專利名稱：可用作激酶抑制劑的雜環(huán)酰胺化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用于治療p38激酶相關(guān)病癥(p38 kinase-associatedcondition)的雜環(huán)酰胺化合物。本發(fā)明還涉及含有至少一種本發(fā)明化合物的藥物組合物，其可用于治療激酶相關(guān)病癥如p38激酶相關(guān)病癥的，以及本發(fā)明還涉及在哺乳動(dòng)物中抑制激酶活性的方法。

背景技術(shù)：
很多種細(xì)胞因子參與炎癥應(yīng)答(inflammatory response)，包括IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α。在很多種疾病中涉及細(xì)胞因子如IL-1和TNF-α的過(guò)量產(chǎn)生(overproduction)，這些疾病包括炎性腸病(inflammatory bowel disease)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis)、牛皮癬(psoriasis)、多發(fā)性硬化(multiplesclerosis)、內(nèi)毒素休克(endotoxin shock)、骨質(zhì)疏松(osteoporosis)、阿爾茲海默病(Alzheimer’s disease)和充血性心力衰竭(congestive heart failure)等[Henry et al.，Drugs Fut.，241345-1354(1999)和Salituro et al.，Curr.Med.Chem.，6807-823(1999)]。人類患者中的證據(jù)表明細(xì)胞因子的蛋白拮抗劑對(duì)于治療慢性炎性疾病(chronic inflammatory disease)是有效的，所述蛋白拮抗劑如TNF-α的單克隆抗體(Enbrel)[Rankin et al.，Br.J.Rheumatol.，34334-342(1995)]和可溶性TNF-α受體-Fc融合蛋白(soluble TNF-αreceptor-Fc fusion protein)(Etanercept)[Moreland et al.，Ann.Intern.Med.，130478-486(1999)]。
TNF-α的生物合成應(yīng)答于外部刺激如促細(xì)胞分裂原(mitogen)、傳染性生物體或創(chuàng)傷而發(fā)生在多種細(xì)胞類型中。產(chǎn)生TNF-α的重要介質(zhì)為促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein(MAP)kinase)，特別是p38激酶。這些激酶應(yīng)答于各種應(yīng)激刺激(stress stimuli)包括但不限于促炎細(xì)胞因子(proinflammatory cytokine)、內(nèi)毒素、紫外線和滲透壓休克(osmotic shock)而被活化。
一種重要的MAP激酶是p38激酶，也稱為細(xì)胞因子抑制性抗炎藥結(jié)合蛋白(cytokine suppressive anti-inflammatory drug binding protein(CSBP)或IK。p38的活化需要通過(guò)上游MAP激酶激酶(MKK3和MKK6)對(duì)p38同工酶(p38isozyme)的Thr-Gly-Tyr基序特征中的蘇氨酸和酪氨酸進(jìn)行雙重磷酸化(dualphosphorylation)。存在p38的四種已知的同工型，即p38α、p38β、p38γ和p38δ。α和β同工型在炎癥細(xì)胞中表達(dá)，并且是產(chǎn)生TNF-α的關(guān)鍵介質(zhì)。在細(xì)胞中抑制p38α和β酶導(dǎo)致TNF-α表達(dá)水平降低。此外，在炎性疾病的動(dòng)物模型中給藥p38α和β抑制劑已證明所述抑制劑對(duì)于治療那些疾病是有效的。因此，所述p38酶在由IL-1和TNF-α介導(dǎo)的炎性過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。盡管對(duì)p38α和β酶這兩種形式都進(jìn)行抑制是人們所注意到的，但得到對(duì)p38α形式的抑制作用成比例高于β形式的化合物也是重要的。
據(jù)報(bào)道抑制p38激酶和細(xì)胞因子如IL-1和TNF-αt的用于治療炎性疾病的化合物披露在以下文獻(xiàn)中Scios，Inc的美國(guó)專利6,277,989和6,130,235；Vertex Pharmaceuticals Inc的美國(guó)專利6,147,080和5,945,418；Smith-KlineBeecham Corp.的美國(guó)專利6,251,914、5,977,103和5,658,903；G.D.Searle &Co.的美國(guó)專利5,932,576和6,087,496；Astra Zeneca的PCT公開(kāi)號(hào)WO00/56738和WO 01/27089；Johnson & Johnson的WO 01/34605；WO00/12497(作為p38激酶抑制劑的喹唑啉衍生物)；WO 00/56738(用于相同目的的吡啶和嘧啶衍生物)；WO 00/12497(討論了p38激酶抑制劑之間的關(guān)系)；和WO 00/12074(可用作p38抑制劑的哌嗪和哌啶化合物)。
本發(fā)明提供了可用作激酶抑制劑特別是激酶p38α和β抑制劑的含有對(duì)p38α具有選擇性的側(cè)鏈(subgroup)的某些雜環(huán)酰胺化合物。將本申請(qǐng)參考的各篇專利申請(qǐng)、專利和出版物引入本申請(qǐng)作為參考。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明大體上涉及式I化合物及其對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和可藥用鹽(特別是可藥用鹽)，其中 R1為任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基； R3為氫、C1-C4烷基或鹵素；以及 R4為氫、任選取代的羧基、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基； 條件是 (a)R1不是任選取代的吡唑基、任選取代的噻唑基或任選取代的氨基噻唑基；以及 (b)R4不是任選取代的吡唑基。
下文列出的是用于描述本發(fā)明的各種術(shù)語(yǔ)的定義。除非在具體情況下另有限制，當(dāng)術(shù)語(yǔ)單獨(dú)或作為較大基團(tuán)的部分在說(shuō)明書(shū)各處使用時(shí)，這些定義用于所述術(shù)語(yǔ)。
術(shù)語(yǔ)“烷基”和“烷(alk)”是指含有1至12個(gè)碳原子，優(yōu)選1至6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷(烴)基。示例性基團(tuán)包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。
“取代的烷基”是指在烷基直鏈或支鏈上的任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的烷基。示例性取代基包括一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)鹵素(例如單個(gè)鹵素取代基或多個(gè)鹵素取代基，在多個(gè)鹵素取代基的情況下形成例如以下的基團(tuán)全氟烷基或帶有Cl3或CF3的烷基)、硝基、氰基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基-O-、雜環(huán)基-O-、芳基-亞烷基-O-、鹵代烷基-O-、烷基硫基-、羧基(即-COOH)、烷氧基羰基-、烷基羰基氧基-、氨甲?；?、取代的氨甲酰基、氨基甲酸酯基團(tuán)、取代的氨基甲酸酯基團(tuán)、脲基團(tuán)、取代的脲基團(tuán)、脒基(amidinyl)、取代的脒基、芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基、-NRcRd、-OC(＝O)NRcRd、-C(＝O)NRcRd、-NReC(＝O)NRcRd、-NReC(O)2-NRcRd、-N(Re)S(O)2NRcRd、-N(Re)P(O)2NRcRd(其中Rc和Rd中的每個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、芳基和雜環(huán)基，以及Re為氫、烷基或苯基)、-SRf、-S(＝O)Rg、-S(O)2Rg、-NReS(O)2-Rg、-P(O)2-Rg、-NReP(O)2-Rg、-NReC(＝O)Rf、-NReC(O)2Rf、-OC(＝O)Rf、-OC(＝O)ORf、-C(＝O)ORf和-C(＝O)Rf(其中Re如上文所剛剛定義，Rf為氫、烷基、芳基或雜環(huán)基，以及Rg為烷基、芳基或雜環(huán)基)。在上述取代基中，在每種情況下，所述烷基、芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基(Rc、Rd、Re、Rf和Rg)接下來(lái)可任選被一至四個(gè)，優(yōu)選一至三個(gè)另外的基團(tuán)取代，所述另外的基團(tuán)選自Rk、-O-Rk、氰基、硝基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵素、-NRkRm、-OC(＝O)NRkRm、-C(＝O)NRkRm、-NRkC(＝O)Rm、-SRk、-S(＝O)Rn、-S(O)2Rn、-OC(＝O)Rk、-C(＝O)ORk、-C(＝O)Rk、苯基、芐基、苯基氧基或芐基氧基以及被以下基團(tuán)中的一至兩個(gè)取代的低級(jí)烷基-O-Rk、氰基、硝基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵素、-NRkRm、-OC(＝O)NRkRm、-C(＝O)NRkRm、-NRkC(＝O)Rm、-SRk、-S(＝O)Rn、-S(O)2Rn、-OC(＝O)Rk、-C(＝O)ORk、-C(＝O)Rk、苯基、芐基、苯基氧基或芐基氧基，其中Rk和Rm選自氫、低級(jí)烷基、羥基(低級(jí)烷基)、鹵素(低級(jí)烷基)、氰基(低級(jí)烷基)和氨基(低級(jí)烷基)，以及Rn為低級(jí)烷基。
如本申請(qǐng)使用的“亞烷基”是指具有通式-(CH2)n-的二價(jià)烷基基團(tuán)，其中n為1至10(具體為1-6，更具體為1-4)。非限制性實(shí)例包括亞甲基、亞乙基(dimethylene)、亞丙基(trimethylene)、亞丁基(tetramethylene)、亞戊基(pentamethylene)和亞己基(hexamethylene)。本申請(qǐng)的術(shù)語(yǔ)“低級(jí)亞烷基”是指具有約1至約6個(gè)碳原子，更具體1-4個(gè)碳原子的那些亞烷基?！叭〈膩喭榛笔侵冈谌魏慰捎眠B接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的亞烷基。示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基和上文作為示例性烷基取代基而引用的那些基團(tuán)。
當(dāng)使用術(shù)語(yǔ)“烷基”作為在另一個(gè)具體命名的基團(tuán)后的后綴時(shí)，如在“芳基烷基”、“取代的芳基烷基”、“環(huán)烷基烷基”等中那樣，或如在羥基(低級(jí)烷基)中那樣，這種情況是指具有一個(gè)或兩個(gè)(優(yōu)選一個(gè))選自其它具體命名的基團(tuán)的取代基的烷基。由此，例如芳基烷基包括芐基、聯(lián)苯基和苯基乙基?！叭〈姆蓟榛笨稍谒龌鶊F(tuán)的烷基部分被選自上文就烷基所述的那些取代基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代，和/或可在所述基團(tuán)的芳基部分被下文就取代的芳基所述的那些取代基中的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代。
術(shù)語(yǔ)“烯基”是指含有2至12個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈烴基。示例性基團(tuán)包括乙烯基或烯丙基?！叭〈南┗笔侵冈谌魏慰捎眠B接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的烯基。烯基上的示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基和上文作為示例性烷基取代基所述的那些基團(tuán)。用于烯基的取代基的具體實(shí)例為選自由2-6個(gè)碳構(gòu)成的基團(tuán)的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“亞烯基”是指含有2至12個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈二價(jià)烴基。示例性基團(tuán)包括亞乙烯基或亞烯丙基?！叭〈膩喯┗笔侵冈谌魏慰捎眠B接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的亞烯基。示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基和上文作為示例性烷基取代基所述的那些基團(tuán)。用于亞烯基的取代基的具體實(shí)例為選自由2-6個(gè)碳構(gòu)成的基團(tuán)的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“炔基”是指含有2至12個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳三鍵的直鏈或支鏈烴基。示例性基團(tuán)包括乙炔基?！叭〈娜不笔侵冈谌魏慰捎眠B接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的炔基。示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基和上文作為示例性烷基取代基所述的那些基團(tuán)。用于炔基的取代基的具體實(shí)例為選自由2-6個(gè)碳構(gòu)成的基團(tuán)的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“亞炔基”是指含有2至12個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳三鍵的直鏈或支鏈二價(jià)烴基。示例性基團(tuán)包括亞乙炔基。“取代的亞炔基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的亞炔基。示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基和上文作為示例性烷基取代基所述的那些基團(tuán)。用于亞炔基的取代基的具體實(shí)例為選自由2-6個(gè)碳構(gòu)成的基團(tuán)的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指含有1至3個(gè)環(huán)并且每個(gè)環(huán)含有3至8個(gè)碳的完全飽和環(huán)狀烴基。示例性基團(tuán)包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基，具體值為環(huán)丙基。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”還包括具有一至兩個(gè)橋頭碳原子的碳-碳橋的基團(tuán)，以及二環(huán)和三環(huán)基團(tuán)，在所述二環(huán)和三環(huán)基團(tuán)中，至少一個(gè)環(huán)是飽和含碳環(huán)，在此情況下，第二個(gè)或第三個(gè)環(huán)可以是碳環(huán)或雜環(huán)，條件是連接點(diǎn)在環(huán)烷基上。另外的環(huán)可按螺(spiro)或稠合(fused)方式與飽和含碳環(huán)連接。“取代的環(huán)烷基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的環(huán)烷基。示例性取代基包括但不限于烷基、取代的烷基、氧代(＝O)和上文作為示例性烷基取代基所述的那些基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“亞環(huán)烷基”是指二價(jià)的如上文所定義的環(huán)烷基。示例性基團(tuán)包括亞環(huán)丙基、亞環(huán)丁基、亞環(huán)戊基和亞環(huán)己基。“取代的亞環(huán)烷基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的亞環(huán)烷基，所述取代基選自就取代的環(huán)烷基所述的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”是指含有1至3個(gè)環(huán)并且每個(gè)環(huán)含有4至8個(gè)碳的部分不飽和環(huán)狀烴基。示例性基團(tuán)包括環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”還包括二環(huán)和三環(huán)基團(tuán)，在所述二環(huán)和三環(huán)基團(tuán)中，至少一個(gè)環(huán)是部分不飽和含碳環(huán)，以及第二個(gè)或第三個(gè)環(huán)可以是碳環(huán)或雜環(huán)，條件是連接點(diǎn)在環(huán)烯基上?！叭〈沫h(huán)烯基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的環(huán)烯基，所述取代基選自上文就環(huán)烷基所述的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“亞環(huán)烯基”是指二價(jià)的如上文所定義的環(huán)烯基。示例性基團(tuán)包括亞環(huán)丁烯基、亞環(huán)戊烯基和亞環(huán)己烯基?！叭〈膩啳h(huán)烯基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的亞環(huán)烯基，所述取代基選自就取代的環(huán)烷基所述的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基”或“烷基硫基”是指分別通過(guò)氧鍵(-O-)或硫鍵(-S-)連接的如上所述的烷基。術(shù)語(yǔ)“取代的烷氧基”或“取代的烷基硫基”是指分別通過(guò)氧鍵或硫鍵連接的如上所述的取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“巰基(thiol)”是指-SH。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基羰基”是指通過(guò)羰基連接的烷氧基(即烷基-O-C(＝O)-)。
術(shù)語(yǔ)“烷基羰基”是指通過(guò)羰基連接的烷基(即烷基-C(＝O)-)。
術(shù)語(yǔ)“烷基羰基氧基”是指通過(guò)氧鍵連接的烷基羰基(即烷基-C(＝O)-O-)。
術(shù)語(yǔ)“酰氨基”是指基團(tuán)-NHC(＝O)H，以及“脒基”是指基團(tuán)-C(＝NH)(NH2)?！叭〈孽０被笔侵富鶊F(tuán)-NRpC(＝O)Rq，以及“取代的脒基”是指基團(tuán)-C(＝NRp)(NRqRr)，其中Rp、Rq和Rr選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基和取代的雜環(huán)基，條件是Rp、Rq和Rr中的至少一個(gè)不是氫。
術(shù)語(yǔ)“芳基”包括單環(huán)芳基和在第一個(gè)環(huán)上僅含有碳的多環(huán)芳基。術(shù)語(yǔ)“單環(huán)芳基”是指苯基(其中所述環(huán)僅含有碳)，以及術(shù)語(yǔ)“多環(huán)芳基”是指萘基和蒽基，是指具有至少第二個(gè)與之稠合的環(huán)的苯基環(huán)，以及是指具有第三個(gè)與之稠合的環(huán)的萘基環(huán)。在由具有第二個(gè)或第三個(gè)與之稠合的環(huán)的苯基環(huán)或具有第三個(gè)與之稠合的環(huán)的萘基環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳基的情況下，另外的環(huán)可以是芳族碳環(huán)或雜環(huán)或非芳族碳環(huán)或雜環(huán)，條件是在此情況下，連接點(diǎn)應(yīng)該在碳環(huán)芳族環(huán)上。例如，這種芳基的一個(gè)亞類是多環(huán)芳基，其中第二個(gè)環(huán)為“雜芳基”，所述雜芳基含有碳原子和至少一個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子(條件是O和S在同一個(gè)環(huán)中不能彼此相鄰)?？晒┻x擇地，第二個(gè)和/或第三個(gè)另外的環(huán)的環(huán)碳原子可被羰基[-C(＝O)基團(tuán)]代替(例如當(dāng)所述環(huán)為非芳族時(shí))?！叭〈姆蓟笔侵冈谌魏苇h(huán)的任何連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基(更優(yōu)選1或2個(gè)取代基)取代的芳基，所述取代基選自烷基、取代的烷基和上文就取代的烷基所述的取代基。
相應(yīng)地，在形成本發(fā)明化合物時(shí)所涉及的芳基的實(shí)例包括


