專(zhuān)利名稱(chēng)：制備穩(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液的組合物和方法
制備穩(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液的組合物和方法本發(fā)明總體涉及用于制備包含或不包含活性劑的穩(wěn)定、透明至半透明單層脂質(zhì)體混懸液的組合物和方法，用于美容、治療或診斷用途。背景脂質(zhì)體是閉合式、通常為球形的小泡，具有由磷脂雙層組成的膜，能夠?qū)⑺苄浴?親水分子包入其水性核心內(nèi)并將油溶性、疏水分子埋入雙層的疏水區(qū)。脂質(zhì)體通常是小顆粒，約25nm-1000nm之間，由多種磷脂組成，包括具有混合脂鏈的天然衍生的磷脂，如蛋磷脂酰乙醇胺，或者純組分如DOPE (dioleolylphosphatidylethanolamine)。通過(guò)提供使活性化合物沉積入皮膚固有層的載體機(jī)制，脂質(zhì)體廣泛用于局部藥物制劑。應(yīng)用該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括控制釋放、選擇性遞送、提高生物利用度和穩(wěn)定性，和增加所需活性劑的吸收。此外，脂質(zhì)體對(duì)皮膚具有強(qiáng)大的親和力和相容性，因?yàn)槠渑c內(nèi)部皮膚細(xì)胞周?chē)募?xì)胞外脂類(lèi)的化學(xué)相似性。脂質(zhì)體的脂雙層可與其它雙層如細(xì)胞膜融合，從而遞送脂質(zhì)體內(nèi)容物。脂質(zhì)體的商品化發(fā)展受穩(wěn)定性、澄清度差和貯存期短的困擾。脂質(zhì)體小泡容易融合一起或凝聚，特別是當(dāng)它們長(zhǎng)時(shí)間暴露于表面活性劑、溶劑、不良的PH條件、提高的溫度，或甚至水時(shí)。概述本文描述用于制備穩(wěn)定的透明至半透明脂質(zhì)體混懸液的組合物和方法。本發(fā)明的前提是發(fā)現(xiàn)可使脂質(zhì)體組分的具體組合分散在外相組合物中，以便脂質(zhì)體混懸液在包含或不包含活性劑的情況下在各種提高或降低的溫度下保持具有穩(wěn)定性的均勻大小顆粒的單峰分布至多一年或以上。具體來(lái)講，通過(guò)減小分散的脂質(zhì)體顆粒分布的平均直徑，使分散的脂質(zhì)體顆粒與外相組合物之間的密度差最小，增加外相組合物的粘度，在小泡的雙層膜中建立剛度，可提高脂質(zhì)體混懸液的穩(wěn)定性、澄清度和貯存期，不需要犧牲脂質(zhì)體顆粒的結(jié)構(gòu)完整性或生物活性?！矫妫€(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液包括懸浮于外相組合物中的脂質(zhì)體制劑，在 21 °C (攝氏度)和lOsec—1剪切速率下密度為約0. 95g/cc-約1. 25g/cc，粘度為約2. 5cP (厘泊)-約40，OOOcP0外相組合物的量占脂質(zhì)體混懸液重量約30 % -約75 %。脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為約1. 30-約1. 45，在約4°C -約50°C溫度下純凈形式顆粒均勻分布穩(wěn)定至少30天，或者在21°C穩(wěn)定至少180天，或者兩者均可。脂質(zhì)體混懸液包括大量平均粒度為約50nm-約290nm的單層脂質(zhì)體顆粒。脂質(zhì)體制劑用脂質(zhì)體水溶液形成，包括油溶性組合物和水溶性組合物。油溶性組合物的濃度為約5% -約33%脂質(zhì)體溶液重量，水溶性組合物的濃度為約67% -約95%脂質(zhì)體溶液重量。油溶性組合物包含偶合劑、至少一種磷脂、 至少一種剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體制劑用油溶性組合物形成，包括一種或多種卵磷脂制劑、丁二醇、神經(jīng)酰胺IIIB、β -谷留醇和生育酚。在此實(shí)施方案中，脂質(zhì)體混懸液包括濃度為約35% -約75%脂質(zhì)體混懸液的甘油。另一方面，制備穩(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液的方法包括(a)制備含有偶合劑、至少一種磷脂、剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑的油溶性組合物；(b)制備水溶性組合物；(c)將水溶性組合物與油溶性組合物合并以形成多層、多泡脂質(zhì)體制劑；(d)將多層、多泡脂質(zhì)體制劑轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體制劑；和(e)將單層脂質(zhì)體制劑加入在21°C和lOsec—1剪切速率下密度為約0. 95g/cc-約1. 25g/cc和粘度為約2. 5cP-約40，OOOcP的外相組合物內(nèi)以形成脂質(zhì)體混懸液，該混懸液包含大量各自平均粒度為約50nm-約^Onm的單層脂質(zhì)體顆粒，其中脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為1. 30-1. 45，在約4°C-約50°C以純凈形式顆粒均勻分布保持其穩(wěn)定性至少30天，或者在21°C保持至少180天，或兩者均可。又一方面，制備美容制劑的方法包括將本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液與適合美容的基體合并以形成采用霜?jiǎng)⑾磩?、凝膠、漿液、補(bǔ)劑、乳液、糊劑或噴霧劑形式的美容制劑。本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液的特征在于提高的穩(wěn)定性和生物活性譜，可用于多種美容、 治療或診斷應(yīng)用中的任何一種，其中使用脂質(zhì)體。此外，公開(kāi)的脂質(zhì)體混懸液的半透明性提供在美學(xué)觀點(diǎn)上超過(guò)現(xiàn)有技術(shù)使用的較不透明制劑的優(yōu)越外觀。附圖簡(jiǎn)述圖IA是用Zeiss-902透射式電子顯微鏡(TEM)放大30，000X采集的表2實(shí)施方案的脂質(zhì)體混懸液的電子顯微照片；圖IB和IC是放大180，000X的圖IA脂質(zhì)體混懸液的 TEM顯微照片。在圖IB和IC中用箭頭標(biāo)識(shí)例示性脂雙層。圖2是在19個(gè)月貯存期后

圖1A-1C描述的脂質(zhì)體制劑的另一個(gè)實(shí)施方案的粒度分析。圖 3 是用 Nanotrac N 150 Submicron Particle Size Analyzer 通過(guò)動(dòng)態(tài)激光散射在環(huán)境溫度條件下，在2. 5個(gè)月貯存期后，表4實(shí)施方案脂質(zhì)體混懸液的粒度分析。圖4是在環(huán)境溫度條件下，在2. 5個(gè)月貯存期后，表4實(shí)施方案脂質(zhì)體混懸液的粒度分析。圖5是在環(huán)境溫度條件下，在19個(gè)月貯存期后，表4實(shí)施方案脂質(zhì)體制劑的粒度分析。圖6是在環(huán)境溫度條件下，在2. 5個(gè)月貯存期后，表5脂質(zhì)體混懸液的粒度分析。圖7是在環(huán)境溫度條件下，在2. 5個(gè)月貯存期后，表6脂質(zhì)體混懸液的粒度分析。圖8是用kiss-902電子顯微鏡放大11，430 X采集的脂質(zhì)體霜?jiǎng)㏕EM顯微照片。 用箭頭標(biāo)識(shí)脂質(zhì)體。圖9是用kiss-902電子顯微鏡放大30，000X采集的脂質(zhì)體霜?jiǎng)㏕EM顯微照片。 用箭頭標(biāo)識(shí)脂質(zhì)體。詳述為了清楚和連貫地理解說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求，提供以下定義。術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體溶液”指在懸浮于外相組合物之前脂質(zhì)體顆粒或小泡在濃縮、水溶液中的制劑。術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體制劑”指脂質(zhì)體顆?；蛐∨莸闹苿?。脂質(zhì)體制劑可以是包含脂質(zhì)體顆粒在水溶液中的脂質(zhì)體溶液(例如在懸浮于外相組合物中之前)或者可以是用脂質(zhì)體溶液制備的凍干(冷凍干燥)脂質(zhì)體顆粒或小泡的制劑。術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體溶液”指在凍干或懸浮于外相組合物中之前包含脂質(zhì)體顆粒或小泡在水溶液中的脂質(zhì)體制劑。
