專利名稱：支鏈脂肪酸類化合物及其衍生物用于防治缺血再灌注損傷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以末端支鏈脂肪酸類化合物及其衍生物為有效成份的抗組織器官缺血與 再灌注損傷的藥物，及其在心腦血管疾病治療領(lǐng)域的用途。
背景技術(shù)：
人體的組織或器官在長時間的缺血及其后的再灌注都可造成缺血區(qū)組織的損傷甚至壞 死。缺血通常是導(dǎo)致組織缺氧和缺乏能量物質(zhì)供應(yīng)的直接原因。對于大腦，心臟等耗氧量大， 對能量物質(zhì)敏感的器官來說，缺血時間的長短通常是確定其損傷是否可逆的決定因素。以急 性腦梗塞為例，神經(jīng)組織最初主要為缺血性損傷，隨著缺血時間的延長，再灌注后通常會進 一步表現(xiàn)出更嚴重的神經(jīng)組織和功能的損傷，即再灌注損傷。在缺血的中心區(qū)隨時間延長出 現(xiàn)不可逆的損傷和壞死。只有在缺血的周邊區(qū)域(半暗帶)，因為側(cè)支循環(huán)及周圍供血正常組 織的血氧的滲透，其損傷較輕，是可逆的，理論上在組織恢復(fù)供血后有可能恢復(fù)細胞功能， 但由于再灌注損傷作用，在血管再通后半暗帶組織的功能仍難以恢復(fù)。因此，在心腦血管缺 血性疾病的治療，不僅需要盡快恢復(fù)供血(再灌注)，也需要應(yīng)用藥物預(yù)防和保護組織免受再 灌注的損傷。
心腦血管的缺血性疾病多數(shù)是由于血管內(nèi)皮損傷后血栓形成或遠處的血栓脫落后梗塞造 成的，如急性心梗(AMI )和腦卒中。但所謂的"缺血"可以是更廣義的概念，如血液低灌流 狀態(tài)(如休克)也能產(chǎn)生相同的現(xiàn)象。因此，再灌注損傷可以涉及心、腦、肝、腎、肺、消 化道等許多的組織和器官，其后果可以導(dǎo)致相關(guān)組織和器官的損傷和壞死及功能衰竭，有嚴 重的后遺癥和很高的死亡率。但目前臨床尚無防治藥物。因此研發(fā)抗缺血再灌注損傷的藥物 是非常必須的。
缺血再灌注損傷也可以發(fā)生于外科手術(shù)和組織器官的移植手術(shù)后的血流的再通。如心臟 手術(shù)過程中應(yīng)用體外循環(huán)技術(shù)，對心臟的控制缺血和再灌注，難以避免對心臟造成損傷。其 它如心、肝、腎移植時，器官經(jīng)過一段時間的缺血后血流的再通，也有缺血再灌注損傷的問題。
缺血再灌注損傷不管是發(fā)生在腦、心或其它器官，通常導(dǎo)致的損傷和損傷的病理機制有 許多共同點(1)缺血再灌注損傷引起組織細胞的凋亡和壞死；(2)微血管內(nèi)皮細胞水肺及 中性粒細胞的附壁堵塞造成再灌注期間的無復(fù)流現(xiàn)象；(3)白細胞往缺血部位趨化，聚集， 并誘導(dǎo)致炎因子產(chǎn)生；(4)局部氧自由基產(chǎn)生過多，細胞膜脂質(zhì)過氧化，細胞膜損傷，組織 水腫；(5)細胞內(nèi)鈣超栽等。缺血再灌注損傷是一個相互關(guān)聯(lián)的多步驟多機制的級聯(lián)過程。目前針對缺血再灌注損傷的病理機制的各環(huán)節(jié)的保護藥物有(1 )釣通道阻斷藥，如尼莫地 平；(2)穩(wěn)定細胞膜藥物，如胞磷膽堿；(3)抗氧自由基生成及自由基捕獲劑，如維生素E;
(4 )抑制興奮性氨基酸毒性作用藥，如谷氨酸受體拮抗藥苯環(huán)立啶。這些藥物在動物模型實 驗中都有明顯的抗缺血再灌注損傷作用，但臨床療效都不滿意。可能跟它們的作用機制單一， 不能對抗缺血再灌注損傷的多種機制和多步驟有關(guān)，有人主張使用多種作用機制不同的藥物 組合來治療以提高療效。因此研發(fā)具有多種作用機制的抗缺血再灌注損傷藥物有可能能克服
目前無治療效果好的藥物的缺點。
