專利名稱：包含表面活性劑蛋白質(zhì)b(sp-b)和表面活性劑蛋白質(zhì)c(sp-c)的類似物的改良重構(gòu)的表面 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及適合于預防和/或治療呼吸窘迫綜合征(RDS)和其他呼吸病的重構(gòu)的肺表面活性劑。
背景技術(shù)：
人肺由大量小氣囊組成，稱作肺泡，其中氣體在肺的血液與空氣間層之間交換。在健康個體中，這種交換由存在的包含蛋白質(zhì)的表面活性劑復合物介導，所述表面活性劑復合物防止呼氣結(jié)束時肺塌陷。肺表面活性劑復合物主要由脂質(zhì)組成且包含少量不同的蛋白質(zhì)。缺乏足夠水平的這種復合物導致肺功能障礙。這種綜合征稱作呼吸窘迫綜合征(RDS)且它通常影響早產(chǎn)兒。使用商購的提取自動物肺的改性的天然表面活性劑制劑如稱作Gurosurf 的標準制劑有效治療所述綜合征。這些表面活性劑制劑的主要成分是磷脂類和表面活性劑疏水蛋白質(zhì)B和C(SP_B 和 SP-C)。由于來自動物組織的表面活性劑制劑存在缺陷，例如生產(chǎn)過程復雜和可能的病毒污染和/或誘發(fā)免疫反應，所以制備了本領(lǐng)域可利用的合成表面活性劑。所述合成表面活性劑可以是合成化合物、主要是磷脂類和其他脂質(zhì)的簡單混合物且稱作“人造”表面活性劑；盡管它們已經(jīng)用于臨床實踐多年，但是其功效與改性的天然表面活性劑的功效無法比擬。還包含表面活性劑蛋白質(zhì)/肽類的人造表面活性劑目前也處于研發(fā)中。它們稱作 “重構(gòu)的”表面活性劑或“生物模擬表面活性劑”。然而，根據(jù)可得到的文獻報道，迄今為止研發(fā)的重構(gòu)的表面活性劑沒有一種在肺順應性方面顯示出與提取自動物的表面活性劑的功效相差無幾的功效。此外，它們產(chǎn)生肺氣體量且在呼氣結(jié)束時肺泡開放性差，且需要呼氣末正壓(PEEP)通氣以得到與使用改性的天然表面活性劑相差無幾的體內(nèi)活性(Johansson J等人J Appl Physiol 2003,95, 2055-2063 ；Davis AJ 等人 Am J Respir Crit Care Med 1998 ； 157，553-559)?？赡艿慕忉屧谟谔幱谘邪l(fā)中的重構(gòu)的表面活性劑無法再現(xiàn)改性的天然表面活性劑的完整蛋白質(zhì)特性，因為它們僅包含一種蛋白質(zhì)(肽)成分。另一方面，除良好的功效外，表面活性劑組合物還應顯示低粘度，以便能夠制備在水性介質(zhì)中的濃混懸液。制備在小體積中的濃混懸液的可能性實際上是將其對極低體征新生兒給藥的特別重要的特征。肽磷脂系統(tǒng)是相當復雜的混合物，其特性明顯依賴于磷脂混合物的組成和特定的磷脂類/肽組合。另一種肽的存在可以影響組合物的流變性質(zhì)，從而使得該系統(tǒng)甚至更復雜。
4
在現(xiàn)有技術(shù)中，已經(jīng)公開了包含模擬人表面活性劑蛋白質(zhì)的SP-B和SP-C類似物的重構(gòu)的表面活性劑，例如在WO 0076535，W02008011559和WO 2008044109中。然而，已經(jīng)證實其中公開的組合物無一在肺順應性和流變性質(zhì)、特別是粘度方面具有最佳特性。因此，對重構(gòu)的表面活性劑制劑仍然存在需求，其具有與提取自動物肺相差無幾的功效和最佳流變性質(zhì)，使得它們在給藥時易于遞送和分布入肺的支氣管肺泡部分。本發(fā)明通過提供在肺順應性和粘度方面具有改良特性的重構(gòu)的表面活性劑組合物解決了這一問題。發(fā)明_既述本發(fā)明涉及重構(gòu)的表面活性劑，其包含a) 1. 2-1. 8%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式IPSSPVHL KRLKLLLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ. ID NO 1)表示的序列組成；b)0. 1-0. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALI KRIQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ. I D NO 2)表示的序列組成；45 55-55 45重量比的單不飽和與飽和磷脂；全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包含請求保護的單獨的重構(gòu)的表面活性劑或該表面活性劑與一種或多種藥學可接受的載體的組合。本發(fā)明還提供了請求保護的重構(gòu)的表面活性劑作為藥物的應用。