一種高山繡線菊提取物的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高山繡線菊提取物的制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。其制備方法是以高山繡線菊為原料，用30%-75%乙醇提取，通過大孔吸附樹脂等純化得到?？膳c藥學(xué)上可接受的載體或其他適宜賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成口服給藥的劑型。
【專利說明】一種高山繡線菊提取物的制備方法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種中藥材提取物的制備方法，具體是涉及一種高山繡線菊提取物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]高山繡線菊為薔薇科植物高山繡線菊Spiraea alpina Turcz.的干燥花、葉?；ㄆ诓杉?，曬干。收載于1998年《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊(cè)》性涼，味甘。具有清骨熱，生津，止血，斂黃水之功效。用于治瘡瘍，黃水病，腹水，肺瘀血，子宮出血。為我國(guó)藏蒙等少數(shù)民族地區(qū)的常用藥物。但有關(guān)高山繡線菊的基礎(chǔ)研究尚十分有限，使該藥材的后續(xù)推廣和應(yīng)用受到限制?，F(xiàn)代研究表明，高山繡線菊含有生物堿類成分；高山繡線菊乙醇提取物對(duì)家蠶乙酰膽堿酯酶具有抑制作用，對(duì)純酶的IC5tl達(dá)到了 0.091X 10_3g ? mL—1，其他藥理作用研究未見報(bào)道。
[0003]國(guó)內(nèi)專利檢索結(jié)果，未見高山繡線菊相關(guān)專利。
[0004]上述文獻(xiàn)及專利等，尚未見高山繡線菊提取物制備方法的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種高山繡線菊提取物的制備方法。
[0006]本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
本發(fā)明所用原料高山繡線菊為薔薇 科植物高山繡線菊Spiraea alpina Turcz.的干燥花、葉。
[0007]—種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備:
(1)高山繡線菊，用濃度30%-75%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度50°C_95°C，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-4小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的6-15倍，濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，濾過，得藥液B ；
(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度30%-95%的乙醇溶液洗脫，收集不同濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；
(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度1%_5%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度60°C-80 °C,提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-3小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10-15倍，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取
1-4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ；
(4)上述高山繡線菊提取物A、高山繡線菊提取物B，其中一種或兩種按一定比例混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0008]優(yōu)選的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備:
(I)高山繡線菊，用濃度30%-75%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度50°C _95°C，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-4小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的6-15倍，濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，濾過，得藥液B ；(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度30%-95%的乙醇溶液洗脫，收集不同濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；
(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度1%_5%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度60°C-80 °C,提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-3小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10-15倍，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取
1-4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ；
(4)上述高山繡線菊提取物A和高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0009]優(yōu)選的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備:
(1)高山繡線菊，用濃度60%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度70°C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10倍；濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.12，濾過，得藥液B ;
(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過ADS-3大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度80%的乙醇溶液洗脫，收集80%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；
(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度2%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度70°C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的12倍；濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.16，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯， 濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ;
(4)上述高山繡線菊提取物A、高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0010]本發(fā)明的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于:所述的高山繡線菊提取物主要含有:繡線菊堿A (spiradine A)、繡線菊堿D(spiradine D)、阿替生(atisine)、繡線菊新堿IV (spirasine IV )、繡線菊新堿I (spirasine I )、繡線菊內(nèi)酯 B。
[0011]本發(fā)明的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于:所采用的大孔吸附樹脂為HP20大孔吸附樹脂、ADS-3大孔吸附樹脂、ADS-17大孔吸附樹脂。