術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體混懸液”指懸浮于外相組合物中的脂質(zhì)體制劑。術(shù)語(yǔ)“偶合劑”指適合使不同極性的不混溶相溶解和完成和保留脂質(zhì)體制劑或脂質(zhì)體混懸液穩(wěn)定性的連接介質(zhì)。術(shù)語(yǔ)“剛度增強(qiáng)劑”指當(dāng)包埋在脂雙層中時(shí)發(fā)揮減少脂肪酸鏈的移動(dòng)或流動(dòng)并促進(jìn)其包裝作用的神經(jīng)鞘脂、神經(jīng)酰胺或甾醇。除非另外說(shuō)明，在本公開(kāi)引用的所有比例和百分?jǐn)?shù)都是指重量。而且，在本專(zhuān)利各處引用的所有文獻(xiàn)、專(zhuān)利和公開(kāi)申請(qǐng)的內(nèi)容通過(guò)引用由此結(jié)合到本文中。一方面，本發(fā)明提供包括脂質(zhì)體制劑在內(nèi)的穩(wěn)定的半透明單層脂質(zhì)體混懸液，包含大量平均粒度為約50-約290nm的單層脂質(zhì)體顆粒，其中使脂質(zhì)體制劑懸浮于包含約 30% -約75%脂質(zhì)體混懸液重量的外相組合物中。外相組合物在21°C和lOsec—1剪切速率下密度為約0. 95g/cc-約1. 25g/cc,粘度為約2. 5cP-約40，OOOcP。脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為約1. 30-約1. 45，在約4°C -約50°C溫度下以純凈形式穩(wěn)定至少30天，或在21°C穩(wěn)定至少180天，或者兩者均可。脂質(zhì)體制劑和混懸液脂質(zhì)體制劑包括在脂質(zhì)體水溶液中的大量脂質(zhì)體顆?；蛐∨莼蛘邅?lái)自脂質(zhì)體溶液的大量?jī)龈?冷凍干燥)脂質(zhì)體顆粒。在脂質(zhì)體制劑中的脂質(zhì)體顆?；蛐∨菘梢允嵌鄬?、 多泡形式或者它們可以是基本單層形式。將脂質(zhì)體制劑加入外相組合物中以形成本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液，如下文進(jìn)一步描述。在脂質(zhì)體制劑中的脂質(zhì)體顆粒用由油溶性組合物和水溶性組合物組成的脂質(zhì)體水溶液形成。油溶性組合物油溶性組合物包括偶合劑、磷脂或磷脂混合物、剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑。在本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液中的油溶性組合物將通常包含大量正常存在于天然細(xì)胞膜中的脂類(lèi)，包括磷脂、神經(jīng)酰胺、神經(jīng)鞘脂、膽留醇和甘油三酯，或者其它脂類(lèi)如來(lái)自植物的植物留醇。油溶性組合物的濃度為約5% -約33%脂質(zhì)體水溶液重量，水溶性組合物的濃度為約67% -約 95%脂質(zhì)體水溶液重量。偶合劑在本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液中的油溶性組合物將包含至少一種偶合劑。偶合劑包括適合使不同極性的不混溶相溶解(例如暫時(shí)或優(yōu)先地)和保持脂質(zhì)體制劑或脂質(zhì)體混懸液穩(wěn)定性的連接介質(zhì)。偶合劑可具有在23°C介電常數(shù)為約10. 5或更大的特征，將其加入本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑或混懸液中以促進(jìn)優(yōu)先或“暫時(shí)”溶解和完成和保持脂質(zhì)體穩(wěn)定性。偶合劑例如乙二醇可以既包括烴也包括羥基部份，可將其分別用于例如同時(shí)溶解疏水或親水化合物。偶合劑允許在較高溫度下優(yōu)先溶解油相組分，包括磷脂和剛度增強(qiáng)劑，從而在脂質(zhì)體溶液中形成脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的過(guò)程中偶合劑移行入雙層膜組分內(nèi)，接著在冷卻后，由于其親水性而在環(huán)境溫度條件下移行返回水相內(nèi)。因此，偶合劑可具有“暫時(shí)增溶劑”的特征，在高溫下能夠溶解油溶性組分包括脂類(lèi)和非極性物質(zhì)，在較低、環(huán)境溫度下能夠溶解水溶性組分包括極性物質(zhì)(和在這些低溫條件下不能溶解脂類(lèi)或能力下降)。因此，偶合劑具有溫度依賴(lài)性“變化的”或暫時(shí)的功能，以促進(jìn)雙層膜形成，包括產(chǎn)生粗制的多層、多泡脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的液化形式的溫度相組合，所述多層結(jié)構(gòu)在高剪切條件下可有效地加工成單層結(jié)構(gòu)。低溫避免削弱活性物質(zhì)的生物活性和減小例如高剪切/高壓設(shè)備伴隨的過(guò)熱的作用。與偶合劑相反，可溶解雙類(lèi)脂膜的其它油溶性增溶劑，如乙醇，可削弱脂質(zhì)體穩(wěn)定性，當(dāng)加工脂質(zhì)體溶液通過(guò)高壓裝置包括微流化裝置時(shí)可產(chǎn)生爆炸危害。而且，在高于約 3%的濃度，乙醇可破壞膠體系統(tǒng)的密度平衡，降低外相的粘度，以致對(duì)膠體穩(wěn)定性產(chǎn)生負(fù)面影響和/或?qū)е履z凝劑結(jié)構(gòu)塌陷。申請(qǐng)人:已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)摻入偶合劑不僅促進(jìn)油溶性組分溶解，還可發(fā)揮穩(wěn)定性增強(qiáng)劑的功能，無(wú)論是否包含油溶性活性物質(zhì)。具體來(lái)講，申請(qǐng)人已發(fā)現(xiàn)缺乏偶合劑、但在其它組成方面相同的脂質(zhì)體混懸液沒(méi)有實(shí)現(xiàn)合適的穩(wěn)定性。照這樣，申請(qǐng)人相信在本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液中使用偶合劑在穩(wěn)定性方面不構(gòu)成公認(rèn)的、結(jié)果有效的變量。合適的偶合劑包括丁二醇、丙二醇、己二醇、聚乙二醇、硅酮二醇，如PEG-12 二甲基硅油，及其類(lèi)似物、衍生物和混合物。用于本發(fā)明的偶合劑總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約-約10%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體混懸液重量約3% -約8%。通常，偶合劑的濃度應(yīng)等于或超過(guò)磷脂在脂質(zhì)體溶液中的總濃度。使用10-15%的偶合劑濃度可允許活性成分的溶解稍大，特別是當(dāng)使用較高磷脂濃度(如1.5X)時(shí)。但是，據(jù)信高于10%的偶合劑濃度可導(dǎo)致相轉(zhuǎn)化，其中油相存在外連續(xù)區(qū)，從而妨礙脂質(zhì)體微囊化。在這些條件下，水被類(lèi)脂溶液以符合油包水乳液的形式排斥。這可在顯微鏡下看到，或者可通過(guò)由于水合氫離子屏蔽而不能精確測(cè)量PH而推斷?；蛘?，可使用濃度超過(guò)磷脂濃度的偶合劑，此時(shí)不僅需要溶解油相組分，還需要溶解水溶性組合物中的活性物質(zhì)。磷脂本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液中的油溶性組合物包含至少一種磷脂或磷脂混合物。例示性磷脂包括含有飽和和/或不飽和脂肪?；糠莸母视土字?，包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酸、N-酰基磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂和心磷脂；鞘磷脂；漿磷脂；其氫化、部份氫化或未氫化衍生物；其類(lèi)似物；及其混合物。當(dāng)通過(guò)磷脂酶A從磷脂(如溶血卵磷脂)上裂解?；鶗r(shí)獲得溶血磷脂。心磷脂如 1，3-雙磷脂酰甘油是由2個(gè)磷脂酸通過(guò)甘油連接組成的磷脂。鞘磷脂是一類(lèi)神經(jīng)鞘脂，通常由磷酰膽堿和神經(jīng)酰胺組成。漿磷脂是醚類(lèi)脂，其中甘油的第一個(gè)碳位具有醚連接烯烴， 第二個(gè)碳具有典型的酯連接脂肪酸，第三個(gè)碳通常具有磷脂頭基如膽堿或乙醇胺。例示性磷脂混合物包括卵磷脂，包括粗卵磷脂，其已被脫油、分餾、噴干、乙?；?、 水解、羥基化、氫化，和/或富集磷酯酰膽堿、磷脂酰肌醇或其組合。卵磷脂和卵磷脂混合物市售獲得。在一些實(shí)施方案中，可使用天然來(lái)源(大豆/蛋)的卵磷脂，如來(lái)自大豆的磷脂酰膽堿富集制劑。市售獲得的大豆/蛋卵磷脂制劑和磷脂濃縮物，包括以下列商品名銷(xiāo)售的制劑和 :Phospholipon 90G, Phospholipon 90H, Phospholipon 85G, Phospholipon
80H, Phospholipon 80，Phosal 50 PG, Phosal 50 SA, Phosal 53 MCT，和 Phosal 75SA, ￠1 i| American Lecithin Company, Oxford Conn. ；Lipoid S75, Lipoid S100, Lipoid SPC，和 Lipoid SL80，購(gòu)自 Lipoid GmbH, Ludwigshafen Germany ；Epikuron 125F, Epikuron 135F, Epikuron 130P, Epikuron 130G, Epikuron 100H，Epikuron 145V,Epikuron 170,Epikuron 200 SH,Epikuron 200，Emulmetik 950，Emulmetik 900 和 Emulmetik 300，Emulfluid F30(Emulfluid, Lipotin Nebr.), Lipotin 100，Lipotin SB，Lipotin 100J，Lipotin H，Lipotin NA，Lipotin AH，和 Lipopur ，購(gòu)自 Degussa Texturant Systems UK Ltd. ；Terradrill V 408 禾口 Terradrill V 1075， 購(gòu)自 Cognis ;Yellowthin 100, Yellowthin 200, Lecistar Sun 100，和 Yellowthin Sun 200，購(gòu)自 Sternchemie ；Lecinol S-IO (氫化卵磷脂)，購(gòu)自 Barnett Industries ； Lipo H(由20%磷脂酰膽堿組成的氫化大豆卵磷脂)，購(gòu)自L(fǎng)ucas Meyer Cosmetics, South Plainfield, NJ ；禾口 Lanchem PE—130K，購(gòu)自 Lambent Technologies, Gurnee, III。在凍干或加入外相組合物之前，用于本發(fā)明的磷脂總量可占脂質(zhì)體水溶液重量約 -約10%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體水溶液重量約3% -約8%。此外，脂質(zhì)體水溶液將優(yōu)選包含
