專利名稱：納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制藥技術(shù)領(lǐng)域的微球及其制備方法，尤其涉及一種納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)制備微球的方法。
背景技術(shù)：
制藥行業(yè)從藥物發(fā)現(xiàn)，到臨床的應(yīng)用，最后一個環(huán)節(jié)是藥物制劑。其中有一部分藥物需要長期給藥才能治愈；還有一部分需要靶向等局部給藥。要達(dá)到這些目的，原料藥必須要制備成相應(yīng)的劑型。例如需要長期給藥但在體內(nèi)的半衰期短的藥物，宜制備成緩釋長效劑型；對于一些腫瘤的治療，需要一些藥物靶向于病照，例如靶向于腫瘤血管的栓塞微球制劑等。關(guān)于微球制劑的制備方法，MengShi 等(Journal of Controlled Release,89(2003),167-177]報道了利用W/O/W方法把牛血清白蛋白(BSA)和環(huán)孢霉素A(CyA)包封在PLGA/PLA殼-核微球里，其利用W/0/W最見的復(fù)乳法來制備雙層微球，而復(fù)乳法的油水界面是公認(rèn)的蛋白殺手，容易導(dǎo)致水溶性的蛋白在該界面的聚集，同樣致使包封率不高，存在不完全釋放和突釋等缺陷。Morita T.等(Journal of Controlled Release, 69 (2000),435-444)用聚乙二醇作為蛋白微粉化的賦形劑(即表面活性劑)，然后用水包油-油包固體的方法把蛋白微囊包在生物可降解的微球里，該文獻(xiàn)雖然利用新S/0/W乳化法制備載蛋白微球，但只是改變了表面活性劑，將以前報道較多的PVA，改為PEG。這種改變?nèi)圆荒芸朔饴实?，及疏水性表面所引起的局部微囊化及炎癥的缺點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固制備微球的方法及其制品，以解決現(xiàn)有技術(shù)中微球制劑包封率低、疏水性表面會引起局部微囊化及炎癥的缺點。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法，包括如下步驟(I)將藥物或藥物和藥用輔料制備成藥物顆粒，所述藥物在藥物顆粒中的重量百分比為0. 1% -100%，較優(yōu)的為10% -60% ；(2)將藥物顆粒按照重量比為I : 1-100分散在濃度為O. 5% -99. 98% (w/w)的聚合物有機(jī)溶液中形成均勻的混懸液，即油包固(s/o)乳液；其中聚合物有機(jī)溶液的濃度以5% -30% (w/w)為佳，分散方式可選擇乳化、渦旋或超聲等，分散時間較佳為1-5分鐘；(3)將步驟⑵形成的油包固乳液加到親水油相中并乳化形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳，乳化方法可為攪拌、渦漩或超聲0. 1-5分鐘；(4)將步驟(3)形成的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳加入到重量百分比濃度為1%-80%的納米顆粒混懸液中或添加有0.5%-5% (w/w)表面活性劑的上述混懸液中乳化，形成納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；其中納米顆粒濃度以20% -70%為佳，加入方式可為滴加、一次性加入、噴霧方式加入或倒入等；乳化方式可選擇乳化、渦旋或超聲等，乳化時間為O. 1-5分鐘；(5)將所述納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳轉(zhuǎn)移到濃度為1% -10% (w/w)無機(jī)鹽溶液固化l_4h，該無機(jī)鹽可選自氯化鈉、氯化鉀、硝酸鉀或碳酸鈉等，轉(zhuǎn)移方式可為滴加、一次性加入、噴霧方式加入或倒入等；(6)將步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并洗滌所得微球，之后凍干得到表面自組裝有納米顆粒的微球，通常洗滌時可采用水或乙醇或乙醇和水的混和液進(jìn)行洗滌3-5 次。較佳地，所述藥物顆粒選自親水性的藥物顆粒，藥物載入到藥物輔料中制備的顆 粒，或疏水性的藥物通過制劑的方法制備成的不溶于有機(jī)溶劑的顆粒中的一種；所述藥物顆粒的粒徑為O. 2-10 μ m,優(yōu)選O. 5-5 μ mm。較佳地，所述藥物包括小分子藥物和大分子藥物，所述小分子藥物為化學(xué)藥物，所述大分子藥物為生物大分子藥物；所述小分子藥物選自腫瘤化療類藥物或抗生素類藥物，其中腫瘤化療類藥物選自阿霉素、環(huán)磷酰胺、更生霉素、博萊霉素、柔紅霉素、表阿霉素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、卡鉬、卡莫司汀(BCNU)、司莫司汀、順鉬、依托泊苷、喜樹堿及其衍生物、苯芥膽留醇、紫杉醇及其衍生物、多西紫杉醇及其衍生物、長春堿、長春新堿、它莫西芬、依托泊苷、哌泊舒凡、環(huán)磷酰胺或氟他胺及其衍生物中的一種；抗生素類藥物選自環(huán)孢素、左氧氟沙星、氧氟沙星、或鹽酸依匹斯汀中的一種。所述藥用輔料為注射用藥用輔料，可選自小糖類(如蔗糖、海藻糖、葡萄糖、麥芽糖或乳糖等)、多羥基類化合物(如甘露醇、山梨醇、甘油、1，2_丙二醇、赤鮮糖醇、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷或聚吡咯烷酮等)、多糖類化合物(如葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素或環(huán)糊精物質(zhì)等)、氨基酸化合物(如甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、谷氨酸或組氨酸等)、或無機(jī)鹽類物質(zhì)(如鋅鹽、鈣鹽、銅鹽、鎂鹽或鑰鹽等)的一種或任意組合。