本發(fā)明涉及植物過時有效成分提取，尤其涉及一種滇皂莢總皂苷的提取純化的方法。
背景技術(shù)：
滇皂莢（Gleditsia japonica var. delavayi）屬蘇木科皂莢屬。皂莢屬全球約15中，零星分布于中亞、東南亞和南北美洲。我國產(chǎn)6種2變種，廣泛分布于南北各省區(qū)，主產(chǎn)長江流域各省。云南有2種，其一為變種。從皂莢種子胚乳種分離提取得到的多糖植物膠成為皂莢豆膠，主要成分為半乳甘露聚糖，其性質(zhì)與瓜爾豆膠相似，具有良好的穩(wěn)定性、增稠性和水合性，低濃度時有較高粘度，被廣泛用于冰激凌的穩(wěn)定、罐頭感官品質(zhì)改善、面粉品質(zhì)改進和增加食品持水性等方面。據(jù)李時珍著《本草綱目》等多種醫(yī)書記載，皂莢、皂刺、皂根、皂葉均可入藥。皂莢味辛，性溫，微毒，能祛風痰、除濕毒、殺蟲。滇皂莢殼中韓活性三萜皂苷，其結(jié)構(gòu)中具有糖體、配基、有機酸等親水性大極性基團，而甙元結(jié)構(gòu)較大，極性性低，具有親脂性，在分子結(jié)構(gòu)上有類似表面活性劑的結(jié)構(gòu)特點，其水溶液振搖后能產(chǎn)生持久類似肥皂溶液的泡沫，是一種非離子型表面活性劑，具有良好的去污能力，殼代肥皂用，洗滌絲織品，不損光澤?，F(xiàn)已有皂莢提取物已廣泛用于洗滌、洗發(fā)產(chǎn)品中，同時有一定的去屑止癢功效。
國外對皂莢研究已有半個多世紀之久，最近幾十年開始了系統(tǒng)研究并取得很大的發(fā)展。國外皂莢屬研究最多的是三刺皂莢（G. triacathos）,其次為日本皂莢（G. japonica Miq.）。研究涉及范圍廣且較為系統(tǒng)，包括種群分布、種源試驗、種內(nèi)群體及個體的遺傳結(jié)構(gòu)、莢和種子遺傳變異、育苗和造林技術(shù)、城市景觀林技術(shù)、皂莢果莢和種子的生化分析利用、生物活性物質(zhì)產(chǎn)品化等。目前，世界上40多個國家的皂莢（屬）已廣泛地栽植并應(yīng)用于綠化造林，工業(yè)原料提取、食品添加劑、日用化工、醫(yī)藥等各種行業(yè)。滇皂莢作為我國特有的皂莢品種，由于還未得到充分的研究與開發(fā)等原因，并不為外國人所了解和熟悉，國內(nèi)的閑逛的研究也較少，目前對滇皂莢開展的研究與開發(fā)利用主要涉及的方面有滇皂莢的莢果的化學成分分析；皂刺、葉、根等藥用價值、生物學特性研究等。21世紀被專家預(yù)言為生物學世紀，生物科學的發(fā)展及其應(yīng)用越來越受到人們的重視，相信具有特殊生物活性的滇皂莢總皂苷的研究開發(fā)，也必引起人們的關(guān)注。
雖然滇皂莢有很多功效，但因種種原因，系統(tǒng)地闡述滇皂莢總皂苷的提取物工藝及開發(fā)利用還未見文獻報道。參照其他植物果實中總皂苷的提取方法主要包括水提法和有機溶劑提取法。水提法的提取率較高，但是往往會將一些單糖、寡糖、氨基酸、蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)等也提取出來，導(dǎo)致提取物中的總皂苷純度降低。有機溶劑提取法的提取率較高，單溶劑消耗大，工業(yè)化生產(chǎn)成本高?？傊?，要實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)還存在忖度低或是成本高，可操作性差等缺點。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種低成本、高純度、操作簡單、綠色環(huán)保的滇皂莢總皂苷提取純化的方法。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案為一種滇皂莢總皂苷提取純化的方法，該方法包括以下步驟：
第一步：將干燥后的滇皂莢殼粉碎到10~20目，置于加壓溶劑提取裝置中，加入1~10倍蒸餾水，密封加壓溶劑提取器，于溫度80~110℃、壓力2.5~4.0Kg/cm2下加壓提取30min~60min，提取1~6次，固液分離，合并提取液；
第二步：將上述提取液冷卻至室溫，加入1%~7%紅平紅球菌 (Rhodococcuserythropolis)，在20~35℃培養(yǎng)2~10天，取上清液；