以及另外的類似結(jié)構(gòu)。
術(shù)語(yǔ)“亞芳基”是指二價(jià)的如上文所定義的芳基。
“氨甲酰基”是指基團(tuán)-C(＝O)-NRhRi，其中Rh和Ri選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基。
“氨基甲酸酯基團(tuán)”是指基團(tuán)-O-C(＝O)-NRhRi，以及“脲基團(tuán)”是指基團(tuán)-NH-C(＝O)-NRhRi和-N(烷基)-C(＝O)-NRhRi，其中Rh和Ri選自就氨甲?；龅南嗤鶊F(tuán)。
“取代的氨甲酰基”、“取代的氨基甲酸酯基團(tuán)”和“取代的脲基團(tuán)”分別是指基團(tuán)-C(＝O)-NRhRi、-O-C(＝O)-NRhRi和-N(Rj)-C(＝O)-NRhRi，，其中Rh、Ri和Rj選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基和取代的雜環(huán)基，條件是Rh、Ri和Rj中的至少一個(gè)為取代的烷基、取代的環(huán)烷基、取代的芳基或取代的雜環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)(heterocycle)”、“雜環(huán)的(heterocyclic)”和“雜環(huán)基(heterocyclo)”是指完全飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的，包括芳族(即“雜芳基”)的環(huán)狀基團(tuán)(例如3至7元單環(huán)環(huán)系、7至11元二環(huán)環(huán)系或10至16元三環(huán)環(huán)系)，所述環(huán)狀基團(tuán)在至少一個(gè)含碳環(huán)中具有至少一個(gè)雜原子。由此，術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是雜環(huán)基的一個(gè)亞類。含有雜原子的雜環(huán)基的每個(gè)環(huán)可含有1、2、3或4個(gè)選自氮原子、氧原子和/或硫原子的雜原子，其中氮和硫雜原子可任選被氧化，以及氮雜原子可任選被季胺化，條件是硫和氧在環(huán)中不彼此相鄰。術(shù)語(yǔ)“雜芳基(heteroarylium)”是指帶有季胺氮原子由此帶有正電荷的雜芳基。此外，當(dāng)化合價(jià)允許時(shí)，雜環(huán)基環(huán)的一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選一個(gè))碳環(huán)原子可被羰基(即-C(＝O)-)代替。雜環(huán)基可在環(huán)或環(huán)系的任何雜原子或碳原子處與分子的其余部分相連。
示例性單環(huán)雜環(huán)基包括選自下列的那些基團(tuán)環(huán)氧乙烷基團(tuán)(ethyleneoxide)、氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧雜環(huán)丁烷基(oxetanyl)、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、唑基、唑烷基、異唑啉基、異唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、異噻唑基、異噻唑烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮雜

基、氮雜

基、六氫二氮雜

基、4-哌啶酮基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、三唑基、四唑基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫嗎啉基、S-氧代硫嗎啉基(thiamorpholinyl sulfoxide)、S，S-二氧代硫嗎啉基(thiamorpholinyl sulfone)、1，3-二氧雜環(huán)戊烷基和四氫-1，1-二氧代噻吩基等。
示例性二環(huán)雜環(huán)基包括選自下列的那些基團(tuán)吲哚基、異吲哚基、苯并噻唑基、苯并二氧雜環(huán)戊烯基、苯并唑基、苯并二唑基、苯并噻吩基、奎寧環(huán)基、喹啉基、四氫異喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(如呋喃并[2，3-c]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基]或呋喃并[2，3-b]吡啶基)、二氫苯并二氧雜環(huán)己二烯基、二氫二氧化苯并噻吩基、二氫異吲哚基、二氫吲哚基、二氫喹啉基、二氫喹唑啉基(如3，4-二氫-4-氧代-喹唑啉基)、三嗪基氮雜

基(triazinylazepinyl)、四氫喹啉基等。示例性三環(huán)雜環(huán)基包括咔唑基、苯并吲哚基、菲咯啉基(phenanthrolinyl)、二苯并呋喃基、吖啶基(acridinyl)、菲啶基(phenanthridinyl)、呫噸基等。
術(shù)語(yǔ)“亞雜環(huán)基(heterocylene)”是指二價(jià)的如上文所定義的雜環(huán)基。
“取代的雜環(huán)(substituted heterocycle)”、“取代的雜環(huán)的(heterocyclic)”和“取代的雜環(huán)基(substituted heterocyclo)”(如“取代的雜芳基”)是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1至4個(gè)取代基取代的雜環(huán)、雜環(huán)的或雜環(huán)基，其中所述取代基選自上文就取代的環(huán)烷基所述的那些取代基。
術(shù)語(yǔ)“季胺氮(quaternary nitrogen)”指四價(jià)正電性氮原子，包括例如四烷基銨基團(tuán)(例如四甲基銨或N-甲基吡啶)中的正電性氮、質(zhì)子化銨物質(zhì)(例如三甲基氫銨或N-氫吡啶)中的正電性氮、胺N-氧化物(例如N-甲基-嗎啉-N-氧化物或吡啶-N-氧化物)中的正電性氮及N-氨基-銨基團(tuán)(例如N-氨基吡啶)中的正電性氮。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指五元和六元單環(huán)芳族雜環(huán)基，以及二環(huán)和三環(huán)雜環(huán)環(huán)系，在所述二環(huán)和三環(huán)雜環(huán)環(huán)系中，環(huán)系與另一個(gè)基團(tuán)的連接點(diǎn)經(jīng)由環(huán)系的五元或六元芳族環(huán)。由此，例如術(shù)語(yǔ)“雜芳基”包括基團(tuán)如五元或六元雜芳基，如噻吩基、吡咯基、唑基、吡啶基、吡嗪基等，其中形成二環(huán)和三環(huán)基團(tuán)的稠環(huán)可僅含有碳原子，并且可以是飽和的、部分飽和的或不飽和的。為二環(huán)或三環(huán)的雜芳基必須包含至少一個(gè)完全芳族的環(huán)，但其它稠環(huán)或環(huán)可以是芳族的或非芳族的。
術(shù)語(yǔ)“取代的雜芳基”是指在任何可用連接點(diǎn)處被一個(gè)或多個(gè)取代基，如1至4個(gè)取代基(更具體1-3個(gè)取代基，甚至更具體1-2個(gè)取代基)取代的五元和六元單環(huán)芳族雜環(huán)基，其中所述取代基選自上文就取代的環(huán)烷基所述的那些取代基。
示例性單環(huán)雜芳基包括選自下列的那些基團(tuán)吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、異唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、呋喃基、噻吩基、二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基等。
示例性二環(huán)雜芳基包括選自下列的那些基團(tuán)吲哚基、苯并噻唑基、苯并二氧雜環(huán)戊烯基、苯并唑基、苯并噻吩基、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基等。
示例性三環(huán)雜芳基包括咔唑基、苯并吲哚基、菲咯啉基、吖啶基、菲啶基、呫噸基等。
術(shù)語(yǔ)“羥基胺基團(tuán)(hydroxylamine)”和“羥基酰胺基團(tuán)(hydroxylamide)”分別是指基團(tuán)-NH-OH和-C(＝O)-NH-OH。
除非另有說(shuō)明，本申請(qǐng)單獨(dú)使用或作為另一個(gè)基團(tuán)的部分使用的術(shù)語(yǔ)“取代的氨基”是指被一個(gè)或兩個(gè)取代基取代的氨基，所述取代基可以相同或不同，如烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、巰基烷基(thioalkyl)、-C(O)Rt、-C(＝O)ORt、-C(＝O)NRtRu、-S(O)2Rt、-S(O)2ORt或-S(O)2NRtRu，其中Rt和Ru各自獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基或雜環(huán)基。這些取代基可進(jìn)一步被羧酸基團(tuán)和/或上文就烷基列出的任何取代基取代。
此外，Rt和Ru可與它們所連接的氮原子一起形成1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-氮雜

基、4-嗎啉基、4-硫嗎啉基、1-哌嗪基、4-烷基-1-哌嗪基、4-芳基烷基-1-哌嗪基、4-(二芳基烷基)-1-哌嗪基、1-吡咯烷基、1-哌啶基或1-氮雜

基，這些基團(tuán)任選被以下基團(tuán)取代烷基、芳基、雜環(huán)基、烷氧基、烷基硫基、鹵素、三氟甲基、羥基、氨基、-C(O)Rf、-C(＝O)ORf、-C(＝O)NRfRg、-S(O)2Rf、-S(O)2ORf或-S(O)2NRfRg，其中Rf和Rg可以是氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基或雜環(huán)基。
術(shù)語(yǔ)“雜原子”應(yīng)該包括氧、硫和氮。
術(shù)語(yǔ)“鹵素(halogen)”或“鹵代(halo)”是指氯、溴、氟或碘。
術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”意指具有一個(gè)或多個(gè)鹵素取代基的烷基，特別是當(dāng)烷基部分選自C1-C3時(shí)。例如，鹵代烷基可以是CF3。
術(shù)語(yǔ)“鹵代烷氧基”意指具有一個(gè)或多個(gè)鹵素取代基的烷氧基，特別是當(dāng)烷氧基部分包含C1-C3。例如，“鹵代烷氧基”包括-OCF3。
術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)”意指飽和或不飽和的單環(huán)或二環(huán)，其中所有環(huán)的所有原子都為碳。由此，所述術(shù)語(yǔ)包括環(huán)烷基環(huán)和芳基環(huán)。碳環(huán)可被取代，在此情況下，取代基選自上文就環(huán)烷基和芳基所述的那些取代基。
當(dāng)術(shù)語(yǔ)“不飽和”在本申請(qǐng)中用于描述環(huán)或基團(tuán)時(shí)，所述環(huán)或基團(tuán)可以是完全不飽和的或部分不飽和的。
當(dāng)描述基團(tuán)可以是“任選取代的”時(shí)，這種情況旨在包括未取代的基團(tuán)和取代的基團(tuán)，其中所述取代基選自上文就具體命名的基團(tuán)所述的那些取代基。由此，當(dāng)提及任選取代的芳基時(shí)，其旨在描述未取代的芳基如苯基或萘基，和具有一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選1至4個(gè)，更優(yōu)選1或2個(gè))取代基的那些芳基，所述取代基選自烷基、取代的烷基和就取代的烷基所述的那些取代基。當(dāng)術(shù)語(yǔ)“任選取代的”處于馬庫(kù)什基團(tuán)(Markush group)前時(shí)，術(shù)語(yǔ)“任選取代的”旨在修飾馬庫(kù)什基團(tuán)中所述的每種基團(tuán)。由此，例如短語(yǔ)“任選取代的芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基”包括芳基、取代的芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基和取代的雜環(huán)基。
在本發(fā)明化合物中，在化合物含有硫化物基團(tuán)的情況下，硫原子可在適當(dāng)?shù)难趸癄顟B(tài)轉(zhuǎn)化為氧化形式，并且所有這些氧化形式衍生物都包括在本申請(qǐng)中。
“N-氧化物”是指這樣的化合物，其中雜芳族環(huán)或叔胺的堿性氮原子被氧化，得到帶有正電荷的季胺氮和所連接的帶有負(fù)電荷的氧原子 “溶劑化物”是指溶劑的分子或離子與溶質(zhì)的分子或離子所形成的分子或離子復(fù)合物。還應(yīng)該理解的是，式I或式II化合物的溶劑化物(例如水合物)也在本發(fā)明的范圍中。溶劑化的方法是本領(lǐng)域公知的。
當(dāng)官能團(tuán)被稱為“經(jīng)保護(hù)的”時(shí)，這種情況意指所述基團(tuán)呈經(jīng)修飾的形式以減輕尤其是排除在經(jīng)保護(hù)的位點(diǎn)發(fā)生不期望的副反應(yīng)。用于本申請(qǐng)所述方法和化合物的合適保護(hù)基包括但不限于標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)中所述的那些保護(hù)基，所述標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)如Greene，T.W.et al.，Protective Groups in OrganicSynthesis，Wiley，N.Y.(1991)，將其引入作為有關(guān)列出所述保護(hù)基的參考。
除非另有說(shuō)明，認(rèn)為具有不滿足化合價(jià)的任何雜原子具有足以滿足化合價(jià)的氫原子。
羧酸根陰離子是指負(fù)電性基團(tuán)-COO-。
本發(fā)明化合物可形成也在本發(fā)明范圍內(nèi)的鹽。盡管其它鹽也可用于例如分離或純化本發(fā)明化合物，但藥學(xué)上可接受的(即無(wú)毒性的生理學(xué)上可接受的)鹽是優(yōu)選的。
本發(fā)明化合物可與堿金屬如鈉、鉀和鋰，與堿土金屬如鈣和鎂，以及與有機(jī)堿如二環(huán)己胺、三丁胺、吡啶和氨基酸如精氨酸、賴氨酸等形成鹽。可如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的那樣來(lái)形成這些鹽。
本發(fā)明化合物可與各種有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸形成鹽。這些鹽包括與鹽酸、氫溴酸、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、馬來(lái)酸、苯磺酸、甲苯磺酸形成的那些鹽以及各種其它鹽(例如硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、酒石酸鹽、枸櫞酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽等)?？扇绫绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的那樣來(lái)形成這些鹽?；衔锏柠}形式對(duì)于改善化合物的溶出率和口服生物利用度可能是有益的。
此外，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)。
本發(fā)明包括呈混合物形式或呈純或基本純形式的本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)體。本發(fā)明化合物的定義涵蓋所有可能的立體異構(gòu)體及其混合物；其還涵蓋外消旋形式和分離的具有特定活性的光學(xué)異構(gòu)體。外消旋形式可通過(guò)物理方法來(lái)拆分，所述物理方法為例如對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體衍生物進(jìn)行分級(jí)結(jié)晶、分離或結(jié)晶，或通過(guò)手性柱色譜進(jìn)行分離?？赏ㄟ^(guò)常規(guī)方法例如與光學(xué)活性酸形成鹽接著進(jìn)行結(jié)晶，從外消旋體得到單獨(dú)的光學(xué)異構(gòu)體。
本發(fā)明化合物還可具有前藥形式?？稍隗w內(nèi)轉(zhuǎn)化以提供生物活性藥劑(即式I或式II化合物)的任何化合物是在本發(fā)明范圍和主旨內(nèi)的前藥。
各種形式的前藥是本領(lǐng)域公知的。這些前藥衍生物的實(shí)例請(qǐng)參見(jiàn) a)Design of Prodrugs，edited by H.Bundgaard，(Elsevier，1985)和Methodsin Enzymology，Vol.112，pp.309-396，edited by K.Widder et al.(AcademicPress，1985)； b)H.Bundgaard，Chapter 5“Design and Application of Prodrugs”，ATextbook of Drug Design and Development，Harwood Academic Publishers，publ.，Krogsgaard-Larsen，P.et al.，eds.，pp.113-191(1991)；和 c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，81-38(1992)； 將上述每篇文獻(xiàn)引入本申請(qǐng)作為參考。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及式I化合物及其對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和可藥用鹽
其中 R1為任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基(具體值下文描述)； R3為氫、C1-C4烷基或鹵素(具體為H、Cl、F或CH3)；以及 R4為氫、任選取代的羧基、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基。對(duì)于R4而言更具體的值選自C1-C5烷基(包括甲基、乙基和支化和非支化的C3-C5烷基)和C3-C6環(huán)烷基(例如環(huán)丙基)，其中所述烷基和環(huán)烷基任選被1-4個(gè)基團(tuán)取代，所述基團(tuán)選自C1-C5烷基和C1-C5烷氧基(包括甲基、乙基和支化和非支化的C3-C5烷基和烷氧基)； 條件是 (a)R1不是任選取代的吡唑基、任選取代的噻唑基或任選取代的氨基噻唑基；以及 (b)R4不是任選取代的吡唑基。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，R1選自任選取代的C1-C4烷基、任選取代的C3-C6環(huán)烷基、任選取代的C2-C4烯基、任選取代的3-6元雜環(huán)基、任選取代的C5-C6芳基和任選取代的雜芳基(更具體的基團(tuán)如下文所定義)，其中 (a)所述未取代的和取代的雜芳基的環(huán)大小為5-10元并且含有1-3個(gè)雜原子，所述雜原子選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連；以及 (b)所述取代基本身還可被取代(例如被1-3個(gè)基團(tuán)取代)。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，R1選自任選取代的C1-C4烷基、任選取代的C1-C6環(huán)烷基、任選取代的C1-C4烯基、任選取代的3-6元雜環(huán)基、任選取代的C5-C6芳基或任選取代的5-6元雜芳基，其中所述雜芳基含有1-2個(gè)雜原子，所述雜原子選自N、O和S(條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連)，以及雜芳基的其余部分為碳原子。
對(duì)于R1而言更具體的值為苯基和雜芳基，所述雜芳基選自未取代的或取代的雜芳基，所述未取代的或取代的雜芳基的環(huán)大小為5-10元，其中1-3個(gè)環(huán)成員選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連。
對(duì)于R1而言更具體的值選自苯基、噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基。
對(duì)于R1而言更具體的值選自噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基。
對(duì)于取代的芳基和雜芳基而言取代基的具體實(shí)例可選自苯基、苯基-CH2-、吡啶基和苯并咪唑基-CH2-。
所述芳基和雜芳基上的取代基本身可例如被1至3個(gè)基團(tuán)(取代基)取代，所述基團(tuán)(取代基)選自芳基和雜芳基(例如含有1-2個(gè)雜原子的C5-C6元芳基(C5-C6 membered aryl)，所述雜原子選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連)、C1-C3烷基(例如甲基、乙基和丙基(包括正丙基和異丙基即-CH(CH3)2)、-CH2OH、鹵代烷基(例如CF3)、烷氧基(例如甲氧基)、鹵素(例如Cl和F)、-NH2、-N(CH3)2、-C(O)NH2、-NHSO2CH3、-SO2NH2、-CH2N(CH3)2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)2、-C(O)NHCH2CH3、-O-CH2CH(OH)CH2OH、-CO2-CH2CH3、-C(O)OC(CH3)3、-CN、-OH(或與雜芳基環(huán)上的N+1相連的O-1)、任選通過(guò)烷基或羰基連接的雜環(huán)基(例如