在另一個方面，本發(fā)明提供了請求保護的重構(gòu)的表面活性劑在預防和/或治療呼吸窘迫綜合征(RDS)和其他呼吸病中的應用。此外，本發(fā)明提供了請求保護的重構(gòu)的表面活性劑在制備用于預防和/或治療呼吸窘迫綜合征(RDS)和其他呼吸病的藥物中的應用。本發(fā)明還提供了用于預防和/或治療呼吸窘迫綜合征(RDS)和其他呼吸病的方法，該方法包括對有這種治療需求的患者給予治療有效量的上述的重構(gòu)的表面活性劑。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種方法，包括通過灌洗技術(shù)給予本發(fā)明的稀釋的重構(gòu)的表面活性劑，以除去有害物質(zhì)和/或炎性滲出物，使肺擴張并且改善肺功能。最終，本發(fā)明還涉及藥盒，其包含a)在第一單位劑型中的上述的干粉形式的重構(gòu)的表面活性劑；b)在第二單位劑型中的藥學可接受的載體；和C)用于容納所述第一種和第二種劑型的容器裝置。定義表面活性劑制劑的“表面活性劑活性”被定義為降低表明張力的能力。外源性表面活性劑制劑的體外功效通常通過使用適合的裝置如WiIhelmy Balance和Captive Bubble Surfactometer測定其減低表面張力的能力來測試。外源性表面活性劑制劑的體內(nèi)功效通常通過測量兩個參數(shù)來測試i)為肺順應性指數(shù)的潮氣量；和ii)為呼氣結(jié)束時肺泡氣擴張或開放性的氣體量，和由此在呼氣結(jié)束時在肺泡內(nèi)形成穩(wěn)定的磷脂薄膜的能力。本文所用的“治療有效”量意指能夠預防、避免、減輕或消除呼吸病或與內(nèi)源性表面活性劑缺乏或功能障礙相關(guān)的疾病的重構(gòu)的表面活性劑的量。術(shù)語“藥學可接受的”或“生理學可耐受的”意指能夠?qū)θ私o藥、但不產(chǎn)生不期望的生理學效應的組合物、介質(zhì)、溶劑、鹽。術(shù)語“天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物”意指具有氨基酸序列的多肽， 其中與天然SP-C蛋白質(zhì)相比，氨基酸缺失和/或已經(jīng)被其他氨基酸替代，條件是在與磷脂類的混合物中，該多肽顯示肺表面活性劑活性(正如通過體外和體內(nèi)功效試驗所證實的)。術(shù)語“天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物”意指具有氨基酸序列的多肽， 其中與天然SP-B蛋白質(zhì)相比，氨基酸缺失和/或已經(jīng)被其他氨基酸替代，條件是在與磷脂類的混合物中，該多肽顯示肺表面活性劑活性(正如通過體外和體內(nèi)功效試驗所證實的)。“重組”在涉及到例如細胞或核酸、蛋白質(zhì)或載體使用時表示該細胞、核酸、蛋白質(zhì)或載體已經(jīng)通過導入異源性核酸或蛋白質(zhì)或改變天然核酸或蛋白質(zhì)被修飾。本文所用的應用于點值的術(shù)語“約”表示士的變異性。磷脂類是脂質(zhì)，其中一個脂肪酸被磷酸基團和簡單有機分子替代?？梢栽诒砻婊钚詣┲苿┲邪l(fā)現(xiàn)的最常見類型的磷脂類是磷脂酰膽堿類(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰絲氨酸(PS)。磷脂類的甘油基部分主要被長鏈脂肪酸酯化，由此可以是飽和的(例如肉豆蔻酸、棕櫚酸和硬脂酸)、單不飽和的(例如油酸)或多不飽和的(例如亞油酸和花生四烯酸)。特別地，本申請中所考慮到的種類是-1,2- 二棕櫚?；?sn-甘油_3_磷酸膽堿，也稱作二棕櫚?；鵢磷脂酰膽堿 (DPPC)，其為飽和衍生物；和1-棕櫚酰基-2-油基-sn-甘油-3-磷酸甘油，也稱作棕櫚酰基-油基-磷脂酰甘油(POPG)，其為單不飽和衍生物。“多肽”、“肽”和“蛋白質(zhì)”在本文中可以互換使用以指氨基酸殘基的聚合物。氨基酸序列根據(jù)在左端攜帶游離氨基(氨基末端)的氨基酸和在右端攜帶游離羧基(羧基末端)的氨基酸的單字母密碼表示。本文確定的全部氨基酸殘基是天然L-構(gòu)型且本文確定的序列根據(jù)氨基酸殘基的標準縮寫報道。為避免疑慮，氨基酸衍生物L-正亮氨酸在本文中稱作nLeu，且L-鳥氨酸縮寫為Orn01顯示作為本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑(n;b)與Curosurf 和未治療動物(η = 動物數(shù)量)的時間/壓力函數(shù)的潮氣量(ml/kg)結(jié)果。圖2顯示本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑(N3)與Curosurf 和未治療動物(n =動物數(shù)量)的肺氣體量(ml/kg)結(jié)果。