專利名稱：一種膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于外科治療骨缺損填充的植入材料的制備方法及應(yīng)用。具體涉
及一種可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前國內(nèi)外普遍應(yīng)用人類同種異體骨植入材料替代自體骨作為治療骨缺損進(jìn)行 修復(fù)和重建的骨移植材料。由于該材料具有天然骨傳導(dǎo)性和骨誘導(dǎo)性，它尤其適合于臨床 一般骨缺損的填充、促進(jìn)骨不連、脊柱或關(guān)節(jié)融合的早期愈合、口腔頜面部骨缺損的填充， 以及用于重建因腫瘤、創(chuàng)傷、感染等病引起的骨關(guān)節(jié)缺損的填充植骨和結(jié)構(gòu)重建。脫礦骨是 將骨組織進(jìn)行酸性脫礦處理后使骨組織內(nèi)含鈣量大量減少，從而提高其骨誘導(dǎo)性，達(dá)到促 進(jìn)骨細(xì)胞生長的更好臨床效果。脫礦骨目前在國外廣泛使用。而國內(nèi)市場上也逐漸開始采 用脫礦骨骨粉用于小型骨腔填充及牙科應(yīng)用，如山西奧瑞生物材料有限公司生產(chǎn)的脫礦骨 粉。國知局2005年2月16日授權(quán)公告了一種"同種骨骨粉及其制備方法"(公開號為CN 1579561A)發(fā)明專利，該專利披露了基本脫礦骨粉的制備方法。然而由于臨床上大多數(shù)骨 缺損是不規(guī)范形狀，直接用干燥脫礦骨粉或骨粒進(jìn)行填充有一定的難度而不能充分填補(bǔ)缺 損。手術(shù)中有時(shí)采用患者自身血液或生理鹽水同干燥骨粉或骨?；旌铣砂肓鳡畋阌谔畛?。 由于血液需要在手術(shù)中現(xiàn)采且不經(jīng)過血型匹配不能使用在不同的患者上，同時(shí)還有交叉感 染的可能，不是理想的方法。鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是在不改 變脫礦骨生物性能的條件下制成半流狀脫礦骨混合物可直接用于臨床。目前國內(nèi)尚未見到 可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物作為骨填充材料方面的有關(guān)信息。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于公開一種可流動，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物的制備 方法及應(yīng)用。這種可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物生物相容性好，具 有天然骨傳導(dǎo)性和骨誘導(dǎo)性，免疫排斥反應(yīng)小。其最主要特征是可塑性強(qiáng)，可以用來填充各 種不規(guī)范形狀的骨缺損。不需要在手術(shù)過程中取血或用生理鹽水現(xiàn)混合，便于使用，節(jié)省手 術(shù)時(shí)間，同時(shí)達(dá)到理想的填充效果，為臨床上提供更好的骨填充材料。 所說的這種可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，是通過如下方 法制得的 1)用人同種異體骨組織作為原材料。制備粒徑為0. lcm到1. 2cm的骨粒；
將骨粒在乙醇和/或曲拉通(TritonX-lOO)溶液中用超聲法進(jìn)行脫脂滅菌；將脫 脂滅菌后的骨粒或骨纖維在鹽酸或過醋酸中用超聲法進(jìn)行脫礦處理，脫礦處理后的骨組織 的剩余含鈣量應(yīng)小于2% 。用無菌水沖洗，去酸，將ra值升到6. 5到7. 5之間；
2)將脫礦后的骨粒在真空中進(jìn)行冷凍干燥處理； 3)將制備好的脫礦凍干骨粒同具有生物相容性的流狀有機(jī)物作為載體進(jìn)行混合 成可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物；
