專利名稱：一種乳結(jié)泰制劑及其質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及復(fù)方藥物制劑分析領(lǐng)域，特別涉及一種乳結(jié)泰制劑及其質(zhì)量檢測(cè)方法；檢測(cè)的項(xiàng)目為所述的乳結(jié)泰制劑的檢測(cè)項(xiàng)目為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)，α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)，野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)；所述的每0.5克乳結(jié)泰制劑中赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。

背景技術(shù)：
中國(guó)專利申請(qǐng)02102626.2(公開(kāi)號(hào)CN1429596)中公開(kāi)了一種乳結(jié)泰制劑的制備工藝。該乳結(jié)泰制劑具有疏肝理氣、化痰散結(jié)，活血祛瘀，消腫止痛的功效，對(duì)各種類型的乳腺增生、乳房腫塊，乳房腫痛及觸痛，胸脅脹悶等癥，包括經(jīng)前乳房腫脹痛及其他乳房痛，經(jīng)臨床試驗(yàn)證明，該制劑具有顯著療效且無(wú)毒副作用；該制劑還可以預(yù)防乳癌術(shù)后復(fù)發(fā)及術(shù)后癜痕。該制劑能滿足廣大患者的需要，具有巨大的市場(chǎng)價(jià)值。
但是，目前還沒(méi)有針對(duì)乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法以保證其質(zhì)量，需要制定專門的質(zhì)量檢測(cè)方法。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種乳結(jié)泰制劑及其質(zhì)量檢測(cè)方法；該制劑原料中含有瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；檢測(cè)方法所檢測(cè)項(xiàng)目為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)，α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)，野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)；所述的每0.5克乳結(jié)泰制劑中赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 一種乳結(jié)泰制劑，原料中含有瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克； 本發(fā)明的另一目的是通過(guò)以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 一種乳結(jié)泰制劑，原料中含有瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于1.55毫克；所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目所采用的檢測(cè)方法為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為薄層色譜法，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)、α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)、野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法均為薄層色譜法，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)的方法為高效液相色譜法。
檢測(cè)過(guò)程如下 I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-9∶30； b.將所述乳結(jié)泰制劑溶液的離心分離處理，得到上清液；將該上清液用正丁醇進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的上清液與每次提取處理中正丁醇的體積比為30∶30； c.將所述的總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25； 將所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的總提取液層，得到水洗滌過(guò)的總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25； 從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到殘?jiān)? d.將所述的殘?jiān)眉状既芙猓玫饺榻Y(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-9； B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備 a.取瓜蔞對(duì)照藥材加水煎煮2-3小時(shí)，濾過(guò)，得到瓜蔞一級(jí)濾液；所述的瓜蔞與水的重量比為1-6∶150； b.將所述的瓜蔞一級(jí)濾液進(jìn)行濃縮處理，得到瓜蔞濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過(guò)濾，得到瓜蔞二級(jí)濾液；所述的瓜蔞濃縮液和瓜蔞一級(jí)濾液的體積比為20-30∶1；所述的瓜蔞濃縮液與乙醇的體積比為5-7.5∶10； c.將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶1-6； 將瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤河谜〈歼M(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到瓜蔞總提取液；所述的瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤号c每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶30； d.將所述的瓜蔞總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的洗滌處理中，瓜蔞總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25； 將所述的氨試液洗滌過(guò)瓜蔞的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液層，得到水洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25； 從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到瓜蔞二級(jí)殘?jiān)? e.將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶1-6； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與瓜蔞對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)； II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-6∶30； b.取一部分所述的乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液作為乳結(jié)泰制劑溶液樣品，向該樣品中加入三氯甲烷，進(jìn)行加熱回流處理之后進(jìn)行冷卻處理，分取水層，得到樣品回流液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的乳結(jié)泰溶液的體積比為30∶20；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的三氯甲烷的體積比為20∶40； c.將所述的樣品回流液用乙酸乙酯進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的樣品回流液與每次提取處理中乙酸乙酯的體積比為20∶20； d.將所述的總提取液進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮液；向所述的濃縮液中加入中性氧化鋁，攪拌均勻后蒸干乙酸乙酯，得到除乙酸乙酯的濃縮液；所述的濃縮液的體積為所述的總提取液的體積的1/10-1/8；所述的中性氧化鋁與所述的濃縮液的重量比為2∶5； e.將所述的除乙酸乙酯的濃縮液用乙醇進(jìn)行3次洗滌處理，合并每次得到的乙醇洗滌液，得到乙醇總洗滌液；所述的除乙酸乙酯的濃縮液與每次提取處理中乙醇的體積比為5∶10； f.將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)粚⑺龅臍堅(jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-6； B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備 取芍藥苷對(duì)照品溶解于乙醇，得到芍藥苷對(duì)照品溶液；該溶液的濃度為1mg/ml。
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、芍藥苷對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與芍藥苷對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)； III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2-24∶200； b.向所述乳結(jié)泰制劑溶液中加入乙酸乙酯，進(jìn)行提取處理2-3小時(shí)，得到乙酸乙酯進(jìn)行提取處理液，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與乙酸乙酯的體積比為200∶1； B.α-香附酮對(duì)照品溶液制備 將α-香附酮溶解于乙酸乙酯，得到α-香附酮的乙酸乙酯溶液，即為α-香附酮對(duì)照品溶液； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、α-香附酮對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠GF254薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與α-香附酮對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；向所述的硅膠GF254薄層板上噴灑二硝基苯肼試液，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色。
IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為 A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液加入石油醚進(jìn)行洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為2-12∶50；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與石油醚的重量比為50∶30； b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液的pH值為9.0-10.0，得到乳結(jié)泰制劑堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液；所述的乳結(jié)泰制劑堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30； c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到乳結(jié)泰制劑酸性溶液； 向所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到總提取液；所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30； d.向所述的總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留總提取液層，得到洗滌過(guò)的總提取液；再將所述的洗滌過(guò)總提取液的蒸干得到殘?jiān)?；所述的總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20； e.向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到殘?jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶2-12； B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備 a.取野菊花對(duì)照藥材加水煎煮25-40分鐘，濾過(guò)，得到野菊花濾液；將該濾液加入石油醚洗滌處理，保留野菊花濾液層，得到洗滌過(guò)的野菊花濾液；所述的野菊花與水的重量比為0.5-2∶50；所述的野菊花濾液與石油醚的體積比為50∶30； b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花濾液的pH值為9.0-10.0，得到野菊花堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留野菊花堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液；所述的野菊花堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30 c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到野菊花酸性溶液； 向所述的野菊花酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到野菊花總提取液；所述的野菊花酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30； d.向所述的野菊花總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留野菊花總提取液層，得到洗滌過(guò)的野菊花總提取液；再將所述的洗滌過(guò)野菊花總提取液的蒸干得到野菊花殘?jiān)?；所述的野菊花總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20； e.向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到野菊花殘?jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶2-12； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、野菊花進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理、顯色處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與野菊花進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)或一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)； V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.精密配置供試品初級(jí)溶液； b.向所述的供試品初級(jí)溶液中加入正丁醇，進(jìn)行4次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的供試品初級(jí)溶液與每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶20； c.將所述的總進(jìn)行提取處理液蒸干，得到殘?jiān)幌驓堅(jiān)屑尤爰状既芤菏蛊淙芙?，得到殘?jiān)芤海? d.將所述的殘?jiān)芤褐屑尤爰状既芤哼M(jìn)行定容，得到供試品次級(jí)溶液； e.將所述的供試品次級(jí)溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到供試品溶液；所述的過(guò)濾處理采用以0.45μm的微孔濾膜； B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備 以甲醇溶液為溶劑，精密配置成40μg/ml的芍藥苷溶液； C.高效液相色譜法測(cè)定 分別精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液與乳結(jié)泰制劑供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；測(cè)定結(jié)果為每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。
本發(fā)明的有益效果為 1.本發(fā)明采用薄層色譜的方法對(duì)乳結(jié)泰制劑進(jìn)行的瓜蔞進(jìn)行提取物、芍藥苷、α-香附酮、野菊花提取物的定性檢測(cè)；薄層色譜的方法具有分離能力強(qiáng)、靈敏度高、分離速度快、顯色方便等優(yōu)點(diǎn)；且操作簡(jiǎn)便、儀器簡(jiǎn)單。
2.本發(fā)明采用高效液相色譜的方法對(duì)乳結(jié)泰制劑進(jìn)行芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)。高效液相色譜的方法具有分辨率和靈敏度高、分析速度快、重復(fù)性好、定量精度高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。且適于分析高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差的化合物。
3.本發(fā)明采用定性和定量結(jié)合的方法檢測(cè)乳結(jié)泰制劑，確保其質(zhì)量，檢測(cè)方法嚴(yán)謹(jǐn)、數(shù)據(jù)可靠。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 一種乳結(jié)泰制劑，原料中含有瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；每克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于1.55毫克；其質(zhì)量檢測(cè)方法為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為薄層色譜法，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)、α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)、野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法均為薄層色譜法，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)的方法為高效液相色譜法。
檢測(cè)過(guò)程如下 I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-9∶30；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為1-9g，水的用量30ml； b.將所述乳結(jié)泰制劑溶液的離心分離處理，得到上清液；將該上清液用正丁醇進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的離心分離處理中，功率為25-35W，頻率為40KHz，時(shí)間為15-35分鐘，溫度為室溫；所述的上清液與每次提取處理中正丁醇的體積比為30∶30；所述的正丁醇為水飽和的正丁醇；所述的正丁醇的用量為每次30ml； c.將所述的總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25；所述的氨試液每次的用量為30ml、25ml、25ml； 將所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的總提取液層，得到水洗滌過(guò)的總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25；所述的水的用量為每次25ml； 從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到殘?jiān)?；所述的取正丁醇的方法可以為蒸餾； d.將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-9；所述的甲醇的用量為1ml； B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備 a.取瓜蔞對(duì)照藥材加水煎煮2-3小時(shí)，濾過(guò)，得到瓜蔞一級(jí)濾液；所述的瓜蔞與水的重量比為1-6∶150；所述的瓜蔞的用量為1-6g，水的用量為150ml； b.將所述的瓜蔞一級(jí)濾液進(jìn)行濃縮處理，得到瓜蔞濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過(guò)濾，得到瓜蔞二級(jí)濾液；所述的瓜蔞濃縮液和瓜蔞一級(jí)濾液的體積比為20-30∶1；所述的瓜蔞濃縮液與乙醇的體積比為5-7.5∶10；所述的乙醇的用量為10ml； c.將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)铀?