)。
對(duì)于R1而言甚至更具體的值參見(jiàn)表中列出的組合。例如，由以下成員構(gòu)成的組在制備具有α選擇性(alpha selectivity)例如具有至少50倍的α選擇性的化合物中是特別重要的，所述成員如下所述

其中 R10為選自以下的基團(tuán)-OH、-CH3、-Cl、-F、-NH2、-CN、-CF3、-N(CH3)2、-OCH3、-CH2OH、-NHSO2CH3、-SO2NH2、-CH2N(CH3)2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)2、-C(O)NHCH2CH3和-O-CH2CH(OH)CH2OH； R11為選自以下的基團(tuán)-OH、-Cl、-F、-CN、-CO2H、-OCH3、-NH2、-CH2OH、-N(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)2和-OCH2CH(OH)CH2OH； R12為選自-CH3、-CN和-F的基團(tuán)； R13為選自-H和-F的基團(tuán)； R14為選自-CH3和-C(O)OC(CH3)3的基團(tuán)； R15為選自-H和-F的基團(tuán)；以及 R16為選自-CH(CH3)2和

的基團(tuán)。
對(duì)于R1而言另一具體的值是作為R1包括在實(shí)施例1至126所列式中的基團(tuán)。
對(duì)于R1而言另一具體的值是作為R1包括在實(shí)施例127至225所列式中的基團(tuán)。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，R3為氫或甲基。
在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，R4選自任選取代的C1-C4烷基、任選取代的C3-C6環(huán)烷基和任選取代的5-6元雜芳基，所述5-6元雜芳基具有1或2個(gè)選自N和O的雜原子(條件是僅一個(gè)O可在環(huán)中)。R4的具體實(shí)例為環(huán)丙基。
在更具體的實(shí)施方案中，可確定具有對(duì)抗p38α的優(yōu)先活性的一類化合物。例如可使用下文描述的p38測(cè)定來(lái)觀察α選擇性。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含至少一種式I化合物(包括上文所述的所有亞類和具體類別)和可藥用載體或稀釋劑。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療炎性疾病的方法，所述方法包括向需要所述治療的患者給藥包含式I化合物(包括上文所述的所有亞類和具體類別)的藥物組合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及在哺乳動(dòng)物中抑制p38激酶的方法，所述方法包括向需要所述治療的哺乳動(dòng)物給藥至少一種式I化合物(包括上文所述的所有亞類和具體類別)。
實(shí)用性 本發(fā)明化合物是p38激酶活性的選擇性抑制劑，并且具體地是同工型p38α和p38β活性的選擇性抑制劑。相應(yīng)地，式I化合物在治療與p38激酶活性相關(guān)的病癥中具有實(shí)用性。所述病癥包括其中作為經(jīng)由p38的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的結(jié)果細(xì)胞因子水平受到調(diào)節(jié)的疾病，以及具體地是與細(xì)胞因子IL-1、IL-4、IL-8和TNF-α的過(guò)量產(chǎn)生相關(guān)的疾病。本申請(qǐng)使用的術(shù)語(yǔ)“治療(treating)”或“治療(treatment)”包括響應(yīng)措施或預(yù)防措施中的一種，或響應(yīng)措施和預(yù)防措施兩者，例如設(shè)計(jì)用來(lái)抑制或延遲疾病或紊亂的發(fā)作，實(shí)現(xiàn)癥狀或病癥的完全或部分減少，和/或緩解(alleviate)、改善(ameliorate)、減輕(lessen)或治愈疾病或紊亂和/或其癥狀的措施。當(dāng)本申請(qǐng)?zhí)峒耙种啤皃38α/β激酶”時(shí)，這是指p38α和/或p38β激酶被抑制。由此，當(dāng)提及抑制p38α/β激酶的IC50值時(shí)，這是指所述化合物可如此有效地抑制p38α和p38β激酶中的至少一種或可如此有效地抑制p38α和p38β激酶兩者。此外，本申請(qǐng)鑒定的某些化合物對(duì)于p38α具有選擇性，例如與p38β激酶相比，對(duì)于p38α激酶具有至少50倍更高的活性。100X≥200X。
鑒于式I化合物作為p38α/β激酶抑制劑的活性，它們可用于治療p38相關(guān)病癥，包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病(destructive bone disorder)、增殖性疾病(proliferative disorder)、血管源性疾病(angiogenic disorder)、感染性疾病、神經(jīng)變性疾病和病毒疾病。
更具體地，可用本發(fā)明化合物治療的具體病癥或疾病包括但不限于胰腺炎(急性胰腺炎或慢性胰腺炎)、哮喘、變態(tài)反應(yīng)(allergy)、成人呼吸窘迫綜合征(adult respiratory distress syndrome)、慢性阻塞性肺病(chronicobstructive pulmonary disease)、腎小球腎炎(glomerulonephritis)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosis)、硬皮病(scleroderma)、慢性甲狀腺炎(chronic thyroiditis)、格雷夫斯病(Graves’disease)、自身免疫性胃炎(autoimmune gastritis)、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血(autoimmunehemolytic anemia)、自身免疫性嗜中性粒細(xì)胞減少(autoimmune neutropenia)、血小板減少(thrombocytopenia)、特應(yīng)性皮炎(atopic dermatitis)、慢性活動(dòng)性肝炎(chronic active hepatitis)、重癥肌無(wú)力(myasthenia gravis)、多發(fā)性硬化、炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis)、克羅恩病(Crohn’s disease)、牛皮癬、移植物抗宿主疾病(graft vs.host disease)、由內(nèi)毒素誘發(fā)的炎性反應(yīng)(inflammatory reaction induced by endotoxin)、結(jié)核病(tuberculosis)、動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis)、肌肉變性(muscle degeneration)、惡病質(zhì)(cachexia)、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎(psoriatic arthritis)、萊特綜合征(Reiter’s syndrome)、痛風(fēng)(gout)、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎(traumatic arthritis)、風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎(rubella arthritis)、急性滑膜炎(acute synovitis)、胰β-細(xì)胞疾病(pancreatic β-cell disease)、以大量嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)(massive neutrophil infiltration)為特征的疾病、類風(fēng)濕性脊椎炎(rheumatoid spondylitis)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(gouty arthritis)和其它關(guān)節(jié)炎病癥、腦型瘧(cerebral malaria)、慢性肺部炎性疾病(chronic pulmonary inflammatorydisease)、矽肺(silicosis)、肺結(jié)節(jié)病(pulmonary sarcoidosis)、骨再吸收疾病(bone resorption disease)、同種異體移植物排斥(allograft rejection)、由感染引起的發(fā)熱和肌痛(myalgia)、繼發(fā)于感染的惡病質(zhì)(cachexia secondary toinfection)、meloid formation、瘢痕組織形成(scar tissue formation)、潰瘍性結(jié)腸炎、發(fā)熱(pyresis)、流行性感冒(influenza)、骨質(zhì)疏松(osteoporosis)、骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis)和多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)骨疾病(multiple myeloma-relatedbone disorder)、急性骨髓性白血病(acute myelogenous leukemia)、慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia)、轉(zhuǎn)移性黑素瘤(metastaticmelanoma)、卡波西肉瘤(Kaposi’s sarcoma)、多發(fā)性骨髓瘤(multiplemyeloma)、敗血癥(sepsis)、敗血癥性休克(septic shock)和志賀菌病(Shigellosis)、阿爾茲海默病、帕金森病(Parkinson’s disease)、由創(chuàng)傷性損傷引起的腦缺血(cerebral ischemia)或神經(jīng)變性疾病、血管源性疾病包括實(shí)體瘤(solid tumor)、眼部新血管形成(ocular neovascularization)和嬰兒血管瘤(infantile haemangioma)、病毒疾病包括急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV視網(wǎng)膜炎(CMV retinitis)、AIDS、ARC或惡性腫瘤(malignancy)和皰疹(herpes)、中風(fēng)、心肌缺血(myocardialischemia)、心臟病發(fā)作中的缺血(ischemia in stroke heart attack)、器官缺氧(organ hyposia)、血管增生(vascular hyperplasia)、心臟和腎臟再灌注損傷(cardiac and renal reperfusion injury)、血栓形成(thrombosis)、心臟肥大(cardiachypertrophy)、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集(thrombin-induced plateletaggregation)、內(nèi)毒素血癥(endotoxemia)和/或中毒性休克綜合征(toxic shocksyndrome)和與前列腺素內(nèi)過(guò)氧化酶合酶-2相關(guān)的病癥(condition associatedwith prostaglandin endoperoxidase syndase-2)。
此外，本發(fā)明的p38抑制劑抑制可誘導(dǎo)的促炎蛋白(induciblepro-inflammatory protein)如前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶-2(prostaglandinendoperoxide synthase-2，PGHS-2)(也稱為環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2))的表達(dá)。相應(yīng)地，其它p38相關(guān)病癥包括水腫、痛覺(jué)缺失(analgesia)、發(fā)熱和疼痛如神經(jīng)肌肉疼痛(neuromuscular pain)、頭痛、由癌癥引起的疼痛、牙痛和關(guān)節(jié)炎疼痛。本發(fā)明化合物還可用于治療獸醫(yī)病毒感染(veterinaryviral infection)，如慢病毒屬感染(lentivirus infection)，包括但不限于馬傳染性貧血病病毒(equine infectious anemia virus)，或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(retro virusinfection)，包括貓免疫缺陷病毒(feline immunodeficiency virus)、牛免疫缺陷病毒(bovine immunodeficiency virus)和犬免疫缺陷病毒(canineimmunodeficiency virus)。
當(dāng)術(shù)語(yǔ)“p38相關(guān)病癥”或“p38相關(guān)疾病或障礙”在本申請(qǐng)中使用時(shí)，每種術(shù)語(yǔ)旨在包括上文確定的所有病癥(如同詳盡地重復(fù))，以及受p38激酶活性影響的任何其它病癥。
可受益于p38抑制劑的疾病的具體實(shí)例為哮喘、成人呼吸窘迫綜合征、慢性阻塞性肺病、慢性肺部炎性疾病、糖尿病、炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病、骨質(zhì)疏松、牛皮癬、移植物抗宿主排斥、動(dòng)脈粥樣硬化、急性冠心病(acute coronary disease)、多發(fā)性骨髓瘤、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、疼痛、心肌缺血和關(guān)節(jié)炎包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎，以及尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬。
本發(fā)明由此提供了治療所述病癥的方法，所述方法包括向需要所述治療的受試者給藥有效量的至少一種式I化合物或其鹽。治療p38激酶相關(guān)病癥的方法可包括將式I化合物單獨(dú)給藥，或?qū)⑹絀化合物與其它式I化合物和/或其它可用于治療所述病癥的合適治療藥物聯(lián)合給藥。所述其它治療藥物的實(shí)例包括皮質(zhì)激素(corticosteroid)、咯利普蘭(rolipram)、卡弗他丁(calphostin)、CSAID(細(xì)胞因子抑制性抗炎藥)、美國(guó)專利4,200,750中披露的4-取代的咪唑并[1，2-A]喹喔啉；白細(xì)胞介素-10、糖皮質(zhì)激素、水楊酸酯(鹽)(salicylate)、一氧化氮(nitric oxide)和其它免疫抑制劑(immunosuppressants)；核轉(zhuǎn)位抑制劑(nuclear translocation inhibitor)，如脫氧精胍菌素(deoxyspergualin，DSG)；非甾類抗炎藥(NSAID)，如布洛芬(ibuprofen)、塞來(lái)考昔(celecoxib)和羅非考昔(rofecoxib)；甾類，如潑尼松(prednisone)或地塞米松(dexamethasone)；抗病毒劑，如阿巴卡韋(abacavir)；抗增殖劑，如甲氨喋呤(methotrexate)、來(lái)氟米特(leflunomide)、FK506(他克莫司(tacrolimus)，Prograf)；細(xì)胞毒類藥物(cytotoxic drug)，如硫唑嘌呤(azathiprine)和環(huán)磷酰胺；TNF-α抑制劑，如替尼達(dá)普(tenidap)、抗TNF抗體或可溶性TNF受體；和雷帕霉素(rapamycin)(西羅莫司(sirolimus)或雷帕鳴(Rapamune))；或上述藥物的衍生物。
上述其它治療藥物，當(dāng)與本發(fā)明化合物聯(lián)用時(shí)，可例如以Physicians’Desk Reference(PDR)中指示的那些量或由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定的那些量來(lái)使用。在本發(fā)明的方法中，所述其它治療藥物(或多種其它治療藥物)可在給藥本發(fā)明化合物之前、同時(shí)或之后給藥。
如上文所述，本發(fā)明還提供了能夠治療p38激酶相關(guān)病癥(包括TNF-α、IL-1和/或IL-8介導(dǎo)的病癥)的藥物組合物。本發(fā)明組合物可含有如上文描述的其它治療藥物，并且可例如如下配制根據(jù)例如藥物制劑領(lǐng)域公知的技術(shù)，使用常規(guī)固態(tài)或液態(tài)載體或稀釋劑以及一類適于所期望給藥模式的藥物添加劑(例如賦形劑、粘合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑等)。
式I化合物可通過(guò)適于待治療病癥的任何方式給藥，這可取決于對(duì)位點(diǎn)特異性治療或待遞送藥物量的需要。局部給藥通常優(yōu)選用于皮膚相關(guān)疾病，全身治療優(yōu)選用于癌癥病癥或癌前病癥(pre-cancerous condition)，然而其它遞送模式也包括在本發(fā)明中。例如，所述化合物可例如以片劑、膠囊劑、粉末劑或液態(tài)制劑包括糖漿劑的形式口服給藥；例如以溶液劑、混懸劑、凝膠劑或軟膏劑的形式局部給藥；舌下給藥；口腔給藥；例如通過(guò)皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或胸骨內(nèi)注射或輸注技術(shù)(例如以無(wú)菌可注射水性或非水性溶液劑或混懸劑的形式)腸胃外給藥；通過(guò)吸入噴霧劑經(jīng)鼻給藥；例如以乳膏劑或軟膏劑的形式局部給藥；以栓劑的形式經(jīng)直腸給藥；或通過(guò)脂質(zhì)體(liposomally)給藥。含有無(wú)毒可藥用載體或稀釋劑的劑量單位制劑可被給藥。所述化合物可按適于立即釋放或延長(zhǎng)釋放的形式給藥。立即釋放或延長(zhǎng)釋放可通過(guò)以下方法來(lái)實(shí)現(xiàn)使用合適的藥物組合物，或尤其在延長(zhǎng)釋放的情況下，使用諸如皮下植入物或滲透泵那樣的裝置。
用于局部給藥的示例性組合物包括局部載體如

(與聚乙烯膠化的礦物油)。
用于口服給藥的示例性組合物包括以下制劑混懸劑，其可含有例如用于賦予體積(bulk)的微晶纖維素、作為助懸劑的海藻酸或海藻酸鈉，作為增稠劑的甲基纖維素，以及如本領(lǐng)域已知的那些增甜劑和矯味劑；以及立即釋放片劑，其可含有例如微晶纖維素、磷酸二鈣、淀粉、硬脂酸鎂和/或乳糖，和/或其它如本領(lǐng)域已知的那些賦形劑、粘合劑、增容劑(extender)、崩解劑、稀釋劑和潤(rùn)滑劑。本發(fā)明化合物還可通過(guò)舌下和/或口腔給藥例如以模制的、壓制的或冷凍干燥的片劑的形式經(jīng)口遞送。示例性組合物可包括快速溶出用稀釋劑，如甘露醇、乳糖、蔗糖和/或環(huán)糊精。所述制劑還可包括高分子量賦形劑如纖維素

或聚乙二醇(PEG)；輔助粘膜粘附的賦形劑如羥丙基纖維素(HPC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羧甲基纖維素鈉(SCMC)和/或馬來(lái)酸酐共聚物(例如

