專利名稱：高山離子芥或其提取物用于制備防治肝臟疾病藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及高山離子芥或其提取物的制備和用途，高山離子芥或其提取物在制備防治肝臟疾病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
中國是肝病大國。近年來，隨著接種肝炎病毒預(yù)防性疫苗的普及，病毒性肝炎的發(fā)病率呈下降趨勢，而非感染性肝病如藥源性肝病、酒精性肝病、肝纖維化、脂肪肝等發(fā)病率日益上升，并呈現(xiàn)低齡化趨勢，嚴(yán)重威脅著全民的健康，防治肝病成為一個長久的課題(齊俊英.疑難性肝病診斷的思考[J]·中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2009，1 Κ4) :193-194)。高山冰緣植物系指一系列分布在高山植被帶以上，永久冰雪帶以下，能適應(yīng)冰雪嚴(yán)寒生境的寒旱生或寒冷中早生多年生軸根性雜類草以及墊狀植物，植株矮小，高5 10cm，呈蓮座狀，墊狀，植物體密被棉毛，根系發(fā)達(dá)(韓艷.高山離子芥鐵轉(zhuǎn)運蛋白基因編碼序列的克隆及其抗氧化作用的分析[D].蘭州蘭州大學(xué)，2008)。這類植物常年生長在強烈的日輻射、低溫、疾風(fēng)等惡劣環(huán)境中，有著極強的生命力，并造就其獨特的生理活性。藥理研究表明高山冰緣植物具有抗氧化、護肝、抗缺氧、抗腫瘤(寧鵬，張壽，楊太東，等.藏雪蓮水提取物對小白鼠抗氧化作用的研究[J].青海大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2009，27( :63-65 ； 陳艷軍，高旭珍，康巍，等.高山紅景天對大白鼠肝星狀細(xì)胞增殖分化的影響[J].肝臟， 2007,12(3) :193-194;陳玉滿，陳江，毛光明，等.高山紅景天的耐缺氧作用實驗研究[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，17(8) :1494-1496 ；Way TD, Lee JC, Kuo DH, et al. Inhibition of epidermal growth factorreceptor signaling by Saussurea involucrate, a rare traditional Chinese medicinal herb, in humanhormone-resistant prostate cancer PC-3 cells [J]· J Agric Food Chem，2010，58 (6) :3356-3365)等活性。高山離子芥(Chorispora Bungeana Fisch. And C. A. Mey.)是一種十字花科高山冰緣植物，生長于其它花類植物無法生長的冰緣地帶，整個生命周期受到低溫、強紫外輻射和低氧分壓的影響。Wu(ffu YL, Lian LH, Jiang YZ, et al. Hepatoprotective effects of salidroside on fulminanthepatic failure induced by D-galactosamine and lipopolysaccharide in mice[J], J Pharm Pharmacol,2009,61(10) :1375-1382)等指出高山冰緣植物可通過抗氧化發(fā)揮護肝作用，而高山離子芥已被驗證具有較強的抗氧化活性(Guo GX, Zhang MX, Chen Y, et al. Relation of several antioxidantenzymes to rapid freezing resistance in suspension cultured cells from alpine Chorispora bungeana[J]. Cryobiology，2006，52 (2) :241-250)，作為典型的高山冰緣植物，有可能在預(yù)防或緩解肝損傷方面有出色的表現(xiàn)。我們在此首次公開了高山離子芥或其提取物具有防治肝臟疾病作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了高山離子芥或其提取物作為肝臟疾病防治藥物的用途，可用于藥源性肝病、酒精性肝病、肝纖維化、脂肪肝等多種肝病的預(yù)防和治療。本發(fā)明提供了一種包含高山離子芥或其提取物及常規(guī)藥用載體的藥物組合物，其特征是所述藥物組合物是采用常規(guī)制劑工藝制備而成的口服或非口服途徑方式給藥的制劑。本發(fā)明提供了預(yù)防或治療肝臟疾病的方法，包括向肝病患者給予高山離子芥或其提取物或前面所述藥物組合物。本發(fā)明提供的高山離子芥或其提取物可以長期應(yīng)用，具有明顯的預(yù)防或改善肝損傷的功效，安全可靠。采用各種不同方法制備的高山離子芥提取物對本發(fā)明的用途沒有影響。
具體實施例方式肝病是指發(fā)生在肝臟的病變，包括但不限于肝炎、藥源性肝病、酒精性肝病、肝纖維化、脂肪肝、肝癌等，危害極大。藥源性肝病(drug-induced liver disease, DILD)是指由藥物或其代謝才產(chǎn)物引起的肝損傷，其表現(xiàn)可從無癥狀、非特異性的生化改變到急性肝炎、慢性肝炎、急性肝衰竭、膽汁淤積，甚至肝硬化、肝臟腫瘤、脂肪肝、肉芽腫等(付靜，李志軍.藥物性肝病的發(fā)病機制及治療新進展[J].天津醫(yī)藥，2009，37 ) :333-335)。酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)是指由于過量攝入酒精導(dǎo)致的肝臟損害及其一系列病變，可分為輕型酒精性肝病、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化等(徐正婕，陸倫根.酒精性肝病的流行病學(xué)和自然史[J].中國處方藥，2010，1 32-34)。肝纖維化(hepatic fibrosis)是指肝細(xì)胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生的病理過程，輕者稱為肝纖維化，重者進而使肝小葉結(jié)構(gòu)改建，假小葉及結(jié)節(jié)形成，稱為肝硬化(程君，楊云霞.