，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶1-6；所述的水的用量為20ml； 將瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤河谜〈歼M(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到瓜蔞總提取液；所述的瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤号c每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶30；所述的正丁醇為水飽和的正丁醇；所述的正丁醇的用量為每次30ml； d.將所述的瓜蔞總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的洗滌處理中，瓜蔞總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25；所述的氨試液每次的用量為30ml、25ml、25ml； 將所述的氨試液洗滌過(guò)瓜蔞的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液層，得到水洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25；所述的水的用量為每次25ml； 從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到瓜蔞二級(jí)殘?jiān)凰龅娜≌〈嫉姆椒梢詾檎麴s； e.將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙猓玫焦鲜V進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶1-6；所述的甲醇的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與瓜蔞對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)；所述的薄層色譜檢測(cè)法記載于中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B；所述瓜蔞提取物對(duì)照品溶液的和乳結(jié)泰制劑供試品溶液的體積比為1∶2；所述的瓜蔞提取物的點(diǎn)樣量為5μl，所述的乳結(jié)泰試劑供試品溶液的點(diǎn)樣量為10μl；所述的硅膠G薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為7-28∶1-4∶1.5-6∶0.5-2；所述的檢視在波長(zhǎng)為365nm的紫外燈下進(jìn)行； II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-6∶30；具體的操作為將所述的乳結(jié)泰制劑中加入水后，加熱使其溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液，待該溶液室溫下放冷后再進(jìn)行過(guò)濾處理；所述的乳結(jié)泰試劑的用量為1-6g，所述的水的用量為30ml； b.取一部分所述的乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液作為乳結(jié)泰制劑溶液樣品，向該樣品中加入三氯甲烷，進(jìn)行加熱回流處理之后進(jìn)行冷卻處理，分取水層，得到樣品回流液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的乳結(jié)泰溶液的體積比為30∶20；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的三氯甲烷的體積比為20∶40；所述的加熱回流處理的時(shí)間為30分鐘；所述的冷卻處理方法為在室溫下自然放涼；所述的三氯甲烷的用量為每次40ml； c.將所述的樣品回流液用乙酸乙酯進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的樣品回流液與每次提取處理中乙酸乙酯的體積比為20∶20；所述的乙酸乙酯的用量為每次20ml； d.將所述的總提取液進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮液；向所述的濃縮液中加入中性氧化鋁，攪拌均勻后蒸干乙酸乙酯，得到除乙酸乙酯的濃縮液；所述的濃縮液的體積為所述的總提取液的體積的1/10-1/8；所述的中性氧化鋁與所述的濃縮液的重量比為2∶5；所述的中性氧化鋁的用量為2g； e.將所述的除乙酸乙酯的濃縮液用乙醇進(jìn)行3次洗滌處理，合并每次得到的乙醇洗滌液，得到乙醇總洗滌液；所述的除乙酸乙酯的濃縮液與每次提取處理中乙醇的體積比為5∶10；所述的乙醇的用量為每次10ml； f.將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-6；所述的丙酮的用量為1ml； B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備 取芍藥苷對(duì)照品溶解于乙醇，得到芍藥苷對(duì)照品溶液；該溶液的濃度為1mg/ml。
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、芍藥苷對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與芍藥苷對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)；所述的薄層色譜檢測(cè)法記載于中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B；所述芍藥苷對(duì)照品溶液和乳結(jié)泰制劑供試品溶液的體積比為1∶1；所述芍藥苷對(duì)照品溶液的點(diǎn)樣量為10μl，所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液的點(diǎn)樣量為10μl；硅膠G薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為3.5-14∶1.5-6∶0.5-2；顯色處理的參數(shù)為顯色劑為5％的香草醛硫酸溶液；將所述的硅膠G薄層板噴以顯色劑后，在105℃條件下加熱2-7分鐘，即可檢視結(jié)果； III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2-24∶200；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為2-24g，所述的水的用量為200ml； b.向所述乳結(jié)泰制劑溶液中加入乙酸乙酯，進(jìn)行提取處理2-3小時(shí)，得到乙酸乙酯進(jìn)行提取處理液，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與乙酸乙酯的體積比為200∶1；所述的乙酸乙酯的用量為1ml；具體的操作為所述的乳結(jié)泰制劑放置于500ml的圓底燒瓶中，向該燒瓶中加入水與玻璃珠數(shù)粒，將該乳結(jié)泰制劑、水和玻璃珠混勻，將該燒瓶與揮發(fā)油測(cè)定器連接，自測(cè)定器上端加水至刻度并溢流入該燒瓶為止，再加入乙酸乙酯，連接回流冷凝器；將所述的圓底燒瓶加熱并保持微沸2小時(shí)后在室溫下自然冷卻，取乙酸乙酯層，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液； B.α-香附酮對(duì)照品溶液制備 將α-香附酮溶解于乙酸乙酯，得到α-香附酮的乙酸乙酯溶液，即為α-香附酮對(duì)照品溶液；該溶液的濃度為1mg/ml； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、α-香附酮對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠GF254薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與α-香附酮對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；向所述的硅膠GF254薄層板上噴灑二硝基苯肼試液，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色。所述的薄層色譜檢測(cè)法記載于中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B；所述的α-香附酮對(duì)照品溶液和乳結(jié)泰制劑供試品溶液的體積比為1∶5-10；所述的α-香附酮對(duì)照品溶液的點(diǎn)樣量為1μl，所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液的點(diǎn)樣量為5-10μl；所述的硅膠GF254薄層板的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為4.5-18∶0.5-2；顯色劑為二硝基苯肼試液；所述的檢視在波長(zhǎng)為254nm的紫外燈下進(jìn)行； IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為 A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液加入石油醚進(jìn)行洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為2-12∶50；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與石油醚的重量比為50∶30；所述的石油醚的溫度為60℃-90℃；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為2-12g，所述的水的用量為50ml，所述的石油醚的用量為30ml； b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液的pH值為9.0-10.0，得到乳結(jié)泰制劑堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液；所述的乳結(jié)泰制劑堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30；用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所述的乳結(jié)泰制劑溶液的pH值；所述的乙醚的用量為30ml； c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到乳結(jié)泰制劑酸性溶液；用鹽酸調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液的pH值； 向所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到總提取液；所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30；所述的乙醚的用量為每次30ml； d.向所述的總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留總提取液層，得到洗滌過(guò)的總提取液；再將所述的洗滌過(guò)總提取液的蒸干得到殘?jiān)?；所述的總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20；所述的氫氧化鈉溶液的重量百分比濃度為2％；所述的氫氧化鈉溶液的體積為20ml； e.