本發(fā)明要求于2014年7月28日提交的韓國專利申請第10-2014-0095977號的優(yōu)先權(quán)，其說明書全文通過引用納入本申請。

本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含亮丙瑞林(Leuprolide)并同時具有立即釋放和持續(xù)釋放特性；更特別地，涉及一種藥物組合物，其特征在于：相對于活性成分總量，包含0.001重量％至25重量％的立即釋放的亮丙瑞林，以及75重量％至99.999重量％的包含于持續(xù)釋放微球中的亮丙瑞林。

背景技術(shù)：

傳統(tǒng)上LHRH(促黃體激素釋放激素)已知為GnRH(促性腺激素釋放激素)，并且是一種調(diào)控脊椎動物生殖系統(tǒng)的下丘腦十肽(pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2)。其釋放至正中隆起以及漏斗莖的下丘腦-垂體門脈系統(tǒng)的毛細(xì)血管中。通過這樣的毛細(xì)血管網(wǎng)LHRH到達(dá)垂體前葉，并通過第二毛細(xì)血管網(wǎng)到達(dá)促性腺激素靶細(xì)胞。GnRH通過G蛋白偶聯(lián)到磷脂酶C并通過具有7次跨膜片段的受體增加細(xì)胞內(nèi)鈣流動而在靶細(xì)胞的膜水平上起作用。通過其作用誘導(dǎo)促性腺激素FSH(促卵泡激素)以及LH(黃體化激素)的生物合成和釋放。LHRH激動劑和拮抗劑被證實(shí)對以下病癥有效：女性的子宮內(nèi)膜炎、纖維瘤、多囊卵巢綜合征、乳腺癌、卵巢癌以及子宮內(nèi)膜癌、醫(yī)學(xué)輔助分娩期間的下丘腦促性腺激素脫敏的治療；以及男性前列腺增生以及前列腺癌的治療；以及男性或女性的早熟治療。

目前使用的LHRH激動劑是一種肽類化合物，由于其口服生物利用度低而通常需要通過靜脈內(nèi)或靜脈內(nèi)途徑給藥。并且LHRH激動劑作為治療慢性疾病的藥物需要長期給藥。LHRH激動劑系列藥物為了實(shí)現(xiàn)藥效需要在初期迅速釋放充分量的藥物。

作為LHRH激動劑之一的醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)，其特征是在現(xiàn)有的皮下或肌肉注射時由于半衰期短而在給藥后發(fā)生血漿濃度急速減少并在幾小時內(nèi)消失(J Pharmaceutical Sciences Vol 73 No 3 1984 pp.298-302.)。因此帶來了為了保持藥效而每日給藥的不便，特別地，其為注射劑這一特征進(jìn)一步加重了這種不便。

為了改善這種問題，開發(fā)并市售有通過1次給藥持續(xù)4周以上藥效的制劑(持續(xù)釋放制劑)。但是盡管為了體現(xiàn)醋酸亮丙瑞林的藥效需要使靶部位在初期釋放充分量的藥物，由于現(xiàn)有的持續(xù)制劑(持續(xù)釋放制劑)的藥物初期釋放量少而無法滿足如上所述的需求。換言之，由于醋酸亮丙瑞林在初期上升之后會抑制循環(huán)的激素水平2至4周，因此為了使亮丙瑞林起到效果，優(yōu)選提高藥物從遞送微粒的初期釋放量。根據(jù)食品和藥物管理局的規(guī)定，針對亮丙瑞林，為了實(shí)現(xiàn)亮丙瑞林的迅速閹割效果而需要高的初期釋放。

因此為了作為LHRH激動劑而展現(xiàn)充分的藥理效果，需要一種同時滿足給藥初期的立即釋放和給藥后長時間在血液中保持規(guī)定水平的持續(xù)釋放的制劑。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)：

[非專利文獻(xiàn)]

(非專利文獻(xiàn)1)Hiroaki Okada et al.，Vaginal absorption of apotent luteinizing hormone-releasing hormone analogue(leuprolide)inrats IV：Evaluation of the vaginal absorption and gonadotropin responses by radioimmunoassay，J Pharmaceutical Sciences Vol 73 No 3 1984 pp.298-302.

(非專利文獻(xiàn)2)YASUAKI OGAWA et al.Controlled Release of LHRH Agonist，Leuprolide Acetate，from Microcapsules：Serum Drug Level Profiles and Pharmacological Effects in Animals，Journal ofPharmacy and Pharmacology，1989Jul；41(7)：439-44.

