另外的實(shí)施例、方面或權(quán)利要求。在本申請的整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中，詞語“包括(comprise)”和“包含(contain)”以及這些詞的變體，如“包含(comprising)”和“包含(comprises)”，可以意指“包括但不限于”，并且一般不排除其他部分、添加劑、組分、整數(shù)或步驟。除非另有所指，否則根據(jù)常規(guī)用法使用技術(shù)術(shù)語。根據(jù)慣例，通常以斜體列舉基因并且以普通文本列舉蛋白質(zhì)。根據(jù)本
技術(shù)領(lǐng)域：
中良好建立的慣例，本文中的基因的名稱以斜體文本書寫，并且蛋白質(zhì)的名稱以普通文本(即，非斜體)書寫。因此，“NRAS”用于表示NRAS蛋白質(zhì)并且“NRAS”用于表示該基因。雖然在本文中已經(jīng)做出努力以根據(jù)此慣例表示NRAS基因或NRAS蛋白質(zhì)，但本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，基于科學(xué)語境，任何對“NRAS”或“NRAS”的引用是否不正確。分子生物學(xué)中常用術(shù)語的定義可以在以下各項(xiàng)中找到：本杰明·列文(BenjaminLewin)，《基因V》(GenesV)，由牛津大學(xué)出版社(OxfordUniversityPress)出版，1994(ISBN0-19-854287-9)；肯德魯(Kendrew)等人(編輯)，《分子生物學(xué)百科全書》(TheEncyclopediaofMolecularBiology)，由布萊克威爾科學(xué)出版公司(BlackwellScienceLtd.)出版，1994(ISBN0-632-02182-9)；以及羅伯特·邁爾(RobertA.Meyers)(編輯)，《分子生物學(xué)與生物技術(shù)：綜合案頭參考》(MolecularBiologyandBiotechnology:aComprehensiveDeskReference)，由VCH出版公司(VCHPublishers，Inc.)出版，1995(ISBN1-56081-569-8)。在本說明書中提及的所有文獻(xiàn)出版物和專利文件在此通過引用并入本說明書。如上文所述的，本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)確定的是，在癌癥患者中對EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法的抗性可以與一種或多種NRAS突變相關(guān)聯(lián)，這些突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。這些突變據(jù)信是NRAS激活突變。這些發(fā)明人還已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在癌癥患者中對EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法的抗性可以與NRAS拷貝數(shù)的增加相關(guān)聯(lián)。此外，這些發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，擁有這些NRAS激活突變或NRAS拷貝數(shù)增加中的一個(gè)或多個(gè)的癌癥患者可有效的用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合進(jìn)行治療，即使該患者展示出(或?qū)⒄故境?對單獨(dú)的EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法的抗性。此外，這些發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，擁有G12RNRAS突變的癌癥患者可有效的用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合進(jìn)行治療，即使該患者展示出(或?qū)⒄故境?對單獨(dú)的EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法的抗性。本發(fā)明允許對癌癥患者的更有效的靶向治療，并且具體而言，允許更有效的癌癥的鑒別和治療(這些癌癥已經(jīng)發(fā)展、或?qū)l(fā)展對EGFR抑制劑的效果的抗性)。因此在一方面中，本發(fā)明的方法可以用于預(yù)測在癌癥患者中對EGFR抑制劑的治療效果的獲得性抗性的發(fā)展。在這樣的方法中，對患者進(jìn)行測試以確定如本文所描述的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加的存在，并且如果患者顯示出擁有根據(jù)本發(fā)明的NRAS激活突變或NRAS拷貝數(shù)增加，那么癌癥被鑒定為正在發(fā)展獲得性抗性。這樣的患者可被描述為對于本文所述的NRAS激活突變或NRAS拷貝數(shù)增加是陽性的。在另一方面中，本發(fā)明的方法可以用于選擇適合用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合治療的癌癥患者。在這樣的方法中，對癌癥患者進(jìn)行測試以確定如本文所描述的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加的存在，并且如果本文所述的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加中的一個(gè)或多個(gè)是存在的，那么將癌癥患者選擇為適合進(jìn)行治療。在一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)檢測以確定NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加的存在時(shí)，該癌癥患者是一個(gè)已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制劑的治療的癌癥患者。本發(fā)明的方法還可以用于為癌癥患者選擇適合的癌癥治療方案。在此方法中，對癌癥患者進(jìn)行測試以確定如本文所述的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加的存在，并且如果NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)增加是存在的，那么選擇包括提供了EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合的治療方案。在一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)檢測以確定NRAS突變的存在時(shí)，該癌癥患者是一個(gè)已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制劑的治療的癌癥患者。癌癥許多癌癥與EGFR的異常或過度表達(dá)和/或其具體配體(例如轉(zhuǎn)化生長因子受體α)的過度表達(dá)相關(guān)(吉利克(Gullick)，BrMedBull.47:87-98，1991；Modijtahedi和迪恩(Dean)，國際腫瘤學(xué)雜志(Int.J.Oncol.)4:277-296，1994；所羅門(Salomon)等人，CritRevOncolHematol.19:183-232，1995)。EGFR的過度表達(dá)已與許多人類癌癥(包括NSCLC)中的不利的預(yù)后相關(guān)聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，“癌癥”是指EGFR相關(guān)聯(lián)的癌癥。用于鑒定和診斷EGFR相關(guān)的癌癥的方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的。舉例來說，各種方法的詳情和它們可以使用的環(huán)境提供于埃里森(Ellison)等人，臨床病理學(xué)雜志(JClinPathol)2013；66:279-89中。例如，EGFR相關(guān)的癌癥可以是已經(jīng)響應(yīng)于或響應(yīng)于用EGFR抑制劑(如本文所述的任何EGFR抑制劑)治療的癌癥。EGFR相關(guān)的癌癥可以是已經(jīng)或?qū)θ绫疚乃龅囊环N或多種EGFR抑制劑的治療效果具有抗性的癌癥。此類抗性可以與EGFR中的突變(如T790M)相關(guān)聯(lián)。EGFR相關(guān)的癌癥可以是(或以前是)至少部分依賴于EGFR信號傳導(dǎo)途徑的癌癥(或腫瘤)。EGFR相關(guān)的癌癥可以與EGFR中的一種或多種突變相關(guān)聯(lián)。此類EGFR突變可以將細(xì)胞轉(zhuǎn)化為癌性狀態(tài)。與癌癥相關(guān)聯(lián)的EGFR突變可以是EGFR激活突變。此類突變通常導(dǎo)致EGFR蛋白的過度表達(dá)和/或過度活性。EGFR的任何活性可以被影響。突變可以例如發(fā)生于核苷酸序列(例如在編碼EGFR的DNA中)中和/或于氨基酸序列(例如在EGFR蛋白的氨基酸序列中)中。突變可以發(fā)生于編碼不同蛋白質(zhì)的核苷酸序列或不同蛋白質(zhì)的氨基酸序列中，其中該突變的作用是產(chǎn)生EGFR蛋白質(zhì)的過度表達(dá)和/或過度活性。典型地，突變是體細(xì)胞突變。突變可以例如是EGFR的酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域中的體細(xì)胞功能獲得性突變。一些這樣的突變增強(qiáng)了癌癥對EGFR酪氨酸激酶抑制劑的敏感性。這些突變通常駐留在EGFR基因的外顯子18-21內(nèi)。參見，例如WO2005/094397和WO2005/118876。這些突變的實(shí)例包括多核苷酸在19號外顯子中的框內(nèi)缺失(涉及亮氨酸-精氨酸-谷氨酸-丙氨酸四個(gè)氨基酸的消除)，和在21號外顯子中在核苷酸2573處的單核苷酸取代(T→G)，導(dǎo)致在位置858處(L858R)精氨酸取代亮氨酸。這些突變特別地與肺癌，例如非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)相關(guān)聯(lián)。L858R是本發(fā)明的上下文中特別感興趣的許多EGFR突變中的一個(gè)，因?yàn)樗?jīng)常與響應(yīng)于EGFR酪氨酸激酶抑制劑(如埃羅替尼、吉非替尼、阿法替尼和AZD9291)的癌癥相關(guān)聯(lián)(另外的詳情包括在本文其他地方)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，EGFR相關(guān)的癌癥可以是與EGFR突變相關(guān)聯(lián)的癌癥，該EGFR突變選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：L858R；和外顯子19缺失突變。另外地或可替代地，EGFR相關(guān)的癌癥可以與EGFRT790M突變相關(guān)聯(lián)。該突變經(jīng)常被視為EGFR中的第二位點(diǎn)突變，發(fā)生在除了第一初級激活突變以外。典型地，該第二突變在用EGFR抑制劑處理期間出現(xiàn)，并且提供對該抑制劑的抗性機(jī)制。該T790M突變具體地與肺癌(例如NSCLC)相關(guān)聯(lián)。AZD9291可以用于EGFR相關(guān)的癌癥的治療，該EGFR相關(guān)的癌癥與外顯子19缺失突變、和/或L858R取代突變、以及任選地T790M抗性突變相關(guān)聯(lián)。EGFR相關(guān)的癌癥的實(shí)例可以包括：非實(shí)體瘤如白血病(例如急性骨髓性白血病)、多發(fā)性骨髓瘤、血液學(xué)惡性腫瘤(例如骨髓增生異常綜合征或骨髓增生綜合征)或淋巴瘤；和實(shí)體瘤和它們的轉(zhuǎn)移如黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肝細(xì)胞(肝)癌、惡性膠質(zhì)瘤、甲狀腺癌、膽管癌、骨癌、胃癌、腦癌/CNS、頭頸癌、肝癌、胃癌、前列腺癌、乳腺癌、腎癌、睪丸癌、卵巢癌、皮膚癌、宮頸癌、肺癌、肌肉癌、神經(jīng)元癌、食管癌、膀胱癌、肺癌、子宮癌、外陰癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、胸膜/腹膜膜癌、唾液腺癌、以及表皮腫瘤。在一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR相關(guān)的癌癥是實(shí)體瘤。在一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR相關(guān)的癌癥是肺癌。在一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR相關(guān)的癌癥是NSCLC。在選自該組的癌癥或這些癌癥的轉(zhuǎn)移的背景下，方法的使用、醫(yī)學(xué)用途、藥物組合物、以及本發(fā)明的其他方面，被認(rèn)為是一個(gè)合適的實(shí)施例。癌癥患者本發(fā)明可以在任何適合的生物體中實(shí)踐。在一方面中，該患者是動(dòng)物或人，例如哺乳動(dòng)物，如溫血?jiǎng)游?。在一方面中，該患者是人。典型地，患者顯示本文所述的EGFR相關(guān)的癌癥的一個(gè)或多個(gè)臨床或臨床前癥狀?；颊呖梢砸呀?jīng)被臨床診斷為正在遭受這樣的癌癥，或被診斷為易患這樣的癌癥。患者可以正在接受或已經(jīng)接受EGFR抑制劑(如EGFRTKI)的癌癥療法?；颊呖梢允且呀?jīng)發(fā)展或可能發(fā)展對本文所述的EGFR抑制劑的療法的獲得性抗性的患者。因此本發(fā)明的方法可以用于提供二線療法或后線療法(subsequentlinetherapy)?？剐院瞳@得性抗性如本文所使用的，對治療的抗性描述了一種臨床情況，其中癌癥(或癌癥患者)不響應(yīng)于治療，或比最初采用該治療時(shí)是更少響應(yīng)的(經(jīng)常稱作獲得性抗性)。獲得性抗性是指一種情況，其中癌癥(或癌癥患者)是最初響應(yīng)于試劑(例如EGFR抑制劑)的治療，但其中隨著時(shí)間的推移，所述癌癥(或患者)變?yōu)楦倩虿豁憫?yīng)于試劑的進(jìn)一步的治療，并且癌癥發(fā)生進(jìn)展。癌癥或癌癥患者可以隨著時(shí)間的推移展示抗性的程度(和響應(yīng)于治療的程度)。響應(yīng)是指治療產(chǎn)生至少一種臨床可檢測的如本文所述的治療效果。如果沒有臨床可檢測的如本文所述的治療效果，那么患者是無響應(yīng)的。治療效果可以例如是如本文所述的抗癌效果。被預(yù)測為正在發(fā)展對根據(jù)本發(fā)明的EGFR抑制劑的獲得性抗性的癌癥是已經(jīng)成為、或?qū)⒊蔀閷GFR抑制劑的治療具有抗性的一種癌癥。治療、療法以及治療效果如本文使用的術(shù)語治療、療法或治療效果包括以下及其組合：(1)抑制，例如延緩癌癥的開始和/或進(jìn)展，例如在維持治療或二級預(yù)防的情況下阻止、減少或延緩癌癥或其至少一種臨床或亞臨床癥狀的發(fā)展或其復(fù)發(fā)；(2)預(yù)防或延緩發(fā)展于受試者中的癌癥的臨床癥狀的出現(xiàn)，該受試者可以被癌癥折磨或易患癌癥但還沒有經(jīng)歷或顯示癌癥的臨床或亞臨床癥狀；和/或(3)緩解和/或治療癌癥(例如，引起癌癥或其臨床或亞臨床癥狀中的至少一種的消退，治療患者或使患者進(jìn)入緩解期)。如本文使用的治療或療法可以包括預(yù)防或預(yù)防處理。因此，例如，本文的治療效果可以是指出現(xiàn)于癌癥患者中的(1)、(2)以及(3)中的一種或多種。本文的治療效果可以是抗癌效果?？拱┬Чǖ幌抻?，腫瘤生長的抑制、腫瘤生長延遲、腫瘤的消退、腫瘤的縮小、停止治療時(shí)腫瘤再生長的時(shí)間增加、疾病進(jìn)展的放緩。本文提及的一線療法中的治療效果可以是指延緩或預(yù)防對EGFR抑制劑介導(dǎo)的療法的獲得性抗性的發(fā)展，該治療效果可以例如，通過本文所述的NRAS突變的發(fā)展來獲得。典型地，治療效果提供了臨床上可檢測的益處。對要治療的受試者或患者的益處可以是在統(tǒng)計(jì)上顯著或至少被患者或醫(yī)師或其他技術(shù)人員可感知的。應(yīng)該理解的是，藥物不一定會(huì)在被給予該藥物的每個(gè)患者中產(chǎn)生臨床效果；因此，在任何個(gè)體患者或甚至在一個(gè)特定的患者群體中，治療可能失敗或僅是部分成功的，并且因此相應(yīng)地理解術(shù)語“治療”、“預(yù)防”和“抑制劑”和同源術(shù)語的含義。術(shù)語“預(yù)防”或“預(yù)防性治療”包括出于養(yǎng)生或者抑制或延遲癌癥的開始和/或進(jìn)展的目的(例如出于降低癌癥發(fā)生的機(jī)會(huì)、或預(yù)防癌癥發(fā)生的目的)而提及的治療或療法。預(yù)防的結(jié)果可以是，例如，養(yǎng)生或延遲的癌癥的開始和/或進(jìn)展。應(yīng)當(dāng)記得，在任何個(gè)體患者或甚至在一個(gè)特定的患者群體中，治療可能失敗，并且應(yīng)相應(yīng)地理解本段。根據(jù)本發(fā)明的癌癥的治療可以通過常規(guī)工具如抗腫瘤效果的程度、應(yīng)答率、疾病進(jìn)展的時(shí)間和/或存活率進(jìn)行評估。針對本文EGFR相關(guān)的癌癥的一線療法是指向先前沒有進(jìn)行治療癌癥的患者使用EGFR抑制劑給予治療。針對本文EGFR相關(guān)的癌癥的二線療法是指向先前沒有進(jìn)行治療癌癥的患者使用EGFR抑制劑給予治療，但其中EGFR相關(guān)的癌癥在用該EGFR抑制劑治療期間已經(jīng)進(jìn)展(或以其他方式成為抗藥的)。針對本文EGFR相關(guān)的癌癥的三線療法是指向先前沒有進(jìn)行治療癌癥的患者(具體而言，先前沒有用兩種不同的療法，例如不同的EGFR抑制劑進(jìn)行治療的患者)給予治療。發(fā)明人相信，本文披露的治療方法和/或醫(yī)學(xué)用途可以，必要時(shí)，在針對EGFR相關(guān)的癌癥的一線、二線、三線或另外的線療法的環(huán)境下是適用的。EGFR/EGFR如本文使用的EGFR是指表皮生長因子受體，一般來說是一種跨膜糖蛋白，該跨膜糖蛋白是蛋白激酶超家族中的一員。EGFR可以是對應(yīng)于要治療的種類的任何種類。在一方面中，EGFR是人EGFR。人EGFR(基因ID:1956)根據(jù)可替代性的、經(jīng)剪接的轉(zhuǎn)錄物以不同同種型存在。如本文使用的EGFR可以指這些同種型中的任何一個(gè)。野生型人EGFR基因序列描述于基因ID:1956中。該EGFR基因可以具有對應(yīng)于基因庫(GenBank)登錄號X00588.1中的cDNA序列的mRNA表達(dá)產(chǎn)物，和具有在UniProtKB/Swiss-ProtP00533.2中的EGFR蛋白質(zhì)氨基酸序列的蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物(這包括在氨基酸1-24處的24個(gè)氨基酸信號序列，該序列在成熟蛋白質(zhì)中被切割)。本文提及的EGFR基因、mRNA、cDNA或EGFR蛋白質(zhì)可以是指這一人基因、mRNA(或?qū)?yīng)的cDNA)或蛋白質(zhì)，當(dāng)上下文允許時(shí)具有另外的突變。本文提及的EGFRmRNA、cDNA或蛋白質(zhì)還可以是指前述的同種型，例如缺乏跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的可溶的同種型，當(dāng)上下文允許時(shí)具有另外的突變。在一些情況下，EGFR可以指以上的一種變體，例如天然存在的野生型變體(例如來自非腫瘤細(xì)胞)。上述內(nèi)容比照適用于非人類物種的EGFR。例如，本文提及的EGFR基因、mRNA或EGFR蛋白質(zhì)可以是指以上人基因、mRNA或蛋白質(zhì)的物種同系物，當(dāng)上下文允許時(shí)具有另外的突變。針對如本文使用的EGFR和EGFR突變進(jìn)行編號的氨基酸序列總體上與以UniProtKB/Swiss-ProtP00533.2(其如以上上述包括在氨基酸1-24處的信號序列)呈現(xiàn)的野生型人類EGFR的氨基酸序列和編號有關(guān)。因此例如，提及T790M突變是指在UniProtKB/Swiss-ProtP00533.2中的1210個(gè)氨基酸序列中的氨基酸790處的T到M的改變。由于使用參比序列，該T790M突變最初被稱作T766M(布蘭奇(Blencke)等人，生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.)278:15435-15440，2003)。類似地，如本文使用的EGFRcDNA序列編號與基因庫X00588.1(具有來自堿基187-3819的蛋白質(zhì)編碼序列)中的野生型EGFRcDNA序列有關(guān)。本文提及的EGFR突變還可以涵蓋出現(xiàn)在具有相同功能作用的非人類物種的EGFR中的對應(yīng)位置處的突變。抑制劑如本文提到的抑制劑可以是，例如多肽、核酸、碳水化合物、脂質(zhì)、小分子量化合物、寡核苷酸、寡肽、siRNA、反義物、重組蛋白、抗體、肽體(peptibody)、或其綴合物或融合蛋白。對于siRNA的綜述，參見米亞沃(Milhavet)O，加里(Gary)DS，馬特森(Mattson)MP，藥理學(xué)評論(PharmacolRev.)2003年12月；55(4):629-48。對于反義物的綜述，參見OpalinskaJB，格維茨(Gewirtz)AM，STKE.科學(xué)(SciSTKE.)2003年10月28日；2003(206)：第47頁。小分子量化合物可以例如是指具有小于2000道爾頓、1000道爾頓、700道爾頓或500道爾頓的分子量的化合物。用于在本發(fā)明中使用的具體的抑制劑是小分子EGFRTKI。EGFR抑制劑EGFR抑制劑通常降低或防止EGFR的表達(dá)和/或活性?？梢酝ㄟ^測定對EGFR表達(dá)和/或活性的抑制影響來鑒別適合的抑制劑。典型地，抑制劑通過在適合的測定中的至少一個(gè)可檢測的量來降低表達(dá)或活性。抑制劑可以，例如，降低表達(dá)或活性至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或至少90％。許多適合的策略是本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知的，通過這些策略EGFR的表達(dá)可以被降低。另外，技術(shù)人員也將清楚的是，許多試劑能夠降低EGFR活性，包括但不限于本說明書中其他地方提供的實(shí)例。任何適合的EGFR活性，例如，酪氨酸激酶活性可被影響。因此在一方面中，EGFR抑制劑可以包括酪氨酸激酶抑制劑(TKI)。酪氨酸激酶活性的抑制可以在任何適合的測定中被確定，如描述于沃德(Ward)等人，化學(xué)醫(yī)學(xué)雜志(J.Med.Chem.)2013,56:7025-7048中的測定。EGFR酪氨酸激酶抑制劑的實(shí)例包括：吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291、CO-1686、WZ4002、PD153035、以及PF00299804。抑制劑可以包括這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，如本文其他地方所描述的。此類抑制劑是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的。確立的EGFRTKI，如吉非替尼、埃羅替尼和阿法替尼可用作對抗患者體內(nèi)的癌癥的一線療法。新近研發(fā)的EGFRTKI，包括AZD9291、CO-1686、WZ4002，有時(shí)可以用以對抗EGFR相關(guān)的癌癥(例如，對抗與初始EGFR激活突變和另外的EGFR突變(如T790M)兩者相關(guān)的癌癥)，EGFR相關(guān)的癌癥中的抗性已經(jīng)發(fā)展至更多確立的EGFRTKI藥物中的一種。以上列出的EGFRTKI中，由吉非替尼；埃羅替尼；阿法替尼；AZD9291；以及CO-1686組成的組代表在本申請的上下文中特別引人關(guān)注的實(shí)例(其中技術(shù)人員理解的是此類EGFRTKI可以各自任選地以藥學(xué)上可接受的鹽的形式使用)。選自該組的EGFRTKI的用途代表本發(fā)明的適合的實(shí)施例。因此，在提及EGFR抑制劑的任何實(shí)施例、方面或權(quán)利要求中，可以形成其他的實(shí)施例、方面和權(quán)利要求，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO1686、或任何其藥學(xué)上可接受的鹽。可以形成其他的實(shí)施例、方面和權(quán)利要求，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、AZD9291和CO1686。