向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫綒堅(jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶2-12；所述的乙醇的用量為0.5ml； B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備 a.取野菊花對(duì)照藥材加水煎煮25-40分鐘，濾過(guò)，得到野菊花濾液；將該濾液加入石油醚洗滌處理，保留野菊花濾液層，得到洗滌過(guò)的野菊花濾液；所述的野菊花與水的重量比為0.5-2∶50；所述的野菊花濾液與石油醚的體積比為50∶30；所述的石油醚的溫度為60℃-90℃；所述的野菊花的用量為0.5-2g，所述的水的用量為50ml，所述的石油醚的用量為30ml； b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花濾液的pH值為9.0-10.0，得到野菊花堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留野菊花堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液；所述的野菊花堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30；用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所述的野菊花溶液的pH值；所述的乙醚的用量為30ml； c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到野菊花酸性溶液；用鹽酸調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液的pH值； 向所述的野菊花酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到野菊花總提取液；所述的野菊花酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30；所述的乙醚的用量為每次30ml； d.向所述的野菊花總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留野菊花總提取液層，得到洗滌過(guò)的野菊花總提取液；再將所述的洗滌過(guò)野菊花總提取液的蒸干得到野菊花殘?jiān)?；所述的野菊花總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20；所述的氫氧化鈉溶液的重量百分比濃度為2％；所述的氫氧化鈉溶液的體積為20ml； e.向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到野菊花殘?jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶2-12；所述的乙醇的用量為0.5ml； C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、野菊花進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理、顯色處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與野菊花提取物對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相一個(gè)或一個(gè)以上同顏色的斑點(diǎn)；所述的薄層色譜檢測(cè)法記載于中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B；所述的野菊花提取物對(duì)照品溶液和乳結(jié)泰制劑供試品溶液的體積比為1∶5；所述的野菊花提取物對(duì)照品溶液的點(diǎn)樣量為2μl，所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液的點(diǎn)樣量為10μl；所述的硅膠G薄層板的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為2.5-10∶2-8∶0.5-2；所述的顯色劑為茴香醛溶液；顯色的條件為加熱所述的硅膠G薄層板至105℃，直到斑點(diǎn)顯色清晰； V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.精密配置供試品初級(jí)溶液； 具體的操作方法為取所述的裝量差異項(xiàng)下的乳結(jié)泰制劑研磨成細(xì)粉，精密稱定所述的細(xì)粉0.25g，置于具塞錐形瓶中，向該瓶中精密加入水50ml，得到乳結(jié)泰制劑混合液，稱定總重量A； 再將所述的乳結(jié)泰制劑混合液超聲處理30分鐘，放冷至室溫，稱定總重量B，用水補(bǔ)足總重量B與總重量A減少的差量；所述的超聲處理中，功率為25W-35W，頻率為40KHz； 再將補(bǔ)足所述的差量的乳結(jié)泰制劑混合液搖勻，進(jìn)行過(guò)濾處理；在過(guò)濾過(guò)程中棄去最初流出的濾液，精密量取后續(xù)流出的濾液20ml作為供試品初級(jí)溶液； b.向所述的供試品初級(jí)溶液中加入正丁醇，進(jìn)行4次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的供試品初級(jí)溶液與每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶20；所述的正丁醇為水飽和的正丁醇；進(jìn)行提取處理的工具為分液漏斗；所述的正丁醇的用量為每次20ml； c.將所述的總進(jìn)行提取處理液蒸干，得到殘?jiān)?；向殘?jiān)屑尤爰状既芤菏蛊淙芙?，得到殘?jiān)芤海? d.將所述的殘?jiān)芤褐屑尤爰状既芤哼M(jìn)行定容，得到供試品次級(jí)溶液；具體的操作為將所述的殘?jiān)芤憾哭D(zhuǎn)移入10ml量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，得到供試品次級(jí)溶液； e.將所述的供試品次級(jí)溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到供試品溶液；所述的過(guò)濾處理采用以0.45μm的微孔濾膜； B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備 以甲醇溶液為溶劑，精密配置成40μg/ml的芍藥苷溶液；所述的芍藥苷已經(jīng)在80℃條件下干燥處理至恒重；所述的芍藥苷的稱取為精密稱??；所述的甲醇溶液為50％的水溶液； C.高效液相色譜法測(cè)定 分別精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液與乳結(jié)泰制劑供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；測(cè)定結(jié)果為每克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。所述的高效液相色譜法測(cè)定記載于中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D；在所述的高效液相色譜法中，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醛與水的體積比為19-76∶31-124；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于1200。
在本實(shí)施例中，在配制所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液，用于各項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，乳結(jié)泰試劑的重量可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉； 在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的重量可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉； 在利用薄層色譜法進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，所述的各個(gè)展開(kāi)劑中的各個(gè)組分的體積可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉。
本實(shí)施例中配制所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液和各個(gè)對(duì)照品溶液的過(guò)程中，使用的重量單位是克(g)，體積單位是毫升(ml)；本實(shí)施例中進(jìn)行所述的各個(gè)組分的薄層色譜法檢測(cè)和高效液相色譜檢測(cè)的過(guò)程中，點(diǎn)樣及進(jìn)樣用量的體積單位是微升(μl)。
本實(shí)施例中所述的各種對(duì)照藥材和化學(xué)試劑均可以在市場(chǎng)及相關(guān)機(jī)構(gòu)購(gòu)買得到。
本實(shí)施例中所述的提取處理、洗滌處理、蒸干、過(guò)濾中所用的設(shè)備均為常規(guī)設(shè)備，均可以在市場(chǎng)上購(gòu)買得到。
本實(shí)施例中采用薄層色譜(Thin Layer Chromatography，TLC)法進(jìn)行瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)，α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)，野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)；薄層色譜法是具有操作簡(jiǎn)便、儀器簡(jiǎn)單、分離速度快、分離能力強(qiáng)、靈敏度高、顯色方便等優(yōu)點(diǎn)，適用于微量樣品的分離鑒定。一方面，薄層色譜法適用于小量樣品(少到10μg-100μg，甚至0.01μg)的分離；另一方面，若在制作薄層板時(shí)，把吸附層加厚，將樣品點(diǎn)成一條線，則可分離多達(dá)500mg的樣品，因此又可用來(lái)精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。
本實(shí)施例中采用高效液相色譜法進(jìn)行芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)；高效液相色譜法具有如下優(yōu)點(diǎn)高效液相色譜(High Performance LiquidChromatography，HPLC)采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。，高效液相色譜是最為常用的分離和檢測(cè)手段，在有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)與檢測(cè)、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜與傳統(tǒng)的經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)速度快，通常分析一個(gè)樣品在15～30min，有些樣品甚至在5min內(nèi)即可完成；分辨率高，可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果；靈敏度高，紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器可達(dá)0.1pg；色譜柱可反復(fù)使用，用一根色譜柱可分離不同的化合物；樣品量少，容易回收，樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。