較佳地，所述生物大分子藥物選自蛋白大分子藥物、疫苗、抗體、核酸、或脂質(zhì)體藥物中的一種或幾種，其中所述蛋白大分子藥物為生長素、促紅細(xì)胞生成素(EPO)、重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、疫苗、干擾素(IFN)、生長素(GH)、胰島素(Insulin)、表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、胰島素樣生長因子(IGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、血小板生長因子(TOGF)、內(nèi)皮生長因子(EGF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、骨衍生性生長因子(BDGF)、骨形成蛋白(BMP)、組織多肽抗原(TPA)、抗體(antibody)、凝血因子VIII (VIII)或凝血因子IX遺傳因子等的一種或幾種；所述的核酸為反義核苷酸(anti-RNA)、小分子RNA(RNAi)或基因(DNA)等的一種或幾種。較佳地，所述步驟(2)中，所述聚合物有機(jī)溶液中的聚合物選自聚己內(nèi)酯(PCL)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)、聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)、聚羥基乙酸-聚乳酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)和聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)中的一種或幾種，有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、氯仿、或丙酮中的一種或幾種，其中有機(jī)溶劑以二氯甲烷、乙酸乙酯或乙腈中一種或幾種組合的有機(jī)溶液為佳；所述步驟(3)中，所述親水油相選自乙二醇、甘油和丙三醇中的一種或幾種，如果選擇它們的混合物，則可為任意混合比，其中親水油相與油包水(W/0)乳液的體積比較佳的為2-10 ；所述步驟(4)中，所述納米顆粒混懸液選自有機(jī)納米顆粒水混懸液、無機(jī)納米顆粒水混懸液或上述兩種混懸液的混合液；其中有機(jī)納米顆粒選自聚苯乙烯納米顆粒、交聯(lián)葡萄糖納米顆粒等，無機(jī)納米顆粒選自二氧化娃納米顆粒、二氧化鈦納米顆粒、輕基磷灰石納米顆粒、四氧化三鐵納米顆粒、三氧化二鐵顆粒、金納米顆粒、三氧化二·招納米顆粒、碳酸鈣納米顆粒、磷酸鈣納米顆粒、碳酸鎂納米顆粒、氫氧化鎂納米顆粒、銀納米顆粒等的一種或多種。較佳地，所述聚合物有機(jī)溶劑中還添加有O. 1%-20% (w/w)聚乙二醇(PEG)或泊洛沙姆(po Ioxmer)。較佳地，所述的步驟(3)中，所述表面活性劑選自聚乙烯醇PVA、聚乙二醇PEG、聚乙烯吡咯烷酮PVP、泊洛沙姆poloxmer、聚三梨醇、乙基纖維素EC、或吐溫的一種或幾種。一種納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備的微球，所述微球表面組裝有一層納米顆粒，其粒徑為1-500 μ m,較佳地為10-100 μ m ;其中所述微球成分組成如下藥物的重量百分比為O. 01% -40%，納米顆粒的重量百分比為0.01% -40%，聚合物的重量百分比為20% -99. 98%，藥用輔料的重量百分比為0-30%。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下第一，本發(fā)明選擇了合適聚合物材料以及制備微球的S/0/0/S方法，避免用常規(guī)的W/0和W/0/W方法導(dǎo)致的包封率不高缺陷，及S/0/0等方法制備的微球，由于表面疏水，容易導(dǎo)致體內(nèi)組織微囊化及炎癥等副作用；第二，采用本發(fā)明方法制備微球，能在微球的表面自組裝一層納米顆粒，這種表面具有納米顆粒的微球具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附的作用，可減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化；第三，本發(fā)明方法引入一親水油相，可起到把有機(jī)溶劑萃取出來，而不形成油和水的界面的作用，從而起到保護(hù)藥物不在油水界面聚集，避免由此導(dǎo)致的變性失活和藥物的包封率降低。當(dāng)然，實施本發(fā)明的任一產(chǎn)品并不一定需要同時達(dá)到以上所述的所有優(yōu)點。


圖I為本發(fā)明實施例一的例I所得微球的SEM照片；圖2為本發(fā)明實施例一的例I所得微球的體外釋放曲線；圖3為本發(fā)明實施例一的例I所得微球的抗菌作用效果曲線；圖4為本發(fā)明實施例一的例I所得微球的抗癌作用效果曲線；圖5為本發(fā)明實施例一的例I所得微球與非納米混懸液制備的微球的體內(nèi)組織相容性SEM照片；圖6為本發(fā)明實施例二的例I所得微球的SEM照片；
圖7為本發(fā)明實施例二的例I所得微球的體外釋放曲線；圖8為本發(fā)明實施例二的例I所得微球的藥效作用曲線；圖9為本發(fā)明實施例二的例I所得微球與非納米混懸液制備的微球的體內(nèi)組織相容性曲線；圖10為本發(fā)明實施例三的例I所得微球的體外釋放曲線。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)該理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明，而不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。在實際應(yīng)用中本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明做出的改進(jìn)和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實施例一載有小分子藥物顆粒的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制備本實施例中，采用的小分子藥物是腫瘤化療類藥物或抗生素類藥物，其中腫瘤化療類藥物選自阿霉素、環(huán)磷酰胺、更生霉素、博萊霉素、柔紅霉素、表阿霉素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、卡鉬、卡莫司汀(BCNU)、司莫司汀、順鉬、依托泊苷、喜樹堿及其衍生物、苯芥膽留醇、紫杉醇及其衍生物、多西紫杉醇及其衍生物、長春堿、長春新堿、它莫西芬、依托泊苷、哌泊舒凡、環(huán)磷酰胺或氟他胺及其衍生物，緩釋微球可載有上述藥物中的一種；抗生素類藥物選自環(huán)孢素、左氧氟沙星、氧氟沙星、或鹽酸依匹斯汀，緩釋微球可載有上述藥物中的一種。