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明要解決的問題

對此，本發(fā)明人在進(jìn)行可針對靶部位在短時間內(nèi)釋放充分量的藥物，并能夠以高水平持續(xù)該效果的LHRH激動劑的研究時，發(fā)現(xiàn)將一部分有效成分以微球形式、以特定比例包含于注射用制劑中，不僅實(shí)現(xiàn)了Cmax增加、Tmax縮短以及初期AUC增加，還證實(shí)了可通過1次注射而保持4周以上的藥物血漿濃度，從而完成了本發(fā)明。

因此，本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，其中相對于活性成分總量，包含0.001重量％至25重量％的立即釋放的亮丙瑞林，以及75重量％至99.999重量％的包含于持續(xù)釋放微球中的亮丙瑞林。

解決問題的方法

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種藥物組合物，其中相對于活性成分總量，包含0.001重量％至25重量％的立即釋放的亮丙瑞林，以及75重量％至99.999重量％的包含于持續(xù)釋放微球中的亮丙瑞林。

下文中將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

本發(fā)明提供一種藥物組合物，其特征在于：相對于活性成分總，包含0.001重量％至25重量％的立即釋放的亮丙瑞林，以及75重量％至99.999重量％的包含于持續(xù)釋放微球中的亮丙瑞林。

本發(fā)明的藥物組合物的特征在于：包含亮丙瑞林作為活性成分，并且該組合物同時包含作為立即釋放藥劑的亮丙瑞林自身和作為持續(xù)釋放藥劑的含有亮丙瑞林的微球。此時，相對于活性成分(即，亮丙瑞林)總重量，包含在所述立即釋放藥劑以及持續(xù)釋放藥劑中的亮丙瑞林以特定比例構(gòu)成。

本發(fā)明的術(shù)語“亮丙瑞林”是指包含具有<式1>中結(jié)構(gòu)的5-氧代-L-脯氨酰-L-組胺酰-L-色氨酰-L-絲氨酰-L-酪氨酰-D-亮氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-脯氨酰乙基酰胺以及其藥學(xué)上可接受的鹽。亮丙瑞林還稱之為亮丙瑞林(Leuprorelin)，在本說明中將混用所述術(shù)語。

<式1>

本發(fā)明的亮丙瑞林可使用其自身或鹽，優(yōu)選藥學(xué)上可接受的鹽的形式。所述“藥學(xué)上可接受的”是指生理學(xué)上可接受的，當(dāng)給予人時，不引發(fā)過敏反應(yīng)或與此類似的反應(yīng)的情況，作為所述鹽，優(yōu)選與藥學(xué)上可接受的游離酸形成的酸加成鹽。作為所述游離酸，可使用有機(jī)酸和無機(jī)酸。所述有機(jī)酸包括檸檬酸、乙酸、乳酸、酒石酸、馬來酸、富馬酸、甲酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、苯甲酸、葡糖酸、間磺酸、乙醇酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、谷氨酸以及天冬氨酸，但不限于此。并且所述無機(jī)酸包括鹽酸、溴酸、硫酸以及磷酸，但不限于此。

本發(fā)明的亮丙瑞林優(yōu)選為醋酸亮丙瑞林。

作為本發(fā)明中所述立即釋放藥劑的亮丙瑞林在組合物中相對于活性成分的總重量可為0.001重量％至25重量％，可優(yōu)選為0.1重量％至20重量％。

本發(fā)明中的術(shù)語“微球”是指含有亮丙瑞林的微球，可使用購買的市售品或通過本領(lǐng)域公知的持續(xù)釋放注射劑的制備方法進(jìn)行制備。作為所述持續(xù)釋放注射劑的制備方法可使用凝聚法、熔融擠出法、噴霧干燥法、溶劑萃取法以及溶劑蒸發(fā)法[包含雙乳化蒸發(fā)法(W/O/W：水/油/水)和單乳化蒸發(fā)法(o/w：油/水)]等，但不限于此。

具體而言，所述含有亮丙瑞林的微球可通過包含下述(i)至(iii)步驟的公知的持續(xù)釋放注射劑的制備方法來制備：(i)將包含亮丙瑞林、增稠劑以及水性溶劑的內(nèi)部水相(W1)和包含聚合物以及脂溶性溶劑的油相(O)混合來制備W1/O乳液的步驟；(ii)將步驟(i)的W1/O乳液分散到聚乙烯醇水溶液(W2)中來制備W1/O/W2乳液的步驟；(iii)將步驟(ii)中所制備的W1/O/W2乳液進(jìn)行干燥并回收的步驟。