吉非替尼EGFR抑制劑可以包括吉非替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。吉非替尼是一種EGFRTKI藥物，該藥物被批準(zhǔn)用于在多個(gè)地區(qū)的晚期NSCLC患者中使用。吉非替尼結(jié)構(gòu)示于以下：吉非替尼也可以通過以下化學(xué)名稱已知：N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉-4-基丙氧基)喹唑啉-4-胺。埃羅替尼EGFR抑制劑可以包括埃羅替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。埃羅替尼是一種用于對抗如本文所述的胰腺癌、肺癌和其他癌癥的EGFRTKI藥物。埃羅替尼結(jié)構(gòu)示于以下：埃羅替尼也可以通過以下化學(xué)名稱已知：N-(3-乙炔基苯基)-6,7-雙(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺。阿法替尼EGFR抑制劑可以包括阿法替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。阿法替尼是一種具體地用于對抗如本文所述的NSCLC的EGFRTKI藥物。該藥物有時(shí)可以用于治療變?yōu)榛蛞呀?jīng)變?yōu)閷τ眉翘婺峄虬Ａ_替尼的治療具有抗性的癌癥。阿法替尼結(jié)構(gòu)示于以下：阿法替尼也可以通過以下化學(xué)名稱已知：N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[[(3S)-四氫-3-呋喃基]氧基]-6-喹唑啉基]-4(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺。AZD9291EGFR抑制劑可以包括AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。AZD9291有時(shí)可以用于治療變?yōu)榛蛞呀?jīng)變?yōu)閷τ肊GFR抑制劑如吉非替尼、埃羅替尼、和/或阿法替尼進(jìn)行的治療具有抗性的癌癥。AZD9291具有以下結(jié)構(gòu)：并且可以通過以下化學(xué)名稱已知：‘N-(2-{2-二甲基氨基乙基-甲基氨基}-4-甲氧基-5-{[4-(1-甲基吲哚-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺’。AZD9291及其藥學(xué)上可接受的鹽披露于國際專利申請?zhí)朠CT/GB2012/051783(公開號WO2013/014448)中，將其內(nèi)容通過引用結(jié)合在此。AZD9291的藥學(xué)上可接受的鹽可以包括本文所描述的任何鹽，例如甲磺酸鹽。CO-1686-還稱為“諾司替尼(rociletinib)”EGFR抑制劑可以包括CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽。Co-1686的化學(xué)結(jié)構(gòu)是：CO-1686可以通過以下化學(xué)名稱已知：N-(3-{[2-{[4-(4-乙?；哙?1-基)-2-甲氧基苯基]氨基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基}苯基)丙-2-烯酰胺。CO-1686的藥學(xué)上可接受的鹽可以，例如，包括HBr鹽。WZ4002是一種有效對抗EGFRT790M的突變型可選擇的EGFR酪氨酸激酶抑制劑。該化合物描述于由周(Zhou)等人的公開物中。(《自然》462，1070-1074；2009)NRAS/NRAS如本文使用的NRAS是指神經(jīng)母細(xì)胞瘤RAS病毒癌基因同系物，并且它由NRAS癌基因編碼。NRAS是Ras基因家族中的一員。哺乳動(dòng)物的Ras基因家族包括Harvey和Kirstenras基因(HRAS和KRAS)、每個(gè)(c-Hras2和c-Kras1)的無活性假基因以及NRAS基因。該RAS蛋白質(zhì)具有GTP-GDP結(jié)合活性和GTP酶活性。NRAS可以是對應(yīng)于要治療的種類的任何種類。在一方面中，NRAS是人NRAS。(野生型)人NRAS(NRAS)基因描述于基因ID：4893中，并且由7個(gè)外顯子(-I、1、II、II、IV、V、VI)組成。野生型人NRAS基因典型地具有對應(yīng)于基因庫登錄號NM_002524中的cDNA序列的mRNA表達(dá)產(chǎn)物，和具有UniProtKB/Swiss-ProtP01111.1中的NRAS蛋白質(zhì)氨基酸序列。本文提及的NRAS基因、mRNA、cDNA或NRAS蛋白質(zhì)可以是指這一人基因、mRNA或?qū)?yīng)的cDNA序列、或蛋白質(zhì)，當(dāng)上下文允許時(shí)具有另外的突變。在一些情況下，NRAS可以指以上的一種變體，例如天然存在的野生型變體。上述內(nèi)容比照適用于非人類物種的NRAS。例如，本文提及的NRAS基因、mRNA、cDNA或NRAS蛋白質(zhì)可以是指上述人基因、mRNA或蛋白質(zhì)的物種同系物，當(dāng)上下文允許時(shí)具有另外的突變。在本文中描述了NRAS氨基酸編號和突變，這與UniProtKB/Swiss-ProtP01111.1中的氨基酸序列相關(guān)。因此，例如，本文提及的NRAS突變E63K是指在UniProtKB/Swiss-ProtP01111.1中的189氨基酸序列中的氨基酸編號63處的谷氨酸(E)到賴氨酸(K)的改變。在基因庫登錄號NM_002524中的NRAScDNA序列中，蛋白質(zhì)編碼序列在核苷酸255-824處示出。該570個(gè)核苷酸共有編碼序列也存在于登錄號CCDS877.1下的CCDS數(shù)據(jù)庫中。本文所述的NRAScDNA序列編號和突變與基因庫登錄號NM_002524中的cDNA序列相關(guān)。本文提及的NRAS突變還可以涵蓋出現(xiàn)在具有相同功能作用的非人類物種的NRAS中的對應(yīng)位置處的突變。NRAS激活突變?nèi)绫疚氖褂玫腘RAS激活突變通常導(dǎo)致NRAS蛋白質(zhì)的過度表達(dá)和/或過度活性。突變可以例如出現(xiàn)在核苷酸序列(例如編碼NRAS的DNA中)中和/或在氨基酸序列(例如在NRAS蛋白質(zhì)序列中)中。本文所述的NRAS突變典型地是體細(xì)胞突變。NRAS的任何活性可被，例如，GTP酶活性影響。本文所述的NRAS激活突變包括：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。本文所述的NRAS激活突變可以自發(fā)地產(chǎn)生癌癥發(fā)展或者它可以在響應(yīng)于癌癥(或患者)的治療(如用EGFR抑制劑)的癌癥(或癌癥患者)中獲得。本文所述的另外的NRAS突變是G12RNRAS突變。NRASE63K突變E63KNRAS突變是指在NRAS蛋白質(zhì)氨基酸序列(SEQIDNO:3)中對應(yīng)于E63的氨基酸位置處的氨基酸從谷氨酸(E)到賴氨酸(K)的改變。氨基酸中的該改變典型地由NRAS基因中的DNA序列中的改變進(jìn)行編碼。典型地，這是在編碼序列(NRAScDNA序列的核苷酸441-443)中的密碼子63中的改變。具體而言，該改變可以導(dǎo)致在NRAScDNA序列中對應(yīng)于堿基441的位置處的從G到A的改變，意味著在對應(yīng)于堿基441至443的位置處從GAG至AAG的改變。(它還可以由雙核堿基取代引起，如在NRAScDNA序列的對應(yīng)于堿基441至443的位置處從GAG至AAA)。NRASG12V突變G12VNRAS突變是指在NRAS蛋白質(zhì)氨基酸序列(SEQIDNo:3)中對應(yīng)于G12的氨基酸位置處的氨基酸序列從甘氨酸(G)到纈氨酸(V)的改變。氨基酸中的該改變典型地由NRAS基因中的DNA序列中的改變進(jìn)行編碼。典型地，這是在編碼序列(NRAScDNA序列的核苷酸288-290)中的密碼子12中的改變。具體而言，該改變可以導(dǎo)致在NRAScDNA序列中對應(yīng)于堿基289的位置處的從G到T的改變，意味著對于堿基288至290的從GGT至GTT的改變。NRASG12R突變G12RNRAS突變是指在NRAS蛋白質(zhì)氨基酸序列(SEQIDNO:3)中對應(yīng)于G12的氨基酸位置處的氨基酸序列從甘氨酸(G)到精氨酸(R)的改變。氨基酸中的該改變典型地由NRAS基因中的DNA序列中的改變進(jìn)行編碼。典型地，這是在編碼序列(NRAScDNA序列的核苷酸288-290)中的密碼子12中的改變。具體而言，該改變可以導(dǎo)致在NRAScDNA序列中對應(yīng)于堿基288的位置處的從G到C的改變，意味著對于堿基288至290的從GGT至CGT的改變。NRAS拷貝數(shù)增加NRAS(N-ras)拷貝數(shù)增加是指DNA中的變化，該變化導(dǎo)致當(dāng)與對照細(xì)胞相比時(shí)NRAS基因的拷貝數(shù)增加的出現(xiàn)。對照細(xì)胞可以是正常的非癌性細(xì)胞或匹配的正常對照細(xì)胞，即取自同一患者的非癌性細(xì)胞/細(xì)胞群。NRAS基因的拷貝數(shù)增加也可以相對于正常情況指示的參比拷貝數(shù)來衡量。例如，擴(kuò)增的突變可以導(dǎo)致與對照細(xì)胞相比至少一個(gè)NRAS基因拷貝數(shù)的增加，如與缺乏拷貝數(shù)增加的細(xì)胞相比至少2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或8個(gè)NRAS基因拷貝數(shù)的增加。基因拷貝數(shù)可以顯示大于1倍、大于2倍、大于3倍或大于4倍的增加。檢測突變和拷貝數(shù)增加根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，針對NRAS激活突變的存在對患者進(jìn)行測試，這些NRAS激活突變選自以下中的任何一個(gè)或多個(gè)：NRASE63K突變；和NRASG12V突變。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，針對NRAS拷貝數(shù)增加的存在對患者進(jìn)行測試?？梢詸z測的突變或拷貝數(shù)增加的適合的技術(shù)包括選自下組的那些，該組由以下各項(xiàng)組成：下一代測序(NGS)；外顯子組測序；等位基因特異擴(kuò)增；以及陣列法基因組比較雜交(aCGH)。更具體地是，在適合的實(shí)施例中，選自NRASE63K突變、NRASG12V突變和NRASG12R突變的NRAS激活突變的存在可以通過以下工具被檢測：NGS、等位基因特異擴(kuò)增或外顯子組測序。在適合的實(shí)施例中，NRAS拷貝數(shù)的增加可以通過CGH被確定。將要理解的是，可以針對此類突變的存在通過在代表突變的患者中測定任何適合的指示物對患者進(jìn)行測試。例如，指示物可以在以下中變化：序列或基因組DNA的量(例如具體的基因或表達(dá)控制元件)；序列或具體的mRNA(或?qū)?yīng)的cDNA)的量；序列或蛋白質(zhì)的量；或蛋白質(zhì)活性，其代表該突變。適當(dāng)?shù)那闆r下，以上中的任何一個(gè)可以通過測定基因組DNA、mRNA(或?qū)?yīng)的cDNA)或蛋白質(zhì)的適合的片段進(jìn)行檢測。針對基因的表達(dá)控制元件是指可操作地連接至一個(gè)基因并且至少部分控制基因表達(dá)的DNA的一段序列，例如啟動(dòng)子或增強(qiáng)子序列。用于檢測以上激活的NRAS突變中的一個(gè)或多個(gè)突變的適合的指示物可以在以下中變化：NRAS基因的序列或針對基因的表達(dá)控制元件；數(shù)量(增加)或表達(dá)自NRAS基因(或與它對應(yīng)的cDNA)的NRASmRNA的序列；數(shù)量(增加)或NRAS蛋白質(zhì)的序列；或NRAS蛋白質(zhì)的活性(增加)。用于檢測NRAS拷貝數(shù)增加的適合的指示物將是存在的NRAS基因的拷貝數(shù)的增加。適當(dāng)?shù)那闆r下，以上中的任何一個(gè)可以通過測定NRAS基因組DNA、mRNA(或?qū)?yīng)的cDNA)或NRAS蛋白質(zhì)的適合的片段進(jìn)行檢測。不希望受到理論的束縛，據(jù)信NRAS突變出現(xiàn)在患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞(典型地是患者體內(nèi)正在治療的腫瘤(之一))的DNA中。因此要測定的DNA、mRNA或蛋白質(zhì)可以是在這樣的腫瘤細(xì)胞中存在的或表達(dá)的DNA、mRNA或蛋白質(zhì)，典型地是NRAS基因組DNA、NRASmRNA、或NRAS蛋白質(zhì)。可以通過任何適合的工具來檢測突變。典型地，該方法包括針對突變的存在測定獲得自患者的樣本(典型地通過測定所描述的適合的指示物)。因此，本發(fā)明的方法可以在體外進(jìn)行。在一些情況下，該方法可以包括從患者獲得適合的樣本?？梢允褂萌魏芜m合的、代表突變的樣本。例如，樣本可以包括是或疑似是癌性的細(xì)胞或組織，或包括癌癥/腫瘤核酸。因此這些方法可以包括測試癌性組織或細(xì)胞以檢測突變的存在。典型地，提及的癌癥是患者正在治療的癌癥。適合的樣本可以通過活組織檢查或其他外科手術(shù)獲得。因此樣本可以是腫瘤活組織檢查。在一些情況下，癌癥細(xì)胞或其DNA可以存在于循環(huán)中并且可以從生物學(xué)流體如血液、血漿、血清或胸腔積液進(jìn)行分離。因此這些方法可以包括測試含有癌細(xì)胞(這些癌細(xì)胞已經(jīng)從腫瘤塊脫離)或來自此類癌細(xì)胞的循環(huán)的游離DNA的生物學(xué)流體以檢測突變的存在。涉及測定NRASmRNA或NRAS蛋白質(zhì)(或其片段)的量的改變、或NRAS活性的量的改變、或NRAS基因的拷貝數(shù)的改變的方法，典型地包括：-在適合的樣本中檢測NRASmRNA或NRAS蛋白質(zhì)(或片段)的水平、或NRAS活性的水平、或NRAS基因拷貝數(shù)；-與參比值進(jìn)行比較來確定水平或拷貝數(shù)；并且-如果確定的水平或拷貝數(shù)大于參比值，那么確定NRAS拷貝數(shù)增加的存在。針對NRASmRNA/蛋白質(zhì)/NRAS活性的水平的適合的參比值可以參照與受試者和樣本類型匹配的對照類群中的中值水平來獲得。技術(shù)人員將能夠選擇適當(dāng)?shù)膶φ諄硖峁┬枰膮⒈戎?。針對NRAS基因拷貝數(shù)的適合的參比值是2(即兩個(gè)拷貝/細(xì)胞)。測定NRAS拷貝數(shù)增加的存在NRAS拷貝數(shù)中的任何增加可以表示對EGFR介導(dǎo)的癌癥療法的增加的抗性，并且此類增加的抗性可以通過檢測NRAS基因拷貝數(shù)的增加來表示。NRAS基因拷貝數(shù)可以直接測定，或NRAS基因拷貝數(shù)可以間接通過測定代表NRAS基因拷貝數(shù)的另一種指示物來進(jìn)行確定。如以上提到的，NRAS拷貝數(shù)增加的存在可以通過CGH測定來檢測?？商娲兀琋RAS拷貝數(shù)增加可以通過癌癥患者的DNA測序進(jìn)行檢測。NRAS拷貝數(shù)增加還可以通過測定NRASmRNA的量的增加、或NRAS蛋白質(zhì)、或NRAS活性的量的增加來檢測。NRASmRNA或NRAS蛋白質(zhì)的量可以在適合的樣本中直接測定?？商娲兀m合的樣本可以針對代表NRASmRNA或NRAS蛋白質(zhì)的量的另一種指示物來進(jìn)行測定。mRNA或蛋白質(zhì)的水平可以通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的任何適合的工具來確定。僅僅通過舉例的方式，蛋白質(zhì)(例如NRAS蛋白質(zhì))在受試者中的水平可以通過在其中檢測蛋白質(zhì)的測定法來確定，并且通過該蛋白質(zhì)與特異性結(jié)合配偶體的結(jié)合確定目前的水平。該結(jié)合配偶體可以直接或間接被標(biāo)記。與蛋白質(zhì)結(jié)合的抗體或抗體片段表示此類結(jié)合配偶體的具體適合的實(shí)例，并且這些在免疫測定中使用?？梢栽诒景l(fā)明的方法中使用的這種免疫測定的適合的實(shí)例包括選自下組的那些，該組由以下各項(xiàng)組成：酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)；放射免疫測定(RIA)；以及多重免疫測定(如由Luminex公司(LuminexCorporation)生產(chǎn)的LuminexTM測定)。用于與NRAS特異性結(jié)合的抗體可以是獲得自雜交瘤的一種。用于生產(chǎn)雜交瘤的程序是本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的。一旦所希望的雜交瘤已被選擇并克隆，那么通過在適合的培養(yǎng)基中在體外培養(yǎng)所希望的雜交瘤來生產(chǎn)要得到的抗體。作為替代方法，可以將所希望的雜交瘤直接注射進(jìn)小鼠中以產(chǎn)生濃縮量的抗體。關(guān)于通過雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的抗人類腫瘤的單克隆抗體的專利包括美國專利號4,182,124和4,196,265。本領(lǐng)域關(guān)于對癌細(xì)胞具有抗原特異性的單克隆抗體的代表是美國專利號4,350,683。此外，技術(shù)人員將會(huì)理解，在不需要生產(chǎn)新型抗體的情況下，可以使用大量的NRAS特異性的商購抗體?？捎糜诖_定樣本中的NRASmRNA的量的測定包括實(shí)時(shí)定量PCR。僅僅通過舉例的方式，發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這種技術(shù)可以使用可商購的的Taqman引物和來自ABI生命技術(shù)公司的探針來實(shí)施。NRAS的任何適合的活性可被測定以確定增加。在一方面中，測定NRASGTP酶活性以便評估是否展現(xiàn)增加。確定NRASE63K突變的存在在核酸中患者中的NRASE63K突變的存在可以通過檢測NRAS基因編碼序列中的對應(yīng)的突變來確定。這可以包括例如檢測在以下各項(xiàng)中的突變：在基因組DNA序列本身中、或在對應(yīng)的表達(dá)的mRNA(或?qū)?yīng)的cDNA)中、或在任何這些多核苷酸中的適合的片段(其中該片段跨越編碼E63K突變的核酸突變)中。該突變還可以在核酸中進(jìn)行檢測，該核酸已經(jīng)基于測試序列使用擴(kuò)增(如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))進(jìn)行了復(fù)制。例如，編碼NRAS密碼子63的NRAS序列的引物的任一邊都用于擴(kuò)增靶序列，并且突變的存在或不存在可以從該擴(kuò)增反應(yīng)或其擴(kuò)增產(chǎn)物中看出。編碼E63K突變的核酸突變的突變位點(diǎn)典型地在NRAS編碼序列的密碼子63處。這可以理解為，在NRAS編碼cDNA序列中的對應(yīng)于堿基441-443的任何堿基中的改變都導(dǎo)致賴氨酸被編碼。具體而言，突變可以出現(xiàn)在編碼cDNA的NRAS中的對應(yīng)于堿基441的位置處。該突變可以是在NRAS編碼序列中的密碼子63處的鳥嘌呤(G)到腺嘌呤(A)(G到A，對應(yīng)于mRNA中的尿苷)的改變。具體而言，該改變可以是在NRAS編碼cDNA序列中的對應(yīng)于堿基441的位置處的從G到A的改變，例如，在對應(yīng)于核苷酸441-443的位置處的從GAG到AAG的改變。該改變可以是在NRAS編碼cDNA序列中的對應(yīng)于堿基441和443的位置處的從G到A的雙改變，例如，在對應(yīng)于核苷酸441-443的位置處的從GAG到AAA的改變?？梢酝ㄟ^任何適合的工具來檢測根據(jù)本發(fā)明的核酸突變。典型地，適合的方法包括擴(kuò)增感興趣的核酸區(qū)域，即含有多肽位點(diǎn)的核酸序列?？墒褂萌魏芜m合的擴(kuò)增方法，例如，PCR擴(kuò)增、等位基因特異擴(kuò)增、基于核酸序列的擴(kuò)增(NASBA)、連接激活擴(kuò)增(LAT)、QB復(fù)制酶體系連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(LCR)、修復(fù)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RCR)核酸擴(kuò)增、或通過鏈置換激活作用進(jìn)行的核酸擴(kuò)增(SDA)。優(yōu)選地使用PCR擴(kuò)增。用于核酸序列擴(kuò)增的跨越上文所述的突變位點(diǎn)的PCR引物可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用例如NRAS基因序列或NRAScDNA序列來獲得。在適合的PCR條件下，這樣的一對PCR引物與編碼NRAS多肽或其片段的多核苷酸雜交，使得該引物囊括該突變位點(diǎn)。在適合的PCR條件下，適合的PCR引物通常與對于該突變位點(diǎn)的各自分別的鏈中的多核苷酸序列5’的有義鏈或反義鏈進(jìn)行雜交。PCR引物可以結(jié)合在約200個(gè)核苷酸的突變中。任何處于純化或非純化形式的核酸標(biāo)本可以作為一個(gè)或多個(gè)起始核酸使用，條件是它包括或疑似包括含有多肽位點(diǎn)的特異性核酸序列。因此，該方法可以擴(kuò)增例如DNA或RNA(包括信使RNA)，其中DNA或RNA可以是單鏈的或雙鏈的。在RNA被用作模板的情況下，將利用對于將該模板反轉(zhuǎn)錄為cDNA最優(yōu)的酶、和/或條件。此外，可以利用各自包含一條鏈的DNA-RNA雜合體。一種方法可以例如涉及從用于測定的適合的患者樣本中提取核酸。例如，可以提取mRNA并且通過反轉(zhuǎn)錄制備對應(yīng)的cDNA(對應(yīng)于全部或部分mRNA)。用于mRNA提取和cDNA制備的方法是本領(lǐng)域已知的并且描述于本文中。檢測本文所述的核酸突變典型地包括用選擇性地檢測該突變的工具接觸核酸。典型地，該工具區(qū)分在突變位點(diǎn)處的突變序列和在該位點(diǎn)處的野生型序列。該工具可以是可檢測地被標(biāo)記的。因此，用于檢測編碼E63K的核酸突變的方法可以包括使適合的樣本接觸如下工具，該方法用于選擇性地檢測在對應(yīng)于編碼cDNA的NRAS的堿基441處的位置處包含突變體G的核苷酸序列并且鑒定該位置處的堿基是A。典型地，該工具區(qū)分在該位置處的突變體T和野生型C。該工具可以是，例如，PCR引物、寡核苷酸探針、或序列特異的切割方法，如本文以上描述的那些中的任何一個(gè)。在一些情況下，該擴(kuò)增方法本身可以用于區(qū)分突變體和野生型核酸序列，例如，擴(kuò)增可以對包含突變的核酸進(jìn)行選擇，使用例如等位基因特異擴(kuò)增或本領(lǐng)域已知的其他適合的技術(shù)。例如，PCR擴(kuò)增可以使用PCR引物來進(jìn)行，該P(yáng)CR引物在適合的PCR條件下選擇性地與突變核酸結(jié)合，但不與野生型核酸結(jié)合。典型地，此類引物在適合的PCR條件下與編碼多核苷酸的NRAS的有義鏈序列或反義鏈序列或其在突變位點(diǎn)處包含突變的片段進(jìn)行雜交，但是在該P(yáng)CR條件下此類引物與在該位置是野生型的第二個(gè)NRAS多核苷酸弱雜交或完全不雜交。例如，選擇性PCR引物在適合的PCR條件下可與編碼多核苷酸的NRAS的有義鏈序列或反義鏈序列或其在對應(yīng)于編碼cDNA的NRAS的堿基441處的位置處包括突變體A的片段進(jìn)行雜交，但是在該P(yáng)CR條件下該選擇性PCR引物與在該位置處編碼包含野生型G的多核苷酸的第二個(gè)NRAS弱雜交或完全不雜交。使用該引物來進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并且使用一種適合的第二引物來提供在該突變位點(diǎn)處包含突變(例如突變體T)的PCR擴(kuò)增子。因此擴(kuò)增子的檢測表示突變的存在。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了能夠選擇性地與核酸序列雜交的寡核苷酸，該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處編碼賴氨酸。在一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸能夠在適合的條件下與編碼多核苷酸的NRAS的有義鏈序列或反義鏈序列或其在對應(yīng)于編碼cDNA的NRAS的堿基441處的位置處包括突變體A的片段進(jìn)行雜交，但是與在該位置處編碼包含野生型G的多核苷酸的第二個(gè)NRAS弱雜交或完全不雜交，該寡核苷酸可以包含可檢測的標(biāo)記或與其相關(guān)聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸被使用或適合用作PCR反應(yīng)中的引物。在另一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸被使用或適合用作雜交探針。