[0012]本發(fā)明的高山繡線菊提取物，通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料，制成藥劑學(xué)上的片劑、顆粒劑、膠囊劑等口服劑型。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的一種高山繡線菊提取物的制備方法做進(jìn)一步說明，但不限于本發(fā)明。
[0014]下面通過具體實(shí)施例作進(jìn)一步詳述。
[0015]實(shí)施例1:高山繡線菊提取物的制備及單體成分研究
(1)高山繡線菊19kg，用濃度60%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度70°C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10倍，濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.12，濾過，得藥液B ;
(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過ADS-3大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度80%的乙醇溶液洗脫，收集80%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度2%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度700C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的12倍，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.16，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ;
(4)上述高山繡線菊提取物A、高山繡線菊提取物B，混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0016]高山繡線菊提取物進(jìn)行硅膠柱色譜、制備薄層色譜、以及S印hadex LH 一 20柱色譜，分別得到繡線菊堿A (spiradine A)、繡線菊堿D (spiradine D)、阿替生(atisine)、繡線菊新堿IV (spirasine IV)、繡線菊新堿I (spirasine I)、繡線菊內(nèi)酯B。以上各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)均經(jīng)質(zhì)譜和核磁共振等波譜手段確證，純度經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)均大于98%。
[0017]實(shí)施例2:高山繡線菊提取物的制備及單體成分研究
(1)高山繡線菊25kg，用濃度30%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度95°C，提取次數(shù)為I次，每次提取時(shí)間為4小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的15倍；濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.18，濾過，得藥液B ; (2)將步驟(1)得到的藥液B，通過HP20大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度30%的乙醇溶液洗脫，收集30%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；
(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度1%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度80°C，提取次數(shù)為3次，每次提取時(shí)間為I小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的15倍；濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.18，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取I次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ;
(4)上述高山繡線菊提取物A和高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0018]高山繡線菊提取物進(jìn)行硅膠柱色譜、制備薄層色譜、以及Sephadex LH 一 20柱色譜，分別得到繡線菊堿A (spiradine A)、繡線菊堿D (spiradine D)、阿替生(atisine)、繡線菊新堿IV (spirasine IV)、繡線菊新堿I (spirasine I)、繡線菊內(nèi)酯B。以上各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)均經(jīng)質(zhì)譜和核磁共振等波譜手段確證，純度經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)均大于98%。
[0019]實(shí)施例3:高山繡線菊提取物的制備及單體成分研究
(1)高山繡線菊20kg，用濃度75%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度50°C，提取次數(shù)為3次，每次提取時(shí)間為I小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的6倍；濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.10，濾過，得藥液B ;
(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過ADS-17大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度95%的乙醇溶液洗脫，收集95%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ；
(3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度5%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度60°C，提取次數(shù)為I次，每次提取時(shí)間為3小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10倍；濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.10，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ;
(4)上述高山繡線菊提取物A和高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
[0020]高山繡線菊提取物進(jìn)行硅膠柱色譜、制備薄層色譜、以及S印hadex LH 一 20柱色譜，分別得到繡線菊堿A (spiradine A)、繡線菊堿D (spiradine D)、阿替生(atisine)、繡線菊新堿IV (spirasine IV)、繡線菊新堿I (spirasine I)、繡線菊內(nèi)酯B。以上各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)均經(jīng)質(zhì)譜和核磁共振等波譜手段確證，純度經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)均大于98%。
[0021] 實(shí)施例4:高山繡線菊提取物的制備及單體成分研究
(1)高山繡線菊，用濃度55%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度75°C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為1.5小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10倍；濾過，得提取液A和藥渣A ；提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.14，濾過，得藥液B ;