在步驟(i)中，將包含亮丙瑞林、增稠劑以及水性溶劑的內(nèi)部水相(W1)和包含聚合物以及脂溶性溶劑的油相(O)混合來制備W1/O乳液。

所述增稠劑通過增加內(nèi)部水相的粘度來制備W1/O乳液從而提高冷卻時粘度增加的效果。本發(fā)明的增稠劑例如可為酪蛋白、明膠、膠原、白蛋白、果膠等的高分子聚合物；纖維素、糊精、瓊脂等的糖類；黃原膠等的天然橡膠，優(yōu)選可為明膠。

所述水性溶劑是指可溶解本發(fā)明的水溶性藥物的溶劑，通常用于溶解藥物的水性溶劑可不受限制地使用。本發(fā)明的水性溶劑例如可為水、磷酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、HEPES緩沖液、碳數(shù)為1至4的低級醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇等)。優(yōu)選可為乙醇、甲醇、水、緩沖液或其混合物。更優(yōu)選本發(fā)明的水性溶劑為水。

構(gòu)成內(nèi)部水相的(W1)的水性溶劑、亮丙瑞林以及明膠的重量比可根據(jù)溶劑種類、藥物種類而改變，例如可以以水性溶劑∶亮丙瑞林∶明膠＝1∶0.01～2∶0.01～0.5的比例混合，優(yōu)選針對每1重量份的水性溶劑以0.05至1重量份的亮丙瑞林和0.05至0.2重量份的明膠的比例混合。

內(nèi)部水相(W1)的制備可通過依次或同時將水性溶劑、亮丙瑞林以及明膠混合的方法來進(jìn)行，優(yōu)選可將內(nèi)部水相在加溫的條件下進(jìn)行混合。所述加溫條件優(yōu)選可為30至80℃，更優(yōu)選可為50至70℃。

所述聚合物是指構(gòu)成高分子微球外壁的高分子化合物，本發(fā)明的聚合物只要是用于制備高分子微球的本領(lǐng)域公知的高分子化合物就可不受限制地使用，優(yōu)選可為羥基脂肪酸聚酯、聚乳酸以及聚乙醇酸的共聚物、聚乳酸或僅由聚乳酸形成的聚合物、聚乳酸-共-乙醇酸、聚丙交酯-共-乙交酯(PLGA)、聚磷腈、聚亞氨碳酸酯、聚膦酸酯、聚酸酐、聚原酸酯、乳酸和己內(nèi)酯的共聚物、聚己內(nèi)酯、聚羥基戊酸酯、聚羥基丁酸酯、聚氨基酸、乳酸和氨基酸的共聚物以及其混合物，更優(yōu)選可為聚乳酸以及聚乙醇酸的共聚物。用于本發(fā)明的制備方法中的聚合物的重量-平均分子量一般為2000至100000，優(yōu)選可為5000至50000，更優(yōu)選可為8000至30000，但不限于此。

所述聚乳酸以及聚乙醇酸的共聚物(PLGA)的乳酸和乙醇酸的摩爾比可為0至100∶0至100，優(yōu)選可為50至90∶10至50(例如50∶50、65∶35、75∶25、85∶15、90∶10)，更優(yōu)選可為70至80∶20至30(例如75∶25)。

所述脂溶性溶劑作為用于溶解高分子量聚合物的溶劑，通常用于制備持續(xù)釋放制劑的高分子微球中的脂溶性溶劑可不受限制地使用。本發(fā)明的脂溶性溶劑例如可為二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、三氯乙烷、四氯化碳等鹵代烴；乙醚、異丙醚等醚類；乙酸乙酯、醋酸丁酯等脂肪酸酯；苯、甲苯、二甲苯等芳香烴，優(yōu)選可為鹵代烴，更優(yōu)選可為二氯甲烷。

脂溶性溶劑的量只要是可溶解聚合物的量就沒有特別限制，其根據(jù)聚合物的種類以及脂溶性溶劑的種類而改變，例如可為聚合物重量的0.1倍至10倍，優(yōu)選可為0.5倍至4倍，更優(yōu)選可為聚合物重量的1至2倍。