)；以及控制釋放的物質(zhì)如聚丙烯酸(酯)共聚物(例如CARBOPOL

)。還可加入潤(rùn)滑劑、助流劑、矯味劑、著色劑和穩(wěn)定劑以便于加工和使用。
用于鼻氣霧劑或吸入給藥的示例性組合物包括溶液劑，其可含有例如芐醇或其它合適的防腐劑，提高吸收和/或生物利用度的吸收促進(jìn)劑，和/或如本領(lǐng)域已知的那些其它增溶劑或分散劑。
用于腸胃外給藥的示例性組合物包括注射用溶液劑或混懸劑，其可含有例如合適的無(wú)毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑，諸如甘露醇，1，3-丁二醇，水，林格溶液(Ringer’s solution)，等張氯化鈉溶液，或其它合適的分散劑或濕潤(rùn)劑及助懸劑，包括合成的甘油一酯或甘油二酯，及脂肪酸，包括油酸。
用于直腸給藥的示例性組合物包括栓劑，其可含有例如合適的非刺激性的賦形劑，如可可酯、合成的甘油酯或聚乙二醇，所述栓劑在常溫是固態(tài)的，但在直腸腔道中液化和/或溶解以釋放藥物。
本發(fā)明化合物的有效量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)確定，并且包括用于哺乳動(dòng)物的約0.05-100mg活性化合物/kg體重/日的示例性劑量，其可按單一劑量的形式給藥或按分份劑量的形式(諸如每天1至4次)給藥。應(yīng)該理解的是，用于任何具體受試者的具體劑量水平及給藥頻率可發(fā)生變化且取決于多種因素，這些因素包括所使用的具體化合物的活性、所述化合物的代謝穩(wěn)定性及作用持續(xù)時(shí)間、受試者的物種、年齡、體重、一般健康情況、性別及飲食、給藥模式及時(shí)間、排泄速率、藥物組合及具體病癥的嚴(yán)重程度。接受治療的優(yōu)選受試者包括動(dòng)物，最優(yōu)選為哺乳動(dòng)物物種，諸如人類及家畜(諸如狗、貓、馬等)。由此，當(dāng)術(shù)語(yǔ)“患者”在本申請(qǐng)中使用時(shí)，該術(shù)語(yǔ)旨在包括受p38酶水平介導(dǎo)所影響的所有受試者，最優(yōu)選為哺乳動(dòng)物物種。
已在一項(xiàng)或多項(xiàng)以下所述的測(cè)定中對(duì)式I化合物(包括本申請(qǐng)實(shí)施例中描述的化合物)進(jìn)行了試驗(yàn)，且這些化合物顯示出作為p38α/β酶和TNF-α抑制劑的活性。
生物測(cè)定 p38激酶的產(chǎn)生 對(duì)于該測(cè)定，通過(guò)PCR對(duì)人p38α、β和γ同工酶的cDNA進(jìn)行克隆。將這些cDNA在pGEX表達(dá)載體(Pharmacia)中亞克隆。將GST-p38融合蛋白在大腸桿菌(E.Coli)中表達(dá)，然后經(jīng)親和色譜法使用谷胱甘肽瓊脂糖從細(xì)菌沉淀物中純化。p38融合蛋白如下活化用組成性活性MKK6(constitutively active MKK6)進(jìn)行孵育。經(jīng)親和色譜法從MKK6中分離活性p38。組成性活性MKK6根據(jù)Raingeaud等人(Mol.Cell.Biol.，1247-1255(1996))產(chǎn)生。
由LPS刺激的PBMC產(chǎn)生TNF-α 肝素化人全血(heparinized human whole blood)得自健康自愿者。經(jīng)聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心(Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation)從人全血中純化外周血單核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，然后以5×106個(gè)/ml的濃度再懸浮于測(cè)定培養(yǎng)基(含有10％胎牛血清的RPMI培養(yǎng)基)中。將50μl細(xì)胞懸浮液與50μl測(cè)試化合物(4×濃度在含有0.2％DMSO的測(cè)定培養(yǎng)基中)一起在96孔組織培養(yǎng)板中在室溫孵育5分鐘。然后將100μlLPS(200ng/ml儲(chǔ)備液)加到細(xì)胞懸浮液中，然后將板在37℃孵育6小時(shí)。孵育后，收集培養(yǎng)基，然后在-20℃貯存。使用標(biāo)準(zhǔn)ELISA試劑盒(Pharmingen-San Diego，CA)對(duì)培養(yǎng)基中的TNF-α濃度進(jìn)行定量。經(jīng)線性回歸分析來(lái)計(jì)算TNF-α的濃度和測(cè)試化合物的IC50值(抑制LPS刺激的TNF-α產(chǎn)生達(dá)50％的化合物濃度)。
p38測(cè)定 所述測(cè)定在V形底96孔板中進(jìn)行。最終測(cè)定體積為60μl，其通過(guò)三次加入20μl酶于測(cè)定緩沖液(50mM Tris pH 7.5、10mM MgCl2、50mM NaCl和1mM DTT)中的溶液、20μl底物(MBP和ATP)于測(cè)定緩沖液(50mM Tris pH7.5、10mM MgCl2、50mM NaCl和1mM DTT)中的溶液和20μl測(cè)試化合物于測(cè)定緩沖液(50mM Tris pH 7.5、10mM MgCl2、50mM NaCl和1mM DTT)中的溶液來(lái)制備。將細(xì)菌表達(dá)的活化的p38與測(cè)試化合物一起孵育10分鐘，然后開(kāi)始與底物反應(yīng)。將反應(yīng)混合物在25℃孵育45分鐘，然后通過(guò)向每種樣品中加入5μl 0.5M EDTA來(lái)終止。使用Skatron Micro96細(xì)胞收集器(Skatron，Inc.)將反應(yīng)混合物抽吸到預(yù)潤(rùn)濕的過(guò)濾墊(filtermat)上，然后用PBS洗滌。然后將過(guò)濾墊在微波爐中干燥1分鐘，用MeltilLex A閃爍蠟(Wallac)處理，然后在Microbeta閃爍計(jì)數(shù)器1450型(Wallac)上計(jì)數(shù)。通過(guò)非線性最小二乘法回歸使用Prizm(GraphPadSoftware)對(duì)抑制數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。測(cè)定中試劑的最終濃度為ATP，1μM；[γ-33P]ATP，3nM；MBP(Sigma，#M1891)，2μg/孔；p38，10nM；以及DMSO，0.3％。所感興趣的一個(gè)具體類別的化合物是同時(shí)具有以下特征的那些化合物(1)對(duì)p38α的活性＜100nm，以及(2)與β相比對(duì)α具有選擇性(例如50倍、100倍或200倍選擇性)。實(shí)施例127-225中的化合物具有至少50倍的α選擇性。
由LPS刺激的小鼠產(chǎn)生TNF-α 用懸浮于無(wú)菌鹽水中的50μg/kg脂多糖(LPS；大腸桿菌菌株0111B4，Sigma)對(duì)小鼠(Balb/c雌性，6-8周齡，Harlan Labs；n＝8/治療組)進(jìn)行腹膜內(nèi)注射。九十分鐘后，小鼠通過(guò)吸入CO2:O2來(lái)鎮(zhèn)靜，然后得到血樣。分離血清，然后經(jīng)市售ELISA測(cè)定根據(jù)制造商(R & D Systems，Minneapolis，MN)提供的說(shuō)明書(shū)對(duì)TNF-α的濃度進(jìn)行分析。
在注射LPS前將測(cè)試化合物在不同時(shí)間口服給藥。所述化合物以在各種載體或增溶劑中的混懸液或溶液的形式來(lái)給藥。
p38α測(cè)定 所述測(cè)定在U形底384孔板中進(jìn)行。最終測(cè)定體積為30μl，其通過(guò)加入15μl酶和底物(熒光化肽(fluoresceinated peptide)和ATP)于測(cè)定緩沖液(100mM HEPES pH 7.2、10mM MgCl2、0.015％Brij35和4mM DTT)中的溶液和15μl測(cè)試化合物于測(cè)定緩沖液(100mM HEPES pH 7.2、10mM MgCl2、0.015％Brij35和4mM DTT)中的溶液來(lái)制備。通過(guò)將活化的p38α與底物和測(cè)試化合物混合來(lái)開(kāi)始反應(yīng)。將反應(yīng)混合物在室溫孵育60分鐘，然后通過(guò)向每種樣品中加入45μl 35mM EDTA來(lái)終止。通過(guò)對(duì)熒光底物和磷酸化產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離在Caliper LabChip 3000(Caliper，Hopkinton，MA)上對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行分析。通過(guò)與無(wú)酶對(duì)照反應(yīng)混合物的100％抑制和僅含載體反應(yīng)混合物的0％抑制進(jìn)行比較來(lái)計(jì)算抑制數(shù)據(jù)。測(cè)定中試劑的最終濃度為ATP，20μM；FL-P38α肽，1.5μM；p38α，6nM；和DMSO，1.6％。
p38β測(cè)定 所述測(cè)定在U形底384孔板中進(jìn)行。最終測(cè)定體積為30μl，其通過(guò)加入15μl酶和底物(熒光化肽和ATP)于測(cè)定緩沖液(100mM HEPES pH 7.2、10mM MgCl2、0.015％Brij35和4mM DTT)中的溶液和15μl測(cè)試化合物于測(cè)定緩沖液(100mM HEPES pH 7.2、10mM MgCl2、0.015％Brij35和4mM DTT)中的溶液來(lái)制備。通過(guò)將活化的p38β與底物和測(cè)試化合物混合來(lái)開(kāi)始反應(yīng)。將反應(yīng)混合物在室溫孵育60分鐘，然后通過(guò)向每種樣品中加入45μl 35mMEDTA來(lái)終止。通過(guò)對(duì)熒光底物和磷酸化產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離在CaliperLabChip 3000(Caliper，Hopkinton，MA)上對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行分析。通過(guò)與無(wú)酶對(duì)照反應(yīng)混合物的100％抑制和僅含載體反應(yīng)混合物的0％抑制進(jìn)行比較來(lái)計(jì)算抑制數(shù)據(jù)。測(cè)定中試劑的最終濃度為ATP，20μM；FL-P38β肽，1.5μM；p38β，1nM；以及DMSO，1.6％。
縮寫(xiě) 為了便于參考，在本申請(qǐng)(包括隨后的制備方法和實(shí)施例)中使用以下縮寫(xiě) MeOH＝甲醇 EtOH＝乙醇 EtOAc＝乙酸乙酯 Boc＝叔丁氧羰基 CBZ＝芐氧羰基 DCM＝二氯甲烷 DCE＝1，2-二氯乙烷 DEAD＝偶氮二羧酸二乙酯 DMF＝二甲基甲酰胺 DMSO＝二甲基亞砜 PmB＝對(duì)甲氧基芐基 TFA＝三氟乙酸 THF＝四氫呋喃 TMS＝三甲基甲硅烷基 p-TsOH＝對(duì)甲苯磺酸 HATU＝O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基`六氟磷酸鹽 KOH＝氫氧化鉀 K2CO3＝碳酸鉀 POCl3＝磷酰氯 KOtBu＝叔丁醇鉀 EDC或EDCI＝1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 DIPEA＝二異丙基乙胺 HOBt＝1-羥基苯并三唑水合物 m-CPBA＝間氯過(guò)氧苯甲酸 LiHMDS＝二(三甲基甲硅烷基)氨基鋰 NaH＝氫化鈉 NaOEt＝乙醇鈉 NaOH＝氫氧化鈉 Na2S2O3＝硫代硫酸鈉 HCl＝氯化氫 NMP＝N-甲基吡咯烷酮 CO2＝二氧化碳 Pd＝鈀 Pd/C＝鈀/碳 sec＝秒 min＝分鐘 h＝小時(shí) L＝升 mL或ml＝毫升 μL＝微升 g＝克 mg＝毫克 mol＝摩爾 mmol＝毫摩爾 N＝當(dāng)量 M＝摩爾濃度 ℃＝攝氏度 rt＝室溫 Ret.Time或tR＝保留時(shí)間(分鐘) anhyd.＝無(wú)水的 sat或sat’d＝飽和的 aq.＝水溶液 HPLC＝高效液相色譜 LCMS＝高效液相色譜/質(zhì)譜 MS＝質(zhì)譜 NMR＝核磁共振 MHz＝兆赫 s＝單峰 m＝多重峰 d＝二重峰 dd＝雙二重峰 制備方法 式I化合物通常可根據(jù)以下方案和本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)來(lái)制備。如下所示，在每種方案后是使用所披露方案制備具體化合物的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例。
本發(fā)明化合物可使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)來(lái)合成。有利的是，這些化合物從易于得到的起始原料方便地合成。下面為制備本發(fā)明化合物的一般合成方案。這些方案是說(shuō)明性的而非意在限制本領(lǐng)域技術(shù)人員可用于制備本申請(qǐng)披露的化合物的可能技術(shù)。不同的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。此外，合成中的各步驟可按交替的順序或次序來(lái)進(jìn)行以得到期望的化合物(或多個(gè)化合物)。將所引用的所有文獻(xiàn)全文引入本申請(qǐng)作為所記錄主題和相關(guān)主題的參考。
本發(fā)明化合物可通過(guò)有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法來(lái)制備。一般而言，完成反應(yīng)操作所花費(fèi)的時(shí)間可由進(jìn)行所述操作的人員判斷，優(yōu)選在通過(guò)由HPLC或TLC等方法監(jiān)測(cè)反應(yīng)而得到的信息的輔助下判斷。反應(yīng)不必進(jìn)行完全以可用于本發(fā)明?？捎糜诒景l(fā)明的雜環(huán)的制備描述在一系列書(shū)籍中Comprehensive Heterocyclic Chemistry.The Structure，Reactions，Synthesis and Uses，of Heterocyclic Compounds，F(xiàn)irst Edition Pergamon PressNew York，publ.，Katritzky，A.R.，Rees，C.W.，eds.(1984)；和ComprehensiveHeterocyclic Chemistry II.A Review of the Literature 1982-1995.The Structure，Reactions，Synthesis and Uses of Heterocyclic Compounds，Pergamon PressNew York，publ.Katritzky，A.R.，Rees，C.W.and Scriven，E.F.，eds.(1996)。
用于制備可用于本發(fā)明的化合物的酸或酰氯(acid chloride)可以是市售的，或可通過(guò)有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法來(lái)容易地制備，并且描述在Richard C.Larock，Comprehensive Organic Transformations.A Guide toFunctional Group Preparation，VCH Publishers，Inc.，publ.，pp.385-439(1989)中。
實(shí)施例 提供以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的部分范圍而非意在對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限制。除非另有說(shuō)明，使用本申請(qǐng)披露的方案和其它方法對(duì)實(shí)施例進(jìn)行制備、分離和表征。本申請(qǐng)使用的縮寫(xiě)如上文所定義。
除非另有說(shuō)明，以下HPLC條件用于實(shí)施例YMC S5 ODS 4.6×50mmBallistic柱，4mL/min流速，4分鐘線性梯度洗脫(起始溶劑％B＝0，最終溶劑％B＝100)，溶劑A＝10％MeOH/90％H2O/0.2％H3PO4，溶劑B＝90％MeOH/10％H2O/0.2％H3PO4。
實(shí)施例1至126 方案1至12 在本申請(qǐng)中描述的方案1至12可用于制備本申請(qǐng)記錄的化合物。除非另有說(shuō)明，上文列出的定義和縮寫(xiě)是適用的。
方案1 具有一般結(jié)構(gòu)c的化合物可根據(jù)下文方案1中的步驟A或B來(lái)制備，其中R20＝-C(O)NH-R4。

步驟A 將羧酸a和苯胺b溶于極性非質(zhì)子性溶劑如DMF中。加入胺堿(如DIPEA)和偶聯(lián)劑(如BOP)。將反應(yīng)混合物在室溫或高溫?cái)嚢瑁玫疆a(chǎn)物c。
步驟B 可供選擇地，使酰氯d與苯胺b在非質(zhì)子性溶劑如DCM中在胺堿如DIPEA的存在下反應(yīng)，得到產(chǎn)物c。
方案2 可使用方案2，其中R29為H或正丙基，R30為H或CH3，以及X＝Cl、Br、I或另一種合適的離去基。