4)為了促進(jìn)骨粒同其有機(jī)物載體更好的混合，可在脫礦骨復(fù)合物中再加入具有觸 變性的添加物使脫礦骨復(fù)合物更加黏稠和厚重。
5)該脫礦骨復(fù)合物中還可根據(jù)不同的臨床需要添加其它生物化學(xué)成份如膠原 蛋白，抗菌素，抗毒素，激素，酶，骨形成蛋白(BMPs)，人類骨髓細(xì)胞及干細(xì)胞等活細(xì)胞。
6)該脫礦骨復(fù)合物可預(yù)先混合好在無菌條件下保存。也可以將制備好的脫礦凍干 骨粒同有機(jī)物載體或其它添加物分開保存，在手術(shù)中再混合使用。 本發(fā)明的優(yōu)選方案為骨粒徑的理想尺寸為0. 2cm到lcm。脫脂滅菌時(shí)所用乙醇 濃度為70%或曲拉通(TritonX-100)濃度為O. 5% ，脫礦時(shí)所用鹽酸濃度為0. 6mol/L，冷凍 干燥在-2(rC到-35t:真空中壓力為150-100mTorr條件下進(jìn)行。復(fù)合物的理想有機(jī)物載體 為液狀或固狀多羥(基)的聚合物和酯類衍生物如單，雙酯甘油，丙二醇，聚乙二醇，乙酸甘 油酯等。添加物使用聚乙烯醇，凝膠，明膠，果膠，膠原蛋白，淀粉，甲基纖維素等具有觸變性 材料使混合物更黏稠和厚重。 由于這種可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀脫礦骨復(fù)合物是經(jīng)過充分脫脂，滅菌，脫 礦，冷凍干燥后制備的，既有效的降低了免疫原性，保留了成骨因子，又加強(qiáng)了其骨誘導(dǎo)性 能。加入有機(jī)載體和添加物后形成的可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀脫礦骨復(fù)合物成為臨床 不規(guī)范骨缺損的理想骨填充材料?？梢杂脕硖畛淙魏涡袪罟侨睋p，空洞，創(chuàng)傷，誘導(dǎo)自體骨 細(xì)胞的生長，促進(jìn)骨的早日愈合。
具體實(shí)施例方式
下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作更為詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面 的實(shí)施例。
1.骨粒的制備加工可用人類皮質(zhì)骨，松質(zhì)骨，及皮松質(zhì)骨。 1. 1骨粒的加工是采用目前已有的加工技術(shù)，將人類骨粉碎制成徑為0. 2cm到lcm 的顆粒。 2.脫脂滅菌處理 取已制好的骨粒放入濃度為70%的乙醇溶液中在常溫下進(jìn)行震動脫脂4小時(shí)。骨 材料同乙醇溶液的比例為每克骨材料需30ML乙醇溶液。
3.脫礦處理 3. 1將脫脂滅菌后的骨材料加入濃度為0. 6N的鹽酸溶液中在常溫下進(jìn)行震動脫 礦3小時(shí)。骨材料同鹽酸溶液的比例為每克骨材料需50ML鹽酸溶液。過濾掉鹽酸溶液， 再加入無菌水進(jìn)行反復(fù)沖洗3到5次，濾干。 3. 2將濾干后的骨材料浸泡在0. 1M磷酸鈉緩沖溶液中直到ra值升到6. 5到7. 5
之間，濾干。再加入無菌水進(jìn)行反復(fù)沖洗3到5次。脫礦處理后的骨組織的剩余含鈣量應(yīng) 小于2%。 4.冷凍干燥處理 將脫礦處理后的骨材料放入冷凍干燥機(jī)中在溫度-201:到-351:真空中壓力為
150-100mTorr條件下進(jìn)行冷凍干燥24-48小時(shí)。
5.膠狀/膏狀脫礦骨復(fù)合物的制備 5. 1將冷凍干燥后的脫礦骨材料10g和50g無菌注射用的甘油充分混合，緩慢攪拌混合物1小時(shí)或更長時(shí)間直到復(fù)合物充分混合成膏狀。 5. 2將制備好的膏狀脫礦骨復(fù)合物在無菌條件下保存。也可以保存在無菌注射器內(nèi)成為可注射式。 關(guān)于實(shí)施例需要說明的幾點(diǎn) 1.脫礦處理后的骨材料也可以不經(jīng)過冷凍干燥直接同無菌注射用的甘油混合制備成膠狀/膏狀脫礦骨復(fù)合物。 2.在混合過程中可按臨床需要在任何時(shí)候添加其它生物化學(xué)成份。