可通過在脂溶性溶劑中混合聚合物的方法來制備油相(O)，并根據(jù)所需可通過使用混合器(攪拌器，混合器)或震蕩器進(jìn)行混合。

所述W1/O乳液通過混合內(nèi)部水相和油相來制備，可通過公知的方法來進(jìn)行所述混合，所述混合方法例如可根據(jù)不連續(xù)震蕩方法、使用槳式攪拌器、渦輪攪拌器等的攪拌方法、膠體磨方法、均質(zhì)器方法或超聲波方法來進(jìn)行，優(yōu)選可根據(jù)均質(zhì)器方法。本發(fā)明的W1/O乳液優(yōu)選通過在油相中加入內(nèi)部水相，并通過均質(zhì)器均質(zhì)化的方法來制備。

內(nèi)部水相和油相的混合比可根據(jù)聚合物、亮丙瑞林、水性溶劑、脂溶性溶劑的種類而改變，例如可相對于1重量份的內(nèi)部水相混合1至100重量份的油相，優(yōu)選可相對于1重量份的內(nèi)部水相混合1至20重量份的油相，更優(yōu)選可相對于1重量份的內(nèi)部水相混合5至15重量份的油相，但不限于此。

在進(jìn)行步驟(i)之后，可任意增加冷卻已制備的W1/O乳液的步驟。所述冷卻溫度可為10℃至20℃，優(yōu)選可為15℃至18℃。

在步驟(ii)中，將步驟(i)中所制備的W1/O乳液分散在聚乙烯醇水溶液(W2)中來制備W1/O/W2乳液。

優(yōu)選將所述聚乙烯醇水溶液的溫度設(shè)定為18℃以下，更優(yōu)選可設(shè)定成10℃以上18℃以下。

可在步驟(ii)的聚乙烯醇水溶液中額外包含滲透壓調(diào)節(jié)劑。在步驟(ii)中包含在乙烯醇水溶液中的滲透壓調(diào)節(jié)劑只要在水溶液中產(chǎn)生滲透壓，就不限制其種類，例如可為水溶性多元醇；水溶性一元醇；水溶性單糖類、二糖類以及寡糖類或其衍生物；水溶性氨基酸；水溶性肽、蛋白質(zhì)或其衍生物。其中優(yōu)選水溶性多元醇以及水溶性單糖類、二糖類以及寡糖或其衍生物。更優(yōu)選水溶性多元醇以及水溶性單糖類。最優(yōu)選水溶性多元醇。作為所述水溶性多元醇的實(shí)例有：二元醇(例如甘油等)、五元醇(例如阿糖醇、木糖醇、阿東糖醇等)、六元醇(例如甘露醇、山梨醇、半乳糖醇等)。其中優(yōu)選六元醇。特別是，優(yōu)選甘露醇。作為水溶性一元醇的實(shí)例有甲醇、乙醇、異丙醇。其中優(yōu)選乙醇。作為所述水溶性單糖類的實(shí)例有戊糖(阿拉伯糖、木糖、核糖、2-脫氧核糖等)以及己糖(葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、山梨糖、鼠李糖、巖藻糖等)。其中優(yōu)選己糖。作為所述水溶性二糖類的實(shí)例有麥芽糖、纖維二糖、α，α-海藻糖、乳糖、蔗糖等。其中優(yōu)選乳糖以及蔗糖。作為所述水溶性寡糖類的實(shí)例有三糖類(例如麥芽三糖、棉子糖等)以及四糖類(例如水蘇糖等)。其中優(yōu)選三糖類。作為所述單糖類、二糖類以及寡糖類的衍生物的實(shí)例有葡糖胺、半乳糖胺、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等。作為所述水溶性氨基酸的實(shí)例有甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸等中性氨基酸；天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸；賴氨酸、精氨酸、組氨酸等堿性氨基酸。這些水溶性氨基酸還能夠以與酸(例如鹽酸、硫酸、磷酸等)或堿(例如鈉、鉀等堿金屬)結(jié)合而成的鹽形式來使用。作為水溶性肽、蛋白質(zhì)或其衍生物的實(shí)例有酪蛋白、球蛋白、醇溶谷蛋白、白蛋白、明膠等。

在步驟(ii)中包含在聚乙烯醇水溶液中的滲透壓調(diào)節(jié)劑可以為0.01至7重量％，優(yōu)選可為0.1至6重量％，最優(yōu)選可為0.5至5重量％。