方案3 可使用方案3，其中R31為任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基。

方案4 基于吡咯的抑制劑的合成
各種基于吡咯的p38激酶抑制劑可根據(jù)方案4中概述的操作來(lái)制備，其中R33具有與R31相同的定義?？捎盟崛鏗2SO4將3-甲基-吡咯-2，4-二羧酸二乙酯水解為4-一元羧酸d。與胺形成標(biāo)準(zhǔn)酰胺鍵可得到C-4酰胺吡咯e，其接下來(lái)可水解為C2-羧酸，并通過(guò)與苯胺偶聯(lián)而進(jìn)一步加工為酰胺，得到具有一般結(jié)構(gòu)f的化合物。2-一元羧酸吡咯b可由二酯經(jīng)堿性皂化來(lái)制備，然后其可與胺或苯胺偶聯(lián)，得到具有一般結(jié)構(gòu)c的化合物。
方案5 吡咯并三嗪酮抑制劑的合成
吡咯并三嗪酮-苯胺p38抑制劑可根據(jù)方案5中概述的方法來(lái)制備，其中R34具有與R31相同的定義，以及對(duì)“芳基”的合適值進(jìn)行選擇(例如如實(shí)施例中所示)?？墒褂脡A和烷化劑如碘丙烷在N3上對(duì)吡咯并三嗪酮a進(jìn)行烷基化，得到b。可用氫氧化物源如NaOH將C6酯水解為酸，得到c。最后，可使用標(biāo)準(zhǔn)酰胺鍵形成條件使酸c與苯胺偶聯(lián)，得到d。
方案6
稠合的噻唑-嘧啶酮p38抑制劑可根據(jù)方案6中概述的一般方法來(lái)制備，其中R36具有與R31相同的定義，以及芳基具有與方案5中相同的定義。可使氨基噻唑a與5-(甲氧基亞甲基)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)己烷-4，6-二酮b在適當(dāng)?shù)娜軇┲性诩訜嵯路磻?yīng)，得到c。將c在高沸點(diǎn)溶劑如二苯醚中加熱，得到6，5-稠環(huán)化合物d?？捎脷溲趸镌慈鏝aOH將酯d水解為羧酸e，然后可使羧酸e與苯胺偶聯(lián)，得到具有一般結(jié)構(gòu)f的化合物。
方案7
化合物c可如方案7中概述的那樣來(lái)制備使酰鹵a(其中X＝Cl或Br；R37＝H或CH3；以及R38＝與就R31所述相同的值)與苯胺b在惰性溶劑如二氯甲烷或THF中在有機(jī)堿如二異丙基乙胺或三乙胺或DBU的存在下反應(yīng)，形成c。
可供選擇地，c可如下制備使羧酸a(X＝OH)與苯胺b在標(biāo)準(zhǔn)酰胺偶聯(lián)條件(例如EDC、HOBt、i-Pr2EtNH2)下反應(yīng)，形成c。
方案8
在方案8中，化合物h可由市售化合物a和b制備?？墒够衔颽與化合物b在堿如三乙胺的存在下在溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，得到化合物c?？墒够衔颿與無(wú)機(jī)酸如鹽酸在溶劑如二氧雜環(huán)己烷中反應(yīng)，得到化合物d?？墒够衔飀與化合物e在堿如吡啶的存在下在溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)，得到化合物f?？墒够衔飂在氫氧化物如氫氧化鉀的存在下在溶劑如甲醇中水解，得到化合物g。最后，可使化合物g與胺在偶聯(lián)劑(如EDCl和HOBt)和堿(如二異丙基乙胺)的存在下在溶劑如NMP中反應(yīng)，得到化合物h。
方案9
在方案9中，化合物c可使用堿如吡啶在溶劑如二氯甲烷中從市售化合物a和b來(lái)制備。
方案10
對(duì)于方案10而言，化合物e可從方案10中所述的市售化合物a和b制備，其中R39具有與就R31所定義相同的值。可使化合物a與化合物b在偶聯(lián)劑如EDCI和HOBt的存在下在溶劑如二甲基甲酰胺中反應(yīng)，得到化合物c?？墒够衔颿與化合物d在偶聯(lián)劑如EDCI和HOBt的存在下在溶劑如二甲基甲酰胺中反應(yīng)，得到化合物e。
方案11
對(duì)于方案11而言，化合物d可從方案11中所述的市售化合物a和b制備，其中R40具有與就R31所定義相同的值?？墒故惺刍衔颽與化合物b在偶聯(lián)劑如EDCI和HOBt的存在下在溶劑如二甲基甲酰胺中反應(yīng)，得到化合物c。可使化合物c與胺(RNH2)在溶劑如N-甲基吡咯烷酮中反應(yīng)，得到化合物d。
方案12
對(duì)于方案12而言，化合物g可從方案12中所述的市售化合物a制備，其中R41具有與就R31所定義相同的值?？捎脷溲趸?如氫氧化鉀)水溶液使化合物a在溶劑如甲醇中水解，得到化合物b。可使化合物b與化合物c在偶聯(lián)劑如EDCI和HOBt的存在下在溶劑如二甲基甲酰胺中反應(yīng)，得到化合物d?？捎醚趸瘎┤玳g氯過(guò)氧苯甲酸使化合物d在溶劑如二氯甲烷中氧化，得到化合物e?？墒够衔飁與硫醇(RSH)在堿如氫化鈉的存在下在溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)，得到化合物f。最后，可用氧化劑如間氯過(guò)氧苯甲酸使化合物f在溶劑如二氯甲烷中氧化，得到化合物g。
實(shí)施例1(方法1)
向3-(2-氯苯基)異唑-5-羧酸a(45mg，0.20mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺b(50mg，0.22mmol)、BOP(111mg，0.25mmol)和DIPEA(0.087mL，0.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?h，然后加熱至70℃并再保持1h。一旦冷卻至室溫，加入水(4mL)，然后經(jīng)真空過(guò)濾收集所形成的沉淀物。粗固體經(jīng)反相制備性HPLC進(jìn)一步純化，得到實(shí)施例1(也稱為化合物1)，其為灰白色固體(44mg)。HPLC保留時(shí)間3.20分鐘。LCMS[M+H]+＝396.3，398.3。
實(shí)施例2(方法2)
向5-(4-氯苯基)-1，3，4-二唑-2-羧酸a(45mg，0.20mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺b(50mg，0.22mmol)、HATU(95mg，0.25mmol)和DIPEA(0.105mL，0.6mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃攪拌1h。一旦冷卻至室溫，加入水(4mL)，然后經(jīng)真空過(guò)濾收集所形成的沉淀物，得到實(shí)施例2(也稱為化合物2)，其為灰白色固體(51mg)。HPLC保留時(shí)間3.17分鐘。LCMS[M+H]+＝397.3，399.3。
實(shí)施例3至9 表1中所示的實(shí)施例3至9以類似于上文實(shí)施例1和2的方式制備。
表1

實(shí)施例10
步驟A 將a(方案2)(R30＝H)(0.234g，1.59mmol，1.0當(dāng)量)、THF(3.2mL)和NaOH水溶液(1N，6.4mL，6.4mmol，4.0當(dāng)量)的溶液回流過(guò)夜。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物真空濃縮但不濃縮至干。在0℃加入HCl水溶液(3N)直到經(jīng)石蕊試紙確定pH等于約3。水層用CH2Cl2(3×)和EtOAc(3×)萃取。合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到b(方案2)，其為橙色固體(0.0696g，32％收率)。HPLC RT＝0.377分鐘(94％，220nm)；LC/MS(MH)＝139.99。
步驟B 將b(方案2)(0.0696，0.50mmol，1.0當(dāng)量)、c(方案2)(0.115g，0.06mmol，1.2當(dāng)量)、EDAC(0.146g，0.76mmol，1.5當(dāng)量)、HOBt(0.103g，0.76mmol，1.5當(dāng)量)和DMF(1.0mL)的溶液在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。反應(yīng)混合物用水和EtOAc稀釋，然后分離各層。水層用EtOAc(4×)萃取。合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮為黃色油狀物，使其接受自動(dòng)制備性色譜(autoprep.)。收集適當(dāng)?shù)募?jí)份，然后冷凍干燥，得到化合物10(方案2中的d)(也稱為實(shí)施例10)，其為灰白色固體(0.040g，25％收率)。HPLC RT＝1.717分鐘(97％，220nm)；LC/MS(MH)＝312.79。
實(shí)施例11
以相似的順序得到實(shí)施例11(也稱為化合物11)(方案2中的d，其中R29＝H且R30＝CH3)，其為白色固體。HPLC RT＝1.937分鐘(95％，220nm)；LC/MS(MH)＝326.16。
實(shí)施例12
步驟A 在氮?dú)庀略?℃向a(方案2)(R30＝H；0.166g，1.1mmol，1.0當(dāng)量)于DMF(1.2mL)中的溶液中加入NaH(95％于礦物油中的分散體，0.0601g，2.4mmol，2.2當(dāng)量)。移開(kāi)冷浴，然后將反應(yīng)混合物攪拌5分鐘至室溫。加入正丙胺，然后將溶液在70℃加熱。3.5h后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后用EtOAc和水稀釋。分離各層后，水層用EtOAc(2×)萃取。合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮。經(jīng)自動(dòng)制備性色譜后，收集適當(dāng)?shù)募?jí)份，得到e，其為白色固體(0.032g，15％收率)。HPLC RT＝1.930分鐘(100％，220nm)；LC/MS(MH)＝196.09。
步驟B 以與就方案2中的d相似的順序得到實(shí)施例12(也稱為化合物12)(方案2中的f，其中R29＝正丙基且R30＝H)，其為白色固體。HPLC RT＝2.277分鐘(100％，220nm)；LC/MS(MH)＝354.08。
實(shí)施例13
步驟A 在氮?dú)庀孪騛(方案3)(3.17g，12.5mmol，1.0當(dāng)量)和正丙胺(1.1mL，13.4mmol，1.1當(dāng)量)于THF(50mL)中的溶液中加入NaBH(OAc)3(4.07g，19.2mmol，1.5當(dāng)量)。攪拌過(guò)夜后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，然后殘余物用CH2Cl2和水稀釋。分離各層后，水層用CH2Cl2萃取，合并有機(jī)層，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮。進(jìn)行硅膠色譜(使用CH2Cl2∶MeOH(20∶1)作為洗脫劑)，得到b(R31＝正丙基且R4＝環(huán)丙基)，其為淺黃色固體(2.43g，66％)。HPLC RT＝2.393分鐘(100％，220nm)；LC/MS(MH)＝297.00。
步驟B 將b(2.43g，8.2mmol，1.0當(dāng)量)、THF(16mL)和NaOH水溶液(1N，35mL，35mmol，4.3當(dāng)量)的溶液回流過(guò)夜。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物真空濃縮但不濃縮至干。在0℃加入HCl水溶液(6N)，直到經(jīng)石蕊試紙測(cè)量pH等于約5。收集沉淀物，用水洗滌，然后干燥，得到c，其為白色固體(1.78g，90％收率)。HPLC RT＝1.023分鐘(96％，220nm)；LC/MS(MH)＝241.12。
步驟C 將c(0.91g，3.8mmol，1.0當(dāng)量)、EDAC(1.6g，8.4mmol，2.2當(dāng)量)、HOBt(1.1g，8.4mmol，2.2當(dāng)量)和DMF(200mL)的溶液在氮?dú)庀略?5℃加熱。0.5h后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后經(jīng)蒸餾除去溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2中，依次用水和飽和NaHCO3水溶液洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮。用Et2O(乙醚)研磨，得到粗品d，其為褐色固體，所述固體不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。HPLC RT＝2.850分鐘(84％，220nm)；LC/MS(MH)＝350.15。
步驟D 以與就c相似的順序得到e，其為褐色固體(0.16g，48％收率)。HPLCRT＝1.920分鐘(93％，220nm)；LC/MS(MH)＝223.02。
步驟E(方案3中的步驟I) 將e(0.071g，0.32mmol，1.0當(dāng)量)、f(0.075g，0.40mmol，1.2當(dāng)量)、EDAC(0.094g，0.49mmol，1.5當(dāng)量)、HOBt(0.067g，0.49mmol，1.5當(dāng)量)和DMF(0.6mL)的溶液在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。然后將反應(yīng)混合物在50℃加熱并攪拌過(guò)夜。冷卻至室溫后，加入MeOH，然后使反應(yīng)混合物接受自動(dòng)制備性色譜。收集適當(dāng)?shù)募?jí)份，然后在0℃加入NaHCO3(固體)直到經(jīng)石蕊試紙確定pH等于約11。收集沉淀物，用水洗滌并干燥，得到實(shí)施例13(也稱為化合物13)(方案3中的g，其中R31＝正丙基且R4＝環(huán)丙基)，其為白色固體(0.036g，28％收率)。HPLC RT＝2.597分鐘(100％，220nm)；LC/MS(MH)＝395.21。
實(shí)施例14
步驟A(方案3中的步驟II) 對(duì)于該實(shí)施例而言，R4＝異唑基且R31＝n-Pr(正丙基)。將d(0.103g，0.30mmol，1.0當(dāng)量)和f(0.103g，0.48mmol，1.6當(dāng)量)于DMF(0.6mL)中的溶液在50℃機(jī)械搖動(dòng)兩天。冷卻至室溫后，加入MeOH，然后使反應(yīng)混合物接受自動(dòng)制備性色譜。收集適當(dāng)?shù)募?jí)份，然后在0℃加入NaHCO3(固體)直到經(jīng)石蕊試紙確定pH等于約11。收集沉淀物，用水洗滌并干燥，得到實(shí)施例14(也稱為化合物14)，其為白色固體(0.017g，13％收率)。HPLC RT＝2.763分鐘(100％，220nm)；LC/MS(MH)＝422.13。
實(shí)施例15至18 對(duì)于實(shí)施例15至18而言，使用方案3，其中各物質(zhì)具有適當(dāng)?shù)闹怠?br>
使用方案3中的步驟II，得到以下化合物 實(shí)施例15(R31＝乙基，R4＝環(huán)丙基)HPLC RT＝2.427分鐘(93％，220nm)；LC/MS(MH)＝381.21。
實(shí)施例16(R31＝乙基，R4＝異唑基)HPLC RT＝2.533分鐘(＜100％，220nm)；LC/MS(MH)＝408.15。
實(shí)施例17(R31＝乙基，R4＝甲基)HPLC RT＝2.207分鐘(99％，220nm)；LC/MS(MH)＝355.14。
實(shí)施例18(R31＝乙基，R4＝乙基)HPLC RT＝2.350分鐘(98％，220nm)；LC/MS(MH)＝369.21。
實(shí)施例19 對(duì)于實(shí)施例19而言，使用方案4，其中取代基具有適當(dāng)?shù)闹怠?br> 步驟A
物質(zhì)b根據(jù)Corwin的方法制備參見(jiàn)Corwin，A.H.，Viohl，P.，J.Am.Chem.Soc.，1137(1944)。
步驟B
在可重新密封的小瓶(resealable vial)中向酸b(63mg，0.32mmol)、EDC(74mg，0.38mmol)、HOBt(52mg，0.38mmol)和2-甲基-5-(甲氧基氨甲?；?苯胺鹽酸鹽(95mg，0.44mmol)中加入DMF(1.5mL)和DIPEA(0.12mL，0.7mmol)。將小瓶密封，然后在60℃加熱20h。將反應(yīng)溶液冷卻，然后在EtOAc(10mL)和水(5mL)之間分配。分離各層，有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾，然后濃縮為油狀物。產(chǎn)物經(jīng)制備性TLC純化，得到實(shí)施例19(也稱為化合物19)(17.7mg)。HPLC tR＝3.21分鐘，99.3％純度。LCMSm/z對(duì)于C18H21N3O5[M+H]+而言，計(jì)算值為360.2，觀測(cè)值為360.2。
實(shí)施例20(方案4) 步驟A
將作為a的3-甲基-吡咯-2，4-二羧酸二乙酯(4.13g)溶于10mL H2SO4中，然后在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將溶液在攪拌下倒入冰水(20mL)中。對(duì)所形成的固體進(jìn)行過(guò)濾，然后用水沖洗，干燥后得到d(2.67g)。
步驟B
將酸d(0.95g，4.8mmol)、EDC(1.01g，5.3mmol)、HOBt(0.71g，5.3mmol)加到DMF(4mL)和DIPEA(1.25mL，7.2mmol)中。攪拌1h后，加入丙胺(0.6mL，7.2mmol)，然后將反應(yīng)溶液攪拌3h。加入水，然后經(jīng)過(guò)濾收集所形成的固體并用水洗滌，干燥后得到e(750mg)。
步驟C
向e(750mg)于THF(2mL)中的溶液中加入2N NaOH(2mL)，然后將混合物在60℃加熱5h。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(rotovap)上除去THF，然后用1N HCl將所得到的溶液調(diào)節(jié)至pH為4。收集沉淀的固體并洗滌，得到酸f(246mg)。
步驟D
向酸f(16mg，0.07mmol)于NMP(0.3mL)中的溶液中加入HATU(32mg，0.08mmol)和3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺(29mg，0.15mmol)，然后在50℃加熱20h。產(chǎn)物直接經(jīng)制備性HPLC純化，得到實(shí)施例20(也稱為化合物20)(f，6mg)。HPLC tR＝3.02分鐘，94％純度。LCMS383.2(M+H)。
實(shí)施例21(方案5) 步驟A
向作為a的吡咯并三嗪酮(606mg，2.5mmol)于DMF(6mL)中的溶液中加入Cs2CO3(1.01g，3.1mmol)和1-碘丙烷(0.3mL，3.1mmol)，然后將反應(yīng)混合物攪拌3h。通過(guò)加料漏斗(addition funnel)滴加水(30mL)，然后將形成的固體攪拌15分鐘，過(guò)濾并用水沖洗。粗固體直接用于下一步。
步驟B
向酯b(2.5mmol)中加入MeOH(5mL)和1N NaOH(5mL)，然后將溶液在60℃加熱18h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后真空除去MeOH。所得到的溶液進(jìn)一步用水(5mL)稀釋并用1N HCl(5mL)中和。對(duì)沉淀的固體進(jìn)行過(guò)濾，然后用水沖洗，得到粗制的酸c(450mg，2步收率77％)。
步驟C
向酸c(1當(dāng)量)、EDC(1.2當(dāng)量)、HOBt(1.2當(dāng)量)于DMF(0.43M)中的溶液中加入一種苯胺即3-氨基-N-甲基-4-甲基-苯甲酰胺(1.2當(dāng)量)，然后將反應(yīng)混合物在60-65℃加熱20h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入水(4體積)，然后將形成的固體攪拌4h，過(guò)濾并用水沖洗，得到純的實(shí)施例21(也稱為化合物21)(d，18.7mg，48％收率)。HPLC tR＝3.16分鐘，99％純度。LCMSm/z對(duì)于C20H23N5O3[M+H]+而言，計(jì)算值為382.18，觀測(cè)值為382.2。
實(shí)施例22至28 對(duì)于實(shí)施例22至28而言，使用與實(shí)施例21類似的操作，其中就R50而言的值在表中列出。更一般地，R50可選自就R31所定義的基團(tuán)。
表2

實(shí)施例29(方案6)
步驟A
將作為a的2-氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酸乙酯(210mg，1.13mmol)和作為b的5-(甲氧基亞甲基)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)己烷-4，6-二酮(213mg，1.13mmol)于MeCN(乙腈)(3mL)中的溶液在70℃加熱90分鐘。然后將溶液冷卻至室溫，并真空除去MeCN。先后加入乙醚(5mL)和己烷(2mL)，將形成的漿液攪拌5分鐘然后過(guò)濾。固體用己烷(2×3mL)洗滌，并在過(guò)濾器上干燥，得到c，其為褐色固體(231mg，60％收率)。HPLC tR＝3.66分鐘，96％純度；LCMS 341.1(M+H)。
步驟B
將c(154mg)于二苯醚(1.5mL)中的混懸液加熱至200-210℃并保持25分鐘。反應(yīng)混合物在200℃左右開(kāi)始放出CO2。將溶液冷卻，然后直接經(jīng)柱色譜(10％至35％EtOAc/己烷)純化，得到d(67mg，62％收率)。LCMS239.04(M+H)。
步驟C
向d(62mg，0.26mmol)于MeOH(0.4mL)和THF(0.4mL)中的溶液中加入1N NaOH(0.4mL，0.39mmol)，然后將溶液在室溫?cái)嚢?0分鐘，在此過(guò)程中固體已經(jīng)沉淀出來(lái)。加入pH為7的緩沖液(0.8mL)，將反應(yīng)容器在冰浴中冷卻，然后加入1N HCl(0.4mL)。濃縮溶液，用熱的EtOAc將產(chǎn)物從鹽中萃取出來(lái)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。
向酸e(19.5mg，0.09mmol)和3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽(25mg，0.11mmol)于NMP(0.4mL)中的溶液中加入HATU(42.4mg，0.11mmol)和DIPEA(0.02mL，0.11mmol)，然后將溶液加熱至75℃并保持4h。粗反應(yīng)混合物經(jīng)制備性HPLC純化，得到實(shí)施例29(也稱為化合物29)(12.6mg，35％收率)。HPLC tR2.83分鐘，99.0％純度；LCMS 383.1(M+H)。
實(shí)施例30至31 下表3中的實(shí)施例30至31化合物使用方案6中描述的類似于上文實(shí)施例29的方法來(lái)制備。
表3