本發(fā)明描述的末端支鏈的脂肪酸是一類不能經(jīng)線粒體P -氧化代謝的脂肪酸，人體內(nèi)不 能合成，只有微量隨食物進入人體中。其中的12-甲基-十四烷酸和13-甲基-十四烷酸在自然 界中存在于多種細菌的細胞膜中，是維持細菌細胞膜功能的重要成份(Satio K.等，J. Biochem. ， 1960， 47:699-719 )。 1996年Faung ST[Faung ST.等，血4全研究，Throrab. Res.， 1996, 81 (1): 91-100]報道此化合物高濃度時能引起聚集的血小板溶解，低濃度時抑制血小板 的聚集和粘附功能。抑制血小板聚集和活化，從而降低血液粘滯度改善缺血組織微循環(huán)，減 輕再灌注時的無復(fù)流現(xiàn)象，對缺血再灌注損傷起保護作用。同時也能防止血流灌通后的再狹 窄。
Lindstr5m等[Lindstr'c3m等，2006, 8 ( 41 ); 4792-4797]用核磁共振法和差示掃描測熱 法發(fā)現(xiàn)12-曱基-十四烷酸和13-甲基-十四烷酸能摻入到生物膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)中，使膜的穩(wěn)定 性增加，減少跨膜擴散速度。而缺血再灌注損傷組織的血管內(nèi)皮細胞的通透性增加和水腫， 組織細胞的水腫及細胞內(nèi)鈣超載都跟細胞膜的通透性增加有關(guān)。具有膜穩(wěn)定作用的此類化合 物擬有保護缺血再灌注損傷的作用。
此夕卜，Ishida-Okawara等[Ishida-Okawara等，J Antibio. (Tokyo), 1991, 44 (5): 524-532] 發(fā)現(xiàn)12-甲基-十四烷酸能抑制多形核白細胞釋放髓過氧化物酶(MPO),并減少氧自由基的產(chǎn) 生，降低MPO活性能有效減少中性粒細胞浸潤，減輕炎癥反應(yīng)，進而改善微循環(huán)狀況，減少組 織損傷。Yang P等[Yang P等，Prostate, 2003， 55 (4): 281-291]報道此類化合物還能抑制 5-脂氧合酶活性，對膜磷脂代謝過程中的5-脂氧合酶的抑制，能減少白三烯類致炎因子的產(chǎn) 生，有抗炎作用，對減輕缺血再灌注損傷的組織炎癥反應(yīng)有益。
綜合上述文獻報道，說明此類化合物在血管內(nèi)能抑制血小板和白細胞功能，又有血管外 的組織細胞的膜穩(wěn)定作用和抑制5-脂氧合酶活性作用，能減輕細胞膜的通透性，減輕水腫及 炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為多靶點多環(huán)節(jié)的保護作用。本發(fā)明的研究證明此類化合物具有很好的抗缺 血再灌注損傷作用。
此類化合物對實驗動物無嚴重的毒性作用，Klein[Klein RA.等，Lipids, 1980,
15 (8): 572-579]給大鼠連續(xù)給藥25天后，與對照組比較體重?zé)o明顯變化，肝臟脾臟腦及
脂肪等組織亦無明顯病理變化。Pittet等[Pittet PG.等，Proc. Nutri. Soc. ， 1977， 36: 116A]
給志愿者給藥未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)。我們的實驗表明給動物最大耐受劑量5g/kg體重，均不引起動物死亡。說明此類化合物有和好的用藥安全性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要內(nèi)容是揭示一類具有末端支鏈的飽和和不飽和脂肪酸及其衍生物，其通式 如下(I, II, III )結(jié)構(gòu)。
<formula>formula see original document page 6</formula>