在步驟(iii)中通過干燥所制備的W1/O/W2乳液來制備微球并進(jìn)行回收。

所述干燥可通過一般用于去除微球上的溶劑的通常方法來進(jìn)行。例如通過將所制備的微球進(jìn)行簡單的攪拌、加熱、通入氮?dú)?、在減壓條件下攪拌、在受控的真空條件下蒸發(fā)溶劑的方法進(jìn)行。優(yōu)選在減壓條件下進(jìn)行攪拌而去除溶劑的水下干燥法。

所述回收是指從水中分離并獲得微球，可通過離心分離、過濾等方法將固體成分從藥床中分離的通常方法進(jìn)行。

可將步驟(iii)中制備的微球額外地再分散到蒸餾水等中并混合后再回收的洗滌步驟。通過如上所述的洗滌步驟可去除微球表面上的藥劑殘留物。

另外可將根據(jù)本發(fā)明的制備方法而制備的微球額外地以冷凍干燥等方法進(jìn)行固化而制備進(jìn)一步穩(wěn)定的微球。更優(yōu)選將所制備的微球懸浮到注射用水等適當(dāng)?shù)娜芤褐?，之后混合公知的稀釋?例如甘露醇等糖類)、分散劑等，之后再進(jìn)行冷凍干燥而進(jìn)行固化。

關(guān)于本發(fā)明的所述“含有亮丙瑞林的微球”的大小，微球直徑可為300μm以下，優(yōu)選直徑可為1μm至200μm，最優(yōu)選可為1μm至100μm。

包裹在本發(fā)明的所述“含有亮丙瑞林的微球”中的亮丙瑞林含量相對于總重量可為5至20重量％，優(yōu)選可為7至15重量％。

在本發(fā)明的藥物組合物中作為持續(xù)釋放藥劑的，以所述“含有亮丙瑞林的微球”形式提供的亮丙瑞林相對于包含在藥物組合物中的活性成分總量優(yōu)選為75重量％至99.999重量％，最優(yōu)選可為80重量％至99.9重量％。

具體而言，本發(fā)明的特征在于所述藥物組合物的Tmax為50至70分鐘，與通過現(xiàn)有的公知方法制備的包含含亮丙瑞林的微球的制劑在給藥后3至4小時以后達(dá)到血漿濃度的最高值(YASUAKI OGAWA etal.，1989)相比較，其非常顯著地表現(xiàn)出了立即釋放。

另外，本發(fā)明特征在于所述藥物組合物的藥物持續(xù)時間為3周以上，可緩解現(xiàn)有立即釋放注射劑需要每天給藥的不便。優(yōu)選本發(fā)明的所述藥物組合物的藥物持續(xù)時間可為3周以上6周以下。

本發(fā)明中的術(shù)語“Tmax”是指達(dá)到血漿濃度峰值的時間，具體是指在給予本發(fā)明的藥物組合物之后藥物(亮丙瑞林)的血漿濃度達(dá)到最高值的時間。

本發(fā)明中的術(shù)語“Cmax”是指最大血漿濃度，具體是指給予本發(fā)明的藥物組合物后，藥物(亮丙瑞林)的最大血漿濃度。

在本發(fā)明中，術(shù)語“藥時曲線下面積(AUC)”是指血藥濃度-時間曲線下的面積，在藥物動力學(xué)中術(shù)語“藥時曲線下面積(AUC)”是指從給藥的開始時間到開始給藥后的時間“t”為止在受試者中繪制有益藥劑(藥物或活性成分)的血漿濃度而從受試者中得到的曲線下面積。對于穩(wěn)態(tài)給藥而言，AUC是直到無窮大時間為止定期給予的給藥量在給藥期間中的曲線下面積。AUC可通過分析給藥受試者的血清樣本來獲得。

本發(fā)明的所述藥物組合物的特征在于：以特定配比包含亮丙瑞林自身和含有亮丙瑞林的微球并且同時滿足為了實(shí)現(xiàn)藥效而在初期迅速釋放充分量的藥物的藥物立即釋放以及4周以上的藥物持續(xù)釋放。即，本發(fā)明涉及具有立即釋放注射劑和持續(xù)釋放注射劑的特征的組合物，其特征在于：在給予組合物之后通過藥物(亮丙瑞林)的非常高的初始釋放速率實(shí)現(xiàn)在初期釋放充分量的藥物，即實(shí)現(xiàn)Cmax的增加以及達(dá)到血漿峰濃度的時間的縮短，并實(shí)現(xiàn)初始AUC的增加，并且通過1次注射獲得持續(xù)4周以上的血漿濃度。