約3 1-9 1的水類(lèi)脂比。在一個(gè)實(shí)施方案中，油溶性組合物包括包含至少60%混合物重量、至少70%重量、至少80%重量、至少85%重量或至少90%混合物重量的磷脂酰膽堿的磷脂制劑或混合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，油溶性組合物包括含有磷脂酰膽堿濃度為約80% -約95%磷脂混合物重量的磷脂混合物。另外，上述磷脂混合物可包含約-約10%脂質(zhì)體混懸液重量，優(yōu)選約3% -約8%脂質(zhì)體混懸液重量。據(jù)信使用高于15%濃度的磷脂將導(dǎo)致相轉(zhuǎn)化， 產(chǎn)生油包水乳液而不是包囊脂質(zhì)體。剛度增強(qiáng)劑本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液中的油溶性組合物將包含至少一種剛度增強(qiáng)劑。剛度增強(qiáng)劑包括至少一種神經(jīng)鞘脂、神經(jīng)酰胺、留醇，或其組合，當(dāng)包埋在脂雙層中時(shí)其發(fā)揮作用以減少脂肪酸鏈的移動(dòng)或流動(dòng)性和促進(jìn)脂雙層的包裝。增加的剛度可減少小泡的破裂和滲漏， 可改變膜的zeta電位或電荷以抑制顆粒之間吸引。據(jù)信剛度增強(qiáng)劑幫助穩(wěn)定脂質(zhì)體顆粒中的電荷或zeta電位。神經(jīng)鞘脂代表參與維持皮膚屏障功能的關(guān)鍵表皮脂類(lèi)。神經(jīng)鞘脂，如鞘氨醇、二氫鞘氨醇、鞘磷脂和植物鞘氨醇，通常包含長(zhǎng)鞘氨基醇?jí)A作為中央基團(tuán)或“主鏈”，包括酰胺連接的長(zhǎng)鏈脂肪酸和頭基。有幾百種已知類(lèi)別的具有不同頭基(如磷酸膽堿、葡萄糖、半乳糖、多糖)和具有不同脂肪酸和鞘氨基醇?jí)A的神經(jīng)鞘脂。植物鞘氨醇是神經(jīng)酰胺前體，集中在健康角質(zhì)層內(nèi)，由皮膚中的酶轉(zhuǎn)化為神經(jīng)鞘脂。神經(jīng)酰胺構(gòu)成神經(jīng)鞘脂家族，非常難溶解和難配制。外源性給予的神經(jīng)酰胺必須能夠滲透角質(zhì)層以到達(dá)滲透性屏障的類(lèi)脂片層。據(jù)信干性皮膚的原因之一是細(xì)胞間類(lèi)脂片層內(nèi)的神經(jīng)酰胺量減少。因此用本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液通過(guò)局部給予成功地代替這些衰竭的類(lèi)脂是理想的。本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液提供遞送神經(jīng)酰胺的有用方法。神經(jīng)酰胺可以是天然存在的神經(jīng)酰胺、合成神經(jīng)酰胺、糖基神經(jīng)酰胺，或其衍生物。天然存在的神經(jīng)酰胺可來(lái)自動(dòng)物、植物或微生物。皮膚中的神經(jīng)酰胺主要由6種層析分離的流分或家族組成，分為1、11、111、1￥、￥、￥1&和￥113(或1、2、3、4、5、6&和613)型。合成 (或雜合)神經(jīng)酰胺是神經(jīng)酰胺樣神經(jīng)鞘脂，其中N-?；c天然存在的神經(jīng)酰胺中發(fā)現(xiàn)的不同。神經(jīng)酰胺可通過(guò)例如飽和度和鏈長(zhǎng)相互區(qū)分。神經(jīng)酰胺衍生物包括例如用一種或多種飽和或不飽和脂肪酸衍生的那些衍生物，或者通過(guò)磷酸化或硫酸化改性的那些衍生物。3型神經(jīng)酰胺構(gòu)成不同分子的混合物，所述分子具有以通用名N-乙酰植物鞘氨醇為特征的植物鞘氨醇主鏈，其中?；秋柡偷?，具有14-30個(gè)碳的鏈長(zhǎng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，神經(jīng)酰胺可以是用單不飽和脂肪酸衍生的神經(jīng)酰胺或植物鞘氨醇，如N-油?；参锴拾贝?神經(jīng)酰胺3B)。其它神經(jīng)酰胺公開(kāi)于授予Lambers等的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，693，677和 6，001，375，其公開(kāi)通過(guò)引用結(jié)合到本文中。用于本發(fā)明的神經(jīng)酰胺總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01% -約1. 00%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 025% -約0. 20%。用于本發(fā)明的留醇代表其它類(lèi)別的剛度增強(qiáng)劑，包括膽留醇、植物留醇和有機(jī)酸衍生物，和/或其鹽形式。植物留醇是攜帶留醇骨架的植物衍生的類(lèi)脂。植物留醇可同步化皮膚表皮細(xì)胞的代謝循環(huán)，可提高具有雙層膜結(jié)構(gòu)的隔膜在脂質(zhì)體或其它膜結(jié)構(gòu)中的強(qiáng)度。本發(fā)明可利用任何一種植物留醇類(lèi)別的成員，包括4-去甲基留醇、4-單甲基甾醇和4，4_ 二甲基留醇。例示性植物留醇包括谷留醇、谷留醇、豆留醇、菜油甾醇、 chalinosterol、穿貝海綿甾醇、菜籽甾醇、α-菠菜甾醇、Δ 5_燕麥甾醇、羽扇豆醇、胡蘿卜苷、鏈留醇和多孔甾醇。留醇的非限制性實(shí)例另外包括膽留醇，有機(jī)酸衍生的膽留醇如半琥珀酸膽甾醇， 植物留醇，沒(méi)藥醇，留體類(lèi)激素如氫化可的松，以及留醇脂族酸酯如硫酸膽留醇、丁酸膽甾醇、異丁酸膽留醇、棕櫚酸膽留醇、硬脂酸膽留醇、乙酸羊毛留醇、棕櫚酸麥角留醇和正丁酸植物留醇；和糖酯的留醇酯，如葡糖苷酸膽留醇、葡糖苷酸羊毛留醇、7-脫氫葡糖苷酸膽甾醇、葡糖苷酸麥角留醇和葡糖酸膽甾醇。用于本發(fā)明的甾醇總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01% -約1. 00%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 025% -約0. 20%。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體混懸液包含至少2種剛度增強(qiáng)劑，包括至少一種植物甾醇和神經(jīng)酰胺或鞘氨醇。在優(yōu)選實(shí)施方案中，脂質(zhì)體混懸液包含神經(jīng)酰胺IIIB和β-谷甾醇。用于本發(fā)明的剛度增強(qiáng)劑總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 02% -約1. 00%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 05% -約0. 40%。申請(qǐng)人:已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)使用剛度增強(qiáng)劑與脂質(zhì)體穩(wěn)定性之間的關(guān)系。更具體來(lái)講，申請(qǐng)人已發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體的穩(wěn)定性取決于摻入相當(dāng)窄濃度范圍的剛度增強(qiáng)劑。具體來(lái)講，發(fā)現(xiàn)摻入超過(guò)1.0%水平或與磷脂的重量比超過(guò)1 4的剛度增強(qiáng)劑可使微結(jié)構(gòu)的形態(tài)變?yōu)閷悠?，與球形脂質(zhì)體小泡相反。例如，放大100-400Χ的顯微鏡檢查已證實(shí)使用大于25%磷脂水平的剛度增強(qiáng)劑時(shí)產(chǎn)生層片，老化后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為可用肉眼觀察的大針狀結(jié)構(gòu)。抗氧化劑根據(jù)本發(fā)明，將至少一種抗氧化劑包埋在脂質(zhì)體中?？蓪⒖寡趸瘎├绨裨谥|(zhì)體的磷脂雙層中，在脂質(zhì)體的含水中心內(nèi)，或兩者均可。抗氧化劑可發(fā)揮保護(hù)脂質(zhì)體免受因脂質(zhì)體含水中心或脂質(zhì)體外活性氧中間體(R0Q引起的氧化損傷或降解的功能。事實(shí)上，在細(xì)胞中抗氧化劑的一種主要作用是防止因ROS作用引起的損傷。活性氧中間體包括過(guò)氧化氫(H2O2)、超氧化物負(fù)離子(O2-)，和游離基如羥基(0Η—)。這些分子不穩(wěn)定和高度反應(yīng)性，可通過(guò)化學(xué)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)如脂質(zhì)過(guò)氧化損傷細(xì)胞?？捎枚喾N不同方式將抗氧化劑摻入本發(fā)明的脂質(zhì)體內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施例中，可將脂溶性抗氧化劑直接埋入脂質(zhì)體的脂雙層內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施例中，可將水溶性抗氧化劑包在脂質(zhì)體的含水中心內(nèi)。在又一個(gè)實(shí)施例中，可將脂溶性抗氧化劑埋在脂雙層中和將水溶性抗氧化劑包在脂雙層的含水中心內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施例中，抗氧化劑可以是單態(tài)氧清除劑。在另一個(gè)實(shí)施例中，抗氧化劑可以既是水溶性也是單態(tài)氧清除劑，或者既是脂溶性也是單態(tài)氧清除劑。在又一個(gè)實(shí)施例中，可將不止一種抗氧化劑埋在本發(fā)明的脂質(zhì)體中。生育酚(即維生素E)和抗壞血酸(即維生素C)是可包埋在本發(fā)明脂質(zhì)體中的抗氧化劑實(shí)例。合適的生育酚抗氧化劑包括生育酚；母育酚的單甲基、二甲基或三乙基衍生物，包括但不限于α生育酚、β生育酚、Y生育酚、δ生育酚、ε生育酚、ζ生育酚和η 生育酚；生育酚酯，及其衍生物，包括乙酸生育酚酯、琥珀酸生育酚酯、苯甲酸生育酚酯、丙酸生育酚酯、山梨酸生育酚酯、油酸生育酚酯、乳清酸生育酚酯、亞油酸生育酚酯、煙酸生育酚酯和2-乙基-己酸酯。