實(shí)施例32(方案1)
向異噻唑-4-羧酸(20mg，0.15mmol)、EDC(32.4mg，0.17mmol)、HOBt(23mg，0.17mmol)于DMF(0.3mL)中的溶液中先后加入3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽(35mg，0.15mmol)和DIPEA(0.03mL，0.17mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃加熱1h。滴加水(0.6mL)并從加熱裝置移開(kāi)反應(yīng)混合物。將固體在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，過(guò)濾，然后用水洗滌，得到實(shí)施例32(42.1mg，91％收率)。HPLC tR＝2.63分鐘，99.80％純度；LCMS 302.1(M+H)。
步驟A
在0℃將苯甲酰氯(0.35mL，3.0mmol)加到5-甲氧羰基-1-甲基咪唑(0.35g，2.5mmol)和TEA(0.41mL)于MeCN(5mL)中的溶液中。將混合物在0℃攪拌2h，倒入水中，然后萃取到EtOAc中。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并濃縮為固體，其用MeOH洗滌，得到a(412mg)。
步驟B
使用實(shí)施例20步驟C中制備e的方法(方案1)將酯a水解為酸b。
實(shí)施例33(方案1)
實(shí)施例33如下制備。
步驟A
在0℃將苯甲酰氯(0.35mL，3.0mmol)加到5-甲氧羰基-1-甲基咪唑(0.35g，2.5mmol)和TEA(0.41mL)于MeCN(5mL)中的溶液中。將混合物在0℃攪拌2h，倒入水中，然后萃取到EtOAc中。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)Na2SO4干燥，過(guò)濾并濃縮為固體，其用MeOH洗滌，得到a(412mg)。
步驟B
使用用于制備實(shí)施例21(方案5)的一般操作使來(lái)自實(shí)施例33的酸b與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽偶聯(lián)。HPLC tR＝3.43分鐘，97％純度；LCMS 403.2(M+H)。
實(shí)施例34 實(shí)施例34以與實(shí)施例33類似的方式制備。HPLC tR＝3.39分鐘，98.6％純度；LCMS 391.2(M+H)。

實(shí)施例35
實(shí)施例35如下制備。根據(jù)實(shí)施例20步驟C中制備e的一般操作(方案4)使5-乙氧羰基-1-苯基咪唑(200mg)在MeOH(5mL)中水解，然后使用制備實(shí)施例21步驟C的一般操作(方案5)與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺鹽酸鹽偶聯(lián)。HPLC tR＝2.31分鐘，98％純度；LCMS 361.1(M+H)。
實(shí)施例36
實(shí)施例36如下制備。將2-苯基-2H-1，2，3-三唑-4-羧酸(對(duì)于其制備請(qǐng)參見(jiàn)R.M.Carman and R.F.Evans，J.Chem.Ed.46847-848(1969)；100mg，0.53mmol)、苯胺即3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基-苯甲酰胺(300mg，1.59mmol)、EDCI(200mg，1.06mol)、HOBt(97mg，0.63mol)和二異丙基乙胺(360μL，2.12mmol)于THF(4mL)和DMF(0.7mL)中的溶液加熱至54℃并保持95分鐘。將反應(yīng)混合物濃縮，然后在1N HCl水溶液(8mL)和1∶1THF∶EtOAc(20mL)之間分配。分離有機(jī)萃取物，用1N HCl水溶液(2×)和飽和NaHCO3水溶液(2×)洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并濃縮，得到標(biāo)題化合物即實(shí)施例36(172mg，90％收率)，其為淺褐色固體。HPLC保留時(shí)間3.86分鐘。LRMS362.05(M+H)。
實(shí)施例37
實(shí)施例37如下制備。將5-甲基-2-苯基-2H-1，2，3-三唑-4-碳酰氯(15mg，0.07mmol)、苯胺即3-氨基-N-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-4-甲基-苯甲酰胺(25mg，0.1mmol)、二異丙基乙胺(35μL，0.21mmol)和預(yù)干燥的分子篩(

100mg)于二氯甲烷(2mL)中的溶液在環(huán)境溫度攪拌75分鐘。反應(yīng)混合物用甲醇稀釋并過(guò)濾。將濾液蒸發(fā)至干，然后用1N HCl水溶液稀釋。經(jīng)過(guò)濾收集固體，用1N HCl水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液和水洗滌，經(jīng)P2O5真空干燥，得到固體，其用乙醚∶己烷混合物(1∶1)研磨，得到標(biāo)題化合物即實(shí)施例37(12mg，41％收率)，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間4.19分鐘。LRMS430.16(M+H)。
實(shí)施例38/39(合并的(consolidated))(方案8)
實(shí)施例38/39如下制備。
步驟A
歷時(shí)5分鐘向1-Boc-哌嗪(2.0g，10.7mmol)和三乙胺(1.6mL，11.7mmol)于二氯甲烷(30mL)中的溶液中緩慢加入2，4-二甲氧基苯甲酰氯a(1.96g，9.76mmol)，然后將所得到的溶液在室溫?cái)嚢?5分鐘。加入二氯甲烷(約50mL)，然后將溶液用1N HCl水溶液(40mL)，水(40mL)，1N NaOH水溶液(40mL)和鹽水(40mL)依次洗滌。有機(jī)層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到3.06g(89％)化合物c，其為粘稠的油狀物。該粗物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。HPLC保留時(shí)間2.97分鐘。
步驟B
在室溫向化合物c(3.06g，8.73mmol)于二氧雜環(huán)己烷(40mL)中的溶液中加入4N無(wú)水HCl于二氧雜環(huán)己烷(20mL)中的溶液。在室溫?cái)嚢?.5h后，混濁的反應(yīng)混合物用己烷(約150mL)稀釋，經(jīng)真空過(guò)濾收集固體，并真空干燥，得到1.9g(76％)化合物d，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間0.77分鐘。1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.25(dd，J＝6.8，2.0Hz，1H)，6.65-6.63(m，2H)，4.10-3.90(m，2H)，3.89(s，3H)，3.86(s，3H)，3.67-3.60(m，2H)，3.58(m，2H)，3.33-3.22(m，4H)。
步驟C
在室溫向3-氨基-4-甲基苯甲酸甲酯(1.0g，6.0mmol)和吡啶(2mL)于二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入氯甲酸4-硝基苯酯(1.5g，7.3mmol)，然后將形成的混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。加入二氯甲烷(約100mL)，然后混合物用10％枸櫞酸水溶液(3×50mL)、10％碳酸鈉水溶液(3×50mL)和鹽水(50mL)依次洗滌，然后經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到1.6g(80％)化合物e，其為淺黃色固體。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就直接使用。HPLC保留時(shí)間3.05分鐘。
步驟D
向化合物d(0.62g，2.2mmol)于乙腈(4mL)中的漿液中加入吡啶(1mL)，然后對(duì)形成的混合物進(jìn)行攪拌，直到形成澄清溶液。此時(shí)加入化合物e(0.6g，1.82mmol)，然后將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?5分鐘，然后在60℃攪拌2h。冷卻至室溫后，將混合物真空濃縮，然后將殘余物溶于二氯甲烷(50mL)中，然后溶液依次用1N HCl水溶液(3×20mL)、1N氫氧化鈉水溶液(3×20mL)、水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌。將所得到的溶液真空濃縮，所得到的油狀物經(jīng)快速硅膠柱色譜(使用梯度洗脫開(kāi)始于100％乙酸乙酯，結(jié)束于8％甲醇/乙酸乙酯)純化，得到0.50g(62％)化合物f(化合物39也稱為實(shí)施例39)，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間3.05分鐘。LCMS MH+(m/z)442.4。
步驟E
在室溫向化合物f(0.48g，1.1mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中加入3N氫氧化鈉水溶液(5mL)，然后將形成的混合物在50℃加熱30分鐘。冷卻至室溫后，將混合物真空濃縮，將所得到的油狀物溶于水(約25mL)中，加入1NHCl水溶液，直到溶液的pH達(dá)到1-2。經(jīng)真空過(guò)濾收集所形成的固體，并真空干燥，得到0.50g化合物g，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.50分鐘。1H NMR(d4-MeOH，400MHz)δ7.66(dd，J＝8.0，1.5Hz，1H)，7.22(d，J＝7.8Hz，1H)，7.10(d，J＝7.8Hz，1H)，6.52(m，2H)，3.76(s，3H)，3.74(s，3H)，3.74-3.70(m，2H)，3.55(m，2H)，3.42(m，2H)，3.29-3.24(m，4H)，2.20(s，3H)。
步驟F 將化合物g(0.050g，0.12mmol)、EDCI(0.029g，0.15mmol)、HOBt(0.019g，0.14mmol)和二異丙基乙胺(0.05mL，0.26mmol)于NMP(0.3mL)中的混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。此時(shí)加入0.5M氨于二氧雜環(huán)己烷中的溶液(0.7mL，0.35mmol)，然后將形成的混合物在室溫?cái)嚢?5h。使反應(yīng)混合物直接接受反相制備性HPLC純化。含有產(chǎn)物的級(jí)份用飽和碳酸氫鈉水溶液中和，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮以除去甲醇，得到含水漿液。經(jīng)真空過(guò)濾收集固體，用水洗滌并真空干燥，得到0.030g化合物38/39(也稱為實(shí)施例38/39)，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.23分鐘。LCMS MH+(m/z)427.3。
實(shí)施例40至48 下表4中列出的實(shí)施例40至48如先前就實(shí)施例38所述的那樣來(lái)制備。
表4


實(shí)施例49 步驟A(方案10)
實(shí)施例49如下制備，其中R39＝2，4-二甲氧基。將2，4-二甲氧基苯甲酸(1.00g，5.49mmol)、1-[3-(二甲基氨基)-丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和1-羥基苯并三唑于無(wú)水DMF(20mL)中的溶液在室溫?cái)嚢?.5h。混合物用冰水(150mL)淬滅，然后用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。合并的有機(jī)層用水、飽和碳酸氫鈉(50mL×2)、鹽水(50mL)洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮。在室溫將粗化合物(2.06g)再溶于無(wú)水DMF(20mL)中，加入二異丙基乙胺(1.91mL，0.98mmol)，接著一次性加入哌啶-4-羧酸(isonipecotic acid)(0.85g，6.59mmol)，接著在室溫?cái)嚢?6h。所形成的混合物用冰水淬滅，然后用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，合并的有機(jī)層用水(20mL×2)和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到1.51g化合物c，其為澄清的油狀物。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就直接使用。HPLC保留時(shí)間2.14分鐘。MH+(m/z)294。
步驟B
將化合物c(0.10g，0.20mmol)、1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和1-羥基苯并三唑于無(wú)水DMF(0.8mL)中的溶液在室溫?cái)嚢?h。先后加入二異丙基乙胺(0.108mL，0.60mmol)和3-氨基-4-甲基苯甲酰胺(62mg，0.40mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?6h。粗產(chǎn)物經(jīng)反相制備性HPLC純化，將含有產(chǎn)物的級(jí)份濃縮，然后在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到0.026g實(shí)施例49(也稱為化合物49)，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.30分鐘。LCMS MH+(m/z)426。
實(shí)施例50
實(shí)施例50如先前就實(shí)施例49所述的那樣來(lái)制備。HPLC保留時(shí)間2.39分鐘。LCMS MH+(m/z)440.4。
實(shí)施例51
實(shí)施例51如先前就實(shí)施例49所述的那樣來(lái)制備。HPLC保留時(shí)間2.39分鐘。LCMS MH+(m/z)456.2。
實(shí)施例52 步驟A
實(shí)施例52如下制備。在0℃通過(guò)注射器向2，4-二羥基苯甲酸甲酯(4.00g，23.8mmol)和碳酸鉀于丙酮(100mL)中的混懸液中滴加芐基溴(3.2mL，26.4mmol)。將形成的混合物在0℃攪拌1h，然后在室溫?cái)嚢?6h，之后將混合物過(guò)濾，然后將所得到的濾液真空濃縮。剩余的殘余物經(jīng)柱色譜純化，得到4.57g(74％)化合物a，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間3.80分鐘。
步驟B
在0℃向化合物a(4.57g，17.7mmol)于無(wú)水DMF(70mL)中的溶液中逐份加入氫化鈉(60％于油中的分散體，1.06g，26.6mmol)，然后將形成的混合物在0℃攪拌10分鐘。此時(shí)滴加碘甲烷(2.80mL，45mmol)，接著在0℃攪拌1h，然后在室溫?cái)嚢?6h?；旌衔镉帽?300mL)淬滅，1h后經(jīng)真空過(guò)濾收集固體。固體用水洗滌并真空干燥，得到4.80g(99.5％)化合物b，其為白色固體。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。HPLC保留時(shí)間3.38分鐘。LCMSMH+(m/z)273。
步驟C
將化合物b(3.00g，11.0mmol)于甲醇/THF 1∶1(22mL)中的溶液和3N氫氧化鈉水溶液(11mL)在60℃加熱1h。真空除去溶劑后，通過(guò)緩慢加入3N HCl水溶液將混合物的pH變?yōu)?。經(jīng)過(guò)濾收集所形成的固體并真空干燥，得到2.96g化合物c，其為白色固體。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。HPLC保留時(shí)間3.04分鐘。MH+(m/z)259。
步驟D
化合物d利用與先前就實(shí)施例49中步驟B所述相同的操作，通過(guò)用本實(shí)施例中的化合物c代替2，4-二甲氧基苯甲酸，從化合物c制備。
實(shí)施例53
實(shí)施例53利用與先前就步驟B所述相同的操作，從實(shí)施例49中的化合物c制備。HPLC保留時(shí)間3.07分鐘。LCMS MH+(m/z)502.3。
實(shí)施例54
實(shí)施例54利用與先前就步驟B所述相同的操作，從實(shí)施例49中的化合物c制備。HPLC保留時(shí)間3.07分鐘。LCMS MH+(m/z)516.2。
實(shí)施例55 步驟A
實(shí)施例55如下制備?；衔颽利用與先前就實(shí)施例49步驟B所述相同的操作，從6-氯吡啶-3-羧酸制備。
步驟B
將化合物a(50mg，0.15mmol)和芐胺(0.10mL，0.90mmol)于無(wú)水NMP(0.5mL)中的溶液在微波反應(yīng)器中在200℃加熱15分鐘。使反應(yīng)混合物直接接受反相制備性HPLC純化，然后將含有產(chǎn)物的級(jí)份濃縮，并冷凍干燥，得到0.039g標(biāo)題化合物(實(shí)施例55)的TFA鹽，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.11分鐘。LCMS MH+(m/z)401.2。
實(shí)施例56
實(shí)施例56如先前實(shí)施例55步驟B中所述的那樣，從化合物a制備。HPLC保留時(shí)間1.85分鐘。LCMS MH+(m/z)379.2。
實(shí)施例57
實(shí)施例57如先前實(shí)施例55步驟B中所述的那樣，從化合物a制備。HPLC保留時(shí)間1.66分鐘。LCMS MH+(m/z)353.3。
實(shí)施例58 步驟A
化合物a利用與先前就實(shí)施例49步驟B所述相同的操作，從2-氯吡啶-4-羧酸制備。
步驟B
實(shí)施例58利用與先前就實(shí)施例55步驟B所述相同的操作，從化合物a制備。HPLC保留時(shí)間2.08分鐘。LCMS MH+(m/z)401.1。
實(shí)施例59
實(shí)施例59利用與先前就實(shí)施例55步驟B所述相同的操作，從化合物a制備。HPLC保留時(shí)間1.90分鐘。LCMS MH+(m/z)379.2。
實(shí)施例60
實(shí)施例60利用與先前就實(shí)施例55步驟B所述相同的操作，從化合物a制備。HPLC保留時(shí)間1.69分鐘。LCMS MH+(m/z)353.1。
實(shí)施例61
步驟A
實(shí)施例61如下制備。在室溫向2-巰基-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(0.50g，2.7mmol)和碳酸鉀(0.75g，5.4mmol)于無(wú)水DMF(10mL)中的漿液中滴加碘乙烷(0.32mL，4.05mmol)。將形成的混合物在室溫?cái)嚢?h，然后反應(yīng)混合物用水(40mL)淬滅，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并的有機(jī)層用1M硫代硫酸鈉水溶液(20mL×2)、水(20mL×2)和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到0.52g(90％)化合物a，其為澄清的油狀物。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就直接使用。HPLC保留時(shí)間1.83分鐘。
步驟B
將化合物a(0.52g，2.43mmol)于甲醇(8mL)中的溶液和5N氫氧化鈉水溶液(1.5mL)回流1h。冷卻至室溫后，真空除去溶劑，然后通過(guò)緩慢加入6N HCl水溶液將混合物的pH變?yōu)?。將該溶液冷凍干燥，得到0.92g化合物b，其為白色固體。所形成的物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就直接使用。HPLC保留時(shí)間0.58分鐘。LCMS MH+(m/z)187。
步驟C
化合物c利用與先前就實(shí)施例49步驟B所述相同的操作，從化合物b制備。
步驟D 向化合物c(0.26g，0.74mmole)于二氯甲烷(3mL)中的漿液中一次性加入mCPBA(間氯過(guò)氧苯甲酸)(0.42g)，然后將形成的混合物在室溫?cái)嚢?6h。混合物用水(40mL)稀釋然后用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并的有機(jī)層用1M硫代亞硫酸鈉水溶液(20mL)、水(20ml×2)和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到0.30g白色粘性固體。經(jīng)反相制備性HPLC純化，然后將含有產(chǎn)物的級(jí)份冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例61)的TFA鹽，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.12分鐘。MH+(m/z)391。
實(shí)施例62
向苯硫酚(0.081g，0.72mmol)于THF(1mL)中的溶液中加入60％氫化鈉(0.020g，0.51mmol)的油分散體，然后將形成的混合物加熱至40℃并保持10分鐘。此時(shí)一次性加入實(shí)施例61，然后將形成的混合物在50℃攪拌16h。反應(yīng)混合物用水(10mL)淬滅，并用乙酸乙酯萃取(100mL)。有機(jī)層用1M氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，其為白色固體。該物質(zhì)經(jīng)反相制備性HPLC純化，將含有產(chǎn)物的級(jí)份冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例62)的TFA鹽，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間2.79分鐘，LCMS MH+(m/z)407。
實(shí)施例63
實(shí)施例63利用與先前就實(shí)施例62所述相同的操作，從實(shí)施例61制備。HPLC保留時(shí)間3.08分鐘。LCMS MH+(m/z)443.1。
實(shí)施例64
實(shí)施例64利用與先前就實(shí)施例61步驟D所述相同的操作，從實(shí)施例62制備。HPLC保留時(shí)間2.57分鐘。LCMS MH+(m/z)439.2。
實(shí)施例65至126 表5中列出的實(shí)施例65至126如上文就先前實(shí)施例所述的那樣來(lái)制備。
表5