本發(fā)明的所述藥物組合物通過同時解決以下問題而呈現(xiàn)出以往無法預(yù)測的高藥效：現(xiàn)有的含有亮丙瑞林的立即釋放注射劑在皮下或肌肉注射時由于其半衰期短而為了維持藥效需要每天給藥的不便；以及為了解決上述問題的持續(xù)釋放制劑(持續(xù)釋放制劑)雖然維持藥物的持續(xù)釋放，但無法滿足針對靶部位的在給藥初期釋放充分量的藥物水平。這一點(diǎn)在了本發(fā)明的實(shí)施例中得到了良好體現(xiàn)。

本發(fā)明的所述藥物組合物為用于預(yù)防和治療性激素依賴性良性或惡性疾病的藥物組合物，所述性激素依賴性良性或惡性疾病只要是本領(lǐng)域公知的疾病就不被限制其種類，例如可包含良性前列腺增生、前列腺癌、性早熟、多毛癥、子宮內(nèi)膜增生及其伴隨癥狀、子宮內(nèi)膜癌、體外受精(IVF/COS/ART)、避孕、經(jīng)前期綜合征(PMS)、子宮肌瘤、乳腺癌、PTO、卵巢癌和子宮癌等。

本發(fā)明的所述藥物組合物的給藥方法根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度以及患者的年齡、性別以及其他條件等，可按照適用于患者的方法給藥，但不限于此。給藥方法可為皮下注射、皮內(nèi)注射、靜脈注射、肌肉注射、腹腔注射等，但不限于此。

發(fā)明的效果

本發(fā)明的所述藥物組合物的特征在于：同時滿足為了實(shí)現(xiàn)藥效而在初期(給藥后1小時左右)迅速釋放充分量的藥物的藥物立即釋放以及3周以上的藥物持續(xù)釋放，因此有效用于預(yù)防和治療性激素依賴性良性或惡性疾病。

附圖說明

圖1表示將含不同組分的注射用制劑以3mg/kg總活性成分的量給予SD大鼠之后，隨時間變化的亮丙瑞林血漿濃度(以亮丙瑞林濃度表示)。

圖2表示將實(shí)施例4的注射用制劑給予SD大鼠之后，隨時間變化的亮丙瑞林血漿濃度(以亮丙瑞林濃度表示)。

具體實(shí)施方式

下文中對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

但是，下述實(shí)施例僅僅例示本發(fā)明，本發(fā)明的內(nèi)容并不限于下述實(shí)施例。

<制備例1、3、4>含有亮丙瑞林的微球的制備

將0.5ml蒸餾水添加到0.05g醋酸亮丙瑞林粉末(Polypeptide Laboratories)和0.08g明膠混合物中，并加熱至60℃左右，溶解所述粉末的同時準(zhǔn)備W1溶劑。將6.0ml二氯甲烷添加到4.0g DL-乳酸-乙醇酸共聚物(7525，特性粘度0.17dl/g)粉末中并混合來制備O溶劑。將W1溶劑添加到O溶劑中，以均質(zhì)器進(jìn)行乳化來制備W1/O乳液。

使用維持在15-18℃的冷卻器進(jìn)行冷卻，并將調(diào)節(jié)至15-18℃的0.25wt％聚乙烯醇(PVA)水溶液混合后，各自以6500rpm(制備例1)、6000rpm(制備例3)、5500rpm(制備例4)進(jìn)行攪拌來制備W1/O/W2乳液。將所制備的W1/O/W2乳液在水中干燥4小時，并通過開口部為75μm的篩進(jìn)行過濾之后，進(jìn)行離心分離來回收微粒。將回收的微粒用蒸餾水再分散，并混合后反復(fù)進(jìn)行離心分離來充分清洗完微粒表面之后進(jìn)行回收，并進(jìn)行冷凍干燥來回收高分子微球。包含在回收微球中的亮丙瑞林含量以重量比各自為9.45％(制備例1)、9.33％(制備例3)、9.55％(制備例4)。