所述的乳結(jié)泰制劑的原料包括如下組分，各個(gè)組分的重量比為瓜蔞550，香附(醋灸)550，赤芍200，天南星(制)150，青皮(醋炒)140，陳皮140，半枝蓮340，野菊花340； 所述的乳結(jié)泰制劑的制備方法為 A.原料準(zhǔn)備 a.將所述的香附、青皮、陳皮粉碎成粗粒與野菊花加水浸泡，進(jìn)行蒸餾處理，得到揮發(fā)油、水溶液和藥渣。將所述的揮發(fā)油密封保存，備用。
b.將所述的藥渣與所述的瓜蔞、赤芍、天南星、半枝蓮加水煎煮2次，每次1.5小時(shí)，合并煎液；將該煎液過(guò)濾，得到濾液；將該濾液與所述的水溶液合并，進(jìn)行濃縮處理，得到相對(duì)密度為1.10-1.13(65℃)的清膏； c.向所述的清膏中加入乙醇，使含醇量為60％，攪勻，靜置24小時(shí)后過(guò)濾，得到清膏濾液；回收該清膏濾液中的乙醇，進(jìn)行濃縮處理，得到稠膏，備用； 所述的乳結(jié)泰制劑的劑型包括膠囊、顆粒劑、片劑、口服液劑，配制方法如中國(guó)專利申請(qǐng)02102626.2(公開(kāi)號(hào)CN1429596)中所述；本實(shí)施例中所述的檢測(cè)方法適用于乳結(jié)泰膠囊劑、乳結(jié)泰顆粒劑、乳結(jié)泰片劑、乳結(jié)泰口服液劑。
實(shí)施例2 本實(shí)施例是在實(shí)施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實(shí)施例中，用于所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化； 在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化； 所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化； 本實(shí)施例的操作方法與實(shí)施例1相同； I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為3∶30；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為3g，水的用量30ml； 將所述的殘?jiān)眉状既芙猓玫饺榻Y(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶3；所述的甲醇的用量為1ml； B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備所述的瓜蔞與水的重量比2∶150；所述的瓜蔞的用量為2g，水的用量為150ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶2；所述的水的用量為20ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙猓玫焦鲜V進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶2；所述的甲醇的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為14∶2∶3∶1； II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2∶30；所述的乳結(jié)泰試劑的用量為2g，所述的水的用量為30ml； 將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙猓玫饺榻Y(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶2；所述的丙酮的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為7∶3∶1； III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為8∶200；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為8g，所述的水的用量為200ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為9∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液； IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為4∶50；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為4g，所述的水的用量為50ml； 向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到殘?jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶4；所述的乙醇的用量為0.5ml； B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備 所述的野菊花與水的重量比為1∶50；所述的野菊花的用量為1g，所述的水的用量為50ml； 向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫揭熬栈堅(jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶4；所述的乙醇的用量為0.5ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為5∶4∶1； V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè) 在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為38∶62； 實(shí)施例3 本實(shí)施例是在實(shí)施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實(shí)施例中，用于所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化； 在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化； 所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化； I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1∶30；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為1g，水的用量30ml； 將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1；所述的甲醇的用量為1ml； B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備所述的瓜蔞與水的重量比1∶150；所述的瓜蔞的用量為1g，水的用量為150ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶1；所述的水的用量為20ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙猓玫焦鲜V進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶1；所述的甲醇的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為7.5∶1.5∶2∶1； II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1∶30；所述的乳結(jié)泰試劑的用量為1g，所述的水的用量為30ml； 將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙猓玫饺榻Y(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1；所述的丙酮的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為4∶1∶1； III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2∶200；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為4g，所述的水的用量為200ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為5∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液； IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為2∶50；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為2g，所述的水的用量為50ml； 向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫綒堅(jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶2；所述的乙醇的用量為0.5ml； B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備 所述的野菊花與水的重量比為0.5∶50；所述的野菊花的用量為0.5g，所述的水的用量為50ml； 向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到野菊花殘?jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶0.5；所述的乙醇的用量為0.5ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為3∶2.5∶1； V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè) 在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為20∶30； 實(shí)施例4 本實(shí)施例是在實(shí)施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實(shí)施例中，用于所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化； 在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化； 所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化； I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為9∶30；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為9g，水的用量30ml； 