第三步：分別使用截留分子量為15000、5000、2000Da的膜進行分離，膜過濾工作壓力：0.1~0.2Mpa；
第四步：經(jīng)過2000Da的膜后的提取液經(jīng)濃縮；
第五步：將濃縮液進行噴霧干燥得總滇皂莢總皂苷粉。
本發(fā)明用水作為提取劑提取滇皂莢皂苷，采用加壓溶劑提取技術(shù)，提取液成分復(fù)雜，含有多糖、蛋白、色素類雜質(zhì)，而且這些雜質(zhì)于皂苷之間相互結(jié)合，同時加入生物絮凝劑對滇皂莢皂苷提取液具有良好的絮凝作用，而且有一定的脫色效果，絮凝處理后的提取液，通過膜法分離能夠獲得較為滿意的純度。
本發(fā)明具有以下明顯的優(yōu)勢和有益效果：
1. 本發(fā)明提供了一種低成本，高純度，操作簡單，綠色環(huán)保的無患子皂苷提取純化方法，為實現(xiàn)或完善滇皂莢總皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)；
2. 采用加壓溶劑提取技術(shù)對滇皂莢總皂苷提取，具有以下特點：①提取時間短：與傳統(tǒng)提取技術(shù)相比，加壓溶劑提取技術(shù)能顯著縮短提取時間；②溶劑消耗少：加壓溶劑提取物技術(shù)能明顯節(jié)約溶劑的消耗，使有效成分提取完全；③提取效率高：在高溫和高壓下，加壓溶劑提取技術(shù)可以顯著地促進有效成分提取過程，提高提取效率；
3. 本發(fā)明認為接種微生物的生長，產(chǎn)生生物絮凝劑NOC-1，對提取液有很好的脫色和絮凝效果，由于微生物絮凝劑可以克服無機高分子和合成有機高分子絮凝劑本身固有的缺陷，最終實現(xiàn)無污染排放；
4. 而且微生物的呼吸作用消耗水提液中大量糖類和水，所以水提掖體積減少，達到了一定的濃縮作用，這比工業(yè)上運用濃縮裝置更環(huán)保，更節(jié)能，成本更低，經(jīng)濟效益增大；
5. 本發(fā)明的總皂苷，純度較高，可以直接用于洗滌用品和化妝品中，涵蓋范圍廣，經(jīng)濟效益高。
具體實施方式
下面的實施例可以使本專業(yè)的技術(shù)人員更理解本發(fā)明，單不以任何形式限制本發(fā)明。
實施例1，滇皂莢殼于60℃烘箱中烘干，脫皮，粉碎到10目，取果殼粉20Kg放入加壓溶劑提取器中，加入200L蒸餾水，于溫度80℃，壓力2.5 Kg/cm2下加壓提取30min，提取3次，合并提取液并離心。提取液冷卻至室溫，加入1%紅平紅球菌 (Rhodococcuserythropolis)，在35℃培養(yǎng)5天，離心分離，取上清液。使用截留分子量為15000、5000Da的膜進行分離，膜過濾工作壓力：0.1~0.2Mpa。透過液經(jīng)過2000Da的膜后的提取液經(jīng)濃縮后，進行噴霧干燥得總滇皂莢總皂苷粉8.2Kg，總皂苷提取率為32.8%，總皂苷純度為80.2%。
實施例2，滇皂莢殼于60℃烘箱中烘干，脫皮，粉碎到20目，取果殼粉20Kg放入加壓溶劑提取器中，加入100L蒸餾水，于溫度100℃，壓力4.0 Kg/cm2下加壓提取30min，提取4次，合并提取液并離心。提取液冷卻至室溫，加入3%紅平紅球菌 (Rhodococcuserythropolis)，在20℃培養(yǎng)8天，離心分離，取上清液。使用截留分子量為15000、5000Da的膜進行分離，膜過濾工作壓力：0.1~0.2Mpa。透過液經(jīng)過2000Da的膜后的提取液經(jīng)濃縮后，進行噴霧干燥得總滇皂莢總皂苷粉8.5Kg，總皂苷提取率為35.0%，總皂苷純度為82.3%。
實施例3，滇皂莢殼于60℃烘箱中烘干，脫皮，粉碎到10目，取果殼粉20Kg放入加壓溶劑提取器中，加入160L蒸餾水，于溫度100℃，壓力3.5 Kg/cm2下加壓提取45min，提取6次，合并提取液并離心。提取液冷卻至室溫，加入7%紅平紅球菌 (Rhodococcuserythropolis)，在20℃培養(yǎng)10天，離心分離，取上清液。使用截留分子量為15000、5000Da的膜進行分離，膜過濾工作壓力：0.1~0.2Mpa。透過液經(jīng)過2000Da的膜后的提取液經(jīng)濃縮后，進行噴霧干燥得總滇皂莢總皂苷粉8.3Kg，總皂苷提取率為34.6%，總皂苷純度為81.3%。