黃芩苷對四氯化碳致亞急性肝纖維化小鼠的保護作用[J]·華西藥學(xué)雜志，2010，25(1) :32-33)。脂肪肝(fatty liver disease, FLD)是指多種因素所致的肝臟脂肪代謝障礙，脂類物質(zhì)的動態(tài)平衡失調(diào)，致使肝細(xì)胞內(nèi)脂肪蓄積過多， 肝臟發(fā)生彌漫性脂肪浸潤(脂肪變性)及一系列病理生理變化的一種臨床病理綜合征，按病理變化的進展可分為單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化、脂肪性肝硬化四個階段(萇新明，負(fù)建蔚.脂肪性肝病防治的研究進展[J].世界華人消化雜志，2009，17 (35) 3573-3578)。本發(fā)明提供了高山離子芥或其提取物在制備肝臟疾病防治藥物中的應(yīng)用，包括但不局限于藥源性肝病、酒精性肝病、肝纖維化、脂肪肝等肝臟疾病。高山離子芥植株可以于每年7 8月從海拔高度為3700 4000m的天山附近向陽礫石山坡上采集后，連同泥土一起在紙箱中運回實驗室，途中噴水保持濕潤。植株高約3 IOcm,被白色短柔毛，地下有粗的肉質(zhì)根，根端有直立的根狀莖，葉多數(shù)，基生，深裂到全裂， 葉片橢圓形，羽狀(阿依吐爾汗，譚敦炎，李志軍，等.高山離子芥營養(yǎng)器官的結(jié)構(gòu)與環(huán)境的關(guān)系研究[J].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1998，2K4) :273-277)。高山離子芥提取物可以通過以下方式制備(1)取新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材重量的4倍水浸泡約lh，熱煎煮，提取三次，每次1. ，過濾(用80目尼綸布)， 合并濾液，3000rpm離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥水提物。(2)取新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，烘干，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材重量的4倍水浸泡約lh，熱煎煮，提取三次，每次1. ，過濾(用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥水提物。(3)取新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡約lh，回流提取3次，每次lh，過濾(用 80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥醇提物。(4)取新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，烘干，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡約lh，回流提取3次，每次lh，過濾 (用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥醇提物。本發(fā)明所述的高山離子芥或其提取物可以根據(jù)臨床需要，加入相應(yīng)藥用載體，以片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、注射劑、霜劑、軟膏、凝膠劑、噴霧劑、口嚼劑或貼劑等制劑形式存在。本發(fā)明所述的高山離子芥或其提取物可根據(jù)臨床需要，采用口服或非口服方式用藥，優(yōu)選口服給藥方式。本發(fā)明所述的高山離子芥或其提取物制劑采用口服方式用藥時，人用劑量優(yōu)選 0.05-50g/人/日(相當(dāng)于生藥量)，其中更優(yōu)選為0.5-25g/人/日(相當(dāng)于生藥量)，最優(yōu)選為2. 5-5g/人/日(相當(dāng)于生藥量)。以下結(jié)合實驗例對本發(fā)明進行說明，但本發(fā)明并不受限于該實施例。實施例1高山離子芥提取物的制備每年7 8月從海拔高度為3700 4000m的天山附近向陽礫石山坡上采集高山離子芥植株，連同泥土一起在紙箱中運回實驗室，途中噴水保持濕潤。取80g新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材重量的4倍水浸泡約 lh，熱煎煮，提取三次，每次1. ，過濾(用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心lOmin， 取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得1. 7g高山離子芥水提物。實施例2高山離子芥提取物的制備每年7 8月從海拔高度為3700 4000m的天山附近向陽礫石山坡上采集高山離子芥植株，連同泥土一起在紙箱中運回實驗室，途中噴水保持濕潤。取80g新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，烘干，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材重量的4倍水浸泡約lh，熱煎煮，提取三次，每次1. ，過濾(用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心 lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得6. 9g高山離子芥水提物。實施例3高山離子芥提取物的制備每年7 8月從海拔高度為3700 4000m的天山附近向陽礫石山坡上采集高山離子芥植株，連同泥土一起在紙箱中運回實驗室，途中噴水保持濕潤。取80g新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材4倍重量的60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡約lh，回流提取3次，每次lh，過濾(用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm 離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得1. 9g高山離子芥醇提物。實施例4高山離子芥提取物的制備