實(shí)施例127至225 以下實(shí)施例127至225是α選擇性的，并且可通過(guò)所描述的方法來(lái)制備。先前的定義仍然適合。也說(shuō)明了另外的方案。
方案21 方案21說(shuō)明了制備式I化合物的方法，其中使環(huán)A與環(huán)B偶聯(lián)以形成R1。

d類型的化合物，其中環(huán)A和環(huán)B表示芳基或雜芳基，可從a類型的化合物制備，其中X1和X2各自獨(dú)立選自Cl或Br，如方案21中所述?；衔颽可在偶聯(lián)劑(如EDCI和HOBt)的存在下，在堿(如二異丙基乙胺)的存在下，在溶劑(如DMF)中與化合物b偶聯(lián)，得到化合物c?；衔颿可在鈀催化劑的存在下與硼酸或硼酸酯偶聯(lián)，得到d類型的化合物?？晒┻x擇地，e類型的化合物可在偶聯(lián)劑(如EDCI和HOBt)的存在下，在堿(如二異丙基乙胺)的存在下，在溶劑(如DMF)中與化合物b偶聯(lián)，得到化合物f?；衔飂可在鈀催化劑的存在下與聯(lián)硼酸頻那醇酯(bis(pinacolato)diborane)反應(yīng)，得到化合物g，化合物g然后可在鈀催化劑的存在下與芳基或雜芳基(其中X1和X2各自獨(dú)立選自Cl和Br)偶聯(lián)，得到d類型的化合物。
方案22
d類型的化合物可以如方案22所述制備?；衔颽的鹽酸鹽可在溶劑如甲苯中與巰基乙酸反應(yīng)，得到化合物b。如J.Med.Chem.，6(47)1448(2004)所述，化合物b可以在堿如NaOMe的存在下與化合物c反應(yīng)，得到d類型的化合物。
實(shí)施例127 5-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)呋喃-2-甲酰胺
向5-(4-氯苯基)呋喃-2-羧酸(45mg，0.20mmol)和3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440所述的那樣來(lái)制備)(50mg，0.22mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入DIPEA(0.105mL，0.6mmol)，將形成的混合物在室溫?cái)嚢?h，然后在80℃攪拌1h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入水(3mL)，經(jīng)真空過(guò)濾收集粗產(chǎn)物并真空干燥，得到78mg褐色固體。粗產(chǎn)物從CH2Cl2中重結(jié)晶，得到48mg淺褐色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例127)。HPLC保留時(shí)間＝3.52分鐘，LCMS[M+H]+395.23。
實(shí)施例128 4’-氯-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)聯(lián)苯-3-甲酰胺
向4’-氯聯(lián)苯-3-羧酸(40mg，0.17mmol)和3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440所述的那樣來(lái)制備)(50mg，0.22mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入EDCI(40mg，0.21mmol)和HOBt(26mg，0.19mmol)，然后將所得到的溶液在室溫?cái)嚢?5分鐘。此時(shí)加入DIPEA(0.042mL，0.26mmol)，然后將混合物在室溫?cái)嚢杓s16h。加入碎冰(約2mL體積)，將混合物攪拌2h，然后經(jīng)真空過(guò)濾收集產(chǎn)物，用水洗滌并干燥，得到59mg白色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例128)。HPLC保留時(shí)間＝3.67分鐘，LCMS[M+H]+405.19。
實(shí)施例129至135 表6中列出的化合物使用實(shí)施例128中描述的方法來(lái)制備。
表6
**HPLC條件Waters Sunfire C18；4.6×50mm(4分鐘梯度)；流速＝4mL/min；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.1％TFA；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA。
實(shí)施例136 5-(2-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A 5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
化合物a如下制備使用實(shí)施例2中描述的方法，使5-溴噻吩-2-羧酸與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO04071440中所述制備)偶聯(lián)。HPLC保留時(shí)間＝3.16分鐘，LCMS[M+H]+379.15。
步驟B 5-(2-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺 將5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺(80mg，0.21mmol)和2-氯苯基硼酸(50mg，0.32mmol)于甲苯(0.7mL)中的溶液用氬氣吹洗，然后加入乙醇(0.14mL)，2M K3PO4水溶液(0.21mL，0.42mmol)和Pd(PPh3)4(四(三苯基膦)鈀)(12mg，0.010mmol)。將形成的混合物在115℃加熱2h。冷卻至室溫后，混合物用EtOAc(100mL)稀釋，用鹽水洗滌并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。對(duì)溶液進(jìn)行過(guò)濾，然后真空濃縮，得到黃色固體，其用MeOH(2mL)研磨，過(guò)濾收集固體，并用另外的MeOH(2×0.5mL)沖洗，并真空干燥，得到56mg白色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例136)。HPLC保留時(shí)間＝3.56分鐘。LCMS[M+H]+411.21。
實(shí)施例137至179 表7中列出的化合物使用與實(shí)施例136中所述類似的方法來(lái)制備。
表7







*(A)YMC S5 Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；流速＝4mL/min；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4。
實(shí)施例180 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(4-(甲基氨甲?；?苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物(實(shí)施例180)如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使實(shí)施例147與甲胺反應(yīng)，得到得到白色固體，93％收率。HPLC保留時(shí)間＝2.82分鐘，LCMS[M+H]+434.17。
實(shí)施例181至185 表8中列出的化合物使用實(shí)施例128中描述的方法，如實(shí)施例180那樣來(lái)制備。
表8

實(shí)施例186 5-(4-氯苯基)-N-(2-甲基-5-(甲基氨甲?；?苯基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A 3-(5-溴噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸甲酯
化合物a如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使5-溴噻吩-2-羧酸與市售的3-氨基-4-甲基苯甲酸甲酯偶聯(lián)，得到白色固體，88％收率。HPLC保留時(shí)間＝3.25分鐘。LCMS[M+H]+355.2。
步驟B 3-(5-(4-氯苯基)噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸甲酯
化合物b如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使3-(5-溴噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸甲酯a與市售的4-氯苯基硼酸偶聯(lián)，得到灰白色固體，82％收率。HPLC保留時(shí)間＝3.78分鐘。LCMS[M+H]+386.09。
步驟C 3-(5-(4-氯苯基)噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸
將3-(5-(4-氯苯基)噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸甲酯b(640mg，1.66mmol)在1∶1THF/MeOH(10mL)中漿化，然后加入3N NaOH水溶液(2mL)。在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜后，對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行過(guò)濾，然后真空濃縮以除去揮發(fā)性溶劑。剩余的含水部分用水稀釋(約5mL)，然后通過(guò)加入1N HCl水溶液而變?yōu)樗嵝?pH為約1)。將形成的漿液攪拌2h，然后經(jīng)真空過(guò)濾收集固體。固體用水洗滌，然后在漏斗中風(fēng)干，得到620mg化合物c，其為白色固體。HPLC保留時(shí)間＝3.61分鐘。LCMS[M+H]+372.05。
步驟D 5-(4-氯苯基)-N-(2-甲基-5-(甲基氨甲?；?苯基)噻吩-2-甲酰胺 標(biāo)題化合物(實(shí)施例186)如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使3-(5-(4-氯苯基)噻吩-2-甲酰氨基)-4-甲基苯甲酸c與甲胺反應(yīng)，得到白色固體，73％收率。HPLC保留時(shí)間＝3.51分鐘，LCMS[M+H]+385.08。
實(shí)施例187至191 表9中列出的化合物使用與實(shí)施例186中所述類似的方法來(lái)制備。
表9
實(shí)施例192 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(3-(環(huán)丙基氨甲酰基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物(實(shí)施例192)如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使實(shí)施例146與環(huán)丙胺反應(yīng)，得到白色固體，94％收率。HPLC保留時(shí)間＝3.06分鐘，LCMS[M+H]+460.21。
實(shí)施例193 (R)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(3-(2，3-二羥基丙氧基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
對(duì)N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(3-羥基苯基)噻吩-2-甲酰胺(實(shí)施例144，80mg，0.20mmol)、對(duì)甲苯磺酸(R)-(-)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-基甲酯(70mg，0.24mmol)和K2CO3(84mg，0.61mmol)于DMF(0.3mL)中的混合物進(jìn)行攪拌并在80℃加熱17h。冷卻至室溫后，混合物用水(約5mL)稀釋，然后用EtOAc(3×10mL)萃取，合并的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到棕色油狀物。該物質(zhì)經(jīng)反相制備性HPLC純化，分離到主要產(chǎn)物，將其溶于MeOH(約3mL)中，然后加入2N HCl水溶液(0.3mL)。將溶液溫?zé)嶂?5℃并保持45分鐘，然后冷卻至室溫，真空濃縮，除去大部分MeOH。所得到的非均相混合物用水(約2-3mL)稀釋，然后攪拌1h。經(jīng)真空過(guò)濾收集所形成的固體，用水(約5mL)沖洗，然后在漏斗中風(fēng)干，接著真空干燥，得到29mg(30％)灰白色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例193)。HPLC保留時(shí)間＝2.90分鐘，LCMS[M+H]+467.29。
實(shí)施例194 (S)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(3-(2，3-二羥基丙氧基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物(實(shí)施例194)使用實(shí)施例193中所述的方法，從對(duì)甲苯磺酸(S)-(-)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-基甲酯制備，得到灰白色固體(實(shí)施例194)，34％收率。HPLC保留時(shí)間＝2.90分鐘，LCMS[M+H]+467.26。
實(shí)施例195 (R)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(4-(2，3-二羥基丙氧基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物(實(shí)施例195)使用實(shí)施例193中所述的方法，從實(shí)施例139和對(duì)甲苯磺酸(R)-(-)-2，2-二甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烷-4-基甲酯制備，得到灰白色固體(實(shí)施例195)，67％收率。HPLC保留時(shí)間＝2.84分鐘，LCMS[M+H]+467.20。
實(shí)施例196 3-(5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲酰基)噻吩-2-基)吡啶-1-氧化物
在室溫向N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(吡啶-3-基)噻吩-2-甲酰胺(實(shí)施例149，30mg，0.079mmol)于CH2Cl2(0.5mL)中的漿液中加入m-CPBA(間氯過(guò)氧苯甲酸)(19mg，0.083mmol)，將形成的漿液在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后在35℃攪拌4.5h。將混合物真空濃縮，將形成的固體在MeOH(約2mL)中漿化，經(jīng)真空過(guò)濾收集固體，然后用另外的MeOH(約1mL)沖洗。將所得到的固體在漏斗中干燥，然后真空干燥過(guò)夜，得到25mg(80％)灰白色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例196)。HPLC保留時(shí)間＝2.34分鐘，LCMS[M+H]+394.10。
實(shí)施例197 4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺
步驟A 4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺
化合物a如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使市售的4-溴-3-甲基噻吩-2-羧酸與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO04/071440中所述制備)偶聯(lián)。HPLC保留時(shí)間＝3.12分鐘，LCMS[M+H]+393.13。
步驟B 4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺 標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺a與市售的4-氯苯基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例197)。HPLC保留時(shí)間＝3.67分鐘，LCMS[M+H]+425.17。
實(shí)施例198 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-3-甲基-4-(吡啶-3-基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺與市售的3-吡啶基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例198)。HPLC保留時(shí)間＝1.98分鐘，LCMS[M+H]+392.29。
實(shí)施例199 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-4-(6-氟吡啶-3-基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺與市售的6-氟吡啶-3-基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例199)。HPLC保留時(shí)間＝2.98分鐘，LCMS[M+H]+410.25。
實(shí)施例200 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-4-(5-氟吡啶-3-基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-3-甲基噻吩-2-甲酰胺與市售的3-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)吡啶偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例200)。HPLC保留時(shí)間＝2.98分鐘。LCMS[M+H]+410.22. 實(shí)施例201 5-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-3-甲酰胺
步驟A 5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-3-甲酰胺
步驟A中的小標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使市售的5-溴噻吩-3-羧酸與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440中所述制備)偶聯(lián)，得到褐色固體。HPLC保留時(shí)間＝3.02分鐘，LCMS[M+H]+379.0。
步驟B 5-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-3-甲酰胺 標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-3-甲酰胺a與市售的4-氯苯基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例201)。HPLC保留時(shí)間＝3.67分鐘，LCMS[M+H]+411.21。
實(shí)施例202 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(吡啶-3-基)噻吩-3-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-3-甲酰胺與市售的3-吡啶基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例202)。HPLC保留時(shí)間＝1.97分鐘，LCMS[M+H]+378.2。
實(shí)施例203 4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A 4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
化合物a如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使市售的3-溴噻吩-5-羧酸與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440中所述制備)偶聯(lián)，得到褐色固體。HPLC保留時(shí)間＝3.01分鐘，LCMS[M+H]+379.0。
步驟B 4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺 標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺a與市售的4-氯苯基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例203)。HPLC保留時(shí)間＝3.66分鐘，LCMS[M+H]+411.21。
實(shí)施例204 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-4-(吡啶-3-基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使4-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺與市售的3-吡啶基硼酸偶聯(lián)，得到白色固體(實(shí)施例204)。HPLC保留時(shí)間＝1.91分鐘，LCMS[M+H]+378.22。
實(shí)施例205 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(4-(嗎啉-4-基羰基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使實(shí)施例147與嗎啉反應(yīng)，得到白色固體(實(shí)施例205)。HPLC保留時(shí)間＝2.86分鐘，LCMS[M+H]+490.29。
實(shí)施例206 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使實(shí)施例147與N-甲基哌嗪反應(yīng)，得到白色固體(實(shí)施例206)。HPLC保留時(shí)間＝2.09分鐘，LCMS[M+H]+503.4。
實(shí)施例207 4-(4-(5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基)苯甲?；?哌嗪-1-羧酸叔丁酯
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使實(shí)施例147與哌嗪-1-羧酸叔丁酯反應(yīng)，得到白色固體(實(shí)施例207)。HPLC保留時(shí)間＝3.42分鐘，LCMS[M+H]+589.45。
實(shí)施例208 3-氨基-5-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A 3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-氯苯基)噻吩-2-羧酸甲酯
在室溫向3-氨基-5-(4-氯苯基)噻吩-2-羧酸甲酯(0.50g，1.87mmol)于THF(8mL)中的溶液中加入1.0M LiHMDS于THF中的溶液(4.1mL，4.1mmol)，然后將形成的混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后加入(Boc)2O(一縮二碳酸二叔丁酯)(1.02g，4.67mmol)。在室溫?cái)嚢?5分鐘后，混合物用EtOAc(200mL)稀釋，然后用水(2×20mL)、鹽水洗滌，然后經(jīng)無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到約1.02g橙色油狀物，其為粗產(chǎn)物。該物質(zhì)經(jīng)快速柱色譜(使用EtOAc/己烷混合物作為洗脫劑)純化，得到600mg(68％)褐色固體，其為化合物a。HPLC保留時(shí)間＝4.83分鐘。
步驟B 3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-氯苯基)噻吩-2-羧酸
在室溫向3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-氯苯基)噻吩-2-羧酸甲酯a(0.135g，0.29mmol)于1∶1THF/MeOH(2mL)中的溶液中加入3N NaOH水溶液(1mL)，然后將形成的混合物溫?zé)嶂?5℃并保持30分鐘，然后冷卻至室溫并濃縮除去揮發(fā)性溶劑。將剩余的含水部分在冰浴中冷卻，然后加入1NHCl水溶液，直到達(dá)到pH為約2。將漿液攪拌1h，然后經(jīng)真空過(guò)濾收集所形成的固體，用水沖洗并真空干燥，得到86mg(66％)灰白色固體，其為化合物b。HPLC保留時(shí)間＝4.32分鐘。
步驟C 中間體c
中間體c如下制備使用實(shí)施例128中描述的方法，使3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-氯苯基)噻吩-2-羧酸與3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440中所述制備)偶聯(lián)，得到膏狀有色固體。HPLC保留時(shí)間＝4.35分鐘。
步驟D 3-氨基-5-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺 在室溫將中間體c(8.5mg)的溶液在4N HCl于二氧雜環(huán)己烷(0.5mL)中的溶液中攪拌6h?；旌衔镉肕eOH稀釋，然后經(jīng)反相制備性HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例208)的TFA鹽，其為淺黃色固體。HPLC保留時(shí)間＝3.59分鐘，LCMS[M+H]+426.20。
實(shí)施例209 3-氨基-4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A N-環(huán)丙基-3-(2-巰基乙酰氨基)-4-甲基苯甲酰胺
將巰基乙酸(1.65mL，24.2mmol)和5.0g(22mmol)3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺鹽酸鹽(如WO 04/071440中所述制備)于甲苯(40mL)中的溶液回流16h。此時(shí)加入額外的0.8mL巰基乙酸，然后將混合物再繼續(xù)回流兩天。冷卻至室溫后，經(jīng)真空過(guò)濾收集固體，然后用EtOAc(2×50mL)沖洗。然后將形成的固體在水(50mL)中漿化，經(jīng)真空過(guò)濾再次收集固體，然后用額外的水沖洗。將所得到的固體在漏斗中風(fēng)干，然后真空干燥過(guò)夜，得到1.86g(32％)白色固體，其為化合物a。HPLC保留時(shí)間＝1.83分鐘，LCMS[M+H]+265.37。
步驟B 3-氨基-4-(4-氯苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺 在室溫向MeOH(4mL)中加入25％(w/w)NaOMe(甲醇鈉)于MeOH中的溶液，接著加入N-環(huán)丙基-3-(2-巰基乙酰氨基)-4-甲基苯甲酰胺a(200mg，10.8mmol)。在室溫?cái)嚢?5分鐘后，加入200mg(10.6mmol)苯磺酸2-(4-氯苯基)-2-氰基乙烯酯(如J.Med.Chem.，6(47)1448(2004)中所述制備)，然后將所得到的溶液溫?zé)嶂?0℃并保持2h，然后冷卻至室溫，再攪拌15h。將混合物真空濃縮，除去MeOH，然后加入水(20mL)，然后溶液用EtOAc(200mL)萃取。有機(jī)萃取物用水、鹽水洗滌，然后經(jīng)無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到300mg橙色固體，其為粗產(chǎn)物。該物質(zhì)經(jīng)反相制備性HPLC純化，得到50mg淺黃色固體，其為標(biāo)題化合物(實(shí)施例209)。HPLC保留時(shí)間＝3.57分鐘，LCMS[M+H]+426.17。
實(shí)施例210 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺
步驟A 5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基硼酸
將1.0g(2.64mmol)5-溴-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺(實(shí)施例136，步驟A)、聯(lián)硼酸頻那醇酯(1.0g，3.95mmol)和KOAc(乙酸鉀)(1.30g，13.2mmol)于DMF(15mL)中的溶液用氬氣吹洗，然后加入Pd(dppf)2Cl2/CH2Cl2復(fù)合物(65mg，0.08mmol)，接著在90℃加熱16h。冷卻至室溫后，將混合物在EtOAc(250mL)和水(50mL)之間分配，然后分離各層。有機(jī)部分先后用額外的水和鹽水洗滌，然后經(jīng)無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到1.62g棕色半固體，其為粗產(chǎn)物混合物。該物質(zhì)用EtOAc研磨，然后過(guò)濾，得到626mg化合物a，其含有約10％硼酸酯。該物質(zhì)不經(jīng)進(jìn)一步純化就使用。HPLC保留時(shí)間＝2.36分鐘，LCMS[M+H]+345.2。
步驟B N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-5-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻吩-2-甲酰胺 標(biāo)題化合物b如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基硼酸a與市售的2-氯-3-三氟甲基吡啶偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到淺黃色固體(實(shí)施例210)。HPLC保留時(shí)間＝3.46分鐘，LCMS[M+H]+446.26。
實(shí)施例211 5-(5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基)吡啶-3-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲酰基)噻吩-2-基硼酸(實(shí)施例210，步驟A)與市售的3-氯-5-氰基吡啶偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到白色固體(實(shí)施例211)。HPLC保留時(shí)間＝2.56分鐘，LCMS[M+H]+421.26。
實(shí)施例212 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(4-甲基吡啶-3-基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲酰基)噻吩-2-基硼酸(實(shí)施例210，步驟A)與市售的3-溴-4-甲基吡啶偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到白色固體(實(shí)施例212)。HPLC保留時(shí)間＝1.99分鐘，LCMS[M+H]+392.3。
實(shí)施例213 5-(5-氰基-2-甲基苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基硼酸(實(shí)施例210，步驟A)與市售的2-溴-4-氰基甲苯偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到白色固體(實(shí)施例213)。HPLC保留時(shí)間＝3.36分鐘，LCMS[M+H]+416.29。
實(shí)施例214和215 實(shí)施例2145-(5-氰基-2-甲基苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺；和 實(shí)施例2155-(5-氨甲?；?2-甲基苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基硼酸(實(shí)施例210，步驟A)與市售的2-溴-4-氰基甲苯偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到標(biāo)題化合物，它們?yōu)榘咨腆w。主要產(chǎn)物HPLC保留時(shí)間＝3.36分鐘，LCMS[M+H]+416.29。次要產(chǎn)物HPLC保留時(shí)間＝2.90分鐘，LCMS[M+H]+434.37。
實(shí)施例216和217 實(shí)施例2165-(3-氰基-5-氟苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺；和 實(shí)施例2175-(3-氨甲酰基-5-氟苯基)-N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)噻吩-2-甲酰胺
標(biāo)題化合物如下制備使用實(shí)施例136步驟B中描述的方法，使5-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?噻吩-2-基硼酸(實(shí)施例210，步驟A)與市售的3-溴-5-氟苯甲腈偶聯(lián)，經(jīng)反相制備性HPLC純化后得到標(biāo)題化合物，它們?yōu)榘咨腆w。主要產(chǎn)物HPLC保留時(shí)間＝3.34分鐘，LCMS[M+H]+420.26。次要產(chǎn)物HPLC保留時(shí)間＝3.00分鐘，LCMS[M+H]+438.24。
實(shí)施例218 6-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基氨甲?；?-1H-吲哚-1-羧酸乙酯
在室溫向3-氨基-N-環(huán)丙基-4-甲基苯甲酰胺(0.025g，0.11mmol)于無(wú)水DMF(0.5mL)中的溶液中依次加入1-(乙氧羰基)-1H-吲哚-6-羧酸(0.026g，0.11mmol，根據(jù)WO 2002/014308實(shí)施例128步驟A中概述的類似操作制備)、三乙胺(61μL，0.44mmol)和BOP(0.098g，0.22mmol)。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?8h，用MeOH(0.5mL)稀釋，然后接受反相制備性HPLC(YMC S520×100mm，運(yùn)行10分鐘，溶劑A10％MeOH∶90％H2O∶0.1％TFA，溶劑B90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)。收集期望的級(jí)份，然后使用