本實施例中，采用的藥用輔料選自葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、環(huán)糊精、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、聚吡咯烷酮、蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、賴氨酸、鋅鹽、韓鹽、銅鹽、鎂鹽、鑰鹽、或組氨酸的一種或幾種。本實施例方法制備的小分子藥物微球可以用于需要長期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤的血管栓塞微球。以下以兩個具體制備例為例進(jìn)行說明例I :具有抗菌作用和抗癌效果的載有阿霉素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制備，包括如下步驟(I)取20mg阿霉素研磨成顆粒，藥物顆粒的粒徑為O. 2-1 μ m ；(2)把上述阿霉素顆粒和百分比濃度為10%的PLGA的二氯甲烷溶液按照重量比I 9混合并超聲5分鐘形成均勻的混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇中并渦漩I分鐘形成油包油-油包固(s/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到2ml重量百分比濃度為80%的銀納米顆?；鞈乙褐胁嚢?分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌3次，凍干后得到載有阿霉素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球。
本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為34. 49%，納米顆粒的重量百分比為34. 47 %，聚合物的重量百分比為31. 04 %，藥用輔料的重量百分比為O %。對本例制備的載有阿霉素的聚乳酸-羥基乙酸微球進(jìn)行形貌表征、釋放曲線測試、抗菌測試、抗癌測試及在體內(nèi)組織相容性測試，并將其抗菌性、抗癌性及相容性與常規(guī)w/0/w方法制備的微球進(jìn)行對比，其中抗癌作用的測試條件為一次給藥，總劑量與對照組水溶液組每天一次的共15天的總劑量相同。組織相容性測試中，以微球注射部位出現(xiàn)纖維化的動物的百分比為標(biāo)準(zhǔn)計算。圖I-圖5分別依次列出了本例中載有阿霉素的聚乳酸-羥基乙酸微球的掃描電鏡圖、體外釋放曲線、抗菌作用曲線、抗癌作用曲線和與體內(nèi)組織相容性曲線。其中圖I中，A為微球的掃描電鏡圖，B為微球的表面放大圖，可以看出，本例所制備的微球形態(tài)好，粒徑為10-200 μ m，微球表面自組裝有一層銀納米顆粒；從圖2中可以看出，本例所制備的微球幾乎達(dá)到100%的釋放藥物，其體外釋放性能符合要求。微球中阿霉素相對于其原始投加量的包封率為89. 23%。從附圖3可以看出，本例所制備的微球的抗菌作用比對照組好；從附圖4可以看出，本例所制備的微球的抗癌作用效果比對照組好，約為100%，而對照組僅為 80% ;附圖5中，W/0/W方法制備的微球(圖5A)在治療后的3-6個月出現(xiàn)纖維化組織；而本實施例方法制備的微球(圖5B)在治療一年后也沒有纖維組織的出現(xiàn)(即注射部位的微囊化不出現(xiàn)，從而克服了微囊化的產(chǎn)生)。這種方法制備的微球包封率高，最少可以達(dá)到80%以上，突釋非常小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級釋放。且這種表面具有納米顆粒的微球，由于表面親水性的材料與組織相容性比疏水性的材料好，具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附、減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化的作用。例2 :具有抗菌作用和抗癌效果的載有阿霉素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制備本例與例I的不同之處在于，步驟⑵中，PLGA的二氯甲烷溶液的濃度為15%，并且含有10% (w/w)泊洛沙姆；步驟⑷中，將步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到含有80%的銀納米顆粒和I % (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中。實施例二載有生物大分子藥物顆粒的PLGA微球的制備本實施例中，采用的生物大分子藥物選自生長素、促紅細(xì)胞生成素(EPO)、重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、疫苗、干擾素(INF)、生長激素(GH)、胰島素(Insulin)、表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、胰島素樣生長因子(IGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、血小板生長因子(TOGF)、內(nèi)皮生長因子(ECGF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、骨衍生性生長因子(BDGF)、骨形成蛋白(BMP)、組織多肽抗原(TPA)、抗體(antibody)、凝血因子VIII (VIII)、IX遺傳因子、反義核苷酸(anti-RNA)、小分子RNA(RNAi)、SiRNA或基因(DNA)的一種或幾種；緩釋微球可載有上述藥物中的一種或幾種，載有幾種藥物時可將藥物混和然后制備成微球。本實施例中，采用的藥用輔料是葡聚糖、海藻酸鈉、殼聚糖、淀粉、纖維素、環(huán)糊精、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚環(huán)氧乙烷、聚吡咯烷酮、蔗糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、甘氨酸、賴氨酸、或組氨酸的一種或幾種。本實施例方法制備的生物大分子藥物微球可以用于需要頻繁注射給藥、長期治療的疾病，尤其是需要局部治療的疾病如腫瘤、各種病因引起的貧血、侏儒等重大疾病的治療。