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了能夠選擇性地與一種核酸序列(該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處編碼賴氨酸)雜交的寡核苷酸，用于在檢測患者是否具有編碼NRAS蛋白中的E63K取代的核酸的方法中使用。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了能夠選擇性地與一種核酸序列(該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處編碼賴氨酸)雜交的寡核苷酸，用于在選擇用如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合治療的患者的方法中使用。該P(yáng)CR反應(yīng)可以將可檢測的標(biāo)記摻入PCR擴(kuò)增子中，并且該方法可以包括檢測該標(biāo)記。在其他情況中，擴(kuò)增的序列可以進(jìn)一步被分析，在溶液中或在與固體支撐體結(jié)合之后，通過通常應(yīng)用于特異DNA序列的檢測的任何方法，如PCR、寡聚體限制(佐伯(Saiki)，等人，生物/科技(Bio/Technology)，3:1008-1012，(1985))、等位基因特異的寡核苷酸(ASO)探針分析(康納(Conner)，等人，美國國家科學(xué)院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.)，80:278，(1983))、寡核苷酸連接測定(OLAs)(蘭德格林(Landgren)，等人，科學(xué)(Science)，241:1007，(1988))等等。針對DNA分析的分子技術(shù)已經(jīng)被評述(蘭德格林(Landgren)，等人，科學(xué)(Science)，242:229-237，(1988))。在一個(gè)實(shí)例中，靶核酸可使用如以上所述的至少一個(gè)等位基因特異的(突變可選擇的)PCR引物來經(jīng)受PCR擴(kuò)增。在另一個(gè)實(shí)例中，突變可選擇的寡核苷酸探針(有時(shí)稱作等位基因特異的探針)可以用于檢測突變的核酸。在此類方法中，擴(kuò)增的核酸與寡核苷酸探針進(jìn)行接觸，該寡核苷酸探針在適合的雜交條件下選擇性地與在突變位點(diǎn)包含突變的核酸進(jìn)行雜交，但是與在該突變位點(diǎn)是野生型的核酸弱雜交或完全不雜交。探針與核酸結(jié)合的檢測表明突變的存在。該探針工具或核酸可在接觸步驟之前被固定。在此類方法中，與固定的配偶體結(jié)合的組分典型地被標(biāo)記，并且確定突變的存在包括檢測該標(biāo)記。用于在該方法中使用的適合的寡核苷酸探針可以例如與編碼多核苷酸的NRAS或其片段雜交，其中該探針的序列包括在對應(yīng)于NRAScDNA的堿基441處的位置處與突變體A互補(bǔ)的堿基，并且其中該探針在適合的雜交條件下與在該位置包含野生型C的多核苷酸弱雜交或完全不雜交。設(shè)計(jì)等位基因特異的寡核苷酸探針的方法是本領(lǐng)域內(nèi)已知的。通常這些是短的、單鏈的多核苷酸，它們被工程化以在給出的一系列條件下準(zhǔn)確地與靶序列雜交。用于本文使用的引物或探針通常是短的、單鏈的多核苷酸，這些多核苷酸在給出的一系列條件下特異地與靶序列雜交。引物或探針典型地具有至少8個(gè)核苷酸的長度，例如，至少10個(gè)、12個(gè)、14個(gè)、16個(gè)、18個(gè)、20個(gè)、30個(gè)核苷酸，多至約50個(gè)核苷酸。探針或引物可以例如是長度不超過15個(gè)、20個(gè)、25個(gè)或20個(gè)核苷酸，如長度為8-15個(gè)、10-20個(gè)或10-30個(gè)核苷酸。等位基因特異的寡核苷酸探針可以例如是14-17個(gè)堿基對，如例如約17個(gè)堿基。本文檢測核酸突變的方法還可以包括大規(guī)模芯片陣列基于序列的技術(shù)。關(guān)于芯片陣列的應(yīng)用和發(fā)展的綜述由薩瑟恩(Southern)，E.M.，遺傳學(xué)趨勢(TrendsInGenetics)，12:110-115(1996年三月)和成(Cheng)等人，分子診斷(MolecularDiagnosis)，1:183-200(1996年九月)覆蓋。關(guān)于在‘DNA芯片’上的大規(guī)模分析的另外的方法論詳細(xì)描述于海瑟(Hacia)等人，自然遺傳學(xué)(NatureGenetics)，14:441-447(1996)中。本文所描述的NRASE63K突變可以通過測定在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的氨基酸序列中的氨基酸E63或其包含氨基酸63的適合的片段的氨基酸位置處的從谷氨酸(E)到賴氨酸(K)的改變來進(jìn)行檢測。這可以通過任何適合的方法來完成。例如，具有E63K突變的NRAS蛋白質(zhì)(或其片段)的存在可以通過一個(gè)測定來確定，在該測定中通過該突變的NRAS蛋白質(zhì)或片段與特異性結(jié)合配偶體的結(jié)合來檢測該突變的NRAS蛋白質(zhì)或其片段。該特異性結(jié)合配偶體與攜帶該E63K突變的突變體NRAS蛋白質(zhì)或片段結(jié)合，并且不與不具有該突變的NRAS蛋白質(zhì)或片段結(jié)合。該結(jié)合配偶體可以直接或間接被標(biāo)記。與突變體蛋白質(zhì)結(jié)合的抗體或抗體片段表示此類結(jié)合配偶體的特別適合的實(shí)例，并且這些在免疫測定中使用?？梢栽诒景l(fā)明的方法中使用的這種免疫測定的適合的實(shí)例包括選自下組的那些，該組由以下各項(xiàng)組成：酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)；放射免疫測定(RIA)；以及多重免疫測定(如由Luminex公司(LuminexCorporation)生產(chǎn)的LuminexTM測定)?？梢允褂玫鞍踪|(zhì)印跡法。特別地，用于檢測該突變體E63KNRAS的抗體可以是獲得自雜交瘤的抗體。本文其他地方描述了用于從雜交瘤獲得抗體的方法。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了能夠選擇性地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處包含賴氨酸的EGFR多肽結(jié)合的抗體，其中該抗體優(yōu)先地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處具有賴氨酸的多肽結(jié)合，優(yōu)于與在所述位置處具有谷氨酸的多肽的結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了能夠選擇性地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處包含賴氨酸的EGFR多肽結(jié)合的抗體，用于在確定患者是否具有對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的賴氨酸的NRAS蛋白質(zhì)的方法中使用，其中該抗體優(yōu)先地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置63的位置處具有賴氨酸的多肽結(jié)合，優(yōu)于與在所述位置處具有谷氨酸的多肽的結(jié)合。在一個(gè)具體的實(shí)施例中，此方法用于選擇用如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合治療的患者。測定可以包括使特異性結(jié)合配偶體與適合的樣本(如本文所述的那些中的任何一個(gè))進(jìn)行接觸。在一些實(shí)例中，通常蛋白質(zhì)或特別地NRAS蛋白質(zhì)可以首先從患者樣本提取出來，并且將該特異性結(jié)合配偶體與該蛋白提取物進(jìn)行接觸。用于蛋白質(zhì)提取的方法是本領(lǐng)域內(nèi)已知的。NRAS蛋白質(zhì)可以通過任何適合的工具從患者樣本提取出來。例如，可以使用與NRAS蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的抗體。可以使用雜交瘤使用類似于以上所述的那些方法獲得結(jié)合NRAS的抗體。提取的一種蛋白質(zhì)或多種蛋白質(zhì)可視為分離的蛋白質(zhì)。如本文使用的術(shù)語“分離”是指一種生物組分(如核酸分子或蛋白質(zhì))已經(jīng)基本上從該組分天然存在的生物體的細(xì)胞中的其他生物組分(即其他染色體和染色體外DNA和RNA以及蛋白質(zhì))分離或純化出來。在一方面中，提取的蛋白質(zhì)或核酸已經(jīng)分離至如下程度以便它們能與所希望的反應(yīng)中的試劑，例如與引物或探針、或與抗體相互作用。已經(jīng)“分離”的核酸和蛋白質(zhì)包括通過標(biāo)準(zhǔn)純化方法純化的核酸和蛋白質(zhì)。該術(shù)語還涵蓋通過在一個(gè)宿主細(xì)胞中重組表達(dá)所制備的核酸和蛋白質(zhì)以及化學(xué)合成的核酸、蛋白質(zhì)和多肽。在另一個(gè)實(shí)例中，具有E63K突變的NRAS蛋白質(zhì)(或其片段)的存在可以通過一個(gè)測定被確定，在該測定中NRAS蛋白質(zhì)或片段在氨基酸63處的氨基酸序列被確定，例如通過氨基酸測序或使用序列特異性切割工具。在這樣的測定中，跨越氨基酸63的NRAS蛋白質(zhì)或其片段使用上文所述的方法典型地從患者樣本進(jìn)行分離。然后分離的蛋白質(zhì)或片段可以進(jìn)行測序，至少到確定在位置63處的氨基酸的程度。適合的測序方法在本領(lǐng)域內(nèi)是已知的。確定NRASG12V突變的存在在核酸中患者中的NRASG12V突變的存在可以通過檢測NRAS基因編碼序列中的對應(yīng)的突變來確定。以上所述的關(guān)于E63K突變的方法比照適用于G12V突變，除了突變位點(diǎn)的位置之外。編碼G12V突變的核酸突變的突變位點(diǎn)典型地在NRAS編碼序列的密碼子12處。這可以理解為在NRAScDNA序列中的對應(yīng)于堿基288-290的任何堿基中的、導(dǎo)致纈氨酸被編碼的改變。具體而言，突變可以出現(xiàn)在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基289的位置處。該突變可以是在NRAS編碼序列中的密碼子12處的從G到T的改變。具體而言，該改變可以是在NRAScDNA序列中的對應(yīng)于堿基289的位置處的從G到T的改變，例如，在對應(yīng)于核苷酸288-290的位置處的從GGT到GTT的改變。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了能夠選擇性地與核酸序列雜交的寡核苷酸，該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處編碼纈氨酸。在一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸能夠在適合的條件下與編碼多核苷酸的NRAS的有義鏈序列或反義鏈序列或其在對應(yīng)于編碼cDNA的NRAS的堿基289處的位置處包括突變體T的片段進(jìn)行雜交，但是與在該位置處編碼包含野生型G的多核苷酸的第二個(gè)NRAS弱雜交或完全不雜交，該寡核苷酸可以包含可檢測的標(biāo)記或與其相關(guān)聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸被使用或適合用作PCR反應(yīng)中的引物。在另一個(gè)實(shí)施例中，該寡核苷酸被使用或適合用作雜交探針。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了能夠選擇性地與一種核酸序列(該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處編碼纈氨酸)雜交的寡核苷酸，用于在檢測患者是否具有編碼NRAS蛋白中的G12V取代的核酸的方法中使用。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了提供了能夠選擇性地與一種核酸序列(該核酸序列在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處編碼纈氨酸)雜交的寡核苷酸，用于在選擇用如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合治療的患者的方法中使用。在蛋白質(zhì)中本文所描述的NRASG12V突變可以通過測定在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的氨基酸序列中的G12或其包含氨基酸12的適合的片段的氨基酸位置處的從甘氨酸(G)到纈氨酸(V)的改變來進(jìn)行檢測。這可以通過任何適合的方法來完成。以上所述的關(guān)于E63K突變的方法比照適用于G12V突變，除了突變位點(diǎn)的位置之外。確定G12V突變的存在還可以包括確定NRAS蛋白質(zhì)的量的增加。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了能夠選擇性地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處包含纈氨酸的EGFR多肽結(jié)合的抗體，其中該抗體優(yōu)先地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處具有纈氨酸的多肽結(jié)合，優(yōu)于與在所述位置處具有甘氨酸的多肽的結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了能夠選擇性地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處包含纈氨酸的EGFR多肽結(jié)合的抗體，用于在確定患者是否具有對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處的纈氨酸的NRAS蛋白質(zhì)的方法中使用，其中該抗體優(yōu)先地與在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的位置12的位置處具有纈氨酸的多肽結(jié)合，優(yōu)于與在所述位置處具有甘氨酸的多肽的結(jié)合。在一個(gè)具體的實(shí)施例中，此方法用于選擇用如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合治療的患者。確定NRASG12R突變的存在在核酸中患者中的NRASG12R突變的存在可以通過檢測NRAS基因編碼序列中的對應(yīng)的突變來確定。以上所述的關(guān)于E63K突變的方法比照適用于G12V突變，除了突變位點(diǎn)的位置之外。編碼G12R突變的核酸突變的突變位點(diǎn)典型地在NRAS編碼序列的密碼子12處。這可以理解為在NRAScDNA序列中的對應(yīng)于堿基288-290的任何堿基中的、導(dǎo)致精氨酸被編碼改變。具體而言，突變可以出現(xiàn)在NRAScDNA中的對應(yīng)于堿基288的位置處。該突變可以是在NRAS編碼序列中的密碼子12處的從G到C的改變。具體而言，該改變可以是在NRAScDNA序列中的對應(yīng)于堿基288的位置處的從G到C的改變，例如，在對應(yīng)于核苷酸288-290的位置處的從GGT到CGT的改變。在蛋白質(zhì)中本文所描述的NRASG12R突變可以通過測定在對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)的氨基酸序列中的G12或其包含氨基酸12的適合的片段的氨基酸位置處的從甘氨酸(G)到精氨酸(R)的改變來進(jìn)行檢測。這可以通過任何適合的方法來完成。以上所述的關(guān)于E63K突變的方法比照適用于G12R突變，除了突變位點(diǎn)的位置之外。確定G12R突變的存在還可以包括確定NRAS蛋白質(zhì)的量的增加。根據(jù)本發(fā)明的治療根據(jù)本發(fā)明，擁有根據(jù)本發(fā)明的NRAS激活突變或NRAS基因的拷貝數(shù)增加的EGFR相關(guān)的癌癥患者可以有效地用EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合進(jìn)行治療。典型地，具有NRAS突變或NRAS基因的拷貝數(shù)增加的的癌癥患者已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制劑的治療。該患者可以表現(xiàn)出對單獨(dú)用EGFR抑制劑治療的獲得性抗性的癥狀。在這種情形下，在該聯(lián)合治療中的EGFR抑制劑可以是用于患者的治療(并且其是對于具有獲得性抗性的患者的治療來說的)中的相同的抑制劑。然而，還考慮了其中該聯(lián)合治療中的EGFR抑制劑與治療中使用的是不同的抑制劑的治療。在那種情況下，在該聯(lián)合治療中的EGFR抑制劑比在患者的治療中使用的并對此已經(jīng)獲得抗性的EGFR抑制劑通常具有相同的世代或更高的世代。在另一個(gè)實(shí)施例中，在患者中確定NRASE63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S或G12C突變或NRAS基因拷貝數(shù)增加的存在之后，本發(fā)明還可以提供在還未接受EGFR抑制劑治療的患者體內(nèi)的針對EGFR相關(guān)的癌癥的一線療法。在該一線療法中，向患者給予EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合以延遲或預(yù)防對EGFR抑制劑的獲得性抗性的發(fā)展(例如通過如本文所述的NRAS突變的發(fā)生)。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或它們中任一者的藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，在患者中確定E63K或G12VNRAS激活突變或NRAS基因拷貝數(shù)增加的存在之后，本發(fā)明還可以提供在還未接受EGFR抑制劑治療的患者體內(nèi)的針對EGFR相關(guān)的癌癥的一線療法。在該一線療法中，向患者給予EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合以延遲或預(yù)防對EGFR抑制劑的獲得性抗性的發(fā)展(例如通過如本文所述的NRAS激活突變的發(fā)生)。在本發(fā)明的方法中，以治療有效量向患者給予EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合。要理解的是，本文提到的包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的聯(lián)合治療涵蓋了包括一種或多種EGFR抑制劑和一種或多種MEK抑制劑的組合，并且具有或包括EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合涵蓋了一種或多種EGFR抑制劑和/或一種或多種MEK抑制劑的組合。EGFR抑制劑和MEK抑制劑的特定組合在本說明書別處考慮。MEK抑制劑如本文使用的MEK抑制劑通常具有抑制Ras/Raf/MEK/ERK途徑的活性。抑制劑可以在所述途徑的任何階段作用于組分，以抑制例如所述途徑的組分的表達(dá)和/或活性。MEK抑制劑可以例如是小分子量化合物。MEK抑制劑可以抑制基因表達(dá)，例如通過干擾mRNA穩(wěn)定性或翻譯。MEK抑制劑可以選自反義寡核苷酸、小干擾RNA(siRNA)(有時(shí)稱作短干擾RNA或沉默RNA)、或短發(fā)夾RNA(shRNA)(有時(shí)稱作小發(fā)夾RNA)。此類MEK抑制劑可以抑制mek1和/或mek2基因的表達(dá)，例如通過干擾mRNA穩(wěn)定性或翻譯。典型地，抑制劑通過在適合的測定中的至少一個(gè)可檢測的量來降低表達(dá)或活性。抑制劑可以，例如，降低表達(dá)或活性至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或至少90％。MEK抑制劑的適合實(shí)例在本披露的以下各頁中被考慮。不受限地，適合用于在本發(fā)明的上下文中使用的MEK抑制劑包括選自下組的那些，該組由以下各項(xiàng)組成：司美替尼；曲美替尼；MEK-162；以及考比替尼(Cobimetinib)；連同這些抑制劑的藥學(xué)上可接受的鹽。司美替尼司美替尼的化學(xué)結(jié)構(gòu)是：它也可以通過以下化學(xué)名稱已知：‘(6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺)’。等同地，它也可以通過以下化學(xué)名稱已知：‘5-[(4-溴-2-氯苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺’。司美替尼還能以藥學(xué)上可接受的鹽的形式提供，如硫酸氫鹽；即司美替尼硫酸氫鹽。(即1:1藥物:H2SO4)。在適合的實(shí)施例中，MEK抑制劑可以包括司美替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽如硫酸氫鹽。曲美替尼曲美替尼的化學(xué)結(jié)構(gòu)是：它也可以通過以下化學(xué)名稱已知：N-(3-{3-環(huán)丙基-5-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基}苯基)乙酰胺。曲美替尼還能以藥學(xué)上可接受的鹽的形式提供，并且除非本文另作要求，本披露中提及的曲美替尼還應(yīng)該涵蓋此類藥學(xué)上可接受的鹽。MEK-162MEK-162的化學(xué)結(jié)構(gòu)是：它也可以通過以下化學(xué)名稱已知：5-[(4-溴-2-氟苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羥基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺。MEK-162還能以藥學(xué)上可接受的鹽的形式提供，并且除非本文另作要求，本披露中提及的MEK-162還應(yīng)該涵蓋此類藥學(xué)上可接受的鹽?？急忍婺峥急忍婺岬幕瘜W(xué)結(jié)構(gòu)是：考比替尼也可以通過以下化學(xué)名稱已知：{3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]苯基}{3-羥基-3-[(2S)-哌啶-2-基]氮雜環(huán)丁烷-1-基}甲酮。考比替尼還能以藥學(xué)上可接受的鹽的形式提供，如考比替尼的富馬酸鹽(2:1藥物:富馬酸)。除非本文另作要求，本披露中提及的考比替尼還應(yīng)該涵蓋藥學(xué)上可接受的鹽如富馬酸鹽。在適合的實(shí)施例中，MEK抑制劑可以抑制MEK1和MEK2兩者的活性(所謂的“MEK1/2抑制劑”)。在一方面中，MEK抑制劑可以抑制MEK1或MEK2蛋白質(zhì)的表達(dá)和/或活性。MEK1如本文使用的MEK1是指促分裂原活化蛋白激酶激酶1。MEK1可以是對應(yīng)于要治療的種類的任何種類。在一方面中，MEK1是人MEK1。(野生型)人MEK1基因描述于基因ID：5604中。野生型人mek1基因典型地具有對應(yīng)于基因庫登錄號NM_002755.3中的MEK1cDNA序列的序列的mRNA表達(dá)產(chǎn)物，和具有UniProtKB/Swiss-ProtQ02750中的MEK1蛋白質(zhì)氨基酸序列的蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物。在列于基因庫登錄號NM_002755.3中的MEK1cDNA序列中，蛋白質(zhì)編碼序列在核苷酸476-1657處示出。該共有編碼序列也存在于登錄號CCDS10216.1下的CCDS數(shù)據(jù)庫中。本文提及的mek1基因(MEK1基因)、mRNA、cDNA或MEK1蛋白質(zhì)可以是指人基因、mRNA或?qū)?yīng)的cDNA序列、或蛋白質(zhì)。在一些情況下，MEK1還可以指以上中任一種的變體，如天然存在的變體。上述內(nèi)容比照適用于非人類物種的MEK1。例如，本文提及的mek1基因、mRNA、cDNA或MEK1蛋白質(zhì)可以是指以上人基因、mRNA或蛋白質(zhì)的物種同系物。MEK2如本文使用的MEK2是指促分裂原活化蛋白激酶激酶2。MEK2可以是對應(yīng)于要治療的種類的任何種類。在一方面中，MEK2是人MEK2。(野生型)人MEK2基因描述于基因ID:5605中。野生型人mek2基因典型地具有對應(yīng)于基因庫登錄號NM_030662.3中的MEK2cDNA序列的序列的mRNA表達(dá)產(chǎn)物，和具有UniProtKB/Swiss-ProtP36507中的MEK2蛋白質(zhì)氨基酸序列的蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物。