其中n是0 ~ 18的整數(shù)，m是0 ~ 2a的偶整數(shù)，a是結(jié)構(gòu)允許的不飽和雙鍵個數(shù)，雙鍵 個數(shù)為0~8。末端基團必須是異丙基或仲丁基或叔丁基。
其中Ri是以下基團或結(jié)構(gòu)之一 -OH，即為飽和或不飽和脂肪酸。
-冊2,-氨基酸，-葡萄糖。通過結(jié)構(gòu)允許的任意位置與?；纬甚０锋I或酯鍵連接。 -0Na,-0K，即為脂肪酸的鈉鹽和鉀鹽，也可以是藥學(xué)上允許的其它鹽。
-0CH3， -OC2H5, -OC3H7, -OC4H9, -OCsHii，即為飽和或不飽和脂肪酸的醇酯，其中的丙 酉旨、丁酯和戊酯可以是任意的異構(gòu)體，如丙酯和異丙酯；正丁酯、異丁酯和仲丁酯；正 戊酯、異戊酯、叔戊酯和仲戊酯。與短碳鏈的醇形成的脂肪酸酯多為熔點較低的油狀物， 易嵌入到生物膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)中，4吏膜的穩(wěn)定性增加。
-丙三醇，-丙二醇，?；c醇的任意羥基形成的酯，如與甘油形成甘油一酯或甘油二酯 或甘油三酉旨。
本發(fā)明的化合物也存在于自然界中多種細菌和真菌的細胞膜組份中，可以通過生物發(fā)酵 的方法大量生產(chǎn)，從中提取到支鏈脂肪酸。也可以通過化學(xué)合成的方法制備。
本發(fā)明的化合物可制成片劑、膠嚢劑、顆粒劑和丸劑等供口服給藥，也可以制成油溶液， 混懸液，以及微乳劑，脂肪乳劑等供注射給藥。注射給藥尤其是靜脈注射或靜脈滴注給藥是 更合適的臨床用藥方法，因腦卒中或心梗病人病情急，口服給藥有困難且吸收較慢。本發(fā)明 的化合物有些為油狀物，可以與營養(yǎng)成分如油，卵磷脂，甘油和水乳化成穩(wěn)定的脂肪乳劑， 通過脂肪乳載體可以靜脈注射安全快速給藥。其中脂肪乳劑中的油可以是大豆油，魚油，橄 欖油等中長鏈脂肪酸酯，也可以是人工合成中長鏈脂肪酸酯。本發(fā)明的化合物可以用于治療腦缺血與再灌注損傷，所指的腦缺血疾病常見的是局部腦 動脈血管內(nèi)血栓梗塞，臨床上目前的治療方法是用藥物溶栓，如用組織型纖溶酶原激活劑或 尿激酶，鏈激酶等。使堵塞的血管再通，但再灌注會造成進一步的損傷，本發(fā)明的化合物能 防治缺血后的再灌注損傷，使腦神經(jīng)運動功能障礙和認知功能障礙的得到部分恢復(fù)，減少腦 卒中的病死率和后遺癥。
本發(fā)明的化合物也能用于腦供血不足后再灌注的損傷保護，如外科進行頸動脈內(nèi)皮切除 術(shù)時控制性阻斷血流后再通對腦組織的損傷保護。以及心臟停跳和心肺復(fù)蘇術(shù)造成的腦缺血 與再灌注損傷的保護。用法為再灌注的同時或之前給藥， 一般給藥一次，需要時也可以多次 給藥。
本發(fā)明的化合物用于急性心梗后血管再通時減少再灌注損傷，能減小心肌梗塞面積及減 輕快速性心率失常的發(fā)生率。也用于心臟體外循環(huán)后再灌注對心肌的保護作用。
本發(fā)明的化合物可用于肺、肝、腎、視網(wǎng)膜和消化道等手術(shù)時控制性阻斷血流后再灌注 損傷的保護，及組織器官的移植過程中的缺血與再灌注損傷的保護。
本發(fā)明的化合物不僅對其溶栓治療后血流再通時的缺血與再灌注損傷有保護作用，還能 減少血管復(fù)通后再梗塞的發(fā)生率。
本發(fā)明的化合物通過多靶點作用，對缺血與再灌注損傷的病理過程多步驟的阻斷作用表 現(xiàn)出很強的抗缺血與再灌注損傷作用，比單一作用機制的藥物有更好的治療效果。
具體實施例方式
實施例1: 13-曱基-十四烷酸的合成
將十二烷二酸單甲酯139克，異戊酸56克，金屬鈉O. 65克，在無水曱醇1400ml, 2A的 直流電流下進行電解反應(yīng)，直至反應(yīng)液呈堿性，蒸除曱醇，水洗，真空分餾，得13-曱基-十 四烷酸甲酯21克。將上述用10°/。NaOH 54ml，曱醇60ml，回流2小時，蒸除曱醇，用10%HC1 調(diào)至1)11=2,冷卻過濾，水洗至中性，得白色固體，真空分餾，乙醇重結(jié)晶，得13-甲基-十四 烷酸"克。把13-甲基-十四烷酸14克加入圓底燒瓶中，加40ml異丙醇和lml的濃硫酸， 加熱至90。C回流2小時，蒸除多余的異丙醇，真空分餾得13-甲基-十四烷酸異丙酯14克。