以下以兩個具體制備例為例進(jìn)行說明例I :具有細(xì)胞黏附作用和促進(jìn)生長或延緩衰老作用的載有生長素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制備，其中PLGA分子量分別為:15000，型號2A50 50和2A65 35 ;及分子量為47000，型號3A50 50和3A65 :35，該方法包括以下步驟(I) IOmg生長素制備成藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為5_10 μ m ；(2)把上述生長素藥物顆粒和百分比濃度為10%的PLGA 二氯甲烷溶液按照重量 比為I : 9混合并超聲I分鐘形成均勻的混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合物中(乙二醇甘油的體積比=3:2)，并超聲O. I分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到20ml重量百分比濃度為50%的羥基磷灰石納米顆?；鞈乙褐胁⒊昈. I分鐘形成納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)的納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為10% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化I小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌5次，凍干后得到具有細(xì)胞黏附作用和促進(jìn)生長或延緩衰老作用的載有生長素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為5. 21%，納米顆粒的重量百分比為39. 99 %，聚合物的重量百分比為49. 9 %，藥用輔料的重量百分比為4. 8 %。對本例制備的具有細(xì)胞黏附作用和促進(jìn)生長或延緩衰老作用的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球進(jìn)行形貌表征、釋放曲線測試、藥效測試、在體內(nèi)組織相容性測試，并將其相容性與W/0/W方法制備的微球進(jìn)行對比，其中藥效測試條件為一次給藥，總劑量與對照組水溶液組每天一次的共15天的總劑量相同。組織相容性測試中，以微球注射部位出現(xiàn)纖維化的動物的百分比為標(biāo)準(zhǔn)計算。圖6-圖9分別依次列出了本例中微球的掃描電鏡圖、體外釋放曲線、藥效作用曲線和組織相容性測試曲線。其中圖6中，A為微球的掃描電鏡圖，B為微球的表面放大圖，圖中可以看出，本例所制備的微球形態(tài)好，粒徑為40-120 μ m，表面自組裝有一層羥基磷灰石納米顆粒；從圖7中可以看出，本例所制備的微球幾乎達(dá)到100%的釋放藥物(體外釋放曲線有多條，分別代表不同型號的PLGA材料制備的微球，通過選擇不同的PLGA材料可以調(diào)控藥物的不同釋放時間)，其體外釋放性能符合要求。微球中阿霉素相對于其原始投加量的包封率為85. 96%。附圖8中，微球組為本實施例方法制備的微球，對照組為W/0/W方法制備的微球，空白組為不含藥物的微球，可以看出，使用本例所制備的微球，體重增加比對照組的體重增加快，藥效更好；從附圖9可以看出，本例所制備的微球的相容性比對照組的好，在治療期間，在動物組織內(nèi)沒有出現(xiàn)注射部位的微囊化或纖維化。這種方法制備的微球包封率高最少可以達(dá)到80%以上，突釋非常小和幾乎沒有不完全釋放，可以達(dá)到零級釋放，同時由于材料降解產(chǎn)生的酸可以與羥基磷灰石納米顆粒發(fā)生反應(yīng)而被中和，以保證微球的內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定，可以使生物大分子藥物在整個制備過程和治療過程保持高活性即不失活。而且這種表面具有納米顆粒的生物大分子藥物微球，由于表面親水性的材料與組織相容性比疏水性的材料好，具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附、減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化的作用。例2 :具有細(xì)胞黏附作用和促進(jìn)生長或延緩衰老作用的載有生長素的聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)的制備本例與例I的不同之處在于，步驟⑵中，PLGA的二氯甲烷溶液的濃度為80 %，并且含有20 % (w/w)泊洛沙姆；步驟(4)中，將步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到含有60%納米顆?；鞈乙汉蚈. 5% (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中。
實施例三例I :具有抗菌作用和抗病毒效果的載有干擾素(IFN)的聚乳酸(PLA)微球的制備，包括如下步驟(I)將5mg干擾素和5mg葡聚糖溶解到O. 2ml的聚乙二醇的溶液中，然后混勻冷凍干燥，再用二氯甲烷洗PEG，離心去上清液，在真空干燥得藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為1-5 μ m ；(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為20%的PLA的二氯甲烷溶液按照重量比為I 20混合并渦旋I分鐘形成均勻的混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相丙二醇和甘油混合物中(丙二醇甘油的體積比=3 2)并攪拌5分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到40ml重量百分比濃度為60%的二氧化鈦納米顆粒混懸液中并超聲2分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為1% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化4小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌4次，凍干后得到載有干擾素(IFN)的聚乳酸(PLA)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為1.7%，納米顆粒的重量百分比為34. 45%，聚合物的重量百分比為62. 25%，藥用輔料的重量百分比為1.6%。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層二氧化鈦納米顆粒，粒徑為50-150 μ m。該例制得的微球的體外釋放曲線如附圖10，圖10中可看出得到幾乎零級釋放的曲線。對該例制得微球進(jìn)行藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。例2 :具有抗菌作用和抗病毒效果的載有干擾素(IFN)的聚乳酸(PLA)微球的制備本例與例I的不同之處在于，