在基因庫登錄號NM_030662.3中的MEK2cDNA序列中，蛋白質(zhì)編碼序列在核苷酸255-1457處示出。該共有編碼序列也存在于登錄號CCDS12120.1下的CCDS數(shù)據(jù)庫中。本文提及的mek2基因(MEK2基因)、mRNA、cDNA或MEK2蛋白質(zhì)可以是指這一人基因、mRNA或?qū)?yīng)的cDNA序列、或蛋白質(zhì)。在一些情況下，MEK2還可以指以上中任一種的變體，如天然存在的變體。上述內(nèi)容比照適用于非人類物種的MEK2。例如，本文提及的mek2基因、mRNA、cDNA或MEK2蛋白質(zhì)可以是指以上人基因、mRNA或蛋白質(zhì)的物種同系物。MEK1和MEK2的抑制劑MEK抑制劑可以抑制MEK1或MEK2的任何適合的活性，例如蛋白激酶活性。蛋白激酶活性的抑制可以在適合的測定中被確定，例如如在葉(Yeh)等人，臨床癌癥研究(ClinCancerRes)2007年3月1日13；1576中所描述的。MEK抑制劑可以例如，選自ATP競爭性MEK抑制劑、非ATP競爭性MEK抑制劑、或ATP非競爭性MEK抑制劑中的任何一種。抑制MEK1和/或MEK2的活性的適合的MEK抑制劑包括司美替尼。EGFR抑制劑和MEK抑制劑的特定組合用于在患者中使用，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該患者的癌癥包括NRASE63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S或G12C突變或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI吉非替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑司美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI吉非替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑曲美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI吉非替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑MEK-162(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI吉非替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑考比替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI埃羅替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑司美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI埃羅替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑曲美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI埃羅替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑MEK-162(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI埃羅替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑考比替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI阿法替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑司美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI阿法替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑曲美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI阿法替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑MEK-162(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKI阿法替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑考比替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKIAZD9291(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑司美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKIAZD9291(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑曲美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKIAZD9291(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑MEK-162(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKIAZD9291(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑考比替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKICO-1686(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑司美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKICO-1686(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑曲美替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKICO-1686(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑MEK-162(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。在適合的實(shí)施例中，聯(lián)合治療可以包括EGFRTKICO-1686(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和MEK抑制劑考比替尼(或其藥學(xué)上可接受的鹽)。NRAS的抑制劑MEK抑制劑可以抑制與NRAS信號傳導(dǎo)相關(guān)聯(lián)的活性，因?yàn)镸EK1和/或MEK2是NRAS信號傳導(dǎo)途徑的下游組件。例如，MEK抑制劑可以抑制NRAS基因的表達(dá)，例如通過干擾mRNA穩(wěn)定性或翻譯。靶向NRAS基因的表達(dá)的siRNA的實(shí)例提供于實(shí)例部分中。其他試劑根據(jù)本發(fā)明的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合可以作為單一療法給予至癌癥患者。可替代地，EGFR抑制劑和MEK抑制劑可以與另外的外科或放射治療或另外的化療劑或治療性抗體組合給予。組合給予根據(jù)本發(fā)明，聯(lián)合治療的各組分可以彼此組合或結(jié)合給予。聯(lián)合治療可以處于組合制劑的形式，例如EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合制劑。組合可以包括組分的一種或多種的單獨(dú)的配制品，例如EGFR抑制劑和MEK抑制劑的單獨(dú)的配制品。組合中的各組分(例如單獨(dú)的配制品)可以按本文關(guān)于聯(lián)合治療方法所述的順序地、分別地和/或同時(shí)地被給予。因此，例如，EGFR抑制劑可以與MEK抑制劑分別地、順序地或同時(shí)地被給予。在一個(gè)實(shí)施例中，同時(shí)地(任選地重復(fù)地)給予這些組分。在一個(gè)實(shí)施例中，順序地(任選地重復(fù)地)給予這些組分。在一個(gè)實(shí)施例中，分別地(任選地重復(fù)地)給予這些組分。技術(shù)人員將理解的是，在組合中的試劑的單獨(dú)配制品順序地或連續(xù)地給予的情況下，可以按任何順序給予這些試劑。因此，在EGFR抑制劑和MEK抑制劑順序地或連續(xù)地給予的情況下，可以給予EGFR抑制劑隨后是MEK抑制劑，或給予MEK抑制劑隨后是EGFR抑制劑。在一個(gè)實(shí)施例中，試劑的單獨(dú)配制品可按可替代的劑量模式給予。在順序地或分別地給予單獨(dú)配制品的情況下，給予該第二(或隨后的)配制品的延遲不應(yīng)該使該聯(lián)合治療的有益治療作用喪失。組合產(chǎn)物本文所述的聯(lián)合治療的組分可以作為組合產(chǎn)物被提供。組合產(chǎn)物典型地包括：(a)EGFR抑制劑；和(b)MEK抑制劑；如本文所述的。通過本文所述的方法，該組合產(chǎn)物對于治療EGFR相關(guān)的癌癥是有用的。組合產(chǎn)物可以包括(a)EGFR抑制劑；和(b)MEK抑制劑；聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。如本文所定義的組合產(chǎn)物可以處于各組分的組合制劑的形式。因此組合產(chǎn)物可以處于EGFR抑制劑、和MEK抑制劑的組合制劑的形式。如本文所定義的組合產(chǎn)物可以包括部件試劑盒，該部件試劑盒包括產(chǎn)物中的各種試劑的單獨(dú)配制品。因此，該部件試劑盒可以包括如本文所述的EGFR抑制劑、和MEK抑制劑的單獨(dú)配制品。組合產(chǎn)物可以包括部件試劑盒，該部件試劑盒包括(a)EGFR抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體；和：(b)MEK抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體；其中這些組分以適合于順序地、分別地和/或同時(shí)地給予至癌癥患者的形式被提供，癌癥患者的腫瘤細(xì)胞包含E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S或G12CNRAS突變。在另外的實(shí)施例中，這些腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變。在另外的實(shí)施例中，這些腫瘤細(xì)胞包含選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一個(gè)實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，這些腫瘤細(xì)胞包含E63K、G12V或G12RNRAS突變。在一個(gè)實(shí)施例中，這些腫瘤細(xì)胞包含G12RNRAS突變。組合產(chǎn)物可以包括部件試劑盒，該部件試劑盒包括(a)EGFR抑制劑，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體；和：(a)MEK抑制劑，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體；其中這些組分以適合于順序地、分別地和/或同時(shí)地給予至癌癥患者的形式被提供，癌癥患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。該部件試劑盒可以包括：包含組合產(chǎn)物中的第一組分聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體的一個(gè)第一容器；和包含組合產(chǎn)物中的第二或任何隨后的組分的一個(gè)第二或隨后的容器，每種組分分別地聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體，以及用于包含所述第一容器和第二容器以及任何隨后的容器的容器裝置。如本文所定義的組合產(chǎn)物可以包括藥物組合物，該藥物組合物包含：(a)EGFR抑制劑；和(b)MEK抑制劑。藥物組合物通常包括藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。組合產(chǎn)物可以包括藥物組合物，該藥物組合物包含：(a)EGFR抑制劑，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體；和(b)MEK抑制劑，聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、稀釋劑或載體。本發(fā)明的組合產(chǎn)物可以包括多于一種EGFR抑制劑，和/或多于一種MEK抑制劑。組合產(chǎn)物可以包括一種或多種選自上文所述的那些其他的活化劑。本文所述的部件試劑盒可以進(jìn)一步包括順序地、分別地和/或同時(shí)地給予這些組分用于治療癌癥的說明書。在一個(gè)實(shí)施例中，如本文所述的組合產(chǎn)物進(jìn)一步包括說明書，這些說明書表明本文所定義的產(chǎn)物可以通過本文所述的方法用于治療EGFR相關(guān)的癌癥。產(chǎn)物可以包括說明書，這些說明書表明該產(chǎn)物用于在如本文所述的癌癥患者中在如本文所述的癌癥的治療中使用。例如，產(chǎn)物可以包括說明書，這些說明書表明該產(chǎn)物可以用于在已經(jīng)接受或正在接受EGFR抑制劑療法并針對根據(jù)本發(fā)明的NRAS突變或NRAS基因拷貝數(shù)的增加而測試為陽性的患者中治療癌癥。在另一個(gè)實(shí)例中，產(chǎn)物可以包括說明書，這些說明書表明該產(chǎn)物可以作為一線療法用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。在另一個(gè)實(shí)例中，產(chǎn)物可以包括說明書，這些說明書表明該產(chǎn)物可以用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含G12RNRAS突變。在一個(gè)實(shí)施例中，產(chǎn)物包括說明書，這些說明書表明該產(chǎn)物可以用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S或G12CNRAS突變。醫(yī)療方法和醫(yī)療用途本發(fā)明還涉及用于在在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的方法，該方法包括給予如本文所述的組合產(chǎn)物或藥用組合物，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變；和NRASG12V突變或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的方法，該方法包括給予如本文所述的組合產(chǎn)物或藥用組合物，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，或NRAS拷貝數(shù)增加。在一個(gè)實(shí)施例中，所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變。在另一個(gè)實(shí)施例中，所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變。在另外的實(shí)施例中，所述患者具有選自G12R、G12A、G12D、G12S或G12C的NRAS突變。在一方面中，本發(fā)明涉及如本文所定義的組合產(chǎn)物，該組合產(chǎn)物包括(a)EGFR抑制劑；和(b)MEK抑制劑；用于在本文所述的任何方法中順序地、分別地和/或同時(shí)地使用。進(jìn)一步提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS基因拷貝數(shù)增加；其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別的、同時(shí)的和/或順序的給予的形式被提供。進(jìn)一步提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS基因拷貝數(shù)增加；其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別的、同時(shí)的和/或順序的給予的形式被提供。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。進(jìn)一步提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變、或NRAS基因拷貝數(shù)增加；其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別的、同時(shí)的和/或順序的給予的形式被提供。在另一方面中，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在另一方面中，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)中的位置的E63K、G12V和G12R的NRAS突變；或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另一方面中，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：對應(yīng)于NRAS蛋白質(zhì)中的位置的E63K和G12V；或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。因此，本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變。因此，本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥具有NRAS拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變。因此，本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另一個(gè)實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥具有NRAS拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變、或NRAS拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥中的組合使用，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變；或NRAS拷貝數(shù)的增加。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，或NRAS拷貝數(shù)的增加。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變、或NRAS拷貝數(shù)的增加。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中使用的EGFR抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變；并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中使用的EGFR抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R；并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R；并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變、或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變；并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R；并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R；并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變；或具有NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變；或具有NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。該藥物(例如如本文所述的組合產(chǎn)物)可以包括MEK抑制劑和EGFR抑制劑。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥或NRAS拷貝數(shù)的增加的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變、或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變或NRAS拷貝數(shù)的增加的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自E63K、G12V和G12R的NRAS突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。因此，本發(fā)明涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者具有選自下組的NRAS激活突變，該組由以下各項(xiàng)組成：NRASE63K突變和NRASG12V突變；或具有NRAS拷貝數(shù)的增加，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。該藥物可以是如本文所述的組合產(chǎn)物。還提供了用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的方法，該方法包括給予如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物。本發(fā)明還提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予至患者的形式被提供，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予的形式被提供，并且其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予至患者的形式被提供，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予的形式被提供，并且其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予至患者的形式被提供，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予的形式被提供，并且其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予至患者的形式被提供，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予的形式被提供，并且其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的組合產(chǎn)物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑各自聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑，并且其中該EGFR抑制劑和MEK抑制劑以適合于分別地、同時(shí)地和/或順序地給予至患者的形式被提供，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。