實施例2: 13-曱基-十四烷酸異丙酯脂肪乳注射液的制備
6°/。13-甲基-十四烷酸異丙酯20%脂肪乳注射液處方組成 注射用大豆油200 g、 13-曱基-十四烷酸異丙酯60 g、注射用卵磷脂12 g、注射用甘油25 g、注射用水加至1000 mL。
含藥脂肪乳注射液制備工藝為稱取處方量的大豆油和藥物于配液鍋內(nèi)，用高速搗碎機 混合均勻，加熱至80 。C,加入卵磷脂，高速搗碎至完全溶解，使成均勻澄清溶液。另取處 方量注射用水加入甘油，置另一配液鍋內(nèi)，在氮氣保護的奈件下攪拌混合均勻，加熱至60 。C。在高速攪拌下將含藥磷脂油溶液緩緩加入甘油水溶液中，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至約8. 0。經(jīng) 高壓均質(zhì)機反復(fù)均質(zhì)至粒子在0. 5 um左右(均質(zhì)溫度60 °C,均質(zhì)壓力20MPa)，用l ym 微孔濾膜過濾，灌裝于輸液瓶中，通入氮氣，加丁基膠塞，鋁蓋密封。110 。C旋轉(zhuǎn)滅菌30min, 即得。
制備工藝的驗證和產(chǎn)品穩(wěn)定性用制備工藝制備5批樣品，按中/長鏈脂肪乳注射液質(zhì)量 標準檢測，各項指標符合規(guī)定。取上述5批樣品25 °C留樣觀察8個月，除PH值稍有下降外， 其余各項指標無明顯變化，均符合質(zhì)量標準的要求。
實施例3: 13-曱基-十四烷酸和13-曱基-十四烷酸異丙酯對局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模 型影響
模型制備大鼠線栓法急性大腦中動脈缺血再灌注損傷模型(參照Longa的方法制備)。 大鼠用2 %戊巴比妥鈉(40 mg/kg，ip)麻醉后分離頸部各動脈，將直徑為0.205 mm的尼龍線 自右頸外動脈插入右頸內(nèi)動脈，緩慢向前推進約(18. 5 ± 0. 5) mm (自分叉部計)，至遇阻力為 止，制成大腦中動脈栓塞模型(MCAO)。缺血2 h后，在麻醉狀態(tài)下拔出栓線，形成再灌注，同 時給藥或給溶劑。動物在術(shù)中及術(shù)后麻醉清醒前給予保溫。模型成功的標志為動物清醒后出 現(xiàn)以左前肢為主的偏癱。拔線后未出現(xiàn)神經(jīng)功能缺失體征或2 h內(nèi)死亡者剔除。
腦梗死體積測定再灌24 h時迅速斷頭取腦，冠狀位切片，2 % TTC染色。梗死區(qū)呈白 色，非梗死區(qū)呈紅色。將染色結(jié)果攝像輸入計算機，用AutoCAD圖像分析軟件計算腦梗死體積 占全腦的比例(％)。(結(jié)果見表1 )
腦水腫測定模型大鼠再灌注24 h斷頭取腦，用濾紙吸干表面水分，分離損傷腦半球， 稱量腦濕重，125。C烘烤48小時至恒重，精確稱量干重，計算腦含水量。腦含水量=(濕重-干重)/濕重x 100%。(結(jié)果見表1 )
神經(jīng)病學(xué)評價按Longa 5分制評分標準，術(shù)后評1 ~ 3分者為手術(shù)成功標志；0分無明 顯神經(jīng)病學(xué)癥狀；1分不能完全伸展左前肢；2分向左側(cè)旋轉(zhuǎn)；3分:行走時向左側(cè)傾倒；4分 不能自行行走。(結(jié)果見表l)表1 13-甲基-十四烷酸和13-甲基-十四烷酸異丙酯對局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模型的腦梗塞體
積和神經(jīng)病學(xué)的影響