將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶9；所述的甲醇的用量為1ml； B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備所述的瓜蔞與水的重量比6∶150；所述的瓜蔞的用量為6g，水的用量為150ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶9；所述的水的用量為20ml； 將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為9∶1；所述的甲醇的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為27∶3∶5∶1； II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為6∶30；所述的乳結(jié)泰試劑的用量為6g，所述的水的用量為30ml； 將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)粚⑺龅臍堅(jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶6；所述的丙酮的用量為1ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為13∶5∶1； III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為24∶200；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為24g，所述的水的用量為200ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為9∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液； IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè) A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備 a.所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為12∶50；所述的乳結(jié)泰制劑的用量為12g，所述的水的用量為50ml； 向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫綒堅(jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶12；所述的乙醇的用量為0.5ml； B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備 所述的野菊花與水的重量比為2∶50；所述的野菊花的用量為2g，所述的水的用量為50ml； 向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫揭熬栈堅(jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶2；所述的乙醇的用量為0.5ml； C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為9∶7∶1； V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè) 在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為75∶120； 實(shí)施例5 本實(shí)施例為實(shí)施例2的檢測(cè)結(jié)果。
1.2008年1月至3月試制乳結(jié)泰膠囊7批，按提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)含量測(cè)定，結(jié)果如下 由于藥材赤芍產(chǎn)地不同其芍藥苷含量差異較大(可能與氣候、土壤、肥料、種植技術(shù)等因素有關(guān))，此次試制前共測(cè)5批，均高于2005版藥典標(biāo)準(zhǔn)(含量標(biāo)準(zhǔn))，結(jié)果如下 考慮今后大生產(chǎn)中的相關(guān)因素及藥材來(lái)源等情況，此次試制用的藥材選用了川赤(批號(hào)070810-10，含量21.30mg/g) 2.乳結(jié)泰膠囊中芍藥苷含量限度的確定 參考本公司97年、98年、02年、04年、05年試制產(chǎn)品的含測(cè)結(jié)果，列表如下 1997年試制4批，同批藥材，成品含量均值1.87mg/粒； 1998年試制3批，同批藥材，成品含量均值1.97mg/粒； 2002年試制1批，成品含量1.7mg/粒； 2004年試制3批，同批藥材，成品含量均值1.9mg/粒； 2005年試制3批，同批藥材，成品含量均值2.17mg/粒； 2008年試制7批，同批藥材，成品含量均值2.02mg/粒； 依上述數(shù)據(jù)，考慮到大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，選用含量中等的川赤藥材(符合2005版藥典標(biāo)準(zhǔn))及工藝損失等因素，可確定乳結(jié)泰膠囊中赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.85mg/粒(較原標(biāo)準(zhǔn)提高了0.3)。
乳結(jié)泰膠囊含量測(cè)定 實(shí)驗(yàn)時(shí)間2008年1月25日至30日 實(shí)驗(yàn)操作員陳一 42.8μg/ml芍藥苷對(duì)照品測(cè)得A＝519552 樣品批號(hào)20080101 A1＝492020A2＝49993A＝49697
樣品批號(hào)20080103 A＝500901
樣品批號(hào)20080104 A1＝515311A2＝471571A＝493441
樣品批號(hào)20080106 A＝439023.5
42.8μg/ml芍藥苷對(duì)照品測(cè)得A＝531150 樣品批號(hào)20080102 A1＝534703A2＝506968A＝520835.5
42.8μg/m l芍藥苷對(duì)照品測(cè)得A＝512585.5 樣品批號(hào)20080105 A1＝290605A2＝305082A＝297843.5
樣品批號(hào)20080107 A＝162413


權(quán)利要求
1.一種乳結(jié)泰制劑，原料中包括瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花，其特征在于，每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含有赤芍按芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于1.55毫克。
2.一種乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，原料中包括瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于1.55毫克，其特征在于所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法所檢測(cè)項(xiàng)目為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)，α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)，野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)項(xiàng)目，其特征在于，采用的檢測(cè)方法為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)、α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)、野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法均為薄層色譜法，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)的方法為高效液相色譜法。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的各項(xiàng)檢測(cè)的過(guò)程為
I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-9∶30；
b.將所述乳結(jié)泰制劑溶液離心分離處理，得到上清液；將該上清液用正丁醇進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的上清液與每次提取處理中正丁醇的體積比為30∶30；
c.將所述的總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25；
將所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的總提取液層，得到水洗滌過(guò)的總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25；
從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到殘?jiān)?br> d.將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-9；
B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備
a.取瓜蔞對(duì)照藥材加水煎煮2-3小時(shí)，濾過(guò)，得到瓜蔞一級(jí)濾液；所述的瓜蔞與水的重量比為1-6∶150；
b.將所述的瓜蔞一級(jí)濾液進(jìn)行濃縮處理，得到瓜蔞濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過(guò)濾，得到瓜蔞二級(jí)濾液；所述的瓜蔞濃縮液和瓜蔞一級(jí)濾液的體積比為20-30∶1；所述的瓜蔞濃縮液與乙醇的體積比為5-7.5∶10；
c.將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶1-6；
將瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤河谜〈歼M(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到瓜蔞總提取液；所述的瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤号c每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶30；
d.將所述的瓜蔞總提取液用氨試液進(jìn)行3次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的洗滌處理中，瓜蔞總提取液與第一次洗滌處理時(shí)氨試液的體積比為60∶30；所述的3次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為30∶25∶25；