本發(fā)明還涉及包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還涉及包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明提供了包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在治療NRAS突變的癌癥中使用，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及包含如本文所述的EGFR抑制劑和MEK抑制劑聯(lián)合藥學(xué)上可接受的佐劑、載體或稀釋劑的藥物組合物，用于在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，提供了如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，提供了如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，還提供了如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，提供了如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)治療NRAS突變的癌癥的藥物的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及如本文所述的組合產(chǎn)物或藥物組合物用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明涉及用于在治療NRAS突變的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C；或NRAS拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，或NRAS拷貝數(shù)的增加。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此，本發(fā)明還涉及用于在治療NRAS突變的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中組合使用的EGFR抑制劑和MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予至患者，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此還提供了在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予，并且該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予至患者，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予，并且該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予至患者，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予，并且該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，或NRAS基因拷貝數(shù)的增加。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予至患者，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變。因此還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予，并且該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的EGFR抑制劑，其中該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予至患者，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C或NRAS基因拷貝數(shù)的增加，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R或NRAS基因拷貝數(shù)的增加，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。因此，還提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變的癌癥是G12RNRAS突變的癌癥。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。還提供了用于在患者中在治療EGFR相關(guān)的癌癥中使用的MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)，其中該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)，其中所述治療包括該MEK抑制劑與EGFR抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，其中所述患者的腫瘤細(xì)胞包含選自E63K、G12V和G12R的NRAS蛋白質(zhì)突變，并且其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或CO1686；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及EGFR抑制劑和MEK抑制劑用于生產(chǎn)在患者中治療EGFR相關(guān)的癌癥的藥物的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加或具有具有E63K和/或G12VNRAS激活突變的NRAS蛋白質(zhì)，其中所述治療包括該EGFR抑制劑與該MEK抑制劑組合給予。該藥物可以是如本文所述的組合產(chǎn)物。另外的實(shí)施例在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12RNRAS突變的癌癥的用途。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑。在本文所述的任何實(shí)施例中，該EGFR抑制劑可以選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、達(dá)克替尼(dacomitinib)、AZD9291以及CO-1686(其中前述的全部可以處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式，條件是存在至少一個(gè)允許此類鹽形成的官能團(tuán))。在本文所述的任何實(shí)施例中，該EGFR抑制劑可以選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291以及CO-1686(其中前述的全部可以處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式，條件是存在至少一個(gè)允許此類鹽形成的官能團(tuán))。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C。在另外的實(shí)施例中，該NRAS突變是G12R。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療G12RNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在患者中的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療G12RNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在本文所述的任何實(shí)施例中，該MEK抑制劑可以選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼(其中前述的全部可以處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式，條件是存在至少一個(gè)允許此類鹽形成的官能團(tuán))。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療NRAS突變的癌癥的用途，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療G12RNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑(各自任選地處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)用于治療G12RNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在NRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在患者中的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼、埃羅替尼、阿法替尼、AZD9291和CO-1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑選自司美替尼、曲美替尼、MEK-162和考比替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在本文所述的任何實(shí)施例中，該MEK抑制劑可以是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V、G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自G12R、G12A、G12D、G12S和G12C，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在治療NRAS突變的癌癥中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該NRAS突變選自E63K、G12V和G12R，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在患者中的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑與MEK抑制劑組合用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在本文所述的任何實(shí)施例中，該EGFR抑制劑可以選自吉非替尼和AZD9291，并且該MEK抑制劑是司美替尼(其中前述中的任一種可以處于藥學(xué)上可接受的鹽的形式)。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63K和/或G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自AZD9291和CO1686或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了用于在G12RNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑是AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療患者中的癌癥的用途，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在患者中的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291；或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療E63KNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在E63KNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一個(gè)實(shí)施例中，提供了EGFR抑制劑組合MEK抑制劑用于治療G12VNRAS突變的癌癥的用途，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。因此，提供了用于在G12VNRAS突變的癌癥的治療中使用的EGFR抑制劑組合MEK抑制劑，其中該EGFR抑制劑選自吉非替尼和AZD9291或其藥學(xué)上可接受的鹽，并且其中該MEK抑制劑是司美替尼或其藥學(xué)上可接受的鹽。在本文描述“E63KNRAS突變的癌癥”的任何實(shí)施例中，該癌癥可以是“E63KNRAS突變的肺癌”或“E63KNRAS突變的非小細(xì)胞肺癌”或“先前已經(jīng)用EGFRTKI治療過的E63KNRAS突變的癌癥”。在本文描述“G12VNRAS突變的癌癥”的任何實(shí)施例中，該癌癥可以是“G12VNRAS突變的肺癌”或“G12VNRAS突變的非小細(xì)胞肺癌”或“先前已經(jīng)用EGFRTKI治療過的E63KNRAS突變的癌癥”。如本文所述的，相同的類型可以應(yīng)用至其他NRAS蛋白質(zhì)突變以提供另外的實(shí)施例。在本文描述“NRAS突變的癌癥”的任何實(shí)施例中，該癌癥可以進(jìn)一步被定義為“NRAS突變的肺癌”或“NRAS突變的非小細(xì)胞肺癌”或“先前已經(jīng)用EGFRTKI治療過的NRAS突變的癌癥”。在本文描述“患者中的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加”的任何實(shí)施例中，該癌癥可以是“非小細(xì)胞肺癌，其腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加”或“患者中的癌癥，所述患者的腫瘤細(xì)胞包含NRAS基因拷貝數(shù)的增加，其中該癌癥先前已經(jīng)用EGFRTKI治療過”。聯(lián)合治療的協(xié)同作用本發(fā)明的聯(lián)合治療預(yù)期在受試者中的治療癌癥方面產(chǎn)生協(xié)同的或有益的作用。這樣的作用可以例如通過抗腫瘤作用的范圍、應(yīng)答速率、疾病進(jìn)展的時(shí)間、或存活率中的一種或多種來進(jìn)行確定。在一方面中，如果按照通過例如，應(yīng)答程度、應(yīng)答速率/治愈速率、疾病進(jìn)展的時(shí)間、經(jīng)歷的副作用、或存活期所測量的，這種作用在治療上優(yōu)于采用聯(lián)合治療的組分中的一種(例如以其常規(guī)劑量或濃度)可達(dá)到的效果，那么實(shí)現(xiàn)協(xié)同的或有益的作用。如果組合作用在治療上優(yōu)于使用組合的組分中的一種達(dá)到的各個(gè)作用的總和，和/或如果在不個(gè)別地響應(yīng)(或弱響應(yīng))于組分中的一種的一組患者中作用所達(dá)到的作用，那么可以獲得協(xié)同的或有益的作用。此外，如果組分中的一種以其常規(guī)劑量或濃度使用，并且其他的一種或多種組分以減少的劑量或濃度使用并且治療效果等同于或好于使用聯(lián)合治療的組分的常規(guī)量所達(dá)到的治療效果，那么聯(lián)合治療可以被定義為提供協(xié)同的或有益的作用。具體而言，如果聯(lián)合治療的組分中的一種的常規(guī)劑量可被降低，不損害以下項(xiàng)中的一種或多種：應(yīng)答程度、應(yīng)答速率、疾病進(jìn)展的時(shí)間和存活數(shù)據(jù)，具體是不損害響應(yīng)的持續(xù)時(shí)間，但是比當(dāng)使用每種組分的常規(guī)劑量或濃度時(shí)出現(xiàn)的令人煩惱的副作用具有更少和/或更小的副作用，那么可認(rèn)為存在協(xié)作或益處。配制品和遞送途徑用于體內(nèi)使用的藥物組合物或組合產(chǎn)物典型地包含一種或多種活性劑(例如如本文所述的EGFR抑制劑和/或MEK抑制劑)，混合一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑、佐劑、填充劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、潤滑劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其他材料。本文中有用的藥學(xué)上可接受的賦形劑是常規(guī)的。雷明頓藥物科學(xué)(Remington’sPharmaceuticalSciences)，由E.W.馬丁(Martin)編寫，麥克出版公司(MackPublishingCo.)，伊斯頓(Easton)，賓夕法尼亞州(PA)，第15版(1975)，描述了適用于本文披露的化合物的藥物遞送的組合物和配制品。此類配制品還可以常規(guī)地含有藥學(xué)上可接受的濃度的鹽、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑和/或相容性載體。配制品還可以包括抗氧化劑和/或防腐劑。作為抗氧化劑可以舉出生育酚，丁基羥基苯甲醚，丁基羥基甲苯，亞硫酸鹽(例如硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、丙酮亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、甲醛次硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉)以及去甲二氫愈創(chuàng)木酸。合適的防腐劑例如可以是苯酚、氯代丁醇、芐醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯扎氯銨和西吡氯銨。配制品可以以單位劑型存在。通過任何合適的裝置，組合物和本文中所述的產(chǎn)品可被傳遞到靶細(xì)胞(或包含靶細(xì)胞的組織、器官或受試者)中。用于遞送至受試者的給予途徑和/或遞送裝置的實(shí)例包括：口服、胃腸外、經(jīng)皮、皮內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或靜脈內(nèi)或局部。在一個(gè)實(shí)例中，給予可以通過靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或皮下注射或輸注，或通過口服給予。組合物或產(chǎn)物可以用于口服給予。在一方面中，口腔組合物可以包括含有活性劑組合增強(qiáng)劑以改善藥劑的生物利用度和/或吸收的口服劑型。適合用于口服給予(例如通過攝食)的配制品可以作為不連續(xù)單位呈現(xiàn)，如各自含有預(yù)先確定的量的活性劑的膠囊、扁囊劑或片劑；呈粉劑或顆粒劑；呈水性或非水性液體中的溶液或混懸液；或呈水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑；呈大丸劑；呈藥糖劑；或呈糊劑。在一個(gè)實(shí)例中，組合物或產(chǎn)物可以用于胃腸外給予。胃腸外制劑可以通過一個(gè)或多個(gè)途徑如靜脈內(nèi)、皮下、皮內(nèi)和輸注給予；一個(gè)具體的實(shí)例是靜脈內(nèi)。本文所披露的配制品可以使用注射器、噴射器、用于固體配制品的柱塞、泵、或在本領(lǐng)域中公認(rèn)的用于胃腸外給予的任何其他裝置來給予。組合物或產(chǎn)品可以用于局部給予，例如到皮膚上。量/劑量/治療有效的在組合物(例如藥物組合物)中的活性成分(例如EGFR抑制劑、或MEK抑制劑、或其他活性劑)的實(shí)際量(例如劑量水平)或濃度可以改變，以便獲得活性成分的量，該量對于具體的受試者、組合物、和給予模式是有效的以實(shí)現(xiàn)所希望的治療響應(yīng)(本文中稱作“治療有效的”量或劑量)。所選的劑量水平可以例如，取決于具體的活性成分的活性，所治療的病癥的嚴(yán)重性和條件，并且如果合適的話，所治療的受試者的先前病史。然而，在低于獲得所希望的作用所需的水平上開始化合物的劑量并逐漸增加劑量直至獲得所希望的作用屬于本領(lǐng)域的基本技能。對于給定的受試者或患者的本文所述的組合中的抑制劑的劑量可以由主治醫(yī)師或其他技術(shù)人員來確定，考慮到已知的各種因素以改善藥物作用，這些因素包括疾病或病癥的嚴(yán)重性和類型、體重、性別、飲食、給予時(shí)間和給予途徑、其他藥物和其他相關(guān)因素(如臨床因素)。治療有效劑量可以通過體外或體內(nèi)方法來確定。將要使用的治療有效量將取決于例如，治療目標(biāo)、給予途徑、和受試者的狀況。因此，對于治療師或其他技術(shù)人員來說根據(jù)需要以獲得最佳的治療效果來滴定劑量并修改給予途徑是優(yōu)選的。典型的每日劑量范圍可能是從約0.0001mg/kg至達(dá)到250mg/kg或更多，取決于上文提到的因素。典型地，臨床醫(yī)師或其他技術(shù)人員將管理如本文所述的該抑制劑或組合(例如組合產(chǎn)品)，直到達(dá)到實(shí)現(xiàn)所希望的效果的劑量。在組合中的試劑的單獨(dú)配制品被給予的情況下，其中所述組合中的試劑可被給予(即，是否和在什么時(shí)間點(diǎn)發(fā)生順序的、分別的和/或同時(shí)的給予)的順序可以由醫(yī)師或技術(shù)人員來確定。給予試劑的組合可以如前文所述的發(fā)生，例如試劑的單獨(dú)配制品可以順序地、分別地和/或同時(shí)地給予。藥學(xué)上可接受的鹽本發(fā)明還涉及本文提到的特定的EGFR抑制劑和MEK抑制劑的藥學(xué)上可接受的鹽。因此，本文中提及的“EGFR抑制劑”或“MEK抑制劑”可被解釋為涵蓋具體命名的抑制劑和它們的藥學(xué)上可接受的鹽。針對命名的抑制劑所描述的用途和應(yīng)用可以被認(rèn)為比照適用于其藥學(xué)上可接受的鹽。如此處使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”從屬于以下化合物、材料、組合物和/或劑型，其在正確醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合用于接觸受試者(例如人類)的組織而沒有過度的毒性、刺激性、過敏響應(yīng)或其他問題或并發(fā)癥，與合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱。可以方便地或令人希望地制備、純化、和/或處理本文所述的試劑(例如EGFR抑制劑或MEK抑制劑)的對應(yīng)的鹽，例如藥學(xué)上可接受的鹽。適合的藥學(xué)上可接受的鹽可以是例如足夠堿性的酸加成鹽，例如與無機(jī)酸或有機(jī)酸的酸加成鹽。這樣的酸加成鹽包括但不限于，富馬酸鹽、甲磺酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽和馬來酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。適合的藥學(xué)上可接受的鹽可以是例如足夠酸性的鹽，例如堿金屬鹽或堿土金屬鹽。這樣的堿金屬鹽或堿土金屬鹽包括但不限于，例如鈉或鉀的堿金屬鹽，例如鈣或鎂的堿土金屬鹽，銨鹽，或有機(jī)胺鹽(例如三乙胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺)，嗎啉，N-甲基哌啶，N-乙基哌啶，二芐胺或氨基酸(如賴氨酸)。鹽可以例如是甲磺酸鹽或HBr鹽。實(shí)例本發(fā)明現(xiàn)在將通過具體實(shí)例的方式并參考附圖進(jìn)行描述，它們被提供僅用于說明目的而不應(yīng)被解釋為限制本文的教導(dǎo)。實(shí)例1.PC9抗吉非替尼細(xì)胞種群和PC9抗AZD9291細(xì)胞種群的生成試劑RPMI-1640培養(yǎng)基(西格瑪(Sigma)R7509)杜爾貝科(Dulbecco)磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)(西格瑪D8537)L-谷氨酰胺200mM(100x)(Gibco，生命技術(shù)公司25030)胎牛血清(西格瑪F7524)TrypLEExpress(Gibco，生命技術(shù)公司12605)AZD9291和吉非替尼(內(nèi)部)生長培養(yǎng)基RPMI-1640培養(yǎng)基10％胎牛血清2mML-谷氨酰胺細(xì)胞PC9人NSCLC衍生的細(xì)胞所有的試劑、化合物和細(xì)胞可從商業(yè)來源獲得。使用劑量升級方法的PC9抗吉非替尼、AZD9291或阿法替尼的細(xì)胞種群的生成在多個(gè)新鮮T75燒瓶中在生長培養(yǎng)基中以5x105個(gè)細(xì)胞接種PC9細(xì)胞，并在37℃、5％CO2下孵育。第二天將燒瓶中的培養(yǎng)基去除并用補(bǔ)充有20nM吉非替尼、10nMAZD9291或0.8nM阿法替尼(這些濃度表示所需的抑制PC9細(xì)胞的生長為先前測定的50％(EC50)的吉非替尼、AZD9291或阿法替尼的濃度)的新鮮生長培養(yǎng)基替換。將這些細(xì)胞返回至培養(yǎng)箱中并在補(bǔ)充有20nM吉非替尼、10nMAZD9291或0.8nM阿法替尼的培養(yǎng)基中持續(xù)培養(yǎng)，伴隨每隔2-3天更換培養(yǎng)基。對于每個(gè)PC9燒瓶，最初培養(yǎng)中的大多數(shù)細(xì)胞死亡并變得從燒瓶分開，隨著更換培養(yǎng)基將這些細(xì)胞去除。剩余的少數(shù)細(xì)胞附著在燒瓶中，并開始成長為抗性菌落。這些菌落持續(xù)生長直至該燒瓶被約80％充滿。在此階段將培養(yǎng)基從燒瓶中去除并添加10ml的PBS。PBS輕輕地洗過細(xì)胞并被去除。添加2ml的TrypLEExpress并且搖晃燒瓶以確保所有的細(xì)胞被該胰蛋白酶溶液覆蓋。將這些細(xì)胞在37℃、5％CO2下孵育10分鐘。然后將燒瓶輕輕打開以去除所有的細(xì)胞，并將這些細(xì)胞重新懸浮于補(bǔ)充有如以上的吉非替尼、AZD9291或阿法替尼的總計(jì)10ml的生長培養(yǎng)基中。