除了其抗氧化劑功能之外，另外已知抗壞血酸(維生素C)及其衍生物可促進(jìn)膠原合成。用于本發(fā)明的抗壞血酸衍生物包括所有對(duì)映體，無(wú)論是單種或組合。優(yōu)選提供左旋形式的抗壞血酸。此外，抗壞血酸及其衍生物可采用水溶性或油溶性形式。維生素C (抗壞血酸)衍生物的非除外性實(shí)例包括例如L-抗壞血酸的烷基酯，其中烷基段具有8-20個(gè)碳原子。關(guān)于酯，它們可選自抗壞血酸的脂肪酸單_、二-、三-或四-酯。例如，此類(lèi)酯包括但不限于棕櫚酸抗壞血酸酯、月桂酸抗壞血酸酯、肉豆蔻酸抗壞血酸酯、硬脂酸抗壞血酸酯、二棕櫚酸抗壞血酸酯、二月桂酸抗壞血酸酯、二肉豆蔻酸抗壞血酸酯、二硬脂酸抗壞血酸酯、三棕櫚酸抗壞血酸酯、三月桂酸抗壞血酸酯、三肉豆蔻酸抗壞血酸酯、三硬脂酸抗壞血酸酯、抗壞血酸四己基癸基酯、四月桂酸抗壞血酸酯、四肉豆蔻酸抗壞血酸酯、四硬脂酸抗壞血酸酯、L-抗壞血酸棕櫚酸酯、L-抗壞血酸異棕櫚酸酯、L-抗壞血酸二棕櫚酸酯、L-抗壞血酸異硬脂酸酯、L-抗壞血酸二硬脂酸酯、L-抗壞血酸二異硬脂酸酯、L-抗壞血酸肉豆蔻酸酯、L-抗壞血酸異肉豆蔻酸酯、L-抗壞血酸2-乙基己酸酯、 L-抗壞血酸二 -2-乙基己酸酯、L-抗壞血酸油酸酯和L-抗壞血酸二油酸酯、抗壞血酸四己基癸基酯；L-抗壞血酸的磷酸酯如L-抗壞血酸-2-磷酸酯和L-抗壞血酸-3-磷酸酯； L-抗壞血酸的硫酸酯如L-抗壞血酸-2-硫酸酯和L-抗壞血酸-3-硫酸酯；其與堿土金屬如鈣和鎂的鹽。關(guān)于鹽，它們可選自磷酸鹽和硫酸鹽，優(yōu)選磷酸鹽?？箟难崃姿猁}通常選自 L-抗壞血酸3-磷酸鹽、L-抗壞血酸2-磷酸鹽、L-抗壞血酸3-焦磷酸鹽和雙(L-抗壞血酸3，3_)磷酸鹽。優(yōu)選抗壞血酸磷酸鹽是鎂或鈉抗壞血酸磷酸鹽；更優(yōu)選抗壞血酸磷酸鎂。 同樣，抗壞血酸硫酸鹽通常選自L(fǎng)-抗壞血酸3-硫酸鹽、L-抗壞血酸2-硫酸鹽、L-抗壞血酸3-焦硫酸鹽和雙(L-抗壞血酸3，3-)硫酸鹽。 其它抗氧化劑包括抗壞血酸四己基癸基酯、丁羥甲苯(BHT)、丁羥茴醚、龍膽酸甲酯、L-肌肽、叔丁基氫醌(TBHQ)、谷胱甘肽，包括其衍生物、組合和混合物。在一個(gè)實(shí)施例中，鑒于水溶性L(fǎng)-肌肽能夠保護(hù)脂質(zhì)體免受經(jīng)過(guò)其含水中心的氧化損傷，可將其摻入脂質(zhì)體的含水中心作為抗氧化劑使用。用于本發(fā)明的抗氧化劑總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01% -約1. 00%，更優(yōu)選占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 025% -約0. 50%。水溶性組合物水溶性組合物將主要由水組成，包含或不包含負(fù)載的活性(水溶性)劑，這在下文進(jìn)一步描述。通常，水溶性組合物將占脂質(zhì)體混懸液重量約10% -約65%或占脂質(zhì)體制劑重量約67% -約95%。外相組合物脂質(zhì)體混懸液中的脂質(zhì)體顆粒被包含水溶液的外組合物包圍，包括一種或多種粘度促進(jìn)劑，共同有效地促使外相組合物在21°C和lOsec—1剪切速率下具備約0. 95g/cc-約 1. 25g/cc的密度和/或通常為約2. 5cP-約40，OOOcP的粘度。一種或多種粘度促進(jìn)劑可包括一種或多種增稠劑、膠凝劑，或兩者均有。在優(yōu)選實(shí)施方案中外相組合物在21°C和 IOsec-1剪切速率下具有粘度為約800cP-20，OOOcP0或者，當(dāng)使用更高膠凝劑濃度時(shí)，在 21°C和lOsec—1剪切速率下外相粘度可上升至約60，000-80, OOOcP，但澄清度下降。外相組合物通常包含接近與分散其中的脂質(zhì)體顆粒匹配的密度，以充分促進(jìn)脂質(zhì)體顆粒穩(wěn)定性和減少脂質(zhì)體顆粒移行、絮凝或凝聚的量摻入本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液內(nèi)。外相組合物包含一種或多種粘度促進(jìn)劑，包括增稠劑、致密劑、膠凝劑、樹(shù)膠，及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它粘度促進(jìn)劑?？筛鶕?jù)經(jīng)驗(yàn)選擇用于本發(fā)明的粘度促進(jìn)劑以增加本文脂質(zhì)體制劑的粘度和提高穩(wěn)定性。優(yōu)選選擇這些試劑以保護(hù)脂質(zhì)體混懸液的半透明或透明性。而且，可通過(guò)用選擇的試劑調(diào)節(jié)組合物以根據(jù)需要對(duì)粘度或密度提供比較大的影響。例示性粘度促進(jìn)劑包括甘油；纖維素，包括羥乙基_、羥丙基_、羥甲基_、羥丙基甲基纖維素，及其衍生物，包括商品名為Natrosol 、Methocel 和Bermocoll 的各種纖維素；光非離子型乳液；和聚山梨酯。例示性膠凝劑和/或增稠劑包括膠基體劑，包括黃原膠，和丙烯酸酯聚合物，包括與聚烯基聚醚或二乙烯二醇交聯(lián)的丙烯酸高分子量同-和共聚物，商品名為 Carbopol ，包括 Carbopol 934、940、941、980、981、1342、1382、2020、2050，和商品名為Simulgel 的各種丙烯酸羥乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸酯共聚物。外相組合物可具有牛頓或非牛頓流動(dòng)特征。在一個(gè)實(shí)施方案中，一種或多種粘度促進(jìn)劑包括具有牛頓流動(dòng)特征的水溶液，如甘油。包括甘油在內(nèi)的牛頓流體的粘度獨(dú)立于施加于流體的指定轉(zhuǎn)速下的剪切速率。包含牛頓流動(dòng)特征的外相組合物可具有約 500cP-約 10，OOOcP 或者約 800cP-約 2，OOOcP 的粘度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，一種或多種粘度促進(jìn)劑可包括濃度為約0. 10% -約1. 0% 的一種或多種試劑，如聚合膠凝劑，提供非牛頓流動(dòng)特征。非牛頓流體包括例如聚合膠凝劑或增稠劑，表現(xiàn)作為剪切速率函數(shù)的比濃粘度。但是，與牛頓流體如甘油相比，聚合膠凝劑可在低濃度提供非牛頓流動(dòng)特征，可提供受溫度影響較小的表觀粘度?？筛鶕?jù)剪切和時(shí)間依賴(lài)性將非牛頓流體的粘度分級(jí)。因此，非牛頓流體可以剪切稀化和剪切稠化。而且，表觀粘度的下降可以呈時(shí)間獨(dú)立性(假塑性)或時(shí)間依賴(lài)性(觸變性)。在優(yōu)選非牛頓實(shí)施方案中，流體具有Carbopol 聚合物的假塑性剪切稀化性特征。在lOsec—1的相對(duì)低剪切速率下，在21°C含有賦予非牛頓流動(dòng)特征的膠凝劑或增稠劑的外相組合物的粘度可為約500cP-約80，OOOcP,約800cP_40，OOOcP,或者約 2，000cP-20, OOOcP0在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)使用膠凝劑如Carbopol 聚合物時(shí)，外相組合物在21°C的粘度在0. IsecT1為約觀4，OOOcP,在IsecT1為約60，OOOcP，在lOsec—1為約 11，200cP，在ZOsec—1為約6，852cP。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)使用增稠劑如黃原膠時(shí)，外相組合物在21°C的粘度在0. Isec-1為約110，OOOcP，在IsecT1為約18，670cP，在IOsec"1為約 2，341cP，在 ZOsecT1 為約 1，272cP。
可用合適的粘度計(jì)測(cè)量粘度，包括Brookfield Syncho-Lectric Model RVT Viscometer、Haake Rotovisco Model RV-12 Viscometer 或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知用于根據(jù) ASTM D1084-88、ASTM D1824-87.D2196-86及其它與粘度測(cè)量有關(guān)的ASTM方案在指定轉(zhuǎn)速和低剪切速率下測(cè)量牛頓流體的粘度或非牛頓物質(zhì)的表觀粘度的其它合適粘度計(jì)(或電流計(jì)如 TA Instruments AR-1000N)。在形成脂質(zhì)體混懸液時(shí)，可將外相組合物加入含脂質(zhì)體顆粒的脂質(zhì)體溶液中，或者可將其加入用脂質(zhì)體溶液制備的脂質(zhì)體顆粒凍干(冷凍干燥)制劑中。根據(jù)理論上的截留體積數(shù)據(jù)，脂質(zhì)體顆粒相對(duì)于脂質(zhì)體混懸液的重量百分?jǐn)?shù)可為約0. 96% -約重量。當(dāng)加入脂質(zhì)體溶液時(shí)，外相組合物的量可占脂質(zhì)體混懸液重量約30% -約75%， 占脂質(zhì)體混懸液重量約55 % -約70 %，占脂質(zhì)體混懸液重量約65 % -約70 %，或者占脂質(zhì)體混懸液重量約65%。另外，脂質(zhì)體溶液與外相組合物的重量比可為約0. 002-約0. 54。在優(yōu)選實(shí)施方案中，當(dāng)加入到脂質(zhì)體溶液時(shí)，脂質(zhì)體混懸液包含約35% -約75%甘油，更優(yōu)選約50% -約65%甘油。當(dāng)膠凝劑，包括中和的Carbopol 用于外相中時(shí)，膠凝劑的水平不應(yīng)超過(guò)約1. 0%脂質(zhì)體混懸液，否則在脂質(zhì)體混懸液中視覺(jué)澄清度/透明度/半透明度可能下降。通常，應(yīng)在制備M小時(shí)內(nèi)用外相組合物稀釋脂質(zhì)體制劑以減小不穩(wěn)定性。脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)可為約1. 3-約1. 45。