Plus(SC250DDA)進(jìn)行濃縮，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例218，0.010g)。HPLC保留時(shí)間(YMC S5 Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4)3.18分鐘。LCMS[M+H]+406.3。
實(shí)施例219至222 表10中列出的化合物使用就實(shí)施例218所述的方法來(lái)制備。
表10
*YMC S5 Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4。
實(shí)施例223 3-氰基-N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-1-甲基-1H-吲哚-6-甲酰胺
在室溫向N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-1-甲基-1H-吲哚-6-甲酰胺(0.045g，0.129mmol，實(shí)施例222，表10)于無(wú)水乙腈(2mL)中的溶液中加入氯磺酰異氰酸酯(chlorosulfonyl isocyanate)(11μL，0.129mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘，然后加入DMF(11μL，0.141mmol)。在室溫再反應(yīng)30分鐘后，反應(yīng)混合物用甲醇(2mL)淬滅，減壓濃縮，然后接受反相制備性HPLC(YMC S5 20×100mm，運(yùn)行10分鐘，溶劑A10％MeOH∶90％H2O∶0.1％TFA，溶劑B90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)。收集期望的級(jí)份，然后使用

Plus(SC250DDA)進(jìn)行濃縮，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例223，0.005g)。HPLC保留時(shí)間(YMC S5 Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4)2.6分鐘。LCMS[M+H]+373.2。
實(shí)施例224 N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-1-異丙基-1H-吲哚-6-甲酰胺
在室溫歷時(shí)3分鐘向N-(5-(環(huán)丙基氨甲?；?-2-甲基苯基)-1H-吲哚-6-甲酰胺(0.05g，0.15mmol，實(shí)施例219，表10)于DMF(0.5mL)中的溶液中加入氫化鈉(60％分散體，0.030g，0.75mmol)。在室溫?cái)嚢?分鐘后，加入異丙基溴(21μL，0.225mmol)，然后將內(nèi)含物在室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)混合物用100μL甲醇淬滅，然后接受反相制備性HPLC(YMC S520×100mm，運(yùn)行10分鐘，溶劑A10％MeOH∶90％H2O∶0.1％TFA，溶劑B90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)。收集期望的級(jí)份，然后使用

Plus(SC250DDA)進(jìn)行濃縮，得到標(biāo)題化合物(實(shí)施例224，0.015g)。HPLC保留時(shí)間(YMC S5Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4)3.1分鐘。LCMS[M+H]+376。
實(shí)施例225 N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-1-(2-嗎啉代乙基)-1H-吲哚-6-甲酰胺
步驟A 1-(2-嗎啉代乙基)-1H-吲哚-6-羧酸
在0℃向1H-吲哚-6-羧酸甲酯(0.5g，2.85mmol)和4-(2-氯乙基)嗎啉(0.585g，3.13mmol)于無(wú)水DMF(5mL)中的溶液中加入氫化鈉(60％分散體，0.342g，8.55mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?分鐘，然后在50℃加熱1.5h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后通過(guò)緩慢加入水(2mL)來(lái)淬滅。殘余物用水(2mL)、甲醇(1mL)稀釋，然后接受反相制備性HPLC(YMC S520×100mm，運(yùn)行10分鐘，溶劑A10％MeOH∶90％H2O∶0.1％TFA，溶劑B90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)。收集期望的級(jí)份，然后使用

Plus(SC250DDA)進(jìn)行濃縮，得到化合物a(0.075g，為T(mén)FA鹽)。HPLC保留時(shí)間(Phenomex Luna5μC18；4.6×30mm(2分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.1％TFA；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)0.87分鐘。LCMS[M+H]+275。
步驟B N-(5-(環(huán)丙基氨甲酰基)-2-甲基苯基)-1-(2-嗎啉代乙基)-1H-吲哚-6-甲酰胺 標(biāo)題化合物如實(shí)施例218中所述，從1-(2-嗎啉代乙基)-1H-吲哚-6-羧酸a(0.07g，0.18mmol)制備，得到實(shí)施例225(0.007g)，其為T(mén)FA的鹽。HPLC保留時(shí)間(YMC S5Combiscreen ODS；4.6×50mm(4分鐘梯度)；溶劑A＝10％MeOH，90％H2O，0.2％H3PO4；溶劑B＝90％MeOH，10％H2O，0.2％H3PO4)1.89分鐘。LCMS[M+H]+447.14。
測(cè)試數(shù)據(jù) 以下數(shù)據(jù)描述了所列化合物的活性。所述數(shù)據(jù)使用上文描述的測(cè)定得到。也列出了β/α的比例以顯示選擇性，其中較大的數(shù)字表示較高的α選擇性。
表11
權(quán)利要求
1.式I化合物或其對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或可藥用鹽
其中
R1選自任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基和任選取代的雜芳基；
R3選自氫、C1-C4烷基和鹵素；以及
R4選自氫、任選取代的羧基、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基和任選取代的雜芳基；
條件是
(a)R1不是任選取代的吡唑基、任選取代的噻唑基或任選取代的氨基噻唑基；以及
(b)R4不是任選取代的吡唑基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自任選取代的C1-C4烷基、任選取代的C3-C6環(huán)烷基、任選取代的C2-C4烯基、任選取代的3-6元雜環(huán)基、任選取代的C5-C6芳基和任選取代的雜芳基，其中
(a)所述未取代的和取代的雜芳基的環(huán)大小為5-10元并含有1-3個(gè)雜原子，所述雜原子選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連；以及
(b)所述取代基本身任選進(jìn)一步被1-3個(gè)取代基取代。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自任選取代的C1-C4烷基、任選取代的C1-C6環(huán)烷基、任選取代的C1-C4烯基、任選取代的3-6元雜環(huán)基、任選取代的C5-C6芳基和任選取代的5-6元雜芳基，其中所述雜芳基含有1-2個(gè)雜原子，所述雜原子選自N、O和S，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連，以及所述雜芳基的其余部分為碳原子。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R1選自苯基和雜芳基，所述雜芳基選自環(huán)大小為5-10元的未取代的或取代的雜芳基，其中1-3個(gè)環(huán)成員選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連。
5.權(quán)利要求2的化合物，其中R1
(a)選自未取代的和取代的芳基和雜芳基，其中所述取代基選自苯基、苯基-CH2-、吡啶基和苯并咪唑基-CH2-；以及
(b)所述取代的芳基和雜芳基任選進(jìn)一步在取代的部分上被選自1至3個(gè)取代基的基團(tuán)取代，所述取代基選自含有1-2個(gè)雜原子的C5-C6元芳基，所述雜原子選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連；C1-C3烷基；-CH2OH；CF3；甲氧基；Cl；F；-NH2；-N(CH3)2；-C(O)NH2；-NHSO2CH3；-SO2NH2；-CH2N(CH3)2；-C(O)NHCH3；-C(O)N(CH3)2；-C(O)NHCH(CH3)2；-C(O)NHCH2CH3；-O-CH2CH(OH)CH2OH；-CO2-CH2CH3；-C(O)OC(CH3)3；-CN；-OH(或與雜芳基環(huán)上的N+1相連的O-1)；
6.權(quán)利要求3的化合物，其中R1選自
其中
R10為選自下列的基團(tuán)-OH、-CH3、-Cl、-F、-NH2、-CN、-CF3、-N(CH3)2、-OCH3、-CH2OH、-NHSO2CH3、-SO2NH2、-CH2N(CH3)2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)2、-C(O)NHCH2CH3和-O-CH2CH(OH)CH2OH；
R11為選自下列的基團(tuán)-OH、-Cl、-F、-CN、-CO2H、-OCH3、-NH2、-CH2OH、-N(CH3)2、-C(O)NHCH(CH3)2和-OCH2CH(OH)CH2OH；
R12為選自-CH3、-CN和-F的基團(tuán)；
R13為選自-H和-F的基團(tuán)；
R14為選自-CH3和-C(O)OC(CH3)3的基團(tuán)；
R15為選自-H和F的基團(tuán)；以及
R16為選自-CH(CH3)2和
的基團(tuán)。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R3為H、Cl、F或CH3。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R3為氫或甲基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R4選自C1-C5烷基和C3-C6環(huán)烷基，其中所述烷基和環(huán)烷基任選被1-4個(gè)基團(tuán)取代，所述基團(tuán)選自C1-C5烷基和C1-C5烷氧基。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R4為環(huán)丙基。
11.權(quán)利要求6的化合物，其中所述取代的芳基和雜芳基任選進(jìn)一步在取代的部分上被選自1至3個(gè)取代基的基團(tuán)取代，所述取代基選自含有1-2個(gè)雜原子的C5-C6元芳基，所述雜原子選自N、S和O，條件是O和S彼此不相連，O和O彼此不相連，以及S和S彼此不相連；C1-C3烷基；-CH2OH；CF3；甲氧基；Cl；F；-NH2；-N(CH3)2；-C(O)NH2；-NHSO2CH3；-SO2NH2；-CH2N(CH3)2；-C(O)NHCH3；-C(O)N(CH3)2；-C(O)NHCH(CH3)2；-C(O)NHCH2CH3；-O-CH2CH(OH)CH2OH；-CO2-CH2CH3；-C(O)OC(CH3)3；-CN；-OH(或與雜芳基環(huán)上的N+1相連的O-1)；
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R1定義中的所述未取代的和取代的芳基和雜芳基選自苯基、噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基，所述苯基、噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基是任選取代的。
13.權(quán)利要求5的化合物，其中R1定義中的所述未取代的和取代的芳基和雜芳基選自苯基、噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基，所述苯基、噻吩基、吡咯基、吲哚基和吲唑基是任選取代的。
14.權(quán)利要求1的化合物，其對(duì)p38α的選擇性至少50倍于p38β。
15.一種藥物組合物，其包含至少一種權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體或稀釋劑。
16.治療炎性疾病的方法，所述方法包括向需要所述治療的患者給藥權(quán)利要求1的藥物組合物。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述炎性疾病選自哮喘、成人呼吸窘迫綜合征、慢性阻塞性肺病、慢性肺部炎性疾病、糖尿病、炎性腸病、骨質(zhì)疏松、牛皮癬、移植物抗宿主排斥、動(dòng)脈粥樣硬化、多發(fā)性骨髓瘤、疼痛、心肌缺血和關(guān)節(jié)炎。
18.在哺乳動(dòng)物中抑制p38激酶的方法，所述方法包括向需要所述治療的哺乳動(dòng)物給藥至少一種權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明披露了式I化合物及其對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和可藥用鹽。本發(fā)明還披露了含有式I化合物的藥物組合物，以及治療與p38激酶活性相關(guān)的病癥的方法。
文檔編號(hào)A61K31/381GK101616667SQ200780048839
公開(kāi)日2009年12月30日 申請(qǐng)日期2007年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月27日
發(fā)明者斯蒂芬·T·羅布爾斯基, 杰加班杜·達(dá)斯, T·G·穆拉利·達(dá)爾, 阿拉里克·J·戴克曼, 約翰·海因斯, 凱特琳娜·萊夫塞里斯, 林子正, 藺恕群 申請(qǐng)人:百時(shí)美施貴寶公司