<制備例2、5>含有亮丙瑞林的微球的制備

將0.5ml蒸餾水添加到0.05g醋酸亮丙瑞林粉末和0.08g明膠混合物中，并加熱至60℃左右，溶解所述粉末的同時準(zhǔn)備W1溶劑。將6.0ml二氯甲烷添加到4.0g DL-乳酸-乙醇酸共聚物(7525，特性粘度0.17dl/g)粉末中并混合來制備O溶劑。將W1溶劑添加到O溶劑中，以均質(zhì)器進(jìn)行乳化來制備W1/O乳液。

使用維持在15-18℃的冷卻器進(jìn)行冷卻，并將調(diào)節(jié)至15-18℃的0.25wt％聚乙烯醇(PVA)水溶液混合(制備例2包含1重量％的D-甘露醇)之后，以5000rpm進(jìn)行攪拌來制備W1/O/W2乳液。將所制備的W1/O/W2乳液在水中干燥4小時，并通過開口部為75μm的篩進(jìn)行過濾之后，進(jìn)行離心分離來回收微粒。將回收的微粒用蒸餾水再分散，并混合后反復(fù)進(jìn)行離心分離來充分清洗完微粒表面之后進(jìn)行回收，并進(jìn)行冷凍干燥來回收高分子微球。包含在回收微球中的亮丙瑞林含量以重量比各自為9.93％(制備例2)、7.79％(制備例5)。

<實(shí)施例1、2、3、4>包含含有亮丙瑞林的微球以及醋酸亮丙瑞林的注射劑的制備以及效果驗(yàn)證

將在<制備例1>中制備的微球作為比較例1，將<制備例1>的微球以及醋酸亮丙瑞林作為活性成分，按照下面的[表1]中所記載的組成分別混合來制備實(shí)施例1以及實(shí)施例2的注射用制劑，將它們各自以皮下注射的方式給予SD大鼠。

將在<制備例2>中制備的微球作為比較例2，將<制備例2>的微球以及醋酸亮丙瑞林作為活性成分，按照下面的[表2]中所記載的組成分別混合來制備實(shí)施例3、實(shí)施例4、比較例3的注射用制劑，將它們各自以皮下注射(比較例2和3、實(shí)施例4)以及肌肉注射(實(shí)施例3)的方式給予SD大鼠。

[表1]

[表2]

如[圖1]中所示，相對于比較例1，在實(shí)施例3中驗(yàn)證了可通過提高在總劑量中的醋酸亮丙瑞林的劑量來提高Cmax的事實(shí)。但是，在比較例3中由于醋酸亮丙瑞林的半衰期短的特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)在初期Cmax之后血漿濃度急劇減少。

因此，為了同時獲得Cmax增加和初期AUC增加的效果，有必要提高含有醋酸亮丙瑞林的微球的初始釋放速率，還確認(rèn)了包含在組合物中的立即釋放醋酸亮丙瑞林自身和密封在微球中的亮丙瑞林的組合比是非常重要的事實(shí)，圖1中的實(shí)施例4示出了這一點(diǎn)。

并且，如上述表2中所示，可以證明本發(fā)明人可在實(shí)施例3和4中獲得均滿足Cmax以及AUC_8-72hr的增加并且縮短血漿濃度達(dá)峰時間的組合物。

<實(shí)施例5、6>包含含有亮丙瑞林的微球以及醋酸亮丙瑞林的注射劑的制備以及效果驗(yàn)證

將<制備例3>中的微球以及醋酸亮丙瑞林、<制備例4>中的微球以及醋酸亮丙瑞林、<制備例5>中的微球以及醋酸亮丙瑞林作為活性成分，按照下面的[表3]中所記載的組成分別混合來制備注射用制劑，并依次作為實(shí)施例5、實(shí)施例6以及比較例4。將所制備的注射用制劑分別以肌肉注射的方式給予SD雄性大鼠。

[表3]

工業(yè)適用性

如上所述，本發(fā)明涉及一種同時包含立即釋放和持續(xù)釋放的亮丙瑞林的藥物組合物，更詳細(xì)地，涉及一種藥物組合物，其特征在于：相對于活性成分總量，包含0.001重量％至25重量％的立即釋放的亮丙瑞林，以及75重量％至99.999重量％的包含在持續(xù)釋放微球中的亮丙瑞林。

本發(fā)明的藥物組合物的特征在于：同時滿足為了實(shí)現(xiàn)藥效而在初期迅速釋放充分量的藥物的藥物立即釋放以及4周以上的藥物持續(xù)釋放，并有效用于預(yù)防和治療性激素依賴性良性或惡性疾病，因此，在工業(yè)上的適用性很大。