權(quán)利要求
膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用，其特征在于其制備方法如下(1)用人類同種異體骨作為原材料，加工成粒徑為0.1cm到1.2cm的骨粒；(2)采用以有的脫礦骨骨粉制備技術(shù)(國知局公開號為CN1579561A)，將骨粒在乙醇和/或曲拉通(TritonX-100)溶液中用超聲法進(jìn)行脫脂滅菌中用超聲法進(jìn)行脫脂滅菌；在鹽酸或過醋酸中用超聲法進(jìn)行脫礦處理；用無菌水沖洗，去酸，將PH值升到6.5到7.5之間；(3)將脫礦后的骨粒在真空中進(jìn)行冷凍干燥處理。(4)將制備好的脫礦凍干骨粒同具有生物相容性的流狀有機(jī)物作為載體進(jìn)行混合成可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物；(5)為了促進(jìn)骨粒同其有機(jī)物載體更好的混合，可在脫礦骨復(fù)合物中再加入具有觸變性的添加物使脫礦骨復(fù)合物更加黏稠和厚重。(6)該脫礦骨復(fù)合物中還可根據(jù)不同的臨床需要添加其它生物化學(xué)成份如膠原蛋白，抗菌素，抗毒素，激素，酶，骨形成蛋白(BMPs)，人類骨髓細(xì)胞及干細(xì)胞等活細(xì)胞。(7)該脫礦骨復(fù)合物可預(yù)先混合好在無菌條件下保存。也可以將制備好的脫礦凍干骨粒同有機(jī)物載體或其它添加物分開保存，在手術(shù)中再混合使用。
2. 如權(quán)利要求l所述的膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，其特征在于步驟(3)中在空中進(jìn)行冷凍干燥處理時(shí)溫度為-2(TC到-35t:，真空中壓力為150-100mTorr，根據(jù)不 同骨材料數(shù)量冷凍時(shí)間為24到48小時(shí)。
3. 如權(quán)利要求l所述的膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，其特征在于步驟(4)中 同有生物相容性的流狀有機(jī)物為液狀或固狀多羥(基)的聚合物和酯類衍生物如單，雙酯 甘油，丙醇，聚乙二醇，乙酸甘油酯等。
4. 如權(quán)利要求l所述的膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，其特征在于步驟(5)中 具觸變性的添加物為聚乙烯醇，凝膠，明膠，果膠，膠原蛋白，淀粉，甲基纖維素等。
5. 如權(quán)利要求1所述的膠狀/膏狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，其特征在于步驟(7)預(yù)先合好的脫礦骨復(fù)合物也可以保存在無菌注射器內(nèi)成為可注射式。
全文摘要
一種膠狀/膏狀，具有流動性的同種異體脫礦骨復(fù)合物的制備方法及應(yīng)用，由于該產(chǎn)品具有一定的流動性，黏性，可塑性強(qiáng)的特征，所以可以廣泛應(yīng)用于臨床治療多種原因引起的骨缺損的填充材料，尤其適用于不規(guī)范形狀骨缺損的填充，該產(chǎn)品是將人類同種異體骨作為原材料，加工成粒徑為0.1cm到1.2cm的骨粒；經(jīng)過脫礦和冷凍干燥處理制成脫礦凍干骨粒，將制備好的脫礦凍干骨粒同具有生物相容性的流狀有機(jī)物作為載體進(jìn)行混合成可流動性的膠狀，膏狀，或糊狀同種異體脫礦骨復(fù)合物，也可在脫礦骨復(fù)合物中再加入具有觸變性的添加物使脫礦骨復(fù)合物更加黏稠和厚重。
文檔編號A61L27/54GK101732763SQ20081017247
公開日2010年6月16日 申請日期2008年11月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月12日
發(fā)明者李元曦 申請人:李鑫國