發(fā)明詳述構(gòu)建多因素實驗設(shè)計以研究WO 2008044109中一般公開的表面活性劑組合物中磷脂類和SP-B和SP-C類似物的相對量如何影響粘度，以及所述成分在重構(gòu)的表面活性劑中如何彼此影響。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)SP-B類似物的量對表面活性劑組合物的粘度具有顯著影響，且由此 SP-B的含量應維持盡可能低以便與治療功效一致，從而將重構(gòu)的表面活性劑的粘度降至可接受的低水平。WO 2008044109涉及DPPC POPG之比，優(yōu)選等于或大于7 3在SP-B類似物的存在下的應用。WO 2008044109未提及這種表面活性劑組合物的粘度。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)當表面活性劑中SP-B類似物的量最小時，雙飽和磷脂類如DPPC與不飽和磷脂類如POPG之間的高比例導致相應組合物的不可接受的高粘度。然而，我們已經(jīng)通過制備低SP-B表面活性劑克服了這一問題，其中不飽和磷脂與飽和磷脂之比降至低于現(xiàn)有技術(shù)所公開的水平，優(yōu)選達到約1 1，且已經(jīng)證實這些表面活性劑組合物具有令人意外的低粘度，使得它們能夠用于所有的臨床應用。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及重構(gòu)的表面活性劑，其包含a) 1. 2-1. 8%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式IPSSPVHL KRLKLLLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ. ID NO 1)表示的序列組成；b)0. 1-0. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALI KRIQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ. ID NO 2)表示的序列組成；45 55-55 45重量比的單不飽和與飽和磷脂；全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。在本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑中，SP-C蛋白質(zhì)類似物成分優(yōu)選占重構(gòu)的表面活性劑總重的1. 4-1. 6%、且更優(yōu)選約1. 5%重量。在本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑中，SP-B蛋白質(zhì)類似物成分優(yōu)選占重構(gòu)的表面活性劑總重的0. 2-0. 4%、且更優(yōu)選約0. 2%重量。本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑可以有利地包含飽和磷脂類如二棕櫚酰基磷脂酰膽堿(DPPC)和二棕櫚?；字８视?DPPG)和單不飽和磷脂類如棕櫚?；突字Ｄ憠A (POPC)和棕櫚?；突字８视?POPG)。用于本發(fā)明應用的優(yōu)選的飽和磷脂是DPPC，而優(yōu)選的單不飽和磷脂是P0PG。有利地，磷脂類的合并重量占重構(gòu)的表面活性劑總重的至少90%、有利地至少 95%、優(yōu)選至少97. 7%、更優(yōu)選98. 3%。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及重構(gòu)的表面活性劑，其包含a)約1. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP_C的多肽類似物，其由式IPSSPVHLK RLKLLLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ. ID NO 1)表示的序列組成；b)約0. 2%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIK RIQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ. ID NO 2)表示的序列組成；c)約50 50重量比的1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油_3_磷酸膽堿(DPPC)與1_棕櫚?；?2-油基-sn-甘油-3-磷酸甘油(POPG)；全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。