組別劑量動物腦梗塞體積占大腦右半球行為評分
數(shù)(n)整個腦組織(W含水量(%)
假手術(shù)組7078. 2 ± 0. 90
溶劑對照組2ml/kg720. 5 ± 4. 882. 9 ± 1. 3##1.7 ±0.5
13-甲基十四烷酸10mg/kg77. 8 ±2. 6**80. 7 ± 1. 2*0. 7 ± 0. 5*
13-曱基十四烷酸40mg/kg73. 5 ± 1. 2**78. 9 ± 1. 4**0. 1 ± 0. 4*
13-甲基十四烷酸80mg/kg74. 6±1. 8**79. 2±1. 7**0**
13-曱基十四烷酸15mg/kg78. 1 ± 3. 0**80. 4 ± 1. 5*0. 1 ± 0. 4**
異丙酯
13-甲基十四烷酸60mg/kg72.8±1. 1**78. 8 ± 1. 0**0**
異丙酯
與溶劑對照組比tp〈0. 05, **p<0. 01.與fli手術(shù)組比Hp〈0. 01
血腦屏障通透性的測定 以2 %伊文思藍(Evan， s blue , EB)作為示蹤劑，檢測血 腦屏障的損傷程度。動物再灌后2 h ，尾靜脈注入2 % EB 2 ml/kg,處死時迅速取右側(cè)損傷區(qū) 腦組織和左側(cè)對應(yīng)區(qū)域腦組織，甲酰胺溶液中孵育24 h ,紫外分光光度計比色，以每克腦組織 濕重所含EB(jug/g濕重)量表示血腦屏障通透性。(見表2)
表2 13-甲基-十四烷酸對局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠模型的血腦屏障通透性影響
組別劑量動物數(shù)(n)EB含量()ag/g濕重)
假手術(shù)組52. 0± 0. 8
溶劑對照組2ml/kg8. 5 ± 2. 3
13-甲基十四烷酸10mg/kg54. 8 ±2. 1**
13-甲基十四烷酸40rag/kg53. 2 ± 1. 2**
與溶劑對照組比**p<0. 01.與布支手術(shù)組比《p<0. 01
腦細胞形態(tài)學(xué)觀察再灌24h時，速斷頭取腦，取視交叉至漏斗柄的腦冠狀切片，置10% 福爾馬林中固定，常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋等步驟，腦組織冠狀切片作蘇木素(hematoxylin) 和伊紅(eosin) —HE染色，觀察腦形態(tài)學(xué)變化和正常錐體神經(jīng)元密度計數(shù)。
對損傷側(cè)腦組織形態(tài)學(xué)的影響腦組織的大體觀假手術(shù)組，兩側(cè)大腦體積相近，顏色 一致，質(zhì)韌。CIRI24h，溶劑對照組，患側(cè)大腦體積增大，腦回扁平，損傷區(qū)顏色發(fā)白，質(zhì)脆；切面腦白質(zhì)增大，皮質(zhì)受擠壓，皮質(zhì)和白質(zhì)分界不清。中劑量和高劑量藥物組，大腦兩側(cè)無 明顯差別，與假手術(shù)組相近。鏡下觀假手術(shù)組，皮層神經(jīng)細胞排列整齊，分布均勻，層次
清楚，大小一致，胞膜完整,胞漿均勻，核膜清楚，染色質(zhì)顆粒細小均勻，有一小核仁；基底 節(jié)神經(jīng)纖維致密、清晰，結(jié)構(gòu)完整。CIRI24h溶劑對照;漠型組，大腦皮質(zhì)部分細胞消失，數(shù) 目減少，排列紊亂，細胞體積大小不一，形態(tài)不規(guī)則，有呈三角形、菱形和不MJ'j形，胞核 深染，大小形態(tài)不一，核膜不清，核仁不明顯，中心區(qū)域出現(xiàn)壞死；星形膠質(zhì)細胞增生，膠 質(zhì)結(jié)節(jié)形成，血管擴張充血，其周圍出現(xiàn)空暈，間質(zhì)疏松，呈網(wǎng)狀改變等；基底節(jié)液化性壞 死，篩狀軟化灶形成。小劑量組患側(cè)皮層神經(jīng)細胞稍小，形態(tài)基本正常，排列稍紊亂，核略深 染，核膜清楚，間質(zhì)疏松;基底節(jié)輕度液化性壞死，初始軟化灶形成。中劑量和高劑量組皮層 神經(jīng)細胞排列整齊，形態(tài)正常，與假手術(shù)組無明顯區(qū)別；基底節(jié)神經(jīng)纖維基本正常，未見軟 化灶形成，但有間質(zhì)疏松。