步驟⑵中，PLA的二氯甲烷溶液的濃度為10%，并且含有O. 1% (w/w)聚乙二醇；步驟(4)中，將步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到含50%的二氧化鈦納米顆粒和5% (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中。這種方法制備的IFN微球可以用于需要頻繁注射給藥、長期治療的疾病，如肝炎；可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦。實施例四例I :具有抗菌作用和治療貧血作用的載有促紅細(xì)胞生成素(EPO)的聚己內(nèi)酯(PCL)微球的制備，包括如下步驟(I)將5mg EPO和5mg葡聚糖制備成藥物顆粒，制備方法為把上述EPO和葡聚糖溶液加到5%的聚乙二醇(PEG)的溶液中混勻，然后冷凍干燥，用二氯甲烷溶解PEG，離心去上清液，然后真空干燥得EPO的藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為O. 2-3 μ m ； (2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為10%的PCL的二氯甲烷溶液按照重量比為I 100比例混合并超聲I分鐘形成均勻的混懸液，即油包固(s/ο)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和丙二醇混合液中(乙二醇丙二醇的體積比=3 2)并渦漩2分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為60%的羥基磷灰石納米顆?；鞈乙褐胁嚢?分鐘形成納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)的納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌3次，凍干后得到具有抗菌作用和治療貧血作用的載有促紅細(xì)胞生成素(EPO)的聚己內(nèi)酯(PCL)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為O. 51%，納米顆粒的重量百分比為39. 49 %，聚合物的重量百分比為55. 5 %，藥用輔料的重量百分比為4. 5 %。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層羥基磷灰石納米顆粒，粒徑為50-150 μ m。對該例制得微球進(jìn)行釋放曲線測試、藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。例2 :具有抗菌作用和治療貧血作用的載有促紅細(xì)胞生成素(EPO)的聚己內(nèi)酯(PCL)微球的制備本例與例I的不同之處在于，步驟⑵中，PCL的二氯甲烷溶液的濃度為O. 5% ;步驟⑷中，將步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到含50%羥基磷灰石納米顆粒和3% (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中。本實施例方法制備的EPO微球可以用于需要頻繁注射給藥、長期治療各種原因引起的貧血如腫瘤治療引起的腎衰貧血；可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦。實施例五例I :具有抗菌作用和粒細(xì)胞增加作用的載有粒細(xì)胞集落刺激因子G-CSF的PLGA-PEG微球制備，包括以下步驟(l)5mg G-CSF和5mg葡聚糖制備成藥物顆粒，制備方法為把上述G-CSF和葡聚糖溶液加到5%的聚乙二醇(PEG)的溶液中混勻，然后冷凍干燥，用二氯甲烷溶解PEG，離心去上清液，然后真空干燥得G-CSF的藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為2-6 μ m ;(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為12%的PLGA-PEG的二氯甲烷溶液按照重量比為I : 20混合并超聲5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)得乳液 滴加到親水油相中乙二醇(5ml)并攪拌、漩渦或超聲O. 1-5分鐘形成油包油-油包固(s/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為60%的羥基磷灰石納米顆粒混懸液中并渦旋5分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌3次，凍干后得到粒細(xì)胞集落刺激因子G-CSF藥物顆粒PLGA-PEG微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為5.2%，納米顆粒的重量百分比為40 %，聚合物的重量百分比為50 %，藥用輔料的重量百分比為4. 8 %。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層羥基磷灰石納米顆粒，粒徑為50-150 μ m。對該例制得微球進(jìn)行釋放曲線測試、藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。