在一個特定的實施方案中，本發(fā)明涉及重構(gòu)的表面活性劑，其包含a)約1. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP_C的多肽類似物，其由式IPSSPVHLK RLKLLLLLLLLILLLILGALLLGL (SEQ ID :N0. 1)表示的序列組成；b)約0. 2%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIK RIQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS (SEQ ID :N0. 2)表示的序列組成；c)約49. 15%重量的1，2_ 二棕櫚酰基-sn-甘油_3_磷酸膽堿(DPPC)；和
d)約49. 15%重量的1-棕櫚?；鵢2_油基-sn-甘油_3_磷酸甘油(POPG)，全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。在一個優(yōu)選的實施方案中，SEQ ID :N0. 2的多肽可以是二硫鍵合的分子形式，其中分子內(nèi)二硫鍵在1-與33-位上的兩個半胱氨酸殘基之間和/或在4-和27-位上的兩個半胱氨酸殘基之間。SEQ ID :N0. 1的多肽在WO 2008044109(完整引入本文參考)中稱作 SP-C33 (Leu)，而 SEQ ID 2 的多肽在 WO 2008044109 中稱作 Mini-B(Leu)且其二硫鍵連接形式稱作 ox Mini-B (Leu)。在一個甚至更優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑主要由所請求的含量的成分a)、b)、c)和任選的d)組成。有利地，兩種多肽都可以以藥學可接受的鹽的形式存在。所述鹽包括，例如鹽酸
鹽、乙酸鹽和三氟乙酸鹽。優(yōu)選地兩種多肽都以乙酸鹽的形式存在于組合物中。此外，POPG可以有利地以藥學可接受的鹽的形式存在，例如為鈉鹽(P0PG Na)。可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法或重組技術(shù)制備SEQ ID :N0. 1和SEQ ID :N0. 2的多肽類。有關(guān)經(jīng)典溶液合成，許多可利用技術(shù)的極佳的概要可以在J.M. Meward和 J.D.Young, “ Solid Phase Peptide Synthesis“ , W. H. Freeman Co., San Francisco, 1969,禾口 J. Meienhofer, " Hormonal Proteins and Peptides" , Vol. 2, p.46, Academic Press (New York)，1983 有關(guān)固相肽合成和 Ε· Schroder 和 K. Kubke, “ The Peptides “， Vol. 1，Academic Press (New York), 1965 中找到。優(yōu)選地可以使用最初Merrifield 在 J. Am. Chem. Soc. 85 :2149-2154(1963)中描述的固相合成技術(shù)制備多肽類。其他多肽合成技術(shù)例如在M.BodanSzky等人，Peptide Synthesis, John ffiley&Sons, 2d Ed.，(1976)和本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的其他參考著作中可以找到。用于這種合成的合適的保護基可以在以上教科書和J. F. W. McOmie，Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, New York, NY(1973)中找至丨J。例如，可以如W02008044109中所述制備兩種多肽。用于治療如本文所述的諸如RDS這樣的疾病的本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑的有效劑量根據(jù)許多不同因素而改變，包括疾病類型、給藥方式、患者的體重和生理狀態(tài)和治療是預防性的還是治療性的。一般而言，劑量由0.01mg-10g/kg體重，優(yōu)選0. Ι-lg/kg體重組成，且給藥次數(shù)可以根據(jù)是采用預防性治療還是采用治療性治療的不同而改變。典型地，在一次劑量中給予約50mg/kg、100mg/kg或200mg/kg的劑量。為了新生兒應用，一般一次或兩次給藥就足夠了。盡管要求可以根據(jù)呼吸病的嚴重性和/或其他變量的不同而改變，但是用于有效劑量的最佳范圍的確定屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的技能。