例如，在外相組合物中含有牛頓流體如甘油的脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)可通常為約1. 40-約1. 45，當(dāng)使用非牛頓流體用樹(shù)膠或膠凝劑時(shí)可通常為約1. 35-約1. 40，包括黃原膠混合物的屈光指數(shù)為約1. 39-約1. 40， 包含聚合Carbopols 的外相組合物為約1. 37。外相組合物可進(jìn)一步包含一種或多種防腐劑、pH調(diào)節(jié)劑、和/或水。防腐劑的非限制性實(shí)例包括苯氧乙醇、氯苯甘醚、甲基異噻唑啉酮、丙二醇、芐醇、乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯和對(duì)羥基苯甲酸異丁酯。商業(yè)上合適的防腐劑制劑包括以商品名Microcare MTC(丙二醇、氯苯甘醚和甲基異噻唑啉酮)和Wienonip XB(苯氧乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯)銷(xiāo)售的那些制劑。例示性PH調(diào)節(jié)劑包括L-精氨酸和三乙醇胺。申請(qǐng)人:已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)常規(guī)防腐劑，包括螯合劑如EDTA 二鈉，可對(duì)上述脂質(zhì)體混懸液的穩(wěn)定性產(chǎn)生負(fù)面影響，以及苯甲酸鈉和各種酸，包括檸檬酸、山梨酸、苯甲酸和異丙基甲酚，在濃度大于0.01%時(shí)可使脂質(zhì)體小泡破裂。通過(guò)在將檸檬酸加入上述脂質(zhì)體溶液的同時(shí)發(fā)生視覺(jué)不透明性證實(shí)雙層/小泡破裂的現(xiàn)象(接著膠體系統(tǒng)失去穩(wěn)定性)。而且， 申請(qǐng)人:已發(fā)現(xiàn)對(duì)羥基苯甲酸酯防腐劑因?yàn)榉峙淙胗拖鄡?nèi)容易移行至雙脂膜，對(duì)穩(wěn)定性產(chǎn)生負(fù)面影響。此外，已發(fā)現(xiàn)在老化后對(duì)羥基苯甲酸酯導(dǎo)致脂質(zhì)體粒度總體增加。申請(qǐng)人已進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)當(dāng)除去水相組合物中的L-精氨酸時(shí)可削弱本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。優(yōu)選用于本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液的防腐劑不含EDTA、苯甲酸鈉、檸檬酸、山梨酸、苯甲酸和異丙基甲酚。在優(yōu)選實(shí)施方案中，脂質(zhì)體混懸液還不含對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)。用于本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液的優(yōu)選防腐劑包括單獨(dú)的苯氧乙醇、單獨(dú)的甲基異噻唑啉酮、單獨(dú)的氯苯甘醚、氯苯甘醚與甲基異噻唑啉酮組合，或者氯苯甘醚與甲基異噻唑啉酮和苯氧乙醇組合。防腐劑的量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01 % -約5. 00 %，約0. 01 % -約 2. 00%，或者占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01% -約0. 30%。L-精氨酸或乙醇胺的量可為約 0. 001% -約 0. 10%，優(yōu)選約 0. 001% -約 0.010%。
活性劑本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液可進(jìn)一步包含一種或多種活性劑(或“活性物質(zhì)”)包埋入本發(fā)明的脂質(zhì)體顆粒內(nèi)?；钚詣┛砂ū绢I(lǐng)域已知用于美容、治療或診斷用途的任何活性劑?；钚晕镔|(zhì)的性質(zhì)可以疏水(即油溶性)或親水(即水溶性)。水溶性活性物質(zhì)可通過(guò) “被動(dòng)負(fù)載”在脂質(zhì)體制劑加工的過(guò)程中包埋。這可通過(guò)使親水活性物質(zhì)預(yù)先溶解在用于干脂水合的緩沖液中完成。然后可通過(guò)透析空白緩沖液或者通過(guò)使分散體穿過(guò)S印hadex 凝膠柱除去任何未包埋分子。對(duì)于大多數(shù)美容和個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品，除去未包埋分子并非關(guān)鍵，因?yàn)檫M(jìn)行這樣的加工需要高成本，并且在它們的常用水平下美容分子無(wú)毒性。與截留在脂質(zhì)體核心內(nèi)的親水性活性物質(zhì)相反，疏水化合物通常截留在脂雙層的疏水區(qū)。這種截留類(lèi)型涉及一種分配形式，其中疏水化合物與類(lèi)脂一起溶于合適的增溶劑中。例如，如果化合物可溶于丁二醇、乙氧基二醇、乙醇、甲醇、氯仿、甲苯、醚、丙二醇、聚乙二醇包括聚乙二醇200和聚乙二醇300，或者中鏈甘油三酯中，它可與類(lèi)脂一起溶于溶劑中。雖然其它溶劑如乙醇和甲醇可用于溶解類(lèi)脂和油溶性活性物質(zhì)，應(yīng)在加入外相組合物之前將其通過(guò)提取除去。申請(qǐng)人已發(fā)現(xiàn)，例如濃度高于3%的溶劑如乙醇、甲醇、氯仿、甲苯或醚可導(dǎo)致凝膠塌陷，密度平衡破壞，或外相的粘度下降，從而降低脂質(zhì)體混懸液的穩(wěn)定性。例如，可將多種皮膚保濕劑、屏障增強(qiáng)劑、必需脂肪酸和維生素包埋入本發(fā)明的脂質(zhì)體內(nèi)或與其聯(lián)合。這些成分通過(guò)防止和逆轉(zhuǎn)對(duì)其的損傷幫助保濕和進(jìn)一步支持皮膚的屏障功能。例示性皮膚保濕劑包括甘油、透明質(zhì)酸鈉、泛醇和氨基酸。屏障增強(qiáng)劑包括各種皮膚類(lèi)脂，幫助支持和維持健康的皮膚屏障功能。皮膚屏障功能的特征在于皮膚中不可滲透水的屏障，或者更具體來(lái)講是角質(zhì)層保留水的功能。在角質(zhì)層細(xì)胞間隙中的脂片層結(jié)構(gòu)被視為負(fù)責(zé)角質(zhì)層保留水的特性。有助于維持屏障功能的例示性皮膚類(lèi)脂包括包含在上述脂質(zhì)體油相組合物中的上述類(lèi)脂，包括磷脂、神經(jīng)鞘脂、膽留醇和植物留醇，可用于補(bǔ)充與維持和提高皮膚屏障功能有關(guān)的關(guān)鍵性角質(zhì)層類(lèi)脂。其他屏障增強(qiáng)劑包括水解大豆蛋白和大豆蛋白提取物。已知大豆蛋白提取物可抑制酶(即彈性酶)的活性，該酶分解真皮中的彈性蛋白纖維，通常因?qū)V線(xiàn)、干燥和環(huán)境應(yīng)激的反應(yīng)而釋放入皮膚中。用水解大豆蛋白提取物處理幫助保持皮膚有彈性、緊實(shí)、光滑、 柔軟和濕潤(rùn)。已知水解大豆蛋白可促進(jìn)膠原和彈性蛋白產(chǎn)生，使皮膚緊實(shí)和有彈性。其它屏障增強(qiáng)劑成分包括必需脂肪酸和維生素?？捎糜诒窘M合物的此類(lèi)必需脂肪酸的非限制性實(shí)例包括亞油酸、亞麻酸、油酸、鈮酸、花生酸、花生四烯酸、掬酸、神經(jīng)酸、 二十碳五烯酸、棕櫚酸硬脂酸，及其混合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它必需脂肪酸，如以上來(lái)源描述的那些脂肪酸，也可考慮用于本組合物。必需脂肪酸可來(lái)自多種來(lái)源。例如，可用疏水植物提取物衍生的一種或多種油將必需脂肪酸提供在脂質(zhì)體混懸液中?？捎糜谶@方面的例示性油包括各種蔬菜或植物油，包括但不限于亞麻籽油、線(xiàn)麻油、棉籽油、南瓜籽油、玉米油、蕓苔油、亞麻籽油、迷迭香油、大豆油、麥胚芽油、橄欖油、葡萄籽油、沙棘籽油、琉璃苣油、全緣葉澳洲圣果籽油、月見(jiàn)草油、 繡線(xiàn)菊籽油、紫蘇籽油、黑葡萄籽油、板栗油、棕櫚油、木瓜籽油、甘草、玉米油、柚籽油、奇異果籽油、ligonberry seed oil、西番蓮籽油、西瓜籽油、玫瑰籽油、紅花油、向日葵油、葵花籽油、棉籽油、花生油、荷荷巴油、芝麻油、罌粟籽油、植物油，其混合物，及其氫化衍生物?；蛘呋虺艘酝猓景l(fā)明的脂質(zhì)體可負(fù)載一種或多種植物提取物、植物成分、DNA 修復(fù)酶和/或甲基黃嘌呤。例示性提取物可來(lái)自各種植物來(lái)源，包括迷迭香、積雪草、紫錐菊、姜、熊果、黃褥花果發(fā)酵物(Acerola Cherry Fermentate)，或來(lái)自與上述油相對(duì)應(yīng)的植物。植物提取物、植物成分和植物衍生的油的其它實(shí)例描述于美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào) 2006/0257509和2007/0003536，其公開(kāi)通過(guò)引用明確地結(jié)合到本文中。用于本發(fā)明的油或提取物的總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0.0001% _1%，更優(yōu)選約 0. 0003wt % -約 0. 003wt %。例示性DNA修復(fù)酶包括噬菌體T4嘧啶二聚體-特異性核酸內(nèi)切酶、滕黃微球菌 N-糖基化酶/AP裂解酶、釀酒酵母N-糖基化酶脫嘌呤/脫嘧啶核酸裂解酶、粟酒裂殖酵母 UV損傷核酸內(nèi)切酶(UVDE)、綠藻病毒分離PBCV-I嘧啶二聚體-特異性糖基化酶和組囊藻光裂合酶。其它DNA修復(fù)酶描述于美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2006/0257509，其公開(kāi)通過(guò)引用明確地結(jié)合到本文中。DNA修復(fù)酶的總量可占脂質(zhì)體混懸液重量約0. 01% -約10%，更優(yōu)選約0. -約3%重量。