例2 :具有抗菌作用和粒細(xì)胞增加作用的粒細(xì)胞集落刺激因子G-CSF藥物顆粒PLGA-PEG微球制備本例與例I的不同之處在于，步驟(2)中，PLGA-PEG的二氯甲烷溶液的濃度為80% ；步驟(4)中，將步驟(3)所得油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到含50%羥基磷灰石納米顆粒和5% (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中。本實施例方法制備的G-CSF微球可以用于需要頻繁注射給藥、長期治療各種原因引起的白細(xì)胞減少癥；可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦。實施例六載有粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)的PLA-PEG微球的制備，包括以下步驟(I) 5mg GM-CSF和5mg葡聚糖制備成藥物顆粒，制備方法為把上述GM-CSF和葡聚糖溶液加到5%的聚乙二醇(PEG)的溶液中混勻，然后冷凍干燥，用二氯甲烷溶解PEG，離心去上清液，然后真空干燥得G-CSF的藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為1-9 μ m ;(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為80%的PLGA-PEG的二氯甲烷溶液按照重量比為I : I混合并超聲5分鐘形成均勻得混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合物中(乙二醇甘油為4 I)并攪拌4分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；
(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到30ml重量百分比濃度為60%的羥基磷灰石納米顆粒混懸液中并渦旋5分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為6% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化3小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌3次，凍干后得到粒細(xì)胞集落刺激因子G-CSF藥物顆粒PLGA-PEG微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為25.2%，納米顆粒的重量百分比為10.3%,聚合物的重量百分比為39. 7%，藥用輔料的重量百分比為24. 8%。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層羥基磷灰石納米顆粒，粒徑為10-120 μ m。 對該例制得微球進(jìn)行釋放曲線測試、藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。這種方法制備的GM-CSF微球可以適用于癌癥化療和在用骨髓抑制療法時所引起的白細(xì)胞減少癥，亦適用于治療骨髓衰竭患者的白細(xì)胞低下，也可預(yù)防白細(xì)胞減少時可能潛在的感染并發(fā)癥，還能使感染引起的中性粒細(xì)胞減少的恢復(fù)加快，可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦。實施例七載有重組人生長激素(GH)的PLA/PLGA殼-核微球的制備，包括如下步驟(I)將5mgGH和5mg葡聚糖溶解到O. 2ml的水溶液中，再把上述5 %的GH和葡聚糖溶液加到5%的聚乙二醇(PEG)的溶液中混勻，然后冷凍干燥，用二氯甲烷溶解PEG，離心去上清液，然后真空干燥的GH的藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為3-5 μ m ;(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為12. 5%和PLGA的二氯甲烷溶液按照重量比為I : 8混合并攪拌2. 5分鐘，形成均勻的混懸液，再把PLA的有機(jī)溶液(I. 6ml，重量百分濃度12. 5% )加到上述混懸液中，再攪拌2分鐘形成均勻混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相丙二醇和甘油混合物中(丙二醇甘油的體積比=4 I)并超聲I分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml含60%羥基磷灰石納米顆粒和2% (w/w)的PVA表面活性劑的混懸液中并超聲O. 5分鐘形成納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌3次，凍干后得到載有重組人生長激素(GH)藥物顆粒的PLA/PLGA殼-核微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為O. 91%，納米顆粒的重量百分比為38. 10%,聚合物的重量百分比為60. 21 %，藥用輔料的重量百分比為O. 69 %。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層羥基磷灰石納米顆粒，粒徑為50-210 μ m。對該例制得微球進(jìn)行釋放曲線測試、藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。本實施例方法制備的微球可以適用于兒童、成人生長激素缺乏癥，特納氏綜合癥，兒童慢性腎功能不全導(dǎo)致的生長障礙，手術(shù)、創(chuàng)傷后高代謝狀態(tài)(負(fù)氮平衡)，燒傷，膿毒敗血癥；可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦；同時表面自組裝有納米顆粒的微球，由于表面親水性的材料與組織相容性比疏水性的材料好，具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附、減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化的作用。實施例八載有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球的制備方法，包括如下步驟(I)將5mgVEGF和5mg葡聚糖噴霧干燥制備成藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為 O. 2-2 μ m ；(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為40 %的PCL-PEG的二氯甲烷溶液按照重量比為I : 100混合并超聲I. 