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑的藥物制劑。所述制劑有利地以溶液、分散液、混懸液或干粉形式給予。優(yōu)選所述組合物包含溶于或混懸于合適的生理學可耐受的溶劑或再混懸載體如水或生理鹽水溶液(0. 9% w/v NaCl)的重構(gòu)的表面活性劑。本發(fā)明的制劑可以包含水溶液，優(yōu)選無菌水溶液，其還可以包含PH緩沖劑、稀釋劑和其他合適的添加劑?？梢詫⒅苿┲瞥蓡蝿┝炕蚨鄤┝咳萜鳎缑芊獾陌碴澈托∑?，或可以將其貯存在冷凍或冷凍干燥(凍干)條件下，僅需要在使用前即刻加入無菌液體載體。優(yōu)選地將本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑作為在單一應用的玻璃小瓶中的在生理鹽水水溶液中的無菌混懸液提供。可以根據(jù)制藥工業(yè)中眾所周知的常規(guī)技術(shù)制備藥物制劑。這樣的技術(shù)包括在有機溶劑的存在下混合多肽類和磷脂類的步驟。然后通過在氮氣氣氛中透析或蒸發(fā)和/或暴露于真空或通過其他本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的合適的技術(shù)如凍干除去溶劑。有利地，殘留溶劑的量可以低于0. 1%，優(yōu)選低于0.05%，更優(yōu)選低于0.003%，甚至更優(yōu)選低于0.001%重量。然后將得到的粉末均勻和緊密地與液體載體固體細粉或它們兩者混合。可以在例如通過無菌過濾除去溶劑前對多肽類和磷脂類的混合物無菌化。在一些其他實施方案中，根據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的方法對重構(gòu)的表面活性劑組合物末端滅菌。按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方式進行本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑的給藥，例如，通過氣管內(nèi)滴入(輸注或推注或通過導管)、通過噴霧給藥或噴霧法。正如本文所公開的，本發(fā)明關(guān)注如本文進一步描述的濃和稀表面活性劑制劑的應用，這取決于具體應用。濃表面活性劑組合物典型地用于“推注”類型的給藥，而稀表面活性劑組合物典型地用于“灌洗”類型的給藥。有利地，在根據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的方法使用市售的常用粘度計測定時，所述制劑的粘度低于20cP、優(yōu)選低于15cP。有利地，就“推注”類型的給藥而言，以重量/ml溶液或混懸液(添加液體載體后) 表示的重構(gòu)的表面活性劑濃度是約0. 1-約100mg/ml，優(yōu)選5_80mg/ml。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，當通過作為在生理鹽水(0. 9% w/v氯化鈉水溶液)中的混懸液氣管內(nèi)滴入給予重構(gòu)的表面活性劑時，濃度為約80mg/ml。因此，本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案涉及在生理鹽水中的水性混懸液形式的藥物制劑，其包含約80mg/ml的重構(gòu)的表面活性劑，該表面活性劑由如下成分組成a)約1. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式I PSSPVHL KRLKLLLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ ID :N0. 1)表示的序列組成；b)約0. 2%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIK RIQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ ID :N0. 2)表示的序列組成；c)約49. 15%重量的1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(DPPC)；和d)約49. 15%重量的1-棕櫚?；?2-油基-sn-甘油-3-磷酸甘油(POPG)，全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。典型地，所述制劑的粘度在25°C為約9 士 3cP且在37°C為8 士 3cP，正如使用市售可得到的常用旋轉(zhuǎn)粘度計測定的。當用于灌洗給藥時，典型的表面活性劑濃度為約0. l-20mg/ml且更優(yōu)選約