將這些細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并且用于在新鮮的T75燒瓶中在補(bǔ)充有40nM吉非替尼、20nMAZD9291或1.6nM阿法替尼(即雙倍的吉非替尼、AZD9291或阿法替尼濃度)的生長培養(yǎng)基中接種5x105個(gè)細(xì)胞。針對每個(gè)PC9燒瓶，如以上所述的用吉非替尼、AZD9291或阿法替尼繼續(xù)進(jìn)行這些細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代，每當(dāng)抗性細(xì)胞達(dá)到約80％融合時(shí)，將吉非替尼、AZD9291或阿法替尼的濃度加倍，直至達(dá)到1500nM吉非替尼、160nMAZD9291或1500nM阿法替尼的最大濃度。針對每一個(gè)抗性種群記錄達(dá)到各濃度加倍所用的時(shí)間(即，針對PC9細(xì)胞達(dá)到約80％融合所用的時(shí)間)，并對濃度作圖。圖1示出了針對生成抗吉非替尼的PC9細(xì)胞的種群所用的時(shí)間繪制的實(shí)例數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)表明，一旦這些細(xì)胞已經(jīng)成為抗約320nm吉非替尼(約62天)，抑制劑濃度的進(jìn)一步增加對細(xì)胞的生長速率和存活的影響較小。這表明，這些PC9細(xì)胞在第一個(gè)62天已獲得抗性機(jī)制，該機(jī)制可以規(guī)避EGFR抑制并甚至當(dāng)吉非替尼的濃度進(jìn)一步提高到1500nM時(shí)允許這些細(xì)胞存活。這些抗性細(xì)胞被維持為抗吉非替尼的細(xì)胞種群。對生成的這些抗性種群進(jìn)行了擴(kuò)展并凍結(jié)了細(xì)胞樣本，用于進(jìn)一步的分子概況分析以鑒定種群內(nèi)的潛在的抗性機(jī)制。使用AZD9291的單一濃度的PC9抗AZD9291細(xì)胞種群的生成。在一個(gè)新鮮T75燒瓶中在生長培養(yǎng)基中以5x105個(gè)細(xì)胞接種PC9細(xì)胞，并在37℃、5％CO2下孵育。第二天將燒瓶中的培養(yǎng)基去除并用補(bǔ)充有160nMAZD9291(先前確定為AZD9291的臨床相關(guān)濃度)的新鮮生長培養(yǎng)基替換。將這些細(xì)胞返回至培養(yǎng)箱中并在補(bǔ)充有160nMAZD9291的培養(yǎng)基中持續(xù)培養(yǎng)，伴隨每隔2-3天更換培養(yǎng)基。最初培養(yǎng)中的大多數(shù)細(xì)胞死亡并變得與燒瓶分開，隨著更換培養(yǎng)基將這些細(xì)胞去除。剩余的非常少數(shù)的細(xì)胞附著在燒瓶上，并開始成長為抗性菌落。這些菌落持續(xù)生長直至該燒瓶被約80％充滿(在培養(yǎng)中約70天)。對該細(xì)胞種群進(jìn)行了擴(kuò)展并凍結(jié)了細(xì)胞樣本，用于進(jìn)一步的分析以鑒定種群內(nèi)的潛在的抗性機(jī)制。實(shí)例2.吉非替尼、AZD9291和阿法替尼抗性的PC9細(xì)胞種群的基因圖譜和NRAS變更的鑒定從抗性細(xì)胞制備細(xì)胞沉淀將PC9吉非替尼抗性的、PC9AZD9291抗性的和PC9阿法替尼抗性的細(xì)胞種群的樣本在T75燒瓶中培養(yǎng)直至它們約80％融合。如先前所述的用胰蛋白酶處理細(xì)胞并重新懸浮于10ml的總體積的PBS中。將這些細(xì)胞通過在1000rpm下離心5分鐘進(jìn)行沉淀并在另外的10mL的PBS中洗滌。沉淀這些細(xì)胞并且去除盡可能多的PBS。在進(jìn)一步處理之前將這些細(xì)胞沉淀在-20℃下凍結(jié)最多1周。必要時(shí)，使用類似的方法從其他細(xì)胞種群(例如親本PC9細(xì)胞)獲得細(xì)胞沉淀。從細(xì)胞中制備DNA根據(jù)生產(chǎn)商的說明，使用AllprepDNA/RNA/miRNAUniversal試劑盒(凱杰公司(Qiagen))來制備DNA樣本，并且包括RNA酶步驟以防止RNA遺留。使用至少兩種下述平臺：下一代測序(NGS)和陣列法基因組比較雜交(aCGH)，使用這些DNA樣本來確定DNA突變和/或基因拷貝數(shù)改變的存在。NRASE63K、G12V和G12R突變的鑒定針對抗吉非替尼的、抗AZD9291的和抗阿法替尼的PC9細(xì)胞種群進(jìn)行NGS。使用QiagenGeneRead系統(tǒng)(多路PCR引物，靶向來自20種肺癌相關(guān)的基因的所有外顯子)進(jìn)行分析以富集純化的DNA，隨后使用Illumina技術(shù)測序。通過使用桑格測序，生命技術(shù)公司IonTorrentPGM測序，或AgilentHaloplexTM富集，隨后通過Illumina測序來測序一樣本亞組而確認(rèn)結(jié)果。通過色譜圖的直接讀取和基于新一代測序的方法，通過標(biāo)準(zhǔn)方法論-測序閱讀QC、比對人類基因組參照hg19、變體識別和目測后的突變的召喚來解釋桑格測序?？偟恼f來，許多PC9抗吉非替尼細(xì)胞系(PC9IR-GM、PC9IRLR、PC9IR-4、PCRIr-6)和抗AZD9291細(xì)胞系(PC99291-5，PC99291_6、PC99291-LOB_1、PC99291-3和PC99291-2)連同親本PC9細(xì)胞系被分析。在一個(gè)抗吉非替尼細(xì)胞系(PC9IR-LR)中并還在一個(gè)抗AZD9291細(xì)胞系(PC99291-LOB_1)中發(fā)現(xiàn)了新的NRAS突變，E63K。使用QiagenGeneRead體系、和HaloplexTM(安捷倫科技公司(AgilentTechnologies))體系的分析表明，在測試的親本PC9細(xì)胞系或其他抗吉非替尼或抗AZD9291細(xì)胞系中未出現(xiàn)顯著水平的編碼E63K突變的對應(yīng)的DNA突變(C到T)(參見下面表1和表2)。因此，E63K突變似乎沒有預(yù)先存在，但是響應(yīng)于EGFR抑制而獲得。如以上所述針對E63K突變進(jìn)行NGS分析。表1-GeneRead結(jié)果給出的第一個(gè)數(shù)字表示讀取的數(shù)目，并且在括號中的數(shù)字表示來自測序的平均phred得分(低于25分將被認(rèn)為是雜音)。該E63K(C到T)突變是粗體的。表2-Haloplex結(jié)果給出的第一個(gè)數(shù)字表示讀取的數(shù)目，并且在括號中的數(shù)字表示來自測序的平均phred得分。該E63K(C到T)突變是粗體的。當(dāng)針對EGFRT790M突變測試細(xì)胞系時(shí)，發(fā)現(xiàn)沒有一個(gè)E63K抗性細(xì)胞系具有該突變。在其他抗吉非替尼細(xì)胞系(PC9IR-4、PC9IR-GM和PC9Ir-6)中檢測到該T709M突變，但是其不存在于任何抗AZD9291細(xì)胞系中。NRAS拷貝數(shù)增加的鑒定使用具有親本PC9細(xì)胞和PC9抗阿法替尼細(xì)胞(PC9_阿法替尼_5)的CGH來鑒定NRAS拷貝數(shù)的增加。下面詳述了NRAS基因拷貝數(shù)的增加，在估計(jì)的拷貝數(shù)(表3)和log2拷貝數(shù)比率(表4)中：基因ID基因符號樣本估計(jì)的_拷貝_數(shù)4893NRASPC9_阿法替尼-58.4790345254893NRASPC9親本的平均數(shù)3.296191359表3-與PC9親本細(xì)胞系的平均數(shù)相比，在阿法替尼_5中預(yù)估的NRAS基因拷貝數(shù)基因ID基因符號樣本Log2_比率4893NRASPC9_阿法替尼-52.08394893NRASPC9親本的平均數(shù)0.7208表4-與PC9親本細(xì)胞系的平均數(shù)相比，在PC9_抗阿法替尼_5中的NRAS基因拷貝數(shù)的Log2比率使用PerlScript計(jì)算以上數(shù)值。所得的log2數(shù)據(jù)隨后被分析、格式化、和可視化。將>1的閾值和<-0.5的倍數(shù)變化應(yīng)用至數(shù)據(jù)中以便使來自所有樣本的CGH數(shù)據(jù)可視化。從所得的可視化中可知，相比于親本PC9細(xì)胞系的平均數(shù)，NRAS基因被確定為表示拷貝數(shù)增加。使用如上所述的NGS，也在2PC9抗AZD9291種群中檢測到了NRAS基因拷貝增加表5樣本也稱為NRAS增加PC9IR49291R_2PC9GR6AZDR_22.4PC9IR49291R_3PC9GR6AZDR_33.68表5-通過序列分析檢測NRAS基因拷貝數(shù)增加。數(shù)值表示相對于各自的親本細(xì)胞的、呈倍數(shù)變化的增加。實(shí)例4.對司美替尼(MEK抑制劑)和EGFR抑制劑的抗性細(xì)胞系的敏感性分析使用細(xì)胞測定(使用SytoxGreen染色作為終點(diǎn))來測定一組典型的途徑抑制劑對細(xì)胞生長和存活的影響。試劑RPMI-1640培養(yǎng)基(西格瑪R7509)杜爾貝科氏磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)(西格瑪D8537)L-谷氨酰胺200mM(100x)(Gibco，生命技術(shù)公司25030)胎牛血清(西格瑪F7524)TrypLEExpress(Gibco，生命技術(shù)公司12605)AZD9291和吉非替尼(內(nèi)部)生長培養(yǎng)基RPMI-1640培養(yǎng)基10％胎牛血清2mML-谷氨酰胺SytoxGreen溶液-SytoxGreen染色，將英杰公司(Invitrogen)S70205mM原溶液稀釋于2μM的含有5mMEDTApH7.5的TBS中0.25％皂苷溶液/孔(西格瑪-奧德里奇(Sigma-Aldrich)目錄號84510)。(在含有5mMEDTApH7.5的TBS和滅菌的過濾器中制備皂苷2.5％原溶液)測試的細(xì)胞系：PC9(NRASWT)PC9_IRGM(NRASWT)(AKA.PC9GR_1)PC9_9291RLOB1(NRASE63K)(AKAPC9AZDR_5)PC9_IRLR(NRASE63K)(AKA.PC9GR_2)PC9_9291R_3(NRASG12V)(AKA.PC9AZDR_2)PC9_9291R_5(NRASWT)(AKA.PC9AZDR_3)PC9_阿法替尼_5(NRASWT增加)(AKA.PC9AR_5)PC9_IR4_9291R_2(NRASWT增加)(AKA.PC9GR6AZDR_2)PC9_IR4_9291R_3(NRASWT增加)(AKA.PC9GR6AZDR_3)方法將細(xì)胞系以70μL的RPMI培養(yǎng)基/孔中的1000個(gè)細(xì)胞/孔置于384孔平板中，該RPMI培養(yǎng)基包含10％胎牛血清、2mML-谷氨酰胺和初始的EGFR抑制劑。允許這些細(xì)胞在37℃、5％CO2下附接過夜。第二天使用Echo液體處理器Labcyte(加利福尼亞州，美國)將測試化合物的滴定添加至測定平板中，并且將處理的細(xì)胞在37℃、5％CO2下再孵育72小時(shí)。作為11點(diǎn)劑量響應(yīng)(具有10μM的頂濃度和1/3的稀釋液)，對每種化合物進(jìn)行試驗(yàn)。將經(jīng)化合物處理的平板孵育72小時(shí)后，每孔添加5μL的2μMSYTOXGreen核酸染色(生命技術(shù)公司(佩斯利(Paisley)，英國)，并且將這些平板在室溫下孵育一小時(shí)。在AcumenTTPLabTechLtd.(墨爾本，英國)上測量每孔熒光細(xì)胞的數(shù)量，該數(shù)量表示死細(xì)胞數(shù)。每孔添加10μL的0.25％皂苷西格瑪(多塞特(Dorset)，英國)并且將這些平板在室溫下孵育過夜。每孔熒光細(xì)胞的總數(shù)在Acumen上獲得。從細(xì)胞的總數(shù)中減去死亡細(xì)胞的數(shù)量并且將活細(xì)胞數(shù)作圖以從劑量響應(yīng)曲線中確定EC50值。觀察到，當(dāng)與其中NRAS突變沒被檢測到的親本細(xì)胞系和其他細(xì)胞系相比時(shí)，已經(jīng)獲得NRAS突變的細(xì)胞系對司美替尼更敏感。下表(表6)示出了整個(gè)NRASWT和測試的突變體細(xì)胞系的EC50μM的值。數(shù)據(jù)表明，當(dāng)組合初始的EGFR抑制劑治療并與親本細(xì)胞系相比時(shí)，已經(jīng)獲得NRAS突變的細(xì)胞系對司美替尼更敏感。相比之下，當(dāng)組合初始的EGFR抑制劑治療時(shí)，其中沒有檢測到NRAS突變的細(xì)胞系對司美替尼不敏感。細(xì)胞系司美替尼μMPC9(NRASWT)6.95PC9_IRGM(NRASWT)7.24PC9_IRLR(NRASE63K)0.62PC9_阿法替尼_5(NRAS增加)0.89PC9_9291R_3(NRASG12V)1.4PC9_9291R_LOB1(NRASE63K)0.167PC9_9291R_LOB3(NRASG12R)0.14PC9_IR4_9291R_2(NRASWT增加)0.54PC9_IR4_9291R_3(NRASWT增加)0.13表6將細(xì)胞系用司美替尼的劑量滴定進(jìn)行處理并且從劑量響應(yīng)曲線中確定EC50μM值。實(shí)例劑量響應(yīng)曲線示于圖2-6中。實(shí)例5：在存活的抗吉非替尼或抗AZD9291細(xì)胞種群中的NRASE63K突變的功能角色的分析為了研究新穎的NRASE63K突變是否是驅(qū)動(dòng)吉非替尼或AZD9291抗性細(xì)胞的存活的激活突變，本發(fā)明中使用一系列的技術(shù)：(a)RAS激活測定以將親本PC9細(xì)胞(WTNRAS)中的活性NRAS的基礎(chǔ)水平與具有突變體NRAS的抗性細(xì)胞中的活性NRAS的基礎(chǔ)水平進(jìn)行比較。(b)WT和突變體NRAS表達(dá)的siRNA敲低來研究對下游信號傳導(dǎo)和細(xì)胞生長的影響。(c)在PC9細(xì)胞中的NRASWT和NRASE63K突變體變體的外源表達(dá)來研究吉非替尼或AZD9291對細(xì)胞生長抑制的影響。(a).RAS激活測定。方法將PC9細(xì)胞和PC9AZD9291抗性細(xì)胞在不含有AZD9291的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天。然后將細(xì)胞置于6孔板和血清中饑餓過夜。第二天將這些細(xì)胞用補(bǔ)充有或沒有160nMAZD9291的培養(yǎng)基處理2小時(shí)。制備裂解物并將活性NRAS使用GST-RAS結(jié)合域下拉測定法(賽默科技公司(ThermoScientific))進(jìn)行分離。將拉下的裂解物通過蛋白質(zhì)印跡法使用NRAS特異性抗體進(jìn)行分析。結(jié)果在親本PC-9細(xì)胞中的基礎(chǔ)的活性NRAS水平相比在其中E63K或G12VNRAS突變已檢測到的抗PC-9細(xì)胞種群是較低的。此外，用160nMAZD9291處理親本PC-9細(xì)胞2小時(shí)導(dǎo)致磷酸化EGFR和活性NRAS的下降。相比之下，突變體NRAS細(xì)胞中磷酸化EGFR的下降不與活性NRAS的相應(yīng)下降相關(guān)聯(lián)，表明在這些細(xì)胞中NRAS的組成型激活獨(dú)立于EGFR的組成型激活。結(jié)果示于圖7中。(b)NRAS和KRASsiRNA處理對PC9、PC9抗吉非替尼和PC9抗AZD9291細(xì)胞種群的影響的分析將PC9、PC9抗吉非替尼和PC9抗AZD9291細(xì)胞以5x105個(gè)細(xì)胞/孔平鋪于6孔板中，該板在適當(dāng)情況下在每孔2ml的補(bǔ)充有EGFR抑制劑的生長培養(yǎng)基中(抗性細(xì)胞在EGFR抑制劑的存在下生長)。將這些細(xì)胞在37℃、5％CO2下孵育過夜。第二天將這些細(xì)胞用來自Dharmacon的如表7中詳述的終濃度為20nM的siRNA進(jìn)行處理。表7NRAS和KRASsiRNA構(gòu)建體的序列。每種siRNA構(gòu)建體在Optimem(生命技術(shù)公司)介質(zhì)中使用RNAiMAX(英杰公司)作為轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行制備。針對每孔：將2.5μl的siRNA(20μM原溶液)與250μL的Optimem混合；并將2.5μL的RNAiMAX與250μL的Optimem混合。將這2種溶液通過移液混合在一起，并在室溫下靜置5分鐘。然后將最終的500μL溶液移液到6孔板中的適當(dāng)?shù)?mL的生長培養(yǎng)基中。將這些板輕輕旋渦并在37℃、5％CO2下進(jìn)一步培養(yǎng)過夜。第二天收獲每孔細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)。然后將來自每次轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的樣本以3000個(gè)細(xì)胞/孔接種于96孔板中，該板在100μL的補(bǔ)充有EGFR抑制劑的生長培養(yǎng)基中，適當(dāng)情況下對于每個(gè)轉(zhuǎn)染條件跨越5個(gè)重復(fù)孔。將細(xì)胞的其余部分重新鋪板于新鮮6孔板中。將96孔板和6孔板都返回至培養(yǎng)箱中用于進(jìn)一步生長。第二天，從該6孔板制備裂解物以使得用siRNA處理48小時(shí)后，可以評估蛋白表達(dá)的敲低。針對以下水平通過蛋白質(zhì)印跡法分析裂解物：磷酸化的EGFR，磷酸化的ERK、NRAS和KRAS。GAPDH的水平被用作所有細(xì)胞樣本的上樣對照。(圖8)允許96孔板中的對應(yīng)細(xì)胞再生長5天，這之后通過每孔加入100μL4％甲醛將它們在室溫下固定30分鐘。將孔用PBS洗滌，將細(xì)胞核通過加入Hoechst(1/5000稀釋液)在室溫下染色30分鐘。使用CellomicsArrayscan以10×放大率計(jì)數(shù)9個(gè)視野/孔將細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。將平均細(xì)胞數(shù)作圖(圖9)。蛋白質(zhì)印跡法的結(jié)果表明，在所有細(xì)胞系中通過使用的全部3個(gè)NRASsiRNA構(gòu)建體敲低NRAS表達(dá)，但未觀察到NTC或KRAS的siRNA構(gòu)建體對NRAS表達(dá)的影響。另一方面，只有KRAS_1構(gòu)建體引起KRAS表達(dá)的敲低而對NRAS的表達(dá)(圖8)沒有影響。通過所述的siRNA轉(zhuǎn)染對細(xì)胞生長的影響表明，在其中新穎的NRAS突變已被鑒定的抗吉非替尼和抗AZD9291細(xì)胞系中，NRAS表達(dá)的敲低顯著抑制細(xì)胞生長而KRAS表達(dá)的敲低對細(xì)胞生長沒有影響。相比之下，NRAS或KRAS的敲低都不影響PC9親本細(xì)胞的生長(圖9)。這個(gè)數(shù)據(jù)表明，NRASE63K突變是激活突變并且它驅(qū)動(dòng)抗性細(xì)胞的存活。(c)在PC9細(xì)胞中的NRASWT和NRASE63K突變體DNA變體的過表達(dá)的分析來研究吉非替尼或AZD9291對細(xì)胞生長抑制的影響。將PC9細(xì)胞用對照DNA構(gòu)建體(pcDNA3.1+對照)，或設(shè)計(jì)來表達(dá)E63K突變體NRAS的構(gòu)建體(pcDNA3.1+/NRASE63K(生命科技有限公司))進(jìn)行轉(zhuǎn)染。表達(dá)MaxCyte轉(zhuǎn)染技術(shù)被用于電穿孔PC9細(xì)胞96小時(shí)。轉(zhuǎn)染前的一天進(jìn)行PC9細(xì)胞傳代。在轉(zhuǎn)染當(dāng)天收獲細(xì)胞并以9x107個(gè)細(xì)胞每600μLMaxCyte緩沖液進(jìn)行重新懸浮。將100μL的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到MaxCyte槽中并將細(xì)胞用20μgDNA構(gòu)建體進(jìn)行電穿孔。電穿孔之后，針對每種情況將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至6孔板中并在37℃下孵育30分鐘，這之后將它們以4x105個(gè)細(xì)胞/孔接種于6孔板中。過夜培養(yǎng)之后收獲這些細(xì)胞并在384孔板中以1000個(gè)細(xì)胞/孔進(jìn)行再鋪板。第二天將這些細(xì)胞用100nMAZD9291或300nM吉非替尼進(jìn)行給予并再次平板孵育96小時(shí)。使用如前文所述的sytoxgreen方法確定活細(xì)胞數(shù)。圖10顯示，當(dāng)細(xì)胞過度表達(dá)E63K突變體NRAS時(shí)，由AZD9291和吉非替尼抑制的細(xì)胞生長降低。含有NRASG12R突變的細(xì)胞種群對MEK抑制劑(司美替尼)的敏感性使用如前文闡明的標(biāo)準(zhǔn)方法制備抗AZD9291PC9細(xì)胞系。培養(yǎng)并分析一系列的此類抗性細(xì)胞種群。發(fā)現(xiàn)一個(gè)這樣的細(xì)胞種群含有所述NRASG12R突變，并且該種群也顯示相比于親本細(xì)胞系對MEK抑制劑司美替尼的敏感性的>5倍增加。序列表<110>阿斯利康A(chǔ)B和阿斯利康英國有限公司(AstraZenecaABandAstraZenecaUKLimited)<120>新方法<130>200196-WO-PCT<140>US62/013573<141>2014-06-18<150>US61/975088<151>2014-04-04<160>17<170>PatentIn3.5版本<210>1<211>1210<212>PRT(1-蛋白質(zhì))智人<213>氨基酸序列：NP_005219.2<400>1MetArgProSerGlyThrAlaGlyAlaAlaLeuLeuAlaLeuLeuAla151015AlaLeuCysProAlaSerArgAlaLeuGluGluLysLysValCysGln202530GlyThrSerAsnLysLeuThrGlnLeuGlyThrPheGluAspHisPhe354045LeuSerLeuGlnArgMetPheAsnAsnCysGluValValLeuGlyAsn505560LeuGluIleThrTyrValGlnArgAsnTyrAspLeuSerPheLeuLys65707580ThrIleGlnGluValAlaGlyTyrValLeuIleAlaLeuAsnThrVal859095GluArgIleProLeuGluAsnLeuGlnIleIleArgGlyAsnMetTyr100105110TyrGluAsnSerTyrAlaLeuAlaValLeuSerAsnTyrAspAlaAsn115120125LysThrGlyLeuLysGluLeuProMetArgAsnLeuGlnGluIleLeu130135140HisGlyAlaValArgPheSerAsnAsnProAlaLeuCysAsnValGlu145150155160SerIleGlnTrpArgAspIleValSerSerAspPheLeuSerAsnMet165170175SerMetAspPheGlnAsnHisLeuGlySerCysGlnLysCysAspPro180185190SerCysProAsnGlySerCysTrpGlyAlaGlyGluGluAsnCysGln195200205LysLeuThrLysIleIleCysAlaGlnGlnCysSerGlyArgCysArg210215220GlyLysSerProSerAspCysCysHisAsnGlnCysAlaAlaGlyCys225230235240ThrGlyProArgGluSerAspCysLeuValCysArgLysPheArgAsp245250255GluAlaThrCysLysAspThrCysProProLeuMetLeuTyrAsnPro260265270ThrThrTyrGlnMetAspValAsnProGluGlyLysTyrSerPheGly275280285AlaThrCysValLysLysCysProArgAsnTyrValValThrAspHis290295300GlySerCysValArgAlaCysGlyAlaAspSerTyrGluMetGluGlu305310315320AspGlyValArgLysCysLysLysCysGluGlyProCysArgLysVal325330335CysAsnGlyIleGlyIleGlyGluPheLysAspSerLeuSerIleAsn340345350AlaThrAsnIleLysHisPheLysAsnCysThrSerIleSerGlyAsp355360365LeuHisIleLeuProValAlaPheArgGlyAspSerPheThrHisThr370375380ProProLeuAspProGlnGluLeuAspIleLeuLysThrValLysGlu385390395400IleThrGlyPheLeuLeuIleGlnAlaTrpProGluAsnArgThrAsp405410415LeuHisAlaPheGluAsnLeuGluIleIleArgGlyArgThrLysGln