將所述的氨試液洗滌過(guò)瓜蔞的總提取液用水進(jìn)行2次洗滌處理，保留氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液層，得到水洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液；所述的氨試液洗滌過(guò)的瓜蔞總提取液與每次洗滌處理中水的體積比為60∶25；
從所述的水洗滌過(guò)的總提取液中取正丁醇液；將所述的正丁醇液蒸干，得到瓜蔞二級(jí)殘?jiān)?br> e.將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶1-6；
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與瓜蔞對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1-6∶30；
b.取一部分所述的乳結(jié)泰制劑過(guò)濾液作為乳結(jié)泰制劑溶液樣品，向該樣品中加入三氯甲烷，進(jìn)行加熱回流處理之后進(jìn)行冷卻處理，分取水層，得到樣品回流液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的乳結(jié)泰溶液的體積比為30∶20；所述的乳結(jié)泰制劑溶液樣品與所述的三氯甲烷的體積比為20∶40；
c.將所述的樣品回流液用乙酸乙酯進(jìn)行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的樣品回流液與每次提取處理中乙酸乙酯的體積比為20∶20；
d.將所述的總提取液進(jìn)行濃縮處理，得到濃縮液；向所述的濃縮液中加入中性氧化鋁，攪拌均勻后蒸干乙酸乙酯，得到除乙酸乙酯的濃縮液；所述的濃縮液的體積為所述的總提取液的體積的1/10-1/8；所述的中性氧化鋁與所述的濃縮液的重量比為2∶5；
e.將所述的除乙酸乙酯的濃縮液用乙醇進(jìn)行3次洗滌處理，合并每次得到的乙醇洗滌液，得到乙醇總洗滌液；所述的除乙酸乙酯的濃縮液與每次提取處理中乙醇的體積比為5∶10；
f.將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)粚⑺龅臍堅(jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1-6；
B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備
取芍藥苷對(duì)照品溶解于乙醇，得到芍藥苷對(duì)照品溶液；該溶液的濃度為1mg/ml；
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、芍藥苷對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與芍藥苷對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯1個(gè)相同顏色的熒光斑點(diǎn)；
III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2-24∶200；
b.向所述乳結(jié)泰制劑溶液中加入乙酸乙酯，進(jìn)行提取處理2-3小時(shí)，得到乙酸乙酯進(jìn)行提取處理液，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與乙酸乙酯的體積比為200∶1；
B.α-香附酮對(duì)照品溶液制備
將α-香附酮溶解于乙酸乙酯，得到α-香附酮的乙酸乙酯溶液，即為α-香附酮對(duì)照品溶液；
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、α-香附酮對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠GF254薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與α-香附酮對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；向所述的硅膠GF254薄層板上噴灑二硝基苯肼試液，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色；
IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.取所述的乳結(jié)泰制劑，加水溶解，得到乳結(jié)泰制劑溶液；將該溶液加入石油醚進(jìn)行洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液；所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為2-12∶50；所述的乳結(jié)泰制劑溶液與石油醚的重量比為50∶30；
b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑溶液的pH值為9.0-10.0，得到乳結(jié)泰制劑堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留乳結(jié)泰制劑堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液；所述的乳結(jié)泰制劑堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30；
c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的乳結(jié)泰制劑堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到乳結(jié)泰制劑酸性溶液；
向所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到總提取液；所述的乳結(jié)泰制劑酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30；
d.向所述的總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留總提取液層，得到洗滌過(guò)的總提取液；再將所述的洗滌過(guò)的總提取液蒸干得到殘?jiān)?；所述的總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20；
e.向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到殘?jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶2-12；
B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備
a.取野菊花對(duì)照藥材加水煎煮25-40分鐘，濾過(guò)，得到野菊花濾液；將該濾液加入石油醚洗滌處理，保留野菊花濾液層，得到洗滌過(guò)的野菊花濾液；所述的野菊花與水的重量比為0.5-2∶50；所述的野菊花濾液與石油醚的體積比為50∶30；
b.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花濾液的pH值為9.0-10.0，得到野菊花堿性溶液；將該溶液用乙醚洗滌處理，保留野菊花堿性溶液層，得到洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液；所述的野菊花堿性溶液與乙醚的體積比為50∶30；
c.調(diào)節(jié)所述的洗滌過(guò)的野菊花堿性溶液的pH值為4.0-5.0，得到野菊花酸性溶液；
向所述的野菊花酸性溶液中加入乙醚進(jìn)行2次提取處理，合并每次的提取液，得到野菊花總提取液；所述的野菊花酸性溶液與每次提取處理中乙醚的體積比為50∶30；
d.向所述的野菊花總提取液中加入氫氧化鈉溶液，進(jìn)行洗滌處理，保留野菊花總提取液層，得到洗滌過(guò)的野菊花總提取液；再將所述的洗滌過(guò)的野菊花總提取液蒸干得到野菊花殘?jiān)?；所述的野菊花總提取液與氫氧化鈉溶液的體積比為60∶20；
e.向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到野菊花殘?jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶2-12；
C.薄層色譜法檢測(cè)吸取所述的乳結(jié)泰制劑供試品溶液、野菊花進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，進(jìn)行展開(kāi)處理、顯色處理，并檢視；檢視的結(jié)果為乳結(jié)泰制劑供試品溶液色譜中，在與野菊花進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)或一個(gè)以上相同顏色的斑點(diǎn)；
V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.精密配置供試品初級(jí)溶液；
b.向所述的供試品初級(jí)溶液中加入正丁醇，進(jìn)行4次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的供試品初級(jí)溶液與每次提取處理中正丁醇的體積比為20∶20；
c.將所述的總提取液取處理液蒸干，得到殘?jiān)?；向殘?jiān)屑尤爰状既芤菏蛊淙芙?，得到殘?jiān)芤海?br> d.將所述的殘?jiān)芤褐屑尤爰状既芤哼M(jìn)行定容，得到供試品次級(jí)溶液；
e.將所述的供試品次級(jí)溶液進(jìn)行過(guò)濾處理，得到供試品溶液；所述的過(guò)濾處理采用以0.45μm的微孔濾膜；
B.芍藥苷對(duì)照品溶液制備
以甲醇溶液為溶劑，精密配置成40μg/ml的芍藥苷溶液；
C.高效液相色譜法測(cè)定
分別精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液與乳結(jié)泰制劑供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；測(cè)定結(jié)果為每0.5克乳結(jié)泰制劑中，含赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化；
在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化；所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化
I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為3∶30；將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶3；
B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備
所述的瓜蔞與水的重量比2∶150；將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶2；
將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶2；
C.薄層色譜法檢測(cè)
所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為14∶2∶3∶1；