例示性維生素包括上文描述的抗氧化劑，以及親脂維生素，如維生素A，包括游離酸或其衍生物及其前體，包括類(lèi)視黃醇，如視黃醇、視黃醛和視黃酯，如乙酸視黃酯、丁酸視黃酯、丙酸視黃酯、辛酸視黃酯、月桂酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯、油酸視黃酯和亞油酸視黃酯；和類(lèi)胡蘿卜素；B-復(fù)合維生素，包括Bl 硫胺素，B2 核黃素，B6 吡哆醇、泛醇和泛酸； 維生素B12及其組合；維生素D，生物素，維生素K，其水溶性衍生物等。局部給予甲基黃嘌呤如咖啡因，據(jù)信可減輕皮膚因暴露于紫外光或日光照射引起的DNA損傷的有害作用。具體來(lái)講，在用紫外光照射后將咖啡因局部給予小鼠皮膚，顯示可降低非惡性和惡性皮膚腫瘤的數(shù)目(Lu et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99(19) :12455-60，2002)，減少光損傷和促進(jìn)DNA-損傷角化細(xì)胞的消除(Koo et al.， Br. J. Dermatol.，156(5) =957-64,2007)。此外，甲基黃嘌呤如咖啡因據(jù)信可發(fā)揮“陽(yáng)光照射不到的”鞣劑的作用，單獨(dú)或與曬黑刺激物如紫外光或日光照射聯(lián)合，調(diào)節(jié)參與黑素生成的生化途徑的活性，大概是通過(guò)它們抑制環(huán)-AMP磷酸二酯酶和增強(qiáng)黑素細(xì)胞中黑色素產(chǎn)生的能力。用于本發(fā)明的例示性甲基黃嘌呤包括咖啡因(1，3，7_三甲基黃嘌呤)、茶堿(1， 3-二甲基黃嘌呤)、氨茶堿、可可堿(3，7_二甲基黃嘌呤)、副黃嘌呤、異丁基甲基黃嘌呤、丁基甲基黃嘌呤，及其類(lèi)似物、衍生物和組合。在具體實(shí)施方案中，甲基黃嘌呤如咖啡因的重量濃度為約0.01% -約0. 30%。本領(lǐng)域技術(shù)人員將清楚可包含在本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液中的其它添加劑，包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在皮膚護(hù)理或美容產(chǎn)品中，可將本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液摻入適合美容的基體中以形成用于局部給藥的采用霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠、漿液、補(bǔ)劑、乳液、糊劑或噴霧劑形式的美容制劑。制備脂質(zhì)體的方法另一方面，本發(fā)明提供制備如上所述的穩(wěn)定、透明至半透明的單層脂質(zhì)體混懸液的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，制備穩(wěn)定、透明至半透明的單層脂質(zhì)體混懸液的方法包括(a)制備含有偶合劑、至少一種磷脂、剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑的油溶性組合物；(b)制備水溶性組合物；(C)將水溶性組合物與油溶性組合物合并以形成多層、多泡脂質(zhì)體制劑；(d) 將多層、多泡脂質(zhì)體制劑轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體制劑；和(e)將單層脂質(zhì)體制劑加入密度為約
0.95g/cc-約1.25g/CC的外相組合物內(nèi)。該方法將通常得到含有均勻的大量平均粒度為約50-約290nm的單層脂質(zhì)體顆粒的脂質(zhì)體混懸液，其中脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為
1.30-1. 45，在約4°C -約50°C在棕色玻璃瓶、無(wú)色玻璃瓶或不透明的塑料容器內(nèi)以純凈形式保持其穩(wěn)定性至少30天，或者在21°C保持至少180天，或更久。在一個(gè)實(shí)施方案中，可通過(guò)按順序加入至少一種偶合劑、至少一種磷脂、至少一種剛度增強(qiáng)劑和/或至少一種抗氧化劑以形成批料組合物制備油溶性組合物。可將批料組合物攪拌和加熱至充分溶解組分的溫度(如190-210 T )。冷卻后，可加入一種或多種溫度敏感性油溶性組分，包括油溶性活性物質(zhì)。然后可使批料組合物冷卻，維持(和攪拌)在約75-85下溫度與水溶性組合物進(jìn)行相組合?？蓪⑺苄越M合物和油溶性組合物(包括或不包括水溶性和/或油溶性活性物質(zhì))在攪拌器中混合(例如50rpm 10-15分鐘)?？尚纬啥鄬?、多泡脂質(zhì)體顆粒組合物，然后用合適的轉(zhuǎn)化過(guò)程如高壓微流化、擠出、高速剪切、研磨、聲處理、選擇性微通道過(guò)濾或勻漿化轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體顆粒組合物?？赏ㄟ^(guò)將外相組合物的一種或多種內(nèi)容物按順序混合一起，攪拌使其溶解，將內(nèi)容物加入上文描述的脂質(zhì)體制劑中，制備外相組合物。因?yàn)樵诮?jīng)受約200 °F的油溶性批料組合物溫度后，某些活性成分的生物活性可能削弱，例如，某些活性成分，包括植物性物質(zhì)(如積雪草提取物)，在更低的溫度條件下可溶解在水溶性組合物中或者在進(jìn)一步冷卻后它們可加(和溶解)在油溶性批料組合物中。有多種方法可用于將多層、多泡脂質(zhì)體制劑轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體制劑。這些包括高壓微流化、擠出、高速剪切、研磨、聲處理、選擇性微通道過(guò)濾或勻漿化。微流化提供制備單層脂質(zhì)體制劑的優(yōu)選方法，特別是根據(jù)其制備大批量脂質(zhì)體制劑的能力。微流化涉及將漿料樣濃縮的類(lèi)脂/水分散體引入微流化器內(nèi)，其通過(guò)直徑 1-5 μ m的微通道以非常高的壓力(10，000-20，OOOpsi)泵送分散體。微通道裂開(kāi)和相互碰撞以增強(qiáng)小滴尺寸減小和能量輸入。通過(guò)加壓進(jìn)入2條限定的微通道內(nèi)使極高速移動(dòng)的流體分成2股流化。在流體通過(guò)微流室很小的洞口進(jìn)入后，出現(xiàn)大規(guī)模空化，但也出現(xiàn)快速壓差。通過(guò)常規(guī)勻漿化獲得類(lèi)似的壓差。然后使2股流以極高速直角碰撞一起。由高壓差和高速產(chǎn)生的巨大能量導(dǎo)致類(lèi)脂自我組裝成脂質(zhì)體?？墒菇K端收集的流體再穿過(guò)微流化器 1-4次，直至獲得看起來(lái)均勻的分散體和單峰、均勻的粒度分布。適合用于制備本發(fā)明脂質(zhì)體制劑的微流化裝置包括 Micofluidics Models MllOY 和 M210EH(Microfluidics Corp., Newton, ΜΑ)?；蛘?，還可通過(guò)在水中聲處理磷脂產(chǎn)生本發(fā)明的單層脂質(zhì)體。低剪切速率產(chǎn)生多層脂質(zhì)體，像洋蔥一樣具有許多層。連續(xù)高剪切聲處理容易形成較小的單層脂質(zhì)體。又一方面，本發(fā)明包括制備美容制劑的方法，其中將本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液與適合美容的基體合并以形成采用霜?jiǎng)⑾磩?、凝膠、漿液、補(bǔ)劑、乳液、糊劑或噴霧劑形式的美容制劑。透射電子顯微鏡(TEM)提供表征脂質(zhì)體的大小、完整性和穩(wěn)定性的方法。常用的樣品制備方法包括將1滴1 5稀釋的脂質(zhì)體混懸液涂在塑料涂層網(wǎng)格內(nèi)，用磷鎢酸或鉬酸銨使材料負(fù)染色，從而制備負(fù)染包埋的脂質(zhì)體單層。更具體來(lái)講可制備樣品用于TEM分析，如下將含水瓊脂糖(w/v)倒入塑料培養(yǎng)皿內(nèi)，在室溫下風(fēng)干10分鐘。通過(guò)輝光放電使Formvar或火棉膠涂層網(wǎng)格具備親水性， 將網(wǎng)格置于1號(hào)Whatman濾紙上。每個(gè)網(wǎng)格上各放1滴樣品混懸液。當(dāng)濾紙?jiān)诰W(wǎng)格周?chē)沾蟛糠忠后w時(shí)，將網(wǎng)格轉(zhuǎn)移至瓊脂糖平板30分鐘-1小時(shí)以促使鹽和液體擴(kuò)散入瓊脂糖內(nèi)。用具備ESI的Zeiss-902觀察未染色的網(wǎng)格并照相。通常，脂質(zhì)體將表現(xiàn)為分離的圓形結(jié)構(gòu)，沒(méi)有明顯凝塊的跡象。可以例如通過(guò)評(píng)估脂質(zhì)體在水溶液或在霜?jiǎng)┲械拇笮『徒Y(jié)構(gòu)，評(píng)估脂質(zhì)體的粒度和穩(wěn)定性，兩者都在棕色玻璃瓶、無(wú)色玻璃瓶或不透明的塑料容器中貯存之前或貯存1-12 個(gè)月后，或者更后的時(shí)間進(jìn)行。脂質(zhì)體的粒度和穩(wěn)定性可用合適的激光散射(如Nanotrac 或Microtrac )、多重光散射、動(dòng)態(tài)穩(wěn)定性分析儀(Turbiscan TLab Expert)，和/或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的透射電子顯微鏡裝置和方法評(píng)估。一方面，激光散射可用于粒度定量。例如，Nanotrac 利用“控制參考”動(dòng)態(tài)光散射法，利用780nm波長(zhǎng)激光二級(jí)閃爍光通過(guò)藍(lán)寶石過(guò)濾窗進(jìn)入稀釋的樣品分散介質(zhì)中。激光(頻移的散射方式)通過(guò)藍(lán)寶石窗反射回分光器內(nèi)，由光電探測(cè)器接收。散射光的頻移代表“控制參考”的組合，是由藍(lán)寶石濾器(已知非漂移頻率)反射的光，結(jié)合出現(xiàn)Brownian 運(yùn)動(dòng)的懸浮樣品顆粒的速度的影響。根據(jù)“Doppler效應(yīng)”激光是頻移的，與感興趣的顆粒分布的移動(dòng)速度成比例。然后將檢測(cè)器輸出信號(hào)放大、過(guò)濾、數(shù)字化和在數(shù)學(xué)上分析以量化粒度分布。當(dāng)經(jīng)受降低或提高的溫度時(shí)，穩(wěn)定的脂質(zhì)體系統(tǒng)在老化后表現(xiàn)顆粒均勻、單峰分布。當(dāng)顆粒聚結(jié)或絮凝導(dǎo)致其截留的內(nèi)容物破裂和整個(gè)微結(jié)構(gòu)/膠體系統(tǒng)全面形成乳狀液或沉降時(shí)，出現(xiàn)雙峰或三峰分布。本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液可在約4°C -約50°C在棕色玻璃瓶、無(wú)色玻璃瓶或不透明的塑料容器內(nèi)以純凈形式保持其穩(wěn)定性至少30天，至少約2個(gè)月， 至少約3個(gè)月，至少約6個(gè)月，至少約19個(gè)月，或更久。如以下圖5顯示，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑在環(huán)境室溫條件下保持其穩(wěn)定性和單峰顆粒分布至少19個(gè)月，如在單峰粒度分布所反應(yīng)，特征在于平均粒度為約157nm和大小范圍為約54nm-約521nm。Turbiscan Accelerated Kinetic Stability AnalyzerIJfjiIlJIi