5分鐘形成均勻混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合液中(乙二醇甘油的體積比=3 2)并攪拌3分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為60%羥基磷灰石納米顆?；鞈乙褐胁嚢?分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌5次，凍干后得到血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)藥物顆粒聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為O. 63%，納米顆粒的重量百分比為38. 74 %，聚合物的重量百分比為60. OI %，藥用輔料的重量百分比為O. 62 %。對所得微球進(jìn)行形貌表征，結(jié)果顯示制備的微球形態(tài)好，其表面自組裝一層羥基磷灰石納米顆粒，粒徑為20-120 μ m。對該例制得微球進(jìn)行釋放曲線測試、藥效測試和相容性測試，結(jié)果與實施例二相似，此處不再贅述。這種方法制備的VEGF微球可以適用于新生血管的形成治療促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的療法，可以減少注射的頻率和減輕病人的痛苦；同時由于納米顆粒在材料降解產(chǎn)生的酸可以與羥基磷灰石納米顆粒發(fā)生反應(yīng)，而中和酸，以保證微球的內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定，本方法制備的微球可以使VEGF藥物在整個制備過程和治療過程保持高活性即不失活。且這種表面自組裝有納米顆粒的微球，由于表面親水性的材料與組織相容性比疏水性的材料好，具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附、減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化的作用。實施例九載有氧氟沙星的PLGA/PLA微球的制備，包括如下步驟(I)取O. Olmg氧氟沙星研磨成藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為5_8 μ m ;(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為99. 98%的PLGA-PEG的二氯甲烷溶液按照重量比為I : 100混合并攪拌2. 5分鐘，形成均勻的混懸液，即油包固(S/0)乳液；
(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合液中(乙二醇甘油的體積比=3 2)并攪拌3分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為60%羥基磷灰石納米顆?；鞈乙褐胁嚢?分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌5次，凍干后得到氧氟沙星藥物顆粒聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為O. 01%，納米顆粒的重量百分比為 O. 01%，聚合物的重量百分比為99. 98%。實施例十載有氧氟沙星的PLA微球的制備，包括如下步驟(I)取4mg氧氟沙星研磨成藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為3_6 μ m ;(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為5%的PLA的二氯甲烷溶液按照重量比為I 12混合并攪拌2. 5分鐘，形成均勻的混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合液中(乙二醇甘油的體積比=3 2)并攪拌3分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為60%羥基磷灰石納米顆粒混懸液中并攪拌5分鐘形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；(5)把步驟(4)所得納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌5次，凍干后得到氧氟沙星藥物顆粒聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為40%，納米顆粒的重量百分比為40%，聚合物的重量百分比為20%。實施例^^一載有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)和促紅細(xì)胞生成素(EPO)的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球的制備方法，包括如下步驟(I)將5mgVEGF、5mg EPO和5mg葡聚糖噴霧干燥制備成藥物顆粒，藥物顆粒的粒徑為 O. 2-2 μ m ；(2)把上述藥物顆粒和百分比濃度為12%的PCL-PEG的二氯甲烷溶液按照重量比為I : 9混合并超聲I. 5分鐘形成均勻混懸液，即油包固(S/0)乳液；(3)把步驟(2)所得油包固(S/0)乳液滴加到5ml親水油相乙二醇和甘油混合液中(乙二醇甘油的體積比=3 2)并攪拌3分鐘形成油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳；(4)把步驟(3)的油包油-油包固(S/0/0)復(fù)乳滴加到50ml重量百分比濃度為30%羥基磷灰石納米顆?；鞈乙褐胁嚢?分鐘形成納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳；