(2)將步驟(1)得到的藥液B，通過ADS-3大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度75%的乙醇溶液洗脫，收集75%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物；
高山繡線菊提取物進(jìn)行硅膠柱色譜、制備薄層色譜、以及Sephadex LH — 20柱色譜，分別得到繡線菊堿A (spiradine A)、繡線菊堿D (spiradine D)、阿替生(atisine)、繡線菊新堿IV (spirasine IV)、繡線菊新堿I (spirasine I)、繡線菊內(nèi)酯B。以上各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)均經(jīng)質(zhì)譜和核磁共振等波譜手段確證，純度經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)均大于98%。
[0022]實(shí)施例5:高山繡線菊提取物片劑的制備
取上述各實(shí)施例中任一高山繡線菊提取物265g，加入60g淀粉，混勻，制粒，過篩，加15g微晶纖維素，0.5g硬脂酸鎂，混勻，壓制成1000片，即為本發(fā)明的高山繡線菊提取物片劑。
[0023]實(shí)施例6:高山繡線菊提取物顆粒劑的制備
取實(shí)施例1高山繡線菊提取物260g，加入糊精100g，混勻，制粒，干燥，整粒，即得高山繡線菊提取物顆粒劑。
[0024]實(shí)施例7:高山繡線菊提取物膠囊的制備
取實(shí)施例2高山繡線菊提取物245g，加入淀粉85g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊1000粒，即得高山繡線菊提取物膠囊。
[0025]實(shí)施例8:高山繡線菊提取物片劑的制備
取實(shí)施例4高山繡線菊提取物255g，加入淀粉85g，微晶纖維素15g，混勻，制粒，干燥，過篩，加入適量硬脂酸鎂，混勻，壓制成100片，即得高山繡線菊提取物片劑。
【權(quán)利要求】
1.一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備: (1)高山繡線菊，用濃度30%-75%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度50°C_95°C，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-4小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的6-15倍，濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，濾過，得藥液B ； (2)將步驟(1)得到的藥液B，通過大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度30%-95%的乙醇溶液洗脫，收集不同濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ； (3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度1%_5%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度60°C-80 °C,提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-3小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10-15倍，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取1-4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ； (4)上述高山繡線菊提取物A、高山繡線菊提取物B，其中一種或兩種按一定比例混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備: (1)高山繡線菊，用濃度30%-75%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度50°C_95°C，提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-4小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的6-15倍，濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液 A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，濾過，得藥液B ； (2)將步驟(1)得到的藥液B，通過大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度30%-95%的乙醇溶液洗脫，收集不同濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ； (3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度1%_5%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度60°C-80 °C,提取次數(shù)為1-3次，每次提取時(shí)間為1-3小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10-15倍，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.10-1.18，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取1-4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ； (4)上述高山繡線菊提取物A和高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于按以下步驟制備: (1)高山繡線菊，用濃度60%乙醇溶液作為溶劑，提取溫度70°C，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的10倍；濾過，得提取液A和藥渣A ;提取液A，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度d=l.12，濾過，得藥液B ; (2)將步驟(1)得到的藥液B，通過ADS-3大孔吸附樹脂，先用水洗脫，再用濃度80%的乙醇溶液洗脫，收集80%濃度乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得高山繡線菊提取物A ； (3)將步驟(1)得到的藥渣A，用濃度2%鹽酸溶液作為溶劑，提取溫度70V，提取次數(shù)為2次，每次提取時(shí)間為2小時(shí)，每次溶劑用量為高山繡線菊重量的12倍；濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度d=l.16，用氨水調(diào)PH9-10，用乙酸乙酯萃取4次，乙酸乙酯萃取液用水洗3次后，回收乙酸乙酯，濃縮，干燥，得高山繡線菊提取物B ; (4)上述高山繡線菊提取物A、高山繡線菊提取物B混勻，即得本發(fā)明的高山繡線菊提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、權(quán)利要求2、權(quán)利要求3所述的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于:所述的高山繡線菊提取物主要含有:繡線菊堿A、繡線菊堿D、阿替生、繡線菊新堿IV、繡線菊新堿1、繡線菊內(nèi)酯B。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、權(quán)利要求2所述的一種高山繡線菊提取物的制備方法，其特征在于:所采用的大孔吸附樹脂為HP20大孔吸附樹脂、ADS-3大孔吸附樹脂、ADS-17大孔吸附樹脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、權(quán)利要求2、權(quán)利要求3所述的高山繡線菊提取物，通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料，制成藥劑學(xué)上的片劑、顆粒劑、膠囊等口服劑型。
【文檔編號(hào)】A61K36/73GK103585311SQ201310525411
【公開日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】孔倩倩 申請(qǐng)人:濟(jì)南星懿醫(yī)藥技術(shù)有限公司