每年7 8月從海拔高度為3700 4000m的天山附近向陽礫石山坡上采集高山離子芥植株，連同泥土一起在紙箱中運回實驗室，途中噴水保持濕潤。取80g新鮮高山離子芥全株，凈選除雜質(zhì)，烘干，使用粉碎機粉碎，置IOOOml圓底燒瓶中，加藥材4倍重量的 60% 80% (ν/ν)乙醇浸泡約lh，回流提取3次，每次lh，過濾(用80目尼綸布)，合并濾液，3000rpm離心lOmin，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得7. 3g高山離子芥醇提物。實施例5高山離子芥提取物對肝纖維化的影響1材料與方法1.1實驗動物SPF級昆明種小鼠，體重18 22g，雄性。購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司(許可證號SCXK(京)2007-001)，飼養(yǎng)于北京聯(lián)合大學(xué)應(yīng)用文理保健食品功能檢測中心實驗動物房。1. 2 試齊[J四氯化碳北京化工廠，石蠟油=Sigma公司；ALT、AST試劑盒南京建成生物研究所；透明質(zhì)酸(HA)、層粘蛋白(LN)肝纖維化ELISA試劑盒上海森雄科技實業(yè)有限公司。1. 3 儀器多功能酶標(biāo)儀=Sigma公司；TGL 16M離心機湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司 ’渦旋混合器金壇市醫(yī)療器械廠。2 方法2. 1造模及給藥小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，隨機分為模型組、正常組和高山離子芥提取物高、中、低劑量(5、2.5、1.258/1^，相當(dāng)于生藥量)組，每組10只。高山離子芥提取物組灌胃給予高山離子芥提取物，1次/d，連續(xù)40d，其他兩組給予等量蒸餾水。模型組和給藥組小鼠皮下注射10%四氯化碳石蠟油溶液(10ml/kg)，l次/周，連續(xù)40d。正常組小鼠則皮下注射等量石蠟油溶液。2. 2指標(biāo)測定第40d，小鼠禁食12h后，眼眶取血，3000rpm離心lOmin，分離血清，檢測血清中 ALT、AST、HA, LN 水平。2. 3數(shù)據(jù)處理實驗數(shù)據(jù)表示為Λ，采用SPSS13. O軟件，用單因素方差分析進行統(tǒng)計學(xué)處理，P <0. 05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。3 結(jié)果3. 1高山離子芥提取物對肝纖維化小鼠肝功能的影響表1中數(shù)據(jù)顯示，由四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠血清中ALT、AST明顯升高，與正常組比較，有顯著性差別，而高山離子芥提取物組血清中ALT和AST的水平明顯下降，且有一定的量效關(guān)系，表明高山離子芥提取物能有效地緩解四氯化碳引起的藥物性肝損傷。表1高山離子芥提取物對肝纖維化小鼠肝功能的影響( ± s )
權(quán)利要求
1.高山離子芥或其提取物用于制備防治肝臟疾病藥物的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是高山離子芥或其提取物用于制備預(yù)防或治療藥源性肝病的用途。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是高山離子芥或其提取物用于制備預(yù)防或治療酒精性肝病的用途。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是高山離子芥或其提取物用于制備預(yù)防或治療肝纖維化的用途。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是高山離子芥或其提取物用于制備預(yù)防或治療脂肪肝的用途。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是所述的高山離子芥提取物是高山離子芥水提物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征是所述的高山離子芥提取物是高山離子芥醇提物。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征是所述的高山離子芥水提物通過以下方式制備取高山離子芥全株或全株的一部分，使用粉碎機粉碎，加水浸泡，加熱煎煮，提取3次， 過濾，合并濾液，離心，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥水提物。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征是所述的高山離子芥醇提物通過以下方式制備取高山離子芥全株，使用粉碎機粉碎，加乙醇浸泡，回流提取3次，過濾，合并濾液，離心，取上清液濃縮，冷凍干燥成干浸膏即得高山離子芥醇提物。
10.一種藥物組合物，其特征是所述藥物組合物包含高山離子芥或高山離子芥提取物及常規(guī)藥用載體，采用常規(guī)制劑工藝制備而成的口服或非口服途徑方式給藥的制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了高山離子芥或其提取物的制備方法和用途。經(jīng)試驗證明，本發(fā)明中的高山離子芥或其提取物，對藥源性肝病、酒精性肝病、肝纖維化及脂肪肝等具有良好的預(yù)防和治療作用，因此，可以按照常規(guī)制劑方法制成任何一種包括片劑、膠囊劑、口服液、沖劑等成藥制劑，用于防治肝臟疾病。
文檔編號A61K36/31GK102232986SQ201010151888
公開日2011年11月9日 申請日期2010年4月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月21日
發(fā)明者劉婷, 向云, 孫雅煊, 安黎哲, 張華 , 李雅博, 李雨瑤, 盛紅梅, 陳書燕 申請人:中國科學(xué)院寒區(qū)旱區(qū)環(huán)境與工程研究所, 蘭州大學(xué)