(5)把步驟(4)所得納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固(S/0/0/S)復(fù)乳滴加到濃度為5% (w/w)的IOOOml氯化鈉溶液固化2小時；(6)把步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并用水洗滌5次，凍干后得到載有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)和促紅細(xì)胞生成素(EPO)的聚己內(nèi)酯-聚乙二醇(PCL-PEG)微球。本實施例中所得微球中，藥物的重量百分比為10%，納米顆粒的重量百分比為
40%，聚合物的重量百分比為20%，藥用輔料的重量百分比為30%。
權(quán)利要求
1.一種納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)將藥物或藥物和藥用輔料制備成藥物顆粒，所述藥物在藥物顆粒中的重量百分比為 O. 1% -100% ； (2)將藥物顆粒按照重量比為I: 1-100分散在濃度為O. 5% -99. 98% (w/w)的聚合物有機(jī)溶液中形成均勻的混懸液，即油包固乳液； (3)將步驟(2)形成的油包固乳液加到親水油相中并乳化形成油包油-油包固復(fù)乳； (4)將步驟(3)形成的油包油-油包固復(fù)乳加入重量百分比濃度為1%-80%的納米顆?；鞈乙褐谢蛱砑佑蠴. 5% -5% (w/w)表面活性劑的1% -80% (w/w)的納米顆粒混懸液中乳化，形成納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固復(fù)乳； (5)將所述納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固復(fù)乳轉(zhuǎn)移到濃度為1%-10% (w/w)無機(jī)鹽溶液固化l_4h ； (6)將步驟(5)所得樣品進(jìn)行離心，收集微球，并洗滌所得微球，之后凍干得到表面自組裝有納米顆粒的藥物微球。
2.如權(quán)利要求I所述的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法,其特征在于，所述藥物顆粒選自親水性的藥物顆粒，藥物載入到藥物輔料中制備的顆粒，或疏水性的藥物通過制劑的方法制備成的不溶于有機(jī)溶劑的顆粒中的一種； 所述藥物顆粒的粒徑為O. 2-10 μ m。
3.如權(quán)利要求I或2所述的納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固制備微球的方法，其特征在于，所述藥物包括小分子藥物和大分子藥物，所述小分子藥物為化學(xué)藥物，所述大分子藥物為生物大分子藥物； 所述藥用輔料為注射用藥用輔料。
4.如權(quán)利要求3所述的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法,其特征在于，所述生物大分子藥物選自蛋白大分子藥物、疫苗、抗體、核酸、或脂質(zhì)體藥物中的一種或幾種。
5.如權(quán)利要求I所述的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法,其特征在于，所述步驟(2)中，所述聚合物有機(jī)溶液中的聚合物選自聚己內(nèi)酯、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥基乙酸-聚乳酸-聚乙二醇和聚己內(nèi)酯-聚乙二醇中的一種或幾種，有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、庚烷、氯仿、或丙酮中的一種或幾種； 所述步驟(3)中，所述親水油相選自乙二醇、甘油和丙三醇中的一種或幾種； 所述步驟(4)中，所述納米顆?；鞈乙哼x自有機(jī)納米顆粒水混懸液、無機(jī)納米顆粒水混懸液或上述兩種混懸液的混合液。
6.如權(quán)利要求5所述的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法,其特征在于，所述步驟(2)中，聚合物有機(jī)溶液的濃度為5%-30% (w/w) 0
7.如權(quán)利要求I所述的納米顆粒混懸液包油-油包油-油包固制備微球的方法,其特征在于，所述聚合物有機(jī)溶劑中還添加有O. 1% -20% (w/w)聚乙二醇或泊洛沙姆。
8.如權(quán)利要求I所述的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法，其特征在于，所述的步驟(3)中，所述表面活性劑選自聚乙烯醇PVA、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、泊洛沙姆、聚三梨醇、乙基纖維素、或吐溫的一種或幾種。
9.一種納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備的微球，其特征在于，所述微球表面組裝有一層納米顆粒，其粒徑為1-500 μ m ； 所述微球成分組成如下藥物的重量百分比為O. 01% -40%，納米顆粒的重量百分比為O. OI % -40 %，聚合物的重量百分比為20 % -99. 98 %，藥用輔料的重量百分比為0_30 %。
10.如權(quán)利要求9所述的微球，其特征在于，所述微球的粒徑為10-100μ m。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制藥技術(shù)領(lǐng)域的納米顆?；鞈乙喊?油包油-油包固制備微球的方法，該方法制備的微球包括藥物、聚合物、藥用輔料、納米顆粒，各組分重量含量為藥物的重量百分比為0.01％-40％，納米顆粒的重量百分比為0.01％-40％，聚合物的重量百分比為20％-99.98％，藥用輔料的重量百分比為0-30％。本發(fā)明將藥物顆粒加到聚合物有機(jī)溶液中進(jìn)行乳化，并將所得乳液加入親水油相攪拌混合，然后選擇納米顆?；鞈乙鹤霰砻婊钚詣┣?，最后在另一大水相中硬化，除去有機(jī)溶劑并收集微球。本發(fā)明避免了用常規(guī)的W/O，W/O/W，或S/O/O的方法制備微球引起的組織相容性問題，制備的微球具有增強(qiáng)細(xì)胞黏附、減少局部過酸和疏水材料引起的炎癥及微囊化的作用，可以運用到各種藥物緩釋或控釋微球的制備及疾病的治療中。
文檔編號A61K45/00GK102895196SQ20121036520
公開日2013年1月30日 申請日期2012年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月26日
發(fā)明者袁偉恩, 金拓, 吳飛, 張奇昕, 洪曉蕓, 徐建雄 申請人:上海交通大學(xué)