實施例4: 13-曱基-十四烷酸異丙酯對離體大鼠心臟缺血再灌注的心功能的影響
Langendorff法灌流離體心臟，灌流液采用氧飽和的37 。C修正洛氏液。配制修正洛克液 成分如下(g/L ) :NaCl 9.0, KC1 0.42, CaCl2 0. 24, NaHC03 0.15， pH 7. 4，臨用前加葡萄糖 2. 5g/L，裝入密閉灌流瓶中，下^L出一定量的灌流液，上與氧氣瓶相連充入相應(yīng)量的氧氣， 用力搖勻。超級恒溫器維持灌流液恒溫37 。C,排盡灌流管道內(nèi)空氣。灌流壓力由一插入灌流 瓶底與大氣相通的玻璃管維持恒定(灌流液面距心臟70 cm )。 取心臟前30 min大鼠腹腔注 射肝素液抗凝(2.5 mg/100 g)。取心臟時腹腔注射2(W氨基甲酸乙酯麻醉(0.3 mL/100 g)， 固定，打開胸腔，剪斷腔靜脈、主動脈及心臟周圍組織，迅速摘出心臟置于冰洛克液中清洗 修剪，在主動脈才艮部穿一棉線備用。將灌流管道末端的主動脈套管插入主動脈，用備好的棉線 結(jié)扎固定。心臟經(jīng)充氧的灌流液灌注后，在l m in內(nèi)即可恢復(fù)跳動。
心率、心臟舒縮力、冠脈流量的測定心臟恢復(fù)跳動后，用系線的蛙心夾夾住少許心尖 組織，系線通過滑輪轉(zhuǎn)向后與肌張力傳感器相連。冠脈流出的灌流液由漏斗收集，滴落時與 液滴換能器兩電極接觸。張力傳感器、液滴換能器輸出的心臟舒縮力、液滴信號由生物機能 實驗系統(tǒng)記錄。記錄心臟舒縮力前，調(diào)節(jié)與張力傳感器相連的系線松緊度，使心臟前負荷約 3 g。灌流20min后穩(wěn)定時開始記錄心跳、液滴曲線(作為開始值)，以后每隔10min采樣 lmin。停止灌流30min后再灌注90min。實驗結(jié)束后，對各時點的曲線進行區(qū)域測量，測得 心率、心臟收縮幅值(g)、最大收縮速度、心肌舒張力(g)、最大舒張速度、冠脈流量(滴/min) 等數(shù)值。各點數(shù)值除以開始值作為各點相對值，開始值作100計。表3 13-甲基-十四烷酸異丙酯對全心缺血再灌注損傷大鼠離體心臟模型心率影響
_^_劑量 心率(相對值)_
缺血前 再灌注后30 再灌注后60 再灌注后90
_^_^_^_
溶劑對照組 2ml/L 100 98 ± 24 145 ± 32 139 ±27
13-曱基十四烷酸異丙酯15|jg/ml 100 81 ±18 126 ±30 121 ±19
13-曱基十四烷酸異丙酯60|jg/ml 100 68 ± 22* 105 ±15*93 ±26*
與溶劑對照組比1<0. 05.
此化合物對心率的影響較明顯，再灌后心率恢復(fù)到缺血前水平比溶劑對照組慢，較少發(fā) 生快速性心率失常，而溶劑對照組均有不同程度的快速性心率失常(表3)。此外此化合物也 能增加再灌后灌脈流量和心收縮的幅度(表4和表5 )。
表413-曱基-十四坑酸異丙酯對全心缺血再灌注損傷大鼠離體心臟模型心臟收縮幅值影響
組別_劑量 心臟收縮幅值(相對值)_
缺血前 再灌注后30 再灌注后60 再灌注后90 _^_^_^_
溶劑對照組 2ml/L "(J 42 ± 13 34 ±17 17 ± 10
13-甲基十四烷酸異丙酯15(ag/ml100 48 ± 10 35 ±16 19 ±13
13-甲基十四烷酸異丙酯60jag/ml100 57 ±17* 44 ± 10 34 ±12*
與溶劑對照組比+p〈0. 05.