420425430HisGlyGlnPheSerLeuAlaValValSerLeuAsnIleThrSerLeu435440445GlyLeuArgSerLeuLysGluIleSerAspGlyAspValIleIleSer450455460GlyAsnLysAsnLeuCysTyrAlaAsnThrIleAsnTrpLysLysLeu465470475480PheGlyThrSerGlyGlnLysThrLysIleIleSerAsnArgGlyGlu485490495AsnSerCysLysAlaThrGlyGlnValCysHisAlaLeuCysSerPro500505510GluGlyCysTrpGlyProGluProArgAspCysValSerCysArgAsn515520525ValSerArgGlyArgGluCysValAspLysCysAsnLeuLeuGluGly530535540GluProArgGluPheValGluAsnSerGluCysIleGlnCysHisPro545550555560GluCysLeuProGlnAlaMetAsnIleThrCysThrGlyArgGlyPro565570575AspAsnCysIleGlnCysAlaHisTyrIleAspGlyProHisCysVal580585590LysThrCysProAlaGlyValMetGlyGluAsnAsnThrLeuValTrp595600605LysTyrAlaAspAlaGlyHisValCysHisLeuCysHisProAsnCys610615620ThrTyrGlyCysThrGlyProGlyLeuGluGlyCysProThrAsnGly625630635640ProLysIleProSerIleAlaThrGlyMetValGlyAlaLeuLeuLeu645650655LeuLeuValValAlaLeuGlyIleGlyLeuPheMetArgArgArgHis660665670IleValArgLysArgThrLeuArgArgLeuLeuGlnGluArgGluLeu675680685ValGluProLeuThrProSerGlyGluAlaProAsnGlnAlaLeuLeu690695700ArgIleLeuLysGluThrGluPheLysLysIleLysValLeuGlySer705710715720GlyAlaPheGlyThrValTyrLysGlyLeuTrpIleProGluGlyGlu725730735LysValLysIleProValAlaIleLysGluLeuArgGluAlaThrSer740745750ProLysAlaAsnLysGluIleLeuAspGluAlaTyrValMetAlaSer755760765ValAspAsnProHisValCysArgLeuLeuGlyIleCysLeuThrSer770775780ThrValGlnLeuIleThrGlnLeuMetProPheGlyCysLeuLeuAsp785790795800TyrValArgGluHisLysAspAsnIleGlySerGlnTyrLeuLeuAsn805810815TrpCysValGlnIleAlaLysGlyMetAsnTyrLeuGluAspArgArg820825830LeuValHisArgAspLeuAlaAlaArgAsnValLeuValLysThrPro835840845GlnHisValLysIleThrAspPheGlyLeuAlaLysLeuLeuGlyAla850855860GluGluLysGluTyrHisAlaGluGlyGlyLysValProIleLysTrp865870875880MetAlaLeuGluSerIleLeuHisArgIleTyrThrHisGlnSerAsp885890895ValTrpSerTyrGlyValThrValTrpGluLeuMetThrPheGlySer900905910LysProTyrAspGlyIleProAlaSerGluIleSerSerIleLeuGlu915920925LysGlyGluArgLeuProGlnProProIleCysThrIleAspValTyr930935940MetIleMetValLysCysTrpMetIleAspAlaAspSerArgProLys945950955960PheArgGluLeuIleIleGluPheSerLysMetAlaArgAspProGln965970975ArgTyrLeuValIleGlnGlyAspGluArgMetHisLeuProSerPro980985990ThrAspSerAsnPheTyrArgAlaLeuMetAspGluGluAspMetAsp99510001005AspValValAspAlaAspGluTyrLeuIleProGlnGlnGlyPhe101010151020PheSerSerProSerThrSerArgThrProLeuLeuSerSerLeu102510301035SerAlaThrSerAsnAsnSerThrValAlaCysIleAspArgAsn104010451050GlyLeuGlnSerCysProIleLysGluAspSerPheLeuGlnArg105510601065TyrSerSerAspProThrGlyAlaLeuThrGluAspSerIleAsp107010751080AspThrPheLeuProValProGluTyrIleAsnGlnSerValPro108510901095LysArgProAlaGlySerValGlnAsnProValTyrHisAsnGln110011051110ProLeuAsnProAlaProSerArgAspProHisTyrGlnAspPro111511201125HisSerThrAlaValGlyAsnProGluTyrLeuAsnThrValGln113011351140ProThrCysValAsnSerThrPheAspSerProAlaHisTrpAla114511501155GlnLysGlySerHisGlnIleSerLeuAspAsnProAspTyrGln116011651170GlnAspPhePheProLysGluAlaLysProAsnGlyIlePheLys117511801185GlySerThrAlaGluAsnAlaGluTyrLeuArgValAlaProGln119011951200SerSerGluPheIleGlyAla12051210<210>2<211>5616<212>DNA智人<213>cDNA序列：NM_005228.3<400>2ccccggcgcagcgcggccgcagcagcctccgccccccgcacggtgtgagcgcccgacgcg60gccgaggcggccggagtcccgagctagccccggcggccgccgccgcccagaccggacgac120aggccacctcgtcggcgtccgcccgagtccccgcctcgccgccaacgccacaaccaccgc180gcacggccccctgactccgtccagtattgatcgggagagccggagcgagctcttcgggga240gcagcgatgcgaccctccgggacggccggggcagcgctcctggcgctgctggctgcgctc300tgcccggcgagtcgggctctggaggaaaagaaagtttgccaaggcacgagtaacaagctc360acgcagttgggcacttttgaagatcattttctcagcctccagaggatgttcaataactgt420gaggtggtccttgggaatttggaaattacctatgtgcagaggaattatgatctttccttc480ttaaagaccatccaggaggtggctggttatgtcctcattgccctcaacacagtggagcga540attcctttggaaaacctgcagatcatcagaggaaatatgtactacgaaaattcctatgcc600ttagcagtcttatctaactatgatgcaaataaaaccggactgaaggagctgcccatgaga660aatttacaggaaatcctgcatggcgccgtgcggttcagcaacaaccctgccctgtgcaac720gtggagagcatccagtggcgggacatagtcagcagtgactttctcagcaacatgtcgatg780gacttccagaaccacctgggcagctgccaaaagtgtgatccaagctgtcccaatgggagc840tgctggggtgcaggagaggagaactgccagaaactgaccaaaatcatctgtgcccagcag900tgctccgggcgctgccgtggcaagtcccccagtgactgctgccacaaccagtgtgctgca960ggctgcacaggcccccgggagagcgactgcctggtctgccgcaaattccgagacgaagcc1020acgtgcaaggacacctgccccccactcatgctctacaaccccaccacgtaccagatggat1080gtgaaccccgagggcaaatacagctttggtgccacctgcgtgaagaagtgtccccgtaat1140tatgtggtgacagatcacggctcgtgcgtccgagcctgtggggccgacagctatgagatg1200gaggaagacggcgtccgcaagtgtaagaagtgcgaagggccttgccgcaaagtgtgtaac1260ggaataggtattggtgaatttaaagactcactctccataaatgctacgaatattaaacac1320ttcaaaaactgcacctccatcagtggcgatctccacatcctgccggtggcatttaggggt1380gactccttcacacatactcctcctctggatccacaggaactggatattctgaaaaccgta1440aaggaaatcacagggtttttgctgattcaggcttggcctgaaaacaggacggacctccat1500gcctttgagaacctagaaatcatacgcggcaggaccaagcaacatggtcagttttctctt1560gcagtcgtcagcctgaacataacatccttgggattacgctccctcaaggagataagtgat1620ggagatgtgataatttcaggaaacaaaaatttgtgctatgcaaatacaataaactggaaa1680aaactgtttgggacctccggtcagaaaaccaaaattataagcaacagaggtgaaaacagc1740tgcaaggccacaggccaggtctgccatgccttgtgctcccccgagggctgctggggcccg1800gagcccagggactgcgtctcttgccggaatgtcagccgaggcagggaatgcgtggacaag1860tgcaaccttctggagggtgagccaagggagtttgtggagaactctgagtgcatacagtgc1920cacccagagtgcctgcctcaggccatgaacatcacctgcacaggacggggaccagacaac1980tgtatccagtgtgcccactacattgacggcccccactgcgtcaagacctgcccggcagga2040gtcatgggagaaaacaacaccctggtctggaagtacgcagacgccggccatgtgtgccac2100ctgtgccatccaaactgcacctacggatgcactgggccaggtcttgaaggctgtccaacg2160aatgggcctaagatcccgtccatcgccactgggatggtgggggccctcctcttgctgctg2220gtggtggccctggggatcggcctcttcatgcgaaggcgccacatcgttcggaagcgcacg2280ctgcggaggctgctgcaggagagggagcttgtggagcctcttacacccagtggagaagct2340cccaaccaagctctcttgaggatcttgaaggaaactgaattcaaaaagatcaaagtgctg2400ggctccggtgcgttcggcacggtgtataagggactctggatcccagaaggtgagaaagtt2460aaaattcccgtcgctatcaaggaattaagagaagcaacatctccgaaagccaacaaggaa2520atcctcgatgaagcctacgtgatggccagcgtggacaacccccacgtgtgccgcctgctg2580ggcatctgcctcacctccaccgtgcagctcatcacgcagctcatgcccttcggctgcctc2640ctggactatgtccgggaacacaaagacaatattggctcccagtacctgctcaactggtgt2700gtgcagatcgcaaagggcatgaactacttggaggaccgtcgcttggtgcaccgcgacctg2760gcagccaggaacgtactggtgaaaacaccgcagcatgtcaagatcacagattttgggctg2820gccaaactgctgggtgcggaagagaaagaataccatgcagaaggaggcaaagtgcctatc2880aagtggatggcattggaatcaattttacacagaatctatacccaccagagtgatgtctgg2940agctacggggtgaccgtttgggagttgatgacctttggatccaagccatatgacggaatc3000cctgccagcgagatctcctccatcctggagaaaggagaacgcctccctcagccacccata3060tgtaccatcgatgtctacatgatcatggtcaagtgctggatgatagacgcagatagtcgc3120ccaaagttccgtgagttgatcatcgaattctccaaaatggcccgagacccccagcgctac3180cttgtcattcagggggatgaaagaatgcatttgccaagtcctacagactccaacttctac3240cgtgccctgatggatgaagaagacatggacgacgtggtggatgccgacgagtacctcatc3300ccacagcagggcttcttcagcagcccctccacgtcacggactcccctcctgagctctctg3360agtgcaaccagcaacaattccaccgtggcttgcattgatagaaatgggctgcaaagctgt3420cccatcaaggaagacagcttcttgcagcgatacagctcagaccccacaggcgccttgact3480gaggacagcatagacgacaccttcctcccagtgcctgaatacataaaccagtccgttccc3540aaaaggcccgctggctctgtgcagaatcctgtctatcacaatcagcctctgaaccccgcg3600cccagcagagacccacactaccaggacccccacagcactgcagtgggcaaccccgagtat3660ctcaacactgtccagcccacctgtgtcaacagcacattcgacagccctgcccactgggcc3720cagaaaggcagccaccaaattagcctggacaaccctgactaccagcaggacttctttccc3780aaggaagccaagccaaatggcatctttaagggctccacagctgaaaatgcagaataccta3840agggtcgcgccacaaagcagtgaatttattggagcatgaccacggaggatagtatgagcc3900ctaaaaatccagactctttcgatacccaggaccaagccacagcaggtcctccatcccaac3960agccatgcccgcattagctcttagacccacagactggttttgcaacgtttacaccgacta4020gccaggaagtacttccacctcgggcacattttgggaagttgcattcctttgtcttcaaac4080tgtgaagcatttacagaaacgcatccagcaagaatattgtccctttgagcagaaatttat4140ctttcaaagaggtatatttgaaaaaaaaaaaaagtatatgtgaggatttttattgattgg4200ggatcttggagtttttcattgtcgctattgatttttacttcaatgggctcttccaacaag4260gaagaagcttgctggtagcacttgctaccctgagttcatccaggcccaactgtgagcaag4320gagcacaagccacaagtcttccagaggatgcttgattccagtggttctgcttcaaggctt4380ccactgcaaaacactaaagatccaagaaggccttcatggccccagcaggccggatcggta4440ctgtatcaagtcatggcaggtacagtaggataagccactctgtcccttcctgggcaaaga4500agaaacggaggggatggaattcttccttagacttacttttgtaaaaatgtccccacggta4560cttactccccactgatggaccagtggtttccagtcatgagcgttagactgacttgtttgt4620cttccattccattgttttgaaactcagtatgctgcccctgtcttgctgtcatgaaatcag4680caagagaggatgacacatcaaataataactcggattccagcccacattggattcatcagc4740atttggaccaatagcccacagctgagaatgtggaatacctaaggatagcaccgcttttgt4800tctcgcaaaaacgtatctcctaatttgaggctcagatgaaatgcatcaggtcctttgggg4860catagatcagaagactacaaaaatgaagctgctctgaaatctcctttagccatcacccca4920accccccaaaattagtttgtgttacttatggaagatagttttctccttttacttcacttc4980aaaagctttttactcaaagagtatatgttccctccaggtcagctgcccccaaaccccctc5040cttacgctttgtcacacaaaaagtgtctctgccttgagtcatctattcaagcacttacag5100ctctggccacaacagggcattttacaggtgcgaatgacagtagcattatgagtagtgtgg5160aattcaggtagtaaatatgaaactagggtttgaaattgataatgctttcacaacatttgc5220agatgttttagaaggaaaaaagttccttcctaaaataatttctctacaattggaagattg5280gaagattcagctagttaggagcccaccttttttcctaatctgtgtgtgccctgtaacctg5340actggttaacagcagtcctttgtaaacagtgttttaaactctcctagtcaatatccaccc5400catccaatttatcaaggaagaaatggttcagaaaatattttcagcctacagttatgttca5460gtcacacacacatacaaaatgttccttttgcttttaaagtaatttttgactcccagatca5520gtcagagcccctacagcattgttaagaaagtatttgatttttgtctcaatgaaaataaaa5580ctatattcatttccactctaaaaaaaaaaaaaaaaa5616<210>3<211>189<212>PRT(1-蛋白質(zhì))<213>智人氨基酸序列：NP_002515.1<400>3MetThrGluTyrLysLeuValValValGlyAlaGlyGlyValGlyLys151015SerAlaLeuThrIleGlnLeuIleGlnAsnHisPheValAspGluTyr202530AspProThrIleGluAspSerTyrArgLysGlnValValIleAspGly354045GluThrCysLeuLeuAspIleLeuAspThrAlaGlyGlnGluGluTyr505560SerAlaMetArgAspGlnTyrMetArgThrGlyGluGlyPheLeuCys65707580ValPheAlaIleAsnAsnSerLysSerPheAlaAspIleAsnLeuTyr859095ArgGluGlnIleLysArgValLysAspSerAspAspValProMetVal100105110LeuValGlyAsnLysCysAspLeuProThrArgThrValAspThrLys115120125GlnAlaHisGluLeuAlaLysSerTyrGlyIleProPheIleGluThr130135140SerAlaLysThrArgGlnGlyValGluAspAlaPheTyrThrLeuVal145150155160ArgGluIleArgGlnTyrArgMetLysLysLeuAsnSerSerAspAsp165170175GlyThrGlnGlyCysMetGlyLeuProCysValValMet180185<210>4<211>4454<212>DNA<213>智人cDNA序列NM_002524.4<400>4gaaacgtcccgtgtgggaggggcgggtctgggtgcggcctgccgcatgactcgtggttcg60gaggcccacgtggccggggcggggactcaggcgcctggggcgccgactgattacgtagcg120ggcggggccggaagtgccgctccttggtgggggctgttcatggcggttccggggtctcca180acatttttcccggctgtggtcctaaatctgtccaaagcagaggcagtggagcttgaggtt240cttgctggtgtgaaatgactgagtacaaactggtggtggttggagcaggtggtgttggga300aaagcgcactgacaatccagctaatccagaaccactttgtagatgaatatgatcccacca360tagaggattcttacagaaaacaagtggttatagatggtgaaacctgtttgttggacatac420tggatacagctggacaagaagagtacagtgccatgagagaccaatacatgaggacaggcg480aaggcttcctctgtgtatttgccatcaataatagcaagtcatttgcggatattaacctct540acagggagcagattaagcgagtaaaagactcggatgatgtacctatggtgctagtgggaa600acaagtgtgatttgccaacaaggacagttgatacaaaacaagcccacgaactggccaaga660gttacgggattccattcattgaaacctcagccaagaccagacagggtgttgaagatgctt720tttacacactggtaagagaaatacgccagtaccgaatgaaaaaactcaacagcagtgatg780atgggactcagggttgtatgggattgccatgtgtggtgatgtaacaagatacttttaaag840ttttgtcagaaaagagccactttcaagctgcactgacaccctggtcctgacttccctgga900ggagaagtattcctgttgctgtcttcagtctcacagagaagctcctgctacttccccagc960tctcagtagtttagtacaataatctctatttgagaagttctcagaataactacctcctca1020cttggctgtctgaccagagaatgcacctcttgttactccctgttatttttctgccctggg1080ttcttccacagcacaaacacacctctgccaccccaggtttttcatctgaaaagcagttca1140tgtctgaaacagagaaccaaaccgcaaacgtgaaattctattgaaaacagtgtcttgagc1200tctaaagtagcaactgctggtgattttttttttctttttactgttgaacttagaactatg1260ctaatttttggagaaatgtcataaattactgttttgccaagaatatagttattattgctg1320tttggtttgtttataatgttatcggctctattctctaaactggcatctgctctagattca1380taaatacaaaaatgaatactgaattttgagtctatcctagtcttcacaactttgacgtaa1440ttaaatccaactttcacagtgaagtgcctttttcctagaagtggtttgtagacttccttt1500ataatatttcagtggaatagatgtctcaaaaatccttatgcatgaaatgaatgtctgaga1560tacgtctgtgacttatctaccattgaaggaaagctatatctatttgagagcagatgccat1620tttgtacatgtatgaaattggttttccagaggcctgttttggggctttcccaggagaaag1680atgaaactgaaagcacatgaataatttcacttaataatttttacctaatctccacttttt1740tcataggttactacctatacaatgtatgtaatttgtttcccctagcttactgataaacct1800aatattcaatgaacttccatttgtattcaaatttgtgtcataccagaaagctctacattt1860gcagatgttcaaatattgtaaaactttggtgcattgttatttaatagctgtgatcagtga1920ttttcaaacctcaaatatagtatattaacaaattacattttcactgtatatcatggtatc1980ttaatgatgtatataattgccttcaatccccttctcaccccaccctctacagcttccccc2040acagcaataggggcttgattatttcagttgagtaaagcatggtgctaatggaccagggtc2100acagtttcaaaacttgaacaatccagttagcatcacagagaaagaaattcttctgcattt2160gctcattgcaccagtaactccagctagtaattttgctaggtagctgcagttagccctgca2220aggaaagaagaggtcagttagcacaaaccctttaccatgactggaaaactcagtatcacg2280tatttaaacatttttttttcttttagccatgtagaaactctaaattaagccaatattctc2340atttgagaatgaggatgtctcagctgagaaacgttttaaattctctttattcataatgtt2400ctttgaagggtttaaaacaagatgttgataaatctaagctgatgagtttgctcaaaacag2460gaagttgaaattgttgagacaggaatggaaaatataattaattgatacctatgaggattt2520ggaggcttggcattttaatttgcagataataccctggtaattctcatgaaaaatagactt2580ggataacttttgataaaagactaattccaaaatggccactttgttcctgtctttaatatc2640taaatacttactgaggtcctccatcttctatattatgaattttcatttattaagcaaatg2700tcatattaccttgaaattcagaagagaagaaacatatactgtgtccagagtataatgaac2760ctgcagagttgtgcttcttactgctaattctgggagctttcacagtactgtcatcatttg2820taaatggaaattctgcttttctgtttctgctccttctggagcagtgctactctgtaattt2880tcctgaggcttatcacctcagtcatttcttttttaaatgtctgtgactggcagtgattct2940ttttcttaaaaatctattaaatttgatgtcaaattagggagaaagatagttactcatctt3000gggctcttgtgccaatagcccttgtatgtatgtacttagagttttccaagtatgttctaa3060gcacagaagtttctaaatggggccaaaattcagacttgagtatgttctttgaatacctta3120agaagttacaattagccgggcatggtggcccgtgcctgtagtcccagctacttgagaggc3180tgaggcaggagaatcacttcaacccaggaggtggaggttacagtgagcagagatcgtgcc3240actgcactccagcctgggtgacaagagagacttgtctccaaaaaaaaagttacacctagg3300tgtgaattttggcacaaaggagtgacaaacttatagttaaaagctgaataacttcagtgt3360ggtataaaacgtggtttttaggctatgtttgtgattgctgaaaagaattctagtttacct3420caaaatccttctctttccccaaattaagtgcctggccagctgtcataaattacatattcc3480ttttggtttttttaaaggttacatgttcaagagtgaaaataagatgttctgtctgaaggc3540taccatgccggatctgtaaatgaacctgttaaatgctgtatttgctccaacggcttacta3600tagaatgttacttaatacaatatcatacttattacaatttttactataggagtgtaatag3660gtaaaattaatctctattttagtgggcccatgtttagtctttcaccatcctttaaactgc3720tgtgaatttttttgtcatgacttgaaagcaaggatagagaaacactttagagatatgtgg3780ggtttttttaccattccagagcttgtgagcataatcatatttgctttatatttatagtca3840tgaactcctaagttggcagctacaaccaagaaccaaaaaatggtgcgttctgcttcttgt3900aattcatctctgctaataaattataagaagcaaggaaaattagggaaaatattttatttg3960gatggtttctataaacaagggactataattcttgtacattatttttcatctttgctgttt4020ctttgagcagtctaatgtgccacacaattatctaaggtatttgttttctataagaattgt4080tttaaaagtattcttgttaccagagtagttgtattatatttcaaaacgtaagatgatttt4140taaaagcctgagtactgacctaagatggaattgtatgaactctgctctggagggagggga4200ggatgtccgtggaagttgtaagacttttatttttttgtgccatcaaatataggtaaaaat4260aattgtgcaattctgctgtttaaacaggaactattggcctccttggccctaaatggaagg4320gccgatattttaagttgattattttattgtaaattaatccaacctagttctttttaattt4380ggttgaatgttttttcttgttaaatgatgtttaaaaaataaaaactggaagttcttggct4440tagtcataattctt4454<210>5<211>393<212>PRT(1-蛋白質(zhì))<213>智人氨基酸序列NP-002746.1<400>5MetProLysLysLysProThrProIleGlnLeuAsnProAlaProAsp151015GlySerAlaValAsnGlyThrSerSerAlaGluThrAsnLeuGluAla202530LeuGlnLysLysLeuGluGluLeuGluLeuAspGluGlnGlnArgLys354045ArgLeuGluAlaPheLeuThrGlnLysGlnLysValGlyGluLeuLys505560AspAspAspPheGluLysIleSerGluLeuGlyAlaGlyAsnGlyGly65707580ValValPheLysValSerHisLysProSerGlyLeuValMetAlaArg859095LysLeuIleHisLeuGluIleLysProAlaIleArgAsnGlnIleIle100105110ArgGluLeuGlnValLeuHisGluCysAsnSerProTyrIleValGly115120125PheTyrGlyAlaPheTyrSerAspGlyGluIleSerIleCysMetGlu130135140HisMetAspGlyGlySerLeuAspGlnValLeuLysLysAlaGlyArg145150155160IleProGluGlnIleLeuGlyLysValSerIleAlaValIleLysGly165170175LeuThrTyrLeuArgGluLysHisLysIleMetHisArgAspValLys180185190ProSerAsnIleLeuValAsnSerArgGlyGluIleLysLeuCysAsp195200205PheGlyValSerGlyGlnLeuIleAspSerMetAlaAsnSerPheVal210215220GlyThrArgSerTyrMetSerProGluArgLeuGlnGlyThrHisTyr225230235240SerValGlnSerAspIleTrpSerMetGlyLeuSerLeuValGluMet245250255AlaValGlyArgTyrProIleProProProAspAlaLysGluLeuGlu260265270LeuMetPheGlyCysGlnValGluGlyAspAlaAlaGluThrProPro275280285ArgProArgThrProGlyArgProLeuSerSerTyrGlyMetAspSer290295300ArgProProMetAlaIlePheGluLeuLeuAspTyrIleValAsnGlu305310315320ProProProLysLeuProSerGlyValPheSerLeuGluPheGlnAsp325330335PheValAsnLysCysLeuIleLysAsnProAlaGluArgAlaAspLeu340345350LysGlnLeuMetValHisAlaPheIleLysArgSerAspAlaGluGlu355360365ValAspPheAlaGlyTrpLeuCysSerThrIleGlyLeuAsnGlnPro370375380SerThrProThrHisAlaAlaGlyVal385390<210>6<211>2603<212>DNA<213>智人cDNA序列：NM_002755.3<400>6aggcgaggcttccccttccccgcccctcccccggcctccagtccctcccagggccgcttc60gcagagcggctaggagcacggcggcggcggcactttccccggcaggagctggagctgggc120tctggtgcgcgcgcggctgtgccgcccgagccggagggactggttggttgagagagagag180aggaagggaatcccgggctgccgaaccgcacgttcagcccgctccgctcctgcagggcag240cctttcggctctctgcgcgcgaagccgagtcccgggcgggtggggcgggggtccactgag300accgctaccggcccctcggcgctgacgggaccgcgcggggcgcacccgctgaaggcagcc360ccggggcccgcggcccggacttggtcctgcgcagcgggcgcggggcagcgcagcgggagg420aagcgagaggtgctgccctccccccggagttggaagcgcgttacccgggtccaaaatgcc480caagaagaagccgacgcccatccagctgaacccggcccccgacggctctgcagttaacgg540gaccagctctgcggagaccaacttggaggccttgcagaagaagctggaggagctagagct600tgatgagcagcagcgaaagcgccttgaggcctttcttacccagaagcagaaggtgggaga660actgaaggatgacgactttgagaagatcagtgagctgggggctggcaatggcggtgtggt720gttcaaggtctcccacaagccttctggcctggtcatggccagaaagctaattcatctgga780gatcaaacccgcaatccggaaccagatcataagggagctgcaggttctgcatgagtgcaa840ctctccgtacatcgtgggcttctatggtgcgttctacagcgatggcgagatcagtatctg900catggagcacatggatggaggttctctggatcaagtcctgaagaaagctggaagaattcc960tgaacaaattttaggaaaagttagcattgctgtaataaaaggcctgacatatctgaggga1020gaagcacaagatcatgcacagagatgtcaagccctccaacatcctagtcaactcccgtgg1080ggagatcaagctctgtgactttggggtcagcgggcagctcatcgactccatggccaactc1140cttcgtgggcacaaggtcctacatgtcgccagaaagactccaggggactcattactctgt1200gcagtcagacatctggagcatgggactgtctctggtagagatggcggttgggaggtatcc1260catccctcctccagatgccaaggagctggagctgatgtttgggtgccaggtggaaggaga1320tgcggctgagaccccacccaggccaaggacccccgggaggccccttagctcatacggaat1380ggacagccgacctcccatggcaatttttgagttgttggattacatagtcaacgagcctcc1440tccaaaactgcccagtggagtgttcagtctggaatttcaagattttgtgaataaatgctt1500aataaaaaaccccgcagagagagcagatttgaagcaactcatggttcatgcttttatcaa1560gagatctgatgctgaggaagtggattttgcaggttggctctgctccaccatcggccttaa1620ccagcccagcacaccaacccatgctgctggcgtctaagtgtttgggaagcaacaaagagc1680gagtcccctgcccggtggtttgccatgtcgcttttgggcctccttcccatgcctgtctct1740gttcagatgtgcatttcacctgtgacaaaggatgaagaacacagcatgtgccaagattct1800actcttgtcatttttaatattactgtctttattcttattactattattgttcccctaagt1860ggattggctttgtgcttggggctatttgtgtgtatgctgatgatcaaaacctgtgccagg1920ctgaattacagtgaaattttggtgaatgtgggtagtcattcttacaattgcactgctgtt1980cctgctccatgactggctgtctgcctgtattttcgggattctttgacatttggtggtact2040ttattcttgctgggcatactttctctctaggagggagccttgtgagatccttcacaggca2100gtgcatgtgaagcatgctttgctgctatgaaaatgagcatcagagagtgtacatcatgtt2160attttattattattatttgcttttcatgtagaactcagcagttgacatccaaatctagcc2220agagcccttcactgccatgatagctggggcttcaccagtctgtctactgtggtgatctgt2280agacttctggttgtatttctatatttattttcagtatactgtgtgggatacttagtggta2340tgtctctttaagttttgattaatgtttcttaaatggaattattttgaatgtcacaaattg2400atcaagatattaaaatgtcggatttatctttccccatatccaagtaccaatgctgttgta2460aacaacgtgtatagtgcctaaaattgtatgaaaatccttttaaccattttaacctagatg2520tttaacaaatctaatctcttattctaataaatatactatgaaataaaaaaaaaaggatga2580aagctaaaaaaaaaaaaaaaaaa2603<210>7<211>400<212>PRT(1-蛋白質(zhì))<213>智人氨基酸序列：NP_109587.1<400>7MetLeuAlaArgArgLysProValLeuProAlaLeuThrIleAsnPro151015ThrIleAlaGluGlyProSerProThrSerGluGlyAlaSerGluAla202530AsnLeuValAspLeuGlnLysLysLeuGluGluLeuGluLeuAspGlu354045GlnGlnLysLysArgLeuGluAlaPheLeuThrGlnLysAlaLysVal505560GlyGluLeuLysAspAspAspPheGluArgIleSerGluLeuGlyAla65707580GlyAsnGlyGlyValValThrLysValGlnHisArgProSerGlyLeu859095IleMetAlaArgLysLeuIleHisLeuGluIleLysProAlaIleArg100105110AsnGlnIleIleArgGluLeuGlnValLeuHisGluCysAsnSerPro115120125TyrIleValGlyPheTyrGlyAlaPheTyrSerAspGlyGluIleSer130135140IleCysMetGluHisMetAspGlyGlySerLeuAspGlnValLeuLys145150155160GluAlaLysArgIleProGluGluIleLeuGlyLysValSerIleAla165170175ValLeuArgGlyLeuAlaTyrLeuArgGluLysHisGlnIleMetHis180185190ArgAspValLysProSerAsnIleLeuValAsnSerArgGlyGluIle195200205LysLeuCysAspPheGlyValSerGlyGlnLeuIleAspSerMetAla210215220AsnSerPheValGlyThrArgSerTyrMetAlaProGluArgLeuGln225230235240GlyThrHisTyrSerValGlnSerAspIleTrpSerMetGlyLeuSer245250255LeuValGluLeuAlaValGlyArgTyrProIleProProProAspAla260265270LysGluLeuGluAlaIlePheGlyArgProValValAspGlyGluGlu275280285GlyGluProHisSerIleSerProArgProArgProProGlyArgPro290295300ValSerGlyHisGlyMetAspSerArgProAlaMetAlaIlePheGlu305310315320LeuLeuAspTyrIleValAsnGluProProProLysLeuProAsnGly325330335ValPheThrProAspPheGlnGluPheValAsnLysCysLeuIleLys340345350AsnProAlaGluArgAlaAspLeuLysMetLeuThrAsnHisThrPhe355360365IleLysArgSerGluValGluGluValAspPheAlaGlyTrpLeuCys370375380LysThrLeuArgLeuAsnGlnProGlyThrProThrArgThrAlaVal385390395400<210>8<211>1759<212>DNA<213>智人cDNA序列：NM_030662.3<400>8cccctgcctctcggactcgggctgcggcgtcagccttcttcgggcctcggcagcggtagc60ggctcgctcgcctcagccccagcgcccctcggctaccctcggcccaggcccgcagcgccg120cccgccctcggccgccccgacgccggcctgggccgcggccgcagccccgggctcgcgtag180gcgccgaccgctcccggcccgccccctatgggccccggctagaggcgccgccgccgccgg240cccgcggagccccgatgctggcccggaggaagccggtgctgccggcgctcaccatcaacc300ctaccatcgccgagggcccatcccctaccagcgagggcgcctccgaggcaaacctggtgg360acctgcagaagaagctggaggagctggaacttgacgagcagcagaagaagcggctggaag420cctttctcacccagaaagccaaggtcggcgaactcaaagacgatgacttcgaaaggatct480cagagctgggcgcgggcaacggcggggtggtcaccaaagtccagcacagaccctcgggcc540tcatcatggccaggaagctgatccaccttgagatcaagccggccatccggaaccagatca600tccgcgagctgcaggtcctgcacgaatgcaactcgccgtacatcgtgggcttctacgggg660ccttctacagtgacggggagatcagcatttgcatggaacacatggacggcggctccctgg720accaggtgctgaaagaggccaagaggattcccgaggagatcctggggaaagtcagcatcg780cggttctccggggcttggcgtacctccgagagaagcaccagatcatgcaccgagatgtga840agccctccaacatcctcgtgaactctagaggggagatcaagctgtgtgacttcggggtga900gcggccagctcatcgactccatggccaactccttcgtgggcacgcgctcctacatggctc960cggagcggttgcagggcacacattactcggtgcagtcggacatctggagcatgggcctgt1020ccctggtggagctggccgtcggaaggtaccccatccccccgcccgacgccaaagagctgg1080aggccatctttggccggcccgtggtcgacggggaagaaggagagcctcacagcatctcgc1140ctcggccgaggccccccgggcgccccgtcagcggtcacgggatggatagccggcctgcca1200tggccatctttgaactcctggactatattgtgaacgagccacctcctaagctgcccaacg1260gtgtgttcacccccgacttccaggagtttgtcaataaatgcctcatcaagaacccagcgg1320agcgggcggacctgaagatgctcacaaaccacaccttcatcaagcggtccgaggtggaag1380aagtggattttgccggctggttgtgtaaaaccctgcggctgaaccagcccggcacaccca1440cgcgcaccgccgtgtgacagtggccgggctccctgcgtcccgctggtgacctgcccaccg1500tccctgtccatgccccgcccttccagctgaggacaggctggcgcctccacccaccctcct1560gcctcacccctgcggagagcaccgtggcggggcgacagcgcatgcaggaacgggggtctc1620ctctcctgcccgtcctggccggggtgcctctggggacgggcgacgctgctgtgtgtggtc1680tcagaggctctgcttccttaggttacaaaacaaaacagggagagaaaaagcaaaaaaaaa1740aaaaaaaaaaaaaaaaaaa1759<210>9<211>19<212>RNA<213>合成的非靶向?qū)φ眨∟TC）<400>9ugguuuacaugucgacuaa19<210>10<211>19<212>RNA<213>合成的非靶向?qū)φ眨∟TC）<400>10ugguuuacauguuguguga19<210>11<211>19<212>RNA<213>合成的非靶向?qū)φ眨∟TC）<400>11ugguuuacauguuuucuga19<210>12<211>19<212>RNA<213>合成的非靶向?qū)φ眨∟TC）<400>12ugguuuacauguuuuccua19<210>13<211>19<212>RNA<213>智人NRAS_1<400>13gagcagauuaagcgaguaa19<210>14<211>19<212>RNA<213>智人NRAS_2<400>14gaaauacgccaguaccgaa19<210>15<211>19<212>RNA<213>智人NRAS_3<400>15guggugauguaacaagaua19<210>16<211>19<212>RNA<213>智人KRAS_1<400>16gaaguuauggaauuccuuu19<210>17<211>19<212>RNA<213>智人KRAS_2<400>17ggagggcuuucuuugugua19當(dāng)前第1頁1 2 3