穩(wěn)定性的可追蹤的定量方法。Turbiscan Analyzer應(yīng)用多重光散射檢測(cè)透射和反散射光的水平，作為樣品深度的函數(shù)用于透明至不透明外觀的膠體系統(tǒng)。Turbiscan儀器由近紅外激光二極管組成，照亮充滿(mǎn)樣品的小(IcmXScm)圓筒狀玻璃比色槽深度全部的光的光子。光的光子以散射方式從樣品發(fā)出(I)，同時(shí)由透射(用于透明度)和反散射(用于不透明度) 檢測(cè)器檢測(cè)。根據(jù)使用者限定的時(shí)間間隔將反散射與透射光的比率收集作為“指紋”掃描。 疊加數(shù)據(jù)掃描的動(dòng)態(tài)結(jié)果顯示感興趣的混懸液、乳液或泡沫狀物的均勻程度。在本發(fā)明中相對(duì)于術(shù)語(yǔ)“穩(wěn)定性”，“反散射動(dòng)態(tài)結(jié)果”可限定為反散射光的相對(duì)改變，是由使用者限定的時(shí)間間隔的函數(shù)。產(chǎn)物反散射光的每次掃描隨激光掃描的每次時(shí)間間隔變化。反散射光的這種改變與系統(tǒng)內(nèi)顆粒的移行有關(guān)。在穩(wěn)定的脂質(zhì)體混懸液中，反散射光的激光掃描與反散射光的初始掃描相比將很少改變。關(guān)于本發(fā)明，反散射動(dòng)態(tài)結(jié)果小于2. 0%表示在選擇的溫度條件和使用者限定的時(shí)間間隔下穩(wěn)定的脂質(zhì)體溶液或混懸液。關(guān)于本發(fā)明的脂質(zhì)體系統(tǒng)，當(dāng)暴露于25°C -50°C的溫度超過(guò)16小時(shí)，反散射動(dòng)態(tài)結(jié)果大約 0. 2-1. 0%。對(duì)于膠體系統(tǒng)可在短至4-8小時(shí)的時(shí)間段檢測(cè)不穩(wěn)定性的早期指征。給藥方式通常將本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液設(shè)計(jì)用于局部給藥。通常，以至少每天為基礎(chǔ)給予本發(fā)明的組合物。本發(fā)明組合物的給藥可持續(xù)任何合適的時(shí)間段。應(yīng)理解美容增效的程度和維持、改善、保持或修復(fù)的程度將直接隨所用組合物的總量和頻率而不同?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員將很好理解的方法和技術(shù)制備有用的劑型，可包括用其它成分制備合適的劑型。在一個(gè)實(shí)施例中，通常至少每天1次給予本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液。在另一個(gè)實(shí)施例中，每天2次給予脂質(zhì)體混懸液。在又一個(gè)實(shí)施例中，可以每天3-5次給予制劑。通常，對(duì)可以每天給藥的制劑的量沒(méi)有限制。本發(fā)明還包括通過(guò)局部涂用本發(fā)明的脂質(zhì)體混懸液治療皮膚的方法。在使用時(shí)， 將小量組合物例如I-IOOml從合適的容器或涂抹器涂在暴露的皮膚區(qū)，然后如果需要?jiǎng)t用手或手指或合適的裝置將其攤開(kāi)和/或擦入皮膚內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供預(yù)防、阻止、逆轉(zhuǎn)、緩解、消除、減小或改善老化跡象的方法，其中將足以預(yù)防、阻止、逆轉(zhuǎn)、緩解、消除、減小或改善皮膚老化跡象的美容有效量的本發(fā)明組合物局部涂在皮膚上。例示性老化跡象包括但不限于面部皺紋、細(xì)紋、皺紋、 魚(yú)尾紋、黑眼圈、瑕疵、老年斑、妊娠紋、減弱的皮膚屏障修復(fù)性，或其組合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供改善皮膚美學(xué)外觀的方法，其中將足以改善皮膚美學(xué)外觀的美容有效量的本發(fā)明組合物局部涂在皮膚上。改善可涉及皮膚厚度、彈性、回彈性、保濕性、色調(diào)、紋理、輻射亮度、光澤、亮度、澄清度、輪廓、均勻度、緊實(shí)度、緊張度、柔軟度、柔和度、敏感性、毛孔大小、水分丟失減少，或其組合。改善可進(jìn)一步涉及改善受以下情況影響、導(dǎo)致以下情況或由以下情況造成的不良皮膚狀況銀屑病、濕疹、脂溢性皮炎、皮炎、曬傷、雌激素失衡、色素沉著過(guò)度、色素沉著不足、脫色、黃化、雀斑、皮膚萎縮、皮膚破裂、皮膚脆弱、干燥、皸裂、下垂、變薄、增生、纖維化、 毛孔增大、蜂窩組織形成、擦傷、座瘡形成、凋亡、細(xì)胞分化、細(xì)胞去分化、預(yù)防腫瘤誘導(dǎo)或腫瘤進(jìn)展、病毒感染、真菌感染、細(xì)菌感染、蜘蛛靜脈(毛細(xì)血管擴(kuò)張)、多毛癥、酒糟鼻、搔癢癥、胼胝、疣、雞眼，或其組合。老化跡象或不良皮膚狀況可來(lái)自自由基損傷、環(huán)境因素、污染物、飲食、時(shí)間性老化、過(guò)早老化、激素老化、光老化或其組合。因此，選擇用于改善抗老化特征或不良皮膚狀況的本組合物和方法可局部應(yīng)用抑制加速或促進(jìn)老化、損傷、自由基形成或皮膚成分分解的酶或介質(zhì)(包括但不限于金屬蛋白酶、膠原酶、彈性酶、透明質(zhì)酸酶和蛋白酶)的活性成分。 活性成分可具有抗氧化活性、自由基清除或抗炎活性，和/或它們可抑制膠原、彈力蛋白、 纖維連接蛋白、透明質(zhì)酸、糖胺聚糖(GAG)或者其它細(xì)胞外基質(zhì)元件或NF-kB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的調(diào)節(jié)酶或介質(zhì)的分解。活性劑還可抑制與老化有關(guān)的其它信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，包括與這些途徑有關(guān)的介質(zhì)和調(diào)節(jié)劑，或其組合。除了改善皮膚的美學(xué)或美容外觀之外，本發(fā)明的局部組合物可局部涂用以增強(qiáng)皮膚的整體健康、活力和外觀。例如，可將本組合物涂在皮膚上以改善微循環(huán)、皮膚細(xì)胞間的溝通、補(bǔ)充必需營(yíng)養(yǎng)素或皮膚組分，或者改善皮膚細(xì)胞的代謝、增殖、增大、周轉(zhuǎn)和/或剝脫。
可在使用或不用α-或β羥基酸或其它剝脫劑或其組合涂在皮膚上的情況下實(shí)施剝脫。當(dāng)在本發(fā)明的組合物中使用剝脫劑時(shí)，包含足夠的抗刺激劑或抗炎劑以中和在缺乏此類(lèi)中和劑的情況下可能伴隨的刺激。預(yù)期以上詳細(xì)說(shuō)明視為例示性而非限制性。本發(fā)明通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)性研究和實(shí)施例進(jìn)一步舉例，不應(yīng)將其視為限制性。而且，在表3-6中的脂質(zhì)體混懸液是例示性制劑，其組成成分和量可根據(jù)以上指導(dǎo)進(jìn)行調(diào)節(jié)。實(shí)施例1脂質(zhì)體混懸液的制備.在制備本發(fā)明脂質(zhì)體混懸液的例示性方法中，通過(guò)按順序?qū)h0Sph0lip0n 85、 神經(jīng)酰胺IIIB和β-谷留醇和丁二醇加入scrapewall渦輪槽內(nèi)制備油溶性組合物。開(kāi)始以40rpm攪拌scrapewall，將批料組合物加熱至充分溶解組分的溫度(190-210 0F )。冷卻組合物，當(dāng)批料溫度下降至170下時(shí)加入生育酚。然后使批料組合物冷卻并維持在75-85下溫度與水溶性組合物相組合。在以50rpm攪拌scrapewal 1的同時(shí)，用氣動(dòng)齒輪泵以8_10Ib/ min速率將水緩慢地加入油溶性組合物內(nèi)。用渦輪式攪拌器以50rpm將水溶性和油溶性組分混合10-15分鐘。然后用80-100psi進(jìn)料壓在微流化器(Microfluidics MHOY和M210EH) 中以12，000-15, OOOpsi使所得多層、多泡脂質(zhì)體顆粒組合物通過(guò)1_4次，以形成單層脂質(zhì)體顆粒組合物。通過(guò)將甘油、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、精氨酸和水在scrapewall渦輪槽中按順序混合一起，邊攪拌(scrapewall為30rpm ；渦輪為300_350rpm)邊使內(nèi)容物在145-155 0F 溶解約20分鐘，制備外相組合物。冷卻至140下后，將附加防腐劑加入外相組合物內(nèi)。接著，在進(jìn)一步冷卻后，將微流化單層顆粒組合物加入外相組合物內(nèi)，在75-90下混合15分鐘。所得含60%甘油的脂質(zhì)體混懸液具有的屈光指數(shù)為1. 4，在4°C _60°C的溫度下穩(wěn)定至少 6 個(gè)月。用 Transmission Electron Microscope(TEM)分析(圖 1A-1C)進(jìn)一步評(píng)估制劑，確認(rèn)產(chǎn)生結(jié)構(gòu)上完整的單層脂質(zhì)體(圖1B，1C)。表 1 顯不用 Nanotrac N 150 Submicron Particle Size Analyzer (Microtrac Inc.，Montgomeryville, PA)通過(guò)動(dòng)態(tài)激光散射，在不同溫度貯存條件下(40 °F，環(huán)境，和 120下)，在制備后以各種時(shí)間間隔(開(kāi)始，1個(gè)月，2個(gè)月，3個(gè)月，和6個(gè)月)通過(guò)微流化器2或3次后圖1A-1C脂質(zhì)體制劑的粒度分析。列舉的25種條件各自包括每種測(cè)試條件下基于3次掃描(直方圖)的75次不同測(cè)試的粒度計(jì)算。如表1顯示，含有脂質(zhì)體混懸液的美容制劑的特征在于在環(huán)境溫度條件下貯存6個(gè)月后粒度范圍是56nm-333nm和中位粒度約140nm。