表513-甲基-十四烷酸異丙酯對全心缺血再灌注損傷大鼠離體心臟模型冠脈流量影響
組別_劑量 冠脈流量(相對值)_
缺血前 再灌注后3D 再灌注后60 再灌注后90
_^_^_^_
溶劑對照組 2ml/L 100 87 ± 9 80 ± 13 69 ±17
13—甲基十四烷酸異丙酯15|ag/ml 100 92 ±13 83 ± 10 69 ±15
13-甲基十四烷酸異丙酯60jug/ml 100 100 ±11*90± 12 76 ±18
與溶劑對照組比* <0. 05.
權(quán)利要求
1.一類如下式(I，II，III)結(jié)構(gòu)，具有末端支鏈的烷酰基結(jié)構(gòu)的化合物其中n是0～18的整數(shù)，m是0～2a的偶整數(shù)，a是結(jié)構(gòu)允許的不飽和雙鍵個數(shù)。其中R1是以下基團或結(jié)構(gòu)之一-OH，即為飽和或不飽和脂肪酸。-NH2，-氨基酸，-葡萄糖-ONa，-OK，即為脂肪酸的鈉鹽和鉀鹽。-OCH3，-OC2H5，-OC3H7，-OC4H9，-OC5H11，即為飽和或不飽和脂肪酸的酯，其中的丙酯、丁酯和戊酯可以是任意的異構(gòu)體。-丙三醇，-丙二醇，?；c醇的任意羥基形成的酯。
2. 權(quán)利要求l所述的化合物，它們是以下的化合物之一 13-曱基-十四烷酸13-曱基-十四烷酸鈉 13-曱基-十四烷酸曱酯 13-曱基-十四烷酸異丙酯 13-甲基-十四烷酸正丁酯 13-曱基-十四烷酸甘油一酯 13-甲基-十四烷Si甘油二酯 13-曱基-十四烷酸甘油三酯 12-曱基-十四烷酸 12-曱基-十四烷酸甲酯 12-曱基-十四烷酸異丙酯 12-甲基-十四烷酸正丁酯 12-曱基-十四烷酸甘油一酯12-曱基-十四烷酸甘油二酯12-曱基-十四烷酸甘油三酯 12-曱基-十三烷酸異丙酯14- 曱基-十五烷酸15- 曱基-十六烷酸
3. 根據(jù)權(quán)利要求1中所述的化合物，用于制造治療人的組織或器官缺血與再灌 注損傷的藥物中的用途。
4. 權(quán)利要求3中所述的組織與器官指的是腦，其缺血與再灌注損傷包括腦卒中 及心臟停跳和心肺復(fù)蘇術(shù)后的腦缺血與再灌注損傷。
5. 權(quán)利要求3中所述的組織與器官指的是心、肺、肝、腎、視網(wǎng)膜和消化道。 其缺血與再灌注損傷包括心肌梗塞、腸缺血、肝缺血、溶栓治療、心血管手術(shù) 及組織器官移植過程中的缺血與再灌注損傷。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述化合物，用于治療缺血與再灌注損傷時，這些化合物可 制成粉劑，片劑，膠囊劑，針劑，以及微乳劑，脂肪乳劑。其中脂肪乳劑主要 包括水，油，卵磷酯及藥學(xué)上可接受的其它輔料。
7. 根據(jù)權(quán)利要求l所述化合物，其來源可以是化學(xué)合成，也可以是從微生物發(fā) 酵提取來的。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以末端支鏈脂肪酸類化合物及其衍生物的化合物，用于制造治療人的組織或器官缺血與再灌注損傷的藥物中的用途。其缺血與再灌注損傷包括腦卒中及心臟停跳和心肺復(fù)蘇術(shù)造成的腦缺血與再灌注損傷；也包括心肌梗塞、腸缺血、肝缺血、溶栓治療、心血管手術(shù)及組織器官移植的缺血與再灌注損傷。
文檔編號A61K31/21GK101555199SQ20081009101
公開日2009年10月14日 申請日期2008年4月8日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月8日
發(fā)明者林澤輝, 翁繩美 申請人:福州永康生物技術(shù)有限公司