II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2∶30；將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶2；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為7∶3∶1；
III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為8∶200；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為9∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液；
IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為4∶50；
向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到殘?jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶4；
B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備
所述的野菊花與水的重量比為1∶50；
向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到野菊花殘?jiān)囊掖既芤海礊橐熬栈▽?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶4；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為5∶4∶1；
V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)
在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為38∶62。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化；
在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化；所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化
I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1∶30；
將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1；
B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備所述的瓜蔞與水的重量比1∶150；
將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶1；
將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為1∶1；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為7.5∶1.5∶2∶1；
II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為1∶30；
將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶1；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為4∶1∶1；
III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為2∶200；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為5∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液；
IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為2∶50；
向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙?，得到殘?jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶2；
B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備
所述的野菊花與水的重量比為0.5∶50
向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫揭熬栈堅(jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶0.5；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為3∶2.5∶1；
V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)
在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為20∶30。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的乳結(jié)泰制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述的各項(xiàng)檢測(cè)的乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備過(guò)程中，乳結(jié)泰制劑的用量進(jìn)一步優(yōu)化；
在配制所述的瓜蔞提取物對(duì)照品溶液、野菊花提取物對(duì)照品溶液用于檢測(cè)時(shí)，瓜蔞對(duì)照藥材、野菊花對(duì)照藥材的取樣量進(jìn)一步優(yōu)化；所述的各項(xiàng)檢測(cè)中，所述的各種展開(kāi)劑的組分配比進(jìn)一步優(yōu)化
I.瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為9∶30；
將所述的殘?jiān)眉状既芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述甲醇的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶9；
B.瓜蔞提取物對(duì)照品溶液制備所述的瓜蔞與水的重量比6∶150；
將所述的瓜蔞二級(jí)濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)?，加水，得到瓜蔞一級(jí)殘?jiān)芤?；所述的水與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為20∶9；
將所述的瓜蔞二級(jí)殘?jiān)眉状既芙?，得到瓜蔞進(jìn)行提取處理物對(duì)照品溶液；所述的甲醇與瓜蔞對(duì)照藥材的重量比為9∶1；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸的體積比為27∶3∶5∶1；
II.芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為6∶30；
將所述的乙醇總提取液進(jìn)行過(guò)濾處理后蒸干，得到殘?jiān)?；將所述的殘?jiān)帽芙?，得到乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述丙酮的與乳結(jié)泰制劑的重量比為1∶6；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯的體積比為13∶5∶1；
III.α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
所述的乳結(jié)泰制劑與水的重量比為24∶200；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，甲苯、乙酸乙酯的體積比為9∶1；顯色劑為二硝基苯肼試液；
IV.野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)
A.乳結(jié)泰制劑供試品溶液制備
a.所述的乳結(jié)泰制劑與水的用量比為12∶50；
向所述的殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫綒堅(jiān)囊掖既芤?，即為乳結(jié)泰制劑供試品溶液；所述的乙醇與乳結(jié)泰制劑的重量比為0.5∶12；
B.野菊花提取物對(duì)照品溶液制備
所述的野菊花與水的重量比為2∶50
向所述的野菊花殘?jiān)屑尤胍掖际蛊淙芙猓玫揭熬栈堅(jiān)囊掖既芤?，即為野菊花?duì)照品溶液；所述的乙醇與野菊花對(duì)照藥材的重量比為0.5∶2；
C.薄層色譜法檢測(cè)所述的展開(kāi)處理中，所述的展開(kāi)劑為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸混合溶液，該混合溶液中，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸的體積比為9∶7∶1；
V.芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)
在所述的高效液相色譜法中，甲醇-水為流動(dòng)相，甲醇與水的體積比為75∶120。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供一種乳結(jié)泰制劑及其質(zhì)量檢測(cè)方法；該制劑原料中含有瓜蔞、香附、赤芍、天南星、青皮、陳皮、半枝蓮、野菊花；檢測(cè)方法所檢測(cè)項(xiàng)目為瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)，α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)，野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)；所述的每0.5克乳結(jié)泰制劑中赤芍按芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于1.55毫克。瓜蔞提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法為薄層色譜法，芍藥苷鑒別對(duì)照檢測(cè)、α-香附酮鑒別對(duì)照檢測(cè)、野菊花提取物鑒別對(duì)照檢測(cè)的方法均為薄層色譜法，芍藥苷含量對(duì)照檢測(cè)的方法為高效液相色譜法。本發(fā)明采用定性和定量結(jié)合的方法檢測(cè)乳結(jié)泰制劑，確保質(zhì)量，檢測(cè)方法嚴(yán)謹(jǐn)、數(shù)據(jù)可靠。
文檔編號(hào)A61P15/14GK101317935SQ20081011704
公開(kāi)日2008年12月10日 申請(qǐng)日期2008年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月23日
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