權(quán)利要求
1. 一種穩(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液，包含:懸浮于外相組合物中的脂質(zhì)體制劑，所述脂質(zhì)體制劑包含大量平均粒度為約50nm-約 290nm的單層脂質(zhì)體顆粒，所述脂質(zhì)體制劑用由油溶性組合物和水溶性組合物組成的脂質(zhì)體水溶液形成，所述油溶性組合物濃度為約5% -約33%脂質(zhì)體溶液重量，所述水溶性組合物濃度為約67% -約95%脂質(zhì)體溶液重量，其中所述油溶性組合物包含偶合劑、至少一種磷脂、至少一種剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑；其中所述外相組合物濃度為約30% -約75%脂質(zhì)體混懸液重量，所述外相組合物在 21 °C和IOsec-1剪切速率下密度為約0. 95g/cc_約1. 25g/cc，粘度為約2. 5cP-約40，OOOcP ； 和其中所述脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為約1. 30-約1. 45，在約4°C -約50°C溫度下以純凈形式保持其穩(wěn)定性至少30天或在21°C保持至少180天。
2.權(quán)利要求1的脂質(zhì)體混懸液，其中所述偶合劑選自丁二醇、丙二醇、己二醇和聚乙二醇，及其混合物。
3.權(quán)利要求1的脂質(zhì)體混懸液，其中所述偶合劑是丁二醇。
4.權(quán)利要求2的脂質(zhì)體混懸液，其中所述至少一種剛度增強(qiáng)劑選自神經(jīng)鞘脂、植物甾醇、膽留醇，及其混合物。
5.權(quán)利要求4的脂質(zhì)體混懸液，包含至少2種剛度增強(qiáng)劑，包括至少一種植物留醇和至少一種選自神經(jīng)酰胺、鞘氨醇和植物鞘氨醇的成員。
6.權(quán)利要求4的脂質(zhì)體混懸液，其中所述至少一種磷脂包括具有不同脂肪酰基部份的甘油磷脂或鞘磷脂。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的脂質(zhì)體混懸液，其中所述至少一種磷脂包括含有濃度為約 80% -約95%磷脂制劑重量的磷脂酰膽堿的磷脂制劑。
8.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的脂質(zhì)體混懸液，其中所述油溶性組合物包含丁二醇、神經(jīng)酰胺IIIB、β-谷甾醇和生育酚。
9.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的脂質(zhì)體混懸液，其中所述抗氧化劑選自生育酚、生育酚衍生物、α生育酚、乙酸生育酚酯、琥珀酸生育酚酯、抗壞血酸、抗壞血酸衍生物、抗壞血酸四己基癸基酯、丁羥甲苯、丁羥茴醚，及其混合物。
10.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的脂質(zhì)體混懸液，其中所述脂質(zhì)體混懸液包含濃度為約 35% -約75%脂質(zhì)體混懸液的甘油。
11.權(quán)利要求10的脂質(zhì)體混懸液，其中所述油溶性組合物包含卵磷脂制劑、丁二醇、神經(jīng)酰胺IIIB和β-谷甾醇；和其中所述脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為約1. 30-約1. 45。
12.—種制備權(quán)利要求1的穩(wěn)定的單層脂質(zhì)體混懸液的方法，包括a.制備含有偶合劑、至少一種磷脂、剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑的油溶性組合物；b.制備水溶性組合物；c.將水溶性組合物與油溶性組合物合并以形成多層、多泡脂質(zhì)體制劑；d.將多層、多泡脂質(zhì)體制劑轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體制劑；和e.將單層脂質(zhì)體制劑加入外相組合物內(nèi)，所述外相組合物在21°C和lOsec—1剪切速率下密度為約1. 05g/cc-約1. 25g/cc，粘度為約2. 5cP-約40，OOOcP,以形成含有大量平均粒度為約50-約^Onm的單層脂質(zhì)體顆粒的脂質(zhì)體混懸液；其中所述脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為1. 30-1. 45，在約4°C -約50°C溫度下以純凈形式保持其穩(wěn)定性至少30天，或在21°C保持至少180天。
13.權(quán)利要求12的方法，其中偶合劑選自丁二醇、丙二醇、己二醇和聚乙二醇，及其混合物。
14.權(quán)利要求12的方法，其中偶合劑是丁二醇。
15.權(quán)利要求13的方法，其中剛度增強(qiáng)劑選自神經(jīng)鞘脂、植物留醇、膽留醇，及其混合物。
16.權(quán)利要求15的方法，包含至少2種剛度增強(qiáng)劑，包括至少一種植物留醇和至少一種選自神經(jīng)酰胺、鞘氨醇和植物鞘氨醇的成員。
17.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種磷脂包括具有不同脂肪酰基部份的甘油磷脂或神經(jīng)鞘脂。
18.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種磷脂包括含有濃度為約 80% -約95%磷脂制劑重量的磷脂酰膽堿的磷脂制劑。
19.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述油溶性組合物包含丁二醇、神經(jīng)酰胺 IIIB、β-谷甾醇和生育酚。
20.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述抗氧化劑選自生育酚、生育酚衍生物、α 生育酚、乙酸生育酚酯、琥珀酸生育酚酯、抗壞血酸、抗壞血酸衍生物、抗壞血酸四己基癸基酯、丁羥甲苯、丁羥茴醚，及其混合物。
21.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述脂質(zhì)體溶液與外相組合物的重量比為約 0. 002-約 0. 54。
22.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述脂質(zhì)體混懸液包含濃度為約35%-約 75%脂質(zhì)體混懸液的甘油。
23.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述轉(zhuǎn)化包括高壓微流化、擠出、高速剪切、 研磨、聲處理、選擇性微通道過(guò)濾或勻漿化。
24.權(quán)利要求12-16中任一項(xiàng)的方法，其中在懸浮于外相組合物之前將單層脂質(zhì)體制劑凍干。
25.一種制備包含權(quán)利要求1的脂質(zhì)體混懸液的美容制劑的方法，包括a.制備含有偶合劑、至少一種磷脂、剛度增強(qiáng)劑和抗氧化劑的油溶性組合物；b.制備水溶性組合物；c.將水溶性組合物與油溶性組合物合并以形成多層、多泡脂質(zhì)體制劑；d.將多層、多泡脂質(zhì)體制劑轉(zhuǎn)化為單層脂質(zhì)體制劑；和e.將單層脂質(zhì)體制劑加入外相組合物內(nèi)，所述外相組合物在21°C和lOsec—1剪切速率下密度為約1. 05g/cc-約1. 25g/cc，粘度為約2. 5cP-約40，OOOcP,以形成含有大量平均粒度為約50-約^Onm的單層脂質(zhì)體顆粒的脂質(zhì)體混懸液；其中所述脂質(zhì)體混懸液的屈光指數(shù)為1. 30-1. 45，在約4°C -約50°C溫度下以純凈形式保持其穩(wěn)定性至少30天，或在21°C保持至少180天；f.將脂質(zhì)體混懸液與適合美容的基體合并以形成采用霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠、漿液、補(bǔ)劑、乳液、糊劑或噴霧劑形式的美容制劑。
全文摘要
描述用于制備和使用穩(wěn)定的透明至半透明單層脂質(zhì)體混懸液的組合物和方法?；鞈乙喊ň哂写罅科骄６葹榧s50nm-約290nm的均勻單層脂質(zhì)體顆粒的脂質(zhì)體制劑。使顆粒懸浮于密度為約0.95g/cc-約1.25g/cc的占脂質(zhì)體混懸液重量約30％-約75％的外相組合物中。脂質(zhì)體制劑由包括油溶性組合物和水溶性組合物的脂質(zhì)體水溶液形成。油溶性組合物的濃度為約5％-約33％脂質(zhì)體溶液重量，水溶性組合物的濃度為約67％-約95％脂質(zhì)體溶液重量。
文檔編號(hào)A61K8/14GK102170853SQ200980139560
公開(kāi)日2011年8月31日 申請(qǐng)日期2009年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月3日
發(fā)明者P·M·安德森 申請(qǐng)人:捷通國(guó)際有限公司