90. 5-10mg/ml (以mg表面活性劑/ml溶液或混懸液表示)。由于取決于濃度，所以稀制劑的粘度甚至可以更低。當作為藥物治療應用時，可以單獨或任選地與用于治療呼吸病或障礙的其他化合物或組合物結(jié)合給予包含本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑的制劑。例如，如果治療受試者因細菌感染導致的呼吸病，則可以將本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑與另一種用于治療細菌感染的化合物如抗生素一起給藥。否則，在某些情況中，例如用于預防諸如旋轉(zhuǎn)粘度計這樣的并發(fā)癥，可以將本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑與皮質(zhì)類固醇如布地奈德和丙酸倍氯米松結(jié)合給藥。在某些實施方案中，可以將本發(fā)明重構(gòu)的表面活性劑和再混懸載體分別同時包裝在適合的容器裝置中。這種將成分單獨在適合的容器裝置中的包裝也描述為藥盒。因此，本發(fā)明還涉及藥盒，其包含a)在第一單位劑型中的上述舉出的干粉形式的重構(gòu)的表面活性劑；b)在第二單位劑型中的藥學可接受的載體；和C)用于包含所述第一種和第二種劑型的容器裝置。優(yōu)選地藥學可接受的載體是生理鹽水溶液、更優(yōu)選無菌的。正如本文所公開的，用于給予本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑及其制劑的方法是可得到的且是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。根據(jù)疾病類型的不同，例如具有呼吸窘迫綜合征的嬰兒或成年人的不同，不同的治療方法可能是合適的。典型地，通過保持在連續(xù)或間歇性正壓換氣(IPPV)下對患者器官內(nèi)滴入(例如早產(chǎn)兒)給予所述的表面活性劑。或者，可以通過使用氣管內(nèi)和通過特別設(shè)計的鼻裝置如面罩、叉狀物或?qū)Ч苤С值幕颊唧w內(nèi)放置的細導管、根據(jù)稱作鼻腔持續(xù)正壓通氣(nCPAP)的方法給予所述的表面活性劑。后一種手段僅能夠應用于具有低粘度的表面活性劑，因為高粘度使得表面活性劑通過細導管更困難。在患者患有與肺部炎癥、肺部感染或肺挫傷相關(guān)的呼吸窘迫癥的例子中，可以推薦特定的治療方法。在一種這樣的治療方法中，用本發(fā)明的表面活性劑組合物灌洗患者作為單次或多次治療進行。本發(fā)明的重構(gòu)的表面活性劑適合于預防、延緩、緩解、阻止或抑制與呼吸病相關(guān)的癥狀或病癥發(fā)生。特別地，它可用于預防和/或治療早產(chǎn)新生兒的呼吸窘迫綜合征(RDS)或其他與表面活性劑-缺乏或功能障礙相關(guān)的疾病，包括急性肺損傷(ALI)、成年人中的RDS(ARDS)、 胎糞吸入綜合征(MAQ和支氣管肺發(fā)育不良(BPD)。它還可以用于預防和/或治療其他呼吸病如慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、呼吸道感染(例如肺炎、卡氏肺囊蟲、囊性纖維化和呼吸道合胞病毒)和用于治療嚴重性漿液性中耳炎(膠耳)。下列實施例更詳細地示例本發(fā)明。 實施例
10
實施例1成分對粘度的影響構(gòu)建多因素實驗設(shè)計，以評價成分對制劑粘度方面的影響。測試不同百分比的多肽類 SP-C33 (Ieu)和 οχ-Mini-B (Ieu)和不同比例的 DPPC 和 POPG Na。將所有得到的混合物以80mg/ml的濃度重新混懸于生理鹽水溶液(0. 9 % w/v)。在25°C 和 37°C 使用應用 100r. p.m.轉(zhuǎn)速的 VISCO STAR Plus (Fungilab)粘度計測定粘度。為比較目的，Curosurf 顯示粘度介于6和IOmPas之間(ImPas = 1厘泊)。將結(jié)果報道在表1中。表權(quán)利要求
1.重構(gòu)的表面活性劑組合物，包含a)1. 2至1. 8%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式IPSSPVHLKR LKLLLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ. ID NO 1)表示的序列組成；b)0.1至0. 5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIKR IQALIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ. ID NO 2)表示的序列組成；45 55至55 45重量比的單不飽和與飽和磷脂；全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。
2.權(quán)利要求1的重構(gòu)的表面活性劑，包含a)約1.5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式IPSSPVHLKRLKL LLLLLLLILLLILGALLLGL(SEQ. ID NO 1)表示的序列組成；b)約0.2%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIKRIQA LIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS(SEQ. ID NO 2)表示的序列組成；c)約50 50重量比的1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油_3_磷酸膽堿(DPPC)與1-棕櫚?；?2-油基-sn-甘油-3-磷酸甘油(POPG)；全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。
3.權(quán)利要求2的重構(gòu)的表面活性劑，包含a)約1.5%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物，其由式IPSSPVHLKRLKL LLLLLLLILLLILGALLLGL (SEQ ID :N0. 1)表示的序列組成；b)約0.2%重量的天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的多肽類似物，其由式CWLCRALIKRIQA LIPKGGRLLPQLVCRLVLRCS (SEQ ID :N0. 2)表示的序列組成；c)約49.15%重量的1,2- 二棕櫚?；?sn-甘油-3-磷酸膽堿(DPPC)；和d)約49.15%重量的1-棕櫚?；?2-油基-sn-甘油-3-磷酸甘油(POPG)，全部含量均相對于重構(gòu)的表面活性劑的總重計算。
4.權(quán)利要求1-3任一項的重構(gòu)的表面活性劑，其中SEQID :N0. 2的多肽是在1_與 33-位上的兩個半胱氨酸殘基之間和/或在4-和27-位上的兩個半胱氨酸殘基之間具有分子內(nèi)二硫鍵的二硫鍵合的分子形式。
5.上述權(quán)利要求任一項的重構(gòu)的表面活性劑，其中POPG是藥學可接受的鹽的形式。
6.權(quán)利要求5的重構(gòu)的表面活性劑，其中所述的鹽是鈉鹽。
7.上述權(quán)利要求任一項的重構(gòu)的表面活性劑，其中所述多肽各自以藥學可接受的鹽的形式存在。
8.權(quán)利要求7的重構(gòu)的表面活性劑，其中所述的鹽是乙酸鹽。
9.藥物制劑，包含權(quán)利要求1-8任一項的重構(gòu)的表面活性劑，該表面活性劑任選地與一種或多種藥學可接受的載體組合，所述制劑是溶液、分散液、混懸液或干粉形式。
10.權(quán)利要求9的藥物組合物，其中所述制劑是水性混懸液形式。
11.權(quán)利要求10的藥物制劑，其中重構(gòu)的表面活性劑的濃度介于0.1和160mg/ml所述水性混懸液之間。
12.藥盒，包含a)在第一單位劑型中的粉末形式的權(quán)利要求1-8任一項的重構(gòu)的表面活性劑；b)在第二單位劑型中的藥學可接受的載體；和c)用來容納所述第一和第二劑型的容器裝置。
13.權(quán)利要求1-8任一項的重構(gòu)的表面活性劑，用作藥物。
14.權(quán)利要求1-8任一項的重構(gòu)的表面活性劑，用于治療或預防早產(chǎn)嬰兒的呼吸窘迫綜合征(RDS)或用于治療或預防與表面活性劑-缺乏或功能障礙相關(guān)的其他疾病。
15.權(quán)利要求14的重構(gòu)的表面活性劑，其中所述疾病包括成人RDS(ARDS)、胎糞吸入綜合征(MAQ和支氣管肺發(fā)育不良(BPD)。
全文摘要
本發(fā)明涉及重構(gòu)的肺表面活性劑，其包含脂質(zhì)載體、天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-C的多肽類似物與天然表面活性劑蛋白質(zhì)SP-B的特定的多肽類似物的組合。本發(fā)明還涉及其藥物制劑及其在治療或預防RDS和其他呼吸病中的應用。
文檔編號A61K38/00GK102459327SQ201080024545
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月5日
發(fā)明者A·索里爾尼拉齊尼, F·皮韋蒂, M·博基 申請人:奇斯藥制品公司